KR101055153B1 - 가수분해 콜라겐 펩타이드를 안정화한 나노리포좀과 비타민ｃ를 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 가수분해 콜라겐 펩타이드를 안정화한 나노리포좀과 비타민 C를 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 콜라겐을 효소 처리하여 저분자화된 가수분해 콜라겐 펩타이드를 만들어 피부에 공급해 줌으로써 피부의 보습력을 향상시키고 ECM(Extra celluar matrix) 내의 콜라겐 합성을 촉진시켜 피부 주름을 개선시키고 피부에 탄력을 증진시켜 피부 노화를 방지한다. 또한 비타민C가 각질층에 경피적으로 공급됨으로서 피부 광택, 피부색 개선, 주름 감소, 피부 탄력 증가 등의 시너지 효과를 줌으로서 피부 노화를 효과적으로 방지해 준다. 더욱이, 본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드는 나노리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부 침투 효과가 크게 증가하고 유효성분의 효과가 극대화되며, 제형의 안정성도 크게 개선되는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

가수분해 콜라겐 펩타이드, 비타민C, 피부 노화, 주름 개선, 탄력 개선, 나노리포좀, 화장료

Description

가수분해 콜라겐 펩타이드를 안정화한 나노리포좀과 비타민 Ｃ를 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물{A anti-aging cosmetic Composition containing Hydrolysis Collagen Peptide stabilized in nano-liposome and Vitamin C}

본 발명은 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민 C를 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 콜라겐을 효소 처리하여 저분자화된 가수분해 콜라겐 펩타이드를 만들어 피부에 공급해 줌으로써 피부의 보습력을 향상시키고 ECM(Extra celluar matrix) 내의 콜라겐 합성을 촉진시켜 피부 주름을 개선시키고 피부에 탄력을 증진시켜 피부 노화를 방지한다. 또한 비타민C가 각질층에 경피적으로 공급됨으로서 피부 광택, 피부색 개선, 주름 감소, 피부 탄력 증가 등의 시너지 효과를 줌으로서 피부 노화를 효과적으로 방지해 준다. 더욱이, 본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드는 나노리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부 침투 효과가 크게 증가하고 유효성분의 효과가 극대화되며, 제형의 안정성도 크게 개선되는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

인체를 이루고 있는 가장 큰 기관인 피부는 나이가 들거나 외부의 자극에 지 속적으로 노출되게 되면 피부가 손상되고, 생리 기능이 저하 되는 등 노화가 빠르게 진행된다. 이러한 피부 노화는 나이가 들어감에 따라 필연적으로 발생하지만, 여러 가지 환경 요인에 의해 피부 노화의 발생 요인이 증가하고, 생활 수준 향상으로 삶의 질에 대한 요구가 증대되고 있는 지금에 들어서는 피부 노화에 대한 대책이 절실히 요구되고 있다.

노화에 수반하는 피부의 외관 변화 중 가장 두드러진 것은 주름이다. 원래 노화 현상에 의한 주름은 피부 진피층의 콜라겐과 탄력 섬유의 소실로 인해 피부 표면에 생기는 골이라고 정의할 수 있다. 피부 주름은 진피층에 존재하는 콜라겐 교원섬유에 의해 결정되는데, 콜라겐 분자는 섬유 아세포에서 생성되어 진피층으로 분비 된 후, 자동회합에 의해 콜라겐 섬유로 형성된다(Implant dentistry. 2002. 11(3):280-285). 콜라겐 섬유는 피부 진피층에서 피부의 기계적 견고성, 조직의 결합력, 세포와의 부착 및 세포 분화 등에 관여한다 (Journal of the American Academy of Dermatology, 2001, 17(4):610-613). 이러한 콜라겐이 내적 요인 및 외적 요인에 의해 생성이 감소하거나 변형이 지속적으로 축적되게 되면 주름생성의 원인이 된다 (Clinics in geriatric medicine, 2001, 17(4):617-630).

종래에 생체 내 콜라겐의 합성이 활발해지면 진피 기질 성분이 증가되어 상처 치유, 탄력 증가, 주름 개선 등의 효과를 기대할 수 있다는 것이 밝혀지면서 많은 제품에 사용되고 있다. 특히 피부 재생 효과가 밝혀진 펩타이드는 프랑스 특허 제2,668,265호, 미국 특허 제4,665,054호, 제WO91/3488호, 제WO91/7431호 등에 공지되어 있다. 그러나, 이러한 펩타이드들의 경우 침전이 형성되어 제품의 안정도가 크게 저하되는 단점이 있다.

콜라겐 합성 촉진물질로 기존에 레티노인산(retinoic acid), TGF(trans- forming growth factor, 발암증식인자; Cardinale G. et al., Adv. Enzymol., 41, p. 425, 1974), 동물 태반 유래의 단백질 (JP8-231370), 베툴린산(betulinic acid(JP8-208424)), 클로렐라 추출물(JP9-40523, JP10-36283, 섬유아세포 증식 촉진작용) 등이 알려져 있다. 그러나 레티노인산의 경우 불안정하고, 피부 적용 시 자극, 발적 등의 안정성 문제로 사용량의 제한이 있으며, 클로렐라 추출물 등은 효과가 미미하여 실질적으로 피부의 콜라겐 합성을 촉진하여 피부 기능 개선 효과를 기대할 수 없다. 따라서, 생체에 안전하고 기존의 콜라겐 합성능 촉진 물질보다 효과가 높은 새로운 콜라겐 합성 촉진제의 개발이 절실히 요망되고 있다.

본 발명자들은 콜라겐 펩타이드를 이용한 효과적인 피부 노화 방지 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 1000이하 크기의 저분자화 된 가수분해된 콜라겐 펩타이드가 기존의 콜라겐(분자량이 약 30만)에 비해 피부 흡수율이 좋고, ECM 내의 콜라겐 합성을 촉진시키며, 피부 보습력 개선 효과가 훨씬 뛰어남을 알아내었고, 비타민C가 삼중 나선 구조의 콜라겐 생합성을 촉진하여 피부 개선 효과를 가짐으로서 피부 주름 형성 억제의 시너지 효과가 있음을 알게 되었다. 더욱이 나노리포좀화 된 콜라겐 펩타이드의 경우 피부 침투 효과가 크게 증가하고, 화장료 조성물 내에서 안정하게 유지되며, 피부 적용 시 주름 발생, 탄력 감소 및 보습능 상실 등 복합적인 피부 노화 현상을 해소함으로서 뛰어난 피부 노화 방지 효과가 있는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명은 상술한 문제를 해결하기 위하여 안출된 것으로 다음과 같은 수단을 포함한다.

본 발명의 일 실시 에에 따른 피부 노화 방지용 화장료 조성물은 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 다른 실시 예에 따른 피부 노화 방지용 화장료 조성물은 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀은 화장료 조성물 총 중량에 대해서 0.1 ~ 50.0중량 %로 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시 예에 따르면, 상기 나노리포좀의 평균 입자 지름은 30-70 nm인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시 예에 따르면, 가수분해 콜라겐 펩타이드는 나노리포좀 총중량에 대하여 0.1 ~ 20.0 중량%로 함유되는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시 예에 따르면, 상기 가수분해 콜라겐 펩타이드의 분자량은 50 ~ 1000 으로 형성되는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시 예에 따르면, 가수분해 콜라겐 펩타이드는 i) 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선 또는 ii) 보습력 향상을 나타내는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 실시 예에 따른 피부노화 방지용 화장료 조성물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제의 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 화장료 조성물은 콜라겐을 효소처리하여 저분자화함으로써 50~1000의 크기의 가수분해 콜라겐 펩타이드를 만들어 피부에 공급해 줌으로써 피부의 보습력을 향상시키고 ECM(Extra celluar matrix) 내의 콜라겐 합성을 촉진시 켜 피부 주름을 개선시키고 피부에 탄력을 증진시켜 피부 노화를 방지한다. 또한 비타민C가 피부 내의 콜라겐 합성을 촉진하고 분해를 억제하여 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선에 시너지 효과를 가져옴으로써 피부 노화를 효과적으로 방지한다. 더욱이, 본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드는 나노리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부 침투 효과가 크게 증가하고 유효성분의 효과가 극대화되며, 제형의 안정성도 크게 개선되는 효과를 도모한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 보습력 향상, 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선에 시너지 효과를 가져옴으로써 피부 노화를 효과적으로 방지하기 위하여 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 포함할 수 있다.

본 명세서에서, 용어 “나노리포좀”은 통상적인 리포좀의 형태를 갖는 것으로서 평균 입자 지름이 1-100 nm인 리포좀을 의미한다. 캡슐적 성질을 가지는 리포좀은 생리 활성 물질들을 포획함으로서 캡슐화하는 전달체로 사용된다.　본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 나노리포좀의 평균 입자 지름은 바람직하게는 피부침투의 개선 및 제형 안정성을 위하여 30-70 nm로 형성되는 것이 적합하다.

본 발명의 나노리포좀은 가수분해 콜라겐 펩타이드, 폴리올, 계면활성제, 인지질, 지방산 및 물을 포함하는 혼합물에 의해 형성될 수 있다.

본 발명에서 이용되는 가수분해 콜라겐 펩타이드는 분자량이 대략 30만 정도인 콜라겐에 단백질 분해효소를 처리하여 일정 분자량, 바람직하게는 피부침투가 용이하도록 분자량이 50~1000으로 형성될 수 있고, 구체적으로 우피, 건조된 소의 뼈, 돈피 등을 초핑하여 콜라겐의 원료를 준비하고, 상기 콜라겐의 원료에 물을70 : 30 내지 50 : 50의 비율로 혼합한 다음, 상기 콜라겐의 원료의 용액의 pH를6.5 내지 8.5로 조절한 후, 상기 콜라겐의 원료에 대하여 0.1 내지 1중량%의 단백질 가수분해 효소를 첨가하여 25 내지 50℃에서 효소 처리 후 처리된 콜라겐 용액을 여과하여 이물질을 제거한 후, 진공 농축, 살균 및 건조하여 가수분해 콜라겐 펩타이드를 수득할 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 가수분해 콜라겐 펩타이드는 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.1―20.0중량％이며, 바람직하게는 4.0―12.0 중량％이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 폴리올은 특히 제한되지 않으며, 바람직하게는 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 메틸프로판디올, 이소프렌글리콜, 펜틸렌글리콜, 에리스리톨, 자이리톨 및 솔비톨을 포함하며, 가장 바람직하게는 프로필렌 글리콜이다.　그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 10-80 중량%, 바람직하게는 30-70 중량%이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 계면활성제는 당업계에 공지된 어떠한 것도 사용할 수 있으며, 예를 들어, 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용될 수 있고, 바람직하게는 음이온성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용된다. 음이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알킬아실글루타메이트, 알킬포스페이트,알킬락틸레이트, 디알킬포스페 이트 및 트리알킬포스페이트를 포함한다. 비이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알콕시레이티드알킬에테르, 알콕시레이티드알킬에스테르, 알킬폴리글리코사이드, 폴리글리세릴에스테르 및 슈가에스테르를 포함한다. 가장 바람직하게는, 비이온성 계면활성제에 속하는 폴리솔베이트류가 이용된다.　계면활성제의 사용량은, 일반적으로 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.1-10 중량%이고, 바람직하게는 0.5-5.0 중량%이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 또 다른 성분인 인지질은 양쪽친화성 지질로 이용된 것으로서, 천연 인지질 (예: 난황 레시틴 또는 대두 레시틴, 스핑고마이엘린) 및 합성 인지질 (예: 디팔미토일포스파티딜콜린 또는 수첨 레시틴)을 포함하며, 바람직하게는 레시틴이다.　보다 바람직하게는, 상기 레시틴은 대두 또는 난황에서 추출한 천연 유래의 불포화 레시틴 또는 포화 레시틴이다. 통상적으로 천연 유래의 레시틴은 포스파티딜 콜린의 양이 23-95%, 그리고 포스파디딜에탄올아민의 양이 20% 이하이다.　본 발명의 나노리포좀의 제조에 있어서, 레시틴의 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.5~20 중량%이며, 바람직하게는 2-8 중량%이다.

본 발명의 나노리포좀 제조에 이용되는 지방산은 고급 지방산으로서, 바람직하게는 C_12-22 알킬 체인의 포화 또는 불포화 지방산으로서, 예컨대, 라우린산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아린산, 올레산 및 리놀레산을 포함한다. 그 사용량은　 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.05-3.0 중량%이고, 바람직하게는 0.1-1.0 중량%이다.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 물은 일반적으로 탈이온화된 증류수이며, 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 5.0-40 중량%이다.

나노리포좀의 제조는 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 이루어질 수 있으나, 가장 바람직하게는 상기 성분들을 포함하는 혼합물을 고압 호모게나이저에 적용하여 제조된다.　고압 호모게나이저에 의한 나노리포좀의 제조는 소망하는 입자 크기에 따라 다양한 조건 (예: 압력, 횟수 등)으로 실시할 수 있으며, 바람직하게는 600-1200 bar 압력 하에서 1-5회 고압 호모게나아저를 통과하도록 하여 나노리포좀을 제조한다.

이렇게 제조된 나노리포좀 시스템은 여러 종류의 난용성 물질을 녹임과 동시에 불안정한 물질을 안정화시켜 피부침투효과를 극대화 하는 장점을 가지고 있다.

본 발명에서 이용되는 가수분해한 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.1∼50.0중량%의 양으로, 바람직하게는 1.0∼30.0중량%의 양으로 배합하는 것이 적합하다. 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀의 함량이 0.1중량% 미만인 경우는 성분의 효능을 거의 나타내지 못하며 50중량% 이상인 경우에는 함량의 증가에 따른 효과의 증대치가 미미하고 조성물 색상이 바람직하지 못하며 변성될 가능성이 높아진다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 가수분해 콜라겐 펩타이드 나노리포좀 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체 등을 포함할 수 있다.

본 발명에서 이용되는 비타민C는 피부 노화를 억제시키는 효과가 있는 성분으로 자외선(UV) 차단 효과, 항산화 효과, 콜라겐 형성 촉진을 통한 피부 주름 개선, 색소 침착개선 효과, 면역 체계 강화 등을 갖는 것으로 알려져 있다.

상기 비타민C는 수용성 물질로 수용액이 아닌 피부와 같은 유기적인 환경에서는 용해도에 제한이 있다. 또한 비타민 C는 통상적으로 사용되는 유기용매, 예를 들어 글리세린, 프로필렌 글리콜, 다양한 지방(fat)등에 잘 녹지 않아서, 비타민C를 피부로 운반하는데 한계가 있다. 즉, 비타민C가 이온화 되지 않았을 때 피부 장벽을 쉽게 통과하여 흡수시 비이온 상태를 유지하기 위해서는 pH가 4.2이하여야 한다는 제한점이 있다.

또한, 비타민C의 피부 축적양은 경구 투여보다 외용제로 사용하였을 때 20배 내지 40배 정도 높은 것으로 알려졌다. 자외선 차단 효과, 항산화 효과, 콜라겐 형성 촉진을 통한 피부 주름 개선 효과, 색소 침착 개선 효과, 면역 체계강화 효과 등을 도모하기 위한 목적으로 사용하는 피부 외용제의 경우 유효물질이 피부의 각질층을 통과하여 표피에 있는 세포까지 도달할 것을 필요로 하므로, 유효 물질의 경피 흡수율이 높아야 한다. 피부의 친유성과 유사한 물질인 경우 피부로의 분배 계수가 커져 경피 흡수가 잘 되는 것으로 알려져 있는데, 비타민C의 경우는 친수성이 높아 피부로의 분배가 낮아져서 경피 흡수가 어렵다.

상기한 바와 같이 비타민 C는 다양한 효과를 나타내지만, 안전성, 안정성, 피부 흡수가 낮기 때문에 이를 개선하기 위한 많은 연구가 진행되어 왔다.

그 중 콜라겐 생성 펩타이드가 결합된 형태의 아스코르브산을 제공하는 것으 로 한국 특허 제0459679호는 아스코르브산의 5번 또는 6번 탄소의 하이드록시기에 숙시노일기를 에스테르 결합으로 연결하고 콜라겐 생성 펩타이드와 이미드 결합하여 유도체화 한 것을 기재하고 있으며, 위와 같은 아스코르브산 유도체는 아스코르브산보다 우수한 효능을 보이나 안전성이 지속적이지 못하다는 단점이 있다.

따라서 화장료로서 비타민C의 안전성과 안정성을 개선하고 우수한 피부 침투력을 제공하기 위해 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀 시스템을 이용하여 비타민C를 안정화 시키고 피부 침투 효과를 극대화 시켜 피부 노화 현상을 해소할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 상기 비타민C를 전체 화장료 조성물에 대하여 0.001 내지 20.0 중량%로 포함하는 것이 좋다. 본 발명의 화장료 조성물이 0.001 중량 미만으로 포함할 경우에는 화장료 조성물의 콜라겐 합성 촉진, 콜라겐 분해 억제 및 피부노화 방지 효과가 미미하며 20.0 중량%를 초과하여 투입할 경우에는 초과투입에 따른 상승 효과가 적어 경제적이지 못하다. 더욱 바람직하기로는 본 발명의 화장료 조성물이 비타민C를 0.01 내지 10.0 중량%, 더더욱 바람직하게는 0.1-5.0 중량%를 포함하는 것이 좋다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선, 보습력 향상을 통하여 피부 노화를 방지하며, 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명시되어 있다.　따라서, 본 발명의 용도인 피부 노화 방지는 주름 개선, 보습력 개선 및 피부 탄력 개선 용도를 포함하는 것으로 해석된다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제 형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이크림, 영양크림, 마사지크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 파우더, 에센스, 팩 등 그 제형에 있어 특별히 한정되지 않고 화장료의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 제조될 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다.　이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다. 배합량은 중량%로 나타낸다.

제조예 1: 가수분해 콜라겐 펩타이드의 제조

냉장 처리된 돈피를 파쇄기로 초핑하여 콜라겐의 원료를 준비한 후, 물과 상기 콜라겐을 40 : 60의 중량비로 균일하게 혼합한 다음 상기 콜라겐 용액의 pH를 7로 조절한 후, 상기 콜라겐의 원료에 대하여 0.5중량%의 단백질 가수분해 효소를 첨가하여 35℃에서 6시간 효소 처리하면서 콜라겐의 점도 측정을 통하여 분자량이 800정도가 되면 온도를 100℃로 30분간 가열하여 여분의 효소를 실활 시킨 후 실온으로 냉각하고, 500메쉬의 체를 이용하여 불용성 물질을 제거하였다. 효소 처리된 콜라겐 추출물을 10000rpm에서 원심분리하여 수용액 상태인 상등액만을 분리하고 필터프레스 여지필터를 사용하여 여과한 다음 농도 40%까지 진공 농축하였다. 농축된 콜라겐을 UHT TYPE 살균기를 이용하여 121℃에서 0.8초 동안 연속적으로 순간 살균한 후 스프레이 드라이어를 이용하여 건조하여 가수분해 콜라겐 펩타이드를 제조하였다.

제조예 2: 가수분해 콜라겐을 함유하는 나노리포좀의 제조

나노리포좀은 하기 표 1의 조성으로 A상에 B상을 첨가하고, 균일하게 습윤 시킨 후 C 상을 첨가하고 70-80℃까지 가열 혼합하였다.　이 용액을 600-1000 bar의 조건으로 고압 호모게나이저에 2-4회 통과 시킨 후 냉각하여 지름 30-70 nm 입자 크기의 가수분해 콜라겐을 안정화시킨 나노리포좀을 얻었다.

상	성　 분	함량 (중량%)
A	프로필렌 글리콜	40
B	레시틴	5
	콜레스테롤	2.5
	세라마이드	2.5
	소듐스테아로일 락테이트	0.5
	폴리솔베이트-80	0.5
	스테아린산	0.5
C	가수분해 콜라겐	10
	수산화 칼륨	적량
	정제수	To 100

실시예 및 비교예의 제조

하기 표 2의 조성비를 가지는 화장료 조성물에 상기의 가수분해 콜라겐을 안정화시킨 나노리포좀과 비타민C를 함유하는 실시예 및 비교예1 내지 4를 다음의 조성으로 제조하였다.

성 분		실시예	비교예 1	비교예 2	비교예 3	비교예 4
		함량(중량%)	함량(중량%)	함량(중량%)	함량(중량%)	함량(중량%)
나노리포좀 (제조예2)		20	20		-	-
가수분해 콜라겐		-	-	-	2.0	-
비타민C		2.0	-	2.0	-	-
A	세토스테아릴알콜	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
	글리세릴스테아레이트	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
	마이키로크리스탈린	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7
	스쿠알란	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	유동파라핀	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
	트리옥타노인	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	폴리솔베이트	1.2	1.2	1.2	1.2	1.2
	솔비탄스테아레이트	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
	토코페롤아세테이트	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
	마이크로메치콘	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
	BHT	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
B	글리세린	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
	1,3-부틸렌글리콜	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
	EDTA-2Na	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
	정제수	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100
향, 방부제		적량	적량	적량	적량	적량

실험예 1: 보습 효과

상기 실시예 및 비교예1 내지 4에서 제조된 각 화장료의 보습력을 평가하기 위하여, 각 화장료가 도포된 피부를 대상으로 하여 수분 보유능 및 수분 증발량을 다음과 같이 측정하였다.

실험예 1-1: 수분 보유능의 측정

22℃ 및 상대습도 45%의 항온 항습실에서 상기 실시예 및 비교예1 내지 4에서 제조된 각 화장료를 40명의 피시험자 하박 안쪽에 일정량 (0.03 g/16 ㎠)을 도포하고, 도포전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분 함량을 측정하였으며, 아무런 처리를 하지 않은 정상 피부를 대조군으로 사용하였다.　측정 기기는 피부의 수분 함량에 따른 피부의 전기 용량을 측정하여 보습력을 측정하는 수분 함량측정기(corneometer CM825, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 사용하였다.　그 결과는 하기 표 3에 나타나 있다.

구 분	실시예	비교예 1	비교예 2	비교예 3	비교예 4	대조군
도포전 피부 전기전도도	48.2	48.1	48.2	48.3	48.1	48.2
도포 1시간후 피부 전기전도도	91.4	86.7	74.9	80.2	68.3	48.4
도포 2시간후 피부 전기전도도	83.2	75.4	61.2	69.4	55.1	48.3

실험예 1-2: 수분 증발량의 측정

팔의 상박 부위에 테입 스트리핑 (tape stripping)을 실시하여 피부의 방어막을 약화시킨 후, 실험예 5-1과 동일한 방법으로 피실험자에게 각 화장료를 도포한 후, 수분증발량기(Tewameter TM300, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 이용하여 12 시간마다 1분 간격으로 5회씩 수분 증발량을 측정하여 평균값을 구하였다.　그 결과는 하기 표 4과 같다.

구　 분	실시예 (%)	비교예 1(%)	비교예 2(%)	비교예 3(%)	비교예 4(%)	대조군(%)
0시간후　수분 증발량	100	100	100	100	100	100
12시간후 수분 증발량	70.6	74.4	79.0	79.5	89.2	92.1
24시간후 수분 증발량	50.5	55.1	60.3	61.5	74.9	85.1
36시간후 수분 증발량	33.0	38.9	47.5	47.9	63.1	77.7
48시간후 수분 증발량	21.1	24.6	27.9	29.4	51.5	71.0

상기 실험예 1-1 및 1-2의 결과에서 보듯이, 본 발명의 실시예 화장료가 비교예1 내지 4의 화장료에 비해서 피부의 전기 전도도가 높고, 적은 수분 손실량을 나타낸다.　따라서, 가수분해 콜라겐을 펩타이드를 포획하여 안정화시킨 나노리포좀과 비타민C를 함유하는 화장료가 매우 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.

실험예 2: 피부탄력효과

본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 함유하는 화장료 조성물의 피부 탄력 증진효과를 측정하였다. 온도 24-26℃, 습도 75의 조건에서 20세 이상의 건강한 여성 50명(평균연령 37세)을 5 그룹으로 나누고, A 그룹에는 실시예를, B 그룹에는 비교 실시예 1을, C 그룹에는 비교 실시예 2를, D 그룹에는 비교 실시예 3을, E 그룹에는 비교 실시예 4의 제형을 눈가를 중심으로 하루 2회씩 (아침 및 저녁) 12주간 도포한 후, 피부탄력 측정기(Cutometer MPA580, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다.　시험결과는 cutometer MPA580의 R8(R8(12주)-R8(0주)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부점탄성 (Vicoelasticity)의 성질을 나타내며, 결과는 하기 표 5에 기재되어 있다.

실험 제형	피부탄력효과
실시예	0.88
비교예 1	0.78
비교예 2	0.71
비교예 3	0.62
비교예 4	0.30

표 5의 결과에서와 같이, 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 함유한 실시예의 피부탄력은 각각을 단독으로 사용한 비교예에 비해 증가함을 확인할 수 있었다.

실험예 3: 피부침투효과

본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 함유한 화장료에 대한 피부침투 효과를 측정하였다.

Dermal Equivalent (DE)-인체 정상 섬유아세포 1 X 10⁵ cell/㎖를 인체의 결합조직을 이루는 섬유조직과 유사한 겔 구조에 콜라겐 수용액 3 mg/㎖:5 X DEM : 2:2 소듐바이카보네이트와 200 mM Hepes 완충액이 포함된 0.05 N 수산화나트륨이 7:2:1로 혼합된 배지에 접종하여 5CO₂, 37℃에서 7일 동안 배양하였다.　이를 3 ㎛ 다공성폴리카보네이트 (porous polycarbonate) 재질로 된 막 (membrane)에 의해 안쪽과 바깥쪽이 구분된 플레이트의 안쪽에 넣고 섬유아세포가 배양된 Derma Equivalent(DE) 표면 위에 표피각질형성세포 (Epidermal Keratinocyte) 1 X 10⁵ cell/㎖ 세포를 접종하여 EGF와 BPE가 함유된 K-SFM 배지를 안쪽과 바깥쪽에 넣고 7일 동안 배양하였다.　그 후 플레이트 안쪽의 배지를 버려 공기가 배양세포의 표면에 접촉되도록 하고 바깥쪽에 10% FBS가 함유된 K-SFM과 EGF가 들어있지 않은 DMEM이 동량으로 혼합된 배지를 넣고 2주간 배양하여 다층의 표피와 진피가 형성된 인공피부를 얻었다.　여기에 본 발명의 실험예 및 비교예를 맨 위층의 인공피부 조직에 적용하여 4시간 배양 후 콜라겐 펩타이드 함량을 분석하였다.　시험결과는 하기 표 6에 나타나 있다.

배지 중의 가수분해 콜라겐 펩타이드의 양 (㎍/㎖)
실시예	비교예 1	비교예 3
43.7	39.5	3.9

실험결과 표 6에서와 같이, 본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 함유한 실시예와 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀을 함유한 비교예1은 가수분해 콜라겐 펩타이드를 그대로 사용한 비교예 3에 비해 10배 이상의 피부 침투 효과가 우수함을 알 수 있었다.　이는 본 발명의 나노리포좀의 평균입자 크기가 30-70 nm로 아주 작아 피부침투가 용이하기 때문이며,　피부 침투력의 증가는 유효성분의 효능을 극대화할 수 있다.

실험예 4: 제형의 안정성 시험

상기 본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 함유한 화장료에 대한 안정성 시험을 하기의 방법으로 실시하였다.

화장료의 안정성을 시험하기 위해 상기 실시예 및 비교 실시예를 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관하고 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관한 후, 변색 및 변취, 분리정도를 비교 측정하였다.　그 결과는 하기 표 7에 정리되어 있다.　이 때 제품 변색 및 변취, 분리정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다: 0 : 변화없음; 1 : 극히 조금 분리(변색); 2 : 조금 분리(변색);　 3 : 조금 심하게 분리(변색); 4 :심하게 분리(변색); 및 5 : 극히 심하게 분리(변색).

구 분	제형의 안정성
	실시예		비교예 1		비교예 3
	45℃	4℃	45℃	4℃	45℃	4℃
변색	0.5	0	0.3	0	2.4	0
변취	0.2	0	0.2	0	1.4	0
분리	0	0	0	0	1.6	0

표 7에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예와 비교 실시예는 45℃에서 변색이나 변취, 분리 현상이 거의 없이 안정하였고 이는 콜라겐 가수분해 펩타이드가 나노리포좀에 의해 매우 안정화 되었고, 비타민C 역시 제형내에서 안정한 상태로 존재함을 나타낸다. 그러나 가수분해 콜라겐 펩타이드를 안정화하지 않고 직접 제형에 사용한 비교 실시예 3은　45℃에서 분리 및 변색이 일어나 가수분해 콜라겐 펩타이드가 불안정할 뿐만 아니라, 가수분해 콜라겐 펩타이드가 제형에 들어가 제형 자체가 불안정해 졌음을 알 수 있다.

이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획하여 안정화한 나노리포좀과 비타민C를 함유하는 화장료를 조성하여 제시한다.　그러나, 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다.

제형예 1: 유연화장수(스킨로션)

하기 표 8에 나타난 바와 같이 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
나노리포좀	1.0
비타민C	0.5
1.3-부틸렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
올레일알코올	0.1
폴리솔베이트 20	0.5
에탄올	15.0
벤조페논-9	0.05
향,방부제	미량
정제수	to 100

제형예 2. 영양화장수(밀크로션)

하기 표 9에 나타난 바와 같이 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
나노리포좀	3.0
비타민C	1.0
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	1.2
토코페닐아세테이트	3.0
유동파라핀	5.0
스쿠알란	3.0
마카다이아너트오일	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	1.0
카르복시비닐 폴리머	1.0
비에치티이	0.01
EDTA-2Na	0.01
향,방부제	미량
정제수	to 100

제형예 3. 영양크림

하기 표 10에 나타난 바와 같이 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
나노리포좀	10.0
비타민C	2.0
세토스테아릴알콜	2.0
글리세릴스테아레이트	1.5
트리옥타노인	5.0
폴리솔베이트 60	1.2
솔비탄스테아레이트	0.5
스쿠알란	5.0
유동 파라핀	3.0
싸이클로메치콘	3.0
비에이치티이	0.05
델타-토코페롤	0.2
농글리세린	4.0
1,3-부틸렌글리콜	2.0
산타검	0.1
EDTA-2Na	0.05
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 4. 마사지크림

하기 표 11에 나타난 바와 같이 마사지크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
나노리포좀	1.0
비타민C	0.5
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
밀납	2.0
토코페릴아세테이트	0.1
폴리솔베이트 60	3.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5
세테아릴알코올	2.0
유동파라핀	30.0
카르복시비닐폴리머	0.5
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 5. 팩

하기 표 12에 나타난 바와 같이 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

배합 성분	함량 (중량%)
나노리포좀	2.0
비타민C	1.0
프로필렌글리콜	2.0
글리세린	4.0
카르복시비닐 폴리머	0.3
에탄올	7.0
피이지-40 히드로게네이티드 캐스터 오일	0.8
트리에탄올아민	0.3
비에치티이	0.01
EDTA-2Na	0.01
향, 방부제	미량
정제수	to 100

Claims (8)

1. 콜라겐의 원료에 물을 7:3 내지 5;5의 중량비율로 혼합한 다음, pH를 6.5내지 8.5로 조절하고, 상기 콜라겐의 원료에 대하여 0.1 중량% 내지 1.0 중량%의 단백질 가수분해 효소를 첨가하여 25℃내지 50℃에서 효소 처리하여 얻어진 1,000이하의 분자량을 갖는 가수분해 콜라겐 펩타이드를 포획한 나노리포좀 및 비타민 C를 유효성분으로 함유하되, 상기 펩타이드는 상기 나노리포좀 총 중량에 대해서 0.1 중량% 내지 20.0 중량%로 포획된 피부 노화방지용 화장료 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 나노리포좀을 화장료 조성물 총 중량에 대해서 0.1 중량% 내지 50.0 중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 비타민 C를 화장료 조성물 총 중량에 대해서 0.001 중량% 내지 20.0중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 나노리포좀은 폴리올, 계면활성제, 인지질, 지방산 및 물을 포함하는 혼합물로 제조된 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기 나노리포좀의 평균 입자 지름의 30nm 내지 70nm인 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.
6. 제1항에 있어서, 상기 가수분해 콜라겐 펩타이드의 분자량은 50 내지 1,000으로 형성되는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.
7. 제1항에 있어서, 상기 가수분해 콜라겐 펩타이드는 ⅰ)콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부탄력 개선, ⅱ)보습력 향상, ⅲ)제형의 안정성 향상, 또는 ⅳ)상기ⅰ)내지 ⅲ)의 조합의 효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.
8. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 또는 분무제의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.