CN113388526B - 一种内生真菌fo-r20及其应用 - Google Patents
一种内生真菌fo-r20及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113388526B CN113388526B CN202110529929.3A CN202110529929A CN113388526B CN 113388526 B CN113388526 B CN 113388526B CN 202110529929 A CN202110529929 A CN 202110529929A CN 113388526 B CN113388526 B CN 113388526B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rice
- endophytic
- seeds
- endophytic fungus
- coating agent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000233866 Fungi Species 0.000 title claims abstract description 111
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 84
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 84
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 241001530388 Falciphora oryzae Species 0.000 claims abstract description 6
- 241000209094 Oryza Species 0.000 claims abstract 14
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 45
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 39
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 36
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 25
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 25
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims description 21
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 21
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 claims description 21
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 20
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 18
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 18
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 claims description 17
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 13
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 12
- 238000009331 sowing Methods 0.000 claims description 12
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 7
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims description 6
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims description 6
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims description 6
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 6
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 6
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 6
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 6
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 claims description 5
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims description 4
- 238000007605 air drying Methods 0.000 claims 1
- 229940098396 barley grain Drugs 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 5
- 230000031068 symbiosis, encompassing mutualism through parasitism Effects 0.000 abstract description 5
- 241000195585 Chlamydomonas Species 0.000 abstract 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 74
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 14
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 11
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 6
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 241000746966 Zizania Species 0.000 description 5
- 235000002636 Zizania aquatica Nutrition 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 5
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000005360 mashing Methods 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 241000235349 Ascomycota Species 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001619333 Magnaporthaceae Species 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 2
- 241001326533 Sordariomycetes Species 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 230000036579 abiotic stress Effects 0.000 description 2
- 230000004790 biotic stress Effects 0.000 description 2
- QDOXWKRWXJOMAK-UHFFFAOYSA-N dichromium trioxide Chemical compound O=[Cr]O[Cr]=O QDOXWKRWXJOMAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 2
- WIIZWVCIJKGZOK-IUCAKERBSA-N 2,2-dichloro-n-[(1s,2s)-1,3-dihydroxy-1-(4-nitrophenyl)propan-2-yl]acetamide Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@@H](CO)[C@@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000153158 Ammi visnaga Species 0.000 description 1
- 235000010585 Ammi visnaga Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091023242 Internal transcribed spacer Proteins 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000044232 Oryza meyeriana Species 0.000 description 1
- 241000222831 Phialophora <Chaetothyriales> Species 0.000 description 1
- 244000184734 Pyrus japonica Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- YKRQBWKLHCEKQH-KHPPLWFESA-N ethyl (z)-3-amino-2-cyano-3-phenylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)C(\C#N)=C(/N)C1=CC=CC=C1 YKRQBWKLHCEKQH-KHPPLWFESA-N 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L magnesium chloride Substances [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 230000009105 vegetative growth Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01C—PLANTING; SOWING; FERTILISING
- A01C1/00—Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
- A01C1/06—Coating or dressing seed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
- A01P15/00—Biocides for specific purposes not provided for in groups A01P1/00 - A01P13/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
- A01G22/20—Cereals
- A01G22/22—Rice
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
- A01G24/20—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor based on or containing natural organic material
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Abstract
本发明公开了一种内生真菌FO‑R20及其应用，属于微生物应用技术领域。所述内生真菌FO‑R20保藏号为CCTCC M 2021505，其分类命名为Falciphora oryzae。本发明提供了一株新的瓶霉属内生真菌，通过将内生真菌FO‑R20定殖于水稻根部组织，可以显著提升水稻种苗素质、增加水稻产量，内生真菌FO‑R20对水稻显著的共生互作效果在农业领域内的推广应用具有巨大价值。
Description
技术领域
本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种内生真菌FO-R20及其在提高水稻种苗素质和或产量中的应用。
背景技术
在自然生态系统中藏匿着大量的有益微生物，其中植物内生真菌就是其中之一。植物内生真菌是指至少生活史的一部分能侵染定殖在健康植物组织中，宿主无明显病症的一类真菌，普遍存在于生态系统中，且与宿主植物进行着非常稳定的长期互作关系。在植物内生真菌与寄主形成互惠共生关系的过程中，一方面植物内生真菌从寄主中获取水分、矿物营养等生长所需的养分，另一方面植物内生真菌赋予植物丰富多样的生物学功能，例如促进植物生长，提高植物生物量，增强寄主植物的抗生物和非生物胁迫的能力。随着对内生真菌研究的逐渐关注，植物与内生真菌共生互作机制研究已成为新的国际研究热点。
水稻作为我国最重要的粮食作物，实现水稻的稳定高产是我国可持续发展的基础。近年来随着人们对植物微生态系统的深入认识，发现植物的表型除了受自身遗传特性的影响外，还受周围有益微生物的积极调控。植物与内生真菌的共生互作就是其中典型的例子，内生真菌不仅能够促进植物营养生长、增加生物量、而且能够提高寄主抗生物和非生物胁迫的能力，具有良好的农业生态应用前景。利用野生稻内生真菌重建有益的水稻-内生真菌共生体系是促进水稻生长、提高产量与抗逆性的有效途径之一。因此建立野生稻内生真菌与水稻的互惠共生体，对于水稻的产量、农业的可持续发展具有重要的意义。
目前，我国水稻机械化插秧迅速推广普及，对于秧苗素质要求亦越发严格。因此，培育出既适合机械插秧作业，又满足高产农艺要求的健壮秧苗成了最大的技术障碍。“秧好一半谷”，提高秧苗素质，健苗壮秧是促进水稻高产的重要技术措施。目前，生产上育出的秧苗不壮，难以符合插秧机作业标准，导致栽插质量差、栽后返青慢，进而导致产量不高。因此，探索能够提高水稻秧苗素质，健苗壮秧的微生物及其应用方式，将进一步助力水稻育秧机械化发展。
目前尚无报道指出野生稻内生真菌具有提高水稻秧苗素质及稻谷产量方面的功能，以及田间应用方式。
发明内容
本发明的目的在于提供一株新的内生真菌，利用与水稻的共生互作来实现水稻的稳定高产。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明从云南疣粒野生稻根系中分离得出一株瓶霉属内生真菌，其ITS序列如SEQID No.1所示，其形态特征为：在PDA平板上菌落生长缓慢，25℃生长10天后菌落直径为6cm；气生菌丝不发达，匍匐状贴于培养基表面，菌落为褐色，菌丝透明或深褐色，宽1.0-2.5μm；分生孢子梗呈酒瓶状，单生，不分支，5.0-13.5×2.5-3.0μm；分生孢子镰刀形，无色，无隔膜，7.0-9.0×0.8-1.2μm。鉴定该菌株属于真菌界Fungi，子囊菌门Ascomycota，粪壳纲Sordariomycetes，巨座壳科Magnaporthaceae，瓶霉属Phialophora，将其命名为Falciphora oryzae FO-R20。于2021年5月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉、武汉大学，保藏号CCTCC M 2021505，其分类命名为Falciphora oryzae。
内生真菌FO-R20的培养条件为：将内生真菌FO-R20菌丝接种于PDA固体培养基，25℃黑暗培养5天。
本发明还提供了内生真菌FO-R20的两种制剂形式，一种是将内生真菌制成种衣剂，所述种衣剂对作物种子进行包衣，育苗过程中，内生真菌FO-R20定殖于植株苗根部；另一种是将内生真菌制成固体菌肥，所述固体菌肥混合到育苗基质中，萌发的作物种子播种于含有内生真菌FO-R20的育苗基质中，育苗过程中，内生真菌FO-R20定殖于植株苗根部。
进一步的，本发明提供了内生真菌FO-R20种衣剂的制备方法，包括：将保藏号为CCTCC M 2021505的内生真菌FO-R20菌丝与壳聚糖溶液混匀后制得种衣剂。
优选的，内生真菌FO-R20菌株接种于PDA培养基中，25℃黑暗培养，再接种于液体发酵培养基中，25℃培养，获得内生真菌FO-R20菌丝；然后菌丝与质量百比分浓度为1％的壳聚糖溶液按照1g：10L的比例混合制得种衣剂；菌丝质量以干重计。1％壳聚糖溶液由1g壳聚糖溶于100mL的1％醋酸溶液制得。
所述液体发酵培养基以质量百分比计，每250mL含0.4％豆饼粉、1％玉米粉、0.05％硫酸镁、0.1％磷酸氢二钾。
本发明提供了内生真菌FO-R20固体菌肥的制备方法，包括：将保藏号为CCTCC M2021505的内生真菌FO-R20接种至液体发酵培养基中，培养获得发酵液，再将发酵液接种于无菌大麦粒上，黑暗培养至菌丝生长布满麦粒，制得FO-R20固体菌肥；
所述液体发酵培养基以质量百分比计，每250mL含0.4％豆饼粉、1％玉米粉、0.05％硫酸镁、0.1％磷酸氢二钾。
优选的，发酵液与无菌大麦粒按照100mL：500g的比例混合，25℃黑暗培养至菌丝生长布满麦粒，即得FO-R20固体菌肥。
本发明研究发现内生真菌FO-R20定殖于水稻根部组织后，能够显著提升水稻种苗素质，即显著提高种苗茎基宽、叶绿色含量、苗龄等。
因此，本发明提供了内生真菌FO-R20在提高水稻种苗素质中的应用。
进一步的，所述应用包括：将内生真菌FO-R20制备成种衣剂，再与水稻种子混合，置于阴凉通风处晾干制得包衣种子，然后包衣种子经过育秧获得水稻种苗；
或者，将内生真菌FO-R20制备成固体菌肥，再混合到育苗基质中制得混合基质，水稻种子萌发后播种于混合基质中，育苗培养获得水稻种苗。
优选的，制备包衣种子时，消毒后的种子与种衣剂按照2.5g:1mL的比例混匀，包衣后置于15-28℃的阴凉通风处晾干；
制备混合基质中，固体菌肥与育苗基质按照质量比1:9进行混合。
本发明研究还发现内生真菌FO-R20定殖于水稻根部组织后，对水稻具有增产效果，实际增产达到6.29％。
因此，本发明提供了内生真菌FO-R20在提高水稻产量中的应用。
进一步的，所述应用包括：将内生真菌FO-R20制备成种衣剂，再与水稻种子混合，置于阴凉通风处晾干制得包衣种子，然后将包衣种子通过直播的方式播种于大田，培育至收获。
或者，将内生真菌FO-R20制备成固体菌肥，再混合到育苗基质中，水稻种子萌发后播种于育苗基质中育苗，然后水稻秧苗移栽至大田，培育至收获。
本发明具备的有益效果：
本发明提供了一种新的瓶霉属内生真菌FO-R20，通过将内生真菌FO-R20定殖于水稻根部组织，可以显著提升水稻种苗素质、增加水稻产量，内生真菌FO-R20对水稻显著的共生互作效果在农业领域内的推广应用具有巨大价值。
附图说明
图1为内生真菌FO-R20菌落形态图。
图2为内生真菌FO-R20菌株在光学显微镜下分生孢子形态。标尺为10μm。
图3为内生真菌FO-R20菌株在光学显微镜下菌丝形态。标尺为20μm。
图4为内生真菌FO-R20菌株在光学显微镜下瓶状产孢梗形态。标尺为20μm。
图5为实施例2中内生真菌FO-R20种衣剂。左：消毒后的水稻种子；右：FO-R20种衣剂。
图6为实施例2中内生真菌FO-R20包衣种子。
图7为实施例2中内生真菌FO-R20包衣剂对水稻秧苗产生影响的照片。
图8为实施例2中内生真菌FO-R20包衣剂对水稻秧苗素质的影响，水稻秧苗素质包括：叶龄、株高、茎基宽、地上部鲜重、地下部鲜重、地上部干重、地下部干重、叶绿色SPAD、第一叶鞘长度、第二叶鞘长度、根长、根数。显著性采用t-test，*表示P<0.05，**表示P<0.01，***表示P<0.001，**表示P<0.0001。
图9为实施例3中内生真菌FO-R20固体菌肥。
图10为实施例3中内生真菌FO-R20固体菌肥对水稻秧苗影响的照片。
图11为实施例3中内生真菌FO-R20固体菌肥对水稻秧苗素质的影响。显著性采用t-test，*表示P<0.05，**表示P<0.01，***表示P<0.001，**表示P<0.0001。
图12为内生真菌FO-R20在水稻根部的定殖。
图13为实施例4中内生真菌FO-R20包衣剂对水稻谷粒的影响。
图14为实施例5中内生真菌FO-R20固体菌肥对水稻谷粒的影响。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于此。若无特别说明，实施中采用的技术手段均为本领域常规技术手段，试剂均为市售商品。
实施例1内生真菌FO-R20菌株的分离和鉴定
一、内生真菌FO-R20的分离纯化
内生真菌FO-R20分离自云南疣粒野生稻(从中国云南省西双版纳采集)根系。
具体分离方法为：首先，用自来水连续冲洗野生稻根系，仔细去除土壤颗粒和附属物。选取健康根组织，进行表面消毒处理，75％乙醇浸泡1-2min，1％次氯酸钠4-5min，再用无菌去离子水清洗3次。将根组织块切成0.5cm小段，然后放入2％麦芽粉琼脂培养基(MEA，malt extract agar，OXOID；培养基中加入50mg/L的氯霉素抑制内生细菌的生长)平板上孵育，25℃黑暗培养。培养至第5天，从组织切口边缘处长出内生真菌菌丝，用接种针小心将其挑出后转接到新鲜PDA培养基上纯化培养并记录菌株编号FO-R20。
PDA培养基：葡萄糖20g/L，马铃薯200g/L，琼脂15g/L。根据待配培养基的体积称取所需马铃薯(200g/L)，水煮后捣碎溶解过滤，加入葡萄糖和琼脂，121℃高压蒸汽灭菌20min。
二、菌株鉴定
1、形态鉴定
FO-R20菌株经过分离纯化后，接种到PDA培养基上，25℃培养7天。用挑针挑取少量菌体，制成玻片，在显微镜下观察，测量，拍照。菌落生长状态如图1所示，分生孢子、菌丝和产孢梗形态如图2、3、4所示。
其形态特征为：菌株FO-R20在PDA平板上菌落生长缓慢，25℃生长10天后菌落直径为6cm；气生菌丝不发达，匍匐状贴于培养基表面，菌落为褐色，菌丝透明或深褐色，宽1.0-2.5μm；分生孢子梗呈酒瓶状，单生，不分支，5.0-13.5×2.5-3.0μm；分生孢子镰刀形，无色，无隔膜，7.0-9.0×0.8-1.2μm。
2、分子鉴定
(1)DNA提取
①在PDA平板上25℃培养FO-R20菌株7天后，用牙签刮取平板上的菌丝，放入已灭菌的含有300μL提取缓冲液(1M KCl，100mM Tris-HCl，10mM EDTA，pH＝8.0；)1.5mL离心管中；
②用电磨机研碎，剧烈震荡2min；
③10000rpm离心10min；
④吸取上清液，转移至另一新的离心管中，弃沉淀；
⑤在上清液中加入等体积的异丙醇(分析纯)，轻轻颠倒混匀数次后，12000rpm离心10min，沉淀核酸；
⑥轻轻倒去上清液，将含有沉淀的离心管倒置在吸水纸上排干水分；
⑦再加入300μL 70％乙醇，轻轻颠倒混匀数次后，12000rpm离心2min；
⑧轻轻倒去上清液，重复步骤⑦一次；
⑨将离心管倒置在吸水纸上排干水分，置于37℃下15min，使乙醇充分挥发；
⑩用50μL ddH2O重悬沉淀，得到FO-R20基因组DNA，浓度达到30ng/μL。
(2)真菌ITS rDNA基因的PCR扩增
PCR扩增在50μL反应体系中进行，体系中含有：上下游引物各2μM，dNTPs 200μM，MgCl2 1.5mM，10×PCR buffer 5μL，模版DNA 2μL，Taq酶2U。
上游引物ITS1序列为：5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′，
下游引物ITS4序列为：5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′。
PCR扩增反应在朗基MG96G型PCR仪上进行。反应条件：94℃预变性2min，然后35个循环包括：94℃变性30sec，55℃退火40sec，72℃延伸1min。最后72℃延伸10min。
(3)PCR产物的回收纯化
PCR反应结束后，PCR产物经1％的琼脂糖凝胶电泳检测后，采用爱思进生物技术公司的DNA凝胶纯化试剂盒，按照试剂盒说明书的步骤进行。
(4)基因的测序和序列分析
经电泳检测后的已经纯化回收的目的DNA片段送至上海生工用ABIPRISMA377型自动测序仪进行测序。测序结果经过严格核对后，得到如SEQ ID No.1所示的长度为527bp的DNA片段序列。
在NCBI网站上，将测得的核苷酸序列用BLAST在GenBank数据库中查找和比对同源或相似的核苷酸序列。经过BLAST比对，该序列与登录号为NR_153972.1序列覆盖率100％，相似度达到100％，属于瓶霉属。
上述分子鉴定与形态鉴定结果表明，新分离的菌株属于真菌界Fungi，子囊菌门Ascomycota，粪壳纲Sordariomycetes，巨座壳科Magnaporthaceae，瓶霉属Phialophora。将其命名为Falciphora oryzae FO-R20，于2021年5月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉、武汉大学，保藏号CCTCC M 2021505。
实施例2 FO-R20菌株包衣剂育秧
供试植物：水稻Oryza sativa L.，常规品种，春优927。
1、FO-R20菌株培养与液体发酵
将保存于滤纸片上的FO-R20菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)固体培养基上进行活化培养，25℃，黑暗培养7d。用直径0.5cm的打孔器打取菌饼，将菌饼(5个)接种至含有500ml液体发酵培养基的三角瓶中，置于摇床中(25℃，转速150)培养7d。然后将液体发酵液真空抽滤，去除培养基，得到菌丝。称取0.1g菌丝，测定含水率为80％，以备计算菌丝干重。
PDA培养基：葡萄糖20g/L，马铃薯200g/L，琼脂15g/L。根据待配培养基的体积称取所需马铃薯(200g/L)，水煮后捣碎溶解过滤，加入葡萄糖和琼脂，121℃高压蒸汽灭菌20min。
液体发酵培养基：豆饼粉0.4％，玉米粉1％，硫酸镁0.05％，磷酸氢二钾0.1％，按比例配制，加水至250ml；120℃湿热灭菌15min。
2、FO-R20种衣剂制备：将菌丝与1％壳聚糖溶液按照1：10000的比例(干重：体积)混合均匀，即干重为1g的菌丝与10L 1％壳聚糖溶液混合，制成种衣剂。因真空抽滤后的菌丝含水率不同，所以每次制备种衣剂按照菌丝干重来计算。
1％壳聚糖溶液配方如下：1g壳聚糖溶于100ml的1％醋酸溶液。
3、种子包衣处理：用1％次氯酸钠对水稻种子表面消毒10分钟，清水冲洗干净，沥干，如图5所示，然后将消毒后的种子与种衣剂按照2.5:1的比例(重量：体积)混匀，即每2.5g种子使用1mL种衣剂，得到包衣种子。如图6所示，将包衣后的种子平铺于无菌纱布上，置于阴凉通风处(15-28℃)晾干2-3天。
4、将包衣种子通过基质育秧方式均匀播种于育苗盘，正常水肥管理，整个育苗期不施用任何杀菌剂，培育25-28天。
5、秧苗素质测定
内生真菌包衣剂育秧示范田位于浙江省杭州市瓶窑地区，以未包衣的水稻种子为对照。播种期5月23日，育秧25天，发现内生真菌包衣处理的水稻苗生长健壮，长势平衡，无明显病虫害发生，如图7、图8所示。
实施例3 FO-R20固体菌肥育秧
供试植物：水稻Oryza sativa L.，南粳5055。
1、FO-R20菌株培养与发酵
将保存于滤纸片上的FO-R20菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)固体培养基上进行活化培养，25℃，黑暗培养7d。用直径0.5cm的打孔器打取菌饼，将菌饼(5个)接种至含有500ml液体发酵培养基的三角瓶中，置于摇床中(25℃，转速150)培养7d。然后将液体发酵液接种于装有无菌麦粒培养瓶中(500g麦粒/瓶，100ml发酵液：500g麦粒)，25℃黑暗培养箱中培养10-15d，待菌丝生长布满麦粒，备用。
PDA培养基：葡萄糖20g/L，马铃薯200g/L，琼脂15g/L。根据待配培养基的体积称取所需马铃薯(200g/L)，水煮后捣碎溶解过滤，加入葡萄糖和琼脂，121℃高压蒸汽灭菌20min。
液体发酵培养基：豆饼粉0.4％，玉米粉1％，硫酸镁0.05％，磷酸氢二钾0.1％，按比例配制，加水至250ml；120℃湿热灭菌15min。
2、FO-R20固体菌肥的基质育秧
将发酵好的固体菌肥(图9)与常规育苗基质混合后，平铺于育苗盘中，每育苗盘含有10g固体菌肥。将水稻种子用25％氰烯菌酯3000倍液浸泡2天进行种子消毒，随后放于30℃黑暗恒温箱中催芽1-2天。待种子露白，将其均匀播种于育苗盘中，放入秧田育苗培养，正常浇水管理。
3、水稻秧苗素质测定
待秧苗在育苗盘中生长23-25天后，测定秧苗素质。如图10、图11所示，内生真菌固体菌肥处理的水稻苗生长健壮，长势平衡，无明显病虫害发生。
实施例4 FO-R20菌株包衣剂对水稻产量的影响
供试植物：水稻Oryza sativa L.，杂交品种，甬优538。
1、FO-R20菌株培养发酵、种衣剂制备、种子包衣处理同实施例2。
2、将包衣种子通过人工直播方式均匀播种于大田，正常水肥管理，整个生育期不施用任何杀菌剂，培育至收获。种子每亩用量为2kg。
同时，为确保真菌能够定殖于根部，在播种15天后将秧苗拔出，清洗根系，剪少量样品，置于LSM780荧光共聚焦显微镜(Carl Zeiss Inc.,Jena，Germany)下进行观察，镜检根部FO-R20真菌定殖情况(图12)。
3、稻谷测产
内生真菌包衣剂育秧示范田位于浙江省杭州市桐庐县江南镇，总面积60亩，以未包衣的种子为对照。播种期6月23日，成熟日期11月6日。水稻成熟时，发现内生真菌包衣处理的水稻生长健壮，长势平衡，青杆黄熟，无明显病虫害发生，穗长增加，谷粒饱满(图13)。
理论测产：经过内生真菌包衣处理的水稻平均理论亩产为614.37kg/亩，未使用内生真菌包衣处理的对照组平均理论亩产为580.84/亩，理论增产5.77％(表1)。
实际测产：内生真菌种衣剂处理的稻田和对照田各取1块田，面积分别为1.0015亩和1.0064亩。经全田机械收割、实测含水量，稻谷称重，按照1.0％扣除杂质，按籼粳杂交稻含水率13.5％的标准折算，内生真菌包衣剂直播水稻实收稻谷564公斤/亩，对照为542公斤/亩，实际增产4.06％。
表1内生真菌FO-R20包衣剂对水稻的理论增产表
百亩方测产：按农业农村部水稻产量测产验收办法，对内生真菌包衣处理直播单季稻百亩方进行测产，结果如表2，经算术平均，示范方平均亩产662.4公斤/亩。
表2内生真菌FO-R20包衣剂百亩示范方测产结果
实施例5 FO-R20固体菌肥对水稻产量的影响
供试植物：水稻Oryza sativa L.，杂交品种，甬优1450。
1、FO-R20菌株培养与发酵、基质育秧同实施例3。
2、水稻秧苗移栽
待秧苗在育苗盘中生长23-25天后，将秧苗拔出，移栽至大田。移栽时，每丛3株苗，每丛株距10-15cm，行距30cm。正常水肥管理，整个生育期内不施用任何杀菌剂，培育至收获。
3、稻谷测产
内生真菌菌肥育秧示范田位于浙江省金华市武义县泉溪镇王山头村，总面积160亩，以常规营养土育秧机插为对照。播种期6月23日，机插期7月18日，成熟日期11月14日。水稻成熟时，发现内生真菌育秧机插连作晚稻生长健壮，长势平衡，青杆黄熟，无明显病虫害发生，穗长增加，谷粒饱满(图14)。
理论测产：经过内生真菌固体菌肥育秧的水稻平均理论亩产为687.01kg/亩，未使用内生真菌菌肥的对照组平均理论亩产为651.07kg/亩，理论增产5.52％(表3)。
表3内生真菌FO-R20固体菌肥对水稻的理论增产表
实际测产：内生真菌固体菌肥育秧和对照各取1块田，面积分别为1.0657亩和1.0275亩。经全田机械收割、实测含水量，稻谷称重，按照1.0％扣除杂质，按籼粳杂交稻含水率13.5％的标准折算，内生真菌固体菌肥育秧机插实收稻谷597.9公斤/亩，对照为562.5公斤/亩，实际增产6.29％。
百亩方测产：按农业农村部水稻产量测产验收办法，对内生真菌基质育秧机插连作晚稻百亩方进行测产，结果如表4，经算术平均，示范方平均亩产658.6公斤/亩。
表4内生真菌FO-R20固体菌肥百亩示范方测产结果
以上实施例仅仅为本发明的优选实施例，并非全部。基于实施方式中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例，都属于本发明的保护范围。
序列表
<110> 浙江省农业科学院
<120> 一种内生真菌FO-R20及其应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 527
<212> DNA
<213> Falciphora oryzae
<400> 1
cggagggatc attaaagagt tgaaaaactc caacccctgt gaaccttacc tttactgttg 60
cttcggcgga cgacggccct tcgtggcccg aggccgccgg aggttccaaa ctctaaatct 120
ttagtgtatc tctgaggaaa ataaaccaat aattaaaact ttcaacaacg gatctcttgg 180
ttctggcatc gatgaagaac gcagcgaaat gcgataagta atgtgaattg cagaattcag 240
tgaatcatcg aatctttgaa cgcacattgc gcccgccggt attccggcgg gcatgcctgt 300
tcgagcgtca tttcaccact caagcccagc ttggtgttgg ggcacccggc cgcccggcgg 360
tcggggcccc caagtacatc ggcggtctcg ctaggaccct gagcgcagta actcgcggta 420
aaacgcgcct cgctcggaag ttcccagcgg gcttccagcc gctaaacccc ccctaatttt 480
cttaggttga cctcggatca ggtaggaata cccgctgaac ttaagca 527
Claims (10)
1.一种内生真菌FO-R20，其特征在于，菌株保藏号为CCTCC M 2021505，其分类命名为Falciphora oryzae。
2.一种内生真菌FO-R20种衣剂，其特征在于，其制备方法包括：将保藏号为CCTCC M2021505的内生真菌FO-R20菌丝与壳聚糖溶液混匀后制得种衣剂。
3.如权利要求2所述的内生真菌FO-R20种衣剂，其特征在于，内生真菌FO-R20菌株接种于PDA培养基中，25℃黑暗培养，再接种于液体发酵培养基中，25℃培养，获得内生真菌FO-R20菌丝；然后菌丝与质量百比分浓度为1％的壳聚糖溶液按照1g：10L的比例混合制得种衣剂；
所述液体发酵培养基以质量百分比计，每250mL含0.4％豆饼粉、1％玉米粉、0.05％硫酸镁、0.1％磷酸氢二钾。
4.一种内生真菌FO-R20固体菌肥，其特征在于，其制备方法包括：将保藏号为CCTCC M2021505的内生真菌FO-R20接种至液体发酵培养基中，培养获得发酵液，再将发酵液接种于无菌大麦粒上，黑暗培养至菌丝生长布满麦粒，制得FO-R20固体菌肥；
所述液体发酵培养基以质量百分比计，每250mL含0.4％豆饼粉、1％玉米粉、0.05％硫酸镁、0.1％磷酸氢二钾。
5.如权利要求4所述的内生真菌FO-R20固体菌肥，其特征在于，发酵液与无菌大麦粒按照100mL：500g的比例混合，25℃黑暗培养至菌丝生长布满麦粒，即得FO-R20固体菌肥。
6.如权利要求1所述的内生真菌FO-R20在提高水稻种苗素质中的应用。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用包括：将内生真菌FO-R20制备成种衣剂，再与水稻种子混合，置于阴凉通风处晾干制得包衣种子，然后包衣种子经过育秧获得水稻种苗；
或者，将内生真菌FO-R20制备成固体菌肥，再混合到育苗基质中制得混合基质，水稻种子萌发后播种于混合基质中，育苗培养获得水稻种苗。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，制备包衣种子时，消毒后的种子与种衣剂按照2.5g:1mL的比例混匀，包衣后置于15-28℃的阴凉通风处晾干；
制备混合基质中，固体菌肥与育苗基质按照质量比1:9进行混合。
9.如权利要求1所述的内生真菌FO-R20在提高水稻产量中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述应用包括：将内生真菌FO-R20制备成种衣剂，再与水稻种子混合，置于阴凉通风处晾干制得包衣种子，然后将包衣种子通过直播的方式播种于大田，培育至收获；
或者，将内生真菌FO-R20制备成固体菌肥，再混合到育苗基质中制得混合基质，水稻种子萌发后播种于混合基质中育苗，然后水稻秧苗移栽至大田，培育至收获。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110529929.3A CN113388526B (zh) | 2021-05-14 | 2021-05-14 | 一种内生真菌fo-r20及其应用 |
| US17/744,713 US20220369648A1 (en) | 2021-05-14 | 2022-05-15 | Endophytic falciphora oryzae fo-r20 and its application |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110529929.3A CN113388526B (zh) | 2021-05-14 | 2021-05-14 | 一种内生真菌fo-r20及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113388526A CN113388526A (zh) | 2021-09-14 |
| CN113388526B true CN113388526B (zh) | 2022-05-27 |
Family
ID=77617120
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110529929.3A Active CN113388526B (zh) | 2021-05-14 | 2021-05-14 | 一种内生真菌fo-r20及其应用 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20220369648A1 (zh) |
| CN (1) | CN113388526B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115287194B (zh) * | 2022-01-30 | 2023-07-14 | 浙江中医药大学 | 一种药用野生稻内生真菌yya21及其应用 |
| CN115287195B (zh) * | 2022-02-14 | 2023-08-04 | 浙江中医药大学 | 一种利用内生真菌p-b313提高水稻种苗素质和谷粒产量的方法 |
| CN114931079B (zh) * | 2022-04-28 | 2023-07-21 | 浙江中医药大学 | 内生真菌p-b313在提高石斛耐低磷胁迫中的应用 |
| CN114806895B (zh) * | 2022-05-20 | 2023-02-28 | 浙江大学 | 内生真菌m-b927在提高水稻谷粒产量中的应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101486970A (zh) * | 2008-12-01 | 2009-07-22 | 浙江大学 | 一种真菌菌株及其用途 |
| CN103087929A (zh) * | 2013-02-06 | 2013-05-08 | 浙江大学 | 内生真菌菌株s22及其用途 |
| CN104168771A (zh) * | 2011-12-13 | 2014-11-26 | 孟山都技术公司 | 植物生长促进微生物及其用途 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108041078A (zh) * | 2017-11-30 | 2018-05-18 | 浙江大学 | 内生真菌菌株nyn8g01的用途 |
-
2021
- 2021-05-14 CN CN202110529929.3A patent/CN113388526B/zh active Active
-
2022
- 2022-05-15 US US17/744,713 patent/US20220369648A1/en active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101486970A (zh) * | 2008-12-01 | 2009-07-22 | 浙江大学 | 一种真菌菌株及其用途 |
| CN104168771A (zh) * | 2011-12-13 | 2014-11-26 | 孟山都技术公司 | 植物生长促进微生物及其用途 |
| CN103087929A (zh) * | 2013-02-06 | 2013-05-08 | 浙江大学 | 内生真菌菌株s22及其用途 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Endophytic fungus Falciphora oryzae promotes lateral root growth by producing indole derivatives after sensing plant signals;Xun Sun等;《Plant,Cell&Environment》;20191101;第43卷(第2期);358-373页 * |
| 内生真菌稻镰状瓶霉对直播稻稻瘟病的防治效果;王国迪等;《中国稻米》;20190712;第25卷;68-69页 * |
| 稻镰状瓶霉促进水稻生长的机制;苏珍珠等;《菌物学报》;20191122;第38卷(第11期);2007-2015页 * |
| 苏珍珠等.稻镰状瓶霉促进水稻生长的机制.《菌物学报》.2019,第38卷(第11期),2007-2015页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113388526A (zh) | 2021-09-14 |
| US20220369648A1 (en) | 2022-11-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113388526B (zh) | 一种内生真菌fo-r20及其应用 | |
| CN108048354B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| US20220386625A1 (en) | Application of endophytic falciphora oryzae fo-r20 in controlling panicle blast | |
| CN113249229B (zh) | 一种假瓶霉属内生真菌p-b313及其应用 | |
| CN114806895B (zh) | 内生真菌m-b927在提高水稻谷粒产量中的应用 | |
| KR20130056585A (ko) | 물억새 뿌리로부터 분리한 미생물을 이용한 식물 생장 촉진방법 | |
| KR102276931B1 (ko) | 침수 저항성, 혐기 발아성 및 도열병 저항성이 우수한 인디카 벼 신품종 '세종인디1' 및 이의 육종 방법 | |
| CN111996130B (zh) | 一种植物根腐病生防菌及其应用 | |
| CN106929433B (zh) | 解磷青霉菌及其应用 | |
| CN115287194B (zh) | 一种药用野生稻内生真菌yya21及其应用 | |
| CN115287195B (zh) | 一种利用内生真菌p-b313提高水稻种苗素质和谷粒产量的方法 | |
| US20220386541A1 (en) | Method for improving cadmium tolerance in rice and reducing cadmium content in rice grains | |
| CN114292759B (zh) | 一株具有防治烟草连作障碍作用的尖孢镰刀菌 | |
| CN113832038B (zh) | 木贼镰刀菌（Fusarium equiseti）K2017-696及其应用 | |
| CN115725419A (zh) | 一株解磷蓝莓内生木霉菌及其应用 | |
| CN108531425B (zh) | 恶臭假单胞菌及其在防治花生根部病害中的应用 | |
| CN107629970B (zh) | 一种用于防治人参红皮病的微生物及应用 | |
| CN116769607B (zh) | 内生真菌a21-1-1在防治水稻稻瘟病中的应用 | |
| CN116376723B (zh) | 一株篮状菌tm28、tm28分生孢子固体制剂及其应用 | |
| CN117586931B (zh) | 一种木糖氧化无色杆菌ivf-wk240及其用途 | |
| CN117004649B (zh) | 一种农杆菌介导的糜子高效遗传转化方法 | |
| CN114164126B (zh) | 一株米根霉xerf-1及其在减轻苹果连作障碍中的应用 | |
| CN116716190B (zh) | 一种螺卷毛壳菌201及其应用 | |
| CN109337847B (zh) | 一株决明属根瘤菌txr2 及其应用 | |
| CN109439590B (zh) | 一株决明属根瘤菌wys3r1 及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract | ||
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Application publication date: 20210914 Assignee: Zhejiang Jinghe Biotechnology Co.,Ltd. Assignor: Zhejiang Academy of Agricultural Sciences Contract record no.: X2024330000003 Denomination of invention: An endophytic fungus FO-R20 and its application Granted publication date: 20220527 License type: Exclusive License Record date: 20240103 |