CN113973806A - 一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法 - Google Patents

一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113973806A
CN113973806A CN202111309438.4A CN202111309438A CN113973806A CN 113973806 A CN113973806 A CN 113973806A CN 202111309438 A CN202111309438 A CN 202111309438A CN 113973806 A CN113973806 A CN 113973806A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mesenchymal stem
umbilical cord
stem cells
cord mesenchymal
activity
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202111309438.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113973806B (zh
Inventor
陶顺领
李成
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kunming Time Muscle Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN202111309438.4A priority Critical patent/CN113973806B/zh
Publication of CN113973806A publication Critical patent/CN113973806A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113973806B publication Critical patent/CN113973806B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0221—Freeze-process protecting agents, i.e. substances protecting cells from effects of the physical process, e.g. cryoprotectants, osmolarity regulators like oncotic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，由以下原料组成：0.9%氯化钠注射液、磷酸氢二钾、姜辣素、11‑羰基‑β‑乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C。本发明保存液的成分安全明确，成分间协同作用，有效维持脐带间充质干细胞在4‑6℃的活性，为脐带间充质干细胞短时间的运输及保存提供条件。保存液中的姜辣素和11‑羰基‑β‑乳香酸配合使用有助于脐带间充质干细胞在4‑6℃保存时保持正常的细胞形态，维持细胞的生物特性，维持活性细胞的数量满足临床需求。保存液中的枯草菌脂肽钠有助于降低保存液中细胞的结团率，提高细胞活性。本发明还提供了一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，操作简单，为其科研及临床应用提供保障。

Description

一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法
技术领域
本发明涉及干细胞领域，尤其涉及一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法。
背景技术
间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、神经、内皮、心肌等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于各种病变引起的组织器官损伤的修复。
脐带间充质干细胞是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。流式细胞仪检测结果显示，贴壁细胞均表达CD29、CD44，不表达造血细胞表型CD45、CD34、CD14和内皮细胞表型CD31，具有和羊膜、骨髓、及脂肪组织来源的间充质干细胞相同的表面抗原。
脐带间充质干细胞具有多向分化潜能，可向多个方向进行分化。研究发现从人脐带中分离出脐带间充质干细胞，无论细胞含量、增殖能力还是分化能力均优于骨髓间充质干细胞，免疫原性比骨髓间充质干细胞低，并且具有取材方便，无伦理学争议等优点，因此越来越受到关注。
目前，人脐带间充质干细胞在科研和临床的应用上还存在一些问题，如运输和临时保存不便等。脐带间充质干细胞脱离培养条件后在常温下很快死亡变质，非培养状态下一般冻存于液氮罐中长期保存，少量长途运输的成本非常高，这大大限制了脐带间充质干细胞的临床应用。另外，在临床应用中，人脐带间充质干细胞制剂需要完成无菌、活性等质量检验后才能注射到人体，这些检验需要等待一定时间才能获得结果，因此在此期间合适的保存液来保证脐带间充质干细胞的活性是临床应用的基础。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，可在4-6℃下实现脐带间充质干细胞的短时间保存。
本发明的目的之二在于提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法。
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，由以下原料组成：0.9%氯化钠注射液、磷酸氢二钾、姜辣素、11-羰基-β-乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C。
进一步地，所述维持脐带间充质干细胞活性的保存液由以下重量份的原料组成：0.9%氯化钠注射液80-90份、磷酸氢二钾1-5份、姜辣素1-3份、11-羰基-β-乳香酸0.5-1.5份、枯草菌脂肽钠0.3-0.8份、维生素C5-10份。
进一步地，所述维持脐带间充质干细胞活性的保存液由以下重量份的原料组成：0.9%氯化钠注射液85份、磷酸氢二钾3份、姜辣素2.5份、11-羰基-β-乳香酸1份、枯草菌脂肽钠0.5份、维生素C7.5份。
本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，采用上述保存液进行保存。
上述维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，包括以下步骤：
（1）向0.9%氯化钠注射液中加入磷酸氢二钾、姜辣素、11-羰基-β-乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C，混合均匀，过滤除菌；
（2）将步骤（1）的保存液放在4-6℃预冷后加入脐带间充质干细胞，继续在4-6℃保存。
进一步地，步骤（1）中将混合后的溶液用0.22µm滤膜过滤除菌。
进一步地，所述脐带间充质干细胞为传代培养得到的细胞。
进一步地，步骤（2）中脐带间充质干细胞在保存液中的浓度为2-4.5×106个/mL。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
1、本发明提供了一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，保存液的成分安全明确，成分间协同作用，有效维持脐带间充质干细胞在4-6℃的活性，为脐带间充质干细胞短时间的运输及保存提供条件。
2、本发明保存液中的姜辣素和11-羰基-β-乳香酸配合使用有助于脐带间充质干细胞在4-6℃保存时保持正常的细胞形态，维持细胞的生物特性，此时细胞处于低活性状态，即能避免细胞死亡，又能保证细胞在合适的条件下快速复苏，维持活性细胞的数量满足临床需求。
3、本发明的保存液中还添加枯草菌脂肽钠，有助于降低保存液中细胞的结团率，提高细胞活性。
4、本发明还提供了一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，操作简单，方便脐带间充质干细胞的保存和运输，为其科研及临床应用提供保障。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
实施例1至3中保存的脐带间充质干细胞通过以下方法制备得到：
（1）取足月健康胎儿脐带置于无菌培养皿中，用手术间剪成2-5cm的小段，用PBS清洗至无血液残留；
（2）将清洗后的脐带小段的脐动脉和脐静脉剥离，将脐带沃顿胶剪成1-2mm的小块，平铺至T25培养瓶底部；
（3）向步骤（2）的培养瓶中加入添加10%FBS和血清白蛋白的DMEM/F12培养基中，在37℃，5%CO2的培养箱中培养，待组织块周围的细胞生长至80-90%融合时去除组织块，用0.25%胰酶消化，将消化后的细胞作为P0代细胞按照1:3的比例进行传代培养，传代培养的细胞用于实施例1至3的保存实验中。
实施例1
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，由以下重量份的原料组成：0.9%氯化钠注射液85份、磷酸氢二钾3份、姜辣素2.5份、11-羰基-β-乳香酸1份、枯草菌脂肽钠0.5份、维生素C 7.5份。
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，包括以下步骤：
（1）向0.9%氯化钠注射液中加入磷酸氢二钾、姜辣素、11-羰基-β-乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C，混合均匀，用0.22µm滤膜过滤除菌；
（2）将步骤（1）的保存液放在4℃预冷后加入传代培养得到P3代脐带间充质干细胞，分装在细胞冻存袋中，细胞在保存液中的浓度为3×106个/mL，继续在4℃保存。
实施例2
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，由以下重量份的原料组成：0.9%氯化钠注射液80份、磷酸氢二钾1份、姜辣素1份、11-羰基-β-乳香酸0.5份、枯草菌脂肽钠0.3份、维生素C 5份。
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，包括以下步骤：
（1）向0.9%氯化钠注射液中加入磷酸氢二钾、姜辣素、11-羰基-β-乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C，混合均匀，用0.22µm滤膜过滤除菌；
（2）将步骤（1）的保存液放在6℃预冷后加入传代培养得到P5代脐带间充质干细胞，分装在细胞冻存袋中，细胞在保存液中的浓度为2×106个/mL，继续在6℃保存。
实施例3
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，由以下重量份的原料组成：0.9%氯化钠注射液90份、磷酸氢二钾5份、姜辣素3份、11-羰基-β-乳香酸1.5份、枯草菌脂肽钠0.8份、维生素C 10份。
一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，包括以下步骤：
（1）向0.9%氯化钠注射液中加入磷酸氢二钾、姜辣素、11-羰基-β-乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C，混合均匀，用0.22µm滤膜过滤除菌；
（2）将步骤（1）的保存液放在4℃预冷后加入传代培养得到P8代脐带间充质干细胞，分装在细胞冻存袋中，细胞在保存液中的浓度为4.5×106个/mL，继续在6℃保存。
对比例1
对比例1提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，和实施例1的区别为：省去姜辣素，其余均和实施例1相同。
对比例2
对比例2提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，和实施例1的区别为：将姜辣素替换为姜黄素，其余均和实施例1相同。
对比例3
对比例3提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，和实施例1的区别为：省去11-羰基-β-乳香酸，其余均和实施例1相同。
对比例4
对比例4提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，和实施例1的区别为：省去11-羰基-β-乳香酸，将姜辣素的用量调整为3.5份，其余均和实施例1相同。
对比例5
对比例5提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，和实施例1的区别为：省去姜辣素，将11-羰基-β-乳香酸的用量调整为3.5份，其余均和实施例1相同。
对比例6
对比例6提供一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，和实施例1的区别为：省去枯草菌脂肽钠，其余均和实施例1相同。
将实施例1至3，对比例1至6中保存的细胞分别在0h、24h、48h、72h取样，采用0.4%台盼蓝染色法统计细胞活率，结果如表1所示。
表1
样品 0h细胞活率 24h细胞活率 48h细胞活率 72h细胞活率
实施例1 98.19% 95.36% 91.23% 86.78%
实施例2 97.84% 94.72% 90.46% 85.08%
实施例3 98.04% 95.14% 91.11% 86.44%
对比例1 97.47% 85.22% 71.61% 60.23%
对比例2 97.61% 76.27% 58.34% 32.79%
对比例3 98.05% 88.45% 72.77% 61.29%
对比例4 98.15% 77.67% 60.04% 38.57%
对比例5 97.26% 82.06% 65.73% 46.91%
对比例6 97.32% 89.81% 78.24% 67.87%
由表1可以看出，实施例1至3中的脐带间充质干细胞在保存72h后细胞的活率在85%以上，对比例1至6中细胞活率和实施例1至3相比下降显著。
对比例1至2中分别省去了姜辣素或者将姜辣素替换为姜黄素，其中省去姜辣素后在保存72h后细胞的活率下降至60.23%，将姜辣素替换为姜黄素后，细胞的活率仅为32.79%，说明姜黄素在4℃下对保持脐带间充质干细胞活性效果有限，明显不及姜辣素。
对比例3至5中分别省去11-羰基-β-乳香酸、或者在省去上述成分或者姜辣素后，调整剩余成分的用量，在保存效果上均不及实施例1，说明保存液中添加的辣素和11-羰基-β-乳香酸配合使用有助于脐带间充质干细胞在4-6℃保存时保持正常的细胞形态，维持细胞的生物特性，此时细胞处于低活性状态，即能避免细胞死亡，又能保证细胞在合适的条件下快速复苏，维持活性细胞的数量满足临床需求。
对比例6中省去了枯草菌脂肽钠，细胞的活率也有一定程度的下降，这是因为保存液中的枯草菌脂肽钠，有助于降低保存液中细胞的结团率，提高细胞活性。
将实施例1和对比例6中的保存液在0h、24h、48h、72h取样1mL，加入0.6mL0.4%台盼蓝轻轻混匀，采用Countstar全自动细胞计数仪检测细胞的结团率，结果如表2所示。
表2
样品 0h细胞结团率 24h细胞结团率 48h细胞结团率 72h细胞结团率
实施例1 0 0.04% 0.13% 0.31%
对比例6 0.08% 0.27% 0.39% 0.54%
由表2可以看出，对比例6中省去了枯草菌脂肽钠，随着保存时间的延长，细胞的结团率增加高于实施例1，进而在一定程度上影响细胞的活性。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液，其特征在于，由以下原料组成：0.9%氯化钠注射液、磷酸氢二钾、姜辣素、11-羰基-β-乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C。
2.根据权利要求1所述维持脐带间充质干细胞活性的保存液，其特征在于，由以下重量份的原料组成：0.9%氯化钠注射液80-90份、磷酸氢二钾1-5份、姜辣素1-3份、11-羰基-β-乳香酸0.5-1.5份、枯草菌脂肽钠0.3-0.8份、维生素C5-10份。
3.根据权利要求2所述维持脐带间充质干细胞活性的保存液，其特征在于，由以下重量份的原料组成：0.9%氯化钠注射液85份、磷酸氢二钾3份、姜辣素2.5份、11-羰基-β-乳香酸1份、枯草菌脂肽钠0.5份、维生素C7.5份。
4.一种维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，其特征在于，采用权利要求1至3任一项所述的保存液进行保存。
5.根据权利要求4所述维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）向0.9%氯化钠注射液中加入磷酸氢二钾、姜辣素、11-羰基-β-乳香酸、枯草菌脂肽钠、维生素C，混合均匀，过滤除菌；
（2）将步骤（1）的保存液放在4-6℃预冷后加入脐带间充质干细胞，继续在4-6℃保存。
6.根据权利要求5所述维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，其特征在于，步骤（1）中将混合后的溶液用0.22µm滤膜过滤除菌。
7.根据权利要求5所述维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，其特征在于，所述脐带间充质干细胞为传代培养得到的细胞。
8.根据权利要求7所述维持脐带间充质干细胞活性的保存方法，其特征在于，步骤（2）中脐带间充质干细胞在保存液中的浓度为2-4.5×106个/mL。
CN202111309438.4A 2021-11-06 2021-11-06 一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法 Active CN113973806B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111309438.4A CN113973806B (zh) 2021-11-06 2021-11-06 一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111309438.4A CN113973806B (zh) 2021-11-06 2021-11-06 一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113973806A true CN113973806A (zh) 2022-01-28
CN113973806B CN113973806B (zh) 2022-08-02

Family

ID=79746911

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111309438.4A Active CN113973806B (zh) 2021-11-06 2021-11-06 一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113973806B (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105284787A (zh) * 2015-10-23 2016-02-03 深圳爱生再生医学科技有限公司 骨髓间充质干细胞的保存试剂及其应用
US20160228394A1 (en) * 2013-09-30 2016-08-11 Calscience International Ltd Compositions Comprising A Conjugate of Quinic Acid Wth Caffeic Acid, Cosmetic And Therapeutic Uses
CN108990966A (zh) * 2018-08-24 2018-12-14 上海中溢精准医疗科技有限公司 一种脐带间充质干细胞运输保护液及其保护方法
CN110622956A (zh) * 2019-09-27 2019-12-31 广州南医大生物工程有限公司 一种脐带间充质干细胞保存液

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160228394A1 (en) * 2013-09-30 2016-08-11 Calscience International Ltd Compositions Comprising A Conjugate of Quinic Acid Wth Caffeic Acid, Cosmetic And Therapeutic Uses
CN105284787A (zh) * 2015-10-23 2016-02-03 深圳爱生再生医学科技有限公司 骨髓间充质干细胞的保存试剂及其应用
CN108990966A (zh) * 2018-08-24 2018-12-14 上海中溢精准医疗科技有限公司 一种脐带间充质干细胞运输保护液及其保护方法
CN110622956A (zh) * 2019-09-27 2019-12-31 广州南医大生物工程有限公司 一种脐带间充质干细胞保存液

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘斌等: "6-姜酚对MC3T3-E1成骨细胞增殖及分化的影响", 《中国生化药物杂志》 *
邹清青等: "具有环状肽结构的生物表面活性剂――枯草菌脂肽钠", 《中国洗涤用品工业》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113973806B (zh) 2022-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100908481B1 (ko) 중간엽 줄기세포 배양 배지 및 이를 이용한 중간엽줄기세포의 배양 방법
EP2504426B1 (en) Methods of preparing mesenchymal stem cells, compositions and kit thereof
CN103070161B (zh) 一种脂肪间充质干细胞冻存液及冻存方法
CN106982821A (zh) 脐带间充质干细胞临床冻存保护液组合物及其用途
CN105132370A (zh) 一种临床级别脂肪干细胞的制备和储存方法
CN108184818B (zh) 一种人胎盘间充质干细胞悬液保护剂
CN111621476B (zh) 一种用于间充质干细胞的无血清培养基及其制备方法
CN110684722A (zh) 来源于胎盘绒毛膜板组织的间充质干细胞制备方法
US20050059152A1 (en) In vitro culture of mesenchymal stem cells (MSC) and a process for the preparation thereof for therapeutic use
CN113736729B (zh) 组合物及含有其的干细胞无血清培养基及干细胞培养方法
CN113564111B (zh) 一种低氧培养脐带来源间充质干细胞的方法
JP2022501322A (ja) 機能的な間葉系幹細胞の富化集団を得る方法、それによって得られる細胞、およびその細胞を含む組成物
CN110622956A (zh) 一种脐带间充质干细胞保存液
CN105165803A (zh) 一种胎盘羊膜间充质干细胞的冻存保护液及冻存方法
CN110946129A (zh) 细胞复苏后高活率冻存液
CN104531617A (zh) 一种树突状细胞的制备方法、所得树突状细胞
CN110800733A (zh) 一种脐带间充质干细胞用冻存液及试剂盒
CN111346051A (zh) 一种用于治疗脑梗死的脐带间充质干细胞注射液制备方法
CN109825469A (zh) 一种促进人源脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的诱导方法
CN106614524B (zh) 一种间充质干细胞的保存液以及保存方法
CN113151165B (zh) 一种人脐带间充质干细胞扩增用培养基及培养方法
CN113287603B (zh) 一种生物样本保存液及其制备方法与应用
CN112195151B (zh) 一种牙髓间充质干细胞复苏培养液、制备方法及复苏培养方法
CN113201489A (zh) 一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法
CN113973806B (zh) 一种维持脐带间充质干细胞活性的保存液及保存方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20220708

Address after: 5 / F, cell industry cluster innovation park, No. 101 Keyuan Road, high tech Zone, Kunming, Yunnan 650000

Applicant after: Kunming time muscle Biotechnology Co.,Ltd.

Address before: 450000 No. r08-68, floor 1, unit 2, building 7, Zhongyuan advertising industrial park, No. 53, science Avenue, high tech Industrial Development Zone, Zhengzhou, Henan Province

Applicant before: Tao Shunling

TA01 Transfer of patent application right
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant