CN115006471B - 一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂及其制备方法和应用,该促进剂是以茶油中长链甘油三酯为活性成分,添加乳化剂、环状糊精、水制成的可促进肠道益生菌增殖的液体或固体制剂。其制备方法包括如下步骤:茶油中加入固定化脂肪酶反应后,加入C8~C12脂肪酸,反应得到混合反应液,经碳酸钠水溶液洗涤后真空干燥,再与乳化剂、环状糊精、水混合制得。该产品在口服后可促进肠道乳酸杆菌和双歧杆菌的显著增殖,从而可预防因肠道有害菌导致的疾病。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,具体涉及一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂及其制备方法和应用。
背景技术
肠道菌群是宿主肠道中的正常微生物,种类繁多。一般而言,健康的成年人,其肠道中的微生物约有1014个,约为人体细胞个数的10倍,能在体内形成复杂而又独特系统,调节宿主的正常生理功能,而菌群的组成和代谢等也会受到宿主周围环境的影响。其中,肠道益生菌有乳酸杆菌和双歧杆菌等,是人体健康不可缺少的要素,可以合成各种维生素,参与食物的消化,促进肠道蠕动,抑制致病菌群的生长,分解有害、有毒物质等。通过调节肠道菌群,增加益生菌,可抑制多种致病菌所致的肠道疾病,并能调节人体代谢和免疫功能。
茶油具有调节肠道菌群的作用,CN111329928A公开了一种含山茶油的组合物,具有降低血糖水平,降低胰岛素的抵抗能力,以及调节肠道菌群作用。然而茶油80%以上为油酸甘油酯,属于长链脂肪酸,其吸收和体内代谢慢,供能不足且营养单一,因而虽能调节肠道菌群,但只起辅助作用。故而许多调节肠道菌群的组方,如CN111888397A、CN112831366A、CN110447725A等,只是将茶油与益生菌混合来起到调节肠道菌群的作用,茶油只能起到辅助作用。中长链甘油三酯(MLCTs)是由中碳链脂肪酸和长碳链脂肪酸结合于同一甘油分子上而形成,是一种极好的生物能源,同时也是一种很好的控制血糖和增加体内酮的产生,从而促进新陈代谢的物质。由于具有被身体迅速吸收的能力,MLCTs可以用来控制肥胖和用于治疗各种吸收不良疾病。
MLCTs在天然油脂含量极小,如能将茶油变为MLCTs,可以供应多种脂肪酸,从而直接调节肠道菌群,促进益生菌的增殖。此类研究未有报道。
发明内容
为了克服现有技术的缺点与不足,本发明的首要目的在于提供一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂。
本发明的另一目的在于提供所述茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂的制备方法。
本发明的再一目的在于提供所述茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂在制备肠道菌群调节药物中的应用。
一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)在茶油中加入其质量分数1~10%的固定化脂肪酶,30~65℃反应1~3h后,加入茶油摩尔质量1~3倍的C8~C12脂肪酸,继续反应3~8h,得到混合反应液;
(2)将步骤(1)所得混合反应液过滤,滤液加入其体积20~50%的质量分数5~20%碳酸钠水溶液洗涤,静置分层,保留上层,60~80℃、0.01~0.1MPa干燥3~5h,得到茶油中长链甘油三酯;
(3)将步骤(2)所得茶油中长链甘油三酯与乳化剂、环状糊精、水按质量分数10~82%、3~10%、10~80%、5~50%混合,制成液体或固体制剂,即获得所述的茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂。
优选的,步骤(1)中所述的固定化脂肪酶为Lipozyme 435,Lipozyme RMIM和Lipozyme TLIM中的一种或多种组合。优选的,步骤(1)中所述的C8~C12脂肪酸为辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸中的一种或多种组合。
优选的,步骤(3)中所述的乳化剂为单甘酯、吐温80、司盘60中的一种或多种组合。
一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂,通过上述制备方法制备得到。
所述的肠道益生菌促进剂是以茶油中长链甘油三酯为活性成分,添加乳化剂、环状糊精、水制成的可促进肠道益生菌增殖的液体或固体制剂;所述茶油中长链甘油三酯是茶油与C8~C12脂肪酸在脂肪酶作用下,生成的同一分子上不同脂肪酸链的甘油三酯,茶油与C8~C12脂肪酸摩尔比1:(1~3)。
上述茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂在制备肠道菌群调节药物中的应用。
优先的,所述的肠道菌群调节包括促进乳酸杆菌和/或双歧杆菌的增殖。所述的肠道益生菌促进剂可以在口服后促进肠道乳酸杆菌和双歧杆菌的显著增殖,从而可预防因肠道有害菌导致的疾病。
本发明的原理:茶油在脂肪酶的作用下水解为脂肪酸和甘油,再与C8~C12脂肪酸在脂肪酶作用下重新结合,生成同一分子具有不同脂肪酸的甘油三酯。该产物在肠道内水解并被吸收,中链脂肪酸可快速分解提供机体和肠道有益菌多种营养和能量,而长链脂肪酸缓慢分解,维持代谢平衡,从而可促进肠道有益菌增殖,并保持人体健康。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
(1)本发明制备了一种茶油中长链甘油三酯,提升了茶油的多重功效。
(2)本发明克服了茶油只能提供长链脂肪酸,不能快速提供多种脂肪酸营养和能量的缺点,可实现肠道有效菌的增殖。
(3)本发明提供的方法反应条件温和,易于工业化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
(1)在1kg茶油中加入10g的固定化Lipozyme 435脂肪酶,30℃反应3h后,加入茶油(分子量按三油酸甘油酯分子量885计)摩尔质量1倍的辛酸,继续反应8h,得到混合反应液;
(2)将上述混合反应液过滤,得滤液1L,加入200mL的质量分数20%碳酸钠水溶液洗涤,静置分层,保留上层,60℃、0.1MPa干燥3h,得茶油中长链甘油三酯0.85kg;
(3)将茶油中长链甘油三酯与吐温80、环状糊精、水按质量82g、3g、10g、5g混合,制成口服液,即为茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂。
实施例2
(1)在1kg茶油中加入100g的固定化Lipozyme RMIM脂肪酶,65℃反应1h后,加入茶油(分子量按三油酸甘油酯分子量885计)摩尔质量3倍的癸酸,继续反应3h,得到混合反应液;
(2)将上述混合反应液过滤,得滤液1.4L,加入其体积700mL的质量分数5%碳酸钠水溶液洗涤,静置分层,保留上层,80℃、0.1MPa干燥5h,得茶油中长链甘油三酯0.72kg;
(3)将茶油中长链甘油三酯与单甘酯、环状糊精、水按质量分数10g、5g、80g、5g混合,制成固体制剂,即为茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂。
实施例3
(1)在1kg茶油中加入50g的固定化Lipozyme TLIM脂肪酶,45℃反应2h后,加入茶油(分子量按三油酸甘油酯分子量885计)摩尔质量2倍的月桂酸,继续反应5h,得到混合反应液;
(2)将上述混合反应液过滤,得滤液1.3L,加入400mL的质量分数10%碳酸钠水溶液洗涤,静置分层,保留上层,70℃、0.05MPa干燥4h,得茶油中长链甘油三酯0.8kg;
(3)将茶油中长链甘油三酯与吐温80、环状糊精、水按质量分数30g、10g、10g、50g混合,制成液体制剂,即为茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂。
实施例4
(1)在1kg茶油中加入10g的固定化Lipozyme 435和10g固定化Lipozyme RMIM脂肪酶,45℃反应3h后,加入茶油(分子量按三油酸甘油酯分子量885计)摩尔质量1.5倍的肉豆蔻酸,继续反应6h,得到混合反应液;
(2)将上述混合反应液过滤,得滤液1.2L,加入500mL的质量分数15%碳酸钠水溶液洗涤,静置分层,保留上层,75℃、0.01MPa干燥3.5h,得茶油中长链甘油三酯0.86kg;
(3)将茶油中长链甘油三酯与司盘60、环状糊精、水按质量分数45g、5g、20g、30g混合,制成液体制剂,即为茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂。
实施例5
(1)在1kg茶油中加入20g的固定化Lipozyme RMIM和30g固定化Lipozyme TLIM脂肪酶,45℃反应2.5h后,加入茶油(分子量按三油酸甘油酯分子量885计)摩尔质量2.5倍的棕榈酸,继续反应5h,得到混合反应液;
(2)将上述混合反应液过滤,得滤液1.5L,加入600mL的质量分数8%碳酸钠水溶液洗涤,静置分层,保留上层,65℃,0.01MPa干燥4.5h,得茶油中长链甘油三酯0.93kg;
(3)将茶油中长链甘油三酯与单甘酯、环状糊精、水按质量分数20g、3g、67g、10g混合,制成固体制剂,即为茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂。
对比例1
按实施例1制备方法,但在步骤(1)中将茶油替换为大豆油,所制得的产品为对照1。
对比例2
按实施例1制备方法,但在步骤(1)中将茶油替换为花生油,所制得的产品为对照2。
对比例3
按实施例1制备方法,但在步骤(3)中将茶油中长链甘油三酯份量改为1g,即在配方中占比为5.3%,所制得的产品为对照3。
测试1:
实施例1-5制得的茶油中长链甘油三酯的组成分析
方法:将实施例1-5制得的茶油中长链甘油三酯,取适量按照食品安全国家标准-食品中脂肪酸的测定(GB5009.168-2016)第一法测定样品中的脂肪酸含量,并换算成摩尔比。
结果:实施例1-5制得的样品中,每摩尔茶油中长链甘油三酯中油酸摩尔数分别2、0.7、1、1.7、0.8,而辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸的摩尔数分别为1、2.2、2、1.2、2,说明实施例1-5制得的茶油中长链甘油三酯主要分别为单辛酸二油酸甘油酯、二癸酸单油酸甘油酯、二月桂酸单油酸甘油酯、单肉豆蔻酸二油酸甘油酯、二棕榈酸单油酸甘油酯。
测试2:
实施例1制得的茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂的作用效果
方法:取250±25g雄性SD大鼠40只,随机分为8组,每组5只。第1组给予正常大鼠饲料,第2组给予高脂饲料(87.6%标准饲料、2%胆固醇、0.2%胆酸钠、10%猪油),第3组在给予高脂饲料中猪油由茶油代替,第4组在给予高脂饲料中猪油由实施例1制得的茶油中长链甘油三酯替代的饲料,第5组在给予高脂饲料,再灌胃实施例1制得的茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂,第6-8组分别灌胃对照1-3,按1g/100g体重剂量,一日两次。分别于15天和30天,取大鼠粪便,对其进行肠道菌群及益生菌(如双歧杆菌和乳酸杆菌)的16sRNA宏基因组测序,并对各种益生菌的丰度分析(相对百分比)。
结果:结果见表1,显示第2组模型大鼠益生菌较正常组显著下降,第3组和第6-8组虽然较第2组有改善,但与正常组无差异;而第4组和第5组大鼠益生菌较模型组显著提高,而且高于正常组和其他组,说明茶油中长链甘油三酯较茶油、其他植物油制得的产品和组方配比不适宜产品具有更强促进益生菌增殖的作用;茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂较茶油中长链甘油三酯具有更好的效果,说明该配方可发挥更强的作用。
表1大鼠粪便中益生菌的相对丰度(%)
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受所述的实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)在茶油中加入其质量分数1~10%的固定化脂肪酶,30~65℃反应1~3h后,加入茶油摩尔质量1~3倍的C8~C12脂肪酸,继续反应3~8h,得到混合反应液;
(2)将步骤(1)所得混合反应液过滤,滤液加入其体积20~50%的质量分数5~20%碳酸钠水溶液洗涤,静置分层,保留上层,60~80℃、0.01~0.1MPa干燥3~5h,得到茶油中长链甘油三酯;
(3)将步骤(2)所得茶油中长链甘油三酯与乳化剂、环状糊精、水按质量分数10~82%、3~10%、10~80%、5~50%混合,制成液体或固体制剂,即获得所述的茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂;
步骤(1)中所述的脂肪酶为Lipozyme 435,Lipozyme RMIM和Lipozyme TLIM中的一种或多种组合;
步骤(1)中所述的C8~C12脂肪酸为辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸中的一种或多种组合。
2.根据权利要求1所述的茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂的制备方法,其特征在于:
步骤(3)中所述的乳化剂为单甘酯、吐温80、司盘60中的一种或多种组合。
3.一种茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂,其特征在于:通过权利要求1~2任一项所述的制备方法制备得到。
4.权利要求3所述的茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂在制备肠道菌群调节药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的茶油中长链甘油三酯肠道益生菌促进剂在制备肠道菌群调节药物中的应用,其特征在于:
所述的肠道菌群调节为促进乳酸杆菌和/或双歧杆菌的增殖。
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