CN113498779B - 一种运输细胞的试剂及方法 - Google Patents
一种运输细胞的试剂及方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113498779B CN113498779B CN202110922947.8A CN202110922947A CN113498779B CN 113498779 B CN113498779 B CN 113498779B CN 202110922947 A CN202110922947 A CN 202110922947A CN 113498779 B CN113498779 B CN 113498779B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cell
- cells
- reagent
- culture medium
- transporting
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 210000001912 transporting cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 87
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims abstract description 16
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 claims abstract description 8
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 12
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 claims description 11
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 claims description 10
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 8
- 238000010009 beating Methods 0.000 claims description 7
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 claims description 7
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 5
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 claims description 4
- 210000004024 hepatic stellate cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 claims description 4
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 claims description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 4
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 claims description 3
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 2
- 239000003292 glue Substances 0.000 claims description 2
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 claims 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 6
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000012832 cell culture technique Methods 0.000 description 1
- 230000004656 cell transport Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000030944 contact inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 238000012606 in vitro cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000003761 preservation solution Substances 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种运输细胞的试剂及方法，试剂由50%‑100%血清、0%‑50%细胞培养基、青霉素和链霉素组成，离体培养的细胞消化后，用该试剂制备成细胞悬液，在2‑30度的环境温度下长途运输，可保持80%以上的细胞活力。
Description
技术领域
本发明属于细胞生物学技术领域，具体涉及一种运输细胞的试剂及方法。
技术背景
体外细胞培养是指在体外模拟体内的生理环境，在无菌、适当温度、酸碱度和一定营养条件下，使哺乳动物细胞生长，繁殖并维持其结构和功能的一种方法。细胞培养技术广泛用于生物和医学研究领域。细胞经常需要从一个实验室运输到另一个实验室以满足全世界范围的各种研究需要，细胞运输过程当中的细胞所处的培养条件、环境温度、运输时间等对细胞的生理状态有很大影响。
目前，为保证细胞在运输过程中的活性，通常将细胞冷冻后用液氮或干冰进行转运，运输条件非常苛刻，必须保证运输全程处于低温状态，成本高昂，且运输过程中若细胞反复冻融，会影响细胞存活率。
此外，在对一些待移植器官或组织的保存、运输等过程中，也对细胞生存的介质提出了更高的要求，既要确保器官、组织或细胞的生存能力，又要最大限度的保留其原有的生物学活性，同时还要防止其被细菌等污染，防止其死亡。
关于细胞(尤其是贴壁培养的细胞)在悬浮状态下的简易运输及短期储存所采用的细胞运输保存液，一般由完全化学成分的细胞活性保存液等组成。例如公开号为CN108770836A、CN109090104A的中国专利申请中采用的细胞保存液中添加有pH缓冲液、多种渗透压稳定剂和多种氧自由基清除剂，还添加了细胞维持代谢所需的能量底物，其成分较为复杂，细胞活力维持3-5天不等。
传统的细胞运输方法包括冷冻储存运输和充液法，虽然在一定程度上维持了细胞的高存活率，但费时费力且成本高昂。冷冻储存运输采用特殊容器内盛液氮或干冰运输细胞，液氮只能短途运输，且造价高，长途运送无法保证安全。干冰在长途运输中常用，保存效果较好，但比较繁琐，影响因素较多，运输过程中发生包装破损，或运输时间较长、干冰挥发，导致细胞所处的环境温度变化，会严重影响细胞的活性。充液法是选择生长良好的细胞，细胞密度1/3-1/2瓶底，瓶中加满新鲜培养液，拧紧瓶盖，并用胶带密封后运输，该方法较为简单，无需特殊装置，可短途或长途常温运输细胞。但在充液时，培养瓶内不能留空气，否则运输过程中的震荡导致瓶内的气泡运动，对细胞有影响，T25培养瓶需要装100mL培养基，价格较贵，且导致浪费。而且，细胞在运输过程中生长，运输时间过长，细胞在瓶底生长，细胞密度过高达到接触抑制，会导致细胞老化。
发明内容
为了解决现有技术中细胞运输费时费力且成本高昂的问题，本发明提供了一种运输细胞的试剂及细胞运输的方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种运输细胞的试剂，由50％-100％(体积占比)血清、0％-50％(体积占比)细胞培养基、青霉素和链霉素组成。
优选的，上述血清为牛血清或马血清。
优选的，上述血清为胎牛血清(FBS)或小牛血清。
所述细胞培养基采用DMEM、MEM、DMEM/F12等常规细胞培养基。
本发明还提供了一种运输细胞的方法，包括以下步骤：
步骤1，细胞培养于培养瓶或培养皿中，细胞融合度90％-100％，细胞密度为2-10×106/25cm2，每25cm2培养面积加入1mL胰酶消化细胞，37℃，1-3分钟，待细胞变圆分散，按2-5:1比例加入完全培养基，吹打细胞；
步骤2，将细胞悬液转入离心管，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；
步骤3，在离心管中加入PBS，吹打均匀，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；
步骤4，每25cm2培养面积的细胞沉淀加入0.5mL前述运输细胞的试剂，吹打均匀，转移至细胞冻存管中，每只冻存管加入1mL细胞悬液；
步骤5，封口胶封口细胞冻存管，运输细胞；
步骤6，培养瓶或培养皿中加入含100U/mL青霉素及100μg/mL链霉素的细胞培养基，打开细胞冻存管，直接将细胞悬液加入细胞培养基中，直到细胞培养基中血清终浓度为10％。
进一步地，上述一种运输细胞的方法，细胞悬液中的细胞密度为2-10×106/mL。
进一步地，上述一种运输细胞的方法，步骤3重复操作2-3次。
进一步地，上述一种运输细胞的方法，步骤4中运输细胞的温度为2℃-30℃，优选为2℃-8℃。
进一步地，上述一种运输细胞的方法，步骤4中运输细胞的温度为2℃-16℃，时间为10天以内。
进一步地，上述一种运输细胞的方法，步骤4中运输细胞的时间为2℃-30℃，时间为3天以内。
进一步地，上述一种运输细胞的方法，步骤7中检测的细胞活率大于80％。
有益效果：本发明提供了一种用于运输细胞的试剂，采用它在2℃-30℃下运输3天或2℃-16℃下运输10天，细胞存活率高达80％以上，且该试剂成本低，配置方便；本发明还提供了一种运输细胞的方法，无需特殊装置，细胞直接悬浮在试剂中，小巧便于携带，不怕震荡，在环境温度下可长途运输，能够保持高水平的生存能力和恢复能力；本发明为细胞运输提供了一种新的途径，成本低，效果好，简单方便，适合各实验室推广应用。
说明书附图
图1为实施例中143B人骨肉瘤细胞株在50％FBS+50％DMEM试剂，12℃-30℃的条件下运输7天后细胞悬液的台盼蓝染色显微图；
图2为实施例中C3H10小鼠骨髓间充质干细胞株在75％FBS+25％DMEM试剂，8℃-16℃条件下运输3天后细胞悬液的台盼蓝染色显微图；
图3为LX-2人肝星状细胞株在100％FBS试剂，2℃-8℃的条件下运输10天后细胞悬液的台盼蓝染色。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是，以下实施例只用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述发明内容对本发明作出一些非本质的改进和调整。
实施例
1、培养细胞：
将C3H10小鼠骨髓间充质干细胞株、143B人骨肉瘤细胞株、LX-2人肝星状细胞株分别培养于培养瓶或培养皿(500cm2培养面积)中3-5天，细胞融合度90％-100％，细胞密度分别为2-4×106/25cm2、7-10×106/25cm2、5-6×106/25cm2。
2、制备细胞悬液：
每25cm2培养面积加入1mL胰酶消化细胞，37℃，消化时间1-3分钟，待细胞变圆分散，按2-5:1比例加入完全培养基，吹打细胞，得细胞悬液。
将细胞悬液平均分为5份，转入离心管，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；在离心管中加入PBS，吹打均匀，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；按每25cm2培养面积的细胞沉淀1mL的剂量，分别加入含100％、75％、50％、25％或0％FBS的DMEM或DMEM/F12培养基(培养基含有终浓度100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素，吹打均匀，转移至细胞冻存管中，每只冻存管加入1mL细胞悬液，不同运输试剂的细胞悬液各4份。
3、细胞运输：将培养后的细胞分别放置于2℃-8℃、8℃-16℃、13℃-30℃、37℃的环境中进行运输。
其中：
2℃-8℃：冷室，每天20次左右开关门拿取试剂，平均温度2-8℃，摇床低速10次/天，每次2分钟；
8℃-16℃：重庆市区快递，2-3月环境温度8℃-16℃；
13℃-30℃：重庆至广州往返快递，2-3月环境温度13℃-30℃；
37℃：恒温摇床37℃，低速10次/天，每次2分钟。
4、细胞培养：培养瓶或培养皿中加入含100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的DMEM或者DMEM/F12培养基，打开细胞冻存管，直接将细胞悬液加入细胞培养基中，补充血清至终浓度为10％。
5、检测细胞活率：取20μl细胞悬液，稀释至适应浓度(1-2×106/mL)的细胞悬液，与0.4％台盼蓝染液9:1混合均匀，3分钟内计数活细胞和死细胞，计算细胞活率(％)＝活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100％。
结论：细胞活率与环境温度、运输时间的关系密切。同一条件下，温度2℃-8℃与8℃-16℃之间无显著差异，温度越高，对细胞活率的影响越大，37℃对细胞活力有非常显著的抑制作用；运输时间越长，细胞活率下降越明显(表1-3和附图1-3，*，p<0.05，**，p<0.01)；同一温度及运输时间下，100％、75％、50％FBS组间无差异，血清浓度越高，对细胞的保护效果越显著(表1-3和附图1-3，#，p<0.05，##，p<0.01)。
表1C3H10小鼠骨髓间充质干细胞株D3
*，p<0.05，**，p<0.01，与同列2℃-8℃比较
#，p<0.05，##，p<0.01，与同行100％FBS比较
表2 143B人骨肉瘤细胞株D7
*，p<0.05，**，p<0.01，与同列2℃-8℃比较
#，p<0.05，##，p<0.01，与同行100％FBS比较
表3LX-2人肝星状细胞株D10
*，p<0.05，**，p<0.01，与同列2℃-8℃比较
#，p<0.05，##，p<0.01，与同行100％FBS比较。
Claims (6)
1.一种运输细胞的试剂，其特征在于：所述试剂由50%-100%血清、0%-50%细胞培养基、青霉素和链霉素组成，青霉素在细胞培养基中的终浓度为100 U/mL，链霉素在细胞培养基中的终浓度为 100μg/mL；所述细胞为C3H10 小鼠骨髓间充质干细胞株、143B人骨肉瘤细胞株或LX-2人肝星状细胞株。
2.如权利要求1所述的运输细胞的试剂，其特征在于：所述血清为牛血清或马血清。
3.如权利要求2所述的运输细胞的试剂，其特征在于：所述牛血清为胎牛血清或小牛血清。
4.如权利要求1-3任一项所述的运输细胞的试剂，其特征在于：所述细胞培养基采用DMEM、MEM或DMEM/F12细胞培养基。
5.一种采用如权利要求1-3任一项所述试剂的运输细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，细胞培养于培养瓶或培养皿中，细胞融合度90%-100%，细胞密度为2~10×106/25cm2，每25cm2培养面积加入1mL胰酶消化细胞，37℃，消化时间1-3分钟，待细胞变圆分散，按2-5:1比例加入完全培养基，吹打细胞；
步骤2，将细胞悬液转入离心管，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；
步骤3，在离心管中加入PBS，吹打洗涤次，800-1200rpm离心3分钟，吸弃培养基；
步骤4，按每25 cm2培养面积的细胞沉淀加入1mL所述试剂，吹打均匀，转移至细胞冻存管中，每只冻存管加入1mL细胞悬液；
步骤5，封口胶封口细胞冻存管，运输细胞，运输中的细胞保存温度为2℃-16℃，保存时间为10天以内；
步骤6，往培养瓶或培养皿中加入含100 U/mL青霉素和 100 μg/mL链霉素的细胞培养基，打开细胞冻存管，直接将细胞悬液加入细胞培养基中，细胞培养基中血清终浓度为10%。
6.如权利要求5所述运输细胞的方法，其特征在于：所述步骤3重复操作2-3次。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110435128 | 2021-04-22 | ||
| CN2021104351280 | 2021-04-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113498779A CN113498779A (zh) | 2021-10-15 |
| CN113498779B true CN113498779B (zh) | 2022-05-31 |
Family
ID=78015983
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110922947.8A Active CN113498779B (zh) | 2021-04-22 | 2021-08-11 | 一种运输细胞的试剂及方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113498779B (zh) |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102948413B (zh) * | 2011-08-29 | 2014-09-03 | 北京清美联创干细胞科技有限公司 | 一种肝干细胞保存液及其应用 |
| CN106554940A (zh) * | 2015-09-24 | 2017-04-05 | 苏州爱乐桢医疗器械有限公司 | 一种脂肪间充质干细胞运输保护液 |
| EP3402330B1 (en) * | 2016-01-12 | 2021-12-29 | StemoniX Inc. | Cell medium formulation for cell stabilization |
| CN107912424A (zh) * | 2017-12-01 | 2018-04-17 | 佛山科学技术学院 | 一种犬间充质干细胞专用常温保存液及应用 |
| CN108056095A (zh) * | 2017-12-28 | 2018-05-22 | 重庆斯德姆生物技术有限公司 | 一种脂肪间充质干细胞运输保护液及其应用 |
| CN108990966A (zh) * | 2018-08-24 | 2018-12-14 | 上海中溢精准医疗科技有限公司 | 一种脐带间充质干细胞运输保护液及其保护方法 |
| CN114867347B (zh) * | 2019-10-08 | 2024-03-05 | 细胞研究私人有限公司 | 间充质干细胞的储存或运输制剂及其制备和使用方法 |
| CN110810399B (zh) * | 2019-11-21 | 2021-07-09 | 康妍葆(北京)干细胞科技有限公司 | 细胞运输保护液及制备方法和应用 |
-
2021
- 2021-08-11 CN CN202110922947.8A patent/CN113498779B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113498779A (zh) | 2021-10-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112680398B (zh) | 用于可室温保存类器官的培养基及维持类器官生长活性的方法 | |
| CN110074096B (zh) | 一种无血清细胞冻存液及其制备方法和应用 | |
| CN107094753A (zh) | 一种造血干细胞冻存液及造血干细胞冻存方法 | |
| CN107810948B (zh) | 一种人脐带间充质干细胞的无血清冻存液 | |
| CN107306936B (zh) | 一种常温条件下保存运输干细胞的方法及其所使用的基质 | |
| CN111248191A (zh) | 一种常温细胞保存液和注射用细胞制剂 | |
| US20070059826A1 (en) | Method to Preserve Cells | |
| CN112690272B (zh) | 一种低温保存液及其保存方法 | |
| CN100459861C (zh) | 家畜胚胎在金属表面玻璃化冷冻法 | |
| CN111838139A (zh) | 一种无蛋白细胞冻存液及其应用 | |
| CN113498779B (zh) | 一种运输细胞的试剂及方法 | |
| US4879239A (en) | Method of culturing freeze-dried microorganisms and resultant preparation | |
| CN107711823B (zh) | 一种常温保存的细胞冻存液及其应用 | |
| CN114073249B (zh) | 一种人t淋巴细胞的慢速冻存方法 | |
| CN107494521A (zh) | 细胞冻存液和细胞冻存方法 | |
| CN106993606A (zh) | 一种不含蛋白和血清的细胞冻存液及其制备方法 | |
| CN115644169B (zh) | 一种nk细胞冻存液及冻存方法 | |
| CN114190368B (zh) | 无血清免疫细胞冻存液、配制方法、及免疫细胞冻存方法 | |
| WO2010008059A1 (ja) | 細胞の保存方法及びその装置 | |
| CN111838132A (zh) | 一种干细胞冻存方法及其使用的细胞冻存液 | |
| CN106942202A (zh) | 一种用于mdbk细胞的无血清冻存培养基 | |
| CN110547287A (zh) | 一种动物细胞低温冷藏保存和运输的方法 | |
| US20190345440A1 (en) | Device for Preparing Stem Cell Spheroids, Method for Preparing Stem Cell spheroids and Method for Preserving Stem Cells | |
| WO2014188365A1 (en) | A portable device for maintaining viability of biological material and a method thereof | |
| CN113133445B (zh) | 一种间充质干细胞的保存方法、运输方法及其处理方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20231009 Address after: 518 Yantian North Industrial Street, Shenzhen Patentee after: Shenzhen Huada gene cell technology Co.,Ltd. Address before: 400014 No. two, No. 136, Zhongshan Road, Yuzhong District, Chongqing Patentee before: CHILDREN'S HOSPITAL OF MEDICAL University |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20231031 Address after: 400014 No. two, No. 136, Zhongshan Road, Yuzhong District, Chongqing Patentee after: CHILDREN'S HOSPITAL OF MEDICAL University Address before: 518 Yantian North Industrial Street, Shenzhen Patentee before: Shenzhen Huada gene cell technology Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20231122 Address after: 518 Yantian North Industrial Street, Shenzhen Patentee after: Shenzhen Huada gene cell technology Co.,Ltd. Address before: 400014 No. two, No. 136, Zhongshan Road, Yuzhong District, Chongqing Patentee before: CHILDREN'S HOSPITAL OF MEDICAL University |
|
| TR01 | Transfer of patent right |