CN115356315A - 一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法 - Google Patents
一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115356315A CN115356315A CN202211022103.9A CN202211022103A CN115356315A CN 115356315 A CN115356315 A CN 115356315A CN 202211022103 A CN202211022103 A CN 202211022103A CN 115356315 A CN115356315 A CN 115356315A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hydrogen sulfide
- probe
- phenoxy
- fluorane
- substituent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 45
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 45
- 239000000523 sample Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical class F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 19
- -1 phenoxy, 1-naphthoxy Chemical group 0.000 claims abstract description 37
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 6
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 4
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims abstract description 3
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N EtOH Substances CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 229910052979 sodium sulfide Inorganic materials 0.000 claims description 4
- GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N sodium sulfide (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[S-2] GRVFOGOEDUUMBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- FWQHNLCNFPYBCA-UHFFFAOYSA-N fluoran Chemical class C12=CC=CC=C2OC2=CC=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=CC=C21 FWQHNLCNFPYBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000005978 1-naphthyloxy group Chemical group 0.000 description 2
- FSGDHZVPZQSBHY-UHFFFAOYSA-N 2-[2-hydroxy-4-(n-phenylanilino)benzoyl]benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)C1=CC=C(N(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)C=C1O FSGDHZVPZQSBHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SBTRJDQNOOGKKQ-UHFFFAOYSA-N 4-methoxy-2-phenoxyaniline Chemical compound COC1=CC=C(N)C(OC=2C=CC=CC=2)=C1 SBTRJDQNOOGKKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- QPNFUBAIQZJEPO-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(dibutylamino)-2-hydroxybenzoyl]benzoic acid Chemical group OC1=CC(N(CCCC)CCCC)=CC=C1C(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O QPNFUBAIQZJEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007830 nerve conduction Effects 0.000 description 1
- 208000020470 nervous system symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000002341 toxic gas Substances 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/10—Spiro-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
- C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
- C09K2211/1007—Non-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
- C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
- C09K2211/1088—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing oxygen as the only heteroatom
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，涉及一种硫化氢检测方法。该方法首先制备荧烷类衍生物探针为含叠氮取代基的荧烷类衍生物，结构通式为：
其中，R1、R2为正丁基或苯基，R3为苯氧基、1‑萘氧基或有取代基的苯氧基，所述的取代基为硝基、三氟甲基。本发明的荧烷类衍生物探针用荧光分光光度计实现微量硫化氢的定量检测，操作简单，方便快捷，该类荧光探针制备工艺操作条件简单、产品后处理方法简易、转化率较高，易实现工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种硫化氢检测方法，特别是涉及一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法。
背景技术
硫化氢（H2S）是一种具有刺激性的无色气体，被生物体吸收后会影响细胞的氧化过程。低浓度的硫化氢接触会对呼吸道产生局部刺激作用，高浓度接触时表现为中枢神经系统症状和窒息症状。硫化氢虽然为一种剧毒气体，但是内源性硫化氢被研究者认为是第三种气体信号分子。内源性硫化氢可参与多种生理活动，例如血管舒张、细胞保护、神经传导、凋亡、糖代谢、胰岛素分泌等。可见，对低浓度硫化氢的准确测定在疾病诊断方面非常有意义。
目前检测硫化氢的分析方法主要包括汞量法、检测管法、亚甲基蓝比色法、荧光探针法等方法，众多方法中荧光探针法选择性较好、操作方便、检测灵敏度高。而荧烷类化合物由于其结构中的氧桥结构，使整个分子保持了较强的刚性平面结构，有利于产生强烈的荧光。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，本发明基于荧烷母核，设计并合成了荧烷类衍生物的荧光探针，其结构中的叠氮取代基用于硫化氢的检测，与硫化氢接触后被还原为氨基，探针的化学结构发生变化导致荧光光谱的变化，实现硫化氢的定量检测，响应速度快，专抗干扰性强。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，所述方法包括以下步骤：
(1)制备的荧烷类衍生物探针其化学结构通式如下：
其中，R1、R2为正丁基或苯基，R3为苯氧基、1-萘氧基或有取代基的苯氧基，所述的取代基为硝基、三氟甲基；
(2)制备的2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针，溶解于PBS:乙醇混合液(9：1)中配制探针储备液，浓度为10 μM；使用PBS:乙醇混合液(9：1)配制系列离子或分子浓度为10 μM的溶液，将两者以相同提体积混合，30 oC下静置30分钟，测量并记录其在563 nm下的荧光强度，发现仅加入硫化钠(硫化氢释放剂)的溶液有较强的荧光，用荧光分光光度计实现微量硫化氢的定量检测即可。
所述的一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，所述R3为下列之一：苯氧基、1-萘氧基、3-三氟甲基苯基、3-硝基苯基。
所述的一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，所述的荧光探针在563 nm的荧光强度与待测硫化氢浓度之间的标准曲线为y = 229.36x + 4.27 。
本发明的优点与效果是：
本发明的荧烷类衍生物探针可使用荧光分光光度计实现微量硫化氢的定量检测，操作简单，方便快捷，提高检测效率，提供一类荧烷类衍生物。该类荧光探针制备工艺操作方便、产品后处理方法简易、转化率较高，易实现工业化生产；灵敏度高，荧光发射光谱特性良好，探针与待测物反应所需时间短，30分钟内性质稳定，通过标准曲线测定硫化氢含量。
附图说明
图1为本发明 2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针与不同离子或分子反应后荧光强度图；
图2为本发明 2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针的荧光强度与硫化氢浓度的线性关系图；
图3为 本发明2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针与不同浓度硫化氢反应后的荧光光谱图；
图4为本发明 2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针检测硫化氢时荧光强度随时间的变化趋势图。
具体实施方式
下面结合附图所示实施例对本发明进行详细说明。
实施例1：2-叠氮-3-苯氧基-6-二苯基氨基荧烷的合成（R1和R2为苯基，R3为苯氧基）
氮气保护下，在11.0 g硫酸中加入2.15 g的2-苯氧基-4-甲氧基苯胺，随后加入4.09 g的2-羧基-4’-二苯基氨基-2’-羟基二苯甲酮固体，反应体系逐渐粘稠，升温至40oC，搅拌4小时。反应结束后，将混合物倒入至25 g冰水混合物中，析出固体，过滤后收集滤饼。滤饼重新分散于30 g去离子水中，氮气保护下滴加75 g的10%氢氧化钠水溶液，滴加结束后升温至80 oC并保持2小时，加入20.00 g甲苯，继续加热至回流并保持搅拌0.5小时，降温至10 oC以下，过滤收集析出的白色固体使用15.00 g甲苯和15.00 g正己烷依次淋洗，干燥后产物为2-氨基-3-苯氧基-6-二苯基氨基荧烷，真空干燥后共4.25 g，收率约60%。
氮气保护下，向12 mL乙醇中加入本例中制备的2-氨基-3-苯氧基-6-二苯基氨基荧烷1.15 g，溶解后，加入7 mL工业盐酸，降温至5 oC，滴加1.5 mL的10%亚硝酸钠水溶液，随后滴加1.0 mL的15%叠氮化钠水溶液，整个滴加过程温度控制在5 -10 oC。反应结束后，加入24 mL水和20 mL二氯甲烷，使用二氯甲烷洗涤水相，收集有机相并干燥浓缩，得到2-叠氮-3-甲基-6-二丁基氨基荧烷共0.9074 g，收率约94%。
1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.95 (dd, J = 7.3, 1.6 Hz, 1H), 7.68(td, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (tt, J = 7.3, 1.4 Hz, 2H), 7.38 – 7.31 (m,2H), 7.26 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.25 – 7.16 (m, 4H), 7.16 – 7.07 (m, 6H), 7.07– 6.98 (m, 5H), 6.71 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H).
实施例2：2-叠氮-3-(3-三氟甲基苯基)-6-二丁基氨基荧烷的合成（R1和R2为正丁基，R3为3-三氟甲基苯基）
2-叠氮-3-(3-三氟甲基苯基)-6-二丁基氨基荧烷可通过与实施例1类似的方法合成，仅将2-苯氧基-4-甲氧基苯胺替换为2-(3-三氟甲基苯氧基)-4-甲氧基苯胺，2-羧基-4’-二苯基氨基-2’-羟基二苯甲酮替换为2-羧基-4’-二丁基氨基-2’-羟基二苯甲酮。以2-(3-三氟甲基苯氧基)-4-甲氧基苯胺计，2-叠氮-3-(3-三氟甲基苯基)-6-二丁基氨基荧烷收率约65%。
1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.95 (dd, J = 7.3, 1.6 Hz, 1H), 7.68(td, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (tt, J = 7.3, 1.4 Hz, 2H), 7.37 (dt, J = 7.5,1.6 Hz, 1H), 7.32 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.27 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.11 (t, J =3.8 Hz, 2H), 6.94 (dt, J = 7.3, 1.6 Hz, 1H), 6.66 – 6.59 (m, 2H), 6.25 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 3.15 – 3.02 (m, 4H), 1.64 (dp, J = 12.3, 7.1 Hz, 2H), 1.53(dp, J = 12.3, 7.0 Hz, 2H), 1.42 (ddtd, J = 14.8, 12.3, 8.0, 7.0 Hz, 2H),1.36 – 1.22 (m, 2H), 0.95 (t, J = 7.9 Hz, 6H).
实施例3：2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷的合成（R1和R2为正丁基，R3为3-硝基苯基）
2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷可通过与实施例2类似的方法合成，仅将2-(3-三氟甲基苯氧基)-4-甲氧基苯胺替换为2-(3-硝基苯基)-4-甲氧基苯胺。以2-(3-硝基苯基)-4-甲氧基苯胺计，2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷收率约55%。
1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 8.00 (dt, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.95(dd, J = 7.3, 1.6 Hz, 1H), 7.68 (td, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (tt, J = 7.3,1.4 Hz, 2H), 7.44 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.35 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 7.22 (dt, J= 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 3.8 Hz, 2H), 6.66 – 6.59 (m, 2H), 6.25 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 3.15 – 3.02 (m, 4H), 1.64 (dp, J = 12.4, 7.1 Hz, 2H), 1.53(dp, J = 12.3, 7.1 Hz, 2H), 1.48 – 1.22 (m, 4H), 0.95 (t, J = 8.0 Hz, 6H).
实施例4：2-叠氮-3-(1-萘氧基)-6-二丁基氨基荧烷的合成（R1和R2为正丁基，R3为1-萘氧基）
2-叠氮-3-(1-萘氧基)-6-二丁基氨基荧烷可通过与实施例2类似的方法合成，仅将2-(3-三氟甲基苯氧基)-4-甲氧基苯胺替换为2-(1-萘氧基)-4-甲氧基苯胺。以2-(1-萘氧基)-4-甲氧基苯胺计，2-叠氮-3-(1-萘氧基)-6-二丁基氨基荧烷收率约62%。
1H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 8.31 – 8.26 (m, 1H), 7.95 (dd, J =7.3, 1.6 Hz, 1H), 7.79 (dt, J = 7.4, 1.6 Hz, 1H), 7.75 (dt, J = 7.5, 1.4 Hz,1H), 7.68 (td, J = 7.6, 1.5 Hz, 1H), 7.59 (td, J = 7.4, 1.6 Hz, 1H), 7.56 –7.43 (m, 4H), 7.29 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 3.8 Hz, 2H), 6.65(s, 1H), 6.62 (dd, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 6.25 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 3.15 –3.02 (m, 4H), 1.64 (dp, J = 12.3, 7.1 Hz, 2H), 1.53 (dp, J = 12.3, 7.0 Hz,2H), 1.42 (ddtd, J = 14.8, 12.3, 8.0, 7.0 Hz, 2H), 1.36 – 1.22 (m, 2H), 0.95(t, J = 7.9 Hz, 6H).
实施例5：2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针对不同离子或分子的选择性
使用实施例3中制备的2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针，溶解于PBS:乙醇混合液(9：1)中配制探针储备液，浓度为10 μM。使用PBS:乙醇混合液(9：1)配制一系列不同离子或分子浓度为10 μM的溶液，将两者以相同提体积混合，30 oC下静置30分钟，测量并记录其在563 nm下的荧光强度，发现仅加入硫化钠(硫化氢释放剂)的溶液有较强的荧光，其他组包括空白组均无荧光响应，选择性好，抗干扰性强。（图1）
实施例6：2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针与硫化氢浓度的线性关系
使用实施例3中制备的2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针，溶解于PBS:乙醇混合液(9：1)中配制探针储备液，浓度为200 μM。使用PBS:乙醇混合液(9：1)配制硫化钠(硫化氢释放剂)溶液，与探针储备液混合后，定容，使体系中硫化氢浓度分别为0、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0、200.0 μM，30 oC下静置30分钟，测量并记录其在563 nm下的荧光强度，发现荧光强度随硫化氢浓度提高而升高（图3），在0.1 – 20.0 μM区间内线性良好（图2），相关系数0.9979，可使用y = 229.36x + 4.27根据测量值计算溶液中硫化氢的浓度。其中，y为563 nm下荧光测量值，x为待测液中硫化氢浓度，单位μM。
实施例7：2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针与硫化氢反应后荧光强度与混合时间的关系
依照实施例6中所述硫化氢浓度为10.0 μM的样品的配制方法，混合后开始计时，反应温度控制为30 oC，在不同时间连续测量其荧光强度。通过记录值分析，2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针与硫化氢反应在30 oC下仅需12分钟左右即接近荧光最大强度，且在30分钟内荧光强度稳定。探针响应速度快，与待测物接触30分钟内性质依然稳定，有足够长的时间窗口用于测试。（图4）
可以理解的是，以上关于本发明的具体描述，仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例所描述的技术方案，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换，以达到相同的技术效果 ；只要满足使用需要，都在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)制备的荧烷类衍生物探针其化学结构通式如下：
其中，R1、R2为正丁基或苯基，R3为苯氧基、1-萘氧基或有取代基的苯氧基，所述的取代基为硝基、三氟甲基；
(2)制备的2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针，溶解于PBS:乙醇混合液(9：1)中配制探针储备液，浓度为10 μM；使用PBS:乙醇混合液(9：1)配制系列离子或分子浓度为10 μM的溶液，将两者以相同提体积混合，30 oC下静置30分钟，测量并记录其在563 nm下的荧光强度，发现仅加入硫化钠(硫化氢释放剂)的溶液有较强的荧光，用荧光分光光度计实现微量硫化氢的定量检测即可。
2.如权利要求1所述的一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，其特征在于，所述R3为下列之一：苯氧基、1-萘氧基、3-三氟甲基苯基、3-硝基苯基。
3.如权利要求1所述的一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，其特征在于，所述的荧光探针在563 nm的荧光强度与待测硫化氢浓度之间的标准曲线为y = 229.36x + 4.27。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211022103.9A CN115356315A (zh) | 2022-08-25 | 2022-08-25 | 一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211022103.9A CN115356315A (zh) | 2022-08-25 | 2022-08-25 | 一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115356315A true CN115356315A (zh) | 2022-11-18 |
Family
ID=84003935
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211022103.9A Pending CN115356315A (zh) | 2022-08-25 | 2022-08-25 | 一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115356315A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103805170A (zh) * | 2014-01-26 | 2014-05-21 | 大连理工常熟研究院有限公司 | 一种用于识别硫化氢的特异性荧光探针及其应用 |
| KR20180115992A (ko) * | 2017-04-14 | 2018-10-24 | 한국생명공학연구원 | 황화수소 검출용 형광 프로브 및 이의 제조방법 |
| CN109735328A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-05-10 | 济南大学 | 一种检测细胞内硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用 |
| WO2020107758A1 (zh) * | 2018-11-30 | 2020-06-04 | 华南理工大学 | 一种检测硝基还原酶的荧光探针及其制备方法与酶促反应的应用 |
| CN112250691A (zh) * | 2020-11-18 | 2021-01-22 | 沈阳感光化工研究院有限公司 | 用于检测硫化氢的荧烷类衍生物探针及其制备方法和应用 |
-
2022
- 2022-08-25 CN CN202211022103.9A patent/CN115356315A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103805170A (zh) * | 2014-01-26 | 2014-05-21 | 大连理工常熟研究院有限公司 | 一种用于识别硫化氢的特异性荧光探针及其应用 |
| KR20180115992A (ko) * | 2017-04-14 | 2018-10-24 | 한국생명공학연구원 | 황화수소 검출용 형광 프로브 및 이의 제조방법 |
| WO2020107758A1 (zh) * | 2018-11-30 | 2020-06-04 | 华南理工大学 | 一种检测硝基还原酶的荧光探针及其制备方法与酶促反应的应用 |
| CN109735328A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-05-10 | 济南大学 | 一种检测细胞内硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用 |
| CN112250691A (zh) * | 2020-11-18 | 2021-01-22 | 沈阳感光化工研究院有限公司 | 用于检测硫化氢的荧烷类衍生物探针及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 黄昆: "基于荧烷的一种化学反应型探针对S2-的识别研究", 分析科学学报, vol. 36, no. 1, 29 February 2020 (2020-02-29), pages 121 - 125 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109735328B (zh) | 一种检测细胞内硫化氢的荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN111423423A (zh) | 一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用 | |
| CN113801105B (zh) | 线粒体靶向的过氧亚硝酸根/亚硫酸氢根双响应荧光探针 | |
| CN104962278A (zh) | 一种钯离子荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN114805262B (zh) | 一种粘度和极性响应型平台荧光探针、硫化氢检测荧光探针及其合成工艺与应用 | |
| CN113292582A (zh) | 一种同时区分羟基自由基和过氧化氢的双功能荧光探针的合成与应用 | |
| CN107698557B (zh) | 基于吡啶联吡唑酰腙衍生物的荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN113912596B (zh) | 一种基于苯并噻唑母体的钯离子检测荧光探针及其制备方法与应用 | |
| CN111205220B (zh) | 一种荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN117164575A (zh) | 一种单激发检测onoo-的近红外比率荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN115356315A (zh) | 一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法 | |
| CN114133387B (zh) | 具有粘度传感性质的可靶向多种细胞器的荧光探针 | |
| CN108558859B (zh) | 一种基于苯并吡喃的可视化长波型Hg2+荧光探针的制备和应用 | |
| CN111187289B (zh) | 一种过氧化氢荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN114957180A (zh) | 一种基于双激发波长荧光分析法识别pH值的荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN109134483B (zh) | 一种硫化氢荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN108299396B (zh) | 一种用于水环境中金属离子检测的有机化合物及其应用 | |
| CN111518093A (zh) | 一种检测硫化物的荧光探针及其制备和应用 | |
| CN114507223B (zh) | 一种吲哚盐-香豆素衍生物及其制备方法和应用、比率检测亚硫酸根的方法 | |
| CN111592532A (zh) | 一种检测肼的近红外荧光探针及其制备和应用 | |
| CN114478319B (zh) | 一种二氰基异佛尔酮衍生物的合成方法及其用于检测汞离子的用途 | |
| CN113045497B (zh) | 硒醇反应型萘酰亚胺荧光探针及其制备方法和在食品检测中的应用 | |
| CN114874111B (zh) | 一种用于检测温度的近红外荧光探针及其制备方法与应用 | |
| CN114805272B (zh) | 芳基香豆素探针，探针分子复合物及其在城市规划污水系统Hg2+检测中的应用 | |
| CN116143719B (zh) | 一种用于检测过氧亚硝酸根的试卤灵类衍生物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |