CN114073661A - 一种抗敏组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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金荣熙
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Nutri Woods Bio Tech Beijing Co ltd
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Abstract

本发明公开了一种抗敏组合物及其制备方法和应用，属于植物提取研究领域。该抗敏组合物包括桃胶提取物、仙人掌提取物和铁皮石斛提取物。本发明抗敏组合物具有显著的拮抗化妆品刺激性的作用。功效评价实验证实，本发明的抗敏组合物能够抑制SDS（十二烷基硫酸钠）引起的红细胞溶血，降低SDS致鸡胚绒毛尿囊膜刺激性。

Description

一种抗敏组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及植物提取研究领域，具体涉及一种抗敏组合物及其应用。
背景技术
随着社会城市化和工业化的迅速发展，外界环境的刺激源也在不断地多样化，其中以环境污染以及化妆品中清洁剂、乳化剂、香精、色素、防腐剂等刺激源最为常见。化妆品刺激性是指因使用化妆品中某些成分，导致水肿、红斑、瘙痒、疼痛等症状。目前，化妆品中可使用原料共有8783种，其中包括活性成分、表面活性剂、香精、颜料、防腐剂等。《化妆品接触性皮炎诊断标准与处理原则》（1997版），列出了化妆品皮炎的常见致敏原130余种，按其功能可分为以下几大类：（1）防腐剂占比30%-40%；（2）香料香精占比20%-30%；（3）表面活性剂占比10-15%。由此说明，化妆品中部分成分会造成皮肤敏感和刺激，引起皮肤泛红、水肿、干燥、粗糙、脱屑等不良症状。
基于此，针对上述化妆品原料导致的皮肤敏感问题，开发一种拮抗化妆品原料刺激的组合物是十分必要的。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种抗敏组合物，该组合物具有显著的拮抗化妆品刺激性的作用。
为此，本申请提供的技术方案如下：
本发明第一方面提供了一种抗敏组合物。
根据本发明，所述抗敏组合物包括以下重量份数的组分：桃胶1-30份、仙人掌0.1-10份、铁皮石斛0.1-10份。
根据本发明，所述抗敏组合物还包括粉剂载体。
根据本发明，所述粉剂载体包括糊精、环糊精、甲基环糊精、羟丙基环糊精、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基纤维素中的一种或几种。
根据本发明，所述抗敏组合物通过包括以下步骤的制备方法制备：
（1）将桃胶、仙人掌和铁皮石斛用水进行提取，得到初提液;
（2）将步骤（1）所述初提液过滤，得到滤液；
（3）将步骤（2）滤液进行浓缩，得到浓缩液；
（4）将步骤（3）浓缩液与所述粉剂载体混合，得固体物；
（5）将步骤（4）固体物进行干燥。
根据本发明，所述制备方法步骤（1）中桃胶、仙人掌和铁皮石斛的总重量与水的重量比为1:10-1:50（m/m）。
根据本发明，所述制备方法步骤（1）中，所述桃胶、仙人掌和铁皮石斛的总重量与水的重量比（料液比）可以是1:10（m/m）、1:11（m/m）、1:12（m/m）、1:13（m/m）、1:14（m/m）、1:15（m/m）、1:16（m/m）、1:17（m/m）、1:18（m/m）、1:20（m/m）、1:25（m/m）、1:27（m/m）、1:30（m/m）、1:32（m/m）、1:35（m/m）、1:36（m/m）、1:39（m/m）、1:40（m/m）、1:41（m/m）、1:42（m/m）、1:45（m/m）、1:48（m/m）、1:50（m/m），以及上述数值之间的点值。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（1）中，桃胶、仙人掌和铁皮石斛的总重量与水的重量比为1:20-1:40（m/m）。
根据本发明，所述制备方法步骤（1）中提取温度为50-90℃。
根据本发明，所述制备方法步骤（1）中，所述提取温度可以是50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃、61℃、62℃、65℃、68℃、69℃、70℃、75℃、78℃、80℃、85℃、88℃、90℃，以及上述数值之间的点值。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（1）中，所述提取温度为60℃-75℃。
根据本发明，所述制备方法步骤（1）中提取时间为0.5-5h。
根据本发明的优选的实施方式，所述制备方法步骤（1）中，所述提取时间可以是0.5 h、1 h、1.5 h 、2 h、2.5 h、3 h、3.5h、4.5h、5h，以及上述数值之间的点值。
根据本发明，所述制备方法步骤（2）中过滤为常规过滤方式。
根据本发明一些具体实施方式，所述制备方法步骤（2）中过滤方式为抽滤。
根据本发明一些具体实施方式，所述制备方法步骤（2）中抽滤纸板孔径为0.45μm。
根据本发明，所述制备方法步骤（3）中滤液浓缩倍数为1-15倍。
根据本发明，所述制备方法步骤（4）中滤液与粉剂载体的重量比为1:1-1:20（m/m）。
根据本发明一些具体实施方式，所述制备方法步骤（4）中滤液与粉剂载体的重量比为1:5-1:15（m/m）。
根据本发明，所述制备方法步骤（5）中，所述干燥方式为常规干燥方式。
根据本发明，所述制备方法步骤（5）中，所述干燥方式包括冷冻干燥、喷雾干燥或烘干。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述冷冻干燥的条件包括：温度为-80至-10℃，时间为8-32h。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述喷雾干燥的条件包括：进风温度100-170℃喷雾干燥，控制物料流速为5-50mL/min。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述烘干的条件包括：温度为90-150℃，烘干时间为12-50h。
根据本发明的一些实施方式，所述制备方法步骤（5）中，将干燥后的固体物粉碎过筛后进行灭菌。
根据本发明，所述制备方法步骤（5）中，所述灭菌方式为常规灭菌方式。
根据本发明的一些具体实施方式，所述所述制备方法步骤（5）中灭菌方式包括钴60灭菌、微波灭菌或干热灭菌。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述钴60灭菌条件包括：时间为1-8h。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述微波灭菌条件包括：微波功率100-700W，灭菌时间0.5-30min。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述干热灭菌条件包括：温度90-150℃，灭菌时间0.5-5h。
本发明第二方面提供了本发明第一方面所述抗敏组合物的制备方法。
根据本发明，所述抗敏组合物的制备方法包括以下步骤：
（1）将桃胶1-30份、仙人掌0.1-10份和铁皮石斛0.1-10份，按原料总重量与水的重量比1:10-1:50（m/m），在50-90℃条件下提取0.5-5h，得到初提液；
（2）将步骤（1）所述初提液进行过滤，得到滤液；
（3）将滤液进行减压浓缩1-15倍，得到浓缩液；
（4）将浓缩液与粉剂载体按1:1-1:20（m/m）重量比混合，得固体物；
（5）将步骤（4）混合后产生的固体物干燥。
根据本发明，所述制备方法步骤（1）中，所述桃胶、仙人掌和铁皮石斛的总重量与水的重量比（料液比）可以是1:10（m/m）、1:11（m/m）、1:12（m/m）、1:13（m/m）、1:14（m/m）、1:15（m/m）、1:16（m/m）、1:17（m/m）、1:18（m/m）、1:20（m/m）、1:25（m/m）、1:27（m/m）、1:30（m/m）、1:32（m/m）、1:35（m/m）、1:36（m/m）、1:39（m/m）、1:40（m/m）、1:41（m/m）、1:42（m/m）、1:45（m/m）、1:48（m/m）、1:50（m/m），以及上述数值之间的点值。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（1）中，桃胶、仙人掌和铁皮石斛的总重量与水的重量比为1:20-1:40（m/m）。
根据本发明，所述制备方法步骤（1）中，所述提取温度可以是50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃、61℃、62℃、65℃、68℃、69℃、70℃、75℃、78℃、80℃、85℃、88℃、90℃，以及上述数值之间的点值。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（1）中，所述提取温度为60℃-75℃。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（1）中，所述提取时间可以是0.5 h、1 h、1.5 h 、2 h、2.5 h、3 h、3.5h、4.5h、5h，以及上述数值之间的点值。
根据本发明，所述制备方法步骤（2）中过滤为常规过滤方式。
根据本发明一些具体实施方式，所述制备方法步骤（2）中过滤方式为抽滤。
根据本发明一些具体实施方式，所述制备方法步骤（2）中抽滤纸板孔径为0.45μm。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（4）中滤液与粉剂载体的重量比为1:5-1:15（m/m）。
根据本发明，所述制备方法步骤（4）中粉剂载体包括糊精、环糊精、甲基环糊精、羟丙基环糊精、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基纤维素中的一种或几种。
根据本发明，所述制备方法步骤（5）中，所述干燥方式为常规干燥方式。
根据本发明，所述制备方法步骤（5）中，所述干燥方式包括冷冻干燥、喷雾干燥或烘干。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述冷冻干燥的条件包括：温度为-80至-10℃，时间为8-32h。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述喷雾干燥的条件包括：进风温度100-170℃喷雾干燥，控制物料流速为5 -50mL/min。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述烘干的条件包括：90-150℃烘干12-50h。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，将干燥后的固体物粉碎过筛后进行灭菌。
根据本发明，所述制备方法步骤（5）中，所述灭菌方式为常规灭菌方式。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中灭菌方式包括钴60灭菌、微波灭菌或干热灭菌。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述钴60灭菌条件包括：时间为1-8h。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述微波灭菌条件包括：微波功率100-700W，灭菌时间0.5-30min。
根据本发明的一些具体实施方式，所述制备方法步骤（5）中，所述干热灭菌条件包括：温度90-150℃，灭菌时间0.5-5h。
本发明第三方面提供了本发明第一方面所述抗敏组合物和/或本发明第二方面所述抗敏组合物的制备方法制备得到的抗敏组合物在制备日用化妆品领域中的应用。
根据本发明，所述抗敏组合物在制备用于拮抗化妆品原料刺激性的产品中的应用。
根据本发明的一些具体实施方式，所述产品为护肤品、洗漱用品或发用产品。
根据本发明的一些具体实施方式，所述产品为面膜、膏霜、乳液、护肤水、洗面奶、洗发水、护发素或沐浴露等。
本发明的有益效果
本发明的抗敏组合物具有显著的拮抗化妆品刺激性的作用，能够拮抗化妆品原料导致的皮肤敏感问题。
本发明以通常作为研究皮肤屏障渗透和破坏模型中典型的阴离子表面活性剂SDS为代表物质，研究抗敏组合物拮抗化妆品刺激性的功效。功效评价实验证实，本发明抗敏组合物可显著抑制SDS引起的红细胞溶血，降低SDS致鸡胚绒毛尿囊膜刺激性。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明进行详细说明，但本发明并不受下述实施例限定。
本发明使用原料的来源见表1，如无特殊说明本发明所使用原料及仪器均为常规原料或仪器。
表1 使用原料来源
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实施例1
桃胶3g，仙人掌1g，铁皮石斛1g，按总原料：水=1:25（m/m）加入纯水125g，纯水提，80℃提取2h，过滤，滤液浓缩5倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
实施例2
桃胶30g，仙人掌10g，铁皮石斛10g，按总原料：水=1:25（m/m）加入纯水1250g，纯水提，80℃提取2h；过滤，滤液浓缩3倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
实施例3
桃胶1g，仙人掌0.1g，铁皮石斛0.1g，按总原料：水=1:50（m/m）加入纯水60g，纯水提，80℃提取2h；过滤，滤液浓缩11倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
实施例4
桃胶20g，仙人掌5g，铁皮石斛5g，按总原料：水=1:10（m/m）加入纯水300g，纯水提，80℃提取2h；过滤，滤液浓缩4倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
对比例1
桃胶0.1g，仙人掌1g，铁皮石斛1g，按总原料：水=1:25（m/m）加入纯水52.5g，纯水提，80℃提取2h；过滤，滤液浓缩5倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
对比例2
桃胶3g，按原料：水=1:25（m/m）加入纯水75g，纯水提，80℃提取2h；过滤，滤液浓缩5倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
对比例3
仙人掌1g，按原料：水=1:25（m/m）加入纯水25g，纯水提，80℃提取2h；过滤，滤液浓缩5倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
对比例4
铁皮石斛1g，按原料：水=1:25（m/m）加入纯水25g，纯水提，80℃提取2h；过滤，滤液浓缩5倍，得到浓缩液；按照浓缩液：环糊精=1:5（m/m）复配；复配后物质150℃喷雾干燥10h；钴60灭菌3h，得组合物。
试验例1：红细胞溶血试验
试验方法：
①红细胞悬液处理：
室温下，调整红细胞悬液中红细胞密度，在530nm波长下测定其吸光值，控制全溶血时红细胞OD值在1.3000-1.7000。
②红细胞耐受性
分别用体系浓度为20mg/L、30mg/L、40mg/L的SDS水溶液作为样品，检测红细胞溶血抑制率，并计算H50（溶血率为50%时，SDS的体系浓度）。要求H50在25.7-33.1mg/L范围内。
③检测受试物
A．取离心管，按照表2所示，依次加入受试样品（实施例1-4和对比例1-4）、PBS（磷酸盐缓冲溶液）、RBC悬液（红细胞悬液）、SDS，并混合均匀，样品体系终浓度即为测试浓度；
B．置于摇床，孵育10min后离心；
C．观察现象，并取上清液，测定OD530；
D．计算溶血抑制率。
表2 反应体系（μL）
添加试剂 受试样品 PBS RBC悬液 0.14%SDS
样品组+SDS 200 90 100 10
阴性对照组（SDS） 0 290 100 10
溶剂对照组 0 300 100 0
红细胞溶血抑制率的计算公式为：
红细胞溶血抑制率（%）=(OD_阴性对照组-OD_样品组)/OD_阴性对照组×100。
表3 不同样品对SDS致红细胞溶血率的影响
样品 红细胞溶血抑制率（ES）
0.02%实施例1+0.0035%SDS 83
0.02%实施例2+0.0035%SDS 86
0.02%实施例3+0.0035%SDS 72
0.02%实施例4+0.0035%SDS 78
0.02%对比例1+0.0035%SDS 31
0.02%对比例2+0.0035%SDS 27
0.02%对比例3+0.0035%SDS 25
0.02%对比例4+0.0035%SDS 21
由表3可知，本发明实施例1-4抗敏组合物对SDS引起的红细胞溶血抑制率均高于对比例1得到的组合物以及对比例2-4得到的单一提取物对SDS引起的红细胞溶血抑制率。通过SDS致红细胞溶血试验可知，本发明抗敏组合物对SDS引起的红细胞刺激具有良好的拮抗效果。
试验例2：鸡胚绒毛尿囊膜试验
鸡胚绒毛尿囊膜试验（HET-CAM Test）是欧洲替代方法认证中心（ECVAM）认证的测试产品刺激性的试验方法，是目前化妆品及化学品眼刺激性体外试验的主要研究方法之一，可用来评价多种物质的刺激性。
试验方法：
①鸡蛋选择：选用SPF级白莱杭鸡受精鸡蛋（北京梅利亚试验动物有限公司购买）。鸡蛋质量符合相关标准的要求，供应商应具有农业部门认可的《兽药生产、检验用SPF鸡（蛋）定点生产企业》资格。鸡蛋应新鲜、干净、完好，质量50g-60g。孵化至4日龄时，应照蛋检查，弃去未受精的鸡胚，破壳或薄壳鸡胚也不能使用。
②孵化条件：孵化温度37.5±0.5℃，相对湿度55-70%，转盘频率3-6次/h，翻蛋孵化3天，第4天开窗后，停止翻蛋。
③CAM制备：在鸡胚孵化4天时，用电磨机在鸡蛋小头端打孔，用10mL注射器抽取2-3mL蛋清，再用电磨机在鸡蛋中部略微靠近大头段开一个1cm×1cm小窗，暴露CAM，小心用镊子去除蛋壳和蛋壳膜，保证鸡胚尿囊膜不受损。此时应观察血管系统的结构和鸡胚的生长情况。用透明胶带封住小头端的孔和中部的小窗后，放入孵化箱继续培养。每天需检查鸡胚的生长情况，及时弃去死胚。10日龄鸡胚用于试验。撕去封住小窗的透明胶带，用镊子扩大小窗面积，增大观察视野，应小心操作不破坏蛋膜完整性。此时应再次观察血管系统的结构，并对其完整性和是否适宜用于试验做出判断。将特氟龙环放在CAM上准备添加样品。
④样品测试：每个受试物为一组，每组试验6只鸡胚，取40μl的受试物直接作用于特氟龙环内CAM表面。37℃作用30min后，观察绒毛尿囊膜毒性效应指标（如：出血、血管溶解和凝血等）的变化，并进行组合计算终点评分（ES）。受试物处理组终点评分与阴性对照的终点评分进行比较，样品的终点评分越低，提示供试品抗刺激效果越强。
测试样品：实施例1-4和对比例1-4制备的抗敏组合物。
表4 不同样品对SDS致鸡胚绒毛尿囊膜刺激分数的影响
样品组成 鸡胚绒毛尿囊膜刺激分数（ES） 刺激强度
0.1%SDS 16 强刺激性
0.5%实施例1+0.1 %SDS 4 轻度刺激
0.5%实施例2+0.1 %SDS 3 轻度刺激
0.5%实施例3+0.1 %SDS 6 轻度刺激
0.5%实施例4+0.1 %SDS 5 轻度刺激
0.5%对比例1+0.1 %SDS 13 中度刺激
0.5%对比例2+0.1 %SDS 14 中度刺激
0.5%对比例3+0.1 %SDS 13 中度刺激
0.5%对比例4+0.1 %SDS 15 中度刺激
生理盐水 0 无刺激
注：“ES≤12，为无/轻度刺激性；12＜ES＜16，为中度刺激性；ES≥16，为强刺激性”
由表4可知，与对比例1-4相比，本发明实施例1-4抗敏组合物能够更好的降低SDS致鸡胚绒毛尿囊膜刺激性。通过SDS致鸡胚绒毛尿囊膜刺激试验可知，该抗敏组合物对SDS引起的鸡胚绒毛尿囊膜刺激具有良好的拮抗效果。
以上实验说明，通过本发明抗刺激组合物可显著抑制SDS引起的红细胞溶血，降低SDS致鸡胚绒毛尿囊膜刺激性，降低了化妆品原料的刺激性，可有效拮抗因化妆品原料而导致的皮肤敏感问题。
本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定，对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无法对所有的实施方式予以穷举，凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (9)

1.一种抗敏组合物，其特征在于，包括以下重量份数的组分：桃胶1-30份、仙人掌0.1-10份、铁皮石斛0.1-10份。
2.根据权利要求1所述的抗敏组合物，其特征在于，所述抗敏组合物还包括粉剂载体，所述粉剂载体包括糊精、环糊精、甲基环糊精、羟丙基环糊精、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基纤维素中的一种或几种。
3.根据权利要求1或2所述的抗敏组合物，其特征在于，所述抗敏组合物通过包括以下步骤的制备方法制备：
（1）将桃胶、仙人掌和铁皮石斛用水进行提取，得到初提液;
（2）将步骤（1）所述初提液过滤，得到滤液；
（3）将步骤（2）滤液进行浓缩，得到浓缩液；
（4）将步骤（3）浓缩液与所述粉剂载体混合，得固体物；
（5）将步骤（4）固体物进行干燥。
4.根据权利要求3所述的抗敏组合物，其特征在于，所述制备方法步骤（1）中桃胶、仙人掌和铁皮石斛的总重量与水的重量比为1:10-1:50（m/m），提取温度为50-90℃，提取时间为0.5-5h。
5.根据权利要求3所述的抗敏组合物，其特征在于，所述制备方法步骤（3）中滤液浓缩倍数为1-15倍。
6.根据权利要求3所述的抗敏组合物，其特征在于，所述制备方法步骤（4）中浓缩液与粉剂载体的重量比为1:1-1:20（m/m）。
7.一种抗敏组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
（1）将桃胶1-30份、仙人掌0.1-10份和铁皮石斛0.1-10份，按原料总重量与水的重量比1:10-1:50（m/m），在50-90℃条件下提取0.5-5h，得到初提液；
（2）将步骤（1）所述初提液进行过滤，得到滤液；
（3）将滤液进行减压浓缩1-15倍，得到浓缩液；
（4）将浓缩液与粉剂载体按1:1-1:20（m/m）重量比混合，得固体物；
（5）将步骤（4）混合后产生的固体物干燥；
所述粉剂载体包括糊精、环糊精、甲基环糊精、羟丙基环糊精、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基纤维素中的一种或几种。
8.权利要求1-6中任一项所述的抗敏组合物或权利要求7所述的抗敏组合物的制备方法得到的抗敏组合物在制备用于拮抗化妆品刺激性的产品中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述产品为护肤品、洗漱用品或发用产品，例如为面膜、膏霜、乳液、护肤水、洗面奶、洗发水、护发素或沐浴露。
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