CN114225027A - 基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球及其制备方法 - Google Patents
基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114225027A CN114225027A CN202111355342.1A CN202111355342A CN114225027A CN 114225027 A CN114225027 A CN 114225027A CN 202111355342 A CN202111355342 A CN 202111355342A CN 114225027 A CN114225027 A CN 114225027A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liver cancer
- cell membrane
- transmembrane protein
- cancer cell
- targeted
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 109
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 108
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 title claims abstract description 77
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 title claims abstract description 68
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 claims abstract description 63
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 claims abstract description 63
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 56
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 34
- MOFVSTNWEDAEEK-UHFFFAOYSA-M indocyanine green Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CCCCN1C2=CC=C3C=CC=CC3=C2C(C)(C)C1=CC=CC=CC=CC1=[N+](CCCCS([O-])(=O)=O)C2=CC=C(C=CC=C3)C3=C2C1(C)C MOFVSTNWEDAEEK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 34
- 229960004657 indocyanine green Drugs 0.000 claims abstract description 34
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 claims abstract description 24
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 claims abstract description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 26
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 11
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000011258 core-shell material Substances 0.000 claims description 8
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 claims description 8
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 claims description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 4
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 3
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 claims description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000003906 phosphoinositides Chemical class 0.000 claims description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims description 3
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 2
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 2
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 claims description 2
- 230000007480 spreading Effects 0.000 claims description 2
- 238000003892 spreading Methods 0.000 claims description 2
- 230000003592 biomimetic effect Effects 0.000 claims 3
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 claims 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 6
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000010354 integration Effects 0.000 abstract 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 14
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 6
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 4
- 238000007626 photothermal therapy Methods 0.000 description 4
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 2
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000002539 nanocarrier Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000010414 supernatant solution Substances 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000003917 TEM image Methods 0.000 description 1
- COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N Uranyl acetate Chemical compound O.O.O=[U]=O.CC(O)=O.CC(O)=O COQLPRJCUIATTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000003519 biomedical and dental material Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/5005—Wall or coating material
- A61K9/5063—Compounds of unknown constitution, e.g. material from plants or animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0052—Thermotherapy; Hyperthermia; Magnetic induction; Induction heating therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0032—Methine dyes, e.g. cyanine dyes
- A61K49/0034—Indocyanine green, i.e. ICG, cardiogreen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0045—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent agent being a peptide or protein used for imaging or diagnosis in vivo
- A61K49/0047—Green fluorescent protein [GFP]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0063—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres
- A61K49/0069—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres the agent being in a particular physical galenical form
- A61K49/0097—Cells, viruses, ghosts, red blood cells, viral vectors, used for imaging or diagnosis in vivo
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/225—Microparticles, microcapsules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/067—Hepatocytes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0693—Tumour cells; Cancer cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2509/00—Methods for the dissociation of cells, e.g. specific use of enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
- C12N2740/15041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/15043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2800/00—Nucleic acids vectors
- C12N2800/10—Plasmid DNA
- C12N2800/106—Plasmid DNA for vertebrates
- C12N2800/107—Plasmid DNA for vertebrates for mammalian
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Acoustics & Sound (AREA)
- Hematology (AREA)
- Botany (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球及其制备方法。为核壳结构，外层壳为基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜，内层核为包载吲哚菁绿分子的聚乳酸‑羟基乙酸共聚物纳米微球；构建过表达靶向跨膜蛋白的慢病毒，构建过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞株，慢病毒转染使肝癌细胞株表面出现靶向跨膜蛋白，分离和纯化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳，包载吲哚菁绿分子的聚乳酸‑羟基乙酸共聚物纳米微球制备，基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球制备。本发明产物有对肝癌组织大量精准递送具有多模态成像和近红外光热效应的吲哚菁绿分子，能够实现肝癌诊疗一体化的功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物医用材料，尤其是涉及一种具有肝癌靶向的基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球及其制备方法，属于仿生纳米载体的制备及其荧光成像和光热治疗应用的技术领域。
背景技术
肝癌是一种肝脏原发性恶性肿瘤，是致死率仅次于胰腺癌的第二大恶性肿瘤。肝癌起病症状不明显，许多患者确诊时已失去手术治愈机会。目前对于不可切除性肝癌的治疗效果有限，急需发展创新高效的肝癌诊断和治疗方式。基于纳米体系的光热治疗近些年正在成为纳米药物肿瘤治疗研究领域的热门方向，具有治疗精准性高，对正常组织损伤小，生物安全性高的特点。目前光热治疗对肝癌等深部肿瘤的治疗效果有限，现有技术缺少利用高效靶向肝癌组织的纳米载体携带光热分子大量富集到肝癌中以提高治疗效果的技术。
发明内容
为了解决背景技术中存在的问题，本发明的目的在于提供了一种具有肝癌靶向的基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球及其制备方法，纳米微球具有对肝癌组织大量精准递送具有多模态成像和近红外光热效应的吲哚菁绿(ICG)分子。能够将肝细胞膜仿生纳米体系的同源归巢靶向作用和肝癌细胞靶向肽的主动亲和靶向作用相结合，实现双重靶向增强效果。同时利用对肝癌的靶向能力将具有光热治疗和肿瘤组织成像功能的纳米体系高效递送到肝癌组织当中，实现对肝癌的诊疗一体化。
本发明方法是通过细胞培养的方式获取基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜，再通过脂质体挤出器共挤出的方式将细胞膜包裹于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球表面，形成核壳结构的基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球。操作简单易行，工艺参数易于控制。该仿生纳米微球能够大量富集于肝癌组织中，减少体内其他组织的非特异性蓄积，实现对肝癌组织的特异性靶向作用。同时微球具有荧光成像和光热治疗效果达到对肝癌的诊疗一体化效果。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一、一种基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球：
所述的纳米微球为核壳结构，直径在100纳米左右分布，核壳结构的外层壳为过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜，核壳结构的内层核为包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球。
所述外层壳为基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜，靶向跨膜蛋白的构成为IL-2跨膜蛋白信号肽、肝癌靶向肽SP94、增强型绿色荧光蛋白EGFP、3×FLAG标记蛋白、糖基化磷酯酰肌醇锚定蛋白GPI中的其中一种。
所述内层核为包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其中聚乳酸：聚羟基乙酸的摩尔比例为1：1，聚乳酸-羟基乙酸共聚物与吲哚菁绿的质量比为5：1～1：5。
二、基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球的制备方法，所述制备方法具体包括：
步骤一：构建过表达靶向跨膜蛋白的慢病毒，所述的慢病毒用于使细胞表面过表达权利要求2中的靶向跨膜蛋白；
步骤二：构建过表达靶向跨膜蛋白的标准肝癌细胞株，且通过慢病毒转染使标准肝癌细胞株表面出现靶向跨膜蛋白；
所述步骤二具体为：
将肝癌细胞铺到6孔板中，37℃培养箱内常规培养24小时，加入20微升/孔的过表达靶向跨膜蛋白的慢病毒，37℃培养24小时得到过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞株。
步骤三：分离和纯化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳；
所述步骤三具体为：
由上述步骤二获得的肝癌细胞膜进行培养获得肝癌细胞膜，收集肝癌细胞膜上稳定表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞，具体是用细胞刮子轻柔刮下细胞，1000转/分钟离心5分钟收集细胞；使用含有质量分数为1％苯甲基磺酰氟的低渗细胞裂解液裂解细胞，于液氮和常温下反复冻结融化细胞溶液，再使用梯度离心法获得细胞膜，具体是在4℃和700g条件下离心10分钟，收集上清的溶液，最后14000g离心30分钟，收集沉淀为过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜；
最后经超声处理后使用脂质体挤出器挤过多孔聚碳酸酯多孔膜，超声处理具体是使用超声细胞破碎仪，在20kHz频率和20W功率下将过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜超声5分钟，使用Avanti脂质体挤出器挤过200nm的聚碳酸酯多孔膜；来回重复挤过膜3～11次，获得大小分布均一的过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳。
步骤四：包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球制备；
所述步骤四具体为：
使用超声细胞破碎仪，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物的乙腈溶液逐滴加入吲哚菁绿的乙醇溶液中超声处理10分钟得到混合溶液，对混合溶液使用超滤管离心去除游离吲哚菁绿分子，然后使用微米针式滤器过滤除处理获得聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球，得到大小分布均一的吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球。
所述步骤四中，使用0.22微米针式滤器过滤除去直径大于0.22微米的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球。
所述步骤四具体可以为：配制2克/升的聚乳酸-羟基乙酸共聚物的80％乙腈溶液和0.75克/升的吲哚菁绿的4％乙醇溶液。在20kHz频率和40W功率的超声下，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液逐滴加入吲哚菁绿溶液中，混合比例5：1～1：5，超声处理10分钟。得到的混合溶液使用Amicon ultra-4超滤管3000转/分钟离心30分钟。取上层溶液使用0.22微米针式滤器过滤3次，得到平均直径0.22微米的包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球。
步骤五：基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球制备。
所述步骤五具体为：
按照质量比1：2～2：1比例混合过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳及吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球，超声处理后使用脂质体挤出器挤过200nm的聚碳酸酯多孔膜，来回重复挤过膜11次，获得大小分布均一的基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球。
所述步骤五具体可以为：使用超声细胞破碎仪，在20kHz频率和20W功率下将过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳和包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球按照1：2～2：1的质量比混合超声5分钟。混合后的溶液使用Avanti脂质体挤出器挤过200nm的聚碳酸酯多孔膜，来回重复3～11次，得到过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球。
本发明是通过基因工程化的方式，将肿瘤靶向肽表达于细胞膜表面从而实现肝癌靶向效果叠加，构建一种强化肝癌靶向效果的细胞膜仿生纳米微球。
本发明构建过表达靶向跨膜蛋白的慢病毒M靶向跨膜蛋白中含有肝癌靶向肽SP94。以慢病毒转染的方式在肝癌细胞表面表达靶向跨膜蛋白，构建过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞株。使用复乳法将具有光热响应和荧光成像、光声成像功能的吲哚菁绿(ICG)装载于聚乳酸-乙醇酸(PLGA)聚合物中，自组装形成聚乳酸-乙醇酸纳米微球。使用梯度离心法和脂质体挤出法制备过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞株的细胞膜外壳，包载聚乳酸-乙醇酸纳米微球，得到过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球。
本发明具体实施是以慢病毒转染的方式在肝癌细胞Huh-7表面表达肝癌靶向肽，构建肝癌靶向肽SP94过表达的Huh-7SP94+肝癌细胞系；使用复乳法将具有光热响应和荧光成像、光声成像功能的吲哚菁绿(ICG)装载于聚乳酸-乙醇酸(PLGA)聚合物中，自组装形成聚乳酸-乙醇酸纳米微球；使用梯度离心法提取Huh-7SP94+肝癌细胞系其细胞膜囊泡，包载聚乳酸-乙醇酸纳米微球，得到肝癌强化靶向的基因工程化细胞膜仿生纳米微球。
本发明具有的有益效果体现在：
1)过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球能够大量富集于肝癌组织中，减少体内其他组织的非特异性蓄积，实现对肝癌组织的特异性靶向作用。
2)过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球具有荧光成像和光热治疗效果达到对肝癌的诊疗一体化效果。
附图说明
图1是本发明的结构图，1-1是靶向跨膜蛋白，1-2是肝癌细胞膜，1-3是聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球，1-4是吲哚菁绿分子。
图2是本发明的透射电镜图。
图3是本发明的光热响应曲线。
图4是本发明的体外靶向荧光效果图。
图中，4-1是基因工程化细胞膜仿生纳米微球，4-2是普通细胞膜仿生纳米微球，4-3是聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球，4-4是对照组。
具体实施方式
下面结合实施例及其附图进一步叙述本发明。
实施例1:
本发明实施例的一种过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球制备方法，选择Huh-7肝癌细胞作为细胞模型，按照如下具体步骤进行：
步骤一：构建过表达靶向跨膜蛋白的慢病毒。
该慢病毒能够使细胞表面过表达靶向跨膜蛋白。靶向跨膜蛋白的构成包括IL-2跨膜蛋白信号肽、肝癌靶向肽SP94、增强型绿色荧光蛋白EGFP、3×FLAG标记蛋白、糖基化磷酯酰肌醇锚定蛋白GPI。
步骤二：构建过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞株Huh-7SP94+
将人肝癌细胞Huh-7按照1x105/孔的密度铺到6孔板中，37℃培养箱内常规培养24小时。用表达靶向跨膜蛋白的慢病毒转染Huh-7细胞，每孔加入20微升慢病毒，37℃培养24小时得到过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞株Huh-7SP94+。
步骤三：分离和纯化过表达靶向跨膜蛋白的Huh-7SP94+肝癌细胞膜外壳
使用直径10cm的培养皿培养Huh-7SP94+细胞，待细胞铺满80％的培养皿，去除培养基，用磷酸盐缓冲盐溶液洗一遍，用细胞刮子轻柔刮下细胞，转移细胞到15毫升离心管中。1000转/分钟离心5分钟收集细胞，吸去上层培养基后用磷酸盐缓冲盐溶液轻轻重悬细胞，取少量细胞用于计数，剩余细胞600g离心5分钟，去掉上清。在离心管中加入1毫升含有1％苯甲基磺酰氟的细胞低渗裂解液，用移液枪吹打充分悬浮细胞，冰浴放置15分钟使细胞溶胀。随后将离心管依次放在液氮和常温下反复冻融，直到细胞破碎。随后在4℃和700g条件下离心10分钟，收集上清的溶液，最后14000g离心30分钟，收集沉淀为细胞膜。使用超声细胞破碎仪，在20kHz频率和20W功率下超声5分钟，随后使用Avanti脂质体挤出器挤过200纳米的聚碳酸酯多孔膜，来回重复11次，得到过表达靶向跨膜蛋白的Huh-7SP94+肝癌细胞膜外壳
步骤四：包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球制备。
称取2毫克聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解于1毫升80％乙腈溶液中，再称取0.75毫克的吲哚菁绿，溶解于1毫升的4％乙醇溶液中。使用超声细胞破碎仪，在20kHz频率和40W功率下，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液逐滴加入吲哚菁绿溶液中，得到2毫升混合溶液，超声处理10分钟。得到的混合溶液使用Amicon ultra-4超滤管3000转/分钟离心30分钟。取上层溶液使用0.22微米针式滤器过滤3次，得到平均直径0.22微米的包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球。
步骤五：基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球制备。
取吲哚菁绿质量为0.2毫克的聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液与0.1毫克的细胞膜溶液混合并定容至1毫升。使用超声细胞破碎仪，在20kHz频率和20W功率下超声5分钟充分混合。混合后的溶液使用Avanti脂质体挤出器挤过200纳米的聚碳酸酯多孔膜，来回重复11次，确保细胞膜能充分包被在聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球表面，形成直径约200纳米的基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球。
使用透射电子显微镜表征基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球的形貌。吸取10μL的纳米微球溶液，轻柔滴加在透射电子显微镜碳支持膜铜网上，使用红外灯烘干铜网上的水分，滴加5μL的2％醋酸双氧铀溶液进行铜网负染色。再次红外灯烘干后将铜网放入透射电子显微镜进样孔，进行拍照，得到纳米体系的形貌如图2所示。结果表明，基因工程化细胞膜仿生纳米微球为核壳结构，直径在100纳米左右分布，细胞膜涂层厚度约7纳米。细胞膜囊泡位于纳米微球表面，纳米微球核心为包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物。
使用波长为808纳米的近红外激光器在0.5瓦/平方厘米、1.0瓦/平方厘米、1.5瓦/平方厘米、2.0瓦/平方厘米的功率下对0.2毫升的1克/升的基因工程化细胞膜仿生纳米微球进行光照，用红外热像仪对溶液温度进行实时检测并记录，绘制温度-时间变化曲线如图3所示。结果表明，在近红外激光照射下，基因工程化细胞膜仿生纳米微球在0.5瓦/平方厘米、1.0瓦/平方厘米、1.5瓦/平方厘米、2.0瓦/平方厘米的功率下温度分别达到30.56℃、59.47℃、70.56℃、80.13℃，具有优秀的光热转化能力。
使用肝癌细胞系Huh-7进行细胞吞噬能力的流式细胞术检测。按照1×104个/孔将细胞种于96孔板中，加入含有浓度为20微摩尔的基因工程化细胞膜仿生纳米微球200微升，培养3小时后用流式细胞仪检测平均荧光强度，如图4所示。结果表明，基因工程化细胞膜仿生纳米微球的平均荧光强度分别为58586，分别是普通细胞膜仿生纳米微球组和聚合物纳米微球平均荧光强度值的2.26倍和3.95倍，证明基因工程化细胞膜仿生纳米微球具有高效体外靶向的效果。
由此可见，本发明实例得到的基因工程化细胞膜仿生纳米微球具有对肝癌组织的特异性靶向作用和荧光成像、光热转化能力，达到对肝癌的诊疗一体化效果。
以上所述仅为本发明的实例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球，其特征在于：
所述的纳米微球为核壳结构，核壳结构的外层壳为过表达靶向跨膜蛋白(1-1)的肝癌细胞膜(1-2)，核壳结构的内层核为包载吲哚菁绿分子(1-4)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球(1-3)。
2.根据权利要求1所述的一种基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球，其特征在于：
所述外层壳为基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜，靶向跨膜蛋白的构成为IL-2跨膜蛋白信号肽、肝癌靶向肽SP94、增强型绿色荧光蛋白EGFP、3×FLAG标记蛋白、糖基化磷酯酰肌醇锚定蛋白GPI中的其中一种。
3.根据权利要求1所述的一种基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球，其特征在于：
所述内层核为包载吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其中聚乳酸：聚羟基乙酸的摩尔比例为1：1，聚乳酸-羟基乙酸共聚物与吲哚菁绿的质量比为5：1～1：5。
4.根据权利要求1～3任一所述基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球的制备方法，其特征在于所述制备方法具体包括：
步骤一：构建过表达靶向跨膜蛋白的慢病毒；
步骤二：构建过表达靶向跨膜蛋白的标准肝癌细胞株，且通过慢病毒转染使标准肝癌细胞株表面出现靶向跨膜蛋白；
步骤三：分离和纯化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳；
步骤四：包载吲哚菁绿分子(1-4)的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球(1-3)制备；
所述步骤四中，使用0.22微米针式滤器过滤除去直径大于0.22微米的聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球。
步骤五：基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球制备。
5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：
所述步骤二具体为：
将肝癌细胞铺到6孔板中，37℃培养箱内常规培养24小时，加入20微升/孔的过表达靶向跨膜蛋白的慢病毒，37℃培养24小时得到过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞株。
6.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：
所述步骤三具体为：
由上述步骤二获得的肝癌细胞膜进行培养获得肝癌细胞膜，收集肝癌细胞膜上稳定表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞，使用含有质量分数为1％苯甲基磺酰氟的细胞裂解液裂解细胞，于液氮和常温下反复冻结融化细胞溶液，再使用梯度离心法获得细胞膜；
最后经超声处理后使用脂质体挤出器挤过多孔聚碳酸酯多孔膜，来回重复挤过膜3～11次，获得大小分布均一的过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳。
7.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：
所述步骤四具体为：
使用超声细胞破碎仪，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物的乙腈溶液逐滴加入吲哚菁绿的乙醇溶液中超声处理10分钟得到混合溶液，对混合溶液使用超滤管离心去除游离吲哚菁绿分子，然后使用微米针式滤器过滤除处理获得聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球，得到大小分布均一的吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球。
8.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：
所述步骤五具体为：
按照质量比1：2～2：1比例混合过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜外壳及吲哚菁绿分子的聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球，超声处理后使用脂质体挤出器挤过200nm的聚碳酸酯多孔膜，来回重复挤过膜11次，获得大小分布均一的基因工程化过表达靶向跨膜蛋白的肝癌细胞膜仿生纳米微球。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111355342.1A CN114225027B (zh) | 2021-11-16 | 2021-11-16 | 基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111355342.1A CN114225027B (zh) | 2021-11-16 | 2021-11-16 | 基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114225027A true CN114225027A (zh) | 2022-03-25 |
| CN114225027B CN114225027B (zh) | 2023-11-28 |
Family
ID=80749572
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111355342.1A Active CN114225027B (zh) | 2021-11-16 | 2021-11-16 | 基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114225027B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114831961A (zh) * | 2022-04-01 | 2022-08-02 | 浙江大学 | 肝靶向的仿生细胞膜载药纳米颗粒及其制备方法和应用 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101381706A (zh) * | 2007-09-06 | 2009-03-11 | 复旦大学附属中山医院 | 稳定表达荧光蛋白的人肝癌高转移细胞株及其建立方法 |
| CN104922671A (zh) * | 2015-06-09 | 2015-09-23 | 深圳先进技术研究院 | 一种吲哚菁绿复合纳米颗粒及其制备方法和应用 |
| CN104946597A (zh) * | 2015-03-23 | 2015-09-30 | 大连医科大学附属第一医院 | 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株 |
| CN109091673A (zh) * | 2018-09-11 | 2018-12-28 | 浙江理工大学 | 一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法 |
| CN110743019A (zh) * | 2019-10-29 | 2020-02-04 | 中国科学院武汉物理与数学研究所 | 靶向肺腺癌肿瘤的细胞膜仿生纳米探针及其应用 |
| CN111603454A (zh) * | 2020-06-08 | 2020-09-01 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 一种多重靶向的融合细胞膜修饰的仿生纳米递送系统及其制备方法与应用 |
| CN111733139A (zh) * | 2020-01-13 | 2020-10-02 | 西安电子科技大学 | 一种基于功能化巨噬细胞/单核细胞的靶向递送系统及其构建与应用 |
| CN113499317A (zh) * | 2021-07-09 | 2021-10-15 | 郑州大学 | 一种多功能仿生纳米药物的制备方法及应用 |
-
2021
- 2021-11-16 CN CN202111355342.1A patent/CN114225027B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101381706A (zh) * | 2007-09-06 | 2009-03-11 | 复旦大学附属中山医院 | 稳定表达荧光蛋白的人肝癌高转移细胞株及其建立方法 |
| CN104946597A (zh) * | 2015-03-23 | 2015-09-30 | 大连医科大学附属第一医院 | 稳定表达GFP的shRNA靶向干扰YB-1基因人肺腺癌A549细胞株 |
| CN104922671A (zh) * | 2015-06-09 | 2015-09-23 | 深圳先进技术研究院 | 一种吲哚菁绿复合纳米颗粒及其制备方法和应用 |
| CN109091673A (zh) * | 2018-09-11 | 2018-12-28 | 浙江理工大学 | 一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法 |
| CN110743019A (zh) * | 2019-10-29 | 2020-02-04 | 中国科学院武汉物理与数学研究所 | 靶向肺腺癌肿瘤的细胞膜仿生纳米探针及其应用 |
| CN111733139A (zh) * | 2020-01-13 | 2020-10-02 | 西安电子科技大学 | 一种基于功能化巨噬细胞/单核细胞的靶向递送系统及其构建与应用 |
| CN111603454A (zh) * | 2020-06-08 | 2020-09-01 | 上海交通大学医学院附属第九人民医院 | 一种多重靶向的融合细胞膜修饰的仿生纳米递送系统及其制备方法与应用 |
| CN113499317A (zh) * | 2021-07-09 | 2021-10-15 | 郑州大学 | 一种多功能仿生纳米药物的制备方法及应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ZE CHEN等: "Cancer Cell Membrane−Biomimetic Nanoparticles for Homologous-Targeting Dual-Modal Imaging and Photothermal Therapy", 《ACS NANO》 * |
| 张红绪等: "蜂毒素-SP94杂合基因原核表达载体的构建及蛋白纯化", 《河南师范大学学报（自然科学版）》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114831961A (zh) * | 2022-04-01 | 2022-08-02 | 浙江大学 | 肝靶向的仿生细胞膜载药纳米颗粒及其制备方法和应用 |
| CN114831961B (zh) * | 2022-04-01 | 2023-08-29 | 浙江大学 | 肝靶向的仿生细胞膜载药纳米颗粒及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114225027B (zh) | 2023-11-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7455165B2 (ja) | 幹細胞からの有益因子の産生および送達のための方法およびデバイス | |
| CN109078176B (zh) | 肿瘤细胞膜包覆的纳米材料及其制备方法与应用 | |
| Srivastava et al. | Exploitation of exosomes as nanocarriers for gene-, chemo-, and immune-therapy of cancer | |
| Ge et al. | Gold and gold-silver alloy nanoparticles enhance the myogenic differentiation of myoblasts through p38 MAPK signaling pathway and promote in vivo skeletal muscle regeneration | |
| CN103002879B (zh) | 来自细胞原生质体的微泡及其应用 | |
| CN106362148B (zh) | 一种普鲁士蓝纳米介晶细胞膜包覆修饰方法 | |
| CN109666695A (zh) | 一种靶向整合素αvβ3的外泌体载体及其制备方法和应用 | |
| CN111110855B (zh) | 一种利用红细胞制备的靶向性的囊泡药物 | |
| CN112494495B (zh) | 一种癌细胞膜嵌合脂质体纳米给药体系的制备方法 | |
| CN114225027B (zh) | 基因工程化肝癌靶向细胞膜仿生纳米微球及其制备方法 | |
| KR101747786B1 (ko) | 배아줄기세포에서 유래한 인공 나노베시클을 이용하여 세포 증식을 향상시키는 방법 | |
| CN115960838A (zh) | 一种内外工程化外泌体及其制备方法与应用 | |
| Wang et al. | Microvesicles as drug delivery systems: A new frontier for bionic therapeutics in cancer | |
| WO2024051764A1 (zh) | 负载聚多巴胺纳米颗粒的细胞外囊泡及制备方法 | |
| CN113384690B (zh) | 靶向肿瘤的体内原位诱导car-t细胞的递送系统及其应用 | |
| CN114146064A (zh) | 具有胰腺癌微环境靶向的基因工程化细胞膜仿生纳米微球及其方法 | |
| CN111787929A (zh) | 细胞重编程疗法 | |
| CN114869911A (zh) | Pd-1细胞膜纳米囊泡联合干细胞膜片在恶性黑色素瘤术后治疗中的应用 | |
| KR20220080681A (ko) | 면역항암치료제로의 적용을 위한 수지상세포 모방 나노구조체 및 이의 제조방법 | |
| CN115068438B (zh) | 破骨细胞前体同源靶向的细胞膜纳米囊泡制备方法及应用 | |
| CN115029310B (zh) | 一种破骨前体细胞膜仿生纳米颗粒及制备方法和应用 | |
| CN115404212B (zh) | 小粒径纳米细胞膜囊泡、制备方法、组合物及试剂盒 | |
| CN115998709B (zh) | 一种膜融合纳米核酸载体及其制备方法与应用 | |
| CN117363652B (zh) | 一种双转录因子调控的双启动质粒、纳米材料及其制备方法和应用 | |
| CN115887679B (zh) | 一种基因-化疗纳米药物共递送系统、其制备方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |