CN114601021A - 一种畜禽用抗脂肪肝药物以及含该药物的中草药联合发酵饲料添加剂 - Google Patents
一种畜禽用抗脂肪肝药物以及含该药物的中草药联合发酵饲料添加剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种畜禽用抗脂肪肝的药物成分、中草药联合发酵饲料添加剂，属于生物饲料技术领域。该添加剂抗脂肪肝的药物成分为3，5‑二羟基‑3‑甲基戊酸。该添加剂是由复方中草药经过复合益生菌发酵制得。复方中草药包括香榧树、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿，其质量百分比组成为香榧树10％‑50％、钩腺大戟10％‑50％、薄荷10％‑50％、艾叶10％‑20％和青蒿10％‑20％。复合益生菌特异性菌株包括地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌，其质量百分比组成为地衣芽孢杆菌10％‑20％、红曲霉20％‑30％和植物乳杆菌50％‑70％。本发明所制备的发酵中草药饲料添加剂以2％‑5％添加量能有效预防畜禽脂肪肝。
Description
技术领域
本发明属于生物饲料领域，具体涉及一种畜禽用抗脂肪肝药物以及含该药物的中草药联合发酵饲料添加剂。
背景技术
非酒精性脂肪肝，由单纯肝脏脂肪变性、非酒精性脂肪肝炎、肝硬化和肝细胞癌等一系列肝脏疾病组成。随着现代饮食习惯和生活方式的改变，非酒精性脂肪肝的患病率急剧上升，已成为人类最常见的慢性肝病。在畜禽中，特别是种畜禽、蛋禽和奶牛中，非酒精性脂肪肝也非常普遍。因肝脏脂肪过量沉积导致的亚健康、发病或继发其他疾病的生理状态，极大地降低了饲料的消化利用效率，增加了废弃物的排放量。由于门静脉系统的联系、肠道和肝脏在解剖结构上有共同的胚胎起源以及双向的生理作用。近年来，对肠-肝轴的研究结果提示，非酒精性脂肪肝可以通过药物、饮食等方式进行预防或康复调控。畜牧生产中，防治非酒精性脂肪肝的主要措施是限制饲养。但是，对于处于高产期的畜禽，例如奶牛、蛋鸡，限饲与生产性能最大化发挥构成了针锋相对的一对矛盾。保证采食量，适当用以抗脂肪沉积的药食兼用的饲料添加剂，是解决此生产难题的优选措施。
发明内容
针对目前畜禽脂肪肝防治存在的技术缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种畜禽用抗脂肪肝的药物成分以及含有该药物的中草药联合发酵饲料添加剂。
第一方面，本发明保护一种抗脂肪肝的药物成分3，5-二羟基-3-甲基戊酸。
所述3，5-二羟基-3-甲基戊酸可用于制备畜禽用防治脂肪肝的药物或饲料添加剂。
本发明筛选出香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿含有3，5-二羟基-3-甲基戊酸。根据本发明的目的，优选树叶和草本茎叶，作为制作复方中草药添加剂原料。3，5- 二羟基-3-甲基戊酸具有负向调控肝内脂肪代谢，抑制肝脏脂肪沉积，无耐药性，无残留，药食同源，符合饲料安全和食品安全要求。
第二方面，本发明保护一种含有3，5-二羟基-3-甲基戊酸的中草药联合发酵饲料添加剂及其制备方法。
本发明选择含有抗脂肪肝药物成分的植物，采集兼具药理性、适口性、营养性的茎叶部分，中草药茎叶粉碎以利发酵效果，发酵益生菌为特异性菌株以定向控制发酵过程和代谢产物。
本发明所述中草药联合发酵饲料添加剂是由复方中草药经过复合益生菌发酵制得。
本发明中，所述复方中草药由下述质量百分含量的组分组成：香榧20％-40％、钩腺大戟10％-20％、薄荷10％-20％、艾草10％-30％、青蒿10％-30％。
优选的，所述香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草、青蒿均选自其树叶和茎叶部分入药。
本发明中，所述复合益生菌包括地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌。
进一步的，所述复合益生菌中，各菌以活菌数计的(CFU)配比为：地衣芽孢杆菌：红曲霉：红酵母：植物乳杆菌＝(1-3)∶(2-3)∶(3-5)∶(1-3)。
具体的，所述复合益生菌中，所述地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌的活菌数(CFU)配比可为1:2:5:3或3:3:3:1或2:3:4:2。
在本发明的具体实施方式中，所述复合益生菌中的地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BFC190102；所述地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BFC190102在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCCNo.18911；
所述复合益生菌中的红曲霉为红曲霉(Monascus sp)BFC170401；所述红曲霉(Monascus sp)BFC170401在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.15088；
所述复合益生菌中的红酵母为红酵母(Rhodotorula sp)BFC170301；所述红酵母(Rhodotorula sp)BFC170301在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.15125；
所述复合益生菌中的植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)BFC1602；所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)BFC1602在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.13132。
本发明所提供的含有3，5-二羟基-3-甲基戊酸的中草药联合发酵饲料添加剂的制备方法，包括下述步骤：
1)将组成复方中草药的各味药材粉碎至60-80目，按比例混合得到复方中草药；
2)将所述复方中草药和水按照质量比1：100-200比例混合，再加入玉米浆、豆粕，灭菌，得到复方中草药液体；其中，所述玉米浆的加入量为所述复方中草药和水总质量的5％-8％，所述豆粕的加入量为所述复方中草药和水总质量的3％-5％；
3)将所述复合益生菌接种到所述复方中草药液体中，进行发酵培养，得到所述中草药联合发酵饲料添加剂。
上述方法步骤2)中，所述灭菌的条件具体可为121℃灭菌30min。
上述方法步骤3)中，所述发酵培养的条件可为：35-40℃下发酵2-5d。
上述方法步骤3)中，所述复合益生菌以复合益生菌种子液的形式接种到所述复方中草药液体中，以10％-20％接种量接种。
所述复合益生菌种子液中，各菌以活菌数计，其浓度(CFU/mL)如下：地衣芽孢杆菌1×108-3×108、红曲霉2×108-3×108、红酵母3×108-5×108和植物乳杆菌1× 108-3×108。
具体的，所述益生菌种子液的制备方法如下：将地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌分别进行菌种活化、一级液体扩大培养、二级液体扩大培养，将上述三种菌种按比例混合均匀，制得复合益生菌种子液。
进一步的，所述方法还包括对上述中草药联合发酵饲料添加剂进行干燥的步骤，所述干燥的条件为60-65℃烘干。
本发明的另一个目的是提供一种防治畜禽脂肪肝的饲料。
本发明所提供的防治畜禽脂肪肝的饲料，包括畜禽基础饲料和上述的中草药联合发酵饲料添加剂。优选的，所述饲料中，中草药联合发酵饲料添加剂的含量为所述畜禽基础饲料质量的2％-5％。
第三方面，本发明还保护前文所述的复方中草药。
第四方面，本发明还保护前文所述的复合益生菌。
第五方面，本发明还保护如下任一所述的应用：
(I)所述中草药联合发酵饲料添加剂或所述饲料在防治畜禽脂肪肝中的应用；
(II)所述中草药联合发酵饲料添加剂或所述饲料在提高畜禽健康水平和/或提高畜禽生产性能中的应用；
(III)所述复合益生菌在制备所述中草药联合发酵饲料添加剂或所述饲料中的应用；
(IIII)所述复方中草药在制备所述中草药联合发酵饲料添加剂或所述饲料中的应用。
本发明中所述的畜禽包括鸡(如母鸡)、牛(如奶牛)等。
本发明中所述的提高畜禽健康水平和/或提高畜禽生产性能体现在：如调控肉种鸡肝脏脂肪代谢，抑制肝内脂肪沉积，提高母鸡的产蛋率；或，有效调控奶牛肝脏脂肪代谢，抑制肝内脂肪沉积，显著提高产奶量。
本发明中所述的脂肪肝具体可为非酒精性脂肪肝。
本发明的有益效果：
(1)本发明中植物活性成分3，5-二羟-3-甲基戊酸能够负向调控脂肪代谢，抑制脂肪在肝内的沉积，从而达到防治脂肪肝的效果。香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿植株中含有3，5-二羟-3-甲基戊酸。因作为饲料添加剂使用于畜禽，采集兼具适口性好、营养性好的茎叶，经过复合益生菌发酵后，中草药的物理结构发生改变，化学成分被释放出来，有效成分含量提高5-10倍，极大地增强了预防畜禽脂肪肝的效果。
(2)复合益生菌地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌及其代谢产物能够调节肠道微生态，保持肠道健康。地衣芽孢杆菌在畜禽肠道内可调整菌群失调，促使机体产生抗菌活性物质，产生的活性物质具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖，在提升原料营养价值的同时还能增加原料中功能性物质。红曲霉能自身合成多种维生素和酶类，产生的代谢产物有红曲色素、胆固醇合成抑制剂、抑菌物质及其它多种生理活性物质。红酵母中超氧化物歧化酶可催化超氧阴离子的歧化反应，消除超氧阴离子的毒性，对机体具有保护作用。本发明复合益生菌的这些特异性和普通性功能对畜禽脂肪肝具有良好的预防效果。
(3)本发明在畜禽饲料中的添加量为：2％-5％。本发明适用于地面和离地等各种饲养方式养殖的畜禽，尤其对于种用畜禽、商品代蛋禽、高产期奶牛等抗脂肪肝效果更为显著。体现在：天然的抗脂肪肝药物成分3，5-二羟-3-甲基戊酸，无抗药性，无残留，无污染，符合饲料安全和食品安全要求，且价廉易得，既可简易作坊生产亦可规模化量产，适合各种规模饲料和养殖企业。
本发明发现，3，5-二羟-3-甲基戊酸对肝脏脂肪的沉积有显著的负向调控作用。其作用机理，体现在：(1)3，5-二羟-3-甲基戊酸能够通过AMPK(adenosine monophosphate-activated protein kinase)途径保持肝脏能量平衡，降低ATP的消耗，促进ATP的合成，催化乙酰辅酶A羧化酶磷酸化并使之灭活，上调PPARα(peroxisome proliferator-activatedreceptorα)，进而发生脂肪酸β氧化。(2)3，5-二羟-3-甲基戊酸能够通过AMPK途径降低肝脏脂肪酸合成，一方面，磷酸化和激活丙二酰辅酶A脱羧，降低丙二酰辅酶A水平；另一方面，下调SREBP-1c(sterol regulatory element binding protein 1c)，降低脂肪酸合成酶活性，使脂肪酸去饱和化。
经筛选，本发明发现中草药香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿中含有3，5-二羟-3-甲基戊酸，含量0.3-11mg/kg。为避开提取纯化成本，从经济实用的原则出发，加之作为饲料添加剂使用于畜禽，采集香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿的(茎) 叶作为原料，考虑了(茎)叶的营养丰富性、适口性，同时也考虑了药食兼用。更重要的是，为提高有效成分3，5-二羟基-3-甲基戊酸的含量，本发明发现这些(茎)叶经过发酵后，游离性的3，5-二羟基-3-甲基戊酸含量提高5-10倍。本发明将发酵用于中药炮制，依靠微生物的转化作用及微生物和中草药的协同作用，来提高中草药有效成分含量，增强其药效或产生新的活性成分，降低中草药毒副作用。此外，发酵基质中的酶可分解大分子物质，促使中草药活性成分更易被机体吸收利用。
本发明发现了天然抗脂肪肝药物成分，对于高产畜禽，克服了限制饲养防治脂肪肝的技术缺陷，应用益生菌发酵技术提高中草药活性成分含量的饲料添加剂生产技术，填补了中草药联合益生菌发酵防治畜禽脂肪肝这一领域的空白。
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)
生物材料的菌株编号：BFC190102
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2019年11月7日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.18911
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：红曲霉(Monascus sp.)
生物材料的菌株编号：BFC170401
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2017年12月26日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.15088
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：红酵母(Rhodotorula sp.)
生物材料的菌株编号：BFC170301
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2017年12月26日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.15125
生物材料保藏说明
生物材料的分类命名：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)
生物材料的菌株编号：BFC1602
生物材料的保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
生物材料的保藏单位简称：CGMCC
生物材料的保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101
生物材料的保藏日期：2016年10月21日
生物材料的保藏中心登记入册编号：CGMCC No.13132
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。
本发明使用的复合益生菌菌种类别(编号)和质量百分比为地衣芽孢杆菌(BFC190102-18911)10％-30％、红曲霉(BFC170401-15088)20％-30％、红酵母(BFC170301)30％-50％和植物乳杆菌(BFC1602-13132)10％-30％。
地衣芽孢杆菌(BFC190102-18911)：地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BFC190102，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.18911。
红曲霉(BFC170401-15088)：红曲霉(Monascus sp.)BFC170401，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.15088。
红酵母(BFC170301)：红酵母(Rhodotorula sp.)BFC170301，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.15125。
植物乳杆酸菌(BFC1602-13132)：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)BFC1602，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCCNo.13132。
下述实施例中3，5-二羟-3-甲基戊酸的测定方法参照下述文献中的方法：孙绍鹏.扭脱甲基杆菌AM1高产甲羟戊酸发酵工艺优化[D].安徽工程大学,2019.
实施例1
1.复方中草药的制备
(1)将干制香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿的茎叶部分，粉碎至60目；
(2)将中草药按照质量百分比混匀，即香榧叶40％、钩腺大戟10％、薄荷10％、艾草10％、青蒿30％，混合得复方中草药。
2.复合益生菌种子液的制备
(1)各菌种分别摇瓶培养，地衣芽孢杆菌使用产孢培养液，LB培养基，121℃高压灭菌20min，pH7.2，35℃培养24h。植物乳杆菌使用MRS培养液进行培养，pH6.5， 121℃高压灭菌30min，37℃培养24h。红酵母培养基配方：蔗糖1.5％，蛋白胨1.0％，酵母膏0.5％，磷酸二氢钾0.15％，硫酸镁0.01％，氯化钠1.0％，pH5.0，121℃高压灭菌30min，30℃培养15h。红曲霉培养基：蔗糖1.5％，蛋白胨2.0％，硫酸二氢钾0.2％，硫酸镁0.1％，硝酸钠0.05％，米粉3％，玉米浆干粉5％，pH4.0，121℃高压灭菌30min， 30℃培养36h。
(2)地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌分别逐步进行一级(50L罐)、二级(500L罐)液体扩大培养，接种量为15％；
(3)将各菌种二级扩大培养液按照比例混合，得到复合益生菌种子液，其中，所述复合益生菌种子液中，各菌以活菌数计，其浓度(CFU/mL)如下：地衣芽孢杆菌1 ×108、红曲霉2×108、红酵母5×108和植物乳杆菌3×108。
3.发酵中草药饲料添加剂的制备
(1)准确称取复方中草药，以与水质量百分比为1：100比例投入到容器中，加入5％玉米浆，2％豆粕粉，121℃灭菌30min，得到复方中草药液体；
(2)以10％接种量(质量百分含量)，将所述益生菌种子液接种至所述复方中草药液体中，在37℃下发酵2d；
(3)60℃烘干，即制得发酵中草药饲料添加剂。
(4)制得的发酵中草药饲料添加剂中抗脂肪肝药物成分含量：3，5-二羟-3-甲基戊酸585mg/kg。
实施例2
1.复方中草药的制备
(1)将香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿的茎叶部分粉碎至70目；
(2)将中草药按照质量百分比混匀，即香榧叶20％、钩腺大戟20％、薄荷20％、艾草30％、青蒿10％，混合得复方中草药。
2.复合益生菌种子液的制备
(1)各菌种分别摇瓶培养，地衣芽孢杆菌使用产孢培养液，LB培养基，121℃高压灭菌20min，pH7.2，35℃培养24h。植物乳杆菌使用MRS培养液进行培养，pH6.5， 121℃高压灭菌30min，37℃培养24h。红酵母培养基配方：蔗糖1.5％，蛋白胨1.0％，酵母膏0.5％，磷酸二氢钾0.15％，硫酸镁0.01％，氯化钠1.0％，pH5.0，121℃高压灭菌30min，30℃培养15h。红曲霉培养基：蔗糖1.5％，蛋白胨2.0％，硫酸二氢钾0.2％，硫酸镁0.1％，硝酸钠0.05％，米粉3％，玉米浆干粉5％，pH4.0，121℃高压灭菌30min， 30℃培养36h。
(2)地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌分别逐步进行一级(50L罐)、二级(500L罐)液体扩大培养，接种量为15％；
(3)将各菌种二级扩大培养液按照比例混合，得到复合益生菌种子液，其中，所述复合益生菌种子液中，各菌以活菌数计，其浓度(CFU/mL)如下：地衣芽孢杆菌3 ×108、红曲霉3×108、红酵母3×108和植物乳杆菌1×108。
3.发酵中草药饲料添加剂的制备
(1)准确称取复方中草药，以与水质量百分比为1：100比例投入到容器中，加入5％玉米浆，2％豆粕粉，121℃灭菌30min，得到复方中草药液体；
(2)以10％接种量(质量百分含量)，将所述益生菌种子液接种至所述复方中草药液体中，在35℃下发酵3d；
(3)65℃烘干，即制得发酵中草药饲料添加剂。
(4)制得的发酵中草药饲料添加剂中抗脂肪肝药物成分含量：3，5-二羟-3-甲基戊酸683mg/kg。
实施例3
1.复方中草药的制备
(1)将干制香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草和青蒿的茎叶部分粉碎至80目；
(2)将中草药按照质量百分比混匀，即香榧叶30％、钩腺大戟10％、薄荷20％、艾草20％、青蒿20％，混合得复方中草药。
2.复合益生菌种子液的制备
(1)各菌种分别摇瓶培养，地衣芽孢杆菌使用产孢培养液，LB培养基，121℃高压灭菌20min，pH7.2，35℃培养24h。植物乳杆菌使用MRS培养液进行培养，pH6.5， 121℃高压灭菌30min，37℃培养24h。红酵母培养基配方：蔗糖1.5％，蛋白胨1.0％，酵母膏0.5％，磷酸二氢钾0.15％，硫酸镁0.01％，氯化钠1.0％，pH5.0，121℃高压灭菌30min，30℃培养15h。红曲霉培养基：蔗糖1.5％，蛋白胨2.0％，硫酸二氢钾0.2％，硫酸镁0.1％，硝酸钠0.05％，米粉3％，玉米浆干粉5％，pH4.0，121℃高压灭菌30min， 30℃培养36h。
(2)短小芽孢杆菌、植物乳杆菌和酿酒酵母分别逐步进行一级(50L罐)、二级(500L罐)液体扩大培养，接种量为15％；
(3)将各菌种二级扩大培养液按照比例混合，得到复合益生菌种子液，其中，所述复合益生菌种子液中，各菌以活菌数计，其浓度(CFU/mL)如下：地衣芽孢杆菌2 ×108、红曲霉3×108、红酵母4×108和植物乳杆菌2×108。
3.发酵中草药饲料添加剂的制备
(1)准确称取复方中草药，以与水质量百分比为1：100比例投入到容器中，加入5％玉米浆，2％豆粕粉，121℃灭菌30min；
(2)以10％接种量(质量百分含量)，将所述益生菌种子液接种至所述复方中草药液体中，在30℃下发酵5d；
(3)65℃烘干，即制得发酵中草药饲料添加剂。
(4)制得的发酵中草药饲料添加剂中抗脂肪肝药物成分含量：3，5-二羟-3-甲基戊酸637mg/kg。
试验例1
将504只50周龄健康肉用种母鸡随机等分为7组，即对照组，饲喂基础日粮。试验组1-3在基础日粮基础上分别添加本发明实施例1-3添加剂，添加量为2％。试验组 4-6在基础日粮基础上分别添加本发明实施例1-3添加剂，添加量为5％。基础日粮来自市售全价肉种鸡后期饲料。饲养试验期28d。本发明的抗脂肪肝和生产性能的试验结果见表1。
表1.实施例1-3对肉种鸡的抗脂肪肝效果和生产性能比较
从表1可以看出，与对照组相比，试验组1-6使用本发明添加剂显著降低脂肪肝生化指标，降低幅度为甘油三酯20.4％-42.4％、总胆固醇12.5％-38.7％、β-脂蛋白 20.2％-42.4％、谷草转氨酶25.0％-58.5％、谷丙转氨酶28.9％-49.4％；生产性能指标，产蛋率提高7.7％-12.7％；而对死亡率没有显著影响。试验结果表明，本发明抗脂肪肝发酵中草药饲料添加剂能有效调控肉种鸡肝脏脂肪代谢，抑制肝内脂肪沉积，显著提高产蛋率。
试验例2
选择210头体重、胎次、产奶量一致的健康奶牛随机等分为7组，即对照组，饲喂基础日粮。试验组1-3在基础日粮基础上分别添加本发明实施例1-3添加剂，添加量为3％。试验组4-6在基础日粮基础上分别添加本发明实施例1-3添加剂，添加量为 5％。基础日粮来自市售TMR饲料。饲养试验期28d。本发明的抗脂肪肝和产奶性能的试验结果见表2。
表2.实施例1-3对奶牛的抗脂肪肝效果和生产性能比较
从表1可以看出，与对照组相比，试验组1-6使用本发明添加剂显著降低脂肪肝生化指标，降低幅度为甘油三酯10.5％-33.3％、总胆固醇20.8％-43.4％、β-脂蛋白 22.7％-44.1％、谷草转氨酶22.0％-48.8％、谷丙转氨酶28.4％-47.1％；生产性能指标，提高产奶量11.1％-28.5％，降低体细胞数14.9％-28.0％，而对乳脂率、乳蛋白率没有影响。试验结果表明，本发明抗脂肪肝发酵中草药饲料添加剂能有效调控奶牛肝脏脂肪代谢，抑制肝内脂肪沉积，显著提高产奶量。
Claims (10)
1.一种中草药联合发酵饲料添加剂的制备方法，是由复方中草药经过复合益生菌发酵制得；
其中，所述复方中草药由下述质量百分含量的组分组成：香榧20％-40％、钩腺大戟10％-20％、薄荷10％-20％、艾草10％-30％、青蒿10％-30％；
所述复合益生菌包括地衣芽孢杆菌、红曲霉、红酵母和植物乳杆菌。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述香榧、钩腺大戟、薄荷、艾草、青蒿均选自其树叶或茎叶部分入药；
所述复合益生菌中，各菌以活菌数计的(CFU)配比为：地衣芽孢杆菌：红曲霉：红酵母：植物乳杆菌＝(1-3)∶(2-3)∶(3-5)∶(1-3)；
具体的，所述复合益生菌中的地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)BFC190102；所述地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BFC190102在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.18911；
所述复合益生菌中的红曲霉为红曲霉(Monascus sp.)BFC170401；所述红曲霉(Monascus sp.)BFC170401在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.15088；
所述复合益生菌中的红酵母为红酵母(Rhodotorula sp.)BFC170301；所述红酵母(Rhodotorula sp.)BFC170301在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.15125；
所述复合益生菌中的植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)BFC1602；所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)BFC1602在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.13132。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于：所述方法包括下述步骤：
1)将组成复方中草药的各味药材粉碎至60-80目，按比例混合得到复方中草药；
2)将所述复方中草药和水按照质量比1：100-200比例混合，再加入玉米浆、豆粕，灭菌，得到复方中草药液体；其中，所述玉米浆的加入量为所述复方中草药和水总质量的5％-8％，所述豆粕的加入量为所述复方中草药和水总质量的3％-5％；
3)将所述复合益生菌接种到所述复方中草药液体中，进行发酵培养，得到所述中草药联合发酵饲料添加剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述灭菌的条件为121℃灭菌30min；
上述方法步骤3)中，所述发酵培养的条件为：35-40℃下发酵2-5d；
所述方法还包括对上述中草药联合发酵饲料添加剂进行干燥的步骤，所述干燥的条件为60-65℃烘干。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中，所述复合益生菌以复合益生菌种子液的形式接种到所述复方中草药液体中，以10％-20％接种量接种；
所述复合益生菌种子液中，各菌以活菌数计，其浓度(CFU/mL)如下：地衣芽孢杆菌1×108-3×108、红曲霉2×108-3×108、红酵母3×108-5×108和植物乳杆菌1×108-3×108。
6.权利要求1-5中任一项所述方法制备得到的中草药联合发酵饲料添加剂。
7.一种防治畜禽脂肪肝的饲料，包括畜禽基础饲料和权利要求6所述的中草药联合发酵饲料添加剂；优选的，所述饲料中，中草药联合发酵饲料添加剂的含量为所述畜禽基础饲料质量的2％-5％。
8.权利要求1或2中所述的复方中草药，或权利要求1或2中所述的复合益生菌。
9.如下任一所述的应用：
(I)权利要求6所述的中草药联合发酵饲料添加剂或权利要求7所述的饲料在防治畜禽脂肪肝中的应用；
(II)权利要求6所述的中草药联合发酵饲料添加剂或权利要求7所述的饲料在提高畜禽健康水平和/或提高畜禽生产性能中的应用；
(III)权利要求8所述复合益生菌在制备所述中草药联合发酵饲料添加剂或所述饲料中的应用；
(IIII)权利要求8所述复方中草药在制备所述中草药联合发酵饲料添加剂或所述饲料中的应用。
10.3，5-二羟基-3-甲基戊酸在制备畜禽用防治脂肪肝的药物和/或饲料和/或饲料添加剂中的应用。
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