CN1297997A - 北冬虫夏草子实体的培养方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种北冬虫夏草菌人工培养子实体的方法。该方法采用的菌种普适性较强,可适用于多个北冬虫夏草菌亚种。本发明提供了一种经过优选的工艺条件,由本发明方法得到的北冬虫夏草菌人工培养子实体,产品质量稳定、高产、培养周期短、色泽、形态较均匀、不易发生杂菌污染。

Description

北冬虫夏草子实体的培养方法

本发明涉及一种药用食用菌－北冬虫夏草人工子实体培养的方法。

ZL93105056.1专利公开了一种人工栽培北冬虫夏草的方法。该栽培方法包括以下步骤：a、菌种分离：将野外采集的北冬虫夏草接种在菌种培养基上，在20～25℃温度下培养一周，得到菌种；b、菌丝接种：将上述菌种接种在灭菌的固体或液体子实体培养基上，配制的固体培养基pH值为7.5～8.0；c、菌丝培养：在黑暗条件下或每天用40瓦日光灯照射1小时，温度为18～25℃，相对湿度为60～65％，菌丝长满后，松动封口膜或扎针眼通气；d、子实体培养：自然光照射，温度为18～25℃，相对湿度为80～85％；固体培养15天后，可长出子实体。该子实体培养基为大米、小米、玉米碴或高粱粒，按1∶1.6～2.0的比例加入水后，pH值调到7.5～8.0。这种子实体培养方法的缺点，一是子实体培养基的pH值过高。大米培养基的pH值低于6.0时，子实体产量下降，易发生霉菌污染；如高于7.5后，棒状子实体比例减少，同时易发生细菌污染。二是子实体培养采用自然光照射，相对日光灯来说子实体培养周期长，色泽、形态不均匀，产量相对低。三是子实体培养空气相对湿度如果高于80％，易发生杂菌污染。这种方法只适用于C868菌种，菌种应用单一。

本发明的目的是克服上述人工栽培北冬虫夏草方法中存在的缺点，提供一种适用多种菌种的人工栽培北冬虫夏草子实体的方法，工艺条件经优化选择，该方法所得产品质量稳定、高产、培养周期短、色泽、形态较均匀、不易发生杂菌污染。

本发明的目的是这样实现的。北冬虫夏草子实体的培养方法，包括培养基的配制→菌丝接种→避光培养→光照培养→子实体采收；

菌丝接种：将北冬虫夏草菌丝体悬液加入到大米培养基中，每公斤大米配制的培养基中可接种菌种悬液80～120ml；

避光培养：将接种后的培养基置培养室，避光条件下进行培养；培养室温度18～25℃，空气相对湿度50～80％；

光照培养：当避光培养的培养基上长出部分菌落后，在光照条件下进行培养；光源为日光灯，光照强度为500～3000lx；培养室温度为l8～25℃，空气相对湿度50～80％。

最佳培养条件为，培养室温度20～23℃，空气相对湿度50～70％；光照强度为800～2000lx。

大米培养基的配制：将大米按1∶1～1∶2的比例加入到营养水中；营养水中含磷酸二氢钾0.3％，七水硫酸镁0.02％，酪蛋白0.5％，富硒酵母0.01～0.1％；pH6.0～7.5。在121℃温度下灭菌30分钟。

实验表明，北冬虫夏草子实体的形成除与本身的遗传特性有关外，环境因素也是极为重要的条件，只有当外界环境条件能满足其本身的生长发育的要求，才能形成正常的子实体。在北冬虫夏菌子实体的工厂化生产中，培养房间的温度、湿度、培养基成分和酸碱度等因素，对于子实体的培养都有较大的影响。大米培养基的pH值如果高于7.5后，棒状子实体比例减少，同时易发生细菌污染；大米培养基的pH值低于6.0时，子实体产量下降，易发生霉菌污染。所以本发明采用大米培养基的pH值为6.0～7.5，pH值最好的范围为6.8～7.2。采用何种光源对子实体的培养也很重要。与节能灯、白炽灯、自然光比较，本发明采用日光灯作光源，实验表明，子实体培养周期相对要短，色泽均一，形态均匀，产量高。培养期间，培养室湿度低于50％时，大米培养基失水较快，易干燥，过早衰老，影响子实体的生长；空气相对湿度高于80％时，易发生杂菌污染。当光照强度高于3000lx时，子实体长度下降，并影响产量；当光照强度低于500lx时，虫草出草率下降，从而使子实体产量下降；同时子实体色泽较淡，形态不均匀。本发明中子实体培养条件的控制，是经过实验选择的最佳工艺条件。采用这种采用本发明的培养方法，在最优条件下，人工培养的北冬虫夏草子实体，所得产品大多呈棒状，桔红色或桔黄色，有特异香味，其外观接近野生菌株；同时子实体的产量稳定，每公斤大米可得子实体60克以上；形态、色泽均匀，培养周期相对较短，生产成本低，因而具有较高的经济价值。本发明与已有技术的最大区别是，该培养条件对许多品种的北冬虫夏草菌都是适用的，普适性很强，不必局限于某一亚种。这对广泛培养北冬虫夏草子实体提供了极为有利的条件。

不同光照强度、不同光源、不同pH值、不同温度、不同湿度对于子实体生长影响列表如下：不同光照强度对于子实体影响研究结果如下

光照强度(lx)	子实体产量(g干重/kg大米)	子实体性状	培养周期(天)
				＜500500～3000＞3000	526849	棒状，桔黄色，形态不均匀棒状，桔红色，形态均匀较短，色泽深，不均匀	45～6040～4540

不同光源对于子实体影响研究结果如下

光源种类	子实体产量(g干重/kg大米)	子实体性状	培养周期(天)
				日光灯节能灯白炽灯自然光	68504850	棒状，桔红色，形态均匀棒状，桔黄色，部分畸形桔黄色，形态不均匀棒状，桔红色，形态不均匀	40～4545～5045～5040～45

不同pH值对于子实体影响研究结果如下

pH	子实体产量(g干重/kg大米)	子实体性状	生长状况
				＜6.06.0～7.5＞7.5	＜3535～70＜60	畸形，形态不均匀形态正常，均匀形态不均匀	易染霉菌，出草率低稳定易染细菌

不同温度对子于实体影响研究结果如下

温度(℃)	子实体产量(g干重/kg大米)	培养周期(天)
			＜1818～25＞25	6568＜58	45～6040～4540～45

不同湿度对于子实体影响研究结果如下

相对湿度(％)	子实体产量(g干重/kg大米)	子实体性状	生长状况
				＜5050～80＞80	＜6060～7050～65	较短，形态不均匀棒状，形态均匀棒状，形态不均匀	易衰老正常易染杂菌

本发明由以下实施例给出。

实施例1：以上海国宝生物工程研究所保藏的北冬虫夏草菌“国宝4号”为生产菌种。每瓶培养基由大米25g和营养水32ml配制而成，营养水中含磷酸二氢钾0.3％，七水硫酸镁0.02％，酪蛋白0.5％，富硒酵母0.01～0.1％；营养水pH值6.8。在121℃温度下灭菌30分钟。将菌种接种到大米培养基中。在避光条件下培养5天，培养温度21±1℃，空气相对湿度60±2％。待培养基表面长出一定白色菌丝后，在日光灯照射下光照培养。光照强度1000±50lx。40天后子实体成熟，棒状，桔红色。采收干燥后，每瓶培养基可收获1.8g子实体。

实施例2：以上海国宝生物工程研究所保藏的北冬虫夏草菌“国宝1号”为生产菌种。每瓶培养基由大米25g和营养水35ml配制而成，营养水成分同上，pH值7.0。将菌种接种到大米培养基中。在避光条件下培养5天，培养温度23～25℃，空气相对湿度66～70％。待培养基表面长出一定白色菌丝后，在日光灯照射下光照培养。光照强度800±50lx。45天后子实体成熟，棒状，桔红色。采收干燥后，每瓶培养基可收获1.6g子实体。

实施例3：以上海国宝生物工程研究所保藏的北冬虫夏草菌“国宝1号”为生产菌种。每瓶培养基由大米25g和营养水32ml配制而成，营养水成分同上，pH值6.8。将菌种接种到大米培养基中。在避光条件下培养5天，培养温度18～20℃，空气相对湿度50～55％。待培养基表面长出一定白色菌丝后，在日光灯照射下光照培养。光照强度1200±50lx。50天后子实体成熟，棒状，桔红色。采收干燥后，每瓶培养基可收获1.7g子实体。

Claims (4)

1、一种北冬虫夏草子实体的培养方法，包括培养基的配制→菌丝接种→避光培养→光照培养→子实体采收；

菌丝接种：将北冬虫夏草菌丝体悬液加入到大米培养基中，每公斤大米配制的培养基中可接种菌种悬液80～120ml；

避光培养：将接种后的培养基置培养室，避光条件下进行培养；培养室温度18～25℃，空气相对湿度50～80％；

光照培养：当避光培养的培养基上长出部分菌落后，在光照条件下进行培养；光源为日光灯，光照强度为500～3000lx；培养室温度为18～25℃，空气相对湿度50～80％。

2、按照权利要求1所述的北冬虫夏草子实体的培养方法，其特征在于培养室温度为20～23℃，空气相对湿度50～70％；光照强度为800～2000lx。

3、按照权利要求1、2所述的北冬虫夏草子实体的培养方法，其特征在于大米培养基的配制：将大米按1∶1～1∶2的比例加入到营养水中；营养水中含磷酸二氢钾0.3％，七水硫酸镁0.02％，酪蛋白0.5％，富硒酵母0.01～0.1％；pH6.0～7.5；在121℃温度下灭菌30分钟。

4、按照权利要求3所述的北冬虫夏草子实体的培养方法，其特征在于培养基pH6.8～7.2。