CN101045904A - 一种北冬虫夏草子实体的培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种北冬虫夏草子实体的培养方法,包括菌种培养、菌种复壮、商品子实体培养三个阶段,复壮培养、子实体培养两个阶段所用的培养基均通过磁化处理。子实体培养分为低温培养、温差培养和恒温培养三个步骤进行。本发明用野生虫草的孢子作繁殖材料,可有效地保留优良野生虫草的特性,通过对培养基磁化处理,激发培养基的物质活性,促进菌种生长发育,菌丝体健壮,子实体产量高,生物效率高达120%以上,瓶装子实体活体商品在上市后能45~60天内保持活性,仍可缓慢生长,保存时间长,便于鲜体销售。
Description
技术领域
本发明涉及一种药用食用菌——北冬虫夏草子实体的培养方法。
背景技术
目前,北冬虫夏草子实体的人工培养已经获得成功。通常是将野外采集的北冬虫夏草接种在菌种培养基上进行培养得到菌种,然后将菌种接种在子实体培养基上,在避光培养数日后再进行光照培养而成。如中国ZL99124200.9公开的就是这样一种北冬虫夏草子实体的人工培养方法。而如何提高产量和防止菌种退化是目前人工大规模培养北冬虫夏草所需要解决的两个主要问题。一般通过选择合适的培养基及适宜的工艺条件可以提高产量,ZL99124200.9公开的正是这样一种方法。而在防止菌种退化方面主要是通过菌种复壮技术,即采集野生虫草菌丝或孢子通过分离、培养筛选出健壮的菌株,再进行培养复壮,然后用于商品子实体的人工培养。如中国ZL01126620.1即采用该方法将野生虫草菌丝体回接到蚕蛹体内进行复壮,然后将复壮后的虫草菌接种到专用PP瓶内的培养基中,放在培养架上培养,通过控制室内温湿度及光照条件,培养出鲜活子实体商品来。这种菌种复壮技术,可以延缓菌种退化,提高产量,但产量提高有限。这些方法虽然都可以培育出子实体商品,但子实体转化率不高。
发明内容
本发明提供了一种北冬虫夏草子实体的培养方法,通过选择合适的方法对菌种复壮,促进菌体生长发育,来提高产量。
本发明是这样实现的:它包括菌种培养、菌种复壮、商品子实体培养三个阶段,菌种培养是用野生虫草的孢子通过培养进行繁殖、再经筛选得到虫草菌种;复壮培养、子实体培养两个阶段所用的培养基均通过磁化处理。
为了使虫草能模仿自然环境下生长发育,上述子实体培养阶段分为低温培养、温差培养和恒温培养三个步骤;低温培养20天,温度保持在14℃~17℃、湿度保持在55~60%、光强不高于0.7lx条件下避光培养;温差培养10-15天,每天将温度23℃~25℃下保持在15小时、在8℃~10℃下9小时,湿度保持在80%下进行光照培养;恒温培养15-20天,温度在23℃~25℃,光照强度为210-230lx,湿度95%左右,并保持每天通风1小时。可以使子实体更健壮,耐病力增强,有利于提高产量。
复壮培养基采用PSA培养基并向其中加入是PSA培养基干料重量的5%的蛋清。
子实体培养基为大米培养基,其组成按重量比计为:大米52%、玉米渣14%、蛹虫粉26%、蛋白胨2%、牛肉1%、葡萄糖4%、酵母0.7%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、酒石酸铵0.03%、反丁烯二酸0.05%、硫胺素0.05%、碳酸钠0.02%,按料水比1∶1.8配制。
本发明采用野生虫草的孢子作繁殖材料进行有性繁殖,可以有效地保留优良野生虫草的特性,通过对培养基磁化处理,可以激发培养基的物质活性,促进菌种生长发育,用磁化处理的培养基复壮培养,可以得到较健壮的菌丝体,用该菌丝接种培养的子实体生产速度快,子实体健壮肥大,产量高,生物效率高,可达120%以上,用该方法培养的瓶装子实体鲜活商品在上市后能45~60天内保持活性,仍可缓慢生长,保存时间长,便于鲜体销售,营养价值更高。用无毒的玻璃瓶作子实体生产及销售容器进行商品销售,便于消费者接受。
具体实施方式
1、菌种培养。采集生长健壮的野生虫草菌株的孢子接种到PDA培养基上进行有性繁殖、再经提纯筛选得到虫草菌种。
2、菌种复壮培养。将上述菌种接种到加入了重量是PSA培养基干料重量的5%的鸡蛋清的经过磁化处理的PSA培养基上进行复壮培养,再次提纯筛选,去掉长势较弱、退化的菌株。
3、子实体培养。(1)接种:将复壮后的菌株菌丝接种到装在高约9-15cm、直径约5-10cm的透明的玻璃瓶或塑料瓶中、并经过磁化处理的大米培养基上,该培养基其组成按重量比计为:大米52%、玉米渣14%、蛹虫粉26%、蛋白胨2%、牛肉1%、葡萄糖4%、酵母0.7%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、酒石酸铵0.03%、反丁烯二酸0.05%、硫胺素0.05%、碳酸钠0.02%及维生素微量(约每公斤干料100毫克),按料水比1∶1.8配制。上述培养基磁化处理是这样进行的:将配制培养基的水放入磁场强度为1000~2000高斯的磁场中进行磁化处理经10分钟,然后用该磁化处理过的水配制培养基,即得到磁化处理的培养基。(2)低温培养20天:将接种后的瓶子在温度保持在14℃~17℃、湿度保持在55~60%条件下弱光培养,但光强不宜超过0.7lx。该阶段主要是通过低温培养,延缓子实体初期生长速度,使其健壮。(3)温差培养10-15天:即每天将温度23℃~25℃下保持在15小时、在8℃~10℃下9小时,湿度保持在80%,每天用210lx强度光照不少于12小时。该阶段模拟虫草在温差变化的自然环境下生长发育,可以使子实体更健壮,提高抗杂性,可以促进子实体发育整齐。(4)恒温培养15-20天:温度在23℃~25℃,光照强度为210-230lx,光照时间每天不少于12小时,湿度95%左右,并保持通风1小时,即得到商品子实体。子实体培养周期约50-55天,在上述步骤(3)和(4)期间分别向瓶内注入1至2次无菌磁化水,以促进子实体的生长。本方法对培养基磁化处理,子实体在生长过程中表现为菌丝增宽增粗,细胞分裂加快,加速对营养物质的吸收利用,促进菌丝生长,生物效率高达120~160%,子实体发育整齐,产量高。另外用瓶装子实体活体商品在上市后能45~60天内保持活性,仍可缓慢生长,保存时间长,便于鲜体销售,营养价值更高。用无毒的玻璃瓶作子实体生产及销售容器进行商品销售,便于消费者接受。
Claims (4)
1、一种北冬虫夏草子实体的培养方法,它包括菌种培养、菌种复壮、子实体培养三个阶段,其特征在于菌种培养是用野生虫草的孢子通过培养进行繁殖、再经筛选得到虫草菌种;复壮培养、子实体培养两个阶段所用的培养基均通过磁化处理。
2、根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于:子实体培养阶段分为低温培养、温差培养和恒温培养三个步骤;低温培养20天,温度保持在14℃~17℃、湿度保持在55~60%、光强不高于0.7lx条件下进行弱光培养;温差培养10-15天,每天将温度23℃~25℃下保持在15小时、在8℃~10℃下9小时,湿度保持在80%下进行光照培养;恒温培养15-20天,温度在23℃~25℃,光照强度为210-230lx,湿度95%左右,并保持每天通风1小时。
3、根据权利要求1或2所述的培养方法,其特征在于:复壮培养基采用PSA培养基并向其中加入是PSA培养基干料重量的5%的蛋清。
4、根据权利要求1或2所述的培养方法,其特征在于:子实体培养基为大米培养基,其组成按重量比计为:大米52%、玉米渣14%、蛹虫粉26%、蛋白胨2%、牛肉1%、葡萄糖4%、酵母0.7%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、酒石酸铵0.03%、反丁烯二酸0.05%、硫胺素0.05%、碳酸钠0.02%,按料水比1∶1.8配比。
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