CN114292621B - 一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法 - Google Patents

一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114292621B
CN114292621B CN202111644571.5A CN202111644571A CN114292621B CN 114292621 B CN114292621 B CN 114292621B CN 202111644571 A CN202111644571 A CN 202111644571A CN 114292621 B CN114292621 B CN 114292621B
Authority
CN
China
Prior art keywords
val pro
gly val
pro gly
gly lys
lys gly
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202111644571.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114292621A (zh
Inventor
刘凯
刘雅薇
赵柯鲁
张洪杰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tsinghua University
Original Assignee
Tsinghua University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tsinghua University filed Critical Tsinghua University
Priority to CN202111644571.5A priority Critical patent/CN114292621B/zh
Publication of CN114292621A publication Critical patent/CN114292621A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114292621B publication Critical patent/CN114292621B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Abstract

本发明提供了一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂。与现有技术相比，本发明通过重组设计表达了含有大量正电荷的类弹性蛋白，然后通过化学合成的阴离子冠醚分子与带正电荷类弹性蛋白之间的静电相互作用，增强了粘合剂的交联度和疏水性，制备了高剪切粘合强度的耐高低温粘合剂，使所得的产品在不同的温度环境下(常温、高温和超低温)均表现出优异的粘合强度，可用于常温、高温、低温甚至超低温环境下的机械加固和破损修补；同时具有制备过程简单、无需特殊设备等优势，可作为新一代便携低温胶水，在极地，外太空等极端低温环境中有巨大的应用前景。

Description

一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法
技术领域
本发明属于生物材料技术领域，尤其涉及一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法。
背景技术
生物粘合剂是人们将提取自动植物的生物质进行界面黏结，特别是生物湿组织界面黏结的一类生物材料。这类粘合剂往往具有可降解性，无毒性，良好的生物相容性和广泛界面适用性。但是，这些传统生物粘合剂的原材料往往缺乏更合理的设计，粘合强度较低，且由于水和氢键大量存在，使用温阈狭窄。因此，在一些极端、复杂的环境下依旧面临着巨大挑战，尤其是在超低温和高温的环境下存在黏附耐力差的问题，难以长效维持原有的粘附性能，大大限制了粘合剂的应用范围。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法，该高低温粘合剂在常温、低温与高温环境下聚能表现除优异的粘合性能，同时具有良好的制备便携性。
本发明提供了一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂，包括带正电荷的类弹性蛋白与冠醚类阴离子；
所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGXG)]； n为4～16的整数；X为除脯氨酸外的任意天然氨基酸。
优选的，所述带正电荷的类弹性蛋白中正电荷的摩尔数与冠醚类阴离子中负电荷的摩尔比为(0.5～2.5)：1。
优选的，所述冠醚类阴离子为修饰有羧基的苯并冠醚、修饰有羧基的苯并冠醚二聚体、修饰有羧基的苯并冠醚多聚体、修饰有羧基的二苯并冠醚、修饰有羧基的二苯并冠醚二聚体与修饰有羧基的二苯并冠醚多聚体中的一种或多种。
优选的，所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9 (VPGVG)]；所述冠醚类阴离子为式(I)所示阴离子和/或式(II)所示阴离子：
Figure BDA0003443241680000021
其中，R1～R3各自独立地为H或式(III)所示的基团，且不同时为H；
Figure BDA0003443241680000022
m1～m9各自独立地为0～5的整数。
优选的，所述冠醚类阴离子如式(IV)所示：
Figure BDA0003443241680000031
优选的，还包括稀土离子；所述稀土离子选自镧离子、铈离子、铕离子、镝离子与镥离子中的一种或多种。
优选的，所述稀土离子与冠醚类阴离子的电荷比为(0.01～2)：10。
本发明还提供了一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂的制备方法，包括：
S1)将带正电荷的类弹性蛋白与水混合，得到蛋白溶液；所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGXG)]；n为4～16的整数；X为除脯氨酸外的任意天然氨基酸；
将冠醚类化合物与水混合，得到含有冠醚类阴离子的冠醚溶液；
S2)将蛋白溶液与冠醚溶液混合，离心后，将下层溶液冷冻干燥，得到基于生物工程蛋白的高低温粘合剂。
优选的，步骤S2)中混合时还加入稀土化合物的水溶液；所述稀土化合物为三氯化镧、三氯化铈、三氯化铕、三氯化镝、三氯化镥、硝酸镧、硝酸铈、硝酸铕、硝酸镝、硝酸镥、三氟乙酸铕与三氟甲磺酸镧中的一种或多种。
优选的，所述蛋白溶液中带正电荷的类弹性蛋白的浓度为100～300 mg/mL；
所述冠醚溶液中冠醚类化合物的浓度为100～300mg/mL；
所述稀土化合物的水溶液中稀土化合物的浓度为0.01～0.02mol/L；
所述离心的速度为10000～13000rpm；离心的时间为2～5min；
所述冷冻干燥的时间为15～25min。
本发明提供了一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂，包括带正电荷的类弹性蛋白与冠醚类阴离子；所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列 [(VPGKG)9(VPGXG)]；n为4～16的整数；X为除脯氨酸外的任意天然氨基酸。与现有技术相比，本发明通过重组设计表达了含有大量正电荷的类弹性蛋白，然后通过化学合成的阴离子冠醚分子与带正电荷类弹性蛋白之间的静电相互作用，增强了粘合剂的交联度和疏水性，制备了高剪切粘合强度的耐高低温粘合剂，使所得的产品在不同的温度环境下(常温、高温和超低温)均表现出优异的粘合强度，在常温下的粘合强度大于等于22MPa；在液氮环境中存储24小时后粘合强度大于等于21MPa；在200℃条件下烘烤30 分钟后粘合强度大于等于21MPa，可用于常温、高温、低温甚至超低温环境下的机械加固和破损修补；同时具有制备过程简单、无需特殊设备等优势，可作为新一代便携低温胶水，在极地，外太空等极端低温环境中有巨大的应用前景。
进一步，本发明引入了高配位数的稀土离子与冠醚结构进行配位，进一步增加粘合剂体系的交联程序，提高粘合剂内聚力，以达到进一步增强粘合强度的目的。
附图说明
图1为本发明实施例1中得到的TDB24C8核磁共振氢谱图；
图2为本发明实施例1中制备的高低温粘合剂外观照片；
图3为本发明实施例1中制备的高低温粘合剂常温粘合强度；
图4为本发明实施例2中制备的高低温粘合剂在常温、高温(200℃)和液氮环境下的剪切粘合强度测试曲线图；
图5为本发明实施例3中制备的高低温粘合剂低温保存5天后粘合性能测试曲线图；
图6为本发明实施例4中制备的高低温粘合剂的粘合性能测试曲线图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂，包括带正电荷的类弹性蛋白与冠醚类阴离子。
所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGXG)]； n为4～16的整数；X为除脯氨酸外的任意天然氨基酸；弹性蛋白是生皮组织中弹性纤维的主要成分，具有一定的力学性能，赋予组织以弹性和抗张能力。通过生物工程技术改造这种力学蛋白，将重复氨基酸序列中的部分缬氨酸替换成带氨基正离子的赖氨酸，保留力学性能的基础上，增强这种类弹性蛋白的粘合性能。
在本发明中，进一步优选的，所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGVG)]；n为4～16的整数，优选为4～16之间4倍数的整数。
在本发明中，进一步优选的，所述带正电荷的类弹性蛋白N端为 MGAGPGVG；所述带正电荷的类弹性蛋白的C端除标签蛋白外为VPGWP。
在本发明中，更进一步优选的，所述带电荷的类弹性蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO：1～3任一项所示。
所述冠醚类阴离子优选为修饰有羧基的苯并冠醚、修饰有羧基的苯并冠醚二聚体、修饰有羧基的苯并冠醚多聚体、修饰有羧基的二苯并冠醚、修饰有羧基的二苯并冠醚二聚体与修饰有羧基的二苯并冠醚多聚体中的一种或多种；其中的苯并冠醚可为苯并15冠-5、苯并18冠-6、苯并24冠8或苯并34 冠-10；二苯并冠醚可为二苯并15冠-5、二苯并18冠-6、二苯并24冠8或二苯并34冠-10；在本发明中，优选的，所述冠醚类阴离子为修饰有羧基的苯并24冠8、修饰有羧基的苯并24冠8二聚体、修饰有羧基的苯并24冠8多聚体、修饰有羧基的二苯并24冠8、修饰有羧基的二苯并24冠8二聚体与修饰有羧基的二苯并24冠8多聚体中的一种或多种。进一步优选的，所述冠醚类阴离子为式(I)所示阴离子和/或式(II)所示阴离子：
Figure BDA0003443241680000061
其中，R1～R3各自独立地为H或式(III)所示的基团，且不同时为H；
Figure BDA0003443241680000062
m1～m9各自独立地为0～5的整数，优选为0～4的整数，更优选为0～3的整数，再优选0～2的整数。
在本发明提供的实施例中，所述冠醚类阴离子具体为式(IV)所示的三聚体冠醚阴离子：
Figure BDA0003443241680000071
在本发明中，所述式(I)所示阴离子优选按照以下方法制备：将式(1) 所示的化合物与式(2)所示的化合物在缚酸剂存在的条件下反应，水解后，得到式(I)所示阴离子。
Figure BDA0003443241680000072
Figure BDA0003443241680000081
其中，R4为C1～C5的烷基，优选为C2～C4的烷基，更优选为C2～C3的烷基。
在本发明中，所述式(1)所示的化合物优选按照以下方法制备：A1)将式(3)所示的化合物在保护气氛及有机碱存在的条件下与对甲苯磺酰氯反应，得到式(4)所示的化合物；A2)将所述式(4)所示的化合物与式(5)所示的化合物在缚酸剂存在的条件下加热反应，得到式(6)所示的化合物；A3) 将所述式(6)所示的化合物在保护气氛及有机碱存在的条件下与对甲苯磺酰氯反应，得到式(7)所示的化合物；A4)将所述式(7)所示的化合物与式 (8)所示的化合物在缚酸剂存在的条件下加热反应，得到式(9)所示的化合物；A5)将所述式(9)所示的化合物在冰浴条件下与三氟乙酸反应，得到式(1)所示的化合物。
Figure BDA0003443241680000082
Figure BDA0003443241680000091
将式(3)所示的化合物在保护气氛及有机碱存在的条件下与对甲苯磺酰氯反应；此反应优选在有机溶剂中进行；所述有机溶剂优选为二氯甲烷；所述有机碱优选为三乙胺；所述式(3)所示的化合物与有机碱的摩尔比优选为 1：(0.4～0.6)，更优选为1：0.5；所述式(3)所示的化合物与对甲苯磺酰氯的摩尔比优选为1：(0.2～0.4)，更优选为1：(0.3～0.35)，再优选为1： 0.33；在本发明中，此步骤优选先将式(3)所示的化合物与有机碱溶剂有机溶剂中，然后滴加对甲苯磺酰氯进行反应；所述保护气氛为本领域技术人员熟知的保护气氛即可，并无特殊的限制，本发明中优选为氮气；所述反应优选在室温条件下进行；所述反应的时间优选为20～30h，更优选为22～26h，再优选为24h；反应完成后，优选用盐酸溶液与饱和盐水溶液洗涤，有机相用干燥剂干燥后，浓缩经硅胶柱层析纯化，得到式(4)所示的化合物；所述盐酸溶液的浓度优选为1mol/L；所述干燥剂优选为碳酸钠；所述硅胶柱层析的洗脱液优选为乙酸乙酯与正己烷的混合溶剂；所述乙酸乙酯与正己烷的体积比优选为7：(1～5)，更优选为7：(2～4)，再优选为7：3。
将所述式(4)所示的化合物与式(5)所示的化合物在缚酸剂存在的条件下加热反应；所述缚酸剂为本领域技术人员熟知的缚酸剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为碳酸钾；所述式(4)所示的化合物与缚酸剂的摩尔比优选为1：(1～3)，更优选为1：(1.5～2.5)，再优选为1：(1.5～2)，最优选为1：1.76；所述式(4)所示的化合物与式(5)所示的化合物的摩尔比优选为(2～2.5)：1，更优选为2.2：1；该反应优选在有机溶剂中进行；所述有机溶剂优选为乙腈；所述反应温度优选为70～100℃，更优选为80～90℃；所述反应的时间优选为8～15h；反应后过滤除去缚酸剂，除去溶剂，经闪速柱层析纯化后，得到式(6)所示的化合物；所述闪速柱层析的固定相优选为 HP C18 Aq；流动相为水和乙腈，洗脱程度优选为水：乙腈＝95：5～5：95，15 min。
将所述式(6)所示的化合物在保护气氛剂有机碱存在的条件下与对甲苯磺酰氯反应；此反应优选在有机溶剂中进行；所述有机溶剂优选为二氯甲烷；所述有机碱优选为三乙胺；所述式(6)所示的化合物与有机碱的摩尔比优选为1：(1～1.5)，更优选为1：1.2；所述式(6)所示的化合物与对甲苯磺酰氯的摩尔比优选为1：(2～2.5)，更优选为1：2.2；在本发明中，此步骤优选先将式(6)所示的化合物与有机碱溶剂有机溶剂中，然后滴加对甲苯磺酰氯进行反应；所述保护气氛为本领域技术人员熟知的保护气氛即可，并无特殊的限制，本发明中优选为氮气；所述反应优选在室温条件下进行；所述反应的时间优选为20～30h，更优选为22～26h，再优选为24h；反应完成后，优选用盐酸溶液与饱和盐水溶液洗涤，有机相用干燥剂干燥后，浓缩经硅胶柱层析纯化，得到式(7)所示的化合物；所述盐酸溶液的浓度优选为1mol/L；所述干燥剂优选为碳酸钠。
将所述式(7)所示的化合物与式(8)所示的化合物在缚酸剂存在的条件下加热反应；所述缚酸剂为本领域技术人员熟知的缚酸剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为碳酸钾；所述式(7)所示的化合物与缚酸剂的摩尔比优选为1：(1～2)，更优选为1：(1～1.5)，再优选为1：1.25；所述式(7) 所示的化合物与式(8)所示的化合物的摩尔比优选为1：1；该反应优选在有机溶剂中进行；所述有机溶剂优选为乙腈；所述反应温度优选为70～100℃，更优选为80～90℃；所述反应的时间优选为8～15h；反应后过滤除去缚酸剂，除去溶剂，经硅胶柱层析纯化后，得到式(9)所示的化合物；所述硅胶柱层析的洗脱液优选为乙酸乙酯与正己烷的混合溶剂；所述乙酸乙酯与正己烷的体积比优选为(8～10)：1，更优选为9：1。
将所述式(9)所示的化合物在冰浴条件下与三氟乙酸反应；所述式(9) 所示的化合物与三氟乙酸的比例优选为(0.4～0.8)mmol：1ml，更优选为 (0.4～0.7)mmol：1ml，再优选为(0.5～0.6)mmol：1ml；所述反应的时间优选为8～15h，更优选为10～12h；反应后，除去多余的三氟乙酸，用有机溶剂溶剂后，再用饱和碳酸氢钠溶液和饱和盐水洗涤，有机相用干燥剂干燥后，过滤，除去溶剂，得到式(1)所示的化合物；所述有机溶剂优选为二氯甲烷。
将式(1)所示的化合物与式(2)所示的化合物在缚酸剂存在的条件下反应；所述缚酸剂为本领域技术人员熟知的缚酸剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为碳酸钾；所述式(1)所示化合物与缚酸剂的摩尔比优选为1： (0.8～1.3)，更优选为1：1；所述式(1)所示的化合物与式(2)所示的化合物的摩尔比优选为(1～4)：1，更优选为(1～3.5)：1，再优选为1：(1.2～3.2)；所述反应优选在室温的条件下进行；所述反应的时间优选为8～15h，更优选为10～12h。
反应结束后，过滤，有机相浓缩后，经硅胶柱层析纯化，再进行水解；所述硅胶柱层析的洗脱液优选为甲醇与二氯甲烷的混合溶剂；所述甲醇与二氯甲烷的体积比优选为7：100～10：100；所述水解的步骤具体为：将纯化后的产物溶于甲醇、二氯甲烷与水的混合溶剂中，调节pH值至强碱性，回流反应后，调节反应液的pH值至中性，浓缩后用水溶解，透析脱盐后，得到式(I) 所示阴离子；其中，所述甲醇、二氯甲烷与水的体积比优选为(3～6)：(0.5～1.5)： (0.5～1.5)，更优选为(3.5～5.5)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)，再优选为4：1：1；调节pH值至强碱性优选为至12～14，更优选为13；回流反应的时间优选为8～15，更优选为10～12；回流反应后优选采用盐酸将反应液的pH值调节至中性；透析脱盐后，得到的透析液优选经柱层析浓缩纯化，冷冻干燥后，得到式(1)所示阴离子；所述柱层析浓缩纯化的固定相优选为HP c18aq，流动相为水和乙腈，洗脱程度优选为水：乙腈＝95：5～5：95，12min。
冠醚分子是良好的负电低温单元，通过冠醚分子上化学修饰的羧基与蛋白上的赖氨酸残基氨基正离子静电结合，将苯并冠醚这个低温单元引入到蛋白粘合剂，大大增加了蛋白疏水性与物理交联度，提高了界面粘合性能。
所述带正电荷的类弹性蛋白中正电荷的摩尔数与冠醚类阴离子中负电荷的摩尔比优选为(0.5～2.5)：1，更优选为(1～2.5)：1，再优选为(1.5～2)： 1。
本发明提供的高低温粘合剂，优选还包括稀土离子。所述稀土离子为本领域技术人员熟知的稀土离子即可，并无特殊的限制，本发明中优选为高配位的稀土离子，更优选为三价态的稀土离子，再优选为镧离子、铈离子、铕离子、镝离子与镥离子中的一种或多种。所述稀土离子与冠醚类阴离子的电荷比优选为(0.01～2)：10，更优选为(0.5～2)：10。三价态的稀土离子，具有高的配位数，可以与冠醚结构进行配位，进一步增加粘合剂体系的交联程度，提高粘合剂内聚力，以达到进一步增强粘合强度的目的。
本发明提供的高低温粘合剂的含水量优选为3％～10％，更优选为4％～6％。
本发明提供的高低温粘合剂在常温下的粘合强度大于等于22MPa，更优选为22.15～25.3MPa；在液氮环境中存储24小时后粘合强度大于等于21MPa；在200℃条件下烘烤30分钟后粘合强度大于等于21MPa。
本发明通过重组设计表达了含有大量正电荷的类弹性蛋白，然后通过化学合成的阴离子冠醚分子与带正电荷类弹性蛋白之间的静电相互作用，增强了生物粘合剂的交联度和疏水性，制备了高剪切粘合强度的耐高低温粘合剂，使所得的产品在不同的温度环境下(常温、高温和超低温)均表现出优异的粘合强度，可用于常温、高温、低温甚至超低温环境下的机械加固和破损修补；同时具有制备过程简单、无需特殊设备等优势，可作为新一代便携低温胶水，在极地，外太空等极端低温环境中有巨大的应用前景。
本发明还提供了一种基于生物工程蛋白的生物粘合剂的制备方法，包括： S1)将带正电荷的类弹性蛋白与水混合，得到蛋白溶液；所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGXG)]；n为4～16的整数；X 为除脯氨酸外的任意天然氨基酸；将冠醚类化合物与水混合，得到含有冠醚类阴离子的冠醚溶液；S2)将蛋白溶液与冠醚溶液混合，离心后，将下层溶液冷冻干燥，得到基于生物工程蛋白的高低温粘合剂。
其中，所述带正电荷的类弹性蛋白同上所述，在此不再赘述。
将带正电荷的类弹性蛋白与水混合，得到蛋白溶液；所述水优选为超纯水；所述蛋白溶液中带正电荷的类弹性蛋白的浓度优选为100～300mg/mL，更优选为100～200mg/mL，再优选为100～150mg/mL。
将冠醚类化合物与水混合，得到含冠醚类阴离子的冠醚溶液；所述冠醚类化合物为上述冠醚类阴离子形成的盐即可，并无特殊的限制，在本发明中优选为冠醚类阴离子的钾盐或钠盐；所述水优选为超纯水；所述冠醚溶液中冠醚类化合物的浓度优选为100～300mg/mL，更优选为100～200mg/mL，再优选为100～150mg/mL，最优选为100～130mg/mL。
将蛋白溶液与冠醚溶液混合；在此步骤中，可将冠醚溶液滴加入蛋白溶液，也可将蛋白溶液滴加入冠醚溶液中，并无特殊的限制；所述带正电荷的类弹性蛋白中正电荷的摩尔数与冠醚类阴离子中负电荷的摩尔比优选为 (0.5～2.5)：1，更优选为(1～2.5)：1，再优选为(1.5～2)：1。在本发明中，优选还加入稀土化合物的水溶液；所述稀土化合物为本领域技术人员熟知的化合物即可，并无特殊的限制，本发明中优选为三价态稀土化合物，其可为稀土无机化合物，也可为稀土有机化合物，并无特殊的限制，在本发明中更优选为三氯化镧、三氯化铈、三氯化铕、三氯化镝、三氯化镥、硝酸镧、硝酸铈、硝酸铕、硝酸镝、硝酸镥、三氟乙酸铕与三氟甲磺酸镧中的一种或多种；所述稀土化合物的水溶液中稀土化合物的浓度优选为0.01～0.02mol/L；所述稀土化合物中稀土离子与冠醚类阴离子的电荷比优选为(0.01～2)：10，更优选为(0.5～2)：10。
混合后出现液液分相现象，离心；所述离心的速率优选为10000～12000 rpm，更优选为11500～12300rpm，再优选为12000rpm；离心的时间优选为 2～5min，更优选为3～4min。
离心后，取下层溶液冷冻干燥，得到基于生物工程蛋白的高低温粘合剂；所述冷冻干燥的时间优选为15～25min，更优选为20～22min。
为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种基于生物工程蛋白的生物粘合剂及其制备方法进行详细描述。
以下实施例中所用的试剂均为市售。
实施例1
Figure BDA0003443241680000141
化合物1：将三甘醇(9.01g,60mmol)和三乙胺(3.03g,30mM)溶于 200mL二氯甲烷中，逐渐滴加对甲苯磺酰氯(3.8g,20mmol)。将混合物在室温氮气气氛下搅拌24小时。然后，用1M盐酸溶液和饱和盐水洗涤，有机层用无水碳酸钠干燥。减压过滤浓缩后得到粗产物，硅胶柱层析(洗脱液:乙酸乙酯/正己烷＝7/3)纯化得到化合物1为淡黄色液体(5.2g，产率85.5％)。
化合物2：将3，4－二羟基苯乙胺盐酸盐(1.89g,10mmol)溶解于100ml 无水甲醇中，氮气保护。待完全溶解后,二碳酸二叔丁酯(2.18g,11mmol)和三乙胺(2.02g,20mmol)加入到上述溶液中,冰浴1h。反应混合物与1M盐酸溶液和饱和食盐水洗，旋蒸除去有机层溶剂，得到化合物2为白色固体(2.268g, 产率90.0％)。
化合物3：将化合物1(5.2g,17mmol)和碳酸钾(4.14g,30mmol)溶于乙腈(100mL)溶液中，再加入3,4-二羟基苯甲酸乙酯(1.4g,7.7mmol)。将混合物在80℃下回流过夜，然后过滤以去除碳酸钾。经旋转蒸发器除去溶剂后，得到粗产物，用闪速柱层析(HP C18 Aq,H2O:乙腈＝95:5to 5:95,15 min)纯化后得到化合物3为淡黄色液体(2.7g，产率78.5％)。
化合物4：将化合物3(2.7g,6mmol)和三乙胺(0.728g,7.2mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，在氮气保护下，滴加对甲苯磺酰氯(2.54g,13.3 mmol)。室温反应24h后，用1MHCl和盐水洗涤，过滤浓缩，硅胶柱层析(洗脱液:乙酸乙酯/正己烷＝4/6)纯化得到化合物4为淡黄色液体(3.34g，产率73.8％)。
化合物5：将化合物4(3.01g,4mmol)、化合物2(1.01g,4mmol)和碳酸钾(0.7g,5mmol)溶于100mL乙腈中。回流12h，过滤去除碳酸钾。旋蒸除去溶剂后，用二氯甲烷重新溶解，硅胶柱层析(洗脱液:乙酸乙酯/正己烷＝9/1)纯化得到化合物5为无色液体(1.79g，产率67.5％)。
化合物6：在冰浴条件下，将三氟乙酸(5mL)滴入含有化合物5(1.79g, 2.7mmol)的烧瓶中。完全加入后，在室温下搅拌过夜。将其浓缩以去除多余的三氟乙酸，再用二氯甲烷溶解。用饱和碳酸氢钠溶液和饱和盐水洗涤，有机层用无水碳酸钠干燥，过滤，除去溶剂，得到化合物6为黄色液体(1.32g，产率86.7％)。
化合物7：在溶解有化合物6(0.90g,1.6mmol)和碳酸钾(0.22g,1.6 mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入1，3，5-苯三甲酰氯(0.13g,0.5mmol)。混合物在室温下反应过夜，然后过滤。有机层浓缩后，经硅胶柱层析(洗脱液:甲醇/二氯甲烷＝7/100～10/100)纯化，得到化合物7为黄色液体(0.60g，产率65％)。
TDB24C8：将化合物7(0.60g,0.325mmol)溶于甲醇/二氯甲烷/水(v:v:v ＝4:1:1)的混合溶剂中，pH值为13。将混合物回流过夜，然后加入1MHCl 调节至pH＝7并浓缩。残余部分在水中重新溶解，并通过水透析(MWCO 500) 脱盐3天。所得透析液再经柱层析(HPc18aq，H2O:乙腈＝95:5～5:95，12min) 浓缩纯化。冻干后为淡黄色海绵状固体即为式(IV)所示的三聚体冠醚阴离子记为TDB24C8(0.37g，产率62.3％)。
A)将带10mg氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的带有正电荷的类弹性蛋白加入至0.2mL超纯水中，混合均匀，得到均相的蛋白溶液。
B)将11.8mg实施例1中得到的TDB24C8加入至0.1mL超纯水中，混合均匀，得到均相的冠醚溶液。
C)将B)配置溶液逐滴加入A)配置溶液中，震荡混合后出现液液分相现象，12000rpm离心3min，取下层溶液进行冷冻干燥20min，得到耐高低温的生物粘合剂。其中正电荷的类弹性蛋白与阴离子冠醚分子的电荷摩尔比为1:1。
利用核磁共振对实施例1中得到的TDB24C8进行分析，得到其核磁共振氢谱图如图1所示。再利用SHIMADZU SLBL-500N拉力机，采用剪切粘合强度对粘合剂的粘附性能进行评估，表征粘合剂在钢底片上的粘合强度。图2 为本发明实施例1制备的生物粘合剂外观照片。图3为本发明实例1制备粘合剂固化5天后的剪切粘合强度。
实施例2
A)将带20mg氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的带有正电荷的类弹性蛋白加入至0.2mL超纯水中，混合均匀，得到均相的蛋白溶液。
B)将11.8mg实施例1中得到的TDB24C8加入至0.1mL超纯水中，混合均匀，得到均相的冠醚溶液。
C)将B)配置溶液逐滴加入A)配置溶液中，震荡混合后出现液液分相现象，12000rpm离心2min，取下层溶液进行冷冻干燥21min，得到耐高低温的生物粘合剂。其中正电荷的类弹性蛋白与阴离子冠醚分子的电荷摩尔比为2:1。
图4本发明实施例2制备的生物粘合剂在常温、高温(200℃)和液氮环境下的剪切粘合强度。
实验表明，粘合剂固化5天在常温下的粘合强度为22.15MPa，然后在液氮环境中存储24小时后的粘合强度为21.95MPa，在200℃条件下烘烤30分钟后的粘合强度为21.22MPa，表明粘合剂在常温，高温和低温下，均具有优异的粘合性能。
实施例3
A)将带15mg氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的带正电荷的类弹性蛋白加入至0.2mL超纯水中，混合均匀，得到均相的蛋白溶液。
B)将11.8mg实施例1中得到的TDB24C8加入至0.1mL超纯水中，混合均匀，得到均相的冠醚溶液。
C)将B)配置溶液逐滴加入A)配置溶液中，震荡混合，震荡混合后出现液液分相现象，11000rpm离心3min，冷冻干燥23min，得到耐高低温的生物粘合剂，其中正电荷的类弹性蛋白与阴离子冠醚分子的电荷摩尔比为 1.5:1。
为了测试粘合剂的长期耐低温稳定性，将发明实施例3制备的生物粘合剂在钢底片进行粘合，粘合后放置于液氮环境下保存5天，进行低温拉伸测试，测试结果如图5所示。结果表明粘合剂具有良好的长效耐低温性能。
实施例4
A)将带20mg氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的带正电荷的类弹性蛋白加入至0.2mL超纯水中，混合均匀，得得到均相的蛋白溶液。
B)将11.8mg实施例1中得到的TDB24C8加入至0.1mL超纯水中，混合均匀，得到均相的冠醚溶液。
C)将B)配置溶液逐滴加入A)配置容液中，并加入0.01mol/L的三氯化铕稀土离子溶液，震荡混合后出现液液分相现象，11000rpm离心2min，冷冻干燥21min，得到耐高低温的生物粘合剂，其中正电荷的类弹性蛋白与阴离子冠醚分子的电荷摩尔比为2:1，其中稀土离子与阴离子冠醚分子负电荷的摩尔比为1：10。
将发明实施例4制备的生物粘合剂涂附于钢底片表面进行粘合，固化5 天后，进行拉伸测试，测试结果如图6所示。结果表明引入稀土离子后，粘合剂的粘合强度大幅增加，达到了25.30MPa。
序列表
<110> 清华大学
<120> 一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法
<130> MP21035028
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Met Gly Ala Gly Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
1               5                   10                  15
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            20                  25                  30
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        35                  40                  45
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    50                  55                  60
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
65                  70                  75                  80
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                85                  90                  95
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys
            100                 105                 110
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        115                 120                 125
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    130                 135                 140
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro
145                 150                 155                 160
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                165                 170                 175
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            180                 185                 190
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Trp Pro
        195                 200                 205
His His His His His His
    210
<210> 2
<211> 414
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Met Gly Ala Gly Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
1               5                   10                  15
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            20                  25                  30
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        35                  40                  45
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    50                  55                  60
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
65                  70                  75                  80
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                85                  90                  95
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys
            100                 105                 110
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        115                 120                 125
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    130                 135                 140
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro
145                 150                 155                 160
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                165                 170                 175
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            180                 185                 190
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly
        195                 200                 205
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    210                 215                 220
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
225                 230                 235                 240
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                245                 250                 255
Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            260                 265                 270
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        275                 280                 285
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    290                 295                 300
Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
305                 310                 315                 320
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                325                 330                 335
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            340                 345                 350
Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        355                 360                 365
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    370                 375                 380
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
385                 390                 395                 400
Gly Lys Gly Val Pro Gly Trp Pro His His His His His His
                405                 410
<210> 3
<211> 809
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
Met Gly Ala Gly Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
1               5                   10                  15
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            20                  25                  30
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        35                  40                  45
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    50                  55                  60
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
65                  70                  75                  80
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                85                  90                  95
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys
            100                 105                 110
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        115                 120                 125
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    130                 135                 140
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro
145                 150                 155                 160
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                165                 170                 175
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            180                 185                 190
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly
        195                 200                 205
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    210                 215                 220
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
225                 230                 235                 240
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                245                 250                 255
Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            260                 265                 270
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        275                 280                 285
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    290                 295                 300
Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
305                 310                 315                 320
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                325                 330                 335
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            340                 345                 350
Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        355                 360                 365
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    370                 375                 380
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
385                 390                 395                 400
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                405                 410                 415
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            420                 425                 430
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        435                 440                 445
Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    450                 455                 460
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
465                 470                 475                 480
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                485                 490                 495
Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            500                 505                 510
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        515                 520                 525
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    530                 535                 540
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
545                 550                 555                 560
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                565                 570                 575
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            580                 585                 590
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly Lys Gly
        595                 600                 605
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    610                 615                 620
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
625                 630                 635                 640
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val Pro Gly
                645                 650                 655
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys
            660                 665                 670
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        675                 680                 685
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val Gly Val
    690                 695                 700
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
705                 710                 715                 720
Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly
                725                 730                 735
Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Val
            740                 745                 750
Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly
        755                 760                 765
Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val
    770                 775                 780
Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro Gly Lys Gly Val Pro
785                 790                 795                 800
Gly Trp Pro His His His His His His
                805

Claims (9)

1.一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂，其特征在于，包括带正电荷的类弹性蛋白与冠醚类阴离子；
所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGXG)]；n为4～16的整数；X为除脯氨酸外的任意天然氨基酸；
所述带正电荷的类弹性蛋白中正电荷的摩尔数与冠醚类阴离子中负电荷的摩尔比为(0.5～2.5)：1；
所述冠醚类阴离子如式(IV)所示：
Figure FDA0004148493690000011
2.根据权利要求1所述的高低温粘合剂，其特征在于，所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGVG)]。
3.根据权利要求1所述的高低温粘合剂，其特征在于，还包括稀土离子。
4.根据权利要求3所述的高低温粘合剂，其特征在于，所述稀土离子选自镧离子、铈离子、铕离子、镝离子与镥离子中的一种或多种。
5.根据权利要求3所述的高低温粘合剂，其特征在于，所述稀土离子与冠醚类阴离子的电荷比为(0.01～2)：10。
6.一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂的制备方法，其特征在于，包括：
S1)将带正电荷的类弹性蛋白与水混合，得到蛋白溶液；所述带正电荷的类弹性蛋白包含n个重复序列[(VPGKG)9(VPGXG)]；n为4～16的整数；X为除脯氨酸外的任意天然氨基酸；
将冠醚类化合物与水混合，得到含有冠醚类阴离子的冠醚溶液；
S2)将蛋白溶液与冠醚溶液混合，离心后，将下层溶液冷冻干燥，得到基于生物工程蛋白的高低温粘合剂；
所述带正电荷的类弹性蛋白中正电荷的摩尔数与冠醚类阴离子中负电荷的摩尔比为(0.5～2.5)：1；
所述冠醚类阴离子如式(IV)所示：
Figure FDA0004148493690000021
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤S2)中混合时还加入稀土化合物的水溶液。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述稀土化合物为三氯化镧、三氯化铈、三氯化铕、三氯化镝、三氯化镥、硝酸镧、硝酸铈、硝酸铕、硝酸镝、硝酸镥、三氟乙酸铕与三氟甲磺酸镧中的一种或多种。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白溶液中带正电荷的类弹性蛋白的浓度为100～300mg/mL；
所述冠醚溶液中冠醚类化合物的浓度为100～300mg/mL；
所述稀土化合物的水溶液中稀土化合物的浓度为0.01～0.02mol/L；
所述离心的速度为10000～13000rpm；离心的时间为2～5min；
所述冷冻干燥的时间为15～25min。
CN202111644571.5A 2021-12-29 2021-12-29 一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法 Active CN114292621B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111644571.5A CN114292621B (zh) 2021-12-29 2021-12-29 一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111644571.5A CN114292621B (zh) 2021-12-29 2021-12-29 一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114292621A CN114292621A (zh) 2022-04-08
CN114292621B true CN114292621B (zh) 2023-05-02

Family

ID=80970879

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111644571.5A Active CN114292621B (zh) 2021-12-29 2021-12-29 一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114292621B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116496415B (zh) * 2023-04-27 2024-04-23 北京镧系生物科技有限公司 一种模块化蛋白、包含其的粘合剂及其制备方法和应用
CN116421772A (zh) * 2023-04-28 2023-07-14 北京瞬行生物科技有限公司 一种基于生物工程蛋白的双组分瞬时原位粘合剂及其制备方法和用途
CN116570757B (zh) * 2023-07-05 2023-10-03 北京镧系生物科技有限公司 一种基于超电荷蛋白的双组分原位粘合剂及其制备方法和用途

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105885772B (zh) * 2016-06-30 2017-12-26 上海东和胶粘剂有限公司 大豆蛋白生物质无醛胶及其制备方法
CN109422836A (zh) * 2017-06-30 2019-03-05 翁秋梅 一种含有组合超分子作用的动态交联聚合物
CN110484990B (zh) * 2019-08-22 2021-05-28 中国科学院长春应用化学研究所 一种稀土蛋白纤维及其制备方法
CN110452662B (zh) * 2019-08-22 2020-07-07 中国科学院长春应用化学研究所 一种基于生物工程蛋白的生物粘合剂及其制备方法
CN110373153B (zh) * 2019-08-22 2021-04-06 中国科学院长春应用化学研究所 一种高粘合强度的生物粘合剂及其制备方法
CN110373152B (zh) * 2019-08-22 2021-08-17 中国科学院长春应用化学研究所 一种高强度的稀土蛋白粘合剂及其制备方法
CN112972421B (zh) * 2021-02-26 2022-04-08 清华大学 基于多正电荷蛋白的纳米药物系统、其制备方法及应用
CN113350563B (zh) * 2021-03-01 2022-09-06 清华大学 一种组织粘合剂及其制备方法和应用
CN113769155A (zh) * 2021-08-12 2021-12-10 中国人民解放军海军军医大学 一种基于生物工程蛋白的生物粘合剂及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN114292621A (zh) 2022-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114292621B (zh) 一种基于生物工程蛋白的高低温粘合剂及其制备方法
CN107056927B (zh) 一种利拉鲁肽的制备方法
CN106928320B (zh) 一种合成Etelcalcetide的方法
WO2012174816A1 (zh) 比伐卢定的制备方法
WO2016047794A1 (ja) 疎水性ペプチドの製造法
JP2005036036A (ja) エンドトキシン除去方法
CN110894225B (zh) 一种μ-芋螺肽的规模化制备纯化方法以及应用
CN110684077A (zh) 一种阿基瑞林的规模化合成方法
CN101838308A (zh) 依替巴肽的固相合成方法
CN107778351B (zh) 一种全固相合成奥曲肽的方法
JP3760435B2 (ja) オクトレオチドとその誘導体の製法
CN106084015B (zh) 一种合成卡贝缩宫素的方法
CN107857796B (zh) 一种三氟乙酰三肽-2的合成方法
CN107629111B (zh) 一种乙酰基四肽-2的液相合成方法
JPS602319B2 (ja) ペンタペプチド
CN110818771B (zh) 使用氨基酸离子液体的羰基硫介导多肽合成
CN102875657B (zh) 一种制备端粒酶多肽疫苗的方法
CN108047305B (zh) 一种十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐的合成方法
CN109879935A (zh) 一种多肽的液相合成方法
CN113896763B (zh) 一种类蛇毒三肽的合成方法
CN104311639A (zh) 一种生长抑素的合成工艺
CN112175042B (zh) Etelcalcetide的合成方法
CN103923210A (zh) 一种胸腺法新的固相合成工艺
WO2008023582A1 (fr) Depsipeptide contenant un résidu d&#39;acide lactique
EP3178867A1 (en) Process for preparation of bioorganic nylon polymers and their use as antibacterial material

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant