CN114569503A

CN114569503A - 包含天然复合提取物的用于改善头皮状态的化妆品组合物

Info

Publication number: CN114569503A
Application number: CN202110767508.4A
Authority: CN
Inventors: 车永权; 郑柱泰; 李光然; 赵昭贤; 李大雨; 文银贞
Original assignee: Dema Skin Research; Cosmecca Korea Co Ltd
Current assignee: Dema Skin Research; Cosmecca Korea Co Ltd
Priority date: 2020-12-02
Filing date: 2021-07-07
Publication date: 2022-06-03
Anticipated expiration: 2041-07-07
Also published as: KR102247777B1; CN114569503B

Abstract

本发明涉及如下化妆品组合物：包含天台乌药(Linderastrychnifolia)、合欢树(Albizia julibrissin)及日本栗(Castanea crenata)复合提取物作为有效成分，表现出对头皮有害菌的抗菌活性、抗氧化活性、抑制头皮皮脂分泌过剩的活性、保持适当头皮pH值及减少头皮热的活性，由此具有优秀的头皮状态改善效果。

Description

包含天然复合提取物的用于改善头皮状态的化妆品组合物

技术领域

本发明涉及包含天台乌药(Lindera strychnifolia)、合欢树(Albiziajulibrissin)及日本栗(Castanea crenata)复合提取物作为有效成分的化妆品组合物，具体地，涉及如下的用于改善头皮状态的化妆品组合物：包含天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物作为有效成分，对头皮有害菌的抗菌力优秀，抑制氧化应激、抑制头皮的皮脂分泌过剩、保持适当pH值及减少头皮热的效果优秀。

背景技术

头皮(scalp)作为保护头部的皮肤组织，除了缓冲外部的物理刺激或化学变化来保持并保护头部内部的原本功能外，在提高生活质量的层面也有很大的功能。由于现代人西化的饮食习惯和生活习惯、污染、压力以及为了美容而向头皮施加的物理、化学刺激等诸多原因，从头皮瘙痒症、头皮屑、各种头皮炎等的问题性头皮最终发展为脱发的人增多。据报告，上述问题性头皮和脱发的持续，加深抑郁、不安的症状且提高压力知觉度，从而给人际关系或异性关系带来困扰(徐淳钰及张美淑，2012；李志敏及金株燮，2013)。

损伤头皮的生理性原因可以为由从人体分泌的分泌物引起的头皮的污染。代表性的分泌物为皮脂，上述分泌物妨碍头皮的呼吸，堵住毛孔周围而阻碍从外部吸收营养成分并妨碍毛发的生长。并且，超出pH 4.5～pH 5.5的正常头皮的适当pH值，诱导头皮微生物的过度增殖，成为头皮屑(dandruff)、炎症及红斑的病因。因此，可以通过抑制头皮皮脂分泌的过多及调节头皮pH值来谋求头皮的健康及保护(俞敏静及李淑英，2010；金美京及姜相模，2013)。

许多皮肤疾病由寄居在人类皮肤的多种细菌引发，其中最具代表性的疾病为头皮屑。头皮屑是指在没有发红或如糜烂的炎症症状的情况下头皮的角质细胞和皮脂的分解氧化物、各种皮肤细菌混合在一起以米糠模样从头皮脱落的现象，被视作脂溢性皮炎的轻微症状。与头皮屑生成相关的头皮常驻微生物为糠秕马拉色菌(Malassezia furfur，M.furfur)，不仅诱发头皮屑，还诱发脂溢性皮炎、头皮炎、湿疹、瘙痒症、脱发、痤疮等。因此，对糠秕马拉色菌具有抑菌效果的天然材料可以多种多样地用于头皮健康用洗发精、护发素、护肤水等(徐京儿及李纯花，2015)。

头皮位于人体的最上部，是最易受到阳光或气温影响的部位。尤其在夏季，头皮因受高温影响的头皮热的上升而引起作用于头皮功能的多种蛋白质酶活性的变化。并且，中医中说明了因不当的生活习惯等使脏腑功能降低，体内热积聚而发生头皮热，从而可能诱发脱发。因此，调节过度发生的头皮热对头皮健康很重要。

用于烫发、染发等化学性操作的双氧水引起毛发损伤和多种头皮疾病。尤其，诱发皮肤的氧化应激，从而诱发通过皮肤抗氧化剂的破坏、蛋白质的氧化、脱氧核糖核酸(DNA)损伤、皮肤结合组织的损伤而引起的加速老化。因此，对于改善头皮环境，抗氧化可以成为非常重要的治疗目标(俞敏静及李淑英，2010)。

本发明人为了发掘能够通过多种方式改善头皮环境来表现出增进头皮健康的功效的天然材料复合提取物而进行研究，经过筛选，最终选择天台乌药、合欢树及日本栗三种材料。确认在将它们混合制备为复合提取物的情况下具有如下效果：具有对于头皮产生有害影响的微生物的优秀的抗菌力，表现出消除自由基的能力，并且抑制头皮皮脂的分泌过剩，保持适当的pH值，大大增进减少头皮热，从而完成了本发明。

现有技术文献

专利文献

专利文献0001：韩国公开专利第10-2018-0040638号(2018年04月20日)

专利文献0002：韩国公开专利第10-2011-0001538号(2011年01月06日)

专利文献0003：韩国公开专利第10-2010-0136308号(2010年12月28日)

专利文献0004：韩国公开专利第10-2006-0068495号(2006年06月21日)

发明内容

本发明的目的在于，提供用于改善头皮状态的化妆品组合物，其包含天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物作为有效成分。

为了实现上述目的，本发明提供用于改善头皮状态的化妆品组合物，包含天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物作为有效成分。

上述天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物是分别以1～3∶1～3∶1～3的重量比例混合天台乌药、合欢树及日本栗后提取制备的。

并且，为了实现上述目的，本发明提供用于改善头皮状态的化妆品组合物，包含天台乌药、合欢树、日本栗及白鲜复合提取物作为有效成分。

上述天台乌药、合欢树、日本栗及白鲜复合提取物是分别以1～3∶1～3∶1～3∶1～3的重量比例混合天台乌药、合欢树、日本栗及白鲜后提取制备的。

相对于化妆品组合物的总重量，包含0.001重量百分比～10重量百分比的作为有效成分的上述复合提取物。

上述化妆品组合物的特征在于，具有对糠秕马拉色菌的抗菌活性。并且，上述化妆品组合物的特征在于，具有抗氧化活性。并且，上述化妆品组合物的特征在于，具有抑制皮脂分泌过剩的活性。并且，上述化妆品组合物的特征在于，具有保持头皮pH值及减少头皮热的活性。

本发明的包含天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物作为有效成分的化妆品组合物含有天然提取物，因此安全，通过其相乘作用表现出优秀的抗菌及抗氧化功效、抑制皮脂分泌过剩、保持适当pH值、减少头皮热的功效。

具体实施方式

以下，为了帮助对本发明的理解，将详细说明发明的内容。

根据本发明，提供包含天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物作为有效成分的化妆品组合物。

天台乌药为双子叶植物纲毛茛目樟树科(Lauraceae)的常绿灌木或小乔木，根部干燥后用作称为乌药的生药。天台乌药的成分已知有倍半萜类化合物(sesquiterpenoid)、单帖类化合物(monoterpene)、黄酮类化合物(flavonoid)、生物碱(alkaloid)类化合物(生药学，2008)，据报告，功效有改善脱发、促进毛发生长、改善头皮微生物菌群等(E.Filaireet al.,2020)。

合欢树为豆科(Fabaceae)的落叶小乔木，在韩国各地均有生长。合欢树的嫩叶和花的香气好，因此与普通蔬菜一样通过烹饪来食用，叶干燥后用作茶的代用品。并且，花和茎皮在中药中称为合欢花和合欢皮，应用于治疗及预防失眠、心神不宁、跌打伤、骨折伤及皮肤疾病。据报告，合欢树的成分为黄酮类化合物及皂苷类(saponin)化合物，已知有抗氧化、抗菌等功效(李阳淑等，2011；MJ Jung et al.,2003；YS Lee et al.,2011；X Bai etal.,2014)。

日本栗树为壳斗科(Fagaceae)落叶乔木，在韩国国内主要用于果实生产而栽培。日本栗的理化成分由水分、粗蛋白质、粗脂肪等组成，此外的成分还有日本栗果肉内的阿魏酸(ferulic acid)、咖啡酸(caffeic acid)等，据报告，日本栗的内皮(栗皮)部分中有11.0％～12.3％的缩合型单宁。尤其是日本栗的内皮已知具有保湿、抗氧化、美白、改善皱纹等皮肤改善功效。(金振润等，2014；郑熙禄等，2011)。

根据本发明的一具体例，上述天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物通过如下方式制备。首先，分别以1～3∶1～3∶1～3的重量比例混合事先干燥的天台乌药、合欢树及日本栗。在此情况下，使用天台乌药的全草或根，使用选自由合欢树的皮、花、茎及叶组成的组中的至少一种，使用选自由日本栗的皮、壳斗、花、枝及叶组成的组中的至少一种。

然后，向上述混合物添加选自由水、碳原子数为1至4的无水或含水醇、乙酸乙酯、丙酮、丙三醇、乙醇、丙二醇及丁二醇组成的组中的至少一种提取溶剂，通过常规方法提取，过滤并干燥后制备复合提取物。

在分别以1～3∶1～3∶3的重量比例混合天台乌药、合欢树及日本栗来提取的情况下，表现出更为优秀的活性，在以1∶3∶3的重量比例混合来提取的情况下，表现出最优秀的活性。

相比于天台乌药、合欢树或日本栗的单独提取物，以上述方式制备的上述天台乌药、合欢树及日本栗的复合提取物表现出更优秀的抗菌、抗氧化功效，抑制皮脂分泌过剩、保持适当pH值、减少头皮热的功效，可以确认混合后活性成分之间的相乘效果。

根据本发明的另一具体例，提供用于改善头皮状态的化妆品组合物，包含在上述天台乌药、合欢树、日本栗追加白鲜来制备的复合提取物作为有效成分。

白鲜为原产于韩国的多年生草本，属于芸香科(Rutaceae)。在包括韩国及中国在内的亚洲地区的民间，很久以前就开始广泛地将白鲜的根皮干燥后的白鲜皮用于治疗皮肤瘙痒症、湿疹、丘疹等皮肤疾病，已知对过敏性皮炎也有效果(崔显奎等，2011；H Kim etal.,2013)。

当制备作为有效成分的上述复合提取物时，可分别以1～3∶1～3∶1～3∶1～3的重量比例混合天台乌药、合欢树、日本栗及白鲜来提取，更优选地，以1∶3∶3∶1～3的重量比混合来提取，最优选地，以1∶3∶3∶1的重量比混合来提取。在此情况下，使用白鲜的全草、根或根皮。

如上所述，在天台乌药、合欢树及日本栗的组合中追加白鲜来制备提取物的情况下，相比于天台乌药、合欢树及日本栗三种的组合及单独的白鲜提取物的情况，在相同的用量下，改善头皮的功效更为优秀。由此确认在追加白鲜的情况下，在改善头皮的效果中表现出相乘作用。

本发明的天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物和天台乌药、合欢树、日本栗及白鲜复合提取物在不影响源自皮肤的细胞株的存活率(试验例1)的情况下，表现出对于头皮产生有害影响的糠秕马拉色菌(M.furfur)的优秀的抗菌活性(试验例2)和消除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH，1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)自由基的能力(试验例3)。并且，抑制与头皮皮脂分泌相关的5-α-还原酶(5-α-reductase)的活性(试验例4)，在源自皮肤的细胞株中保持pH值并大大增大与减少皮肤热感相关的因子的表达(试验例5及试验例6)。并且，在将这些复合提取物应用于精华素及霜剂剂型时，在室温、冷藏、恒温条件下表现出剂型稳定性(试验例7)。因此，上述化妆品组合物可以有效地用作用于改善头皮状态的化妆品。

相比于化妆品组合物的总重量，可以包含0.001重量百分比～10重量百分比的作为有效成分的上述复合提取物。若包含小于0.001重量百分比的复合提取物，则效果微乎其微，若大于10重量百分比，则在皮肤中有可能表现出不期待的作用，因此考虑为上述范围。

本发明的化妆品组合物可以制备为通常制备的任意剂型，例如，可以例举化妆水、霜剂、精华、洗面奶、卸妆水、女性清洁剂、面膜、润肤露、护肤油、护肤凝胶、洗发剂、护发素、护发精华、发胶、粉底霜、口红、睫毛膏、隔离霜等。

实施例

以下，通过详细说明实施例来帮助本发明的理解。下述实施例仅用于例示本发明的内容，本发明的范围并不限定于下述实施例。本发明的实施例是为了对本发明所属技术领域的普通技术人员更完整地说明本发明而提供。

制备例1～4：天台乌药、合欢树、日本栗或白鲜提取物的制备

分别向100g的干燥的天台乌药根(制备例1)、合欢树皮(制备例2)、日本栗皮(制备例3)、白鲜根(制备例4)加入10倍重量的作为提取溶剂的含水乙醇，在配置有冷凝器的提取器(Cosmos-660型，KYUNGSEO公司)中加热至80℃～100℃，每次提取2小时且共提取三次。

按照上述方法提取后，在室温下放置3天，然后使用300目的过滤纸过滤沉淀物，使用advance tech公司的5号过滤纸和whatman GFC 150mm过滤纸过滤两次来制备提取物。

实施例1～13：复合提取物的制备

向100g的以下述表1所示的重量比混合干燥的天台乌药根、合欢树皮、日本栗皮、白鲜根的混合物添加10倍重量的作为提取溶剂的含水乙醇，在配置有冷凝器的提取器(Cosmos-660型，KYUNGSEO公司)中加热至80℃～100℃，每次提取2小时且共提取三次。

表1

重量比	天台乌药	合欢树	日本栗	白鲜
					实施例1	1	1	1	0
实施例2	3	1	1	0
					实施例3	1	3	1	0
实施例4	3	3	1	0
					实施例5	1	1	3	0
实施例6	3	1	3	0
					实施例7	1	3	3	0
实施例8	1	1	3	3
					实施例9	3	1	3	3
实施例10	1	3	3	3
					实施例11	1	1	3	1
实施例12	3	1	3	1
					实施例13	1	3	3	1

试验例1：确认有无细胞毒性

为了确认有无细胞毒性，在添加有10％的胎牛血清的DMEM培养基中培养作为角质细胞株的HaCaT，以5×10⁵的细胞浓度接种于96孔培养板(96well plate)后，在37℃、5％的CO₂的培养器中培养24小时。培养后去除培养基，使用二甲基亚砜分别稀释上述制备例及实施例中制备的提取物来使试样浓度分别成为0.1％、0.5％、1.0％，处理所制备的稀释溶液并培养24小时后，在各孔(well)中添加100ml的3-[4,5-二甲基噻唑-2基]-2,5-二苯基四唑鎓硼酰胺(MTT，3-[4,5-dimethylthiazol-2yl]-2,5-diphenyltetrazoliumboromide，Sigma公司)溶液(3mg/ml)后，再培养4小时。之后，去除上清液，添加150μl的二甲基亚砜后，振荡(shaking)30分钟，溶解生成的甲臜(formazan)后使用多功能酶标仪(multimicroplate reader)(Molecular device Spectra max190)在540nm的波长下测定吸光度。通过如下式计算细胞存活率，其结果如下述表2所示。

细胞存活率(％)＝试样添加组的吸光度/对照组的吸光度×100

表2

如上述表2的结果所示，制备例及实施例全都表现出95％以上的细胞存活率，由此确认对于细胞毒性没有影响，从而确认没有安全方面的问题。

试验例2：确认对糠秕马拉色菌的抗菌效果

用于实验的糠秕马拉色菌菌株是从韩国生命工程研究院生物资源中心(KCTC；Korea Collection for Type Culture)获得的，利用在液体培养基或固体培养基中增殖的新鲜培养菌传代培养2天～3天后使用。用于抗菌性试验的平板培养基的制备如下：对添加有15％的琼脂的生育培养基进行灭菌后在每个培养皿中接种15ml来凝固基层用培养基，使实验菌的浓度达到1×10⁶CFU/ml后，在添加有0.7％的琼脂的中层用培养基中制备接种菌的平板培养基。将制备例或实施例的提取物制备为0.1％及1.0％的浓度的试样后，各以20μl在滤纸圆片(filter paper disc)(8mm的滤纸圆片(advantec公司，东京))上加样(loading)两次。通过圆片(Disc)周围有无抑菌圈(inhibition zone)的生成及其尺寸来检验其抗菌活性，其结果如表3所示。

表3

如上述表3的结果所示，与制备例的各提取物相比，本发明实施例的天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物对糠秕马拉色菌菌株的抑菌圈的尺寸更大，并可确认对相关菌株的抗菌力优秀。并且，可以在追加混合白鲜来制备的实施例8～13中确认更为优秀的抗菌效果。

试验例3：确认消除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的能力

向0.8ml的溶解在95％的乙醇的0.4mM的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼溶液分别添加0.2ml的浓度为0.1％及1.0％的制备例或实施例的提取物并混合后，放置约5分钟，之后使用多功能酶标仪在517nm的波长下测定吸光度。通过如下式计算消除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的能力，其结果如表4所示。

消除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的能力(％)＝((对照组的吸光度－试样添加组的吸光度)/对照组的吸光度)×100

表4

如上述表4的结果所示，与制备例的各提取物相比，本发明实施例的天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物表现出更高的消除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的能力，从而可以确认这些复合提取物的抗氧化功效优秀。并且，可以在追加混合白鲜来制备的实施例8～13中确认更为优秀的抗氧化效果。

试验例4：确认抑制5-α-还原酶活性的功效

作为与皮脂分泌相关的主要酶的5-α-还原酶的活性是通过测定在睾酮底物存在时通过5-α-还原酶的还原型辅酶II(NADPH)的减少程度来确认的。混合25nM的5-α-还原酶、350ng/ml的睾酮及480nM的还原型辅酶II后，添加制备例或实施例的提取物使上述提取物的最终浓度分别成为0.1％及1.0％。在340nm的波长的吸光度下测定还原型辅酶II的减少速度，通过如下式计算抑制酶活性的功效，其结果如表5所示。

抑制5-α-还原酶活性的功效(％)＝((对照组的吸光度－试样添加组的吸光度)/对照组的吸光度)×100

表5

如上述表5的结果所示，与制备例的各提取物相比，本发明实施例的天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物进一步抑制5-α-还原酶的活性，从而可以确认这些复合提取物通过抑制5-α-还原酶来减少皮脂分泌的功效优秀。并且，可以在追加混合白鲜来制备的实施例8～13中确认更为优秀的效果。

试验例5：增加pH值调节因子分泌型磷脂酶A2(sPLA2)的表达的效果

在表皮中表达的酶分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2)与游离脂肪酸和磷脂的生成有关，最终作用于皮肤表皮屏障功能及pH值调节中(D Llic,et al.,2015)。通过如下方法确认分泌型磷脂酶A2的信使核糖核酸(mRNA)的表达程度。利用包含10％的胎牛血清及1％的青霉素/链霉素的DMEM培养基，在37℃、5％的CO₂的恒湿培养器中培养作为人类角质细胞株的HaCaT细胞。以1×10⁶cells/well的浓度(density)将HaCaT接种于24孔培养板使其在培养板上附着24小时后，使用包含1.0％浓度的试样的新的培养基处理并培养6小时。之后，回收细胞后使用TRIzol试剂(TRIzol reagent)提取核糖核酸(RNA)，利用寡聚胸腺嘧啶20引物(oligo-(dT)20primer)及超级反转录酶III(SuperscriptIII RT)合成互补脱氧核糖核酸(cDNA)。利用Fast Start DNA Master SYBR Green I kit进行实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR)。

分泌型磷脂酶A2信使核糖核酸的表达量是以β-肌动蛋白(β-actin)为内标(internal reference)来计算结果的。分泌型磷脂酶A2的引物序列(primer sequence)(5'→3')为正向(Forward)：GGCCGGGGCAGAAGTTGAGAC，反向(Reverse)：AGGGTAGGGAGGGAGGGTATGAGAG。结果如表6所示。

表6

如上述表6的结果所示，与制备例的各提取物相比，本发明实施例的天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物增加了分泌型磷脂酶A2的信使核糖核酸的表达。并且，追加混合白鲜来制备的实施例8～13表现出更为优秀的效果，尤其是实施例13表现出最为优秀的增加分泌型磷脂酶A2的表达的功效。

试验例6：增加冷受体TRPM8的表达的效果

存在于纤维的细胞膜上的冷受体瞬时受体蛋白8(TRPM8，transient receptorprotein 8)根据温度变化移动阳离子并向大脑传导其感觉。尤其，瞬时受体蛋白8是在18℃～28℃的温度范围内反应的冷受体，若被激活，则向大脑传递凉爽的感觉(D Mckemy，2007)。瞬时受体蛋白8的信使核糖核酸的表达程度是通过试验例5的方法确认的。使用包含1.0％浓度的试样的新的培养基处理作为人类角质细胞株的HaCaT细胞并培养6小时。之后，回收细胞后提取核糖核酸来合成互补脱氧核糖核酸，并进行实时定量聚合酶链式反应。

瞬时受体蛋白8的信使核糖核酸的表达量是以β-肌动蛋白为内标来计算结果的，瞬时受体蛋白8的引物序列(5'→3')为正向：CGGTCATCTACGAGCCCTAC，反向：CACACACAGTGGCTTGGACT。结果如表7所示。

表7

如上述表7的结果所示，与制备例的各提取物相比，本发明实施例的天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物增加了瞬时受体蛋白8的信使核糖核酸的表达。并且，在追加混合白鲜来制备的实施例8～13中表现出更为优秀的效果。

实施例14：制备包含天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物的精华素

根据常规方法以下述表8所示的组成成分及含量制备包含上述实施例7的复合提取物的精华素。

实施例15：制备包含天台乌药、合欢树、日本栗及白鲜复合提取物的精华素

根据常规方法以下述表8所示的组成成分及含量制备包含上述实施例13的复合提取物的精华素。

表8

实施例16：制备包含天台乌药、合欢树及日本栗复合提取物的霜剂

根据常规方法以下述表9所示的组成成分及含量制备包含上述实施例7的复合提取物的霜剂。

实施例17：制备包含天台乌药、合欢树、日本栗及白鲜复合提取物的霜剂

根据常规方法以下述表9所示的组成成分及含量制备包含上述实施例13的复合提取物的霜剂。

表9

试验例7：确认剂型稳定度

将上述实施例14～17中制备的剂型装在不透明硝子容器中，分别在保持室温(25℃)、冷藏(4℃)及恒温(50℃)的室内、冰箱及恒温箱里保管12周及24周并观察(变色、变臭及分离)，来确认其稳定性。结果如表10所示。

表10

剂型稳定等级

0：无变化，1：细微变化，2：变化，3：严重变化

如上述表10所示，在25℃、4℃及50℃的温度条件下，实施例14～17的剂型均没有出现变色、变臭及分离的现象，确认了它们的稳定性。