CN114624339A - 一种测定吲哚布芬杂质的分析方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种测定吲哚布芬杂质的分析方法，以十八烷基硅烷键合硅胶或辛烷基键合硅胶为固定相进行色谱分离，采用紫外检测仪进行分析检测；所述流动相为溶剂A和溶剂B的混合，所述溶剂A为磷酸缓冲溶液，所述的溶剂B选自甲醇或乙腈或甲醇与乙腈的混合与磷酸的混合液。所述方法专属性、精密度、定量限、检测限、准确度、线性和范围、溶液稳定性都符合要求；同时实验操作简便、快速、成本低，对吲哚布芬的质量控制及用药安全保证具有极其重要的意义。
Description
技术领域
本发明属于药物分析化学领域，具体涉及一种测定吲哚布芬杂质的分析方法。
背景技术
吲哚布芬(Indobufen)是一种异吲哚啉基苯基丁酸衍生物，由 FarmitaIia CarIoErba Pharmacia(法玛西亚，现在的辉瑞)公司开发的一种强效抗血小板聚集药物，最早于1984年在意大利上市，随后在其它国家陆续上市，包括菲律宾、委内瑞拉、泰国、葡萄牙等。我国于2002年研制成功并被CFDA批准为4类新药。其化学名为(±) 2-[4-(1-氧代-2-异二氢吲哚基)苯基]丁酸，分子式C18H17NO3，精确分子量295.12，结构式如下所示：
吲哚布芬主要是通过以下机制发挥抗血小板聚集作用：(1)可逆性抑制血小板环氧化酶，使血栓素B2(血小板聚集的强效激活剂) 生成减少；(2)抑制二磷酸腺苷(ADP)、肾上腺素和血小板活化因子(PAF)、胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集；(3)降低血小板三磷酸腺苷、血清素、血小板因子3、血小板因子4和β-凝血球蛋白的水平，降低血小板粘附性。吲哚布芬是一种可逆的多靶点抗血栓药物，对于激活剂诱发的血小板聚集，单次口服吲哚布芬200mg后2 小时可达最大抑制作用，12小时后仍有显著抑制作用(90％)，24小时内恢复。
对于报道的吲哚布芬的合成工艺中多数工艺路线涉及2-(4- 氨基)苯基丁酸和2-(4-硝基)苯基丁酸，专利CN106631974B公开了如下的合成工艺路线：
(1)氢化反应
(2)环化反应：
(3)锌粉还原反应
现有制备方法中，吲哚布芬含有的相关的7种杂质主要如下表：
表1：7种工艺杂质列表
目前尚未有公开的文献与专利报道上述杂质的检查方法。因此，找到一种灵敏度高、专属性好的检测这些杂质的方法，实现对吲哚布芬原料药中这些杂质的控制，对提高产品的质量和用药的安全性具有十分重要的意义。
发明内容
为解决现有技术存在的缺陷，本发明提供了一种分析方法用于上述7种工艺杂质及其它未知杂质与总杂质的测定与限度控制。
本发明的技术方案为：
一种测定吲哚布芬杂质的分析方法，所述方法以十八烷基硅烷键合硅胶或辛烷基键合硅胶为固定相进行色谱分离，采用紫外检测仪进行分析检测；所述流动相为溶剂A和溶剂B的混合，所述溶剂A为磷酸缓冲溶液，所述的溶剂B选自甲醇或乙腈或甲醇与乙腈的混合与磷酸的混合液。
本发明所述的杂质包含特定杂质；所述的特定杂质为：
进一步，本发明所述的检测方法还可测定未知单杂和总杂。
本发明的优选方案中，所述的溶剂A为磷酸二氢钾水溶液。
本发明的优选方案中，所述的溶剂A的pH值为2.0～3.5，优选为3.0。
本发明的优选方案中，所述的溶剂B中磷酸的浓度为0.05～0.2％。
本发明的优选方案中，所述流动相采用程序如表2所示：
表2梯度洗脱程序表
其中溶剂A和B的百分比为体积百分比。
本发明的优选方案中，所述色谱柱的规格选自4.6×250mm，5μm 或4.6×150mm，5μm或2.1×150mm，1.7μm或2.1×150mm，1.6μm或 2.1×150mm，1.9μm或4.6×150mm，2.7μm或4.6×150mm，2.5μm或 4.6×150mm，3.5μm或4.6×150mm，3.0μm，进一步优选4.6×250mm， 5μm。
本发明的优选方案中，所述流动相的流速为0.3～1.5ml/min；检测波长为220～230nm，优选228nm；柱温为25～40℃，优选30℃；进样体积为5～20μl；运行时间为60min。
本发明的优选方案中，所述的方法按照加校正因子的主成分自身对照法测得杂质的含量。
进一步，所述方法包含如下步骤：取吲哚布芬待测样品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液，然后以溶剂A和溶剂B的混合为流动相进行HPLC检测，按照加校正因子的主成分自身对照法计算各特定杂质含量：特定杂质含量％＝F×(A杂/A对照)×0.1，总杂质含量为各特定杂质含量与未知杂质含量之和。其中，F为校正因子，A杂为供试品溶液图谱中各特定杂质的峰面积，A对照为对照溶液图谱中主峰峰面积，所述校正因子为主成份线性回归方程的斜率和特定杂质线性回归方程的斜率的比值。
再进一步，较为具体的，本发明所述的检测方法包括如下步骤：
(a)供试品溶液的配制：取吲哚布芬待测样品溶于乙腈并加水稀释成浓度为0.5mg/ml，作为供试品溶液；
(b)对照溶液的配制：取供试品溶液适量，用乙腈-水(30：70) 稀释制成0.5μg/ml的溶液，作为对照溶液；
(c)对照品贮备液及定位溶液的配制：取YDBF-IM-A、 YDBF-IM-B、YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H 和YDBF-IM-I对照品分别加乙腈溶解并加水稀释作为各杂质对照品贮备液及定位溶液，浓度均为0.01mg/ml；
(d)系统适用性溶液的配制：取吲哚布芬对照品加乙腈溶解，然后加入适量各杂质对照品贮备液，用水稀释至每1ml含吲哚布芬样品约0.5mg，YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、 YDBF-IM-F、YDBF-IM-H和YDBF-IM-I各约0.5μg的混合溶液，作为系统适用性溶液；
(e)精密量取系统适用性溶液5～20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，YDBF-IM-H、YDBF-IM-E、YDBF-IM-C、YDBF-IM-I、吲哚布芬、YDBF-IM-A、YDBF-IM-F和YDBF-IM-B依次出峰，主峰与前后峰的分离度不得小于2.0，理论塔板数按吲哚布芬峰计算应不低于5000；
(f)精密量取供试品溶液和对照溶液5～20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；供试品溶液色谱图中如有与YDBF-IM-A、 YDBF-IM-B、YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H 和YDBF-IM-I相对保留时间一致的色谱峰，按乘以校正因子的主成分自身对照法计算，含YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H和YDBF-IM-I均不得过0.1％，其他单个未知杂质不得过0.1％，总杂不得过1.0％；所述的 YDBF-IM-A校正因子为0.44，所述的YDBF-IM-B校正因子为2.94，所述的YDBF-IM-C校正因子为0.88，YDBF-IM-E校正因子为1.38，所述的YDBF-IM-F校正因子为1.05，所述的YDBF-IM-H校正因子为0.94，所述的YDBF-IM-I校正因子为0.88。
进一步，本技术方案还参照中国药典2020年版9101分析方法验证指导原则提供了系统的方法学验证，验证的色谱条件为：
色谱柱：Waters XTerra RP18，4.6×250mm，5μm；流速：1.0ml/min；检测波长：228nm；进样体积：10μl；柱温：30℃；运行时间：60min；溶剂A PH为3.0；验证结果见表3：
表3方法学验证结果
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明首次提供了一种用于杂质YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、 YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I 及其它未知杂质与总杂质的测定方法。所述方法不仅能够实现吲哚布芬原料药中YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、 YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I及其它未知杂质与总杂质的测定，而且方法的专属性、精密度、定量限、检测限、准确度、线性和范围、溶液稳定性都符合要求；同时实验操作简便、快速、成本低，对吲哚布芬的质量控制及用药安全保证具有极其重要的意义。
附图说明
图1为实施例1中系统适用性溶液的HPLC图谱，出峰顺序依次为：YDBF-IM-H、YDBF-IM-E、YDBF-IM-C、YDBF-IM-I、吲哚布芬、YDBF-IM-A、YDBF-IM-F和YDBF-IM-B；
图2为实施例1中Z200203批样品溶液的HPLC图谱；
图3为对比例中系统适用性溶液的HPLC图谱，出峰顺序依次为： YDBF-IM-H，YDBF-IM-E，YDBF-IM-I，YDBF-IM-A、YDBF-IM-C、吲哚布芬，YDBF-IM-F，YDBF-IM-B。
具体实施方式
以下将参考附图，结合具体实施例对本发明做进一步阐述。所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1三批吲哚布芬原料样品中YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、 YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I 及其它未知杂质与总杂质的测定
(1)色谱条件
仪器：Agilent 1290高效液相色谱仪(配备DAD检测器)；
色谱柱：Waters XTerra RP18，4.6×250mm，5μm；
柱温：30℃；流速：1.0ml/min；检测波长：228nm；进样量：10μl；
流动相：以磷酸盐缓冲液(称取磷酸二氢钾1.36g，加水1000ml 溶解，用磷酸调节pH值至3.0；所述的溶剂B为0.1％磷酸乙腈，按上表5所述梯度进行洗脱；
(2)溶液配制
供试品溶液：取样品适量，精密称定，约25mg，置50ml量瓶中，加15ml乙腈超声溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，即得，浓度约 0.5mg/ml；
空白溶液：乙腈-水(30：70)；
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用乙腈-水(30：70)稀释制成每1ml中约含0.5μg的溶液，作为对照溶液；
对照品贮备液及定位溶液：取YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、 YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I 对照品各约1mg，分别置100ml量瓶中，加30ml乙腈超声溶解后，用水稀释至刻度，作为各杂质对照品贮备液及定位溶液，浓度均为 0.01mg/ml；
系统适用性溶液：另取吲哚布芬对照品约10mg，精密称定，置 20ml量瓶中，加6ml乙腈超声溶解后，精密量取各杂质对照品贮备液1ml至该容量瓶中，用水稀释至刻度制成每1ml含吲哚布芬约 0.5mg，YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、 YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I各约0.5μg的混合溶液，作为系统适用性溶液。
(3)进样分析
精密量取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图， YDBF-IM-H、YDBF-IM-E、YDBF-IM-C、YDBF-IM-I、吲哚布芬、 YDBF-IM-A、YDBF-IM-F和YDBF-IM-B依次出峰，主峰与前后峰的分离度不得小于2.0，理论塔板数按吲哚布芬峰计算应不低于5000。精密量取供试品溶液和对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与YDBF-IM-H、YDBF-IM-E、 YDBF-IM-C、YDBF-IM-I、YDBF-IM-A、YDBF-IM-F和YDBF-IM-B 相对保留时间一致的色谱峰，按乘以校正因子的主成分自身对照法计算，含YDBF-IM-H、YDBF-IM-E、YDBF-IM-C、YDBF-IM-I、 YDBF-IM-A、YDBF-IM-F和YDBF-IM-B均不得过0.1％，其它单个杂质不得过0.1％，总杂不得过1.0％。
(4)测定结果
3批原料样品杂质测试数据见表4所示：
表4实施例1所测得的三批样品杂质结果
三批样品中各项杂质检出均符合规定。
系统适用性溶液图谱见附图1，典型样品溶液图谱见附图2 (Z200203批)。
对比例现行国家标准所记载的杂质方法测定吲哚布芬原料样品中YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、 YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I及其它未知杂质与总杂质的适用性考察
(1)色谱条件
除色谱柱、流动相及洗脱方式外，其它均同实施例1
色谱柱：ZORBAX SB-C18 4.6×250mm，5um
流动相及洗脱方式：见我国国家药品标准：WS1-(X-069)-2006Z 及2020年国家药典委公布的该质量标准的拟修订草案，以甲醇-水- 三乙胺(65：35：0.5)(用磷酸调节PH至3.0)进行洗脱，运行时间为主峰保留时间的5倍，约1小时；
(2)对照品贮备液及定位溶液、空白溶液、系统适用性溶液均同实施例1；
(3)进样及结果分析
系统充分平衡后，分别进样空白溶液、各杂质及吲哚布芬定位溶液、系统适用性溶液，记录色谱图。结果系统适用性溶液所得图谱中，YDBF-IM-A、YDBF-IM-C与吲哚布芬合并出峰；YDBF-IM-H没有保留，死体积出峰；YDBF-IM-B出峰过晚且峰形不佳；YDBF-IM-E 出峰过早；
色谱图见附图3；说明该方法不适用。
实施例2吲哚布芬原料样品中YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、 YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I 及其它未知杂质与总杂质测定方法开发-色谱柱的选择
(1)色谱条件
除色谱柱外，其它均同实施例1
色谱柱1：Waters
HSS T3，4.6×150mm，2.5μm；
色谱柱2：ZORBAX SB-C18 4.6×250mm，5um；
色谱柱3：Waters XTerra RP18，4.6×250mm，5μm；
(2)空白溶液、系统适用性溶液均同实施例1；
(3)进样及结果分析
分别以色谱柱1、色谱柱2、色谱柱3作为分析柱，系统充分平衡后，分别进样空白溶液、系统适用性溶液，记录色谱图。结果3根色谱柱所记录的系统适用性溶液图谱没有明显差异，均可作为本方案分析用柱。
实施例3吲哚布芬原料样品中YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、 YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I 及其它未知杂质与总杂质测定方法开发-流动相中溶剂A pH、溶剂B 中磷酸体积浓度及洗脱梯度的考察
(1)色谱条件
除流动相中溶剂A的PH、溶剂B中磷酸体积浓度及洗脱梯度改变外，其它均同实施例2
流动相1：溶剂A的PH为4.0，溶剂B为乙腈，洗脱梯度同上表5；
流动相2：溶剂A的PH为2.0，溶剂B为乙腈，洗脱梯度同上表5；
流动相5：溶剂A的PH为2.0，溶剂B为0.05％磷酸乙腈，洗脱梯度同上表5；
流动相4：溶剂A的PH为2.0，溶剂B为0.1％磷酸乙腈，洗脱梯度同上表5；
流动相5：溶剂A的PH为2.0，溶剂B为0.1％磷酸乙腈，洗脱梯度同上表2；
流动相6：溶剂A的PH为4.0，溶剂B为0.1％磷酸乙腈，洗脱梯度同上表2；
流动相7：溶剂A的PH为3.5，溶剂B为0.1％磷酸乙腈，洗脱梯度同上表2；
流动相8：溶剂A的PH为3.0，溶剂B为0.1％磷酸乙腈，洗脱梯度同上表2；
流动相9：溶剂A的PH为2.5，溶剂B为0.1％磷酸乙腈，洗脱梯度同上表2；
表5梯度洗脱程序
| 时间(min) | 溶剂A(％) | 溶剂B(％) |
| 0 | 90 | 10 |
| 3 | 90 | 10 |
| 10 | 62 | 38 |
| 23 | 62 | 38 |
| 45 | 20 | 80 |
| 45.1 | 90 | 10 |
| 55 | 90 | 10 |
(2)空白溶液、系统适用性溶液均同实施例1；
(3)进样及结果分析
1、流动相系统(流动相1～流动相5)分别充分平衡后，分别进样空白溶液、各杂质定位溶液、系统适用性溶液，记录色谱图。所记录的系统适用性溶液图谱显示：流动相1洗脱，杂质H出峰过早(25cm 的柱子，出峰4分钟，离死体积峰太近)且峰形较差；流动相2洗脱，杂质H出峰明显改善，但杂质F、杂质B同前后相邻杂质峰未实现基线分离；流动相3、流动相4有改善且流动相4更佳，但杂质F、杂质B同前后相邻杂质峰仍未实现基线分离；流动相5洗脱，各杂质及吲哚布芬的保留和分离均较好，符合系统适用性的要求；
2、改变流动相5溶剂A的PH，分别对应流动相6～流动相10，充分平衡后，分别进样空白溶液、各杂质定位溶液、系统适用性溶液，记录色谱图。所记录的系统适用性溶液图谱显示：当溶剂A PH为2.0、 2.5、3.0、3.5时，所记录图谱没有显著差异，但当溶剂A PH为4.0时，杂质H峰形明显变差，表明，本技术方案中溶剂A的PH可为 2.0～3.5，为保护色谱柱，实际测定中溶剂A的PH优选3.0。
实施例4吲哚布芬原料样品中YDBF-IM-A、YDBF-IM-B、 YDBF-IM-C、YDBF-IM-E、YDBF-IM-F、YDBF-IM-H、YDBF-IM-I 及其它未知杂质与总杂质测定方法开发-检测波长的确定
(1)色谱条件
除设置多个检测波长外，其它均同实施例1
检测波长：设置220、222、224、226、228、230、232、234nm；
(2)空白溶液、系统适用性溶液均同实施例1；
(3)进样及结果分析
系统充分平衡后，分别进样空白溶液、系统适用性溶液，记录色谱图。结果各波长(220～230nm)下所记录色谱图中，各杂质以及吲哚布芬的响应均没有明显差异，表明这几个波长都适用，故参照现行国家药品标准，优选228nm作为样品实际测定的检测波长。
Claims (9)
1.一种测定吲哚布芬杂质的分析方法，其特征在于：所述方法以十八烷基硅烷键合硅胶或辛烷基键合硅胶为固定相进行色谱分离，采用紫外检测仪进行分析检测；所述流动相为溶剂A和溶剂B的混合，所述溶剂A为磷酸缓冲溶液，所述的溶剂B选自甲醇或乙腈或甲醇与乙腈的混合与磷酸的混合液。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的杂质包含特定杂质；所述的特定杂质为：
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶剂A为磷酸二氢钾水溶液。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶剂A的pH值为2.0～3.5，优选为3.0。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶剂B中磷酸的浓度为0.05～0.2％。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述流动相采用梯度洗脱程序如下表所示：
其中溶剂A和B的百分比为体积百分比。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述色谱柱的规格选自4.6×250mm，5μm或4.6×150mm，5μm或2.1×150mm，1.7μm或2.1×150mm，1.6μm或2.1×150mm，1.9μm或4.6×150mm，2.7μm或4.6×150mm，2.5μm或4.6×150mm，3.5μm或4.6×150mm，3.0μm，优选4.6×250mm，5μm。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述流动相的流速为0.3～1.5ml/min；检测波长为220～230nm，优选228nm；柱温为25～40℃，优选30℃。
9.如权利要求1～8之一所述的方法，其特征在于：按照加校正因子的主成分自身对照法测得杂质的含量。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115902026A (zh) * | 2022-12-01 | 2023-04-04 | 浙江大学 | 一种吲哚布芬片中新杂质的分离检测方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20110005974A (ko) * | 2009-07-13 | 2011-01-20 | 일동제약주식회사 | 인도부펜 및 그 광학적 이성질체의 서방성 제제 및 그 광학적 이성질체의 분리방법 |
| CN106631974A (zh) * | 2017-02-17 | 2017-05-10 | 杭州中美华东制药有限公司 | 制备吲哚布芬的方法 |
| CN107281149A (zh) * | 2017-06-16 | 2017-10-24 | 杭州中美华东制药有限公司 | 吲哚布芬药物组合物及其质控方法 |
| CN110229075A (zh) * | 2019-05-29 | 2019-09-13 | 济南康和医药科技有限公司 | 一种吲哚布芬中间体的制备工艺 |
| CN110407703A (zh) * | 2019-08-02 | 2019-11-05 | 深圳振强生物技术有限公司 | 吲哚布芬杂质的制备方法 |
-
2020
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20110005974A (ko) * | 2009-07-13 | 2011-01-20 | 일동제약주식회사 | 인도부펜 및 그 광학적 이성질체의 서방성 제제 및 그 광학적 이성질체의 분리방법 |
| CN106631974A (zh) * | 2017-02-17 | 2017-05-10 | 杭州中美华东制药有限公司 | 制备吲哚布芬的方法 |
| CN107281149A (zh) * | 2017-06-16 | 2017-10-24 | 杭州中美华东制药有限公司 | 吲哚布芬药物组合物及其质控方法 |
| CN110229075A (zh) * | 2019-05-29 | 2019-09-13 | 济南康和医药科技有限公司 | 一种吲哚布芬中间体的制备工艺 |
| CN110407703A (zh) * | 2019-08-02 | 2019-11-05 | 深圳振强生物技术有限公司 | 吲哚布芬杂质的制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| FRANCISZEK K.GLO ́WKA等: "C procedure with SPE for quantification of indobufen enantiomers: pharmacokinetic studies", JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSI, vol. 22, no. 1, 29 February 2000 (2000-02-29), pages 2 * |
| YU LI 等,: "haracterization of an Unknown Impurity in Indobufen Tablets by HPLC-Q-TOF MS and NMR", CURRENT PHARMACEUTICAL ANALYSIS, vol. 17, no. 7, 16 June 2020 (2020-06-16), pages 2 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115902026A (zh) * | 2022-12-01 | 2023-04-04 | 浙江大学 | 一种吲哚布芬片中新杂质的分离检测方法 |
| CN115902026B (zh) * | 2022-12-01 | 2023-06-06 | 浙江大学 | 一种吲哚布芬片中新杂质的分离检测方法 |
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