CN111458451B - 一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与药材溶液，分别点于同一块薄层板上，用适宜展开剂，展开后，在3种检视条件下，检视到杜仲炭药材、颗粒及标煎粉的荧光斑点、无荧光斑点和显色的颜色斑点共11个，归属于约8种化学成分。斑点交错，互不干扰，发挥了不同检视条件下的信息斑点互补。目前还未查阅到有关杜仲炭药材、水提取的颗粒及标煎粉的薄层鉴别报道。本发明不但提供了杜仲炭药材、颗粒及标煎粉多信息鉴别方法，提高了其质量可控性，有利于质量监督管理。方法简便、快捷，高效率、成本低、绿色环保。

Description

一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法

技术领域

本发明涉及一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法。属于中药的薄层鉴别领域。即，采用薄层色谱鉴别，在同一块薄层板上，3种不同的检视条件下，共检视到杜仲炭药材、颗粒及标煎粉的11种信息斑点，归属约8种化学成分。

背景技术

所谓的快速多信息薄层鉴别方法，顾名思义就是薄层鉴别简便、快捷、高效，供试品溶液和对照药材溶液，不需要反复提纯处理，无蒸发、浓缩等污染环境的操作程序，用适宜的溶剂超声后，都不需滤过，上清液点样、展开、检视、即可，很快就能得到薄层结果。所谓的多信息系指一块薄层板，展开1次，可获得不同检视条件下的多种信息斑点，斑点重叠、交错，但在各自的检视条件下，互补干扰。与常规的薄层鉴别相比，大幅度提高了被检测物的质量可控性，有利于市场质量监督，确保人民用药的安全与有效。

杜仲为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮。收载于2015年版中国药典一部，具有补肝肾，强筋骨，安胎之功效。用于肝肾不足，腰膝酸痛，筋骨无力，头晕目眩，妊娠漏血，胎动不安。杜仲主含杜仲胶，约6-10％，是一种难溶于水的硬性树胶，此外还含有木脂素类化合物松脂醇二葡糖糖苷及环烯醚萜类化合物京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸等。杜仲的质量标准收载了显微鉴别、试管反应、浸出物和含量测定，还未收载薄层鉴别项目。虽然偶有薄层鉴别的报道^【1】，也多是以京尼平苷酸和松脂醇二葡萄糖苷为指标，而且方法极其繁琐、费时，一项薄层鉴别就要花费近2天时间，具体方法如下：取杜仲2g，精密称定，置索氏提取器中，加入三氯甲烷适量，回流提取6小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，再置索氏提取器中，加甲醇适量，回流提取6小时，提取液过滤，回收甲醇至适量，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，作为供试品溶液。另取杜仲对照药材2g，精密称定，置索氏提取器中，按供试品溶液的制备方法，制备对照药材溶液。再取松脂醇二葡萄糖苷和京尼平苷酸对照品适量，加甲醇制成每1ml各含5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液适量，分别点于硅胶G薄层板上，以三氯甲烷- 正丁醇-水-乙酸溶液(1∶7∶1∶1)为展开剂，预饱和30分钟，展开，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热显色，观察与对照品和对照药材相应的颜色斑点。从方法的操作程序，该薄层方法鉴别1批药材，粗略地计算，至少要花费时间2天、有机试剂610ml、展开剂12ml，显色剂5％香草醛硫酸溶液，为浓硫酸，腐蚀性很强，污染环境，危害操作人员健康。

杜仲炭为杜仲经加工得到的炮制加工品。即，取杜仲块，置锅内用武火炒至黑色并断丝，但须存性，用盐水喷洒，取出，防止复燃，晾干即得，每100公斤杜仲块用食盐3公斤，或取杜仲块，先用盐水拌匀吸尽后置锅中，用武火炒至黑色并断丝存性，用水喷灭火星，取出晾干。每100公斤杜仲块用食盐3公斤。炒制后的杜仲炭其所含的化学成分与杜仲药材相比，松脂醇二葡糖糖质量分数下降了85％；京尼平、京尼平苷、京尼平酸分别降低98％、70％、70％；咖啡酸质量分数下降了75％等等。

杜仲炭因武火的炒制，使大量的有效成分损失，无法采用杜仲药材薄层鉴别方法进行鉴别，也就无法控制药材的炒制工艺，更无法检测杜仲炭水煎煮颗粒以及标煎粉的质量和为临床制剂提供行之有效质量检测体系。

为快速多信息控制杜仲炭颗粒及标煎粉质量，并为其制备工艺提供科学依据，本着简便、快捷、低成本、高效率、多信息的宗旨，对杜仲炭药材、颗粒及标煎粉进行了专题薄层鉴别研究。获得了一种简便、快捷、绿色环保的杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法。下面就杜仲炭药材、颗粒及标煎粉的制备工艺描述如下：

杜仲炭药材系指：取杜仲块，先用盐水拌匀吸尽后置锅中，用武火炒至黑色并断丝存性，用水喷灭火星，取出晾干(每100公斤杜仲块用食盐3公斤)，即得。

杜仲炭颗粒系指将杜仲炭块，稍加破碎，加水煎煮2次，每次1～2小时，滤过，合并滤液，减压浓缩到适宜的相对密度，喷雾干燥，将干燥粉，加适量糊精，混合均匀，制成颗粒，即得。

杜仲炭标煎粉系指将杜仲炭块，稍加破碎，加水煎煮2次，每次1小时，滤过，合并滤液，常温浓缩到适宜相对密度，置60℃烘箱内，烘干，粉碎，即得。

发明内容

首次创建了一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与药材溶液，分别点于同一块薄层板上，用适宜展开剂，展开后，在3种检视条件下，检视到杜仲炭药材、颗粒及标煎粉的荧光斑点、无荧光斑点和显色的颜色斑点共11个，归属于约8种化学成分。斑点交错，互不干扰，发挥了不同检视条件下的信息斑点互补。目前还未查阅到有关杜仲炭药材、水提取的颗粒及标煎粉的薄层鉴别报道。本发明不但提供了杜仲炭药材、颗粒及标煎粉多信息鉴别方法，提高了其质量可控性，有利于质量监督管理。方法简便、快捷，高效率、成本低、绿色环保。

本发明解决其技术问题所采用的方案为：

取杜仲炭颗粒和标煎粉各0.5g，分别加甲醇3ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另杜仲炭药材0.3g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为药材溶液；吸取颗粒供试品溶液3μl、标煎粉溶液3μl、药材溶液10μl，分别点于同一硅胶 GF₂₅₄薄层板上，以体积比6∶5∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，至少显3个蓝紫色荧光斑点；喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点呈现，再置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，显相同的棕黑色主斑点。

本发明的原理如下：

依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相容的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制备供试品与对照药材溶液。再采用适宜的展开剂，进行展开，各种化学成分就会随着选用的展开剂，依据吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的能力不同，而在薄层板上得以良好分离。再借助各种极性近似的有效成分，在同一块薄层板上，不同的检视条件下，虽然重叠，但在不同的层次上，互不干扰，呈现出各自不同的颜色斑点，获得多信息的薄层色谱图。

本发明的创新点及有益效果如下：

1.创建了一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与药材溶液，分别点于同一块薄层板上，用适宜展开剂，展开后，在3种检视条件下，检视到杜仲炭药材、颗粒及标煎粉的荧光斑点、无荧光斑点和显色的颜色斑点共11个，归属于约8种化学成分。斑点交错，互不干扰，发挥了不同检视条件下的信息斑点互补。目前还未查阅到有关杜仲炭药材、水提取的颗粒及标煎粉的薄层鉴别报道。本发明不但提供了杜仲炭药材、颗粒及标煎粉多信息鉴别方法，提高了其质量可控性，有利于质量监督管理。方法简便、快捷，高效率、成本低、绿色环保。

2.以体积比6∶5∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开杜仲炭药材、颗粒及标煎粉后，置紫外光灯254nm下检视，药材和供试品都检视到2个棕褐色主斑点(图1)；置紫外光灯365nm下检视，药材检视到5荧光斑点，供试品检视到3个荧光斑点，药材中有 1个偏脂溶性的亮蓝绿色荧光，在供试品中未检视到，说明该斑点用水是提取不到的(图2)；对比图1、2的斑点形状、剂量和Rf值，2种图中的斑点，不是同一化合物，在2种检视条件下，检视出共有斑点5个。喷雾10％硫酸乙醇溶液显色后，置暗室内透过灯光检视，药材呈现了9个颜色斑点，供试品呈现了6个颜色斑点，比药材少了3个偏脂溶性斑点，该偏脂溶性斑点用水是提取不到的。与图1、2中的斑点比较，该检视条件的信息斑点水溶性更大。 3种检视条件下，共检出斑点11个，归属于约8余种不同的化学成分。所呈现的主斑点Rf值不同，斑点形状、大小不一样，发挥了不同检视条件下的信息斑点互补。

3.本鉴别方法只需杜仲炭药材0.3g、颗粒和标煎粉各0.5g、甲醇8ml、时间20分钟，即可获得供试品和药材溶液。加上展开剂12ml，展开时间30分钟，总花费50分钟，即可对供试品质量做出多种化学成分为指标的质量评价。简便、快捷，具有很高的实用价值。与报道^【1】的鉴别1批杜仲原生药材，需花费时间2天、有机试剂610ml、以及检视2～3个信息斑点相比，其节约资源、降低成本、绿色环保、提高效率与产品的质量可控性的有益效果是不言而喻的。

4.以体积比6∶5∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开的成分属于中极性的；而文献报道的以体积比1∶7∶1∶1的三氯甲烷-正丁醇-水-乙酸溶液为展开剂，展开的成分属于水溶性的。两种展开剂的极性悬殊，展开的并非相同成分，所以本申请鉴别的化学成分为初次报道。

5.本发明的创新性还在于将强酸强腐蚀性的5％香草醛硫酸溶液，更换为10％硫酸乙醇溶液，不但酸度大幅度降低，而且刺激性小，经济易得。

6.从本鉴别的薄层色谱图分析，药材的斑点明显多余标煎粉与颗粒的，说明药材中的脂溶性成分，在提取过程中没有被提取出来，而药材、颗粒及标煎粉的中极性成分，在3种不同的检视条件下，几乎所呈现的斑点是相同的，间接地说明了在加热煎煮、干燥的过程中其化学成分未被分解破坏，产生与药材不一致的成分。以此提示：杜仲炭药材、颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法还可对制备工艺是否规范？进行监督。

附图说明

图1为杜仲炭药材、颗粒及标煎粉在紫外光灯254nm下检视的薄层TLC图。

图2为杜仲炭药材、颗粒及标煎粉在紫外光灯365nm下检视的薄层TLC图。

图3为杜仲炭药材、颗粒及标煎粉用10％硫酸乙醇溶液显色后，置紫暗室内透过灯光检视的薄层TLC图。

图1、2、3为同一块薄层板，不同检视条件下的薄层色谱图，其中，1.2.3.为杜仲炭药材；4.为杜仲炭标煎粉；5.6.为杜仲炭颗粒。

本发明具体实施方式如下：

取杜仲炭颗粒和标煎粉各0.5g，分别加甲醇3ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另杜仲炭药材0.3g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为药材溶液；吸取颗粒供试品溶液3μl、标煎粉溶液3μl、药材溶液10μl，分别点于同一硅胶 GF₂₅₄薄层板上，以体积比6∶5∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，至少显3个蓝紫色荧光斑点；喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点呈现，再置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，显相同的棕黑色主斑点。

参考文献

【1】刘玲，鲍家科，杜仲药材薄层色谱鉴别研究[J].中国民族民间医药，2014，23(2):8-9。

Claims (3)

1.一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于：

取杜仲炭颗粒和标煎粉各0.5g，分别加甲醇3ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另杜仲炭药材0.3g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为药材溶液；吸取颗粒供试品溶液3μl、标煎粉溶液3μl、药材溶液10μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比6∶5∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，至少显3个蓝紫色荧光斑点；喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点呈现，再置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与杜仲炭药材色谱相应的位置上，显相同的棕黑色主斑点。

2.根据权利要求1所述的一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于每1g颗粒相当原生药材20g；每1g标煎粉相当原生药材20g。

3.根据权利要求1所述的一种杜仲炭颗粒及标煎粉的快速多信息薄层鉴别方法，其特征在于采用同一展开剂，在同一块薄层板，3种检视条件下，检视到杜仲炭药材、颗粒及标煎粉的信息斑点11个，归属约8种化学成分。

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