CN113295807A - 蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制方法，所述测定方法包括，首先采用盐酸溶液提取蛇莓药材中的没食子酸获得提取液，而后采用高效液相色谱法检测提取液中没食子酸的含量。该方法提取效果更加充分，同时，盐酸溶液提取物在后续的高效液相色谱检测过程中具有更好的溶解性，得到的流动相更加稳定，使得检测结果更加准确。本发明还将得到的没食子酸特征图谱用于蛇莓药材的质量控制，在稳定、准确地检测蛇莓药材中没食子酸含量的基础上，对蛇莓药材的质量作出准确的评估，保证了使用蛇莓药材生产制得药品的质量。

Description

蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制 方法

技术领域

本发明涉及中药分析技术领域，具体而言，涉及蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法及蛇莓药材质量控制方法。

背景技术

蛇莓药材始载于《名医别录》，后收载于《北京市中药材标准》(1994版)、《山东省中药材标准》(2002版)、《云南省中药材标准》(2005版)、《湖南省中药材标准》(2009版)等。

蛇莓属蔷薇科，有着众多别名，如蛇泡草、龙吐珠、三爪凤等等，多年生草本，全株有柔毛；匍匐茎长。小叶片倒卵形至菱状长圆形，长2-3.5(-5)厘米，宽1-3厘米；花单生于叶腋；直径1.5-2.5厘米；瘦果卵形，长约1.5毫米，光滑或具不明显突起，鲜时有光泽。花期6-8月，果期8-10月。多野生于山坡、草地上、路旁、沟边或田埂杂草中；全国各地都有分布。全草供药用，有清热解毒、活血散瘀、收敛止血作用，又能治毒蛇咬伤，敷治疔疮等；并用于杀灭蝇蛆。

全草含甲氧基去氢胆甾醇(methoxydehydrochlesterol)，低聚缩合鞣质(lowercondensedtannin)，并没食子鞣质(ellagitannin)，总蛋白，总非结构性碳水化合物(totalnonstructuralcarbonhydrate)，没食子酸(gallicacid)，已糖(hexose)，戊糖(pentose)，糖醛酸(uronicacid)，蛋白质(protein)，蛋白质鞣质多糖(proteintannicpolysaccharide)，酚性物质(phenolicsubstance)，又含熊果酸(ursolicacid)，委陵菜酸(tormenticacid)，野蔷薇葡萄糖酯(rosamultin)，刺梨甙(kajiichigoside)F，6-甲氧基柚皮素(6-methoxynaringenin)，杜鹃素(farrerol)，β-谷甾醇(β-sitosterol)，硬脂酸(stearicacid)，白桦甙(betuloside)，蛇莓并没食子甙(duchesellagiside)A、B，山柰酚-3-O-芸香糖甙(kaempferol-3-O-rutinoside)及山柰酚-3-O-刺槐二糖甙(kaempferol-3-O-robinobioside)的多种化学组分，但在目前可依据的质量标准中，如《天津市中药饮片炮制规范(2012年版)》，仅包括对性状和炮制方法进行描述，尚无对有效药用组分进行定性、定量等质量标准用以控制药材质量。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法、蛇莓药材特征图谱的构建方法、构建方法得到的蛇莓药材特征图谱在蛇莓药材质量控制中的应用和蛇莓药材质量控制方法，以实现对蛇莓药材质量的综合评价。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明提供一种蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法，所述测定方法包括，采用高效液相色谱法检测蛇莓药材中没食子酸提取液中没食子酸的含量；其中，采用盐酸溶液提取蛇莓药材中的没食子酸获得蛇莓药材中没食子酸提取液。

在可选的实施方式中，所述盐酸溶液体积百分为1％～5％。

优选地，所述盐酸溶液浓度为3％。

在可选的实施方式中，所述蛇莓药材包括蛇莓药材粉末。

优选地，所述蛇莓药材粉末包括采用四号筛筛选得到的。

在可选的实施方式中，所述蛇莓药材与盐酸溶液的质量体积比为1:100。

第二方面，本发明提供一种蛇莓药材特征图谱的构建方法，所述构建方法包括，设定色谱条件，将包含没食子酸的对照品溶液与包含蛇莓药材的盐酸提取溶液的供试品溶液通过高效液相色谱检测，得到特征图谱。

在可选的实施方式中，所述色谱条件为：

色谱柱：AgelaVenusil MP C18(4.6*250mm，5um 100A)；

流动相：甲醇-1.7％冰醋酸(1：99)；

波长：273nm；

流速：1.0mL/min；

柱温：30℃。

第三方面，本发明提供根据前述实施方式所述的蛇莓药材特征图谱的构建方法在蛇莓药材质量控制中的应用。

第四方面，本发明提供一种蛇莓药材质量控制方法，所述质量控制方法包括，应用前述实施方式所述的构建方法得到的特征图谱筛选没食子酸含量在1.09mg/g以上的蛇莓药材。

在可选的实施方式中，所述的质量控制方法还包括，蛇莓药材的性状筛选、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、酸不溶性灰分测定、重金属含量测定、砷盐含量测定中的至少两种或两种以上筛选方法。

在可选的实施方案中，所述的性状筛选是指，通过观察蛇莓的外观，筛选出具有如下性状的蛇莓药材：根细小，棕色至棕褐色。茎长而纤细，直径约1mm，表面黄绿色或黄棕色，被白色毛茸。三出复叶，小叶黄绿色至暗绿色，多皱缩，完整的小叶展平后，呈菱状卵形或倒卵形，长1.5～4cm，宽1～3cm，基部楔形，边缘有钝锯齿，两面散生柔毛或上面近无毛。花单生于叶腋，具长柄。聚合果暗红色，球形，由多数小瘦果聚合而成。气微，味淡。

在可选的实施方案中，所述的显微鉴别是指，将蛇莓叶置于显微镜下观察蛇莓叶片组织及细胞结构，并从中选出具有以下性状的蛇莓药材：上表皮细胞类多角形，垂周壁平直，排列紧密。下表皮细胞垂周壁波状弯曲。非腺毛单细胞，长短不一，长180～1300μm，直径20～45μm，壁平直或表面有螺状纹理。腺毛长60～125μm，头部2细胞，直径25～40μm；柄2～3细胞。下表皮气孔较多，不定式或不等式，叶肉细胞中含草酸钙簇晶众多，直径10～38μm。

在可选的实施方式中，所述的薄层鉴别是指选择蛇莓中的有效药用组分作为对照品，对蛇莓的提取物进行薄层层析，判断蛇莓中有效药用组分的含量进行判断。

蛇莓主要化学成分包括酚酸类、黄酮类和三萜类。其中酚酸类主要为没食子酸，三萜类包括熊果酸、齐墩果酸等。没食子酸具有抗炎、抗突变、抗氧化等生物学效应，且在药材中含量较高，因此，在可选的实施方式中，选择没食子酸作为对照品对蛇莓药材进行薄层鉴别。

在可选的实施方式中，选择没食子酸作为对照品对蛇莓药材进行薄层鉴定，其薄层层析的条件为：

吸附剂硅胶G；

点样量样品8μL、对照品2μL；

展开剂甲苯、醋酸乙酯和甲酸，所述甲苯、醋酸乙酯和甲酸的体积比为5:4:1；

显色喷以2％铁氰化钾-2％三氯化铁溶液。

在可选的实施方式中，所述的水分测定是指通过蛇莓药材干燥前后的重量变化，测定蛇莓中水分的含量。

在可选的实施方式中，所述水分测定中干燥温度为100～105℃。

在可选的实施方式中，所述总灰分测定是指使蛇莓药材在500～600℃下完全碳化后得到的残渣重量。

由于不同蛇莓药材个体之间含有的无机物差异较大，尤其是含多量草酸钙结晶的生药，测定总灰分并不足以说明外来无机物的存在，还需要测定酸不溶性灰分，所述在可选的实施方式中，还采用稀盐酸处理总灰分，并计算总灰分中的酸不溶性灰分。

在可选的实施方式中，所述处理总灰分的稀盐酸包括质量分数为10％的盐酸水溶液。

在可选的实施方式中，所述重金属含量测定包括采用铅含量为对照品，测定蛇莓药材完全碳化后残渣中重金属的含量。

在可选的实施方式中，所述砷盐含量测定包括采用中国药典》2010年版一部附录IX F砷盐检查法第一法测定蛇莓药材中的砷盐含量。

通过在采用没食子酸特征图谱对蛇莓药材中没食子酸含量测定的基础上，对蛇莓药材进一步地进行性状筛选、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、酸不溶性灰分测定或重金属含量测定，实现了对蛇莓药材的综合评价，充分保证了筛选得到的蛇莓药材的质量，实现了对蛇莓药材的质量控制。

本发明具有以下有益效果：

本发明提供的没食子酸含量的测定方法，采用盐酸溶液作为没食子酸的提取试剂，而后采用高效液相色谱法对提取组分中的没食子酸含量进行测定，与现有技术中采用有机试剂对没食子酸进行提取的方法相比，提取效果更加充分，同时，盐酸溶液提取物在后续的高效液相色谱检测过程中具有更好的溶解性，得到的流动相更加稳定，使得检测结果更加准确。

本发明利用没食子酸的盐酸提取溶液，通过高效液相色谱进行蛇莓药材特征图谱的构建，与现有有机提取溶液相比，构建过程中，盐酸提取溶液具有更好的均一性和流动性，其得到的图谱更加稳定、准确。

本发明还将得到的没食子酸特征图谱用于蛇莓药材的质量控制，在稳定、准确地检测蛇莓药材中没食子酸含量的基础上，对蛇莓药材的质量作出准确的评估，保证了使用蛇莓药材生产制得药品的质量。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为实施例1中专属性试验中对照品的色谱图；

图2为实施例1中专属性试验中空白样品的色谱图；

图3为实施例1中专属性试验中供试品的色谱图；

图4为实施例1中对照品浓度为200.6μg/mL的色谱图；

图5为实施例1中对照品浓度为100.3μg/mL的色谱图；

图6为实施例1中对照品浓度为50.14μg/mL的色谱图；

图7为实施例1中对照品浓度为20.06μg/mL的色谱图；

图8为实施例1中对照品浓度为10.03μg/mL的色谱图；

图9为实施例1中对照品浓度为4.011μg/mL的色谱图；

图10为实施例1中没食子酸对照品的标准曲线；

图11为实施例1的精密度试验中编号为1的样品的色谱图；

图12为实施例1的精密度试验中编号为2的样品的色谱图；

图13为实施例1的精密度试验中编号为3的样品的色谱图；

图14为实施例1的精密度试验中编号为4的样品的色谱图；

图15为实施例1的精密度试验中编号为5的样品的色谱图；

图16为实施例1的精密度试验中编号为6的样品的色谱图；

图17为实施例1的重现性试验中编号为1的样品的色谱图；

图18为实施例1的重现性试验中编号为2的样品的色谱图；

图19为实施例1的重现性试验中编号为3的样品的色谱图；

图20为实施例1的重现性试验中编号为4的样品的色谱图；

图21为实施例1的重现性试验中编号为5的样品的色谱图；

图22为实施例1的重现性试验中编号为6的样品的色谱图；

图23为实施例1的重复性试验中对照品的色谱图；

图24为实施例1的重复性试验中编号为1的样品的色谱图；

图25为实施例1的重复性试验中编号为2的样品的色谱图；

图26为实施例1的重复性试验中编号为3的样品的色谱图；

图27为实施例1的重复性试验中编号为4的样品的色谱图；

图28为实施例1的重复性试验中编号为5的样品的色谱图；

图29为实施例1的重复性试验中编号为6的样品的色谱图；

图30为实施例1的准确度试验中对照品的色谱图；

图31为实施例1的准确度试验中编号为1的样品的色谱图；

图32为实施例1的准确度试验中编号为2的样品的色谱图；

图33为实施例1的准确度试验中编号为3的样品的色谱图；

图34为实施例1的准确度试验中编号为4的样品的色谱图；

图35为实施例1的准确度试验中编号为5的样品的色谱图；

图36为实施例1的准确度试验中编号为6的样品的色谱图；

图37为实施例1的稳定性试验中编号为1的样品的色谱图；

图38为实施例1的稳定性试验中编号为2的样品的色谱图；

图39为实施例1的稳定性试验中编号为3的样品的色谱图；

图40为实施例1的稳定性试验中编号为4的样品的色谱图；

图41为实施例1的稳定性试验中编号为5的样品的色谱图；

图42为实施例1的稳定性试验中编号为6的样品的色谱图；

图43为实施例1的稳定性试验中编号为7的样品的色谱图；

图44为实施例1的稳定性试验中编号为8的样品的色谱图；

图45为实施例1蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图46为实施例2蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图47为实施例3蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图48为实施例4蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图49为实施例5蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图50为实施例6蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图51为实施例7蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图52为实施例8蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图53为实施例9蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图54为实施例10蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图55为实施例11蛇莓药材含量测定结果色谱图；

图56为实施例12中蛇莓叶片中壁有螺状纹理的非腺毛单细胞显微图；

图57为实施例12中蛇莓叶片中壁平直的非腺毛单细胞显微图；

图58为实施例12中蛇莓叶片中下表皮细胞和气孔显微图；

图59为实施例12中蛇莓叶片中上表皮细胞显微图；

图60为实施例12中蛇莓叶片中含有草酸钙簇晶的叶肉细胞显微图；

图61为实施例13～17中蛇莓药材供试品的色谱图；

图62为实施例18～23中蛇莓药材供试品的色谱图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

本实施例提供了一种蛇莓药材中没食子酸含量的检测方法，该方法包括如下步骤：

1.1检测溶液的配制

(1)对照品溶液的制备

精密称取没食子酸对照品适量，加3％盐酸溶液制成每1mL含没食子酸20μg的溶液，配制成200.6μg/mL、100.3μg/mL、50.14μg/mL、20.06μg/mL、10.03μg/mL、4.011μg/mL的对照品溶液。

(2)供试品溶液的制备

将隆顺榕制药厂批号Y1303122的蛇莓药材粉碎后过四号筛，称取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入3％的盐酸溶液50mL，称定重量，水浴回流4h，放冷，再称定重量，用3％的盐酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.2设定高效液相色谱条件

色谱柱：AgelaVenusil MP C18(4.6*250mm，5um 100A)；

流动相：甲醇-1.7％冰醋酸(1：99)；

波长：273nm；

流速：1.0mL/min；

柱温：30℃。

1.3专属性试验

取对照品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件进行测定，记录色谱图，结果见图1。

取空白溶剂10μL，注入液相色谱仪，照上述色谱条件进行测定，记录色谱图，结果见图2。

取供试品溶液10μL，注入液相色谱仪，照上述色谱条件进行测定，记录色谱图，结果见图3。

结果表明，供试品色谱图中与对照品色谱图中相同保留时间有对应的色谱峰，峰形良好。没食子酸色谱峰按照公式n＝5.54(t_R/W_h/2)²(n：理论塔板数；t_R：保留时间；W_h/2：半峰宽)计算，理论塔板数为17655。按照公式R＝2(t_R2-t_R1)/(W₁+W₂)(R：分离度；t_R：保留时间；W：峰宽)没食子酸分离度为2.41。空白溶剂色谱中，在相同的保留时间无色谱峰，说明本方法专属性良好，无干扰。

1.4线性试验

按照上述色谱条件将各浓度对照品溶液分别进样10μL，测定峰面积，结果见表1，附图4～9。

表1没食子酸线性考察结果

对没食子酸峰面积与进样量进行线性回归处理，得回归方程：

Y＝1659150.60X-1183.05r＝0.9999

以进样量为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线如图10。

结果表明，没食子酸在进样量0.04011μg～2.006μg之间呈良好的线性关系。

1.5精密度试验

取没食子酸对照品溶液按照上述色谱条件重复进样6次，计算相对标准偏差，结果见表2，附图11～16。

表2精密度试验结果

结果表明，没食子酸对照品溶液的相对标准偏差为0.58％，符合要求。

1.6重现性试验

取供试品按照上述色谱条件进样10μL测定，重复进样6次，计算相对标准偏差，结果见表3，附图17～22。

表3重现性试验结果

结果表明，供试品溶液的相对标准偏差为1.12％，符合要求。

1.7重复性试验

取本品粉末(过四号筛，批号Y1303122)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入3％盐酸溶液50mL，称定重量，水浴回流4小时，放冷，再称定重量，用3％盐酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。平行6份，按照上述色谱条件进样10μL测定，计算相对标准偏差，结果见表4，附图23-29。

表4重复性试验结果

结果表明，蛇莓样品中没食子酸的平均含量为1.71mg/g，相对标准偏差为1.36％，符合要求。

1.8准确度试验

取本品粉末(过四号筛，批号Y1303122)约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入3％盐酸溶液50mL，再精密加入对照品溶液1mL(合0.5014mg)，称定重量，水浴回流4小时，冷却，用3％盐酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。平行6份，按照上述色谱条件进样10μL测定，计算相对标准偏差，结果见表5，附图30-36。

表5准确度试验结果

结果表明，没食子酸的平均回收率为98.79％，相对标准偏差为1.71％，证明该方法准确度良好。

1.9稳定性试验

取本品粉末(过四号筛，批号Y1303122)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入3％盐酸溶液50mL，称定重量，水浴回流4小时，放冷，再称定重量，用3％盐酸溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按照上述色谱条件分别在0、2、6、8、12、16、18、20小时时进样10μL，测定没食子酸峰面积，计算相对标准偏差，结果见表6，附图37-44。

表6稳定性试验结果

结果表明，供试品溶液在20小时内稳定性良好。

实施例2～11

本组实施例与实施例1的区别仅在于，实施例2～11所用供试品的蛇莓药材，分别为隆顺榕制药厂批号为YFZ001、YFZ002、YFZ003、YFZ004、YFZ005、YFZ006、YFZ007、YFZ008、YFZ009、YFZ010的蛇莓药材。

将实施例1～11按照上述色谱条件进样10μL测定，计算没食子酸含量，结果见表7，附图45-55。

表7不同批次蛇莓药材含量测定结果

实施例12

本实施例将批号为Y1303122的蛇莓药材叶片置于显微镜下观察，如图56-图60所示，上表皮细胞类多角形，垂周壁平直，排列紧密，如图59所示。下表皮细胞垂周壁波状弯曲，如图58所示。非腺毛单细胞，长短不一，长180～1300μm，直径20～45μm，壁平直或表面有螺状纹理，如图56和57所示。腺毛长60～125μm，头部2细胞，直径25～40μm；柄2～3细胞。下表皮气孔较多，不定式或不等式，叶肉细胞中含草酸钙簇晶众多，直径10～38μm，如图60所示。

实施例13～23

本组实施例分别对隆顺榕制药厂蛇莓药材批号为Y1303122、YFZ001、YFZ002、YFZ003、YFZ004、YFZ005、YFZ006、YFZ007、YFZ008、YFZ009和YFZ010的十一批次药材进行了薄层层析，薄层层析方法如下：

(1)供试品溶液的配制

分别取十一批次蛇莓药材粉碎后的粉末1g，加甲醇10mL，超声处理30分钟，滤过，即得。

(2)对照品溶液的配制

取没食子酸对照品1mg，置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得。

(3)薄层层析条件

吸附剂硅胶G；

点样量样品8μL、对照品2μL；

展开剂甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5：4：1)；

显色喷以2％铁氰化钾-2％三氯化铁溶液。

(4)结果与分析

十一批蛇莓药材(批号为Y1303122、YFZ001、YFZ002、YFZ003、YFZ004、YFZ005、YFZ006、YFZ007、YFZ008、YFZ009、YFZ010)供试品按上述方法鉴别，供试品色谱中，在与没食子酸对照品色谱相对应的位置上显相同颜色的斑点，如图61和62所示，图61中1没食子酸对照品；2-6蛇莓药材供试品(批号依次为YFZ001、YFZ002、YFZ003、YFZ004、Y1303122)；图62中4没食子酸对照品，1-3、5-7蛇莓药材供试品(批号分别为YFZ005-YFZ007、YFZ008-010)。而后分别计算各批次层析结果的R_f值(Rf＝组分移动的距离/溶剂前沿移动的距离＝原点至组分斑点中心的距离/原点至溶剂前沿的距离)，结果见表8。

表8十一批次蛇莓药材薄层层析的R_f值

结果表明，该薄层鉴别方法能较好的鉴别蛇莓药材，可用于蛇莓药材质量标准薄层鉴别。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种蛇莓药材中没食子酸含量的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括，

采用高效液相色谱法检测蛇莓药材中没食子酸提取液中没食子酸的含量；其中，采用盐酸溶液提取蛇莓药材中的没食子酸获得蛇莓药材中没食子酸提取液。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述盐酸溶液的体积百分比为1％～5％；

优选地，所述盐酸溶液的浓度为3％。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述蛇莓药材包括蛇莓药材粉末，所述蛇莓药材粉末包括采用四号筛筛选得到的。

4.根据权利要求1～3任一项所述的测定方法，其特征在于，所述蛇莓药材与盐酸溶液的质量体积比为1:100。

5.一种蛇莓药材特征图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括，设定色谱条件，将包含没食子酸的对照品溶液与包含蛇莓药材的盐酸提取溶液的供试品溶液通过高效液相色谱检测，得到特征图谱。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述色谱条件为：

色谱柱：AgelaVenusil MP C18；

流动相：甲醇-1.7％冰醋酸；

波长：273nm；

流速：1.0mL/min；

柱温：30℃。

7.权利要求5或6所述的蛇莓药材特征图谱的构建方法在蛇莓药材质量控制中的应用。

8.一种蛇莓药材质量控制方法，其特征在于，所述质量控制方法包括，应用权利要求5或6所述的构建方法得到的特征图谱筛选没食子酸含量在1.09mg/g以上的蛇莓药材。

9.根据权利要求8所述的质量控制方法，其特征在于，所述的质量控制方法还包括，蛇莓药材的性状筛选、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、酸不溶性灰分测定或重金属含量测定中的至少两种或两种以上筛选方法；

优选地，所述水分测定中干燥温度为100～105℃；

优选地，所述总灰分测定是指使蛇莓药材在500～600℃下完全碳化后得到的残渣重量；

优选地，采用稀盐酸处理总灰分，并计算总灰分中的酸不溶性灰分；

优选地，处理总灰分的稀盐酸包括质量分数为10％的盐酸水溶液；

优选地，所述重金属含量测定包括采用铅含量为对照品，测定蛇莓药材完全碳化后残渣中重金属的含量。

10.根据权利要求9所述的质量控制方法，其特征在于，所述的薄层鉴别的层析条件为：

吸附剂硅胶G；

点样量样品8μL、对照品2μL；

展开剂甲苯、醋酸乙酯和甲酸，所述甲苯、醋酸乙酯和甲酸的体积比为5:4:1；

显色喷以2％铁氰化钾-2％三氯化铁溶液。

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