CN1468954A - 防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株及其生产方法和应用 - Google Patents
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Abstract
防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株及其生产方法和应用。本发明涉及一种防治作物菌核病等真菌病害的微生物菌株,以及其生产方法和应用。农作物的病害是农业生产中的自然灾害之一,其中的80%是由于病原真菌引起的,严重的时候会造成某一作物的绝产。本生防菌株是枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis),保藏于CGMCC保藏号0733。其用途是:该菌株的制剂在十字花科、茄科、葫芦科、豆科等蔬菜作物上的菌核病、枯萎病、炭疽病、黄萎病、褐斑病等土传性真菌病害上的应用,以及作为植物促长剂的应用和生产生物农药的生产菌株。
Description
技术领域:本发明涉及一种防治作物菌核病等真菌病害的微生物菌株,以及该菌株的生产方法和在植物土传性真菌病害方面的应用。
背景技术:农作物的病害是农业生产中的自然灾害之一,其中的80%是由于病原真菌引起的,平均造成植物减产35%左右,严重的时候会造成某一作物的绝产。目前主要是依靠化学农药来防治,虽然起到了一定的防治效果,但其负面的影响日趋严重,同时造成土壤污染、土质退化、农药残留、抗药性病害的产生和再次蔓延等严重的问题,现实已经证实,化学农药已经对人类造成了严重的危害。80年代,国内外的专家开始致力于用微生物方法防治农作物的病虫害,90年代成为热点。
发明内容:本发明的目的是提供一种防治作物菌株核病等真菌病害的生防菌株及其生产方法和应用。
上述的目的通过以下的技术方案实现:
第一部分:本发明的产品
一种防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株,所述的菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis),该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会(CGMCC),菌种保藏号为0733。
该菌株的生物学特性如下:
1. 形态特征:
于37℃培养1-2天,菌体为短杆状,有时成串,中生芽孢,芽
孢为椭圆形,不膨大,大小为0.5-1.0×2.0-2.2微米,革兰氏染色
阳性。
2. 培养特征:
该菌株在NYDA琼脂培养基上37℃培养1-2天,菌落乳白色,
边沿不整齐,不光滑,菌落成脊状,不粘,易挑起。
3. 菌株的生理生化特性:
明胶液化 +
淀粉水解 +
V.P反应 +
硝酸盐还原 +
葡萄糖发酵 产酸不产气
石蕊牛奶 还原胨化
甲基红反应 +
4. 菌株具有良好的稳定性:
将该菌株置于-70℃冰柜中保存,传代5次仍保持菌种的活性稳定。该菌株的生长温度范围广,在10-50℃之间,其中最适宜的温度为37℃,其生长的酸碱度在5.7-8之间,最适宜的酸碱度为pH7.0。
本菌株的发酵液在20℃以下可以贮存一年。
第二部分:本发明产品的制作方法
上述的防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株的制作方法:在NYDA培养基中接入一接种环的冷冻菌种,过夜培养,然后,按1%-2%接种量进行摇瓶放大培养,在水浴摇床中震荡培养24小时,作为种子液,进行自控罐发酵。发酵条件:接种量2%-4%,发酵温度为37℃,pH为7.0,发酵周期24-48小时。
第三部分:防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株的用途:
该菌株的制剂在黄瓜、豆角、油菜、西红柿、大豆等十字花科、茄科、葫芦科、豆科蔬菜作物上的菌核病、枯萎病、炭疽病、黄萎病、褐斑病等土传性真菌病害上的应用,以及作为植物促长剂的应用和生产生物农药的生产菌株。
这个技术方案有以下有益效果:将本产品用于温室黄瓜盆栽试验,用玉米粉-砂培养基培养菌核病菌,将培养好的病原菌与灭菌土以1∶15的比例混匀,试验组用10倍的枯草杆菌发酵液浸泡黄瓜种子,共作4个处理。处理1:无病土,播种正常的种子;处理2:无病土,播种用菌液浸泡的种子;处理3:病土,播种用菌液浸泡的种子;处理4:病土,播种正常处理的种子。每一处理各用50个培养钵,每个培养钵中播种一粒种子,试验结果如下:处理 1 2 3 4(对照)总株数 50 50 50 50出苗数 42 46 50 36发病数 0 0 6 25出苗率(%) 84 86 100 72病情指数(%) 7.0 54.2防效(%) 88.0湿重(克) 1.62 1.29 1.36 1.06T(湿重) 5.04
可见,本菌株的制剂能有效的防治黄瓜的菌核病害,防效达到88.0%,而且具有显著的促生长作用。
1.本菌株的制剂可以防治土传性真菌病害,由于其中的80%是由病原真菌引起的,平均造成植物减产35%左右,严重的时候会造成某一作物的绝产,本制剂可以有效的解决这个问题。
2.本产品可以避免化学农药造成的土壤污染、土质退化、农药残留、抗药性病害的产生和再次蔓延等严重的问题。
3.经试验,本制剂对于黄瓜、豆角、白菜、大豆十字花科、茄科、葫芦科、豆科等蔬菜作物的菌核病有较好的效果,对于其他的土传性真菌病害如枯萎病、炭疽病、黄萎病、褐斑病等病害的防治效果达50-80%。
4.使用本制剂后,有效的促进了植物的增长,植株的发育明显好于对照组,明显的提高了收获物的产量。
实施例1:
一种防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株,其特征是:所述的菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis),该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会(CGMCC)菌种保藏号为0733。
实施例2:
上述菌株及其研制方法:
1.菌株样本采集:
取黄瓜或西红柿根部的土壤,采用稀释法分离,将土样干燥、研碎,取10克溶于99ml的无菌水中,加玻璃珠震荡20分钟,取1ml土样悬浮液倍比稀释,分别取10-6、10-7、10-8,三个浓度的液体各200μl,涂于NYDA平板中,37℃过夜培养,挑取单菌落用划线法纯化,获得菌种为枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis),该菌株现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会(CGMCC)菌种保藏号为0733。
2.种子液的培养:
NYDA培养基组成:牛肉膏0.2-1.0%,最佳用量为0.8%,酵母膏为0.1-1.0%,最佳用量为0.5%,葡萄糖为0.5-1.5%,最佳用量1.0%,发酵温度控制在20℃-40℃,最佳温度37℃,按1%-2%接种量接入活化后的菌种,摇床震荡培养,转速为150-240rpm/min,培养时间为24小时,pH控制在7.0-7.2。
3.自控发酵罐发酵:
培养基组成:玉米粉4%-8%,大豆粉为3%-6%、CaCO30.1%-0.2%,KH2PO4为0.05-0.1%。用20立升自控罐发酵,装液量为15立升,接种量2%-4%,发酵温度为37℃,pH为7.0,发酵周期24-48小时,转速150-240rpm/min,通气量为1∶0.5(V/V/min)。
实施例3:
一种实施例1或2所述的防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株的用途:该菌株的制剂在黄瓜、豆角、油菜、西红柿、大豆等十字花科、茄科、葫芦科、豆科等蔬菜作物上的菌核病、枯萎病、炭疽病、黄萎病、褐斑病等土传性真菌病害上的应用,以及作为植物促长剂的应用和生产生物农药的生产菌株。
以黄瓜为例,其使用的方法及其对应的效果见本说明书的效果部分。
Claims (3)
1.一种防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株,其特征是:所述的菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis),该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会(CGMCC),菌种保藏号为0733。
2.一种权利要求1所述的防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株生产方法,其特征是:上述的防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株研制方法:用NYDA培养基活化冷冻的菌种,然后将上述的培养物移入摇瓶放大培养,按1%-2%接种量进行接种后,在水浴摇床中震荡培养,作为种子液,然后,进行自控罐发酵,接种量为2%-4%,发酵周期24-48小时,发酵温度为37℃,pH为7.0。
3.一种权利要求1或2所述的防治作物菌核病等真菌病害的生防菌株的用途:该制剂在十字花科,茄科,葫芦科,豆科等蔬菜作物上的菌核病、枯萎病、炭疽病、黄萎病、褐斑病等土传性真菌病害上的应用,以及作为植物促长剂的应用和生产生物农药的生产菌株。
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