CN1157472C - 北冬虫夏草子实体的培养方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种北冬虫夏草菌人工培养子实体的方法。该方法采用的菌种普适性较强，可适用于多个北冬虫夏草菌亚种。本发明提供了一种经过优选的工艺条件，由本发明方法得到的北冬虫夏草菌人工培养子实体，产品质量稳定、高产、培养周期短、色泽、形态较均匀、不易发生杂菌污染。

Description

北冬虫夏草子实体的培养方法

技术领域

本发明涉及一种药用食用菌——北冬虫夏草人工子实体培养的方法。

背景技术

ZL 93105056.1专利公开了一种人工栽培北冬虫夏草的方法。该栽培方法包括以下步骤：a、菌种分离：将野外采集的北冬虫夏草接种在菌种培养基上，在20～25℃温度下培养一周，得到菌种；b、菌丝接种：将上述菌种接种在灭菌的固体或液体子实体培养基上，配制的固体培养基pH值为7.5～8.0；c、菌丝培养：在黑暗条件下或每天用40瓦日光灯照射1小时，温度为18～25℃，相对湿度为60～65％，菌丝长满后，松动封口膜或扎针眼通气；d、子实体培养：自然光照射，温度为18～25℃，相对湿度为80～85％；固体培养15天后，可长出子实体。该子实体培养基为大米、小米、玉米碴或高粱粒，按1∶1.6～2.0的比例加入水后，pH值调到7.5～8.0。这种子实体培养方法的缺点，一是子实体培养基的pH值过高。大米培养基的pH值低于6.0时，子实体产量下降，易发生霉菌污染；如高于7.5后，棒状子实体比例减少，同时易发生细菌污染。二是子实体培养采用自然光照射，相对日光灯来说子实体培养周期长，色泽、形态不均匀，产量相对低。三是子实体培养空气相对湿度如果高于80％，易发生杂菌污染。这种方法只适用于C868菌种，菌种应用单一。

发明内容

本发明的目的是克服上述人工栽培北冬虫夏草方法中存在的缺点，提供一种适用多种菌种的人工栽培北冬虫夏草子实体的方法，工艺条件经优化选择，该方法所得产品质量稳定、高产、培养周期短、色泽、形态较均匀、不易发生杂菌污染。

本发明的目的是这样实现的。北冬虫夏草子实体的培养方法，包括步骤1)大米培养基的配制，2)菌丝接种，3)避光培养，4)光照培养，5)子实体采收；

其中所述步骤1)大米培养基的配制：单位为克/毫升，将大米加入到营养水中，大米和营养水的重量比为1∶1～1∶2；所述的营养水中按重量比磷酸二氢钾0.3％，七水硫酸镁0.02％，酪蛋白0.5％，富硒酵母0.01～0.1％，所述的营养水pH6.0～7.5；所述的大米培养基在121℃温度下灭菌30分钟；

其中所述步骤2)菌丝接种：将北冬虫夏草菌丝体悬液加入到所述大米培养基中，每公斤大米配制的培养基中可接种菌丝体悬液80～120毫升；

其中所述步骤3)避光培养：将接种后的所述大米培养基置培养室，避光条件下进行培养；培养室温度20～23℃，空气相对湿度50～70％；

其中所述步骤4)光照培养：当避光培养的所述大米培养基上长出白色菌丝后，在光照条件下进行培养；光源为日光灯，光照强度为800～2000lx，培养室温度20～23℃，空气相对湿度50～70％。

最佳培养条件为，培养室温度20～23℃，空气相对湿度50～70％；光照强度为800～2000lx。

实验表明，北冬虫夏草子实体的形成除与本身的遗传特性有关外，环境因素也是极为重要的条件，只有当外界环境条件能满足其本身的生长发育的要求，才能形成正常的子实体。在北冬虫夏菌子实体的工厂化生产中，培养房间的温度、湿度、培养基成分和酸碱度等因素，对于子实体的培养都有较大的影响。大米培养基的pH值如果高于7.5后，棒状子实体比例减少，同时易发生细菌污染；大米培养基的pH值低于6.0时，子实体产量下降，易发生霉菌污染。所以本发明采用大米培养基的pH值为6.0～7.5，pH值最好的范围为6.8～7.2。采用何种光源对子实体的培养也很重要。与节能灯、白炽灯、自然光比较，本发明采用日光灯作光源，实验表明，子实体培养周期相对要短，色泽均一，形态均匀，产量高。培养期间，培养室湿度低于50％时，大米培养基失水较快，易干燥，过早衰老，影响子实体的生长；空气相对湿度高于80％时，易发生杂菌污染。当光照强度高于3000lx时，子实体长度下降，并影响产量；当光照强度低于500lx时，虫草出草率下降，从而使子实体产量下降；同时子实体色泽较淡，形态不均匀。本发明中子实体培养条件的控制，是经过实验选择的最佳工艺条件。采用这种采用本发明的培养方法，在最优条件下，人工培养的北冬虫夏草子实体，所得产品大多呈棒状，桔红色或桔黄色，有特异香味，其外观接近野生菌株；同时子实体的产量稳定，每公斤大米可得子实体60克以上；形态、色泽均匀，培养周期相对较短，生产成本低，因而具有较高的经济价值。本发明与已有技术的最大区别是，该培养条件对许多品种的北冬虫夏草菌都是适用的，普适性很强，不必局限于某一亚种。这对广泛培养北冬虫夏草子实体提供了极为有利的条件。

不同光照强度、不同光源、不同pH值、不同温度、不同湿度对于子实体生长影响列表如下：

         不同光照强度对于子实体影响研究结果如下

光照强度    子实体产量                                  培养周期

                            子实体性状

(lx)        (g干重/kg大米)                              (天)

＜500       52              棒状，桔黄色，形态不均匀    45～60

500～3000   68              棒状，桔红色，形态均匀      40～45

＞3000      49              较短，色泽深，不均匀        40

        不同光源对于子实体影响研究结果如下

             子实体产量                                 培养周期

光源种类                     子实体性状

             (g干重/kg大米)                             (天)

日光灯       68              棒状，桔红色，形态均匀     40～45

节能灯       50              棒状，桔黄色，部分畸形     45～50

白炽灯       48              桔黄色，形态不均匀         45～50

自然光       50              棒状，桔红色，形态不均匀   40～45

              不同pH值对于子实体影响研究结果如下

pH          子实体产量(g干重/kg大米)  子实体性状         生长状况

＜6.0       ＜35                      畸形，形态不均匀   易染霉菌，出草率低

6.0～7.5    35～70                    形态正常，均匀     稳定

＞7.5       ＜60                      形态不均匀         易染细菌

             不同温度对子于实体影响研究结果如下

温度(℃)    子实体产量(g干重/kg大米)    培养周期(天)

＜18        65                          45～6018～25       68                          40～45

＞25        ＜58                        40～45

             不同湿度对于子实体影响研究结果如下

相对湿度

           子实体产量(g干重/kg大米)  子实体性状          生长状况

(％)

＜50       ＜60                      较短，形态不均匀    易衰老

50～80     60～70                    棒状，形态均匀      正常

＞80       50～65                    棒状，形态不均匀    易染杂菌

具体实施方式

本发明由以下实施例给出。

实施例1：以北冬虫夏草菌为生产菌种。每瓶培养基由大米25克和营养水32毫升配制而成。按重量比，营养水中含磷酸二氢钾0.3％，七水硫酸镁0.02％，酪蛋白0.5％，富硒酵母0.01～0.1％。营养水pH值6.8。大米培养基在121℃温度下灭菌30分钟。将菌丝体接种到大米培养基中。在避光条件下培养5天，培养温度21±1℃，空气相对湿度60±2％。待大米培养基表面长出一定白色菌丝后，在日光灯照射下光照培养。光照强度1000±50lx。40天后子实体成熟，棒状，桔红色。采收干燥后，每瓶培养基可收获1.8克子实体。

实施例2：以北冬虫夏草菌为生产菌种。每瓶培养基由大米25克和营养水35毫升配制而成，营养水成分同上，pH值7.0。将菌丝体接种到大米培养基中。在避光条件下培养5天，培养温度23～25℃，空气相对湿度66～70％。待大米培养基表面长出一定白色菌丝后，在日光灯照射下光照培养。光照强度800±50lx。45天后子实体成熟，棒状，桔红色。采收干燥后，每瓶培养基可收获1.6克子实体。

实施例3：以北冬虫夏草菌为生产菌种。每瓶培养基由大米25克和营养水32毫升配制而成，营养水成分同上，pH值6.8。将菌丝体接种到大米培养基中。在避光条件下培养5天，培养温度18～20℃，空气相对湿度50～55％。待大米培养基表面长出一定白色菌丝后，在日光灯照射下光照培养。光照强度1200±50lx。50天后子实体成熟，棒状，桔红色。采收干燥后，每瓶培养基可收获1.7克子实体。

Claims (2)

1、一种北冬虫夏草子实体的培养方法，其特征在于，包括，步骤1)大米培养基的配制，2)菌丝接种，3)避光培养，4)光照培养，5)子实体采收，

其中所述步骤1)大米培养基的配制：单位为克/毫升，将大米加入到营养水中，大米和营养水的重量比为1∶1～1∶2；所述的营养水中按重量比磷酸二氢钾0.3％，七水硫酸镁0.02％，酪蛋白0.5％，富硒酵母0.01～0.1％，所述的营养水pH6.0～7.5；所述的大米培养基在121℃温度下灭菌30分钟；

其中所述步骤2)菌丝接种：将北冬虫夏草菌丝体悬液加入到所述大米培养基中，每公斤大米配制的培养基中可接种菌丝体悬液80～120毫升；

其中所述步骤3)避光培养：将接种后的所述大米培养基置培养室，避光条件下进行培养；培养室温度20～23℃，空气相对湿度50～70％；

其中所述步骤4)光照培养：当避光培养的所述大米培养基上长出白色菌丝后，在光照条件下进行培养；光源为日光灯，光照强度为800～2000lx，培养室温度20～23℃，空气相对湿度50～70％。

2、按照权利要求1所述的北冬虫夏草子实体的培养方法，其特征在于所述大米培养基pH6.8～7.2。