CN100348713C - 提高蛹虫草生产稳定性的方法 - Google Patents
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Abstract
一种提高蛹虫草生长稳定性的方法,它选用优良菌种,引入二次预培养,以提高虫草生长的稳定性。第一次预培养是将菌丝体接种到液体培养基中,预培养后,一支试管菌种可接种5-8瓶悬浮液,试种后每瓶悬浮液可转接100瓶液体菌种,不但大大增加了转接液体菌种,而且由于悬浮液具有很强的均一性,从中取样具有更好的代表性,取样试种,能进一步确认菌种的生产性能,保证生产的稳定性。将液体菌种接种到大米培养基上,引入第二次预培养,使虫草子实体在培养容器中营养、生殖同步生长、生长稳定、成熟一致,外观上粗细、长度均匀。既大大增加转接液体菌种,降低生产成本,提高虫草产量,缩短生长培养周期,又确保产品质量的稳定性。
Description
技术领域
本发明涉及一种提高蛹虫草生产稳定性的方法。
背景技术
冬虫夏虫是一种极其珍贵的药用食用真菌,近年来,随着人们生活水平的不断提高,医疗保健科学的发展和对虫草认识领域的不断扩大,以虫草为主要原料的药品、保健食品、饮料、化妆品的开发层出不穷,不仅国内市场对草虫的需求日趋扩大,东南亚、日本、美国等国际市场的需求量也在不断增加。由于野生虫草资源非常稀缺,采挖不易,常常出现供不应求,价格不断上涨、攀升,已使虫草价格倍增,无度采挖,既导致野生资源的几近枯竭,又造成对自然生态环境的破坏。因此,蛹虫草作为唯一可以代替野生冬虫夏虫的替代品,已受到国内外的广泛关注。
目前,蛹虫草子实体的人工培养技术已获得成功,市场发展前景看好,但蛹虫草子实体培养工序复杂,实现规模化和产业化生产过程中还存在一些不容忽视的制约因素。一般培养蛹虫草的方法是:选用优良菌种,刮取斜面表面的菌丝体,接种到液体培养基中,悬浮培养4天左右获得液体菌种。将液体菌种接种到大米培养基上,经光照-黑暗交替培养,成熟后采收。一般培养方法,一支试管菌种只能接种5-8瓶液体菌种。且一般培养方法不取样试种,既使增加取样试种环节,也只能在试管上取样,效果较差。一般的培养方法,蛹虫草菌种在大米培养基上,前期的生长是营养生长和生殖生长同时进行,菌丝需要10-15天左右才能长满大米培养基,而且同一培养容器中,子实体的生长有早有迟,加上生长空间和营养的竞争,必然造成采收时有些过老,有些太嫩,难以把握采收时间,先长出的子实体比较粗壮肥大,后长出的子实体比较纤细弱小。影响蛹虫草的外观和品质。
发明内容:
本发明的目的是提供一种既能保证蛹虫草的产量和质量稳定性,又能缩短生长周期的提高蛹虫草生产稳定性的方法。本发明引入二次预培养,第一次预培养在液体中进行。由于悬浮液具有很强的均一性,从中取样具有更好的代表性。取样试种,能进一步确认菌种的生产性能,保证生产的稳定性。第二次预培养在预培养室的黑暗条件中进行,当虫草菌种在黑暗环境中培养时,只进行营养生长,3-4天时间即可长满培养基,随后转移到培养室里连续光照3天之后,菌丝体同时转入生殖生长,故培养容器中的虫草子实体同步生长,成熟度一致,外观上粗细、长度均一,可以适时采收,既缩短虫草的培养生长周期,又保证产品质量的稳定性。
本发明的目的是通过下述途径来实现的:选用优良菌种(试管种),引入二次预培养以提高蛹虫草生产的稳定性,具体步骤是:a、刮取斜面表面的菌丝体,接种到液体培养基中,悬浮培养2~3天,引入第一次预培养,预培养时,1支试管菌种可接种5-8瓶悬浮液。b、对悬浮液进行抽样试种,其余放3-5℃冰箱中保存。取样后须马上放入冰箱中,在冰箱中保存的时间最好不超过60天。c、确认菌种生产性能之后,取出抽样试种表现正常的悬浮液进行接种,淘汰其他悬浮液。接种时取悬浮液1.5-2ml接种到液体培养基中,悬浮培养4天,获得液体菌种。每瓶悬浮液可转接100瓶液体菌种。d、将液体菌种接种到大米培养基上,在预培养室的黑暗条件下进行第二次预培养,黑暗培养3-4天。e、转移到培养室中连续光照3天,之后作每天白天光照,晚上黑暗各12小时的光照-黑暗交替培养,培养时间40-45天。按照常规,培养室温度为18-20℃,湿度为80%左右,光照强度控制在1000-5000勒克斯。成熟后采收。
本发明不但能大大增强优良菌种的生产能力,降低生产成本,提高虫草子实体的产量,促进虫草的规模化和产业化生产,而且由于悬浮液具有很强的均一性,从中取样具有更好的代表性,取样试种,能进一步确认菌种的生产性能,保证生产的稳定性。在第二次预培养过程中,虫草菌种在黑暗环境中只进行营养生长,随后菌丝体同时转入生殖生长,因此培养容器中的子实体同步生长,成熟度一致,外观上粗细、长度均匀,可适时采收,既缩短了虫草的生长培养周期,又确保产品质量的稳定性。同时在第二次预培养过程中,培养容器可以集中堆放,占用空间、场地少,可提高厂房利用率。
具体实施方式
本发明的提高蛹虫草生产稳定性的方法,选用优良菌种(试管中),引入二次预培养,提高蛹虫草生长的稳定性,其具体步骤是:
a、刮取斜面表面的菌丝体,接种到液体培养基中,悬浮培养2~3天,引入第一次预培养,1支试管菌种可接种5-8瓶悬浮液。
b、取样试种,其余放3-5℃冰箱中保存。取样后须马上放入冰箱,在冰箱中保存的时间最好不超过60天。
c、确认菌种生产性能之后,取出抽样试种表现正常的悬浮液进行接种,淘汰其他悬浮液。接种时取悬浮液1.5-2ml接种到液体培养基中,悬浮培养4天,获得液体菌种。每瓶悬浮液可转接100瓶液体菌种。
d、将液体菌种接种到大米培养基上,在预培养室的黑暗条件下,进行第二次预培养,黑暗培养3-4天。
e、转移到培养室中连续光照3天之后,作每天白天光照、晚上黑暗各12小时的光照-黑暗交替培养,培养时间40-45天,培养室温度为18-20℃,湿度为80%左右,光照强度控制在1000-5000勒克斯。成熟后采收。
本发明中悬浮培养的培养基以及培养条件均为现有技术。
其中步骤a、c中的悬浮培养条件为:黑暗,18-20℃,120转/分。其培养基为:在每升马铃薯葡萄糖液体培养基中,添加磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.5克,带鱼蛋白胨2.5克,PH值调至6.2,高压灭菌15分钟。
其中大米培养基的成分是:由江苏大米和营养液组成,25克大米与35ml营养液混合后高压灭菌30分钟。营养液中含磷酸二氢钾2克/升,硫酸镁1克/升,带鱼蛋白胨3克/升,PH值调至7.0。
Claims (3)
1、一种提高蛹虫草生产稳定性的方法,其特征在于:选用优良菌种,引入二次预培养,提高蛹虫草生产的稳定性,具体步骤是:
a、刮取斜面表面的菌丝体,接种到液体培养基中,悬浮培养2~3天;
b、对悬浮液进行抽样试种,其余放入3-5℃冰箱中保存;
c、确认菌种生产性能之后,取出抽样试种表现正常的悬浮液进行接种,淘汰其他悬浮液,接种时取悬浮液1.5-2ml接种到液体培养基中,悬浮培养4天,获得液体菌种;
d、将液体菌种接种到大米培养基上,在预培养室内黑暗条件下培养3-4天;
e、转移到培养室连续光照3天,之后作光照-黑暗交替培养,成熟后采收。
2、根据权利要求1所述的提高蛹虫草生产稳定性的方法,其特征是:取样试种时,取样之后须马上放入冰箱,在冰箱中保存的时间不超过60天。
3、根据权利要求1所述的提高蛹虫草生产稳定性的方法,其特征是:光照-黑暗交替培养是每天白天光照、晚上黑暗培养各12小时交替进行,培养时间为40~45天。
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