CN111423423A - 一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用 - Google Patents

一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用，所述的比率型荧光探针的结构式为：

Description

一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用
技术领域
本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用。
背景技术
过氧亚硝基阴离子(ONOO-)被认为是最重要的阴离子之一，在人体内由过量的一氧化氮(NO)和氧自由基(.O2 -)反应产生，它既是强氧化剂，又是硝化剂，可与人体细胞内的核酸、蛋白质、脂质等大分子物质反应，使细胞的代谢发生困难并且使机体消耗大量的能量，从而引起一系列的生物病变过程，如肿瘤、动脉硬化、身体炎症、视网膜损伤等。近年来，医学界也不乏大量对于ONOO-的检测的研究，但是由于ONOO-的强氧化性，在体内很不稳定，这为ONOO-的检测带来不便。因此，检测过氧化亚硝基阴离子的新的有效技术至关重要。随着新型小分子荧光探针的发展，检测这些过氧化物，荧光探针通常比许多其他方法更有选择性，侵入性更小，更方便的检测细胞中的生物相关分析物。
为了探讨体内过氧化亚硝基阴离子的病理生理机制，开发有效的脑内过氧化亚硝基阴离子监测的影像学工具至关重要。 基于活性传感探针的荧光成像技术以其高灵敏度、高选择性、实时性、无创性等优点，成为研究生物系统中生物种类的重要手段。虽然已经报道了一些荧光探针用于细胞或组织的体内成像，但仍然缺乏体内成像方法用于包括癫痫大脑在内的脑体内成像检测。
近年来，作为卓越的检测技术，荧光探针因为它的高选择性、高敏感性及实时成像性，已经越来越引起人们的高度关注，被广泛应用于各种物质的检测，操作简便、重现性好等优点，可方便用于生物分子的原位、实时无损伤检测以及生物分子及其生物过程的追踪。通常情况下，荧光探针检测物质是依靠于荧光强度的增加或消减，因此探针的浓度、仪器的效率、环境等因素都会影响信号的输出。相比之下，比率型荧光探针以两个荧光信号的比值为输出信号，利用两个不同波长处荧光强度的变化，可以很好地消除这些因素。
目前检测过氧化亚硝基阴离子的荧光探针很少，已经报导过的探针大都是受到其他活性氧素的干扰（如过氧化氢），这些探针在生物体检测中受到的背景干扰较大，大大限制了它们的应用。因此，开发新型的比率荧光探针检测过氧化亚硝基阴离子是非常重要的。
发明内容
针对现有技术种存在的检测过氧亚硝基阴离子的荧光探针存在灵敏度低、背景干扰大的缺陷，本发明提供了一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用，经过荧光分光光度仪检测可以发现，该荧光探针对过氧化亚硝基阴离子检测灵敏度高，而且现象明显，便于识别。
本发明中，一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用，所述的荧光探针分子式为C52H50N7O6 +，结构式CS-NA如下所示：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
。
进一步地，所述应用的体系包括水体系、有机溶剂体系或生物体系。
进一步地，所述的荧光探针通过以下方法制备得到：
（1）将化合物1和炔丙胺加入到乙醇中，加热反应，反应结束后将反应液倒入冰水中，DCM萃取，经柱层析提纯后得化合物2；
（2）将化合物2和N-（2-氨基乙基）吗啉溶解到乙二醇单甲醚中，加热反应，反应液用稀盐酸溶液洗涤，经柱层析提纯得化合物3；
（3）将化合物4和环己酮加入到硫酸中，加热反应，将反应液倒入到冰水当中，滴加高氯酸，析出固体，将固体用乙醇重结晶得化合物5；
（4）将化合物5和对叠氮苯甲醛加入到冰醋酸中，加热反应，反应液使用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经柱色层析提纯得化合物6；
（5）将化合物3和化合物6加入到氯仿中，溴化亚铜作为催化剂，滴入三乙胺，室温下反应，经柱层析后得化合物CS-NA；
合成路线如下：
Figure DEST_PATH_IMAGE002
。
进一步地，步骤（1）中化合物1和炔丙胺的摩尔比为1：1.5；步骤（2）中化合物2和N-（2-氨基乙基）吗啉的摩尔比为1：1.2；步骤（3）中化合物4和环己酮的摩尔比为1：3；步骤（4）中化合物5和对叠氮苯甲醛的摩尔比为1：1.5；步骤（5）中化合物3和化合物6、溴化亚铜、三乙胺的摩尔比为1：1.1：3：2。
进一步地，步骤（1）中所述的加热反应条件为80℃下12小时；步骤（2）中所述的加热反应条件为110℃下12小时；步骤（3）中所述的加热反应条件为90℃下12小时；步骤（4）中所述的加热反应条件为90℃下12小时；步骤（5）中所述的反应时间为12小时。
进一步地，步骤（1）所述的柱层析提纯方法为：旋转蒸馏除去溶剂，固体用二氯甲烷溶解，用体积比5:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离；步骤（2）中所述的柱层析提纯方法为：用二氯甲烷萃取除去水相，旋转蒸馏除去溶剂，少量二氯甲烷溶解固体，用体积比20：1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离；步骤（4）中所述的柱色层析提纯方法为：用二氯甲烷萃取除去水相，旋转蒸馏除去溶剂，少量二氯甲烷溶解固体，用体积比5：1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离；步骤（5）中所述的柱层析提纯方法为：旋转蒸馏除去溶剂，固体用二氯甲烷溶解，用体积比10:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离。
进一步地，步骤（3）中所述硫酸的质量份数为36%，所述高氯酸的质量分数为70%。
本发明所述的荧光探针以荧光增强、颜色发生明显改变的方式检测过氧化亚硝基阴离子。该荧光探针未与过氧化亚硝基阴离子反应时，分子内羧基会形成一个分子内螺环，破坏了荧光基团的共轭结构，导致了荧光猝灭；当荧光探针与过氧化亚硝基阴离子发生反应后，螺环会打开重新恢复荧光基团的共轭结构，并在光照条件下显示处较强的荧光。该荧光探针能够在水体系、有机溶剂体系高选择性识别和检测过氧化亚硝基阴离子，该探针本身在490 nm处具有较弱荧光，加入水或者有机溶剂后变成淡黄色，当与过氧化亚硝基阴离子作用后，淡黄色消失。
有益效果
1. 本发明检测过氧化亚硝基阴离子的荧光探针对过氧化亚硝基阴离子检测的选择性高，经过荧光分光光度仪检测可以发现，该荧光探针对过氧化亚硝基阴离子检测灵敏度高，现象明显，便于识别；
2. 本发明检测过氧化亚硝基阴离子的荧光探针的制备方法简单，制备的产品产率高，适合大规模推广应用；
3. 本发明针对生物体的检测具有高选择性，通过比率型荧光探针以两个荧光信号的比值为输出信号，可以很好地消除背景因素的干扰，减少其他因素的干扰，提高检测的灵敏度和准确度。
附图说明
图1为本发明实施例1合成的CS-NA的质谱图；
图2为荧光探针对不同浓度的过氧化亚硝基阴离子的荧光强度响应图（pH=7.4）；
图3为在激发波长为420 nm和580 nm下，荧光强度比(I490/I650)随过氧化亚硝基阴离子浓度变化的关系图（pH=7.4）；
图4为不同浓度的荧光探针对细胞存活力影响的关系图，以过氧化亚硝基阴离子浓度为0作为基准；
图5为不同生物小分子对荧光探针荧光强度变化的对比图，1-14分别代表Glu, Cys,S2O3 2-, S2-, SO3 2-, SO4 2-, HSO3 2-, NO2-, H2O2, Vc-, Zn2+, Fe3+、Mg2+和ONOO-。
具体实施方式
为了使本领域的人员更好地理解本发明的技术方案，下面对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述，基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的其它类同实施例，都应当属于本申请保护的范围。
实施例1
（1）将0.276 g化合物1（6-溴-1H,3H-苯并[de]异色胺-1,3-二酮）与0.08 g炔丙胺加入到20ml乙醇中，在80℃下反应12小时，TLC监测反应进程，反应结束后，将反应液旋转蒸馏除去溶剂，固体用二氯甲烷溶解，用体积比5:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离，得化合物2；
（2）将0.156 g化合物2和0.078 g N-(2-氨基乙基)吗啉在8ml乙二醇单甲醚中溶解，在110℃下反应12小时，TLC监测反应进程，反应液用质量分数为10％的稀盐酸洗涤，将反应完成得到反应液用二氯甲烷萃取除去水相，再用旋转蒸馏出去溶剂，使用少量二氯甲烷溶解固体，用体积比20：1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离，得到化合物3，产量为0.13g，产率为72％。 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 8.40(d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.57 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 8.1Hz, 1H), 6.24 (s, 1H), 4.85 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 3.69 (s, 4H), 3.31 (d, J =13.5 Hz, 2H), 2.74 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.17 – 1.95 (m, 1H), 1.14 (s, 1H).13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 164.02, 163.24, 149.73, 135.02, 131.57, 129.95,126.42, 124.89, 120.48, 116.00, 104.61, 90.27, 88.51, 79.17, 69.92, 67.04,59.80, 55.99, 53.13, 38.85, 29.09. HRMS（ESI）计算得出。ForC21H21N3O3 [M] +:363.1583. found: 364.1649；
（3）将0.269 g化合物4（(4-(二乙氨基)-2-羟基苯基)(苯基)甲酮）和0.294环己酮加入到20ml质量分数36％的浓硫酸中，90℃下反应12小时，将反应液倒入到冰水当中，逐滴滴入10ml质量分数70%的高氯酸，析出固体，将固体用乙醇重结晶，得到化合物5；
（4）将0.188g化合物5和0.22g对叠氮基苯甲醛在10ml冰醋酸中90℃下冷凝回流反应12小时，TLC监测反应，将反应完成得到的溶液用二氯甲烷萃取除去水相，再用旋转蒸馏出去溶剂，使用少量二氯甲烷溶解固体，用体积比5：1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离，得到化合物6，产量为0.17g，产率为67％。13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 212.74,175.28, 169.90, 166.60, 161.79, 155.90, 151.84, 150.43, 143.60, 138.67,134.40, 134.00, 131.02, 130.57, 130.55, 129.35, 129.30, 128.65, 123.65,123.64, 122.58, 118.85, 101.15, 97.17, 47.75, 44.51, 29.72, 27.17, 23.14,22.29, 12.47.
（5）将0.072化合物3和0.11g化合物6加入到10ml氯仿中，0.086g溴化亚铜作为催化剂，滴加3-4滴三乙胺，通过Click反应制备探针CS-NA，TLC监测反应进程，将反应完成得到的溶液旋转蒸馏除去溶剂，将固体二氯甲烷溶解，用体积比10:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离，得到CS-NA所示化合物，所述的CS-NA的质谱图如图1所示。1H NMR (400 MHz,MeOD) δ 8.30 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 – 7.65 (m, 1H), 7.52 (d, J = 6.5 Hz,1H), 7.34 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 7.21 (d, J = 31.1 Hz, 3H), 6.93 (d, J = 9.3Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.31 (s, 1H), 6.21 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 4.14 (d, J =7.2 Hz, 3H), 3.57 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 2.84 (s, 3H), 2.16 (d, J = 20.5 Hz,1H), 1.84 – 1.44 (m, 4H), 1.38 – 1.22 (m, 18H), 1.18 – 0.73 (m, 4H).13C NMR(101 MHz, CDCl3) δ 170.06, 167.37, 164.48, 163.78, 156.16, 152.53, 152.19,149.67, 149.40, 145.00, 137.68, 137.22, 135.56, 134.88, 134.49, 131.76,131.50, 131.48, 130.59, 130.56, 129.95, 129.26, 128.52, 128.33, 128.14,127.63, 126.34, 124.96, 124.83, 123.79, 123.47, 122.93, 121.35, 120.46,120.23, 110.04, 108.84, 104.54, 97.31, 66.93, 55.92, 53.07, 44.52, 41.05,38.93, 35.02, 29.67, 29.26, 27.16, 23.09, 22.30, 12.51.HRMS（ESI）计算得出。ForC52H50N7O6 [M] +: 868.3817. Found: 868.3798。
合成路线如下：
Figure 223019DEST_PATH_IMAGE002
。
实施例2
荧光探针与过氧化亚硝基阴离子的滴定实验
在PBS缓冲液（pH=7.4）中，加入初始浓度为1mM的荧光探针，使溶液中荧光探针的浓度为10μM。然后，依次加入不同量的初始浓度为1.00mM的过氧化亚硝基阴离子，使得溶液中过氧化亚硝基阴离子的浓度分别为0.5μM、1μM、2μM、3μM、4μM、5μM，不加入过氧化亚硝基阴离子作为对照，静置0.5h使过氧化亚硝基阴离子与荧光探针充分反应。
用荧光光谱仪测试不同浓度过氧化亚基阴离子条件下的荧光光谱，荧光光谱的激发波长为420 nm、580 nm，发射波长为490 nm、660 nm，检测波长为490 nm、660 nm，如图2所示，随着过氧化亚硝基阴离子浓度的增大，490nm处荧光强度逐渐增强，660 nm处荧光强度逐渐减弱。
以过氧化亚硝基阴离子的浓度为横坐标，荧光强度比值I490/I660为纵坐标绘制工作曲线，过氧化亚硝基阴离子与荧光强度比值I490/I660线性相关，相关系数为0.99742，如图3所示。因此，该荧光探针具有良好的线性比率关系，能够较好的消除生物检测中的所产生的背景影响。
实施例3
（1）荧光探针对细胞存活力的MTT检测
将HeLa细胞在37°C的培养箱中培养24小时，然后将它们培养到96孔板中，再与不同浓度的探针一起培养12小时。随后向板的每个孔中添加10 μL MTT，并进一步培育4小时，然后添加DMSO（100 μL）。使用Herm Fisher Scientific读板器测量每个孔板中细胞数量。细胞毒性结构如图4所示，因而，本专利中的荧光探针对细胞是低毒性的。
（2）荧光探针检测过氧化亚硝基阴离子的选择性测试
在同样测试条件下，向溶液中加入过量的其它生物活性小分子，测试加入不同生物活性小分子之后的荧光光谱，结果如图5所示。由图5可知，从1-14分别代表生物活性小分子Glu, Cys, S2O3 2-, S2-, SO3 2-, SO4 2-, HSO3 2-, NO2 -, H2O2, Vc-, Zn2+, Fe3+，Mg2+和ONOO-，490 nm处荧光强度只有过氧化亚硝基阴离子明显增强，其它生物活性小分子不对检测结果产生干扰，说明本发明制备的荧光探针对过氧化亚硝基阴离子具有较高的选择性。

Claims (7)

1.一种比率型荧光探针在检测过氧亚硝基阴离子中的应用，其特征在于，所述的荧光探针分子式为C52H50N7O6 +，结构式CS-NA如下所示：
Figure 799415DEST_PATH_IMAGE001
。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用的体系包括水体系、有机溶剂体系或生物体系。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的荧光探针通过以下方法制备得到：
（1）将化合物1和炔丙胺加入到乙醇中，加热反应，反应结束后将反应液倒入冰水中，DCM萃取，经柱层析提纯后得化合物2；
（2）将化合物2和N-（2-氨基乙基）吗啉溶解到乙二醇单甲醚中，加热反应，反应液用稀盐酸溶液洗涤，经柱层析提纯得化合物3；
（3）将化合物4和环己酮加入到硫酸中，加热反应，将反应液倒入到冰水中，加高氯酸，析出固体，固体用乙醇重结晶得化合物5；
（4）将化合物5和对叠氮苯甲醛加入到冰醋酸中，加热反应，反应液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经柱层析提纯得化合物6；
（5）将化合物3和化合物6加入到氯仿中，溴化亚铜作为催化剂，加入三乙胺，室温下反应，经柱层析后得荧光探针CS-NA；
合成路线如下：
Figure 47994DEST_PATH_IMAGE002
。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤（1）中化合物1和炔丙胺的摩尔比为1：1.5；步骤（2）中化合物2和N-（2-氨基乙基）吗啉的摩尔比为1：1.2；步骤（3）中化合物4和环己酮的摩尔比为1：3；步骤（4）中化合物5和对叠氮苯甲醛的摩尔比为1：1.5；步骤（5）中化合物3和化合物6、溴化亚铜、三乙胺的摩尔比为1：1.1：3：2。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤（1）中所述的加热反应条件为80℃下12小时；步骤（2）中所述的加热反应条件为110℃下12小时；步骤（3）中所述的加热反应条件为90℃下12小时；步骤（4）中所述的加热反应条件为90℃下12小时；步骤（5）中所述的反应时间为12小时。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤（1）所述的柱层析提纯方法为：旋转蒸馏除去溶剂，固体用二氯甲烷溶解，用体积比5:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离；步骤（2）中所述的柱层析提纯方法为：用二氯甲烷萃取除去水相，旋转蒸馏除去溶剂，少量二氯甲烷溶解固体，用体积比20：1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离；步骤（4）中所述的柱色层析提纯方法为：用二氯甲烷萃取除去水相，旋转蒸馏除去溶剂，少量二氯甲烷溶解固体，用体积比5：1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离；步骤（5）中所述的柱层析提纯方法为：旋转蒸馏除去溶剂，固体用二氯甲烷溶解，用体积比10:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂柱层析分离。
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤（3）中所述硫酸的质量份数为36%，所述高氯酸的质量分数为70%。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112457286A (zh) * 2020-12-02 2021-03-09 青岛科技大学 含有氧正离子的化合物在制备检测过氧化亚硝基离子的荧光分子探针中的应用
CN113072537A (zh) * 2021-03-25 2021-07-06 山东师范大学 一种荧光探针及其制备方法与应用
CN114621174A (zh) * 2022-03-15 2022-06-14 新乡学院 检测过氧亚硝基阴离子的荧光探针及其制备方法和应用
CN115403552A (zh) * 2022-07-20 2022-11-29 中国科学院理化技术研究所 一种单激发检测亚铜离子的近红外比率荧光探针，制备及应用

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114890977A (zh) * 2022-06-06 2022-08-12 广西大学 一种二氧化硫和黏度双识别荧光探针的设计方法
CN114956049B (zh) * 2022-06-17 2023-07-18 山西大学 一种长波长比率荧光碳点及其制备方法和应用
CN115232098B (zh) * 2022-07-18 2023-10-03 嘉兴学院 一种用于快速灵敏检测过氧硝酸盐的Rhodol荧光探针及其制备方法和应用
CN116143719B (zh) * 2023-03-01 2024-03-01 西北大学 一种用于检测过氧亚硝酸根的试卤灵类衍生物及其制备方法和应用
CN116693511A (zh) * 2023-04-21 2023-09-05 齐鲁工业大学(山东省科学院) 粘度响应荧光探针及其制备方法和应用
CN117126125B (zh) * 2023-06-21 2024-03-01 徐州医科大学 用于超高灵敏检测氮氧化物(no)的单分子荧光探针及其制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109971464A (zh) * 2019-04-26 2019-07-05 郑州大学 一种基于氧杂蒽和香豆素的区分过氧化亚硝基和次氯酸根荧光探针的制备方法
CN110128435A (zh) * 2019-06-03 2019-08-16 湘潭大学 一种过氧化亚硝基比率型荧光探针的制备和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109971464A (zh) * 2019-04-26 2019-07-05 郑州大学 一种基于氧杂蒽和香豆素的区分过氧化亚硝基和次氯酸根荧光探针的制备方法
CN110128435A (zh) * 2019-06-03 2019-08-16 湘潭大学 一种过氧化亚硝基比率型荧光探针的制备和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PEISHENG ZHANG，ET AL.: "A logic gate-based fluorescent sensor for detecting H2S and NO in aqueous media and inside live cells", 《CHEM. COMMUN.》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112457286A (zh) * 2020-12-02 2021-03-09 青岛科技大学 含有氧正离子的化合物在制备检测过氧化亚硝基离子的荧光分子探针中的应用
CN112457286B (zh) * 2020-12-02 2022-03-04 青岛科技大学 含有氧正离子的化合物在制备检测过氧化亚硝基离子的荧光分子探针中的应用
CN113072537A (zh) * 2021-03-25 2021-07-06 山东师范大学 一种荧光探针及其制备方法与应用
CN113072537B (zh) * 2021-03-25 2022-04-15 山东师范大学 一种荧光探针及其制备方法与应用
CN114621174A (zh) * 2022-03-15 2022-06-14 新乡学院 检测过氧亚硝基阴离子的荧光探针及其制备方法和应用
CN115403552A (zh) * 2022-07-20 2022-11-29 中国科学院理化技术研究所 一种单激发检测亚铜离子的近红外比率荧光探针，制备及应用
CN115403552B (zh) * 2022-07-20 2023-09-29 中国科学院理化技术研究所 一种单激发检测亚铜离子的近红外比率荧光探针，制备及应用

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