CN116472916A - 一种通过混合菌种获得金耳子实体的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种通过混合菌种获得金耳子实体的方法。所述方法包括:(1)酵母状芽孢的培养;(2)毛韧革菌的培养;(3)混合菌液的制备。将培养基培养的金耳芽孢与毛韧革菌混合菌种做出耳实验,能够使混合菌液在栽培袋里面18‑20天现耳,在原种瓶里面23‑25天现耳,其现耳率高,所得金耳子实体质量好。通本发明方法可以直接用液体菌种接入到栽培料上,出耳后获得菌种F1代,用F1代作为原种制备的转接可以解决传代问题,即可满足一次性纯液体接种栽培要求,也可满足固体制种的菌种来源。
Description
技术领域
本发明属于食用菌栽培技术领域,具体涉及一种通过混合菌种获得金耳子实体的方法。
背景技术
金耳,也称脑型银耳、金银耳,隶属担子菌门银耳科银耳属,是一种珍贵的食药同源真菌资源主要分布于我国西南地区。金耳子实体外观呈脑状,色泽金黄,富含胶质,食用口感爽滑;临床研究发现金耳多糖具有降低血糖、血脂,增强免疫力,抗凝血和抗肿瘤等效果。金耳是食用菌中珍品,它含有丰富的脂肪、蛋白质和硫、磷、锰、铁等多种微量元素,也是保健美容佳品,有着广阔的发展前景。
由于野生金耳的资源量十分稀少,远远满足不了市场需要。为了珍贵的金耳资源可持续利用,20世纪80年代,科学家开始探索金耳的人工栽培,但由于金耳的生活史比较复杂,包括1个有性世代的大循环和几个无性世代的小循环,期间又有被寄生真菌毛韧革菌的相互参与,导致金耳的栽培难以人为控制。其自身特殊的生理特性和制种特性,目前金耳的栽培过程中,菌种尚不稳定,在原基形成初期容易遭到杂菌感染,导致烂耳和出耳不整齐,严重影响金耳产量和生物转化率,阻碍了代料栽培金耳的大规模推广。
目前大多的金耳菌栽培方式主要为液体+固体模式,即单独培养革菌的液体菌种和金耳子实体,金耳子实体的原种培养需要30-40天,耗时长,与液体菌种制备相比需要耗费4-5倍的人工和9-10倍的玻璃器皿(玻璃器皿主要为原种瓶和锥形瓶)。而采用原种制备子实体对传代有严格要求,传代次数多,可能会造成菌种质量降低而引起抗性差、产量受损等(见图1);
因此,有必要提供一种即可满足一次性纯液体接种要求,也可满足固体制种的菌种来源的方法。本发明团队经过长期实验研究,提供了一种通过混合菌种获得金耳子实体的方法。通过本发明方法可以直接用液体菌种接入到栽培料上,出耳后获得菌种F1代(子一代),用F1代作为原种制备的转接,不仅解决了传代问题(见图2),还解决现有耗人力、耗时长、耗材多的问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种通过混合菌种获得金耳子实体的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的:
本发明所述的一种通过混合菌种获得金耳子实体的方法,包括如下步骤:
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,23-26℃黑暗培养5-12天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,23-26℃、140-160r/min培养4-8d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,23-26℃、140-160r/min培养4-8d,待摇瓶内菌液由百色转变为红色取出备用;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于23-26℃、140-160r/min的摇床上过夜,即可用于接种栽培袋和原种瓶;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.2-0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度19-23℃分别培养23-25天、18-20天即可出现幼耳。
本发明所述方法包括如下步骤:
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养7-10天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5-7d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5-7d,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜,即可用于接种栽培袋和原种瓶;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.2-0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度19-23℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
本发明所述专属培养基的配方为:葡萄糖18-28g,蛋白胨1-4g,酵母浸粉1-4g,磷酸二氢钾1-4g,硫酸镁0.5-2.0g,蒸馏水1L。
优选的,本发明所述专属培养基的配方为:葡萄糖20-26g,蛋白胨1-3.5g,酵母浸粉1-3g,磷酸二氢钾1-3g,硫酸镁0.6-1.5g,蒸馏水1L。
进一步优选的,本发明所述专属培养基的配方为:葡萄糖24-26g,蛋白胨2.5-3.5g,酵母浸粉2-3g,磷酸二氢钾1-2g,硫酸镁0.6-1.0g,蒸馏水1L。
更进一步优选的,本发明所述专属培养基的配方为:葡萄糖26g,蛋白胨3.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.6g,纯水1L。
本发明中步骤(2)中所述活化的温度为18-28℃,活化时间为4-10d。
优选的,本发明步骤(2)中所述活化的温度为20-25℃,活化时间为5-8d。
本发明中步骤(3)中所述混合为:按体积比1-2:1混合。
优选的,本发明步骤(3)中所述混合为:按体积比1:1混合。
本发明的有益效果:
1、本发明方法将培养基培养的金耳芽孢与毛韧革菌混合菌种,能够使混合菌液在栽培袋里面18-20天现耳,在原种瓶里面23-25天现耳,其现耳率高,所得金耳子实体质量好。
2、本发本方法可以直接用液体菌种接入到栽培料上,出耳后获得菌种F1代(子一代),用F1代作为原种制备的转接,不仅解决了对传代要求严格、传代次数多以及可能会造成菌种质量降低而引起抗性差、产量受损等问题,还解决现有耗人力、耗时长、耗材多的问题。即可满足一次性纯液体接种要求,也可满足固体制种的菌种来源。
3、本发明方法筛选出的最佳培养基配方为:葡萄糖26g,蛋白胨3.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.6g,纯水1L,得到金耳子实体完整,颜色纯正;革菌适中,生长速度快,在子实体周围的培养料表面无明显黄色分泌物;子实体存活率达到96%。
附图说明
图1:传代次数对菌种质量影响图(从左到右依次为:传代1次、传代2次、传代5次、传代6次)
图2:转接液体种幼耳至原种瓶天数变化图(从左到右依次为:出耳后转接7d、出耳后转接14d、出耳后转接21d、出耳后转接28d、出耳后转接35d)
图3:液体种接至原种瓶内(24d)出耳图
图4:液体种接至栽培袋内(20d)出耳图
图5:显微镜下的混合菌丝状态图
图6:显微镜下的混合菌种形态图
图7:金耳芽孢与毛韧革菌液体菌种培养完成后按1:1混合过夜的菌种图
图8:液体菌种宏观形态图
具体实施方式
下面通过具体实施例,对本发明的技术方案作进一步地具体说明。
实施例1通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养8天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6天,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在23℃下活化7天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6天,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
上述所述的专属培养基配方为:葡萄糖26g,蛋白胨3.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.6g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.3%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度21℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例2通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养7天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5天,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在20℃下活化5天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5天,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
上述所述的专属培养基配方为:葡萄糖26g,蛋白胨3.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.6g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.2-0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度19℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例3通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养10天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养7d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在25℃下活化8天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养7d,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
上述所述的专属培养基配方为:葡萄糖26g,蛋白胨3.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.6g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度23℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例4通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,23℃黑暗培养5天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,23℃、140r/min培养4d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在18℃下活化10天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,23℃、140r/min培养4d,待摇瓶内菌液由百色转变为红色取出备用;
上述所述的专属培养基配方为:葡萄糖18g,蛋白胨1g,酵母浸粉1g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于23℃、160r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.2%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度19℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例5通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,26℃黑暗培养12天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,26℃、160r/min培养8d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在28℃下活化4天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,26℃、160r/min培养8d,待摇瓶内菌液由百色转变为红色取出备用;
上述所述的专属培养基配方配方为:葡萄糖28g,蛋白胨4g,酵母浸粉4g,磷酸二氢钾4g,硫酸镁2g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比2:1混合,置于26℃、160r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度23℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例6通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,24℃黑暗培养6天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,24℃、150r/min培养6d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在25℃下活化6天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,24℃、150r/min培养6d,待摇瓶内菌液由百色转变为红色取出备用;
所述的专属培养基配方为:葡萄糖24g,蛋白胨1.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾2g,硫酸镁1.0g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于24℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.3%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度22℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例7通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养8天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在23℃下活化7天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
所述的专属培养基配方为:葡萄糖24g,蛋白胨2.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁1.4g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.3%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度20℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例8通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养8天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在23℃下活化7天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
所述的专属培养基配方为:葡萄糖25g,蛋白胨3g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁1g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.3%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度20℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例9通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养8天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在23℃下活化7天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
所述的专属培养基配方为:葡萄糖24g,蛋白胨3.5g,酵母浸粉3g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.6g,蒸馏水1L。
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.3%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度20℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
实施例10通过混合菌种获得金耳子实体的方法
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养8天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,在23℃下活化7天,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养6d,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
所述的专属培养基配方为:葡萄糖26g,蛋白胨2.5g,酵母浸粉1g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁1.4g,蒸馏水1L;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内按体积比1:1混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.3%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度20℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
为了进一步验证本发明的可行性,发明人进行了一系列的实验,如下:
一、实验部分
1、实验材料与仪器
1.1主要试验设备:超净工作台,恒温培养箱,摇床;
1.2实验材料:公司自有毛韧革菌菌株及芽孢,保存于4℃冰箱;
1.3实验试剂:葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氢钾、硫酸镁(均购自百思生物有限责任公司)。
2、实验方法:
2.1专用液体培养基的配方筛选试验
2.1.1试验1:
成分选取试验,设置5个配方,见表1。
表1专用液体培养基的配方筛选及结果
结果,配方4培养的混合菌种表现最优,出耳质量最好,子实体弹性好,颜色纯正,存活率88%。
2.1.2试验2:
在试验1的基础上,优化配方4,见表2。
表2专用液体培养基的配方4优化筛选及结果
结果,得到的配方C综合表现最佳。
2.2酵母状芽孢的培养
将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养7-10天,将其转入500mL含有上述配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5-7d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用。
2.3毛韧革菌的培养
将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有上述配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5-7d,待摇瓶内菌液由百色转变为红色取出备用。
2.4混合菌液的制备
将上述两种菌液,在超净工作台内1:1(V/V)混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜,即可用于接种栽培袋和原种瓶。(见图7-图8)
2.5结果
通过上述方法能够使混合菌液在原种瓶里面23-25天现耳(见图3),在栽培袋里面18-20天现耳(见图4),子实体完整,颜色纯正;革菌适中,生长速度快,在子实体周围的培养料表面无明显黄色分泌物;其现耳率高,子实体存活率96%,所得金耳子实体质量好;在培养基中19-21℃培养5天即可使用,显微下的混合菌种可以看见芽孢萌发,呈蝌蚪状,穿插在革菌菌丝中(见图5);培养好的混合菌种按照培养料干重的0.2-0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中(见图6),在温度19-23℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
虽然,上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验,对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作出一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的,因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,23-26℃黑暗培养5-12天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,23-26℃、140-160r/min培养4-8d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,23-26℃、140-160r/min培养4-8d,待摇瓶内菌液由百色转变为红色取出备用;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内混合,置于23-26℃、140-160r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.2-0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度19-23℃分别培养23-25天、18-20天即可出现幼耳。
2.根据权利要求1所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)酵母状芽孢的培养:将酵母状芽孢挑取在PDA培养基上,25℃黑暗培养7-10天,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5-7d,待摇瓶内呈现白色悬浊状备用;
(2)毛韧革菌的培养:将毛韧革菌挑取到PDA培养基上活化,待菌丝长到培养皿2/3时,将其转入500mL含有专属培养基配方的1000mL三角瓶中,25℃、150r/min培养5-7d,待摇瓶内菌液由白色转变为红色取出备用;
(3)混合菌液的制备:将上述培养好的芽孢和毛韧革菌两种菌液,在超净工作台内混合,置于25℃、150r/min的摇床上过夜;
(4)出耳:将培养好的混合菌种按照培养料干重的0.2-0.4%的接种量接入原种瓶或栽培袋中,在温度19-23℃分别培养23天、18天即可出现幼耳。
3.根据权利要求1或2任一项所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,所述专属培养基配方为:葡萄糖18-28g,蛋白胨1-4g,酵母浸粉1-4g,磷酸二氢钾1-4g,硫酸镁0.5-2.0g,蒸馏水1L。
4.根据权利要求3所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,所述专属培养基配方为:葡萄糖20-26g,蛋白胨1-3.5g,酵母浸粉1-3g,磷酸二氢钾1-3g,硫酸镁0.6-1.5g,蒸馏水1L。
5.根据权利要求4所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,所述专属培养基配方为:葡萄糖24-26g,蛋白胨2.5-3.5g,酵母浸粉2-3g,磷酸二氢钾1-2g,硫酸镁0.6-1.0g,蒸馏水1L。
6.根据权利要求5所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,所述专属培养基配方为:葡萄糖26g,蛋白胨3.5g,酵母浸粉2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.6g,纯水1L。
7.根据权利要求1或2任一项所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,步骤(2)中所述活化的温度为18-28℃,活化时间为4-10d。
8.根据权利要求7所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,步骤(2)中所述活化的温度为20-25℃,活化时间为5-8d。
9.根据权利要求1或2任一项所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,步骤(3)中所述混合为:按体积比1-2:1混合。
10.根据权利要求9所述的通过混合菌种获得金耳子实体的方法,其特征在于,步骤(3)中所述混合为:按体积比1:1混合。
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