CN114699446A - 一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法 - Google Patents

一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114699446A
CN114699446A CN202210465316.2A CN202210465316A CN114699446A CN 114699446 A CN114699446 A CN 114699446A CN 202210465316 A CN202210465316 A CN 202210465316A CN 114699446 A CN114699446 A CN 114699446A
Authority
CN
China
Prior art keywords
exosome
solution
adipose
mesenchymal stem
extract
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210465316.2A
Other languages
English (en)
Inventor
李少波
亓爱杰
马润林
李立华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Daxi Biotechnology Co ltd
Nuosa Union Beijing Biomedical Technology Co ltd
Original Assignee
Beijing Daxi Biotechnology Co ltd
Nuosa Union Beijing Biomedical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Daxi Biotechnology Co ltd, Nuosa Union Beijing Biomedical Technology Co ltd filed Critical Beijing Daxi Biotechnology Co ltd
Priority to CN202210465316.2A priority Critical patent/CN114699446A/zh
Publication of CN114699446A publication Critical patent/CN114699446A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/33—Fibroblasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/13—Coniferophyta (gymnosperms)
    • A61K36/14—Cupressaceae (Cypress family), e.g. juniper or cypress
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A61K36/704—Polygonum, e.g. knotweed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
    • C12N5/0662—Stem cells
    • C12N5/0667—Adipose-derived stem cells [ADSC]; Adipose stromal stem cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
    • C12N2509/10—Mechanical dissociation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法，所述外泌体复合液包括如下百分含量的组分：脂肪间充质干细胞外泌体溶液20％～30％、成纤维细胞外基质溶液8～12％、侧伯叶提取物1％～3％和何首乌提取物2％～4％，余量为生理盐水；本发明外泌体复合液中脂肪间充质干细胞外泌体和成纤维细胞外基质及三型胶原蛋白不仅能够为毛囊细胞提供营养物质，同时能够刺激毛囊干细胞的分化，增加毛囊数量，刺激休止期毛囊向生长期转化，再辅以促进血液循环、抗炎去脂和调节免疫的侧伯叶提取物、何首乌提取物以及氨基酸和多种维生素成分，进而促进毛囊周围血管的形成和循环，达到更好固发生发效果。

Description

一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法
技术领域
本发明涉及外泌体应用技术领域，具体涉及一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法。
背景技术
脱发是指头发脱落的现象。正常脱落的头发都是处于退行期及休止期的毛发，由于进入退行期与新进入生长期的毛发不断处于动态平衡，故能维持正常数量的头发。病理性脱发是指头发异常或过度的脱落，其原因很多，主要包括激素性脱发、先天性脱发和营养性脱发等。
然而，脱发的直接原因在于毛囊细胞处于休止期、毛囊退化导致，因此，如何能够恢复毛囊机能，促进毛发的生长尤为关键；目前，针对脱发的治疗采用的手段包括毛囊移植术，服用及外用药物，比如非那雄胺等，但现有药物存在依赖性强的特点，一旦停药易导致脱发复发。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法，该外泌体复合液能够促进毛囊细胞的生成，并刺激毛囊进入生长期，进而显著改善脱发问题。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
本发明第一方面提供一种用于治疗脱发的外泌体复合液，所述外泌体复合液包括如下百分含量的组分：
脂肪间充质干细胞外泌体溶液20％～30％、成纤维细胞外基质溶液8～12％、侧柏叶提取物1％～3％和何首乌提取物2％～4％，余量为生理盐水。
在本发明中，脂肪间充质干细胞外泌体和成纤维细胞外基质及三型胶原蛋白不仅能够为毛囊细胞提供营养物质，同时能够刺激毛囊干细胞的分化，增加毛囊数量，刺激休止期毛囊向生长期转化，再辅以促进血液循环、抗炎去脂和调节免疫的侧伯叶提取物、何首乌提取物以及氨基酸和多种维生素成分，进而促进毛囊周围血管的形成和循环，达到更好固发生发效果。
优选地，所述脂肪间充质干细胞外泌体溶液浓度为6～16mg/ml。
优选地，所述脂肪间充质干细胞外泌体溶液通过如下方法制得：
(a)获取人体脂肪组织，再进行组织消化、离心，得到原代脂肪间充质干细胞；
(b)采用无血清培养基重悬原代脂肪间充质干细胞并进行培养，待细胞达到70％-85％饱和度后进行消化，然后进行传代培养；
(c)收集第3代和第4代培养上清液，再经离心去除细胞和细胞碎片，然后，采用超速离心法得到脂肪间充质干细胞外泌体沉淀；
(d)采用PBS重悬脂肪间充质干细胞外泌体沉淀，得到所述脂肪间充质干细胞外泌体溶液。
优选地，所述无血清培养基为DMEM/F12培养基。
优选地，所述成纤维细胞外基质溶液浓度为3～12mg/ml。
优选地，所述成纤维细胞外基质溶液通过如下方法制得：
(a)获取人体皮肤组织，再进行组织消化、离心，得到原代成纤维母细胞；
(b)采用无血清培养基重悬原代成纤维母细胞并进行培养，待细胞达到70％-85％饱和度后进行消化，然后进行传代培养；
(c)收集第3代和第4代培养上清液，再经离心去除细胞和细胞碎片，然后，采用超速离心法得到成纤维细胞外基质沉淀；
(d)采用PBS重悬成纤维细胞外基质沉淀，得到所述成纤维细胞外基质溶液。
优选地，所述侧柏叶提取物和何首乌提取物分别通过如下方法制得：
(1)将侧柏叶和何首乌分别进行粉碎，得到粉碎物料；
(2)将粉碎物料分别置于乙醇溶液中进行搅拌提取，连续提取2～3次，再将提取液进行混合、浓缩、冷冻干燥，分别得到所述侧柏叶提取物和何首乌提取物。
优选地，所述提取温度为40～50℃，提取时间为1～2h。
优选地，所述粉碎物料与乙醇溶液的质量体积比为1∶(5～10)；
所述粉碎物料目的度不低于50目。
本发明第二方面提供一种上述外泌体复合液的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
将侧柏叶提取物和何首乌提取物分散于生理盐水中，得到混合液；
再将脂肪间充质干细胞外泌体溶液和成纤维细胞外基质溶液与混合液混合，然后搅拌均匀，得到所述外泌体复合液。
与现有技术相比，本发明的有益效果至少包括：
本发明外泌体复合液中脂肪间充质干细胞外泌体和成纤维细胞外基质及三型胶原蛋白不仅能够为毛囊细胞提供营养物质，同时能够刺激毛囊干细胞的分化，增加毛囊数量，刺激休止期毛囊向生长期转化，再辅以促进血液循环、抗炎去脂和调节免疫的侧伯叶提取物、何首乌提取物以及氨基酸和多种维生素成分，进而促进毛囊周围血管的形成和循环，达到更好固发生发效果。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本发明的保护范围。
需要注意的是，除非另有说明，本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域技术人员所理解的通常意义。
除非本文另有定义，连同本发明使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。术语的含义和范围应当清晰，然而，在任何潜在不明确性的情况下，本文提供的定义优先于任何字典或外来定义。在本申请中，除非另有说明，术语“包括”及其他形式的使用是非限制性的。
一般地，连同本文描述的细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学以及蛋白和核酸化学和杂交使用的命名法和其技术是本领域众所周知和通常使用的那些。除非另有说明，本发明的方法和技术一般根据本领域众所周知，且如各种一般和更具体的参考文献中所述的常规方法来进行，所述参考文献在本说明书自始至终引用和讨论。酶促反应和纯化技术根据制造商的说明书、如本领域通常实现的或如本文所述来进行。连同本文描述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的命名法、及其实验室程序和技术是本领域众所周知和通常使用的那些。
本发明实施例提供一种用于治疗脱发的外泌体复合液，所述外泌体复合液包括如下百分含量的组分：
脂肪间充质干细胞外泌体溶液20％～30％、成纤维细胞外基质溶液8～12％、侧柏叶提取物1％～3％和何首乌提取物2％～4％，余量为生理盐水。
在本发明中，外泌体复合液中脂肪间充质干细胞外泌体和成纤维细胞外基质及三型胶原蛋白不仅能够为毛囊细胞提供营养物质，同时能够刺激毛囊干细胞的分化，增加毛囊数量，刺激休止期毛囊向生长期转化，再辅以促进血液循环、抗炎去脂和调节免疫的侧伯叶提取物、何首乌提取物以及氨基酸和多种维生素成分，进而促进毛囊周围血管的形成和循环，达到更好固发生发效果。
下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
实施例1
本实施例为一种脂肪间充质干细胞外泌体溶液的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
(a)获取人体脂肪组织并剪碎，再采用胶原酶进行组织消化、离心，得到原代脂肪间充质干细胞；
(b)采用无血清培养基(DMEM/F12培养基)重悬原代脂肪间充质干细胞并在37℃、5％CO2下进行培养，待细胞达到70％-85％饱和度后去除培养基并清洗，采用胰蛋白酶进行消化，然后进行传代培养；
(c)收集第3代和第4代培养上清液，再以4000×g、4℃离心20min去除细胞和细胞碎片，然后，再以200000×g、4℃、离心60mi得到脂肪间充质干细胞外泌体沉淀；
(d)采用PBS重悬脂肪间充质干细胞外泌体沉淀，得到8mg/ml的脂肪间充质干细胞外泌体溶液。
实施例2
本实施例为侧柏叶和何首乌提取物的提取方法，该提取方法包括如下步骤：
(1)将侧柏叶和何首乌分别进行粉碎至目粒度不低于50目，得到粉碎物料；
(2)按照粉碎物料与乙醇溶液的质量体积比为1∶8，将粉碎物料分别置于55％的乙醇溶液中在200r/min、45℃下提取2h，连续提取3次，再将提取液进行混合、浓缩、冷冻干燥，分别得到上述侧柏叶提取物和何首乌提取物。
实施例3
本实施例为成纤维细胞外基质溶液的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
(a)获取人体皮肤组织，再进行组织消化、离心，得到原代成纤维母细胞；
(b)采用无血清培养基(DMEM/F12培养基)重悬原代成纤维母细胞并进行培养，待细胞达到80％饱和度后进行消化，然后进行传代培养；
(c)收集第3代和第4代培养上清液，再经离心去除细胞和细胞碎片，然后，采用超速离心法得到成纤维细胞外基质沉淀；
(d)采用PBS重悬成纤维细胞外基质沉淀，得到8mg/ml的成纤维细胞外基质溶液。
实施例4
本实施例为一种用于治疗脱发的外泌体复合液，该外泌体复合液包括如下百分含量的组分：
实施例1的脂肪间充质干细胞外泌体溶液25％、实施例2的侧柏叶提取物2％、实施例2的何首乌提取物3％、实施例3的成纤维细胞外基质溶液10％，余量为生理盐水。
上述外泌体复合液通过如下方法制得：
将侧柏叶提取物和何首乌提取物分散于生理盐水中，得到混合液；
再将脂肪间充质干细胞外泌体溶液和成纤维细胞外基质溶液与混合液混合，然后搅拌均匀，得到上述外泌体复合液。
对照例1
本对照例为一种用于治疗脱发的外泌体复合液，该外泌体复合液包括如下百分含量的组分：
实施例1的脂肪间充质干细胞外泌体溶液25％，余量为生理盐水。
上述外泌体复合液通过如下方法制得：
将脂肪间充质干细胞外泌体溶液与生理盐水混合，然后搅拌均匀，得到所述外泌体复合液。
对照例2
本对照例为一种用于治疗脱发的外泌体复合液，该外泌体复合液包括如下百分含量的组分：
实施例2的侧柏叶提取物2％、实施例2的何首乌提取物3％、实施例3的成纤维细胞外基质溶液10％，余量为生理盐水。
上述外泌体复合液通过如下方法制得：
将侧柏叶提取物和何首乌提取物分散于生理盐水中，得到混合液；
再将成纤维细胞外基质溶液与混合液混合，然后搅拌均匀，得到上述外泌体复合液。
对照例3
本对照例为一种用于治疗脱发的外泌体复合液，该外泌体复合液包括如下百分含量的组分：
实施例1的脂肪间充质干细胞外泌体溶液35％、实施例2的侧柏叶提取物2％、实施例2的何首乌提取物3％，余量为生理盐水。
上述外泌体复合液通过如下方法制得：
将侧柏叶提取物和何首乌提取物分散于生理盐水中，得到混合液；
再将脂肪间充质干细胞外泌体溶液与混合液混合，然后搅拌均匀，得到上述外泌体复合液。
实验例1
本实验例为实施例3和对照例1～3的外泌体复合液对脱发影响的研究
1、构建小鼠脱发模型
小鼠品系为C57小鼠35只，雌雄各半；采用棉签蘸取咪喹莫特乳膏均匀涂抹在小鼠背部皮肤上，涂抹面积为2×2cm，涂抹量每次约0.4g；涂抹次数为每两天1次，持续12天后，在给药部位形成脱毛区，即造模成功，成功率100％；
2、分组
选取造模成功的30只小鼠，平均分为5组，每组雌雄各半；
3、给药方式
将4组小鼠分别给药实施例3和对照例1～3的外泌体复合液，第5组作为空白对照涂抹生理盐水；给药方式为在形成的脱毛区涂抹外泌体复合液，每次涂抹量为1ml，每2天一次；持续给药30天；
4、结果
在给药区拔取5根毛发，采用游标卡尺测量长度，并计算每组小鼠毛发的平均长度，计算结果如表1所示：
表1不同实验组毛发长度
Figure BDA0003623755990000071
Figure BDA0003623755990000081
由表1可知：
本发明外泌体复合液能够有效促进小鼠毛发的生长，通过实施例3和对比例1～3相比，本发明外泌体复合液通过将脂肪间充质干细胞外泌体联合成纤维细胞外基质、侧柏叶提取物和何首乌提取物能够更好的促进毛发生长，达到更好生发效果。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围，其均应涵盖在本发明的权利要求和说明书的范围当中。

Claims (10)

1.一种用于治疗脱发的外泌体复合液，其特征在于，包括如下百分含量的组分：
脂肪间充质干细胞外泌体溶液20％～30％、成纤维细胞外基质溶液8～12％、侧柏叶提取物1％～3％和何首乌提取物2％～4％，余量为生理盐水。
2.根据权利要求1所述的外泌体复合液，其特征在于，所述脂肪间充质干细胞外泌体溶液浓度为6～16mg/ml。
3.根据权利要求1或2所述的外泌体复合液，其特征在于，所述脂肪间充质干细胞外泌体溶液通过如下方法制得：
(a)获取人体脂肪组织，再进行组织消化、离心，得到原代脂肪间充质干细胞；
(b)采用无血清培养基重悬原代脂肪间充质干细胞并进行培养，待细胞达到70％-85％饱和度后进行消化，然后进行传代培养；
(c)收集第3代和第4代培养上清液，再经离心去除细胞和细胞碎片，然后，采用超速离心法得到脂肪间充质干细胞外泌体沉淀；
(d)采用PBS重悬脂肪间充质干细胞外泌体沉淀，得到所述脂肪间充质干细胞外泌体溶液。
4.根据权利要求3所述的外泌体复合液，其特征在于，所述无血清培养基为DMEM/F12培养基。
5.根据权利要求1所述的外泌体复合液，其特征在于，所述成纤维细胞外基质溶液浓度为3～12mg/ml。
6.根据权利要求1或2所述的外泌体复合液，其特征在于，所述成纤维细胞外基质溶液通过如下方法制得：
(a)获取人体皮肤组织，再进行组织消化、离心，得到原代成纤维母细胞；
(b)采用无血清培养基重悬原代成纤维母细胞并进行培养，待细胞达到70％-85％饱和度后进行消化，然后进行传代培养；
(c)收集第3代和第4代培养上清液，再经离心去除细胞和细胞碎片，然后，采用超速离心法得到成纤维细胞外基质沉淀；
(d)采用PBS重悬成纤维细胞外基质沉淀，得到所述成纤维细胞外基质溶液。
7.根据权利要求1所述的外泌体复合液，其特征在于，所述侧柏叶提取物和何首乌提取物分别通过如下方法制得：
(1)将侧柏叶和何首乌分别进行粉碎，得到粉碎物料；
(2)将粉碎物料分别置于乙醇溶液中进行搅拌提取，连续提取2～3次，再将提取液进行混合、浓缩、冷冻干燥，分别得到所述侧柏叶提取物和何首乌提取物。
8.根据权利要求7所述的外泌体复合液，其特征在于，所述提取温度为40～50℃，提取时间为1～2h。
9.根据权利要求7所述的外泌体复合液，其特征在于，所述粉碎物料与乙醇溶液的质量体积比为1∶(5～10)；
所述粉碎物料目的度不低于50目。
10.权利要求1～9任一所述的外泌体复合液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将侧柏叶提取物和何首乌提取物分散于生理盐水中，得到混合液；
再将脂肪间充质干细胞外泌体溶液和成纤维细胞外基质溶液与混合液混合，然后搅拌均匀，得到所述外泌体复合液。
CN202210465316.2A 2022-04-29 2022-04-29 一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法 Pending CN114699446A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210465316.2A CN114699446A (zh) 2022-04-29 2022-04-29 一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210465316.2A CN114699446A (zh) 2022-04-29 2022-04-29 一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114699446A true CN114699446A (zh) 2022-07-05

Family

ID=82176056

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210465316.2A Pending CN114699446A (zh) 2022-04-29 2022-04-29 一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114699446A (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115154575A (zh) * 2022-07-15 2022-10-11 中南大学湘雅三医院 一种小分子药物在促进小鼠毛发再生中的应用
CN115227646A (zh) * 2022-09-02 2022-10-25 北京达济康华生物科技有限责任公司 一种干细胞外泌体生发因子的制备方法
CN115232786A (zh) * 2022-08-02 2022-10-25 莫伊森(厦门)生发有限公司 一种脂肪干细胞外泌体及其应用
CN115337221A (zh) * 2022-08-31 2022-11-15 陕西中鸿科瑞再生医学研究院有限公司 一种有利于防脱生发的组合物及其制备方法和应用
CN116942847A (zh) * 2023-08-30 2023-10-27 深圳市华健生物技术有限公司 一种靶向毛囊的载药植物外泌体及其制备方法和应用
CN117427144A (zh) * 2023-12-20 2024-01-23 北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司 一种含干细胞外泌体的防脱生发组合物及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106635973A (zh) * 2016-09-19 2017-05-10 东莞自然衡健康科技有限公司 一种促进毛发再生的细胞营养液的制备方法
CN110184235A (zh) * 2019-05-21 2019-08-30 大连英伦美焰生物科技有限公司 一种adsc外泌体及其制备方法与应用
CN110339338A (zh) * 2019-07-16 2019-10-18 东莞自然衡健康科技有限公司 生发剂

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106635973A (zh) * 2016-09-19 2017-05-10 东莞自然衡健康科技有限公司 一种促进毛发再生的细胞营养液的制备方法
CN110184235A (zh) * 2019-05-21 2019-08-30 大连英伦美焰生物科技有限公司 一种adsc外泌体及其制备方法与应用
CN110339338A (zh) * 2019-07-16 2019-10-18 东莞自然衡健康科技有限公司 生发剂

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115154575A (zh) * 2022-07-15 2022-10-11 中南大学湘雅三医院 一种小分子药物在促进小鼠毛发再生中的应用
CN115232786A (zh) * 2022-08-02 2022-10-25 莫伊森(厦门)生发有限公司 一种脂肪干细胞外泌体及其应用
CN115337221A (zh) * 2022-08-31 2022-11-15 陕西中鸿科瑞再生医学研究院有限公司 一种有利于防脱生发的组合物及其制备方法和应用
CN115227646A (zh) * 2022-09-02 2022-10-25 北京达济康华生物科技有限责任公司 一种干细胞外泌体生发因子的制备方法
CN116942847A (zh) * 2023-08-30 2023-10-27 深圳市华健生物技术有限公司 一种靶向毛囊的载药植物外泌体及其制备方法和应用
CN116942847B (zh) * 2023-08-30 2024-04-09 深圳市华健生物技术有限公司 一种靶向毛囊的载药植物外泌体及其制备方法和应用
CN117427144A (zh) * 2023-12-20 2024-01-23 北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司 一种含干细胞外泌体的防脱生发组合物及其制备方法
CN117427144B (zh) * 2023-12-20 2024-03-01 北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司 一种含干细胞外泌体的防脱生发组合物及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114699446A (zh) 一种用于治疗脱发的外泌体复合液及其制备方法
JP5981947B2 (ja) スキンクリーム
KR101737164B1 (ko) 물질대사된 조건화 성장 배지 및 이용 방법
KR101836029B1 (ko) 자극된 줄기세포 배양액의 발모 촉진능 및 이의 용도
EP3189828A1 (en) Composition for differentiation induction of adipocyte containing stem cell-derived exosome, regeneration of adipose tissue, and skin whitening or wrinkle improvement
CN109908329A (zh) 毛囊细胞激活因子止脱生发制剂生产工艺及其用途
EP3146973B1 (en) Hair growth-promoting function of small-sized stem cells and use thereof
CN101461772A (zh) 用于美容护肤的干细胞分泌因子的制备方法
WO2005065419A2 (en) Method of culturing cells
WO2005065269A2 (en) Compositions and method for decreasing the appearance of skin wrinkles
CN114306432B (zh) 一种具有防脱生发功能的植物外泌体组合物及其制备方法
KR20120010699A (ko) 발효인삼 추출물을 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물
US20200230172A1 (en) Stem cell conditioned media for clinical and cosmetic applications
CN112891517A (zh) 促进头皮毛囊再生的细胞因子组合物及其制备方法与应用
CN113957040A (zh) 一种脂肪干细胞生长因子提取物及其制备方法和应用
EP4257674A1 (en) Method for isolating and culturing cord blood stem cells expressing gdf-3 at high level, and use of gdf-3
CN109876012B (zh) 一种药用组合物及其在促进皮肤伤口愈合中的应用
CN111544373A (zh) 一种含有毛乳头细胞来源外泌体的生发液及其制备方法
CN117379537A (zh) 一种基于细胞衍生物的组合物及其制备方法和应用
EP4227403A1 (en) Exosome and preparation process and use thereof
CN114948932B (zh) 包含桑根酮的组合物在制备通过作用于毛囊组织防治脱发的产品中的用途
KR20130116972A (ko) 타인지방줄기세포를 배양하여 만든 모발증식제재 및 이의 제조방법
US20230330183A1 (en) Stem cell conditioned media for clinical and cosmetic applications
KR101362236B1 (ko) 생약재로 구성된 탈모방지용 조성물
TW201813652A (zh) 江氏龍鬚菜水萃取物的水解產物及其製備方法與用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination