CN114924022B - 大黄产品的薄层鉴别方法及其用途 - Google Patents
大黄产品的薄层鉴别方法及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114924022B CN114924022B CN202210527131.XA CN202210527131A CN114924022B CN 114924022 B CN114924022 B CN 114924022B CN 202210527131 A CN202210527131 A CN 202210527131A CN 114924022 B CN114924022 B CN 114924022B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rheum
- rhubarb
- thin layer
- rheum officinale
- product
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 240000004980 Rheum officinale Species 0.000 title claims abstract description 101
- 235000008081 Rheum officinale Nutrition 0.000 title claims abstract description 92
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 63
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 11
- ZOODSQWDUGSWPX-UHFFFAOYSA-N O.CO.C(=O)OCC Chemical compound O.CO.C(=O)OCC ZOODSQWDUGSWPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 235000008090 Rheum palmatum Nutrition 0.000 claims description 118
- 240000001745 Rheum palmatum Species 0.000 claims description 118
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 90
- 241000219061 Rheum Species 0.000 claims description 76
- 235000009411 Rheum rhabarbarum Nutrition 0.000 claims description 75
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 69
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 55
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 36
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 25
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 24
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 21
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 21
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 20
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 11
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical group O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 10
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 9
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 9
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 229940069514 rhubarb preparation Drugs 0.000 claims description 3
- 239000012925 reference material Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 abstract description 7
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 48
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 34
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 32
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 3
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 3
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 3
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 240000006661 Serenoa repens Species 0.000 description 2
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 2
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N formic acid ethyl ester Natural products CCOC=O WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明涉及薄层鉴别技术领域，具体涉及一种大黄产品的薄层鉴别方法及其用途。本发明提供的大黄产品的薄层鉴别方法，以体积比为20:3:2的甲酸乙酯‑甲醇‑水为展开剂，展开并检视后，所得薄层色谱中的斑点信息丰富，能够全面反应大黄产品的化学成分特点，有利于大黄产品质量的全面监控。
Description
技术领域
本发明涉及薄层鉴别技术领域，具体涉及一种大黄产品的薄层鉴别方法及其用途。
背景技术
药典规定人用药品大黄应来自掌叶大黄(Rheum palmatum L.)、药用大黄(Rheumoffcinale Baill.)、唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.)的干燥根和根茎。秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖，除去细根，刮去外皮，切瓣或段，绳穿成串干燥或直接干燥。
根据炮制方法的不同，大黄又可分为大黄(大黄除去杂质，洗净，润透，切厚片或块，晾干)、酒大黄(取净大黄片，照酒炙法炒干)、熟大黄(取净大黄块，照酒炖或酒蒸法炖或蒸至内外均呈黑色)和大黄炭(取净大黄片，照炒炭法炒至表面焦黑色、内部焦褐色)。
大黄产品化学成分复杂，且不同品种或者不同炮制方法的大黄产品的化学成分又有区别，导致不同品种或者不同炮制方法的大黄产品的功能主治存在区别，因此，需要一种具有很好的区分和鉴定能力且操作更加简便、快捷的鉴别方法，以便能够更好地对大黄产品进行质量控制。
薄层鉴别方法具有操作简便、快捷的优势，是一种较好的鉴别方法。然而，现有的大黄产品的薄层鉴别方法检视得到的斑点信息较少，无法全面地反应大黄产品的化学成分特点，无法全面监控大黄产品的质量。
发明内容
因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中大黄产品薄层鉴别方法因所得斑点信息较少而无法全面监控大黄产品质量的缺陷，从而提供一种大黄产品的薄层鉴别方法及其用途。
为此，本发明提供一种大黄产品的薄层鉴别方法，包括：
取供试品溶液，点于薄层板上，以体积比为20:3:2的甲酸乙酯-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和/或紫外光灯下检视。
可选的，所述大黄产品包括大黄药材、大黄饮片和大黄制剂中的至少一种；优选的，所述大黄制剂为大黄配方颗粒。
可选的，所述大黄产品包括大黄(掌叶大黄)产品、大黄(唐古特大黄)产品和大黄(药用大黄)产品中的至少一种。
可选的，供试品为大黄制剂，所述供试品溶液的制备过程包括：
取大黄制剂粉末，加提取溶剂，超声提取，固液分离，取液体；其中，所述提取溶剂选自甲醇或甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量不低于80％；
可选的，相对于1g所述大黄制剂粉末，所述提取溶剂的加入量为5～15ml；
可选的，所述超声提取的超声功率为200～400W，时间为10～20min。
可选的，供试品为大黄药材和/或饮片，所述供试品溶液的制备过程包括：
取大黄药材和/或饮片，加水，回流提取，固液分离，所得液体浓缩至干，得浓缩残渣；
在所述浓缩残渣中加入提取溶剂，超声提取，固液分离，取液体；其中，所述提取溶剂选自甲醇或甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量不低于80％；
可选的，相对于1g所述大黄药材和/或饮片，水的加入量为50～150ml；
可选的，所述回流提取的温度为80～100℃，时间为30～90min；
可选的，在向所述大黄药材和/或饮片的浓缩残渣中加入提取溶剂时，相对于1g所述大黄药材和/或饮片，所述提取溶剂的加入量为5～15ml；
可选的，所述超声提取的超声功率为200～400W，时间为10～20min。
可选的，所述薄层板为硅胶GF254薄层板；所述紫外灯检视的波长为365nm。
可选的，所述方法还包括采用大黄对照药材制备对照药材溶液的操作，以及按照上述任一项所述的薄层鉴别方法对所述对照药材溶液进行鉴别的操作；
可选的，所述大黄对照药材选自大黄(掌叶大黄)对照药材、大黄(唐古特大黄)对照药材和大黄(药用大黄)对照药材中的任一种；
可选的，所述对照药材溶液的制备过程包括：
取所述大黄对照药材，加水，回流提取，固液分离，所得液体浓缩至干，得浓缩残渣；在所述浓缩残渣中加入提取溶剂，超声提取，固液分离，取液体；其中，所述提取溶剂选自甲醇或甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量不低于80％。
可选的，相对于1g所述大黄对照药材，水的加入量为50～150ml；所述回流提取的温度为80～100℃，时间为30～90min；在向所述大黄对照药材的浓缩残渣中加入提取溶剂时，相对于1g所述大黄对照药材，所述提取溶剂的加入量为5～15ml；所述超声提取的超声功率为200～400W，时间为10～20min。
可选的，所述供试品溶液的点样量为1～3μl；所述对照药材溶液的点样量为2～4μl。
本发明还提供了上述任一项所述的薄层鉴别方法在鉴别熟大黄(掌叶大黄)产品中的用途，置日光和/或紫外光灯下检视时，在所得色谱的Rf值0.4～0.6处未显现斑点的情况下，确定供试品为熟大黄(掌叶大黄)产品。
本发明还提供了上述任一项所述的薄层鉴别方法在鉴别大黄(唐古特大黄)产品中的用途，置紫外光灯下检视时，在所得色谱图的Rf值0.36～0.40和0.40～0.44处显现两个亮蓝色斑点的情况下，确定供试品为大黄(唐古特大黄)产品。
可选的，在所得色谱图的Rf值0.36～0.40和0.40～0.44处显现两个亮蓝色斑点，且Rf值0.58～0.62、0.68～0.72和0.76～0.80处未显现明显斑点的情况下，确定供试品为大黄(唐古特大黄)产品。
本发明技术方案，具有如下优点：
1.本发明提供的大黄产品的薄层鉴别方法，以体积比为20:3:2的甲酸乙酯-甲醇-水为展开剂，展开并检视后，所得薄层色谱中的斑点信息丰富，能够全面反应大黄产品的化学成分特点，有利于大黄产品质量的全面监控。
2.本发明提供的大黄产品的薄层鉴别方法，对温度、湿度等环境因素的耐用性好，检视后显示出的各斑点清晰且分离度良好，针对不同厂家薄层板、不同操作人员的重现性好。
3.本发明提供的大黄产品的薄层鉴别方法，供试品溶液的制备过程简单、快速，且能够全面、足量地提取出大黄产品中的化学成分，为检视所得薄层色谱中的丰富的斑点信息提供了奠定了基础，确保了大黄产品的质量可控性，从而保证大黄产品的临床用药疗效；
同时，供试品溶液的制备过程中以甲醇或高浓度甲醇水为提取溶剂，能够直接提取到大黄产品中的化学成分，相较于现有技术中主要对相关化学成分水解产物(游离蒽醌类成分)进行鉴别的方法，本发明的方法能够直观反映大黄产品的整体质量。
4.本发明提供的大黄产品的薄层鉴别方法，能够基于薄层色谱特定位置处的斑点信息，有效指认熟大黄(掌叶大黄)和大黄(唐古特大黄)，且指认专属性强。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例1中3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒的检视结果；
图2是本发明实施例2中3批大黄(掌叶大黄)配方颗粒的检视结果；
图3是本发明实施例3中3批酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒的检视结果；
图4是本发明实施例4中3批大黄(唐古特大黄)配方颗粒的检视结果；
图5是本发明实施例5中3批大黄(药用大黄)配方颗粒的检视结果；
图6是本发明实施例6中不同点样量考察结果；
图7是本发明实施例6中常温(25℃)下的检视结果；
图8是本发明实施例6中低温(4℃)下的检视结果；
图9是本发明实施例6中高湿(湿度：88％)下的检视结果；
图10是本发明实施例6中低湿(湿度：32％)下的检视结果；
图11是本发明实施例6中利用默克生产的薄层板的检视结果；
图12是本发明实施例6中利用烟台生产的薄层板的检视结果；
图13是本发明实施例6中利用青岛生产的薄层板的检视结果；
图14是本发明实施例6中实验人员甲的检视结果；
图15是本发明实施例6中实验人员乙的检视结果；
图16是本发明实施例7中对熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒的鉴别效果图；
图17是本发明实施例8中对大黄(唐古特大黄)配方颗粒的鉴别效果图。
具体实施方式
提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
本发明实施例中涉及的仪器与试药如下所示：
仪器：
薄层自动成像仪(TLC visualizer2)、超声仪SB-5200DTD(宁波新芝生物科技股份有限公司)、天平(AG135)METTLER TOLEDO(瑞士梅特勒)、水浴锅EYELA WATER BATH-SB-2000(日本分光限)、展开缸、硅胶GF254薄层板(青岛海洋，烟台华阳，Merck)、电热恒温鼓风干燥箱DHG-9247A。
试剂：
甲酸乙酯(批号：20201201；来源：天津市大茂化学试剂厂)；甲酸(批号：20211201；来源：广州化学试剂厂)；水为自制纯化水。
材料：
熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒(批号：2004001Y、2004002Y、2004003Y，来源：华润三九医药股份有限公司)；
大黄(掌叶大黄)配方颗粒(批号：1902001Y、1902002Y、1902003Y，来源：华润三九医药股份有限公司)；
酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒(批号：1909001Y、1909002Y、1909003Y，来源：华润三九医药股份有限公司)；
大黄(唐古特大黄)配方颗粒(批号：2108001Y、2108002Y、2108003Y，来源：华润三九医药股份有限公司)；
大黄(药用大黄)配方颗粒(批号：2009001W、2009002W、2009003W，来源：华润三九医药股份有限公司)；
大黄(掌叶大黄)对照药材(批号：121249-201304，来源：中国食品药品检定研究院)；
大黄(唐古特大黄)对照药材(批号：120902-201912，来源：中国食品药品检定研究院)；
大黄(药用大黄)对照药材(批号：120984-201202，来源：中国食品药品检定研究院)；
阴性颗粒通过如下方法制备：取麦芽糊精，干法制粒，制粒参数即辊轮转速：4～7rpm；挤压压力：5～9Mpa；送料转速：20～30rpm。
实施例1
一种熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒的薄层鉴别方法，包括如下操作：
(1)供试品溶液的制备
取本品适量，研细，取0.5g，加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液。
(2)对照药材溶液的制备
对照药材溶液的制备：取大黄(掌叶大黄)对照药材0.5g，加水50ml，100℃下加热回流1.0小时，滤过，滤液减压浓缩至干，残渣加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，作为对照药材溶液。
(3)薄层鉴别
照薄层色谱法(中国药典2020年版通则0502)试验，吸取供试品溶液2μl和对照药材溶液3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲酸乙酯-甲醇-水(20:3:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
本实施例中，对上述3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒进行检视，检视结果如图1A和图1B所示，其中，图1A为日光下检视的色谱，图1B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图1A和图1B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
实施例2
利用上述3批大黄(掌叶大黄)配方颗粒，按照实施例1操作(1)的方法制备供试品溶液，按照实施例1操作(2)的方法制备对照药材溶液，按照实施例1操作(3)的方法进行薄层鉴别。
本实施例中，对上述3批大黄(掌叶大黄)配方颗粒的检视结果如图2A和图2B所示，其中，图2A为日光下检视的色谱，图2B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图2A和图2B中，1-3依次对应大黄(掌叶大黄)配方颗粒1902001Y、1902002Y、1902003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
实施例3
利用上述3批酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒，按照实施例1操作(1)的方法制备供试品溶液，按照实施例1操作(2)的方法制备对照药材溶液，按照实施例1操作(3)的方法进行薄层鉴别。
本实施例中，对上述3批酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒的检视结果如图3A和图3B所示，其中，图3A为日光下检视的色谱，图3B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图3A和图3B中，1-3依次对应酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒1909001Y、1909002Y、1909003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
实施例4
利用上述3批大黄(唐古特大黄)配方颗粒，按照实施例1操作(1)的方法制备供试品溶液，利用上述大黄(唐古特大黄)对照药材，按照实施例1操作(2)的方法制备对照药材溶液，按照实施例1操作(3)的方法进行薄层鉴别。
本实施例中，对上述3批大黄(唐古特大黄)配方颗粒的检视结果如图4A和图4B所示，其中，图4A为日光下检视的色谱，图4B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图4A和图4B中，1-3依次对应大黄(唐古特大黄)配方颗粒2108001Y、2108002Y、2108003Y，4对应大黄(唐古特大黄)对照药材。
实施例5
利用上述3批大黄(药用大黄)配方颗粒，按照实施例1操作(1)的方法制备供试品溶液，利用上述大黄(药用大黄)对照药材，按照实施例1操作(2)的方法制备对照药材溶液，按照实施例1操作(3)的方法进行薄层鉴别。
本实施例中，对上述3批大黄(药用大黄)配方颗粒的检视结果如图5A和图5B所示，其中，图5A为日光下检视的色谱，图5B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图5A和图5B中，1-3依次对应大黄(药用大黄)配方颗粒2009001W、2009002W、2009003W，4对应大黄(药用大黄)对照药材。
实施例6
本实施例以上述3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒为供试品，对本发明的大黄产品的薄层鉴别方法进行方法学考察：
供试品溶液的制备：取本品适量，研细，取0.5g，加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液。
对照药材溶液的制备：对照药材溶液的制备：取大黄(掌叶大黄)对照药材0.5g，加水50ml，100℃下加热回流1.0小时，滤过，滤液减压浓缩至干，残渣加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，作为对照药材溶液。
阴性对照溶液的制备：取阴性颗粒适量，研细，取0.5g，加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液，作为阴性对照溶液。
1、供试品溶液、对照药材溶液不同点样量和专属性考察
分别吸取供试品溶液(批号：2004001Y)和对照药材溶液各1μl、2μl、3μl，以及阴性对照溶液3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲酸乙酯-甲醇-水(20:3:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和紫外光灯(365nm)下检视，检视结果如图6A和图6B所示。其中，图6A为日光下检视的色谱，图6B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图6A和图6B中，1-3依次对应供试品溶液1μl、2μl、3μl的点样量，4-6依次对应对照药材溶液1μl、2μl、3μl的点样量，7对应阴性对照溶液。
由图6A和图6B可知，在熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品色谱中，在与大黄(掌叶大黄)对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且阴性无干扰。根据斑点的分离度及清晰度，确定熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品溶液的最佳点样量为2μl、大黄(掌叶大黄)对照药材溶液的最佳点样量为3μl。
2、耐用性考察
(1)不同温度考察
分别吸取3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品溶液2μl和对照药材溶液3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲酸乙酯-甲醇-水(20:3:2)为展开剂，分别在常温(25℃)和低温(4℃)条件下展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和紫外光灯(365nm)下检视。
常温(25℃)下的检视结果如图7A和图7B所示，其中，图7A为日光下检视的色谱，图7B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图7A和图7B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
低温(4℃)下的检视结果如图8A和图8B所示，其中，图8A为日光下检视的色谱，图8B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图8A和图8B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
由图7A、7B、8A和8B可知，在常温和低温条件下，熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒色谱在与大黄(掌叶大黄)对照药材色谱相应的位置显相同颜色的斑点，色谱斑点分离效果较好，实验结果表明，温度对本发明的薄层鉴别方法无显著性的影响，表明该方法在不同温度条件下的重现性较好。
(2)不同湿度考察
分别吸取3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品溶液2μl和对照药材溶液3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲酸乙酯-甲醇-水(20:3:2)为展开剂，分别在高湿(湿度：88％)和低湿(湿度：32％)条件下展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和紫外光灯(365nm)下检视。
高湿(湿度：88％)下的检视结果如图9A和图9B所示，其中，图9A为日光下检视的色谱，图9B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图9A和图9B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
低湿(湿度：32％)下的检视结果如图10A和图10B所示，其中，图10A为日光下检视的色谱，图10B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图10A和图10B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
由图9A、9B、10A和10B可知，在高湿和低湿条件下，熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒色谱在与大黄(掌叶大黄)对照药材色谱相应的位置显相同颜色的斑点，在不同条件下的色谱斑点分离效果较好，实验结果表明，湿度对本发明的薄层鉴别方法无显著性的影响，说明该方法对不同湿度条件的耐用性良好。
3、不同厂家薄层板考察
分别吸取3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品溶液2μl和对照药材溶液3μl，分别点于不同厂家(默克、烟台、青岛)硅胶GF254薄层板上，以甲酸乙酯-甲醇-水(20:3:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和紫外光灯(365nm)下检视。
利用默克(厂家全称：默克集团)生产的薄层板的检视结果如图11A和图11B所示，其中，图11A为日光下检视的色谱，图11B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图11A和图11B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
利用烟台(厂家全称：烟台江友硅胶开发有限公司)生产的薄层板的检视结果如图12A和图12B所示，其中，图12A为日光下检视的色谱，图12B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图12A和图12B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
利用青岛(厂家全称：青岛海洋化工厂分厂)生产的薄层板的检视结果如图13A和图13B所示，其中，图13A为日光下检视的色谱，图13B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图13A和图13B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
由图11A-13B可知，采用不同厂家的薄层版，熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒色谱在与大黄(掌叶大黄)对照药材色谱相应的位置显相同颜色的斑点，其中，使用默克和烟台厂家生产的薄层板时，色谱斑点分离效果较好，而使用青岛厂家生产的薄层板时，色谱斑点的分离度较差，但仍然符合检测要求。
4、不同人员重现性考察
分别由甲、乙两位实验人员，分别制备供试品溶液和对照药材溶液，分别吸取3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品溶液2μl和对照药材溶液3μl，点于硅胶GF254薄层板上，以甲酸乙酯-甲醇-水(20:3:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和紫外光灯(365nm)下检视。
实验人员甲的检视结果如图14A和图14B所示，其中，图14A为日光下检视的色谱，图14B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图14A和图14B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
实验人员乙的检视结果如图15A和图15B所示，其中，图15A为日光下检视的色谱，图15B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图15A和图15B中，1-3依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，4对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
由图14A-15B可知，由不同实验人员制备的供试品溶液和对照药材溶液，熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒色谱在与大黄(掌叶大黄)对照药材色谱相应的位置显相同颜色的斑点，色谱斑点分离效果较好，说明该方法在不同实验人员间的重现性较好。
实施例7
本实施例用于验证本发明的薄层鉴别方法对熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒的鉴别效果：
分别取大黄(掌叶大黄)对照药材、3批大黄(掌叶大黄)配方颗粒、3批酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒和3批熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒，参照实施例1的方法分别制备供试品溶液和对照药材溶液，并进行薄层色谱鉴定。
检视结果如图16A和图16B所示，其中，图16A为日光下检视的色谱，图16B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图16A和图16B中，1-3依次对应大黄(掌叶大黄)配方颗粒1902001Y、1902002Y、1902003Y，4-6依次对应酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒1909001Y、1909002Y、1909003Y，7-9依次对应熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒2004001Y、2004002Y、2004003Y，10对应大黄(掌叶大黄)对照药材。
由图16A和图16B可知，大黄(掌叶大黄)配方颗粒和酒大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
熟大黄(掌叶大黄)配方颗粒供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。但在白光和紫外光灯(365nm)条件下，在大黄、酒大黄和对照药材色谱Rf值约0.5处，显现一明显的斑点，而熟大黄样品则未显现该斑点，因此，可以通过该斑点的显现与否，准确鉴别供试品是否为熟大黄(掌叶大黄)产品。
实施例8
本实施例用于验证本发明的薄层鉴别方法对大黄(唐古特大黄)配方颗粒的鉴别效果：
分别取大黄(掌叶大黄)对照药材、大黄(唐古特大黄)对照药材、大黄(药用大黄)对照药材、3批大黄(掌叶大黄)配方颗粒、3批大黄(唐古特大黄)配方颗粒和3批大黄(药用大黄)配方颗粒，分别参照实施例2、实施例4和实施例5的方法制备供试品溶液和对照药材溶液，并进行薄层色谱鉴定。
检视结果如图17A和图17B所示，其中，图17A为日光下检视的色谱，图17B为紫外光灯(365nm)下检视的色谱，图17A和图17B中，1-4依次对应大黄(掌叶大黄)配方颗粒1902001Y、1902002Y、1902003Y、大黄(掌叶大黄)对照药材；5-8依次对应大黄(唐古特大黄)配方颗粒2108001Y、2108002Y、2108003Y、大黄(唐古特大黄)对照药材；9-12依次对应大黄(药用大黄)配方颗粒2009001W、2009002W、2009003W、大黄(药用大黄)对照药材
由图17A和图17B可知，采用该鉴别方法，斑点的信息量较丰富，能反映大黄多类型成分的特点。三种不同基原的大黄供试品色谱中，在与相应基原的对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
在紫外光灯(365nm)条件下，大黄(掌叶大黄)色谱中在Rf值约0.41处显现棕红色的荧光斑点，而唐古特大黄样品则未显现该斑点，并且Rf值约0.6、0.7和0.78处，大黄(掌叶大黄)样品色谱中显现三个亮蓝色的荧光斑点，与唐古特大黄样品有明显的差异。而唐古特大黄样品则在Rf值约0.38和0.42处显现两个亮蓝色的斑点，而该两个斑点未出现在掌叶大黄和药用大黄的样品中。综合以上的结果，说明了该薄层鉴别方法可用于专属鉴别唐古特大黄产品。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种大黄产品的薄层鉴别方法，其特征在于，包括：
取供试品溶液，点于薄层板上，以体积比为20:3:2的甲酸乙酯-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光和/或紫外光灯下检视；
所述大黄产品包括大黄药材、大黄饮片和大黄制剂中的至少一种；
在所述供试品溶液中供试品为大黄制剂的情况下，所述供试品溶液的制备过程包括：取大黄制剂的粉末，加提取溶剂，超声提取，固液分离，取液体；其中，所述提取溶剂选自甲醇或甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量不低于80%；
在所述供试品溶液中的供试品为大黄药材和/或饮片的情况下，所述供试品溶液的制备过程包括：取大黄药材和/或饮片，加水，回流提取，固液分离，所得液体浓缩至干，得浓缩残渣；在所述浓缩残渣中加入提取溶剂，超声提取，固液分离，取液体；其中，所述提取溶剂选自甲醇或甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量不低于80%。
2.根据权利要求1所述的薄层鉴别方法，其特征在于，所述大黄产品包括掌叶大黄产品、唐古特大黄产品和药用大黄产品中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的薄层鉴别方法，其特征在于，相对于1g所述大黄制剂粉末，所述提取溶剂的加入量为5～15ml；
所述超声提取的超声功率为200～400W，时间为10～20min。
4.根据权利要求2所述的薄层鉴别方法，其特征在于，相对于1g所述大黄药材和/或饮片，水的加入量为50～150ml；
所述回流提取的温度为80～100℃，时间为30～90min；
在向所述大黄药材和/或饮片的浓缩残渣中加入提取溶剂时，相对于1g所述大黄药材和/或饮片，所述提取溶剂的加入量为5～15ml；
所述超声提取的超声功率为200～400W，时间为10～20min。
5.根据权利要求1所述的薄层鉴别方法，其特征在于，所述薄层板为硅胶GF254薄层板；
所述紫外光灯检视的波长为365nm。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的薄层鉴别方法，其特征在于，还包括采用大黄对照药材制备对照药材溶液的操作，以及按照所述的薄层鉴别方法对所述对照药材溶液进行鉴别的操作；
所述大黄对照药材选自掌叶大黄对照药材、唐古特大黄对照药材和药用大黄对照药材中的任一种；
所述对照药材溶液的制备过程包括：
取所述大黄对照药材，加水，回流提取，固液分离，所得液体浓缩至干，得浓缩残渣；在所述浓缩残渣中加入提取溶剂，超声提取，固液分离，取液体；其中，所述提取溶剂选自甲醇或甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积百分含量不低于80%。
7.根据权利要求6所述的薄层鉴别方法，其特征在于，所述供试品溶液的点样量为1～3μl；所述对照药材溶液的点样量为2～4μl。
8.权利要求1～7中任一项所述的薄层鉴别方法在鉴别以掌叶大黄为基原的熟大黄产品中的用途，其特征在于，置日光和/或紫外光灯下检视时，在所得色谱的Rf值0.4～0.6处未显现斑点的情况下，确定供试品为以掌叶大黄为基原的熟大黄产品。
9.权利要求1～7中任一项所述的薄层鉴别方法在鉴别唐古特大黄产品中的用途，其特征在于，置紫外光灯下检视时，在所得色谱图的Rf值0.36～0.40和0.40～0.44处显现两个亮蓝色斑点的情况下，确定供试品为唐古特大黄产品。
10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，在所得色谱图的Rf值0.36～0.40和0.40～0.44处显现两个亮蓝色斑点，且Rf值0.58～0.62、0.68～0.72和0.76～0.80处未显现明显斑点的情况下，确定供试品为唐古特大黄产品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210527131.XA CN114924022B (zh) | 2022-05-13 | 2022-05-13 | 大黄产品的薄层鉴别方法及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210527131.XA CN114924022B (zh) | 2022-05-13 | 2022-05-13 | 大黄产品的薄层鉴别方法及其用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114924022A CN114924022A (zh) | 2022-08-19 |
| CN114924022B true CN114924022B (zh) | 2023-12-19 |
Family
ID=82809449
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210527131.XA Active CN114924022B (zh) | 2022-05-13 | 2022-05-13 | 大黄产品的薄层鉴别方法及其用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114924022B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107505427A (zh) * | 2017-08-22 | 2017-12-22 | 成都维恒医药科技有限公司 | 一种中药材掌叶大黄的薄层色谱检测方法 |
| CN111735901A (zh) * | 2020-07-09 | 2020-10-02 | 四川大学 | 一种多基源大黄药材的梯度全信息薄层鉴别方法 |
-
2022
- 2022-05-13 CN CN202210527131.XA patent/CN114924022B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107505427A (zh) * | 2017-08-22 | 2017-12-22 | 成都维恒医药科技有限公司 | 一种中药材掌叶大黄的薄层色谱检测方法 |
| CN111735901A (zh) * | 2020-07-09 | 2020-10-02 | 四川大学 | 一种多基源大黄药材的梯度全信息薄层鉴别方法 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| 乌苓苁蓉合剂的薄层色谱鉴别研究;苟立平 等;中药与临床(第06期);全文 * |
| 同属不同种大黄及含大黄制剂中土大黄苷检查方法的研究;严华 等;药物分析杂志(第09期);全文 * |
| 均匀设计法优选掌叶大黄(Rheum palmatum L.)总蒽醌类物质的薄层层析展开剂体系;井明博 等;《陇东学院学报》;第26卷(第5期);第66-69页 * |
| 大黄全成分薄层色谱条件研究;叶强 等;《亚太传统医药》;第9卷(第3期);第15-16页 * |
| 大黄及其混伪品的鉴别;杨成英;时珍国医国药(第12期);全文 * |
| 大黄真伪鉴定与质量控制方法研究进展;陈敏 等;《中国药房》;第30卷(第18期);第2583-2589页 * |
| 胃舒散中大黄薄层鉴别方法的研究;郑奕辉 等;《中国中医药科技》(第6期);第390-391页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114924022A (zh) | 2022-08-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108562683B (zh) | 一种韭根药物质量检测方法 | |
| CN107505427B (zh) | 一种中药材掌叶大黄的薄层色谱检测方法 | |
| CN110895265A (zh) | 一种瓜蒌配方颗粒基源鉴定的方法 | |
| CN109884238B (zh) | 一种启脾丸的鉴别方法 | |
| CN113109495B (zh) | 一种基于薄层色谱的枣仁安神胶囊质量检测方法 | |
| CN114924022B (zh) | 大黄产品的薄层鉴别方法及其用途 | |
| CN113252836A (zh) | 一种黄柏及黄柏酒炙品的薄层层析鉴别方法 | |
| CN111220719B (zh) | 一种人参药材质量的指纹图谱评价方法 | |
| CN116879416A (zh) | 一种北刘寄奴药物制剂的特征图谱与薄层色谱的构建方法 | |
| CN106324177A (zh) | 一种中药复方中姜的鉴别方法 | |
| CN109406707B (zh) | 一种炒桃仁及其制剂的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN114354828A (zh) | 短穗兔耳草特征图谱及其构建方法和短穗兔耳草的质量检测方法 | |
| CN112730724A (zh) | 一种白前配方颗粒的薄层鉴别方法 | |
| CN111458451B (zh) | 一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法 | |
| CN114720622B (zh) | 一种消肿痛醋膏的检测方法 | |
| CN113759063B (zh) | 一种芦根及其制剂的薄层鉴别方法 | |
| CN116068075B (zh) | 基于薄层色谱的保元汤的快速鉴别方法 | |
| CN113759066B (zh) | 一种薤白供试品的薄层鉴别方法 | |
| CN115452964B (zh) | 锦灯笼的uplc特征图谱构建方法及质量控制方法 | |
| CN114236034B (zh) | 一种飞龙掌血药材的检测方法 | |
| CN114137142B (zh) | 盐肤木的薄层色谱鉴别方法 | |
| CN113155573B (zh) | 枸杞子大极性对照提取物及其制备方法和应用 | |
| CN111638300B (zh) | 一种泽泻中16-氧代泽泻醇a的薄层鉴别方法 | |
| CN110873776B (zh) | 一种栀子与炒栀子配方颗粒的鉴别方法 | |
| CN108072730B (zh) | 一种峨眉雪胆的薄层色谱鉴别方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |