CN115166126A - 一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，属于中药检测技术领域。该方法能够分别对藿香清胃片中栀子、防风和甘草进行快速鉴别，能够有效的控制藿香清胃片的生产质量，建立的薄层法对其质量标准分析具有简单准确、斑点清晰和耐受性强的优点，且保证产品质量的稳定。

Description

一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法。

背景技术

藿香清胃片由广藿香、栀子、防风、石膏、南山楂、六神曲、甘草七味药材按照比例加工而成的中药复方制剂，清热化湿，醒脾消滞。用于脾胃伏火引起的消化不良，脘腹胀满，不思饮食，口苦，口臭等症。方中广藿香芳香化湿、醒脾悦胃，栀子、石膏清泻脾胃积热共为君药；防风疏脾散湿、调脾养胃，为臣药；南山楂、六神曲消食化滞为佐药；甘草和中泻火，调和诸药为使药；诸药合用，清热化湿、醒脾消滞之功效。可见，藿香清胃片各组分对治疗疾病起到了各自重要的作用。然而，根据现行质量标准为中药成方制剂第十一册WS3-B-2267-96及药典业发(2000)第366号，其控制内容为：性状、薄层鉴别广藿香、南山楂，缺乏其他药味的控制手段，且实验中发现广藿香、南山楂鉴别中阴性有干扰，专属性较差。可见，目前仍没有建立藿香清胃片的准确鉴别方法。

发明内容

本发明的目的在于避免现有技术中的不足之处而提供一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，该藿香清胃片鉴别方法建立了藿香清胃片中的栀子、防风和甘草的鉴别方法，该鉴别方法具有阴性无干扰、斑点清晰和耐受性强的优点。

为实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

提供一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，包括对栀子苷的鉴别，包括以下步骤：

供试品溶液的制备：取藿香清胃片样品适量，除去糖衣，研细，称取1.5g，加水饱和乙酸乙酯40mL，超声波处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；

阴性样品溶液的制备：按藿香清胃片处方和工艺制备制备不含栀子苷的藿香清胃片阴性样品，取该阴性样品1.5g，研细，加水饱和乙酸乙酯40mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为阴性样品溶液；

对照品溶液的制备：取栀子苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；

薄层层析：按《中华人民共和国药典》2020年版四部薄层色谱法，分别吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，阴性无干扰；

耐用性考察：试验过程中对不同薄层板厂家、不同温度及不同湿度条件下分别进行了考察，若各条件下的供试品薄层色谱图中栀子苷均能达到很好的分离效果，各阴性样品也均未出现干扰斑点，则该栀子苷的鉴别方法耐受性良好。

在一些实施方式中，还包括对防风的鉴别，包括以下步骤：

供试品溶液的制备：取藿香清胃片样品适量，除去糖衣，研细，称取1.5g，加丙酮30mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；

阴性样品溶液的制备：按藿香清胃片处方和工艺制备不含防风的阴性样品，取该阴性样品1.5g，研细，加丙酮30mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，制成阴性样品溶液；

对照样品溶液的制备：取防风对照药材1g，同法制成对照药材溶液；另取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；

薄层层析：按《中华人民共和国药典》2020年版四部薄层色谱法，分别吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液、对照药材溶液和对照样品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷-甲醇作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，置365nm的紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，阴性无干扰；

耐用性考察：试验过程中对不同薄层板厂家、不同温度及不同湿度条件下分别进行了考察，若各条件下的供试品色谱中均与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，则该防风的鉴别方法耐受性良好。

在一些实施方式中，还包括对甘草的鉴别，包括以下步骤：

供试品溶液的制备：取藿香清胃片10片，除去糖衣，研细，加甲醇30mL，加热回流提取30分钟，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，置已处理好的中性氧化铝柱上，用10mL甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。

阴性样品溶液的制备：按藿香清胃片处方和工艺制备不含甘草的阴性样品，取该阴性样品适量，研细，加甲醇30mL，加热回流提取30分钟，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，置已处理好的中性氧化铝柱上，用10mL甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，制成阴性样品溶液。

对照药材溶液的制备：取甘草对照药材1g，加甲醇30mL，加热回流提取30分钟，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，置已处理好的中性氧化铝柱上，用10mL甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，制成对照样品溶液。

薄层层析：按《中华人民共和国药典》2020年版四部薄层色谱法，分别吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各10μL，分别点于同一硅胶G板上，以乙酸丁酯-甲酸-水作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，阴性无干扰；

耐用性考察：试验过程中对不同薄层板厂家、不同温度及不同湿度条件下分别进行了考察，若各条件下的供试品薄层色谱中均与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，各阴性样品也均未出现干扰斑点，则该甘草的鉴别方法耐受性良好。

在一些实施方式中，栀子苷鉴别中，乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水中的乙酸乙酯、丙酮、甲酸和水的体积之比是6:5:1:0.5。

在一些实施方式中，防风鉴别中，三氯甲烷-甲醇中的三氯甲烷与甲醇的体积之比是4:1。

在一些实施方式中，防风鉴别中，5-O-甲基维斯阿米醇苷作为对照品起到定性作用。

在一些实施方式中，甘草鉴别中，乙酸丁酯-甲酸-水中的乙酸丁酯、甲酸和水的体积之比是8:2:1。

在一些实施方式中，所述中性氧化铝为100～200目，将5g的中性氧化铝制成内径为1.5cm的洗脱柱。

本发明一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法的有益效果：

(1)本发明的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其选择鉴定栀子苷，由于栀子苷溶于水、甲醇，微溶于乙酸乙酯，继而采用水饱和乙酸乙酯将栀子苷提取出来，水饱和乙酸乙酯减少了其他水溶性杂质的提取，减少干扰；根据栀子苷极性大的特性，选用乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水，能组成极性大的展开剂，从而能清晰地显示栀子苷的斑点。

(2)本发明的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其选择鉴定防风，由于防风有效成分主要是色原酮类，根据色原酮类的中等极性，选择中等极性的丙酮提取，能有效地将防风主要有效成分提取出来，并减少其他杂质的干扰，同时，根据防风中色原酮类中等极性的特性，选用三氯甲烷-甲醇，能组成中等极性的展开剂，能将防风有效成分高度分离，斑点清晰。

(3)本发明的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其选择鉴定甘草，甘草中主要含有三萜类、黄酮类等，三萜类、黄酮类溶于热水和极性较大的有机试剂，微溶于冷水。首先用甲醇以加热回流方式将三萜类、黄酮类提取出来，由于提取出来的成分较多，接着利用三萜类、黄酮类在水和正丁醇中的分配系数不同，除去部分杂质，此时正丁醇提取液中杂质较多，将正丁醇液蒸干，接着用甲醇溶解加在极性吸附剂中性氧化铝上进行柱层析，被分离的成分被吸附下来，然后增大洗脱剂的极性，用一定浓度的甲醇进行洗脱，将待测成分提纯；而甘草中三萜类、黄酮类均为极性较大的活性成分，乙酸丁酯-甲酸-水是极性较大的溶剂，能对甘草中三萜类、黄酮类成分有效分离，斑点清晰。

(4)本发明的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，在鉴别栀子苷和防风时，采用超声振动，该超声振动的超声波能够更快、更充分地将栀子苷和防风有效成分在其对应溶剂中提取出来，进入滤液中，降低干扰溶剂对目标成分的影响，提高了鉴别的精确度。

(5)本发明的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，建立了栀子、防风和甘草的鉴别，阴性无干扰，斑点清晰，耐受性强，针对不同的薄层板、不同温度、不同湿度，都能达到很好分离，且阴性无干扰，能更好地控制藿香清胃片的质量。

附图说明

图1是实施例1鉴别栀子苷的TLC色谱图，其中，图中标号1～3代表栀子苷待测溶液、标号4代表阴性样品溶液、标号5代表栀子苷对照品溶液。

图2是实施例1鉴别栀子苷的TLC色谱图(不同厂家薄层板)。

图3是实施例1鉴别栀子苷的TLC色谱图(不同温度和湿度条件)。

图4是实施例2鉴别防风的TLC色谱图，其中，图中标号1代表阴性样品溶液，2～4代表防风待测溶液、标号5代表防风对照药材溶液、标号6代表5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液。

图5是实施例2鉴别防风的TLC色谱图(不同厂家薄层板)。

图6是实施例2鉴别防风的TLC色谱图(不同温度和湿度条件)。

图7是实施例3鉴别甘草的TLC色谱图，其中，图中标号1～3代表甘草待测溶液、标号4代表阴性样品溶液、标号5代表甘草对照药材溶液。

图8是实施例3鉴别甘草的TLC色谱图(不同厂家薄层板)。

图9是实施例3鉴别甘草的TLC色谱图(不同温度和湿度条件)。

具体实施方式

下面将参照附图更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然附图中显示了本发明的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反，提供这些实施方式是为了使本发明更加透彻和完整，并且能够将本发明的范围完整地传达给本领域的技术人员。

在本发明使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本发明。在本发明和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“该”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。还应当理解，本文中使用的术语“和/或”是指并包含一个或多个相关联的列出项目的任何或所有可能组合。

应当理解，尽管在本发明可能采用术语“1号”、“2号”等来描述各种信息，但这些信息不应限于这些术语。这些术语仅用来将同一类型的信息彼此区分开。例如，在不脱离本发明范围的情况下，第一信息也可以被称为第二信息，类似地，第二信息也可以被称为第一信息。由此，限定有“1号”、“2号”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。

为便于说明本发明的检测方法，统一选用以下的藿香清胃片：

【处方】广藿香(600g)、栀子(600g)、石膏(600g)、防风(600g)、南山楂(600g)、六神曲(600g)、甘草(240g)七味药组成。

【制法】广藿香、防风提取挥发油，药渣与其余栀子等五味加水煎煮两次，每次1小时，合并煎液，静置，滤液浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，喷入挥发油，制粒，压制成1000片，包糖衣，即得。

【功能与主治】清热化湿，醒脾消滞。用于脾胃伏火引起的消化不良，脘腹胀满，不思饮食，口苦，口臭等症。

实施例1

本实施例公开的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，鉴别藿香清胃片中的栀子苷，包括以下步骤：取藿香清胃片1.5g，除去藿香清胃片糖衣，研细，加水饱和乙酸乙酯40mL，超声波处理30min(超声处理时间可根据实际需要进行调整，下同)，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣中加甲醇1mL使其溶解，作为栀子苷待测溶液(吉林俊宏药业有限公司，批号：20211001、20211002、20211003)；制备不含栀子的藿香清胃片阴性样品，取该阴性样品约1.5g，研细，加水饱和乙酸乙酯40mL，超声波处理30min，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣中加甲醇1mL使其溶解，作为阴性样品溶液；另取栀子苷作为对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110749-201909，含量：97.1％)，向该对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为栀子苷对照品溶液；将栀子苷待测溶液、阴性样品溶液和栀子苷对照品溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点清晰，观察栀子苷待测溶液、阴性样品溶液和栀子苷对照品溶液三者在硅胶G板上的位置，如栀子苷待测溶液的斑点与栀子苷对照品溶液的斑点在对应的位置上显色，且阴性样品溶液不显色阴性无干扰，则表明待测藿香清胃片含有栀子；同时在试验过程中分别对不同薄层板(厂家青岛海洋化工有限公司，批号：20210905；烟台市化学工业研究所，批号：20210925)和德国Merck公司，批号：HX03164126)、不同温度(10～35℃)及不同湿度(35％～75％)条件下分别进行了耐受性考察，各条件下的供试品薄层色谱中均与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，各阴性样品也均未出现干扰斑点，耐受性良好。

本实施例中，鉴别栀子苷中，乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水中的乙酸乙酯、丙酮、甲酸和水的体积之比是6:5:1:0.5。该配比的乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水能获得较好的展开效果。实际应用中，还可以采用其他配比，此处不再限制。

实施例2

本实施例公开的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，鉴别藿香清胃片中的防风，包括以下步骤：

取藿香清胃片1.5g，除去藿香清胃片糖衣，研细，加入丙酮30mL，超声处理30min，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣中加甲醇1mL使其溶解，作为防风待测溶液(吉林俊宏药业有限公司，批号：20211001、20211002、20211003)；制备不含防风的藿香清胃片阴性样品，取该阴性样品1.5g，加入丙酮30mL，超声处理30min，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣中加甲醇1mL使其溶解，作为阴性样品溶液；另取防风对照药材(中国食品药品检定研究院，批号：120947-201810)作为对药材，取该对照药材1.5g，加入丙酮30mL，超声波处理，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣中加甲醇1mL使其溶解，作为防风对照药材溶液；另取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111523-201811，含量：97.4％)作为对照品，向该对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液；将防风待测溶液、阴性样品溶液、防风对照药材溶液和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，置365nm的紫外灯下检视，观察防风待测溶液、阴性样品溶液、防风对照药材溶液和5-O-甲基维斯阿米醇苷照品溶液四者在硅胶G板上的位置，如防风待测溶液的斑点与防风对照药材溶液和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的斑点在对应的位置上显色，且阴性样品溶液不显色，阴性无干扰，则表明待测藿香清胃片含有防风；同时在试验过程中分别对不同薄层板(厂家青岛海洋化工有限公司，批号：20210905；烟台市化学工业研究所，批号：20210925)和德国Merck公司，批号：HX03164126)、不同温度(10～35℃)及不同湿度(35％～75％)条件下分别进行了耐受性考察，各条件下的供试品薄层色谱中均与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，各阴性样品也均未出现干扰斑点，耐受性良好。

实施例2中，防风鉴别中，三氯甲烷-甲醇中的三氯甲烷与甲醇的体积之比是4:1。该配比的三氯甲烷-甲醇能获得较好的展开效果。实际应用中，还可以采用其他配比，此处不再限制。

实施例2中，防风鉴别中，5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品是作为对照药材不能清晰反映薄层鉴别斑点时起到定性作用。

实施例3

本实施例公开的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，鉴别藿香清胃片中的甘草，包括以下步骤：

取藿香清胃片10片(0.31g/片)，除去藿香清胃片糖衣，研细，加入甲醇30mL，加热回流提取30min，放冷，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣加水20mL使滤液残渣溶解，用水饱和正丁醇振摇提取溶解的滤液残渣3次，获得滤液残渣的正丁醇提取液，合并各次滤液残渣的正丁醇提取液，用正丁醇饱和水溶液洗涤滤液残渣的正丁醇提取液，收集正丁醇液提取液，将正丁醇液蒸干，将该蒸干残渣加甲醇5mL使其溶解，加在中性氧化铝上，用甲醇10mL洗脱，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，将该蒸干残渣加甲醇1mL使其溶解，作为甘草待测溶液(吉林俊宏药业有限公司，批号：20211001、20211002、20211003)；制备不含甘草的藿香清胃片阴性样品，除去该藿香清胃片阴性样品糖衣，研细，加入甲醇30mL，加热回流提取30min，放冷，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣加水20mL使滤液残渣溶解，用水饱和正丁醇振摇提取溶解的滤液残渣3次，获得滤液残渣的正丁醇提取液，合并各次滤液残渣的正丁醇提取液，用正丁醇饱和水溶液洗涤滤液残渣的正丁醇提取液，收集正丁醇液提取液，将正丁醇液蒸干，将该蒸干残渣加甲醇5mL使其溶解，加在中性氧化铝上，用甲醇10mL洗脱，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，将该蒸干残渣加甲醇1mL使其溶解，作为阴性样品溶液；另取甘草对照药材(中国食品药品检定研究院，批号：批号：120904-202021)作为对照药材，研细，加入甲醇30mL，加热回流提取30min，放冷，滤过，获取滤液并将其蒸干，往蒸干的滤液残渣加水20mL使滤液残渣溶解，用水饱和正丁醇振摇提取溶解的滤液残渣3次，获得滤液残渣的正丁醇提取液，合并各次滤液残渣的正丁醇提取液，用正丁醇饱和水溶液洗涤滤液残渣的正丁醇提取液，收集正丁醇液提取液，将正丁醇液蒸干，将该蒸干残渣加甲醇5mL使其溶解，加在中性氧化铝上，用甲醇10mL洗脱，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，将该蒸干残渣加甲醇1mL使其溶解，作为甘草对照样品溶液；将甘草待测溶液、阴性样品溶液和甘草对照药材溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点清晰，观察甘草待测溶液、阴性样品溶液和甘草对照药材溶液三者在硅胶G板上的位置，如甘草待测溶液的斑点与甘草对照药材溶液的斑点在对应的位置上显色，且阴性样品溶液不显色，阴性无干扰，则表明待测藿香清胃片含有甘草；同时在试验过程中分别对不同薄层板(厂家青岛海洋化工有限公司，批号：20210905；烟台市化学工业研究所，批号：20210925)和德国Merck公司，批号：HX03164126)、不同温度(10～35℃)及不同湿度(35％～75％)条件下分别进行了耐受性考察，各条件下的供试品薄层色谱中均与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，各阴性样品也均未出现干扰斑点，耐受性良好。

实施例3中，甘草鉴别中，乙酸丁酯-甲酸-水中的乙酸丁酯、甲酸和水的体积之比是8:2:1。该配比的乙酸丁酯-甲酸-水能获得较好的展开效果。实际应用中，还可以采用其他配比，此处不再限制。

实施例3中，所述中性氧化铝为100～200目，将5g的中性氧化铝制成内径为1.5cm的洗脱柱。该目数的中性氧化铝能获得较好的分离效果。实际应用中，还能采用其他尺寸的中性氧化铝洗脱柱。

性能验证

1.图1是实施例1鉴别栀子苷的TLC色谱图，其中，图中标号1～3代表栀子苷待测溶液、标号4代表阴性样品溶液、标号5代表栀子苷对照品溶液。从图1可见，TLC色谱图中，栀子苷待测溶液的斑点与栀子苷对照品溶液在相应的位置上，显相同颜色的斑点，可见，本鉴定方法能鉴别出栀子苷，并且阴性样品溶液未见相同颜色的斑点，可见栀子苷阴性无干扰。

2.图2是实施例1鉴别栀子苷的TLC色谱图(不同厂家薄层板)，从图2可见，栀子苷在不同厂家薄层板的薄层色谱图中均能达到很好的分离效果，各阴性样品也均未出现干扰斑点，方法耐受性良好。

3.图3是实施例1鉴别栀子苷的TLC色谱图(不同温度、湿度条件)，从图3可见，栀子苷在不同温度及湿度条件下的薄层色谱图中均能达到很好的分离效果，各阴性样品也均未出现干扰斑点，方法耐受性良好。

4.图4是实施例2鉴别防风的TLC色谱图，其中，图中标号1代表阴性样品溶液，2～4代表防风待测溶液、标号5代表防风对照药材溶液、标号6代表5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液。从图4可见，TLC色谱图中，防风待测溶液的斑点与防风对照药材溶液和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品在相应的位置上，显相同颜色的斑点，可见，本鉴定方法能鉴别出防风，并且阴性样品溶液未见相同颜色的斑点，可见防风阴性无干扰。

5.图5是实施例2鉴别防风的TLC色谱图(不同厂家薄层板)，从图5可见，供试品色谱在不同厂家薄层板中均与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，方法耐受性良好。

图6是实施例2鉴别防风的TLC色谱图(不同温度和湿度条件)，从图6可见，供试品色谱在不同温度和湿度条件下均与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，方法耐受性良好。

图7是实施例3鉴别甘草的TLC色谱图，其中，图中标号1～3代表甘草待测溶液、标号4代表阴性样品溶液、标号5代表甘草对照药材溶液。从图7可见，TLC色谱图中，甘草待测溶液的斑点与甘草对照药材溶液在相应的位置上，显相同颜色的斑点，可见，本鉴定方法能鉴别出甘草，并且阴性样品溶液未见相同颜色的斑点，可见甘草阴性无干扰。

图8是实施例3鉴别甘草的TLC色谱图(不同厂家薄层板)，从图8可见，供试品色谱在不同厂家薄层板中均与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，各阴性样品也均未出现干扰斑点，方法耐受性良好。

图9是实施例3鉴别甘草的TLC色谱图(不同温度和湿度条件)，从图9可见，供试品色谱在不同温度和湿度条件下均与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，方法耐受性良好。

除非另外具体说明，否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对布置、数字表达式和数值不限制本申请的范围。同时，应当明白，为了便于描述，附图中所示出的各个部分的尺寸并不是按照实际的比例关系绘制的。对于相关领域普通技术人员已知的技术、方法和设备可能不作详细讨论，但在适当情况下，所述技术、方法和设备应当被视为授权说明书的一部分。在这里示出和讨论的所有示例中，任何具体值应被解释为仅仅是示例性的，而不是作为限制。因此，示例性实施例的其它示例可以具有不同的值。应注意到：相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项，因此，一旦某一项在一个附图中被定义，则在随后的附图中不需要对其进行进一步讨论。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其特征在于，包括对栀子苷的鉴别，包括以下步骤：

供试品溶液的制备：取藿香清胃片样品适量，除去糖衣，研细，称取1.5g，加水饱和乙酸乙酯40mL，超声波处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；

阴性样品溶液的制备：按藿香清胃片处方和工艺制备制备不含栀子苷的藿香清胃片阴性样品，取该阴性样品1.5g，研细，加水饱和乙酸乙酯40mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为阴性样品溶液；

对照品溶液的制备：取栀子苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；

薄层层析：按《中华人民共和国药典》2020年版四部薄层色谱法，分别吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，阴性无干扰；

耐用性考察：试验过程中对不同薄层板厂家、不同温度及不同湿度条件下分别进行了考察，若各条件下的供试品薄层色谱图中栀子苷均能达到很好的分离效果，各阴性样品也均未出现干扰斑点，则该栀子苷的鉴别方法耐受性良好。

2.按照权利要求1所述的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其特征在于，还包括对防风的鉴别，包括以下步骤：

供试品溶液的制备：取藿香清胃片样品适量，除去糖衣，研细，称取1.5g，加丙酮30mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；

阴性样品溶液的制备：按藿香清胃片处方和工艺制备不含防风的阴性样品，取该阴性样品1.5g，研细，加丙酮30mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，制成阴性样品溶液；

对照样品溶液的制备：取防风对照药材1g，同法制成对照药材溶液；另取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；

薄层层析：按《中华人民共和国药典》2020年版四部薄层色谱法，分别吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液、对照药材溶液和对照样品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷-甲醇作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，置365nm的紫外灯下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，阴性无干扰；

耐用性考察：试验过程中对不同薄层板厂家、不同温度及不同湿度条件下分别进行了考察，若各条件下的供试品色谱中均与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，则该防风的鉴别方法耐受性良好。

3.按照权利要求1所述的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其特征在于，还包括对甘草的鉴别，包括以下步骤：

供试品溶液的制备：取藿香清胃片10片，除去糖衣，研细，加甲醇30mL，加热回流提取30分钟，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，置已处理好的中性氧化铝柱上，用10mL甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。

阴性样品溶液的制备：按藿香清胃片处方和工艺制备不含甘草的阴性样品，取该阴性样品适量，研细，加甲醇30mL，加热回流提取30分钟，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，置已处理好的中性氧化铝柱上，用10mL甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，制成阴性样品溶液。

对照药材溶液的制备：取甘草对照药材1g，加甲醇30mL，加热回流提取30分钟，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5mL使溶解，置已处理好的中性氧化铝柱上，用10mL甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用40％甲醇50mL洗脱，收集40％甲醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，制成对照样品溶液。

薄层层析：按《中华人民共和国药典》2020年版四部薄层色谱法，分别吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液和对照药材溶液各10μL，分别点于同一硅胶G板上，以乙酸丁酯-甲酸-水作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品未显相同颜色的斑点，阴性无干扰；

耐用性考察：试验过程中对不同薄层板厂家、不同温度及不同湿度条件下分别进行了考察，若各条件下的供试品薄层色谱中均与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，各阴性样品也均未出现干扰斑点，则该甘草的鉴别方法耐受性良好。

4.根据权利要求1所述的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其特征是：栀子苷鉴别中，乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水中的乙酸乙酯、丙酮、甲酸和水的体积之比是6:5:1:0.5。

5.根据权利要求1所述的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其特征是：防风鉴别中，三氯甲烷-甲醇中的三氯甲烷与甲醇的体积之比是4:1。

6.根据权利要求2所述的一种藿香清胃片的快速薄层鉴别方法，其特征是：防风鉴别中，5-O-甲基维斯阿米醇苷作为对照品起到定性作用。

7.根据权利要求3所述的藿香清胃片鉴别方法，其特征是：甘草鉴别中，乙酸丁酯-甲酸-水中的乙酸丁酯、甲酸和水的体积之比是8:2:1。

8.根据权利要求3所述的藿香清胃片鉴别方法，其特征是：所述中性氧化铝为100～200目，将5g的中性氧化铝制成内径为1.5cm的洗脱柱。

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