CN113519722A - 壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用 - Google Patents

壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用，具体地，包括：在提高南美白对虾体内硒含量中的应用，在促进南美白对虾生长中的应用，在提高南美白对虾存活率中的应用，在提高南美白对虾体内氨基酸含量中的应用；在制备南美白对虾饲料中的应用。所述壳寡糖硒是壳寡糖与亚硒酸螯合形成的壳寡糖硒配合物。具体应用时，向南美白对虾饲喂壳寡糖硒。本发明还公开了一种南美白对虾饲料，由南美白对虾基础饲料和壳寡糖硒组成，其中，壳寡糖硒的添加量为0.3％～0.8％。本发明通过实验研究发现壳寡糖硒可显著促进南美白对虾的生长(体长，体重)，提升其质量品质(含硒量、氨基酸含量)，具有良好的推广应用前景。

Description

壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用
技术领域
本发明涉及壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用，属于水产配合饲料添加剂技术领域。
背景技术
壳寡糖是壳聚糖经水解之后所得的寡糖类化合物，具有水溶性好、生物活性高、易吸收利用等优点，在功能食品、功能饲料等领域有着广泛的应用前景。但根据水解方式的不同，如使用不同的水解条件或不同的水解酶，壳聚糖可被水解成为不同聚合度的壳寡糖，聚合度不同的壳寡糖，可能具有不同的功能活性，使壳聚糖具有开发利用的巨大潜力。
硒是一种动物体必需的营养元素，对于动物的生长、机体能力提升等方面具有重要作用。硒的存在有游离态和螯合态等多种形式，不同的存在形式会显著影响硒的吸收与利用。壳聚糖硒、壳寡糖硒在现有技术中均已有报道，如CN 109504722 A公开了一种淀粉酶水解制备壳寡糖螯合硒的方法，并提及壳寡糖螯合硒能通过作物叶片吸收，提高果蔬中硒含量同时避免无机硒的毒性，对高品质农业发展具有显著作用。但现有技术中未见壳寡糖硒在水产养殖中的报道。
发明内容
针对上述现有技术，本发明提供了壳寡糖硒的一种新用途——在南美白对虾养殖中的应用。本发明还提供了一种含壳寡糖硒的南美白对虾饲料。本发明还提供了一种具有特殊活性的壳寡糖、壳寡糖硒。
本发明是通过以下技术方案实现的：
壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用。
进一步地，壳寡糖硒在提高南美白对虾体内硒含量中的应用，和/或：在促进南美白对虾生长中的应用，和/或：在提高南美白对虾存活率中的应用，和/或：在提高南美白对虾体内氨基酸含量中的应用；和/或：在制备南美白对虾饲料中的应用。
进一步地，在提高南美白对虾体内谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸和/或甘氨酸含量中的应用。
进一步地，具体应用时，向南美白对虾饲喂壳寡糖硒。
所述壳寡糖硒，是指壳寡糖与亚硒酸螯合形成的壳寡糖硒配合物，可通过壳寡糖与亚硒酸盐(比如亚硒酸钠)反应得到。
所述壳寡糖，是壳聚糖经壳聚糖酶水解得到的产物。所述壳聚糖酶，优选SEQ IDNO:2所示的壳聚糖酶，其来源于枯草芽孢杆菌斯氏亚种(Bacillus spizizenii)。
进一步地，所述壳聚糖水解的具体方式为：将壳聚糖溶解于醋酸溶液中，加入壳聚糖酶进行水解；水解后，离心取上清，超滤膜脱盐后冻干，即得壳寡糖。
进一步地，所述醋酸溶液的浓度优选3％(质量体积比，单位g/ml)；所述壳聚糖的浓度优选10％(质量体积比，单位g/ml)；所述水解的条件优选为：温度27～32℃，时间3～8小时。
进一步地，所述壳寡糖硒可通过以下方法制备得到：将壳寡糖与亚硒酸钠置于甲醇中反应，反应后冻干，即得壳寡糖硒。
一种南美白对虾饲料，由基础饲料和壳寡糖硒组成，其中，壳寡糖硒的添加量为0.3％～0.8％，优选0.5％。所述基础饲料，为现有技术中已有的常规的南美白对虾饲料，比如可以是福星生物有限公司生产的斑节对虾一号饲料。
一种壳聚糖酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，其来源于枯草芽孢杆菌斯氏亚种(Bacillus spizizenii)。
一种壳寡糖，是壳聚糖经上述SEQ ID NO:2所示的壳聚糖酶水解得到的壳寡糖；该壳寡糖具有特殊的、优异的功能活性，进而使得以该壳寡糖为原料制备的壳寡糖硒也具有特殊的、优异的功能活性，明显优于其它常规方法制备的壳寡糖硒。
本发明通过实验研究发现，给南美白对虾饲喂壳寡糖硒，可提高其体内硒含量；可促进其生长；可提高其存活率；可提高其氨基酸含量，提升品质。之所以能够取得这些有益效果，一方面是硒以螯合态(壳寡糖上含有氨基与羟基，其与亚硒酸根形成螯合态硒)的形式存在，可能更有利于硒的吸收与利用，更有利于发挥硒的功效；另一方面，壳寡糖与硒的联用可能产生了协同效应，产生了新的功效或使原有功效得到了显著的增强。
本发明通过实验研究发现壳寡糖硒可显著促进南美白对虾的生长，提升其质量品质，具有良好的推广应用前景。
本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。
附图说明：
图1：BS-chitosanase01的SDS-PAGE电泳检测。
图2：壳聚糖酶Csn-gly的SDS-PAGE电泳检测。
图3：壳寡糖硒1的质谱图，a、壳寡糖硒1(壳二糖)质谱鉴定；b、壳寡糖硒1(单糖)质谱鉴定。
图4：各实验组的体长对比示意图。
图5：各实验组的体重对比示意图。
图6：各实验组的含硒量对比示意图。
图7：各实验组的存活率对比示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。
下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法，检测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。
实施例1
根据枯草芽孢杆菌斯氏亚种(Bacillus spizizenii，ATCC6633)(购自中国微生物菌种保藏中心)测基因组测序数据，经过序列分析与比对，确定一段编码壳聚糖酶的基因序列，序列如SEQ ID NO.1所示，所编码壳聚糖酶命名为BS-chitosanase01，序列如SEQ IDNO.2所示。将此基因片段连接于重组载体pP43NMK(+)上，并将重组载体转化入枯草芽孢杆菌WB800中进行异源表达。将重组枯草芽孢杆菌进行发酵培养(37℃摇床培养24h)，发酵结束后将发酵液离心(8000rpm/min,10min)，收集离心上清液，使用超滤管(10KD)将发酵上清液进行浓缩，浓缩液即为壳聚糖酶酶液1(浓度30U/g)。
分别将BS-chitosanase01的不同浓度的咪唑洗脱液进行SDS-PAGE电泳检测，电泳结果如图1所示，1-6泳道分别是10Mm、20mM、50mM、100mM、150mM、200mM的咪唑洗脱液电泳检测结果。在第六泳道可以看到一条清晰且相对单一的条带，分子量大小约为30KDa，该结果与预测的分子量大小相一致。
实施例2
取壳聚糖原料(壳聚糖购自源叶生物，脱乙酰度90％)，搅拌溶解于3％醋酸溶液中(壳聚糖浓度1％wt)，加入实施例1制备的壳聚糖酶酶液1(30U/g)(每200ml的壳聚糖醋酸溶液加入10ml壳聚糖酶酶液)，30℃搅拌酶解5小时。酶解后将酶液离心(6000rpm,20min)，取上清液使用超滤管(1KD)进行脱盐，脱盐后溶液进行冻干，得到壳寡糖1。
取10g壳寡糖1，溶于60mL甲醇，加入10mL甲醇钠溶液(甲醇钠溶液的溶剂为甲醇，甲醇钠的浓度为20％，质量体积比，单位g/ml)，搅拌10min后静置，取上清液。上清液加入10mL亚硒酸钠溶液(亚硒酸钠溶液的溶剂为甲醇，亚硒酸钠的浓度为30％，质量体积比，单位g/ml)，50℃搅拌反应3小时，静置取上清，将上清液冻干后得到壳寡糖硒1，壳寡糖硒1的质谱图如图3a、b所示。由图可知，图3a为壳寡糖硒1(壳二糖)的质谱鉴定，m/z 514.7376的峰是壳二糖硒的质谱信号；图3b为壳寡糖硒1(单糖)的质谱鉴定，m/z 352.8189的峰是单糖硒的质谱信号。
实施例3
将壳聚糖酶Csn-gly(基因序列如SEQ ID NO.3所示；所对应的氨基酸序列如SEQID NO.4所示)(该壳聚糖酶来源于糖苷水解酶的GH5家族)(该酶记载在中国发明专利申请CN 111235131 A中)，连接于重组载体pP43NMK(+)上，并将重组载体转化入枯草芽孢杆菌WB800中进行异源表达。将重组枯草芽孢杆菌进行发酵培养，发酵结束后将发酵液离心，收集上清液，使用超滤膜将发酵上清液进行浓缩，浓缩液即为壳聚糖酶酶液2。壳聚糖酶纯化后的纯酶SDS-PAGE电泳结果如图2所示，M为标准蛋白Marker；1为粗酶蛋白；2为纯化后的壳聚糖酶蛋白。该结果与预测的分子量大小相一致。发酵培养条件、离心条件、超滤膜等，均同实施例1。
取壳聚糖原料1kg，搅拌溶解于3％醋酸溶液中(壳聚糖浓度1％wt)，加入上述制备的壳聚糖酶酶液2(每200ml的壳聚糖醋酸溶液加入10ml壳聚糖酶酶液)，30℃搅拌酶解5h。酶解后将酶液离心，取上清液使用超滤膜进行脱盐，脱盐后溶液进行冻干，得到壳寡糖2。具体参数条件同实施例2。
取10g壳寡糖2，溶于60mL甲醇溶液，加入10mL 20％甲醇溶解的甲醇钠溶液，搅拌10min后静置，取上清液。上清液加入10mL 30％甲醇溶解的亚硒酸钠溶液，50℃搅拌反应3h，静置取上清，将上清液冻干后得到壳寡糖硒2。具体参数条件同实施例2。
实施例4
取10g购自武汉益中生物科技公司的饲料级壳寡糖，命名为壳寡糖3，溶于60mL甲醇溶液中，加入10mL 20％甲醇溶解的甲醇钠溶液，搅拌10min后静置，取上清液。上清液加入10mL 30％甲醇溶解的亚硒酸钠溶液，50℃搅拌反应3h，静置取上清，将上清液冻干后得到壳寡糖硒3。具体参数条件同实施例2。
实验：壳寡糖硒对南美白对虾的促生长实验
在恒温养殖桶中进行南美白对虾养殖实验，养殖水温为27±3℃，实验分为对照组，壳寡糖1组，壳寡糖硒1组，壳寡糖硒2组，壳寡糖硒3组，在配合饲料(福星生物饲料有限公司斑节对虾一号饲料)中添加，添加量为0.5％wt，每组3个平行，每个平行为500只。实验开始前分别测量每组平行对虾的体长体重，共养殖3周。养殖周期结束后分别检测各组对虾的体长、体重、含硒量、存活率及氨基酸含量。
体长结果如图4所示，1是实验开始前测量的各组对虾的体长，2、3、4分别是养殖1周、养殖2周、养殖3周后分别测量的各组的体长。可见，每个养殖周内壳寡糖组、壳寡糖硒1组、壳寡糖硒2组、壳寡糖硒3组的对虾相比较对照组的对虾生长较快，体长值均比对照组高。而且，通过显著性差异计算和分析，每个养殖周内，各组的体长值之间均具有极显著差异(P＝7.07×10-7，P＜0.01)。其中，第3周养殖结束后，对照组、壳寡糖组、壳寡糖硒1组、壳寡糖硒2组、壳寡糖硒3组的体长分别是6.75cm、7.13cm、8.36cm、7.41cm、7.2cm。其中，壳寡糖硒1组的对虾体长值最大。
体重结果如图5所示，1是实验开始前测量的各组对虾的体重，2、3、4分别是养殖1周、2周、3周后分别测量的各组的体重。可见，每个养殖周内壳寡糖组、壳寡糖硒1组、壳寡糖硒2组、壳寡糖硒3组的体重值均高于对照组。通过显著性差异计算分析，每个养殖周内，各组的体重值之间均具有极显著差异(P＝5.12×10-6，P＜0.01)。此外，第三周养殖结束后，对照组、壳寡糖组、壳寡糖硒1组、壳寡糖硒2组、壳寡糖硒3组的体重分别是1.75g、1.86g、2.38g、1.99g、1.92g,其中，壳寡糖硒1组的对虾体重值最大。结果表明，壳寡糖硒1可以显著促进南美白对虾的生长。
每组的含硒量结果如图6所示，可见，壳寡糖硒1组的硒含量最高，为0.368mg/kg,其次是壳寡糖硒2组和壳寡糖硒3组，含硒量分别为0.325mg/kg、0.315mg/kg，对照组和壳寡糖组的含硒量分别为0.2mg/kg、0.198mg/kg。而且，通过显著性差异计算和分析，各组含硒量之间具有极显著差异(P＝7.68×10-12，P＜0.01)结果表明，壳寡糖硒1提高硒含量的效果最显著。
各组的存活率结果如图7所示，壳寡糖硒1组的存活率最高，为99.9％；壳寡糖组、壳寡糖硒2组、壳寡糖硒3组的存活率分别为92.2％、96.3％、94.2％；对照组的存活率最低，为89.21％；而且，通过显著性差异计算和分析，各组存活率之间具有极显著差异(P＝1.92×10-13，P＜0.01)结果表明，壳寡糖硒1提高南美白对虾存活率的效果显著高于其他组。
各组的氨基酸含量结果如表1所示，每组的谷氨酸含量最高，其次为天冬氨酸。对照组、壳寡糖、壳寡糖硒1、壳寡糖硒2、壳寡糖硒3浓度组的氨基酸总含量分别为17.159±0.42g/100g、17.953±0.39g/100g、21.711±1.03g/100g、19.288±0.5g/100g、18.667±0.5g/100g。其中必需氨基酸含量分别为6.444±0.13g/100g、6.813±0.19g/100g、7.834±0.24g/100g、6.532±0.15g/100g、6.446±0.14g/100g。其中，壳寡糖硒1浓度组所含的氨基酸总量和必需氨基酸总量最高，其次是壳寡糖硒2浓度组。
表1各组对虾的氨基酸含量
Figure BDA0003162415470000061
注：WTAA是氨基酸总量，WEAA是必需氨基酸总量，WNEAA是非必需氨基酸总量，WFAA是鲜味氨基酸总量。
由表1可知，对照组、壳寡糖、壳寡糖硒1、壳寡糖硒2、壳寡糖硒3浓度组的鲜味氨基酸总含量分别为6.859±0.18g/100g、7.027±0.13g/100g、8.849±0.38g/100g、7.674±0.21g/100g、7.26±0.2g/100g；其中壳寡糖硒1浓度组的鲜味氨基酸总含量最高，其次是壳寡糖硒2浓度组；谷氨酸和天冬氨酸为样品鲜味的特征氨基酸。结果显示，壳寡糖硒1浓度组的谷氨酸和天冬氨酸含量最高；呈甘味的特征氨基酸为甘氨酸和丙氨酸，从而使南美白对虾表现出明显的海产虾类的鲜美品质。结果显示壳寡糖硒1浓度组的甘氨酸和丙氨酸含量最高。
各组的氨基酸含量和比例有所差异，其中壳寡糖硒1浓度组对南美白对虾的氨基酸含量影响较大，各种氨基酸的含量最高。结果表明，壳寡糖硒1可以显著提高南美白对虾的氨基酸含量，从而提升对虾的养殖品质。
通过上述各实验的考察，可以发现，壳寡糖硒1组的效果，不仅明显优于对照组、壳寡糖组，还明显优于壳寡糖硒2组、壳寡糖硒3组，这说明：1、壳寡糖硒对南美白对虾的影响(体长、体重、含硒量、氨基酸含量等)，明显优于壳寡糖；2、本发明的壳寡糖硒1，对南美白对虾的影响，明显优于壳寡糖硒2、壳寡糖硒3，这说明本发明的壳寡糖硒1具有特殊的、优异的功能活性，该特殊的、优异的功能活性的根源在于壳寡糖(通过特定的壳寡糖酶水解壳聚糖所得)。
给本领域技术人员提供上述实施例，以完全公开和描述如何实施和使用所主张的实施方案，而不是用于限制本文公开的范围。对于本领域技术人员而言显而易见的修饰将在所附权利要求的范围内。
序列表
<110> 中国海洋大学
<120> 壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用
<141> 2021-07-14
<160> 4
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 816
<212> DNA
<213> Bacillus spizizenii
<400> 1
atgaaaatca gtatgcaaaa agcagcgatc tcattacttg ttttcactat gttttttacc 60
ctgatgatga gcgaaacggt ttttgcggcg ggactgaata aagatcaaaa gcgccgggcg 120
gaacagctga caagtatctt tgaaaacggc acaacggaga tccaatatgg atatgtagag 180
caattggatg acgggcgagg ttatacatgc ggacgggcag gctttacaac ggctaccggg 240
gatgcattgg aagtagtgga agtatacaca aaggcagttc cgaataataa actgaaaaag 300
tatctgcctg aattgcgccg tctggccaag gaagaaagcg atgatacaag caatctcaag 360
ggattcgctt ctgcctggaa gtcgcttgca aatgataagg aatttcgcgc cgctcaagac 420
aaagtaaatg accatttgta ttatcagcct gctatgaaac gatcggacaa tgccggacta 480
aaaacagcat tggctagagc tgtggtgtac gatacggtta ttcaacatgg cgatggtgat 540
gaccctgact ctttttatgc cttgattaaa cgtacgaaca aaaaagcggg cggatcacct 600
aaagacggaa tagacgagaa gaagtggtta aataaattct tggacgtacg ctatgacgat 660
ctgatgaatc cggccaatca tgacacccgt gacgaatgga gagaatcagt tgcccgtgtg 720
gacgtgcttc gatctatcgc caaggagaac aactacaatt taaacggacc gattcatgtt 780
cgttcaaacg agtacggtaa tttcgtaatc aaataa 816
<210> 2
<211> 271
<212> PRT
<213> Bacillus spizizenii
<400> 2
Met Lys Ile Ser Met Gln Lys Ala Ala Ile Ser Leu Leu Val Phe Thr
1 5 10 15
Met Phe Phe Thr Leu Met Met Ser Glu Thr Val Phe Ala Ala Gly Leu
20 25 30
Asn Lys Asp Gln Lys Arg Arg Ala Glu Gln Leu Thr Ser Ile Phe Glu
35 40 45
Asn Gly Thr Thr Glu Ile Gln Tyr Gly Tyr Val Glu Gln Leu Asp Asp
50 55 60
Gly Arg Gly Tyr Thr Cys Gly Arg Ala Gly Phe Thr Thr Ala Thr Gly
65 70 75 80
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85 90 95
Lys Leu Lys Lys Tyr Leu Pro Glu Leu Arg Arg Leu Ala Lys Glu Glu
100 105 110
Ser Asp Asp Thr Ser Asn Leu Lys Gly Phe Ala Ser Ala Trp Lys Ser
115 120 125
Leu Ala Asn Asp Lys Glu Phe Arg Ala Ala Gln Asp Lys Val Asn Asp
130 135 140
His Leu Tyr Tyr Gln Pro Ala Met Lys Arg Ser Asp Asn Ala Gly Leu
145 150 155 160
Lys Thr Ala Leu Ala Arg Ala Val Val Tyr Asp Thr Val Ile Gln His
165 170 175
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180 185 190
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225 230 235 240
Asp Val Leu Arg Ser Ile Ala Lys Glu Asn Asn Tyr Asn Leu Asn Gly
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Pro Ile His Val Arg Ser Asn Glu Tyr Gly Asn Phe Val Ile Lys
260 265 270
<210> 3
<211> 1104
<212> DNA
<213> Streptomyces bacillaris
<400> 3
atgcaccagc gccccactcc ccccacgtcc cccaccgaac ccacggccgc ccccacgacc 60
ggccggcgcc gcttcacccg taaggccctg ctcgccgctt ccgcgctcgg cgtggtcacc 120
gcgctcctga cccccgtcca ggccggagcc gcccccgctc ccgccgagcc cgccacggcc 180
agggccgcca ccccgctcgc ggccaacggc cagctccgcg tctgcggtct ccagctctgt 240
aacgcctcgg gccaggcgat cgccctcaac ggcatgagca cccacggcac ccagtggtac 300
gcccagtgcg tcaccgacgg gtccctgaac gccctcgccc aggactggcg cgccgacgtg 360
ctgcgtgtct ccacctacgt acaggaggga gggtacgaga ccgacccggc cggattcacc 420
gcgcgggcgc agaagttcat cgacgcggcg cacgcgcgcg ggatgtacgc ggtcatcgac 480
tggcacatgc tcacgccggg cgatccgaac gccaacctcg accgggcgaa gacgttcttc 540
accgcgatgg cgaagaggta caaggaccac ccgggcgtgc tctacgagat cgccaacgag 600
ccctcggggg tgagctggtc ggccatcaag tcctactccg agcagatcat cccggtgatc 660
cgggcgcagg acccggacgc ggtggtcctg gtcgggacgc gggcctggtc ctcgttcggg 720
gtgtcggagg gatcgaacga gtccgaggtc gtcaacaacc cggtccgcgc ctcgaacatc 780
atgtacacct tccacttcta cgcggcctcg caccgcgagg cgtatctcgc gacgctggac 840
cgggcctcgg accggctccc cgtcttcgtc accgagttcg ggacgcagaa ctacgcgggc 900
gagggcgcca acgacttcgc gatgtcgcag cgttacctcg acctgatgaa gcgcaagaag 960
atctcctgga ccaactggaa ctactccgac gaccaccgct ccggtgccgt cttcaagacc 1020
ggcacgtgca gcggcaccaa ctggaccggg accggggtcc tgaaggaggc cggggtctgg 1080
atccgcgagc gcatccgcca gtga 1104
<210> 4
<211> 367
<212> PRT
<213> Streptomyces bacillaris
<400> 4
Met His Gln Arg Pro Thr Pro Pro Thr Ser Pro Thr Glu Pro Thr Ala
1 5 10 15
Ala Pro Thr Thr Gly Arg Arg Arg Phe Thr Arg Lys Ala Leu Leu Ala
20 25 30
Ala Ser Ala Leu Gly Val Val Thr Ala Leu Leu Thr Pro Val Gln Ala
35 40 45
Gly Ala Ala Pro Ala Pro Ala Glu Pro Ala Thr Ala Arg Ala Ala Thr
50 55 60
Pro Leu Ala Ala Asn Gly Gln Leu Arg Val Cys Gly Leu Gln Leu Cys
65 70 75 80
Asn Ala Ser Gly Gln Ala Ile Ala Leu Asn Gly Met Ser Thr His Gly
85 90 95
Thr Gln Trp Tyr Ala Gln Cys Val Thr Asp Gly Ser Leu Asn Ala Leu
100 105 110
Ala Gln Asp Trp Arg Ala Asp Val Leu Arg Val Ser Thr Tyr Val Gln
115 120 125
Glu Gly Gly Tyr Glu Thr Asp Pro Ala Gly Phe Thr Ala Arg Ala Gln
130 135 140
Lys Phe Ile Asp Ala Ala His Ala Arg Gly Met Tyr Ala Val Ile Asp
145 150 155 160
Trp His Met Leu Thr Pro Gly Asp Pro Asn Ala Asn Leu Asp Arg Ala
165 170 175
Lys Thr Phe Phe Thr Ala Met Ala Lys Arg Tyr Lys Asp His Pro Gly
180 185 190
Val Leu Tyr Glu Ile Ala Asn Glu Pro Ser Gly Val Ser Trp Ser Ala
195 200 205
Ile Lys Ser Tyr Ser Glu Gln Ile Ile Pro Val Ile Arg Ala Gln Asp
210 215 220
Pro Asp Ala Val Val Leu Val Gly Thr Arg Ala Trp Ser Ser Phe Gly
225 230 235 240
Val Ser Glu Gly Ser Asn Glu Ser Glu Val Val Asn Asn Pro Val Arg
245 250 255
Ala Ser Asn Ile Met Tyr Thr Phe His Phe Tyr Ala Ala Ser His Arg
260 265 270
Glu Ala Tyr Leu Ala Thr Leu Asp Arg Ala Ser Asp Arg Leu Pro Val
275 280 285
Phe Val Thr Glu Phe Gly Thr Gln Asn Tyr Ala Gly Glu Gly Ala Asn
290 295 300
Asp Phe Ala Met Ser Gln Arg Tyr Leu Asp Leu Met Lys Arg Lys Lys
305 310 315 320
Ile Ser Trp Thr Asn Trp Asn Tyr Ser Asp Asp His Arg Ser Gly Ala
325 330 335
Val Phe Lys Thr Gly Thr Cys Ser Gly Thr Asn Trp Thr Gly Thr Gly
340 345 350
Val Leu Lys Glu Ala Gly Val Trp Ile Arg Glu Arg Ile Arg Gln
355 360 365

Claims (10)

1.壳寡糖硒在南美白对虾养殖中的应用；所述壳寡糖硒，是壳寡糖与亚硒酸螯合形成的壳寡糖硒配合物。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：壳寡糖硒在提高南美白对虾体内硒含量中的应用，和/或：在促进南美白对虾生长中的应用，和/或：在提高南美白对虾存活率中的应用，和/或：在提高南美白对虾体内氨基酸含量中的应用；和/或：在制备南美白对虾饲料中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述氨基酸为谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸和/或甘氨酸。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的应用，其特征在于：具体应用时，向南美白对虾饲喂壳寡糖硒。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述壳寡糖，是壳聚糖经壳聚糖酶水解得到的产物；所述壳聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述壳聚糖水解的具体方式为：将壳聚糖溶解于醋酸溶液中，加入壳聚糖酶进行水解；水解后，离心取上清，超滤膜脱盐后冻干，即得壳寡糖。
7.根据权利要求1或5或6所述的应用，其特征在于：所述壳寡糖硒是通过以下方法制备得到的：将壳寡糖与亚硒酸钠置于甲醇中反应，反应后冻干，即得壳寡糖硒。
8.一种南美白对虾饲料，其特征在于：由南美白对虾基础饲料和壳寡糖硒组成，其中，壳寡糖硒的添加量为0.3％～0.8％。
9.根据权利要求8所述的南美白对虾饲料，其特征在于：所述壳寡糖硒的添加量为0.5％。
10.根据权利要求8所述的南美白对虾饲料，其特征在于：所述壳寡糖硒是通过以下方法制备得到的：将壳寡糖与亚硒酸钠置于甲醇中反应，反应后冻干，即得壳寡糖硒；
所述壳寡糖，是壳聚糖经壳聚糖酶水解得到的产物；所述壳聚糖酶的氨基酸序列如SEQID NO:2所示。
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