CN114323874A

CN114323874A - 一种奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法

Info

Publication number: CN114323874A
Application number: CN202210099320.1A
Authority: CN
Inventors: 苏立林; 陈龙; 刘橙; 张璐; 余艳平; 范昭泽; 胡仁军
Original assignee: Wuhan Jiuzhou Yumin Medical Technology Co ltd
Current assignee: Wuhan Jiuzhou Yumin Medical Technology Co ltd
Priority date: 2022-01-25
Filing date: 2022-01-25
Publication date: 2022-04-12

Abstract

本发明公开了一种奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法。该检测方法包括以下步骤：(1)采用电感耦合等离子体质谱测试对照品溶液中杂质元素与内标元素的响应比，并得到线性方程；(2)再测试供试品溶液中待测杂质元素与内标元素的响应比，并代入线性方程；目标杂质元素包括Li、Sb、Cu、V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb；供试品溶液中待测样品的浓度为0.1～0.4mg/mL；供试品溶液的制备方法包括以下步骤：将待测样品与硝酸的混合液消解后再进行稀释，待测样品与硝酸的质量体积比为5～8mg/mL。本发明的检测方法能够快速有效的同时检测出奥扎格雷钠中多种杂质元素的含量，稳定性好、检测高效。

Description

一种奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法

技术领域

本发明涉及一种奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法。

背景技术

奥扎格雷钠(ozagrel sodium)，化学名为反式-3-[4-(1H-咪唑-1-甲基)苯基]-2-丙烯酸钠，是日本小野药品工业株式会社与1989年以商品名Cataclot投放市场的首个血栓素合成酶(TX)抑制剂，具有抗血小板聚集和抗张血管作用，用于治疗脑血栓及伴随的运动障碍。在制备奥扎格雷钠的过程中不可避免的引入微量的重金属元素，众所周知，重金属元素在人体内代谢缓慢，容易积累，对人体产生危害。

但是目前还未报道过针对奥扎格雷钠原料药如何检测其所含有的重金属元素，该问题还未能够得到解决。

发明内容

本发明主要是为了克服现有技术中存在无有效检测得到能够有效检测奥扎格雷钠中多种金属元素含量的缺陷，而提供了一种奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法。本发明的检测方法能够快速有效的同时检测出奥扎格雷钠中多种杂质元素(V、Co、Ni、As、Cu、Cd、Sb、Hg、Pb和Li)的含量，稳定性好、检测高效。

本发明主要是通过以下技术方案解决上述技术问题的。

本发明提供了一种奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其包括以下步骤：

步骤(1)，采用电感耦合等离子体质谱测试对照品溶液中目标杂质元素与内标元素的响应比，并绘制标准曲线得到线性方程；

步骤(2)，采用电感耦合等离子体质谱测试供试品溶液中待测杂质元素与内标元素的响应比，并代入步骤(1)中相应目标杂质元素的线性方程中即得待测杂质元素的浓度；

所述目标杂质元素包括Li、Sb、Cu、V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb中的一种或多种；

所述供试品溶液中包含待测奥扎格雷钠样品；所述供试品溶液中，所述待测奥扎格雷钠样品的浓度为0.1～0.4mg/mL；

所述供试品溶液的制备方法包括以下步骤：将待测奥扎格雷钠样品与硝酸的混合液消解后再进行稀释即得，所述待测奥扎格雷钠样品与所述硝酸的质量体积比为5～8mg/mL。

本发明中，本领域技术人员根据所述的检测方法可知，所述标准曲线的横坐标一般为目标杂质元素的浓度，纵坐标一般为目标杂质元素与内标元素的响应比。

其中，本领域技术人员知晓，所述线性方程一般为y_n＝ax_n+b，其线性关系系数r＞0.9995，例如0.9996、0.9999或1，其中x为目标杂质元素的浓度，y为该浓度下目标杂质元素与内标元素的响应比，n为V、Co、Ni、As、Cu、Cd、Sb、Hg、Pb或Li中的一种或多种。

本发明中，所述的目标杂质元素较佳地为V、Co、Ni、As、Cu、Cd、Sb、Hg、Pb和Li。本领域技术人员知晓，所述目标杂质元素分别是指⁵¹V、⁵⁹Co、⁶⁰Ni、⁷⁵As、⁶³Cu、¹¹¹Cd、¹²¹Sb、²⁰²Hg、²⁰⁸Pb和⁷Li。

本发明中，在配制所述对照品溶液时，所用的稀释剂可为本领域常规，一般为体积百分比为1.5～2.5％硝酸水溶液，例如2％的硝酸水溶液。

本发明中，所述对照品溶液的配制方法可为本领域常规，一般配制各目标杂质元素的标准品储备液之后，再进行梯度倍数稀释以绘制所述的标准曲线。

其中，当所述目标杂质元素包含Li时，所述Li的标准品储备液的浓度较佳地为900～1100μg/mL，例如1000μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含Sb时，所述Sb的标准品储备液的浓度较佳地为900～1100μg/mL，例如1000μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含Cu时，所述Cu的标准品储备液的浓度较佳地为900～1100μg/mL，例如991μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含V时，所述V的标准品储备液的浓度较佳地为9～11μg/mL，例如10μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含Co时，所述Co的标准品储备液的浓度较佳地为4～6μg/mL，例如5μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含Ni时，所述Ni的标准品储备液的浓度较佳地为18～22μg/mL，例如20μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含As时，所述As的标准品储备液的浓度较佳地为12～17μg/mL，例如15μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含Cd时，所述Cd的标准品储备液的浓度较佳地为1～3μg/mL，例如2μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含Hg时，所述Hg的标准品储备液的浓度较佳地为2～4μg/mL，例如3μg/mL。

其中，当所述目标杂质元素包含Pb时，所述Pb的标准品储备液的浓度较佳地为4～6μg/mL，例如5μg/mL。

其中，所述的梯度倍数稀释的方式可为本领域常规，一般将0.05～1mL的所述标准品储备液稀释至40～60倍后，再配制浓度为0％、20％、50％、100％、150％和300％的梯度即可。

当所述的目标杂质元素为V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb中的一种或多种时，例如将1mL的所述标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数稀释。

当所述的目标杂质元素为Sb时，例如将0.09mL的所述Sb的标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数稀释。

当所述的目标杂质元素为Li时，例如将0.25mL的所述Li的标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数。

当所述的目标杂质元素为Cu时，例如将0.3mL的所述Cu的标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数稀释。

本发明中，当所述目标杂质元素包含V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb中的一种或多种时，所述对照品溶液为各元素的混合溶液。研发人员在实验中发现，上述7种元素配制为特定的浓度，只需配制一份混合对照品溶液即可进样检测，极大减少了测试时间。

本发明中，当所述目标杂质元素包含Sb、Li和Cu中的一种或多种时，所述的对照品溶液为单一元素的对照品溶液。

本发明中，所述内标杂质元素根据所述目标元素的分子量进行合理选择即可。

本发明中，所述的内标元素较佳地包括Ge、Rh、Bi和Be中的一种或多种。本领域技术人员知晓，所述内标元素一般是指⁷²Ge、¹⁰³Rh、²⁰⁹Bi和⁹Be。

其中，当所述目标杂质元素为V、Co、Ni、As和Cu中的一种或多种时，对应的所述内标元素较佳地为Ge。

其中，当所述目标杂质元素为Cd和/或Sb时，对应的所述内标元素较佳地为Rh。

其中，当所述目标杂质元素为Hg和/或Pb时，对应的所述内标元素较佳地为Bi。

其中，当所述目标杂质元素为Li时，对应的所述内标元素较佳地为Be。

本发明中，所述内标元素较佳地配制成内标溶液后，与所述对照品溶液同时进样进行所述的电感耦合等离子体质谱测试。

其中，所述内标溶液的浓度较佳地为0.01～0.12ug/mL，例如0.02ug/mL或0.1ug/mL。

当所述的内标元素为Ge时，所述Ge的内标溶液的进样浓度较佳地为0.08～0.12ug/mL，例如0.1ug/mL。

当所述的内标元素为Bi时，所述Bi的内标溶液的进样浓度较佳地为0.08～0.12ug/mL，例如0.1ug/mL。

当所述的内标元素为Rh时，所述Rh的内标溶液的进样浓度较佳地为0.01～0.03ug/mL，例如0.02ug/mL。

当所述的内标元素为Be时，所述Be的内标溶液的进样浓度较佳地为0.01～0.03ug/mL，例如0.02ug/mL。

本发明中，所述待测奥扎格雷钠样品与硝酸的混合液中，较佳地还包括Au元素。

其中，所述Au元素与所述待测奥扎格雷钠样品的质量比较佳地为(0.0004～0.0006)：1，例如0.0005：1。

其中，所述Au元素较佳地以溶液的形式加入，浓度较佳地为80～120ug/mL，例如100ug/mL。

本发明中，所述消解较佳地为微波消解，例如在微波消解仪中进行。其中，所述的微波消解仪例如为Multiwave 5000。

本发明中，所述消解的温度较佳地为210～240℃，例如230℃。

其中，从室温升温至所述消解的温度的时间较佳地为20～30min，例如25min。所述室温一般是指10～30℃。

其中，在所述消解的温度下进行消解的时间可为本领域常规，一般为20～30min，例如24min、25min或26min。

本发明中，所述的硝酸可为本领域常规在进行所述电感耦合等离子体质谱测试时采用的硝酸，一般为优级纯，质量浓度为69％。

本发明中，所述供试品溶液的制备方法中，所述稀释时采用的稀释剂可为本领域常规，一般为水。

本发明中，所述供试品溶液的制备方法中，所述待测奥扎格雷钠样品与硝酸的质量体积比较佳地为6～7mg/mL，例如(20：3)mg/mL。

本发明中，所述供试品溶液中，所述待测奥扎格雷钠样品的浓度较佳地为0.2～0.3mg/mL，例如0.25mg/mL。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，所述的电感耦合等离子体质谱测试采用的仪器可为本领域常规，例如Agilent ICPMS-7800。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，所述电感耦合等离子体质谱一般在氦气模式下进行测定。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，发射功率较佳地为1520～1580W，例如1550W。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，等离子体气流速较佳地为13～17L/min，例如15L/min。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，辅助气流速较佳地为0.8～1.2L/min，例如1.0L/min。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，雾化气流速较佳地为1～1.1L/min，例如1.05L/min。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，采样深度较佳地为8～12mm，例如10mm。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，氦气流速较佳地为4～6L/min，例如5L/min。

本发明中，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，积分时间较佳地为0.25～0.35s，例如0.2700s、0.3000s或0.3300s。

本发明的研发人员不仅仅对消解中采用的硝酸与待测样品的配比进行了特别的选择，才实现了对待测样品的准确测量，同时在测试过程中，还对消解过程中所涉及的工艺参数，主要消解温度以及消解时间的特别优化、以及采用电感耦合等离子体质谱仪器中发射功率以及气体流速和积分时间的特别优化，才能够使得采用电感耦合等离子体质谱仪能够实现对奥扎格雷钠原料药中多种杂质的测量。

在得到上述技术方案之前，申请人为了实现针对奥扎格雷钠原料药中多种杂质元素的准确测量并符合药典标准，参照过现有技术中已报道的采用电感耦合等离子体质谱仪测试药物中元素杂质的含量的方法，期间也做过很多次尝试，均并未能够实现测量。例如针对供试品溶液的制备过程中，采用硝酸与盐酸为1:3体积比的混合酸与待测样品混合并进行消解，对空白溶液的干扰大，进而影响了样本的检测。还尝试过采用现有技术常用的例如200mg待测奥扎格雷钠样品与8mL硝酸、100mg待测样品与8mL硝酸、100mg待测样品与8mL硝酸与1mL过氧化氢的混合液，进行消解，均出现消解不澄清的情况。其中，例如在采用200mg待测奥扎格雷钠样品与8mL硝酸的配比进行消解之后，进样测试结果导致最终的回收率重复性差。还尝试直接将待测样品与2％硝酸水溶液的混合液进行消解，在进样测试的过程中出现了内标波动较大的情况，也无法实现准确且稳定的测量。经过多次尝试，最终确定本发明的测试方法在特别优化后的消解仪器参数以及电感耦合等离子体质谱仪的参数的配合下，能够实现准确的测量、且重复性好、稳定性好、中间精密度好、耐用性高。

在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：本发明能够准确的检测出奥扎格雷钠中多种杂质元素(As、Cd、Co、Hg、Pb、V、Ni、Li、Sb和Cu)的含量。在本文方法学验证耐用性范围内，均可实现本发明。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。

实施例1

1、目的

为确保该ICPMS分析方法适用于奥扎格雷钠中元素杂质(As、Cd、Co、Hg、Pb、V、Ni、Li、Sb和Cu)的检测分析，满足方法系统适用性要求，保证测试结果的准确性与可靠性，汇总验证数据。

各元素的杂质限定如下表1所示：

表1

元素	限度(ppm)
		As	15
Cd	2
		Co	5
Hg	3
		Pb	5
V	10
		Ni	20
Li	250
		Sb	90
Cu	300

2、范围

根据方法的使用目的，对该方法进行专属性、LOQ、线性、系统精密度、准确度、重复性、溶液稳定性、中间精密度和耐用性考察，测试结果符合相应规定。

3、偏差

验证过程中没有出现偏差。

4、仪器设备、试剂、样品与对照品

4.1仪器设备

本实施例中采用的仪器设备如下表2所示：

表2

名称	型号	设备编号	生产厂家
				ICPMS	ICPMS-7800	CAS-WH-ICPMS-B	Agilent
分析天平	XPE205DR	CAS-WH-BAL-I	Mettler Toledo
				分析天平	XS05DU	CAS-WH-BAL-A	Mettler Toledo
移液器	(0.5～5)mL	CAS-WH-MP-Z	eppendorf
				移液器	(100～1000)μL	CAS-WH-MP-AX	eppendorf
移液器	(20～200)μL	CAS-WH-MP-AB	eppendorf
				微波消解仪	Multiwave 5000	CAS-WH-MD-B	安东帕
纯水仪	Milli-Q IQ7000	CAS-WH-PWG-E	Merck

本实施例在ICPMS测试过程中的参数设置如下表3所示：

表3

注：内标溶液采用在线加入方式。

本实施例中采用的微波消解仪的参数如下表4所示：

表4

4.2试剂、样品与对照品

本实施例中采用的试剂、样品和对照品如下表5所示：

表5

5、待测奥扎格雷钠样品中杂质元素的含量测定

①稀释剂：2％硝酸水溶液

例如：移取20mL硝酸于980mL水中，混匀，备用。

②100ppm Au溶液

例如：吸取1mL Au标准品溶液于10mL样品瓶中，用稀释剂稀释至刻度，混匀，标识为100ppm Au。

③内标溶液(Bi：1ug/mL，Ge：1ug/mL，Rh：0.2ug/mL，Be：0.2ug/mL)

取内标溶液在线进样。

④标准溶液配置

⑤线性溶液和对照品溶液

配制一组线性溶液(0％，20％，50％，100％，150％，300％)，配制过程如下：

取Cal-4溶液作为对照品溶液(STD)进样。

⑥空白溶液

例如：移取3mL硝酸于微波消解内罐中，加100μL 100ppm Au，微波消解，微波消解完成后放冷至室温，用纯水转移至100mL样品瓶中，纯水润洗消解内罐三次，合并至同一100mL样品瓶，纯水定容，混匀，标记为Blank。

⑦待测样品溶液(也称为供试品溶液)

取AG(191101)样品称取约20mg样品，精密称定，置于微波消解内罐中，加入3mL硝酸，再加入100μL 100ppm Au，进行微波消解，微波消解完成放冷至室温，用纯水转移至100mL样品瓶中，纯水润洗消解内罐三次，合并至同一100mL样品瓶，纯水定容，混匀，标记为SPL-1(待测样品的浓度为0.2mg/mL)。

同法配制另外一份样品溶液，标记为SPL-2。

⑧待测样品中杂质元素含量的测试过程

采用上述ICPMS检测条件进行测试，检测方法如下：

步骤(1)，采用ICPMS测试对照品溶液中目标元素(V、Co、Ni、As、Cu、Cd、Sb、Hg、Pb和Li)与内标元素的响应比，并以相应的浓度为横坐标响应比为纵坐标绘制各个目标元素的标准曲线(如下表13所示)

步骤(2)采用ICPMS测试待测样品溶液中待测杂质元素与内标元素的响应比，代入相应元素的标准曲线中，即得待测杂质元素的浓度，测试结果如下表40所示。

⑨进样程序

在系统适用性测试通过后进样分析，进样程序可参考下表6：

表6

⑨系统适用性

验证过程中，满足方法的系统适用性条件。系统适用性结果见表7。

表7

1专属性

1.1程序

1)稀释剂：2％硝酸水溶液

移取20mL硝酸于980mL水中，混匀，备用。

2)100ppm Au(Au：100ug/mL)

移取1mL Au标准品溶液于10mL量瓶中，加稀释剂至刻度，混匀，备用。

3)内标溶液(Bi：lug/mL，Ge：lug/mL，Rh：0.2ug/mL，Be：0.2ug/mL)，如下表8所示。

表8

4)空白溶液的配制：移取3mL硝酸于微波消解内罐中，加100uL 100ppm Au，微波消解，微波消解完成后放冷至室温，用纯水转移至100mL样品瓶中，纯水润洗消解内罐三次，合并至同一100mL样品瓶，纯水定容，混匀，标记为Blank。

5)100％浓度水平加标样品溶液(以限度水平作为100％浓度水平)

取5准确度项下SPK-100％-1。

6)空白样品溶液

取5准确度项下SPL-1。

7)对照品溶液(STD)

取3线性项下Cal-4溶液作为对照品溶液进样。

分别分析上述空白溶液、100％浓度水平加标样品溶液、空白样品溶液、对照品溶液，考察方法的专属性，专属性结果见表9。

1.2接受标准

空白溶液中各目标元素杂质响应值不得大于连续进样6针STD溶液中各目标元素杂质响应值平均值的30％。

与空白样品溶液比较，100％浓度水平加标样品溶液中各目标元素杂质有明显信号强度并达到70％-150％加标回收率的接受标准。

1.3验证结果

表9

*¹表示空白溶液中各目标元素杂质响应值与连续进样6针STD溶液中各目标元素杂质响应值平均值的比值；

*²回收率结果索引5准确度项下。

2 LOQ

2.1程序

分析5准确度项下30％限度浓度水平加标样品溶液的回收率结果，若满足加标回收率要求，则以各目标元素杂质的30％限度作为LOQ。测试结果见表10。

2.2接受标准

30％限度浓度水平加标样品溶液中各目标元素杂质的回收率结果在70％～150％之间时，LOQ为各目标元素杂质限度的30％。

2.3验证结果

表10

3线性

3.1程序

1)标准品储备液(如下表11)

表11

2)配制一组线性溶液(0％，20％，50％，100％，150％，300％)，每个浓度水平进1针(如下表12)。具体配制过程如下：

表12

注：浓度100％的含义是指供试品溶液为0.2mg/ml的情况下，各元素限度的浓度。

3)考察各目标元素杂质在0～300％浓度区间之间的线性回归方程与相关系数r。

4)在0～300％浓度区间，以浓度为横坐标，响应值为纵坐标，作图得到各目标元素杂质响应值与浓度的线性回归方程和相关系数r。

检测结果见表13。

3.2接受标准

在0～300％浓度区间，各目标元素杂质的线性方程相关系数r均应≥0.995。

3.3验证结果

表13

4系统精密度

4.1程序

将3线性项下Cal-4作为STD并连续进6针。计算连续6针STD溶液中各目标元素杂质响应值的RSD。

系统精密度结果见表14。

4.2接受标准

连续进样6针STD溶液中各目标元素杂质响应值RSD≤15％。

4.3验证结果

表14

5准确度

5.1程序

样品批号：191101

平行配制两份空白样品溶液(0.2mg/mL，如下表15)

表15

在30％、100％、150％浓度水平，用6.3线性项下Stock溶液配制9份加标样品，每个浓度平行配制3份样品，如下表16：

表16

注：以限度浓度作为100％浓度水平。

将上述溶液各进一针，计算加标样品溶液中各目标元素杂质的加标回收率。

准确度见表17。

按照下列公式计算各目标元素杂质的加标回收率：

其中：

C_SPK指加标溶液中扣除样品本底后各元素的计算浓度Cng/mL)；

W_SPK指加标溶液中各目标元素杂质的测得含量(ppb)，从仪器中直接读取；

W_SPL指空白样品溶液中各目标元素杂质测得含量的平均值(ppb)；

m_SPK指加标样品溶液中样品的称样量(g)；

V_SPK指加标样品溶液的总稀释体积(mL；

C_input指加标样品溶液中所加入的对照品的最终浓度(ng/mL)。

5.2接受标准

9份加标样品溶液中各目标元素杂质的加标回收率应在70％～150％范围内，9份回收率的RSD≤20％。

5.3验证结果

表17

6重复性

6.1程序

样品批号：191101

平行配制6份100％浓度水平加标样品溶液。取5准确度项下3份100％浓度水平加标样品溶液SPK-100％-1、SPK-100％-2和SPK-100％-3作为其中3份，另配制3份100％浓度水平加标溶液，配制过程如下表18：

表18

分别将上述3份100％浓度水平加标样品溶液各进样1针，连同6.5准确度项下3份100％浓度水平加标样品溶液和2份空白样品溶液进样结果，计算6份加标样品溶液中各目标元素杂质的加标回收率的RSD。回收率的计算公式参照5准确度项下回收率计算公式。

重复性结果见表19。

6.2接受标准

6份100％浓度水平加标样品溶液中各目标元素杂质的加标回收率应在70％～150％范围内，6份回收率的RSD≤20％。

6.3验证结果

表19

7溶液稳定性

7.1程序

取5准确度"项下SPK-100％-1考察样品溶液的稳定性。

取3线性项下Cal-4溶液作为对照品溶液(STD)考察对照品溶液的稳定性。

将SPK-100％-1和STD溶液按一定的时间间隔重复进样，考察室温条件下样品溶液和对照品溶液在一定时间内的稳定性。

分别计算每个时间间隔SPK-100％-1和STD溶液中各目标元素杂质的含量与第一针对应溶液中各目标元素杂质的含量的百分比S。(同一序列中，可使用响应值等效计算)时间间隔与相应结果见表20～表21。

7.2接受标准

对照品溶液：S应在80％～120％范围内。

样品溶液：S应在80％～120％范围内。

7.3验证结果

表20对照品溶液稳定性

注：STD01～STD28为对同一种对照品溶液的不同进样时间。

表21样品溶液稳定性

注：SPK-100％-1-01～SPK-100％-1-22为对同一种加标样品溶液的不同进样时间。

8中间精密度

8.1程序

由另一位分析员(以下称为分析员2)独立配制相关系统适用性溶液。需要说明的是前述的1～7项由分析员1完成。

1)稀释剂：2％硝酸水溶液

移取20mL硝酸于980mL水中，混匀，备用。

2)100ppm Au(Au：100ug/mL)

移取1mLAu标准品溶液于10mL量瓶中，加稀释剂至刻度，混匀，备用。

3)内标溶液(Bi:lug/mL，Ge:lug/mL，Rh:0.2ug/mL，Be:0.2ug/mL)，如下表22所示。

表22

4)空白溶液的配制：移取3mL硝酸于微波消解内罐中，加100uL 100ppm Au，微波消解，微波消解完成后放冷至室温，用纯水转移至100mL样品瓶中，纯水润洗消解内罐三次，合并至同一100mL样品瓶，纯水定容，混匀，标记为Blank-IP。

5)标准品储备液(表23)

表23

配制一组线性溶液(0％，20％，50％，100％,150％,300％)，每个浓度水平进1针。具体配制过程如下表24：

表24

平行配制两份空白样品溶液(0.2mg/mL)及六份100％浓度水平加标样品溶液，如下表25。样品批号：191101。

表25

计算该分析员配制的6份加标样品溶液中各目标元素杂质的加标回收率及RSD。回收率的计算公式参照6.5准确度项下回收率计算公式。

计算6重复性与8中间精密度项下共12份100％浓度水平加标样品溶液中各目标元素杂质的回收率的RSD。

结果见表26～表27。

8.2接受标准

系统适用性应符合验证方法要求。

6份100％浓度水平加标样品溶液中各目标元素杂质的加标回收率应在70％～150％范围内，6份回收率的RSD≤20％(分析员2)。

6重复性与8中间精密度项下共12份加标样品溶液中各目标元素杂质的加标回收率的RSD应≤25％。

8.3验证结果

表26中间精密度项下的系统适用性

表27中间精密度

注：溶液名称中后缀带IP的表示由分析员2完成的实验，未带IP的表示由分析员1完成的实验。

9耐用性

9.1程序

按照下表28更改实验条件考察该方法耐用性。

表28

1)扫描/读取次数与积分时间耐用性考察溶液

索引中间精密度项下的Cal-1-IP，Cal-2-IP，Cal-3-IP，Cal-4-IP，Cal-5-IP，Cal-6-IP，Blank-IP，Diluent，SPL-1-IP，SPL-2-IP，SPK-100％-1-IP，SPK-100％-2-IP，STD-IP。

取SPL-1-IP命名为SPL-C1-1，SPL-C2-1，SPL-I1-1，SPL-I2-1。

取SPL-2-IP命名为SPL-C1-2，SPL-C2-2，SPL-I1-2，SPL-I2-2。

取SPK-100％-1-IP命名为SPK-C1-1，SPK-C2-1，SPK-I1-1，SPK-I2-1。

取SPK-100％-2-IP命名为SPK-C1-2，SPK-C2-2，SPK-I1-2，SPK-I2-2。使用上述溶液考察扫描/读取次数与积分时间的耐用性。

2)微波消解高温保持时间耐用性考察溶液。

3)稀释剂(Diluent)：2％硝酸水溶液

移取20mL硝酸于980mL水中，混匀，备用。

4)100ppm Au(Au：100ug/mL)

5)内标溶液(Bi:lug/mL,Ge:lug/mL,Rh:0.2ug/mL,Be:0.2ug/mL)如下表29。

表29

6)标准品储备液(表30)

表30

7)配制一组线性溶液(0％，20％，50％，100％，150％，300％)，每个浓度水平进1针。具体配制过程如下表31：

表31

取Cal-1-T1，Cal-2-T1，Cal-3-T1，Cal～4-T1，Cal-5-T1，Cal-6-T1，分别命名为Cal-1-T2，Cal-2-T2，Cal-3-T2，Cal-4-T2，Cal-5-T2，Cal-6-T2。

8)平行配制空白溶液、两份样品溶液及两份100％浓度水平加标样品溶液(微波消解高温保持时间24min)，如下表32。

样品批号：191101。

表32

9)平行配制空白溶液、两份样品溶液及两份100％浓度水平加标样品溶液(微波消解高温保持时间26min)，如下表33。

样品批号：191101。

表33

10)不同实验条件下各分别进样，考察方法耐用性。

11)计算各条件下100％浓度加标样品溶液中元素杂质的回收率。

12)耐用性结果见表34、表35、表36、表37、表38表39和表40。

9.2接受标准

系统适用性符合验证方法要求。

在各个实验参数(微波消解高温保持时间、扫描/读取次数、积分时间)调整条件下的四份100％浓度水平加标样品溶液中元素杂质的回收率分别与原始条件下的两份100％浓度水平加标样品溶液中元素杂质的回收率均应在70％～150％范围内且6份回收率的RSD均不大于20％。

9.3验证结果

表34扫描/读取次数95系统适用性

表35扫描/读取次数105系统适用性

表36积分时间0.2700sec系统适用性

表37积分时间0.3300sec系统适用性

表38微波消解高温保持时间24min系统适用性

表39微波消解高温保持时间26min系统适用性

表40各个条件下的耐用性结果

注：原条件数据为5准确度项下。

10.验证总结及待测样品的测试结果

本次结果各项验证数据正常，均符合方案中各项目项下规定的接受标准，验证通过。因此，该方法适用于本实验室对AG中元素杂质(As，Cd，Co，Hg，Ni，Pb，V，Li，Sb，Cu)含量的检测。经检测，待测样品中各元素杂质的含量如下表41所示。

表41

注：样品编号200701、200702、200703表示与191101进行的重复实验。

上表41中，SPL1-1和SPL1-2分别表示同时或是分次进行的两份相同的供试品溶液，表中的数据表示通过上述电感耦合等离子体质谱的测试方法测试后仪器上显示的各个杂质元素的测试结果。Result表示根据SPL1-1和SPL1-2测得结果，经计算得到的SPL1-1和SPL1-2中各个杂质元素的含量。结合本发明针对本实施例中的测试方法的线性关系、系统精密度、准确度、重复性、溶液稳定性、中间精密度和耐用性的验证可知，本发明的测试方法能够准确且快速的对奥扎格雷钠待测样品中10个杂质元素的含量进行准确测量。同时表41中同一份样品进行了多次重复实验，测试结果基本一致，也表明了测试结果准确。

Claims

1.一种奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，其包括以下步骤：

步骤(1)：采用电感耦合等离子体质谱测试对照品溶液中目标杂质元素与内标元素的响应比，并绘制标准曲线得到线性方程；

步骤(2)：采用电感耦合等离子体质谱测试供试品溶液中待测杂质元素与内标元素的响应比，并代入步骤(1)中相应目标杂质元素的线性方程中，即得待测杂质元素的浓度；

2.如权利要求1所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，所述标准曲线的横坐标为所述目标杂质元素的浓度，纵坐标为采用所述电感耦合等离子体质谱测试得到的所述目标杂质元素与内标元素的响应比；

和/或，所述线性方程为y_n＝ax_n+b，线性关系系数r＞0.9995，其中x为目标杂质元素的浓度，y为该浓度下目标杂质元素与内标元素的响应比，n为V、Co、Ni、As、Cu、Cd、Sb、Hg、Pb或Li。

3.如权利要求1所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，所述目标杂质元素较佳地为Li、Sb、Cu、V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb；

和/或，所述对照品溶液的配制包括以下步骤：配制各目标杂质元素的标准品储备液之后，再进行梯度倍数稀释；

和/或，在配制所述对照品溶液时，采用的稀释剂为1.5～2.5％硝酸水溶液，例如2％的硝酸水溶液，百分比为体积百分比。

4.如权利要求3所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，当所述目标杂质元素包含Li时，所述Li的标准品储备液的浓度为900～1100μg/mL，例如1000μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含Sb时，所述Sb的标准品储备液的浓度为900～1100μg/mL，例如1000μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含Cu时，所述Cu的标准品储备液的浓度为900～1100μg/mL，例如991μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含V时，所述V的标准品储备液的浓度为9～11μg/mL，例如10μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含Co时，所述Co的标准品储备液的浓度为4～6μg/mL，例如5μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含Ni时，所述Ni的标准品储备液的浓度为18～22μg/mL，例如20μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含As时，所述As的标准品储备液的浓度为12～17μg/mL，例如15μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含Cd时，所述Cd的标准品储备液的浓度为1～3μg/mL，例如2μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含Hg时，所述Hg的标准品储备液的浓度为2～4μg/mL，例如3μg/mL；

和/或，当所述目标杂质元素包含Pb时，所述Pb的标准品储备液的浓度为4～6μg/mL，例如5μg/mL。

5.如权利要求3所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，所述梯度倍数稀释为将0.05～1mL的所述标准品储备液稀释至40～60倍后，再配制浓度为0％、20％、50％、100％、150％和300％的梯度即可；

当所述的目标杂质元素为V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb中的一种或多种时，例如将1mL的所述标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数稀释；

当所述的目标杂质元素为Sb时，例如将0.09mL的所述Sb的标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数稀释；

当所述的目标杂质元素为Li时，例如将0.25mL的所述Li的标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数；

当所述的目标杂质元素为Cu时，例如将0.3mL的所述Cu的标准品储备液稀释至50倍后，再进行梯度倍数稀释；

和/或，当所述目标杂质元素包含V、Co、Ni、As、Cd、Hg和Pb中的一种或多种时，所述对照品溶液为各元素的混合溶液；

和/或，当所述目标杂质元素包含Sb、Li和Cu中的一种或多种时，所述的对照品溶液为单一元素的对照品溶液。

6.如权利要求1～5中任一项所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，所述的内标元素包括Ge、Rh、Bi和Be中的一种或多种；

当所述目标杂质元素为V、Co、Ni、As和Cu中的一种或多种时，对应的所述内标元素较佳地为Ge；

当所述目标杂质元素为Cd和/或Sb时，对应的所述内标元素较佳地为Rh；

当所述目标杂质元素为Hg和/或Pb时，对应的所述内标元素较佳地为Bi；

当所述目标杂质元素为Li时，对应的所述内标元素较佳地为Be；

和/或，所述内标元素配制成内标溶液后，与所述对照品溶液同时进样进行所述的电感耦合等离子体质谱测试；

和/或，所述内标溶液的浓度为0.01～0.12ug/mL，例如0.02ug/mL或0.1ug/mL；

当所述的内标元素为Ge时，所述Ge的内标溶液的进样浓度较佳地为0.08～0.12ug/mL，例如0.1ug/mL；

当所述的内标元素为Bi时，所述Bi的内标溶液的进样浓度较佳地为0.08～0.12ug/mL，例如0.1ug/mL；

当所述的内标元素为Rh时，所述Rh的内标溶液的进样浓度较佳地为0.01～0.03ug/mL，例如0.02ug/mL；

7.如权利要求1～5中任一项中所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，所述待测奥扎格雷钠样品与硝酸的混合液中，还包括Au元素；

所述Au元素与所述待测奥扎格雷钠样品的质量比较佳地为(0.0004～0.0006)：1，例如0.0005：1；

所述Au元素较佳地以溶液的形式加入，所述溶液的浓度较佳地为80～120ug/mL，例如100ug/mL；

和/或，所述消解为微波消解，所述微波消解的设备例如为Multiwave 5000；

和/或，所述消解的温度为210～240℃，例如230℃；

其中，从室温升温至所述消解的温度的时间较佳地为20～30min，例如25min；

其中，在所述消解的温度下进行消解的时间较佳地为20～30min，例如24min、25min或26min。

8.如权利要求1～5中任一项所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，所述硝酸的质量浓度为69％；

和/或，所述供试品溶液的制备方法中，所述稀释时采用的稀释剂为水；

和/或，所述供试品溶液的制备方法中，所述待测奥扎格雷钠样品与硝酸的质量体积比较佳地为6～7mg/mL，例如(20：3)mg/mL；

和/或，所述供试品溶液中，所述待测奥扎格雷钠样品的浓度为0.2～0.3mg/mL，例如0.25mg/mL。

9.如权利要求1～5中任一项所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，步骤(1)或步骤(2)中，所述的电感耦合等离子体质谱测试采用的仪器为AgilentICPMS-7800。

10.如权利要求9所述的奥扎格雷钠中杂质元素的检测方法，其特征在于，步骤(1)或步骤(2)中，所述的电感耦合等离子体质谱测试在氦气模式下进行测定；

和/或，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，发射功率为1520～1580W，例如1550W；

和/或，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，等离子体气流速为13～17L/min，例如15L/min；

和/或，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，辅助气流速为0.8～1.2L/min，例如1.0L/min；

和/或，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，雾化气流速为1～1.1L/min，例如1.05L/min；

和/或，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，采样深度为8～12mm，例如10mm；

和/或，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，氦气流速为4～6L/min，例如5L/min；

和/或，步骤(1)或步骤(2)中，采用所述电感耦合等离子体质谱测试时，积分时间为0.25～0.35s，例如0.2700s、0.3000s或0.3300s。