CN114917409A

CN114917409A - 一种基于透明质酸的组合物

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Publication number: CN114917409A
Application number: CN202210620816.9A
Authority: CN
Inventors: 顾其胜; 陆文岐; 陈霄宇; 颜杰峰; 范以兰; 张丽; 胡继霞; 梁晓怡
Original assignee: Ruiyue Biomedical Shenzhen Co Ltd
Current assignee: Ruiyue Biomedical Shenzhen Co Ltd
Priority date: 2022-06-02
Filing date: 2022-06-02
Publication date: 2022-08-19

Abstract

本发明涉及一种基于透明质酸的组合物，属于抗衰老、医学美容领域。本发明提供的组合物包括：透明质酸或其药学上可接受的盐，氨基酸，抗氧剂，维生素或其衍生物和调节剂。本发明提供的组合物，不仅具有补充胞外基质的功能，还能促进成纤维细胞增殖和自身胶原蛋白合成，改善、解决皮肤的衰老老化现象如缺水、干燥，色素沉着，皱纹等现象。

Description

一种基于透明质酸的组合物

技术领域

本发明涉及一种基于透明质酸的组合物，具体地涉及可以用于抗衰老、美学用途的基于透明质酸的皮肤填充组合物，属于抗衰老、医学美容领域。

背景技术

随着年龄和/或环境的变化，人体的皮肤等器官或组织会发生衰老。皮肤自然老化，会使皮肤内的胶原蛋白和透明质酸钠含量减少，弹性纤维及胶原纤维变性、皮肤变薄等，这种损伤会出现在全身所有部位的皮肤；皮肤老化可表现出皮肤干燥、粗糙、毛细血管扩张、弹性降低、不规则色素沉着、脂溢性角化等现象或状态。在皮下补充胶原蛋白和/或透明质酸钠是改善皮肤老化状态的有效方案，如果能够促进皮肤中成纤维细胞增殖，则可以改善皮肤衰老状态，减少黑色素细胞生成，可以减少皮肤黑色素生成和沉着，也可以改善皮肤的衰老状态。

透明质酸是一种天然多糖，由下列重复单元连接而成：N-乙酰-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸。它在整个人体(例如，皮肤中)中存在。透明质酸能够结合和保持水分，能够在皮肤水合作用中起到支持作用；同时，透明质酸具有优异的粘弹性并具有高的组织提升能力(体积效应)，因此，透明质酸成为优选的皮肤美容、填充材料。

临床上用于人体的胶原蛋白注射填充剂有人源胶原蛋白和非人源胶原蛋白，人源胶原蛋白虽无免疫风险，但获得费时费力，价格昂贵；非人源胶原蛋白有一定的免疫风险，使用存在较多不确定因素。因此直接注射胶原蛋白填充剂并不是最优方案。而氨基酸是蛋白质的结构单元，补充某些氨基酸能为胶原蛋白的合成提供原料，从而也有利于改善皮肤老化状态，且氨基酸无安全风险，获得也方便容易。

在透明质酸用于美学用途时，为了避免透明质酸的快速降解，往往将交联剂与透明质酸交联并且用于产品中，但交联剂(如1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE))为非人体组织中组分，容易存在未交联情况或交联剂降解情况，这些交联剂带来的外来组分被认为对人体存在毒性，需要严格控制和除去，以保证产品的安全性。这也导致相关产品的组分确定及其生产工艺、质量控制的难度大大提高。另外，也可以采用高分子量的透明质酸或其盐，但分子量过大，易导致粘稠度高，注射困难，同样也存在生产工艺困难的问题。

因此，不使用交联剂等非人体存在组分的可用于和达到美学目的的基于透明质酸和氨基酸的产品，对改善皮肤老化状态是非常有利的，也是医学美容领域希望获得的。

发明内容

基于目前存在的问题和需求，本发明提供了一种可以用于美学用途的基于透明质酸的组合物，具体地提供一种抗衰老的可用于皮肤填充的透明质酸的组合物。本发明提供的组合物，不仅具有填充材料具备的补充胞外基质的功能，还能促进成纤维细胞增殖和自身胶原蛋白合成，改善、解决皮肤的衰老老化现象如缺水、干燥，色素沉着，皱纹等现象。

本发明提供的组合物，包括：主作用成分，氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和调节剂。

所述主作用成分为透明质酸或其药学上可接受的盐。

所述透明质酸药学上可接受的盐可以为透明质酸的钠盐，钾盐，锌盐，镁盐或钙盐。在一些实施方式中，所述盐优选为钠盐。在一些实施方式中，所述组合物优选包括透明质酸钠。在一些实施方式中，所述组合物优选包括透明质酸锌。在一些实施方式中，所述组合物中主作用成分为透明质酸钠。

所述透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量可以在15万-300万道尔顿(Da)。在一些实施例中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐的分子量为20万-250万道尔顿。在一些实施例中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐的分子量为24万-230万道尔顿。在一些实施例中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐的分子量为25万-220万道尔顿。在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐分子量在25万或50万或100万或105万或110万或150万或160万或180万200万或220万或240万道尔顿。

根据本发明的实施例，相对单一分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，更有利于组合物的稳定、生物相容性，更有利于产品促进细胞增殖和提升皮肤长时间含相对较多水分，更好地改善、解决皮肤的衰老老化现象(如缺水、干燥，色素沉着，皱纹等)；并且，使用非交联的透明质酸或其药学上可接受的盐，不引入非人体天然存在的交联剂，具有更好的安全性和生物相容性。根据本发明的实施例，所述透明质酸或其药学上可接受的盐可以为分子量为15万道尔顿-35万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为90万道尔顿-120万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为180万道尔顿-250万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合。

根据本发明的实施例，在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐可以为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为90万道尔顿-120万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为180万道尔顿-250万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合。根据本发明的实施例，在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐可以为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为90万道尔顿-120万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为200万道尔顿-240万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，有利于组合物的稳定和细胞的再生等抗衰老作用。

在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，有利于组合物的稳定和细胞的再生等抗衰老作用。在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为21万道尔顿-29万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为101万道尔顿-111万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为215万道尔顿-225万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，有利于组合物的稳定和细胞的再生等抗衰老作用。在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为22万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为110万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为220万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，有利于组合物的稳定和细胞的再生等抗衰老作用。

按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组的质量比可以为(5-7):(4-6):(3-5)。在一些实施方式中，按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组的质量比优选为(5.5-6.5):(4.5-5.5):(3.5-4.5)，有利于获得具有较好抗衰老作用的组合物。在一些实施方式中，按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组的质量比优选为6:5:4，有利于质量控制和获得具有较好抗衰老作用的组合物。

在本发明的一些实施方式中，一种组合物，包括：透明质酸或其药学上可接受的盐，氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和调节剂；其中，所述氨基酸包括甘氨酸和脯氨酸；所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为90万道尔顿-120万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为180万道尔顿-250万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，按照分子量低中高的顺序，不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的质量比为(5-7):(4-6):(3-5)。

在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组的质量比为(5-7):(4-6):(3-5)。在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组的质量比为(5.5-6.5):(4.5-5.5):(3.5-4.5)。在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组的质量比为6:5:4。在一些实施方式中，所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为22万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为110万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为220万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的组的质量比为6:5:4，有利于组合物的稳定和细胞的再生等抗衰老作用。

在一些实施方式中，所述组合物包括透明质酸钠，所述透明质酸钠为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸钠，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸钠和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸钠的组合，或者所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为22万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为110万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为220万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合。在一些实施方式中，所述组合物包括透明质酸钠，所述透明质酸钠为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸钠，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸钠和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸钠的组合，或者所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为22万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为110万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为220万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合；按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的所述质量比为(5.5-6.5):(4.5-5.5):(3.5-4.5)或6:5:4。

基于所述组合物中水的体积，所述透明质酸或其药学上可接受的盐的含量可以为3mg/mL-21mg/mL(例如：3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL、7mg/mL、8mg/mL、9mg/mL、10mg/mL、11mg/mL、12mg/mL、13mg/mL、14mg/mL、15mg/mL、16mg/mL、17mg/mL、18mg/mL、19mg/mL、20mg/mL或21mg/mL)，优选5mg/mL-20mg/mL，或优选10mg/mL-20mg/mL；或进一步优选12mg/mL，15mg/mL，或18mg/mL。

所述氨基酸包括甘氨酸和脯氨酸，还可以包括苏氨酸，异亮氨酸，色氨酸，苯丙氨酸，组氨酸，酪氨酸，鸟氨酸，胱氨酸，蛋氨酸，赖氨酸，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸中的至少一种。在一些实施方式中，所述氨基酸包括甘氨酸和脯氨酸，还可以包括苏氨酸，异亮氨酸，色氨酸，苯丙氨酸，组氨酸，酪氨酸，鸟氨酸，胱氨酸和蛋氨酸中的至少一种。在一些实施方式中，所述氨基酸包括甘氨酸和脯氨酸，还包括苏氨酸，异亮氨酸，色氨酸，苯丙氨酸，酪氨酸，鸟氨酸和蛋氨酸中的至少一种。在一些实施方式中，所述氨基酸包括甘氨酸和脯氨酸，还包括赖氨酸，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸中的至少一种或至少两种，所述组合物具有较好的抗衰老作用。在一些实施方式中，所述氨基酸包括甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸，所述组合物具有较好的抗衰老作用。在一些实施方式中，所述氨基酸包括甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸，任选包括苏氨酸，异亮氨酸，色氨酸，苯丙氨酸，酪氨酸，鸟氨酸和蛋氨酸中的一种或多种，所述组合物具有较好的抗衰老作用。

氨基酸药学上可接受的盐可以为乙酸盐，盐酸盐，硫酸盐，柠檬酸盐，钠盐，钾盐，镁盐或钙盐。在一些实施方式中，氨基酸药学上可接受的盐为所述氨基酸的盐酸盐或钠盐。

在组合物中包含氨基酸，特别是本发明所述的氨基酸，有利于为皮肤提供营养成分，有助于促进胶原蛋白的合成和成纤维细胞的生成，使组合物具有更好的抗衰老作用，并且有利于透明质酸或其盐的稳定。

基于所述组合物中水的体积，所述氨基酸或其药学上可接受的盐的含量独立地可以为0.001mg/mL-10mg/mL，优选0.005mg/mL-5mg/mL，或0.005mg/mL-1mg/mL，或0.01mg/mL-2mg/mL，或0.01mg/mL-1mg/mL，或0.05mg/mL-1mg/mL，或0.1mg/mL-1mg/mL。在一些实施方式中，基于所述组合物中水的体积，所述氨基酸或其药学上可接受的盐的含量独立地为0.01mg/mL，或0.025mg/mL，或0.05mg/mL，或0.25mg/mL，或0.5mg/mL，或0.75mg/mL，或2mg/mL。

组合物中包含抗氧剂，有助于组合物的稳定，降低组合物中某些成分的降解可能性，也有助于组合物增强抗衰老作用。所述抗氧剂可以包括谷胱甘肽，L-肌肽，硫辛酸，4-氨基丁酸，丙二醇，甘露糖醇，环己六醇六磷酸，环己六醇六磷酸钠盐，茶多酚，3,4,5-三羟基苯甲酸丙酯，特丁基对苯二酚，2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，丁基羟基茴香醚，竹叶抗氧化物，甘草抗氧化物，迷迭香提取物和绿茶提取物中的至少一种。在一些实施方式中，所述抗氧剂包括：谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸，硫辛酸，环己六醇六磷酸，环己六醇六磷酸钠盐，茶多酚，3,4,5-三羟基苯甲酸丙酯，特丁基对苯二酚，2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚和丁基羟基茴香醚中的至少一种，有利于组合物的稳定和抗衰老作用。在一些实施方式中，所述抗氧剂包括谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸中的至少一种，有利于得到稳定的和具有较好抗衰老作用的组合物。在一些实施方式中，所述抗氧剂可以任选包括4-氨基丁酸，丙二醇或甘露糖醇。在一些实施方式中，所述抗氧剂包括谷胱甘肽，L-肌肽和硫辛酸，任选包括4-氨基丁酸，丙二醇或甘露糖醇。

基于所述组合物中水的体积，所述抗氧剂的含量独立地可以为0.001mg/mL-10mg/mL，优选0.005mg/mL-5mg/mL，或0.005mg/mL-1mg/mL，或0.005mg/mL-0.1mg/mL，或0.01mg/mL-1mg/mL，或0.01mg/mL-0.5mg/mL。在一些实施方式中，基于所述组合物中水的体积，所述抗氧剂的含量独立地为0.01mg/mL，或0.025mg/mL，或0.05mg/mL，或0.25mg/mL，或0.5mg/mL，或2mg/mL，或3mg/mL。

所述维生素可以包括维生素A，B族维生素，维生素C，维生素D和维生素E中的至少一种。在一些实施方式中，所述维生素包括B族维生素和维生素C。在一些实施方式中，所述组合物包括B族维生素和维生素C或其衍生物。在一些实施方式中，所述组合物优选包括维生素B3，和维生素C或其衍生物。

所述B族维生素可以包括维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B9中的至少一种。在一些实施方式中，所述B族维生素包括烟酸。在一些实施方式中，所述B族维生素包括烟酰胺。

维生素C的衍生物可以为维生素C磷酸酯钠，维生素C磷酸酯镁，维生素C磷酸酯钙，抗坏血酸棕榈酸酯，L-抗坏血酸硬脂酸酯，抗坏血酸葡糖苷，抗坏血酸棕榈酸酯磷酸盐，抗坏血酸四异棕榈酸酯，2-O-乙基抗坏血酸，3-O-乙基抗坏血酸醚和氨基丙醇抗坏血酸磷酸酯中的至少一种。在一些实施方式中，维生素C的衍生物为维生素C磷酸酯钠，维生素C磷酸酯镁和维生素C磷酸酯钙中的至少一种。在一些实施方式中，所述组合物包括维生素C的衍生物，所述维生素C的衍生物包括维生素C磷酸酯钠，维生素C磷酸酯镁和维生素C磷酸酯钙中的至少一种。在一些实施方式中，所述组合物包括维生素C的衍生物，所述维生素C的衍生物包括或为维生素C磷酸酯钠，有利于组合物的稳定和具有较好的抗衰老作用。

基于所述组合物中水的体积，所述维生素或其衍生物的含量独立地可以为0.001mg/mL-10mg/mL，优选0.005mg/mL-5mg/mL，或0.005mg/mL-1mg/mL，或0.005mg/mL-0.1mg/mL，或0.01mg/mL-2mg/mL，或0.01mg/mL-1mg/mL。在一些实施方式中，基于所述组合物中水的体积，所述维生素或其衍生物的含量独立地为0.01mg/mL，或0.025mg/mL，或0.05mg/mL，或0.25mg/mL，或0.5mg/mL，或1mg/mL，或1.5mg/mL，或2mg/mL，或3mg/mL，有利于得到具有较好抗衰老作用的组合物。

所述抗氧剂和/或维生素或其衍生物，可以抗氧化，抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素生成，改善皮肤的色素沉着，有利于增强组合物的抗衰老作用，也利于组合物的稳定。

所述调节剂可以调节组合物的pH和/或渗透压。

所述调节剂可以包括氯化钠。所述调节剂可以包括缓冲剂。

所述缓冲剂可以用于调节组合物的pH和/或渗透压，有助于使组合物具有适宜皮肤使用的渗透压，也有助于所述组合物的稳定和质量控制。所述缓冲剂可以包括氯化钠，盐酸，氢氧化钠，磷酸二氢钠，磷酸氢二钠或其水合物中的一种或多种；或者所述缓冲剂是由氯化钠，盐酸，磷酸二氢钠，磷酸氢二钠或其水合物和氢氧化钠中的一种或多种配制成的缓冲水溶液。所述缓冲剂可以为任意适宜浓度的水溶液。在一些实施方式中，所述缓冲剂包括磷酸氢二钠或其水合物。在一些实施方式中，所述缓冲剂为磷酸氢二钠或其水合物或磷酸氢二钠的水溶液。在一些实施方式中，所述调节剂包括氯化钠和缓冲剂。

所述调节剂可以为任意适宜的量，以使所述组合物可以用于注射于人体皮肤或软组织等部位，或为任意适宜的量以使所述组合物可以用于外用如涂抹，贴敷等方式用于人体皮肤等部位。

根据本发明的实施例，所述组合物的pH可以为6-9，优选6.5-8.5，或优选7-8；进一步优选7.3-7.5或7.4。所述pH范围有助于使组合物具有适宜使用于皮肤的渗透压，也有助于所述组合物的稳定。

在一些实施方式中，前述的组合物包括或由以下组分组成：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸或其盐，脯氨酸或其盐，赖氨酸或其盐，缬氨酸或其盐，丙氨酸或其盐，亮氨酸或其盐，谷氨酸或其盐，丝氨酸或其盐和精氨酸或其盐；谷胱甘肽，L-肌肽，硫辛酸；B族维生素，维生素C或其衍生物，氯化钠和缓冲剂；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。在一些实施方式中，前述的组合物包括：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸或其盐，脯氨酸或其盐，赖氨酸或其盐，缬氨酸或其盐，丙氨酸或其盐，亮氨酸或其盐，谷氨酸或其盐，丝氨酸或其盐和精氨酸或其盐；谷胱甘肽，L-肌肽和硫辛酸；B族维生素，维生素C或其衍生物，氯化钠和缓冲剂；任选地含有4-氨基丁酸，丙二醇或甘露糖醇。

在一些实施方式中，前述的组合物包括：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸；烟酰胺，维生素C磷酸酯钠，氯化钠和缓冲剂；所述组合物的pH为7-8。

在一些实施方式中，前述的组合物，包括或由以下组分组成：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸；B族维生素，维生素C或其衍生物，氯化钠和缓冲剂；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。

在一些实施方式中，前述的组合物，包括或由以下组分组成：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐酸盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸；维生素B3(烟酰胺)，维生素C的衍生物，氯化钠和缓冲剂；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。

在一些实施方式中，前述的组合物，包括：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐酸盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；谷胱甘肽，L-肌肽和硫辛酸；维生素B3(烟酰胺)，维生素C或其衍生物，氯化钠和缓冲剂；任选地含有4-氨基丁酸，丙二醇或甘露糖醇；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。

在一些实施方式中，前述的组合物，包括：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐酸盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸；维生素B3(烟酰胺)，维生素C或其衍生物，氯化钠和缓冲剂；还包括丙二醇和/或甘露糖醇；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。

在一些实施方式中，前述的组合物，包括：透明质酸钠，氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和调节剂；其中，所述氨基酸为甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；所述抗氧剂为谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸；所述维生素或其衍生物为维生素B3(烟酰胺)和维生素C磷酸酯钠；所述调节剂为氯化钠，磷酸氢二钠和水；基于组合物中水的体积，其中，透明质酸钠的含量为3mg/mL-21mg/mL，各氨基酸或其药学上可接受的盐的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL，所述抗氧剂的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL，所述维生素B3(烟酰胺)和维生素C磷酸酯钠的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。

在一些实施方式中，前述的组合物由透明质酸钠，甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐酸盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸，精氨酸，谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸，硫辛酸，烟酰胺，维生素C磷酸酯钠，氯化钠，磷酸氢二钠和水组成；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。

前述的组合物，优选pH为7.3-7.5。

在一些实施方式中，前述的组合物由透明质酸钠，甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐酸盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸，精氨酸，谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸，硫辛酸，烟酰胺，维生素C磷酸酯钠，氯化钠，磷酸氢二钠和水组成；其中，透明质酸钠的含量为3mg/mL-21mg/mL；各氨基酸的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL；谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL；所述维生素B3(烟酰胺)和维生素C磷酸酯钠的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL；所述组合物的pH为7.3-7.5；此时，所述组合物具有较好的稳定性，能够较好地促进胶原蛋白合成和细胞新生。

前述的组合物，优选所述透明质酸或其药学上可接受的盐的含量为10mg/mL-20mg/mL，所述氨基酸或其药学上可接受的盐的含量独立地为0.1mg/mL-1mg/mL，所述抗氧剂的含量独立地为0.01mg/mL-0.5mg/mL，所述维生素或其衍生物的含量独立地为0.01mg/mL-2mg/mL。

本发明提供的组合物，可以为注射剂，用于注射于人体皮肤或软组织等部位，也可以为外用制剂，用于外用涂抹或贴敷于人体皮肤等。

本发明还提供制备所述组合物的方法。所述方法能够简便地获得本发明的组合物，使所述组合物中的成分不会发生降解等不符合质量要求的现象。

为了使获得的所述组合物可以用于注射，达到中国药典注射剂要求的无菌质量标准，可以采用终端灭菌法，得到前述的组合物产品，或在无菌环境下或采用无菌操作等无菌生产工艺制备所述组合物，或者采用辐照灭菌等方式制备得到所述组合物。

在一些实施方式中，一种制备前述的组合物的方法，包括以下步骤：

1)将透明质酸或其药学上可接受的盐，氯化钠和水在10℃～90℃搅拌混匀；

2)将氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和水在10℃-30℃搅拌混匀；

3)将步骤1和步骤2所得的混合液和水在10℃-30℃搅拌混匀，用缓冲剂或其水溶液调节pH；和

4)灭菌，得到组合物；其中，灭菌前任选过滤。

在一些实施方式中，一种制备前述的组合物的方法，包括：

1)将透明质酸或其药学上可接受的盐，氯化钠和水在10℃～90℃搅拌混匀，然后灭菌，过滤，滤液降至10℃-30℃；

2)将氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和水在10℃-30℃搅拌混匀，过滤，得到滤液；其中，任选用缓冲剂或其水溶液调节pH值；和

3)将步骤1和2所得的滤液和水在10℃-30℃搅拌混匀，得到混合液，其中，任选用缓冲剂或其水溶液调节pH值；得到组合物。

在一些实施方式中，一种制备前述的组合物的方法，包括：

1)将透明质酸或其药学上可接受的盐，氯化钠和水在10℃-90℃搅拌混匀，用缓冲剂或其水溶液调节pH值，然后灭菌，再降至10℃-30℃，得到混合液；

2)将氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和水在10℃-30℃搅拌混匀，过滤，得到滤液；和

3)将步骤1所得混合液，步骤2所得的滤液和水在10℃-30℃搅拌混匀；得到组合物。

在一些实施方式中，将透明质酸或其药学上可接受的盐，氯化钠和水在20℃-70℃或20℃-50℃搅拌混匀。

上述方法中，灭菌可以为湿热灭菌、过滤除菌或辐照灭菌。在一些实施方式中，灭菌采用湿热灭菌，有利于操作和获得性能稳定的产品。

所述灭菌的时间可以为10-30分钟。

在一些实施方式中，所述湿热灭菌的具体条件为在105℃-126℃在湿热灭菌器中灭菌10分钟-30分钟，优选在115℃-126℃或在121℃在湿热灭菌器中灭菌10分钟-20分钟。

上述方法中，过滤可以采用聚醚砜等微孔滤膜，孔径可以为0.2μm-0.8μm，如0.22μm，0.45μm，0.5μm，或0.6μm等。根据本发明的实施例，所述微孔滤膜优选孔径为0.2μm-0.5μm的滤膜。

上述方法中，调节pH时可将pH值控制为6-9或6.5-8.5；优选7-8，进一步优选7.3-7.5或7.4。

在一些实施方式中，一种制备前述的组合物的方法，包括：

1)将透明质酸钠，氯化钠和水在20℃-70℃搅拌混匀，用缓冲剂或其水溶液调节pH值为7.3-7.5，然后湿热灭菌，再降至室温，得到混合液；

2)将氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和水在室温搅拌混匀，经0.22μm聚醚砜过滤器过滤，得到滤液；和

3)将步骤1所得混合液，步骤2所得的滤液和水在室温搅拌混匀；任选地，用经0.22μm聚醚砜过滤器过滤的缓冲剂水溶液调节，使混合溶液的pH值为7.3-7.5；得到组合物。

本发明提供的制备组合物的方法，可以将组合物制备成注射剂，也可以制备成外用制剂。

所述制备组合物的方法，简便、可控，易于操作，可以简便地获得组合物，并且使组合物中的成分不会发生降解、变性等不符合质量要求的现象。

具体实施方式

术语“包含”或“包括”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。

本发明中，任选表示可以有也可以没有，如任选含有丙二醇表示可以含有丙二醇，也可以不含丙二醇。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“一些实施方式”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

本发明中，室温为环境温度，在20℃-30℃，或者22℃-28℃，或者25℃。

本发明中，“多种”表示两种或两种以上。

本发明中，透明质酸或其药学上可接受的盐的分子量以重均分子量计。

本发明中，组分的含量计算方法为：组合物中组分的重量/组合物中水的体积，如透明质酸钠含量为5mg/ml，表示每1ml水含有透明质酸钠5mg。

为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例，对本发明作进一步的详细说明。

实施例1

配方组分及其含量比例见表1，其中，透明质酸钠分子量及其质量比为：20万Da:106万Da:240万Da＝6.5:5.5:3。

表1：组合物处方

制备方法：

1)按照配方比例，将透明质酸钠，氯化钠和约60％注射用水在40℃-50℃搅拌混匀，降至室温；

2)将按照配方比例，将氨基酸，抗氧剂，维生素和约30％注射用水混合，室温搅拌混匀；

3)将步骤1和步骤2所得的溶液及搅拌混匀，用0.2mol/L的磷酸氢二钠水溶液调节pH值至7.4，加入剩余注射用水(扣除与加入的磷酸氢二钠水溶液等体积量的水)，混匀；

4)用氮气压滤和减压过滤，再经0.45μm聚醚砜过滤器过滤，121℃湿热灭菌20min，得到粘稠溶液状透明质酸钠溶液。

实施例2

配方组分及其含量比例见表2，其中，透明质酸钠分子量及其质量比为：24.7万Da:106万Da:221万Da＝6:5:4。

表2：组合物处方

制备可按照方法2-1或方法2-2进行；制备方法2-1：

1)按照配方比例，将透明质酸钠，氯化钠和约60％注射用水在40℃～50℃搅拌混匀，然后在121℃湿热灭菌15min，灭菌结束降至50℃～70℃，再经过氮气压滤、0.5μm聚醚砜过滤器过滤，降温至室温，得到混合液；

2)按照配方比例，将氨基酸，抗氧剂，维生素和约30％注射用水混合，室温搅拌混匀，加入0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液调节pH值至7.5，氮气压滤，经0.22μm聚醚砜过滤器过滤，得到滤液；

3)将步骤1的混合液，步骤2的滤液和剩余注射用水(扣除与加入的磷酸氢二钠水溶液等体积量的水)在室温下搅拌混匀(如必要，可以用经0.22μm聚醚砜过滤器过滤的0.2mol/L磷酸氢二钠溶液再次调节使混合溶液pH值至7.4±0.1)；得到粘稠溶液状透明质酸钠溶液。

制备方法2-2：

1)按照配方比例，将透明质酸钠，氯化钠和约60％注射用水在40℃-50℃搅拌混匀，用0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液调节pH值至7.5，然后在121℃湿热灭菌15min，灭菌后降至室温，得到混合液；

2)按照配方比例，将氨基酸，抗氧剂，维生素和约30％注射用水混合，室温搅拌混匀，然后经0.22μm聚醚砜过滤器过滤，得到滤液；

3)将步骤1所得混合液，步骤2所得的滤液和剩余注射用水(扣除与加入的磷酸氢二钠水溶液等体积量的水)在室温下搅拌混匀(如必要，可以用经0.22μm聚醚砜过滤器过滤的磷酸氢二钠溶液再次调节使混合溶液pH值至7.4±0.1)；得到粘稠溶液状透明质酸钠溶液。

实施例3

配方组分及其含量比例见表3，其中，透明质酸钠分子量及其质量比为：28万Da:110万Da:221万Da＝6.5:5:3.5。

表3：组合物处方

制备方法：同实施例2中的方法2-2，得到性质基本相同的粘稠溶液状透明质酸钠溶液。

实施例4

透明质酸钠分子量及其质量比为：22万Da:110万Da:220万Da＝6:5:4；注射用水100g(按照100mL计)；

1.50g透明质酸钠，0.60g氯化钠，加入约60g注射用水，用0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液调节pH至7.5，在40℃-50℃搅拌混匀，然后在121℃湿热灭菌15min，灭菌后降至室温，得到混合液；

分别取脯氨酸和甘氨酸各0.075g，盐酸赖氨酸、丙氨酸、谷氨酸、丝氨酸、精氨酸、缬氨酸和亮氨酸各0.050g，谷胱甘肽，肌肽，4-氨基丁酸，烟酰胺和硫辛酸各0.005g，维生素C磷酸酯钠0.08g，加入约30g注射用水，在室温搅拌混匀，然后经0.22μm聚醚砜过滤器过滤，得到滤液；

将上述混合液和滤液及剩余注射用水(扣除与加入的磷酸氢二钠水溶液等体积量的水)在室温搅拌混匀；得到粘稠溶液状透明质酸钠溶液。

实施例5

透明质酸钠分子量及其质量比为：26万Da:106万Da:225万Da＝6:5:4；注射用水100g(按照100mL计)；

1.50g透明质酸钠，0.60g氯化钠，磷酸氢二钠0.086g和约60g注射用水在40℃-50℃搅拌混匀，然后在121℃湿热灭菌15min，灭菌后降至室温，得到混合液；

分别取脯氨酸、甘氨酸、盐酸赖氨酸、丙氨酸、谷氨酸、丝氨酸、精氨酸、缬氨酸和亮氨酸各0.050g，谷胱甘肽，肌肽，4-氨基丁酸，烟酰胺和硫辛酸各0.005g，维生素C磷酸酯钠0.12g，加入约30g注射用水，在室温搅拌混匀，然后经0.22μm聚醚砜过滤器过滤，得到滤液；

将上述混合液和滤液及剩余注射用水在室温搅拌混匀；得到粘稠溶液状透明质酸钠溶液。

实施例6

组分及其含量同实施例2，透明质酸钠分子量及其质量比见表4：

表4：透明质酸钠分子量及其质量比

透明质酸钠	分子量(万道尔顿)	分子量(万道尔顿)	分子量(万道尔顿)
				质量比：1:1:1	26.3	55	221
质量比：1:1:1	30.6	81.2	121
				质量比：1:1:1	25	110	220
质量比：1:1:1	60	130	280

制备方法：同实施例2的方法2-2；发现随分子量增大，制备过程中需要提高温度或者延长搅拌时间，才能使透明质酸钠溶解(根据公开的文献报道，分子量过低，透明质酸钠在体内更容易被分解，维持时间缩短；透明质酸钠分子量大有助于在体表、体内维持更长时间)，不同分子量最终得到的产物在粘稠度和抗衰老作用上也具有差别。考虑产品的制备和产品的功效，优选分子量为20万道尔顿-30万道尔顿，90万道尔顿-120万道尔顿和200万道尔顿-240万道尔顿的透明质酸钠的组合，优选其质量比为(5-7):(4-6):(3-5)。

以下实施例7-实施例8中，

各样品分组如表5：

表5：各样品分组

样品	样品信息
		对照组	空白组
A组	丝丽抗皱精华液，5ml/瓶(厂家：润维他化妆品有限公司)
		B组	菲洛嘉青春精华液加强型，5ml/瓶(厂家：法国菲洛嘉胚胎活细胞研究中心)
C组	英诺皮肤世家慕颜莹润精华液，5ml/瓶(厂家：西班牙英诺皮肤世家公司)
		D组	本发明组合物，使用实施例4所得产品

各组样品浓度基于透明质酸或透明质酸钠总质量计算，如样品中是含透明质酸则以透明质酸计算，如样品中是含透明质酸钠，则以透明质酸钠计算，如样品中是含有透明质酸和透明质酸钠，则以二者总量计算。

完全培养基配制方法：DMEM高糖培养基+15％FBS(胎牛血清)+1％PS(青霉素100U/mL和链霉素100μg/mL)。

PBS：磷酸盐缓冲液，pH为7.2-7.4。

CCK-8用于细胞增殖检测的原理：CCK-8化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐，在电子载体PMS的存在下可被细胞线粒体中的脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲瓒产物。对于平行培养的同种细胞，活细胞的数量与甲瓒生成量成正比，细胞增殖越快、状态越好，甲瓒转化量越多、颜色越深，测定450nm下的吸光值，生成的甲臜的量与活细胞数量成正比，利用这一特性可进行细胞增殖和毒性检测分析。

实施例7：对人皮肤成纤维细胞HFF-1增殖的影响

取适宜代数、状态良好的HFF-1细胞，胰酶消化后加入完全培养基终止消化，800-1000rpm/min离心5min，弃去上清液，加入完全培养基重悬细胞；按每孔100μl细胞悬液接种于96孔板，细胞密度为5000个/孔(用于CCK-8实验)，每组设5个复孔，四周孔加入200μLPBS；待细胞贴壁后，分别加入待测物质，其中，对照组：培养基；A组-D组：分别加入100μl含有A组-D组分的培养基，样品用培养基稀释至终浓度分别为0.0005mg/ml，0.005mg/ml，0.5mg/ml；然后37℃、5％CO₂条件下培养24h(小时)、48h；用CCK-8法测定细胞增殖率；HFF-1细胞存活率结果参见:表6。

表6：HFF-1细胞存活率结果

根据上述实验结果可以看出：在24h，三种浓度下，D组(本发明组合物)较A、B、C三组对HFF-1细胞具有更明显的增殖作用，在48h，0.005mg/ml，0.5mg/ml条件下，D组(本发明组合物)对HFF-1细胞具有相对明显的增殖作用。

实施例8：对B16细胞(小鼠黑色素瘤细胞)增殖影响

取适宜代数、状态良好的B16细胞，胰酶消化后加入完全培养基终止消化，800-1000rpm/min离心5min，弃上清液，加入完全培养基重悬细胞；按每孔100μl细胞悬液接种于96孔板，细胞密度为5,000个/孔(用于cck-8实验)，四周孔内加入200μL PBS，每组设5个复孔；待细胞贴壁后，加入待测品，其中，对照组：完全培养基(不含待测物质，即浓度计为0)；A组-D组：分别加入100μl含有A组-D组分的培养基，样品用培养基稀释至终浓度分别为0.0005mg/ml，0.005mg/ml，0.5mg/ml或1mg/ml；然后37℃、5％CO₂条件下培养12h(小时)、24h；用CCK-8法测定细胞增殖率；细胞存活率结果见下表7。

表7：细胞存活率结果

根据检测结果可知，各浓度下，作用12h和24h，D组中黑色素瘤细胞具有相对其他组更低的存活率，即D组(本发明组合物)样品相对其他组样品具有更好的抑制黑色素生成作用，更有利于美白，减少皮肤色素沉着和抵抗皮肤衰老。

本发明其他实施例产品采用上述方法检测，也发现具有较好的促成纤维细胞增殖和抑制黑色素细胞生成作用，其中，配方1的产品相对D组较差，配方4的产品相对D组略差，其他配方和实施例5产品与D组促成纤维细胞增殖和抑制黑色素生成作用相当。

根据实施例的结果可知，采用本发明所述的分子量的透明质酸钠，配以本发明所述含量范围的各组分，能够得到具有较好的抗衰老作用和稳定的透明质酸钠溶液。

本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在本发明内容和范围内对本文所述的方案或应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进条件/参数来实现和/或应用本发明技术。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明内。

Claims

1.一种组合物，包括：透明质酸或其药学上可接受的盐，氨基酸或其药学上可接受的盐，抗氧剂，维生素或其衍生物和调节剂；其中，所述氨基酸包括甘氨酸和脯氨酸；所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为90万道尔顿-120万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为180万道尔顿-250万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，按照分子量低中高的顺序，不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的质量比为(5-7):(4-6):(3-5)。

2.权利要求1所述的组合物，包括透明质酸药学上可接受的盐，透明质酸药学上可接受的盐为透明质酸的钠盐，钾盐，锌盐，镁盐或钙盐；和/或

所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为90万道尔顿-120万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为200万道尔顿-240万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合；和/或

所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为24.7道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为106万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为221万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，或所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为22万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为110万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为220万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合，或所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为26万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为106万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为225万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合。

3.权利要求1-2任一所述的组合物，所述氨基酸还包括苏氨酸，异亮氨酸，色氨酸，苯丙氨酸，组氨酸，酪氨酸，鸟氨酸，胱氨酸，蛋氨酸，赖氨酸，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸中的至少一种；和/或

所述抗氧剂包括谷胱甘肽，L-肌肽，硫辛酸，4-氨基丁酸，丙二醇，甘露糖醇，环己六醇六磷酸，环己六醇六磷酸钠盐，茶多酚，3,4,5-三羟基苯甲酸丙酯，特丁基对苯二酚，2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，丁基羟基茴香醚，竹叶抗氧化物，甘草抗氧化物，迷迭香提取物和绿茶提取物中的至少一种；和/或

所述维生素包括维生素A，B族维生素，维生素C，维生素D和维生素E中的至少一种；和/或

所述组合物包括维生素C的衍生物，所述衍生物选自维生素C磷酸酯钠，维生素C磷酸酯镁，维生素C磷酸酯钙，抗坏血酸棕榈酸酯，L-抗坏血酸硬脂酸酯，抗坏血酸葡糖苷，抗坏血酸棕榈酸酯磷酸盐，抗坏血酸四异棕榈酸酯，2-O-乙基抗坏血酸，3-O-乙基抗坏血酸醚和氨基丙醇抗坏血酸磷酸酯中的至少一种；和/或

所述组合物包括维生素C的衍生物，所述维生素C的衍生物包括维生素C磷酸酯钠；和/或

所述抗氧剂包括谷胱甘肽，L-肌肽和硫辛酸，任选包括丙二醇或甘露糖醇。

4.权利要求1-3任一所述的组合物，其中，所述调节剂包括缓冲剂；所述缓冲剂选自氯化钠，盐酸，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠或其水合物中的一种或多种，或者所述缓冲剂是由氯化钠，盐酸，磷酸二氢钠，磷酸氢二钠或其水合物和氢氧化钠中的一种或多种配制成的缓冲水溶液，或者所述缓冲剂为磷酸氢二钠或其水合物。

5.权利要求1-4任一所述的组合物，包括选自以下条件中的至少之一：

(a)所述氨基酸包括甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；

(b)所述抗氧剂包括谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸；

(c)所述维生素包括烟酰胺和维生素C磷酸酯钠；

(d)调节剂包括氯化钠和缓冲剂；

(e)组合物包括透明质酸钠，所述透明质酸钠为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸钠，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸钠和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸钠的组合，或者所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为22万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为110万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为220万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合；

(f)按照分子量低中高的顺序，不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的质量比为(5.5-6.5):(4.5-5.5):(3.5-4.5)或6:5:4；

(g)组合物包括透明质酸钠，所述透明质酸钠为分子量为20万道尔顿-30万道尔顿的透明质酸钠，分子量为96万道尔顿-116万道尔顿的透明质酸钠和分子量为210万道尔顿-230万道尔顿的透明质酸钠的组合，或者所述透明质酸或其药学上可接受的盐为分子量为22万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐，分子量为110万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐和分子量为220万道尔顿的透明质酸或其药学上可接受的盐的组合；按照分子量低中高的顺序，所述不同分子量的透明质酸或其药学上可接受的盐的质量比为(5.5-6.5):(4.5-5.5):(3.5-4.5)或6:5:4；

(h)所述组合物的pH为6.5-8.5；和

(i)所述组合物为注射剂或外用制剂。

6.权利要求1-5任一所述的组合物，包括：透明质酸和/或透明质酸钠；甘氨酸，脯氨酸，赖氨酸或其盐，缬氨酸，丙氨酸，亮氨酸，谷氨酸，丝氨酸和精氨酸；谷胱甘肽，L-肌肽，4-氨基丁酸和硫辛酸；烟酰胺，维生素C磷酸酯钠，氯化钠和缓冲剂；所述组合物的pH为7-8。

7.权利要求1-6任一所述的组合物，基于组合物中水的体积，所述透明质酸或其药学上可接受的盐的含量为3mg/mL-21mg/mL，所述氨基酸或其药学上可接受的盐的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL，所述抗氧剂的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL，所述维生素或其衍生物的含量独立地为0.001mg/mL-10mg/mL。

8.权利要求1-6任一所述的组合物，基于组合物中水的体积，所述透明质酸或其药学上可接受的盐的含量为10mg/mL-20mg/mL，所述氨基酸或其药学上可接受的盐的含量独立地为0.01mg/mL-1mg/mL，所述抗氧剂的含量独立地为0.01mg/mL-1mg/mL，所述维生素或其衍生物的含量独立地为0.01mg/mL-2mg/mL。

9.一种制备权利要求1-8任一所述的组合物的方法，包括以下步骤：

1)将透明质酸或其药学上可接受的盐，氯化钠和水在10℃-90℃搅拌混匀；

3)将步骤1和步骤2所得的混合液和水在10℃-30℃搅拌混匀，用缓冲剂或其水溶液调节pH值；和

4)灭菌，得到组合物；其中，灭菌前任选过滤；

或者包括以下步骤：

1)将透明质酸或其药学上可接受的盐，氯化钠和水在10℃-90℃搅拌混匀，然后灭菌，过滤，滤液降至10℃-30℃；

3)将步骤1和2所得的滤液和水在10℃-30℃搅拌混匀，得到混合液，其中，任选用缓冲剂或其水溶液调节pH值；得到组合物；

或者包括以下步骤：

10.根据权利要求9所述的方法，包括选自以下条件中的至少之一：

(a)所述pH值为7-8；

(b)过滤时，采用聚醚砜微孔滤膜，孔径为0.22μm-0.8μm；和

(c)所述灭菌为湿热灭菌，湿热灭菌的具体条件为在105℃-126℃在湿热灭菌器中灭菌10分钟-30分钟。