CN114191452A - 一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，包括制备脐血血浆，制备脐血干细胞，将脐血血浆混合脐血干细胞输注血液，使脐血干细胞与脐血血浆相联合进行使用，所述脐血血浆提取过程为：脐血经离心机转速2000r，持续时间为10min离心，使血细胞和血浆分层，取5ml血浆做无菌和病毒检测，将剩余的血浆按每份20ml分装至转移袋中，放置‑80℃冰箱保存备用。本发明的有益效果是：该采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法通过脐血干细胞和脐血血浆联合制剂能够调节局部组织微环境，促进血管新生，改善局部供血，恢复心室壁厚度。脐血血浆能够为脐血干细胞提供更好的生存环境，能够最大限度地维持细胞的活性和功能，从而起到延缓心肌缺血的效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种延缓心肌缺血的方法，具体为一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，属于脐带血干细胞技术领域。
背景技术
冠状动脉狭窄或栓塞是心肌缺血的主要原因之一，长期缺血将导致心肌细胞不同程度的功能代谢混乱、损伤甚至死亡。经皮冠状动脉介入术是目前治疗心肌缺血的有效方法，通过植入导管、球囊、支架等方式使狭隘或栓塞的血管再度通畅，恢复血流对心肌细胞的营养供给。但在恢复供血的同时可能会导致已受损的心肌细胞出现缺血再灌注损伤，导致心力衰竭的可能。
干细胞产业作为再生医学的一部分，已成为一种新兴的健康医药产业。研究者发现，脐血干细胞和脐血血浆联合制剂能够调节局部组织微环境，促进血管新生，改善局部供血，恢复心室壁厚度。脐血血浆能够为脐血干细胞提供更好的生存环境，能够最大限度地维持细胞的活性和功能。
在如今心肌缺血年轻化、广泛化的大背景下，越来越多的科学家研究用干细胞治疗衰老相关的疾病。随着我国干细胞技术与应用不断发展与成熟，干细胞技术在抗衰老和治疗领域的应用也将迅速扩展起来。因此开发了一种利用脐血干细胞延缓心肌缺血的发法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的，一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备脐血血浆，制备脐血干细胞；
步骤二：将脐血血浆混合脐血干细胞输注血液，使脐血干细胞与脐血血浆相联合进行使用。
优选的，所述脐血血浆提取过程为：脐血经离心机转速2000r，持续时间为10min离心，使血细胞和血浆分层，取5ml血浆做无菌和病毒检测，将剩余的血浆按每份20ml分装至转移袋中，放置-80℃冰箱保存备用。
优选的，所述脐血干细胞是将脐血在无菌条件下采集单个核细胞，将提取的单个核已2-4*107接种无血清培养基培养24小时后，收集培养集中悬浮的脐血干细胞进行冻存，细胞冻存密度2*107/ml，采用程序降温的方法：采用1℃/min降至-40℃，再以5℃/min降至-80℃，在-80℃中防止12小时后投入液氮气象罐中保存。
优选的，包含以下步骤：
所述脐血血浆复苏，将20ml脐血血浆37℃恒温水浴，2min内复苏完成；将10*107脐血干细胞同样37℃恒温水浴，1min内复苏完成，再进行2次离心洗涤，将10ml脐血血浆和10*107脐血干细胞进行混合过滤，将得到的脐血血浆和脐血干细胞混合液静脉输注，回输4次为一个疗程，时间间隔7天。
优选的，两周内应注意清淡饮食，避免食用过敏性食物。
本发明的有益效果是：脐血干细胞和脐血血浆联合制剂能够调节局部组织微环境，促进血管新生，改善局部供血，恢复心室壁厚度。脐血血浆能够为脐血干细胞提供更好的生存环境，能够最大限度地维持细胞的活性和功能，从而起到延缓心肌缺血的效果。
附图说明
图1为本发明的脐血血浆和脐血干细胞提取流程图；
图2为本发明的脐血血浆和脐血干细胞联合使用步骤流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1-2所示，一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，包括以下步骤：
第一步，制备脐血血浆，制备脐血干细胞。
第二步，将脐血血浆混合脐血干细胞输注血液，使脐血干细胞与脐血血浆相联合进行使用。
第三步，注射后注意事项。
第四步，定期随访使用者的各项指标变化。
所述脐血血浆提取过程为：脐血经离心机转速2000r，10min离心，使血细胞和血浆分层，取5ml血浆做无菌和病毒检测，将剩余的血浆按每份20ml分装至转移袋中，放置-80℃冰箱保存备用。
所述脐血干细胞是将脐血在无菌条件下采集单个核细胞，将提取的单个核已2-4*107接种无血清培养基培养24小时后，收集培养集中悬浮的脐血干细胞进行冻存，细胞冻存密度2*107/ml。采用程序降温的方法：采用1℃/min降至-40℃，再以5℃/min降至-80℃，在-80℃中防止12小时后投入液氮气象罐中保存。
在所述第二步中将脐血血浆混合脐血干细胞输注血液，使脐血干细胞与脐血血浆相联合进行使用：
所述脐血血浆复苏，将20ml脐血血浆37℃恒温水浴，2min内复苏完成；将10*107脐血干细胞同样37℃恒温水浴，1min内复苏完成，再进行2次离心洗涤。将10ml脐血血浆和10*107脐血干细胞进行混合过滤。将得到的脐血血浆和脐血干细胞混合液静脉输注。回输4次为一个疗程，时间间隔7天。
两周内应注意清淡饮食，避免食用过敏性食物，治疗后可能会出现注射局部轻微的红肿及体温升高，同时也可能出现慵懒或者疲乏的现象，尽量减少或者停止吸烟，至少在一个月内不饮烈酒，10天内不参加剧烈运动，7天内不宜进行桑拿、汗蒸等。同时保持良好的生活方式及良好的心情，使细胞发挥最佳作用，维持更长的时间。
整个使用过程，分别在使用者使用三个月、五个月、七个月后进行心室射血分数结果的变化。
具体实施案例：通过对39人采用脐血干细胞联合脐血血浆进行1疗程回输后对骨密度的测试，其中18人都有轻微心肌缺血症状。
表为18人使用后心室射血分数的变化统计表：
| 使用前 | 第三个月 | 第五个月 | 第七个月 | 症状改善情况 | |
| 1 | 45％ | 46％ | 48％ | 51％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 2 | 48％ | 48％ | 50％ | 55％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 3 | 42％ | 44％ | 45％ | 49％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 4 | 41％ | 42％ | 45％ | 46％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 5 | 50％ | 53％ | 53％ | 53％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 6 | 39％ | 41％ | 44％ | 52％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 7 | 42％ | 46％ | 51％ | 55％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 8 | 45％ | 50％ | 52％ | 55％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 9 | 46％ | 48％ | 52％ | 57％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 10 | 43％ | 46％ | 47％ | 49％ | 心悸、胸闷、气短症状改善不明显 |
| 11 | 44％ | 50％ | 54％ | 61％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 12 | 38％ | 42％ | 45％ | 48％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 13 | 39％ | 40％ | 42％ | 42％ | 心悸、胸闷、气短症状改善不明显 |
| 14 | 40％ | 46％ | 53％ | 55％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 15 | 42％ | 43％ | 48％ | 52％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 16 | 42％ | 46％ | 46％ | 48％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 17 | 42％ | 47％ | 52％ | 56％ | 心悸、胸闷、气短症状改善 |
| 18 | 43％ | 48％ | 49％ | 49％ | 心悸、胸闷、气短症状改善不明显 |
从表中数据看出，18名轻微症患者中，心室射血分数都有明显的改善。伴随着的心悸、胸闷、气短症状改善比较明显。
在本发明尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (5)
1.一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，包括以下步骤：
步骤一：制备脐血血浆，制备脐血干细胞；
步骤二：将脐血血浆混合脐血干细胞输注血液，使脐血干细胞与脐血血浆相联合进行使用。
2.根据权利要求1所述的一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，其特征在于：所述脐血血浆提取过程为：脐血经离心机转速2000r，持续时间为10min离心，使血细胞和血浆分层，取5ml血浆做无菌和病毒检测，将剩余的血浆按每份20ml分装至转移袋中，放置-80℃冰箱保存备用。
3.根据权利要求1所述的一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，其特征在于：所述脐血干细胞是将脐血在无菌条件下采集单个核细胞，将提取的单个核已2-4*107接种无血清培养基培养24小时后，收集培养集中悬浮的脐血干细胞进行冻存，细胞冻存密度2*107/ml，采用程序降温的方法：采用1℃/min降至-40℃，再以5℃/min降至-80℃，在-80℃中防止12小时后投入液氮气象罐中保存。
4.根据权利要求1所述的一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，其特征在于：包含以下步骤：
所述脐血血浆复苏，将20ml脐血血浆37℃恒温水浴，2min内复苏完成；将10*107脐血干细胞同样37℃恒温水浴，1min内复苏完成，再进行2次离心洗涤，将10ml脐血血浆和10*107脐血干细胞进行混合过滤，将得到的脐血血浆和脐血干细胞混合液静脉输注，回输4次为一个疗程，时间间隔7天。
5.根据权利要求1所述的一种采用脐带血干细胞延缓心肌缺血的方法，其特征在于：两周内应注意清淡饮食，避免食用过敏性食物。
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