CN109696513A - 一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及其生长年限的方法 - Google Patents
一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及其生长年限的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109696513A CN109696513A CN201811572380.0A CN201811572380A CN109696513A CN 109696513 A CN109696513 A CN 109696513A CN 201811572380 A CN201811572380 A CN 201811572380A CN 109696513 A CN109696513 A CN 109696513A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sample
- years
- percentage
- ginseng
- content
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/89—Inverse chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及年限的方法。所述方法的过程包括：称取待测样品，检测样品中人参皂苷Rg1、Rb1、Re和Rf的含量，并计算得到Rg1的含量占样品重量的百分比，以及Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1的比值，即可判断样品的种类及年限。发明人通过大量的摸索试验，找到了人参皂苷中Rg1的含量占样品重量的百分比，以及Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1的比值和人参种类以及生长年限之间的规律，由此得出了可以快速判断人参种类以及生长年限之间的标准，即可以简单的通过检测人参样品中Re、Rg1、Rb1、和Rf的含量，并计算得出Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1的比值即可鉴别样品的种类和生长年限，所述鉴别方法不仅简单、快速，而且适用性广，不受样品状态的限制，且鉴别结果准确。
Description
技术领域
本发明属于化学分析检测领域，涉及利用中药有效成分之间含量比例鉴别原料药种类及其生长年限的方法，特别涉及一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及年限的方法。
背景技术
人参是五加科(Araliaceae)植物人参Panax ginseng C.A.Meyer.的干燥根和根茎，栽培的称“园参”，播种在山林野生状态下自然生长的称“林下山参”，是中国吉林长白山孕育的天然瑰宝之一。人参具有大补元气，复脉固脱，补脾益肾，生津养血，安神益智之功效。
研究表明人参中已知的人参皂苷单体有50余种，其中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rb3和Rd是人参主要活性成分，其质量分数占人参根总皂苷的90％以上。人参皂苷具有提高人体免疫力、促进物质代谢、改善心血管功能、抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老等多种药理作用。而在当今社会，人参不仅是一味珍贵的药材，还以一种文化的象征或者收藏品出现在市场上，生长年限长、根型好的野山人参更为众人所追捧。
目前，人参药材种类及生长年限的鉴别主要有外观性状的观察、分子生物学基因测序以及化学分析人参皂苷含量高低等方法。但外观性状鉴别需要保存人参样品的完整，对于人参药材饮片或制成粉末的样品，则难以从外观性状上鉴别其生长年限；利用分子生物学技术测定不同生长年限人参的基因序列，成本高且效率低；从人参样品含量测定结果来看，人参总皂苷或单个成分含量与人参生长年限的变化规律并不统一，因此仅通过人参皂苷含量测定亦不能很好鉴别人参药材生长年限。
因此，有必要提供一种不受样品状态局限的检测方法，可以检测任何状态的样品，即使是制成片状或者粉末状的样品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及年限的方法。发明人通过研究大量样品中人参皂苷含量和种类以及生长年限之间的关系和规律，探究到了可以用来快速判断人参样品的种类和生长年限的标准，不仅适用性广，适用于市面上几乎所有人参样品的鉴别，且不受样品状态的限制；而且鉴别结果准确。
本发明的上述目的是通过以下方案予以实现的：
一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及年限的方法，其过程包括：称取待测样品，检测样品中人参皂苷Rg1、Rb1、Re和Rf的含量，并计算得到Rg1的含量占样品重量的百分比，以及Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1的比值，即可判断样品的种类及年限。
优选地，所述方法中的判断标准为：
当Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.35％，Re/Rg1≥1.00，则样品为3年以下的园参；
当0.35％＜Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.43％，0.82＜Re/Rg1≤1.00，1.25＜Rb1/Rg1＜1.60，则样品为3年至5年的园参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45％，Re/Rg1≤0.82，Rb1/Rg1＜1.30，则样品为6年及以上的园参。
当0.35％≤Rg1的含量占样品重量的百分比＜0.41％，0.90＜Re/Rg1＜1.00，1.62＜Rb1/Rg1＜1.80，则样品为8年至12年的林下参；
当0.42％≤Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.47％，0.75＜Re/Rg1≤1.15，1.62＜Rb1/Rg1＜2.0，0.20≤Rf/Rg1＜0.23，则样品为13年至15年的林下参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比＜0.42％，Re/Rg1≥1.15，Rb1/Rg1≥2.0，Rf/Rg1＜0.20，则样品为16年以上的林下参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.43％，0.50≤Re/Rg1≤0.53，1.30＜Rb1/Rg1≤1.50，则样品为8年至10年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45％，0.53≤Re/Rg1≤0.60，1.50＜Rb1/Rg1≤1.80，则样品为11年至14年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45％，0.60＜Re/Rg1≤0.80，1.80＜Rb1/Rg1≤2.00，Rf/Rg1≥0.24，则样品为15年至19年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46％，0.78＜Re/Rg1≤0.88，2.00＜Rb1/Rg1≤2.20，Rf/Rg1≥0.26，则样品为20年至25年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46％，0.88＜Re/Rg1≤0.92，2.22＜Rb1/Rg1≤2.25，Rf/Rg1≥0.27，则样品为26年至29年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46％，Re/Rg1＞0.92，Rb1/Rg1＞2.25，Rf/Rg1≥0.28，则样品为30年以上的野山参。
发明人通过大量的摸索试验，找到了人参皂苷中Rg1的含量占样品重量的百分比，以及Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1的比值和人参种类以及生长年限之间的规律，由此得出了可以快速判断人参种类以及生长年限之间的标准，可以简单的通过检测人参样品中Re、Rg1、Rb1、和Rf的含量，并计算得出Rg1的含量占样品重量的百分比，以及Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1的比值即可鉴别样品的种类和生长年限，所述鉴别方法不仅简单、快速，而且适用性广，不受样品状态的限制，且鉴别结果准确。
优选地，检测人参皂苷Rg1、Rb1、Re和Rf含量前，样品的前处理过程为先将待测样品粉碎过2～8号筛，烘干至恒重，然后称取样品加入甲醇后超声提取，提取液去除溶剂后用乙腈-水混合液复溶，过滤膜过滤即得待测样液。
优选地，所述乙腈-水混合液中乙腈:水的体积比为5～50:95～50；更优选地，乙腈:水的体积比为19:81。
优选地，所述样品粉碎后过4号筛；样品烘干过程中温度不高于40℃；所述甲醇的体积质量分数为30～90％；所述超声提取的温度为10～80℃，时间为15～120min；去除溶剂的过程中，温度不超过80℃。
优选地，，所述甲醇的体积质量分数为70％；所述超声提取的温度为40℃，时间为50min，去除溶剂的过程中，温度为70℃。
优选地，甲醇提取过程为2～3次，并合并提取液。
优选地，所述滤膜为0.22微孔滤膜。
优选地，所述待测样采用反相高效液相色谱仪检测人参皂苷Rg1、Rb1、Re和Rf的含量。
优选地，反相高效液相色谱仪的检测条件为：色谱柱为C18柱，加保护预柱；洗脱过程为：以乙腈-水为流动相梯度洗脱；柱温为35℃；流动相的流速为1.0mL/min；进样量为10μL；检测波长为203nm。
优选地，梯度洗脱的过程为：体积分数为19％的乙腈洗脱0～15min，体积分数为19％～20％的乙腈洗脱15～25min；体积分数为20％～31％的乙腈洗脱25～45min；体积分数为31％～35％的乙腈洗脱45～55min；体积分数为35％～40％的乙腈洗脱55～65min；体积分数为40％～19％的乙腈洗脱65～66min。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
发明人通过研究大量样品中人参皂苷含量和种类以及生长年限之间的关系和规律，探究到了可以用来快速判断人参样品的种类和生长年限的标准，所述标准不仅其鉴别适用性广，适用于市面上几乎所有人参样品的鉴别，且不受样品状态的限制；而且鉴别结果准确。
附图说明
图1为8种人参皂苷标准品混合溶液的反相高效液相色谱图。
图2为实施例1中检测样品中8种人参皂苷含量的反相高效液相色谱图。
图3为实施例1中检测样品前空白对照溶液的反相高效液相色谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
以下实施例所使用的仪器与试药为：
Dionex Ultimate 3000高效液相色谱仪，配制四元梯度泵、柱温箱、自动进样器、DAD二极管阵列检测器(美国Thermo Fisher Scientific公司)；Elmasonic P 300H超声波清洗器(德国Elma公司)；BT224S型万分之一、BT125D型十万分之一电子天平(德国Sartorius公司)。
对照品人参皂苷Rg1(批号110703-201731，质量分数93.6％)，Re(批号110754-201626，质量分数97.4％)，Rf(批号111719-201505，质量分数98％)，Rb1(批号110704-201625，质量分数95.0％)，Rb2(批号111715-201203，质量分数93.8％)，Rb3(批号111686-201504，质量分数97.0％)，Rd(批号111818-201302，质量分数94.2％)均购自中国食品药品检定研究院；对照品人参皂苷Rc(成都曼思特生物科技有限公司，批号：MUST-12052705，质量分数98％)；甲醇、乙腈(色谱纯，德国Merck公司)，其他试剂均为分析纯，超纯水由Veolia水处理系统制得(英国ELGA公司)。实施例中所利用到的各批次人参药材样品均购自吉林省参源商贸有限公司。
采用8种人参皂苷标准品配置的混合标样采用反相高效液相色谱检测的结果如图1所示。
实施例1
检测已知种类和生长年限的人参样品中的8种人参皂苷(即人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rb3和Rd)，探究人参皂苷的含量和种类、生长年限之间的规律。
待检测的样品的种类有：园参、林下参和野山生三种，生长年限为3～30年。
(1)样品检测的前处理过程：
分别取已知种类和年限的人参样品，粉碎成粉末，过4号筛，精密称定0.1g粉末样品，置于50mL锥形瓶中，精密量取70％甲醇10mL，超声处理(功率380W，频率37kHz)50min，温度为40℃，超声结束后，滤出滤液，然后再加入10mL 70％甲醇超声提取第2次，超声结束后，合并2次的滤液，70℃水浴挥干，然后用适量流动相乙腈-水(19：81)复溶，并定容5mL量瓶中，摇匀，滤液用微孔滤膜(0.22μm)滤过，即得待测液。
(2)采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测待测液中的8种人参皂苷的含量，色谱柱为Kromasil M05CLA15-C18(150mm×4.6mm,5.0μm)，Phenomenex KJ0-4282预柱，以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(以下百分比均为体积百分比)，0～15min，19％A；15～25min，19％～20％A；25～45min，20％～31％A；45～55min，31％～35％A；55～65min，35％～40％A；65～66min，40％～19％A；流速：1.0mL/min，柱温：35℃，检测波长：203nm，进样量：10μL，理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000。
其中一个样品经反相高效液相色谱检测后的色谱图如图2所示，图3为样品检测前空白对照溶液的色谱图，由于所有样品检测的图谱类似，因此此处仅提供一份样品检测色谱图作为代表。
各种种类和生长年限的人参样品中8种人参皂苷的检测结果见表1所示。
表1各种种类和生长年限的人参样品中8种人参皂苷的检测结果(n＝3)
注：为了便于表述，每种人参皂苷的含量单位采用mg/g表示，含量百分比是指某种或多种人参皂苷的重量占样品重量的百分比，上述数据都是多个样品检测的平均值。
依据中国药典中对于人参药材的规定，当Rg1+Re的含量百分比≥0.3％；Rb1的含量百分比≥0.20％，则为合格品，否则为不合格的人参产品。从表1中的数据可知，本次试验采用的样品均为合格人参。
对表1中园参的数据进行研究，其中Rg1的含量以及其他人参皂苷与Rg1含量的比值关系如表2所示。
表2园参中Rg1的含量以及其他人参皂苷与Rg1含量的比值关系
研究表1和表2中的数据可知，随着生长年限的增长，园参中8种皂苷总量、Rg1的重量百分比、Re/Rg1、Rb1/Rg1、Rc/Rg1和Rd/Rg1的比值均逐渐减小，且不同年份之间各指标之间的差异在统计学上是显著的(P＜0.001)，而且再这5个不同年份之间具有显著性差异的指标中，Rg1的重量百分比、Re/Rg1和Rb1/Rg1与园参的生长年限之间存在一定规律的。
对表1中林下参的数据进行研究，其中Rg1的含量以及其他人参皂苷与Rg1含量的比值关系如表3所示。
表3林下参中Rg1的含量以及其他人参皂苷与Rg1含量的比值关系
同样地，对林下参中8种人参皂苷的含量进行研究，发现其中人参皂苷Re/Rg1的比值呈先减小后增加趋势(P＜0.001)，生长年限15年为转折点，生长年限15年以上的林下参Re/Rg1的比值随着年限的增加而增大；而Rf/Rg1的比值在生长年限15年以内无明显规律，但生长年限15年以上的林下参Rf/Rg1的比值随着年限的增加而降低。
对表1中野山参的数据进行研究，其中Rg1的含量以及其他人参皂苷与Rg1含量的比值关系如表4所示。
表4野山参中Rg1的含量以及其他人参皂苷与Rg1含量的比值关系
野山参中8种皂苷总量、Rg1、Re和Rb1的含量随着年限的增加而增大，且Re/Rg1和Rb1/Rg1的比值以随着年限的增加而增大。
通过研究表1～4中的数据，可知Rg1的重量百分比和Re/Rg1、Rb1/Rg1、Rf/Rg1与人参的种类(园参、林下参、野山参)及其生长年限之间存在一定的规律，而Rc/Rg1、Rb2/Rg1、Rb3/Rg1、Rd/Rg1与人参的种类(园参、林下参、野山参)及其生长年限则未发现有明显的规律。为此，对表1中各批次的样品中Rg1的重量百分比、Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1进行整理，如表5所示。
表5各批次样品中Rg1的重量百分比、Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1结果
经仪器检测得到的数据，为了保证检测结果更为精确，检测的结果数值小数点后保留3位数，但在实际检测或者评比的过程中，为了便于操作，各指标通常保留2位小数位即可，因此表5中的数据经过四舍五入后再进行下一步的研究。
通过对表5中的数据进行研究，得到如表6所示的规律。
表6人参的种类、生长年限与人参皂苷含量或比值之间的关系
注：表6中的“-”表示不需要这一参数即可准确判断人参的种类和生长年限。
表6中表述的规律为：
当Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.35％，Re/Rg1≥1.00，则样品为3年以下的园参；
当0.35％＜Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.43％，0.82＜Re/Rg1≤1.00，1.25＜Rb1/Rg1＜1.60，则样品为3年至5年的园参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45％，Re/Rg1≤0.82，Rb1/Rg1＜1.30，则样品为6年及以上的园参。
当0.35％≤Rg1的含量占样品重量的百分比＜0.41％，0.90＜Re/Rg1＜1.00，1.62＜Rb1/Rg1＜1.80，则样品为8年至12年的林下参；
当0.42％≤Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.47％，0.75＜Re/Rg1≤1.15，1.62＜Rb1/Rg1＜2.0，0.20≤Rf/Rg1＜0.23，则样品为13年至15年的林下参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比＜0.42％，Re/Rg1≥1.15，Rb1/Rg1≥2.0，Rf/Rg1＜0.20，则样品为16年以上的林下参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.43％，0.50≤Re/Rg1≤0.53，1.30＜Rb1/Rg1≤1.50，则样品为8年至10年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45％，0.53≤Re/Rg1≤0.60，1.50＜Rb1/Rg1≤1.80，则样品为11年至14年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45％，0.60＜Re/Rg1≤0.80，1.80＜Rb1/Rg1≤2.00，Rf/Rg1≥0.24，则样品为15年至19年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46％，0.78＜Re/Rg1≤0.88，2.00＜Rb1/Rg1≤2.20，Rf/Rg1≥0.26，则样品为20年至25年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46％，0.88＜Re/Rg1≤0.92，2.22＜Rb1/Rg1≤2.25，Rf/Rg1≥0.27，则样品为26年至29年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46％，Re/Rg1＞0.92，Rb1/Rg1＞2.25，Rf/Rg1≥0.28，则样品为30年以上的野山参。
实施例2
判断实施例1中得到的判断规律的准确性和适用性。
测试采用的样品详情请见表7所示。
表7测试样品详情
依照实施例1中样品检测的前处理过程和检测过程检测表7中所述样品含有的人参皂苷Rg1、Re、Rf和Rb1的含量，在样品检测前，由一人按照表7中的分类标识样品，由另一人在不知晓上述样品信息的情况下，参照实施例1中的方法检测其人参皂苷的含量，并进行后续的计算和判断，检测结果见表8所示。
表8样品中Rg1、Re、Rf和Rb1含量的检测结果
| 组别 | Rg<sub>1</sub>/％ | Re/％ | Rb<sub>1</sub>/％ | Rf/％ |
| S1 | 0.425 | 0.355 | 0.560 | 0.099 |
| S2 | 0.485 | 0.361 | 0.601 | 0.113 |
| S3 | 0.385 | 0.363 | 0.689 | 0.084 |
| S4 | 0.442 | 0.495 | 0.778 | 0.101 |
| S5 | 0.461 | 0.405 | 0.972 | 0.120 |
| S6 | 0.475 | 0.455 | 1.154 | 0.141 |
注：表8中各人参皂苷的比分比是指该种皂苷的质量占样品质量的百分比。
依据表8中的检测结果计算Rb1/Rg1、Re/Rg1和Rf/Rg1的比值，结果见表9所示。
表9样品中Rg1的重量百分比、Rb1/Rg1、Re/Rg1和Rf/Rg1的比值结果
| 组别 | Rg<sub>1</sub>/％ | Re/Rg<sub>1</sub> | Rb<sub>1</sub>/Rg<sub>1</sub> | Rf/Rg<sub>1</sub> |
| S1 | 0.425 | 0.835 | 1.318 | 0.233 |
| S2 | 0.485 | 0.744 | 1.239 | 0.233 |
| S3 | 0.385 | 0.943 | 1.790 | 0.218 |
| S4 | 0.442 | 1.120 | 1.760 | 0.229 |
| S5 | 0.461 | 0.879 | 2.108 | 0.260 |
| S6 | 0.475 | 0.958 | 2.429 | 0.297 |
然后将表9中每组样品的各项结果按照表6所示标准一一对应，得到判断结果，结果如表10所示。
表10样品的预测结果和实际情况
通过表10中实际样品情况和判断情况的对比可知，二者的结论相同，由此可判断实施例1中所得到的判断标准适用于人参样品的种类和生长年限判断，且判断结果准确。
实施例3
进一步地验证实施例1的判断标准的准确性。
发明人采集了不同地区、相同生长年限的人工种植的园参生晒人参样品，参照实施例2中的方法再次进行人参种类及年限预测双盲实验。
样品的实际情况和判断情况见表11所示。
表11不同地区、相同生长年限的园参的实际情况和判断情况
通过表11中实际样品情况和判断情况的对比可知，二者的结论相同，由此可判断实施例1中所得到的判断标准适用于人参样品的种类和生长年限判断，且判断结果准确。
综上，从上述两个验证实验结果来看，实施例1中的判断标准适用于判断人参样品的种类和生长年限，且判断结果准确。虽然这里仅提供了两个具有代表性的验证实验过程和结果，但并不代表发明人仅进行了上述验证实验过程。实际上，发明人为了验证实施例1中得到的判断标准是否适用以及方法的准确性，进行了不少于50批次不重复样品的验证实验，所有的判断结果均与实际结果对应，准确性100％，只是在这里提供两个具有代表性的验证实验过程和结果予以证明。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，对于本领域的普通技术人员来说，在上述说明及思路的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及年限的方法，其特征在于，其过程包括：称取待测样品，检测样品中人参皂苷Rg1、Rb1、Re和Rf的含量，并计算得到Rg1的含量占样品重量的百分比，以及Re/Rg1、Rb1/Rg1和Rf/Rg1的比值，即可判断样品的种类及年限。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述方法中的判断标准为：
当Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.35%，Re/Rg1≥1.00，则样品为3年以下的园参；
当0.35%＜Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.43%，0.82＜Re/Rg1≤1.00，1.25＜Rb1/Rg1＜1.60，则样品为3年至5年的园参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45%，Re/Rg1≤0.82，Rb1/Rg1＜1.30，则样品为6年及以上的园参；
当0.35%≤Rg1的含量占样品重量的百分比＜0.41%，0.90＜Re/Rg1＜1.00，1.62＜Rb1/Rg1＜1.80，则样品为8年至12年的林下参；
当0.42%≤Rg1的含量占样品重量的百分比≤0.47%，0.75＜Re/Rg1≤1.15，1.62＜Rb1/Rg1＜2.0，0.20≤Rf/Rg1＜0.23，则样品为13年至15年的林下参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比＜0.42%，Re/Rg1≥1.15，Rb1/Rg1≥2.0，Rf/Rg1＜0.20，则样品为16年以上的林下参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.43%，0.50≤Re/Rg1≤0.53，1.30＜Rb1/Rg1≤1.50，则样品为8年至10年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45%，0.53≤Re/Rg1≤0.60，1.50＜Rb1/Rg1≤1.80，则样品为11年至14年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.45%，0.60＜Re/Rg1≤0.80，1.80＜Rb1/Rg1≤2.00，Rf/Rg1≥0.24，则样品为15年至19年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46%，0.78＜Re/Rg1≤0.88，2.00＜Rb1/Rg1≤2.20，Rf/Rg1≥0.26，则样品为20年至25年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46%，0.88＜Re/Rg1≤0.92，2.22＜Rb1/Rg1≤2.25，Rf/Rg1≥0.27，则样品为26年至29年的野山参；
当Rg1的含量占样品重量的百分比≥0.46%，Re/Rg1＞0.92，Rb1/Rg1＞2.25，Rf/Rg1≥0.28，则样品为30年以上的野山参。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，检测人参皂苷Rg1、Rb1、Re和Rf含量前，样品的前处理过程为先将待测样品粉碎过2～8号筛，烘干至恒重，然后称取样品加入甲醇后超声提取，提取液去除溶剂用乙腈-水混合液复溶，过滤膜过滤即得待测样液。
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述样品粉碎后过4号筛；样品烘干过程中温度不高于40℃；所述甲醇的体积质量分数为30～90%；所述超声提取的温度为10～80℃，时间为15～120 min；去除溶剂的过程中，温度不超过80℃。
5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述甲醇的体积质量分数为70%；所述超声提取的温度为40℃，时间为50 min，去除溶剂的过程中，温度为70℃。
6.根据权利要求4所述方法，其特征在于，甲醇提取过程为2～3次，并合并提取液。
7.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述滤膜为0.22微孔滤膜。
8.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述待测样采用反相高效液相色谱仪检测人参皂苷Rg1、Rb1、Re和Rf的含量。
9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，反相高效液相色谱仪的检测条件为：C18色谱柱，加保护预柱；洗脱过程为：以乙腈-水为流动相梯度洗脱；柱温为35℃；流动相的流速为1.0 mL/min；进样量为10 μL；检测波长为203 nm。
10.根据权利要求9所述方法，其特征在于，梯度洗脱的过程为：体积分数为19%的乙腈洗脱0～15 min，体积分数为19%～20%的乙腈洗脱15～25 min；体积分数为20%～31%的乙腈洗脱25～45 min；体积分数为31%～35%的乙腈洗脱45～55 min；体积分数为35%～40%的乙腈洗脱55～65 min；体积分数为40%～19%的乙腈洗脱65～66 min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811572380.0A CN109696513A (zh) | 2018-12-21 | 2018-12-21 | 一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及其生长年限的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811572380.0A CN109696513A (zh) | 2018-12-21 | 2018-12-21 | 一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及其生长年限的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109696513A true CN109696513A (zh) | 2019-04-30 |
Family
ID=66232086
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811572380.0A Pending CN109696513A (zh) | 2018-12-21 | 2018-12-21 | 一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及其生长年限的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109696513A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111912927A (zh) * | 2020-08-26 | 2020-11-10 | 沈阳药科大学 | 鉴别野山参与园参、林下山参与园参的方法 |
| CN113254847A (zh) * | 2021-03-31 | 2021-08-13 | 北京瑞草科技有限公司 | 一种西洋参皂苷含量估算方法及其西洋参筛选方法 |
-
2018
- 2018-12-21 CN CN201811572380.0A patent/CN109696513A/zh active Pending
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| 孙海 等: "利用HPLC/MS对野山参和林下参皂苷的分析", 《特产研究》 * |
| 崔丽丽 等: "吉林省不同产地不同年限林下参皂苷含量比较", 《吉林农业大学学报》 * |
| 方小衡 等: "《学校卫生与健康促进》", 31 May 2010, 广东高等教育出版社 * |
| 段金廒 等: "《中药资源化学》", 30 September 2013, 中国中医药出版社 * |
| 秦伟: "《初中生物学教科书经典教学实验介评》", 28 February 2014, 广东科技出版社 * |
| 窦德强 等: "《中国林下山参研究》", 31 March 2013, 辽宁科学技术出版社 * |
| 肖新月 等: "不同生长年限的人参中8种主要皂苷成分的分析研究", 《药物分析杂志》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111912927A (zh) * | 2020-08-26 | 2020-11-10 | 沈阳药科大学 | 鉴别野山参与园参、林下山参与园参的方法 |
| CN113254847A (zh) * | 2021-03-31 | 2021-08-13 | 北京瑞草科技有限公司 | 一种西洋参皂苷含量估算方法及其西洋参筛选方法 |
| CN113254847B (zh) * | 2021-03-31 | 2023-09-19 | 北京瑞草科技有限公司 | 一种西洋参皂苷含量估算方法及其西洋参筛选方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108226313A (zh) | 地黄中苷类成分的同时测定及指纹图谱构建方法 | |
| CN106526002A (zh) | 参芪降糖制剂含量测定方法及其在整体质量控制中的应用 | |
| CN106124639A (zh) | 杜仲药材的多成分含量测定方法 | |
| CN101256177A (zh) | 中药数字化色谱指纹谱相似度评价系统 | |
| CN111999395A (zh) | 一种药物制剂的指纹图谱检测方法 | |
| CN106442789A (zh) | 复方血脂宁提取物指纹图谱的建立及其活性成分定量分析方法 | |
| Xie et al. | Simultaneous determination of six main components in Bushen Huoxue prescription by HPLC-CAD | |
| CN107402265B (zh) | 康媛颗粒指纹图谱的检测方法 | |
| CN109696513A (zh) | 一种利用人参皂苷成分含量及其比例鉴别人参种类及其生长年限的方法 | |
| CN109521106A (zh) | 一种同时检测黄芪桂枝五物颗粒中四种成分含量的方法 | |
| CN108459128A (zh) | 一种当归四逆汤组合物的质量控制方法 | |
| CN109991330A (zh) | 一种林下山参的指纹图谱的检测方法 | |
| CN111948330B (zh) | 仁术健胃颗粒指纹图谱的检测方法 | |
| CN111912927A (zh) | 鉴别野山参与园参、林下山参与园参的方法 | |
| CN108663440A (zh) | 裸花紫珠药材uplc指纹图谱构建方法及标准指纹图谱 | |
| CN109521123B (zh) | 一种pmp-hplc法在园参与林下参鉴别中的应用 | |
| CN113759047B (zh) | 人参中皂苷含量的检测方法及园参和野山参的鉴别方法 | |
| CN113759011B (zh) | 一种银柴胡及其制剂特征图谱的建立方法 | |
| CN104569209A (zh) | 一种熟三七的质量检测方法 | |
| CN114942291A (zh) | 潜阳育阴颗粒的质量检测方法 | |
| CN108680596A (zh) | 一种鉴别温县铁棍山药的方法 | |
| CN111220719B (zh) | 一种人参药材质量的指纹图谱评价方法 | |
| CN109507310B (zh) | 养精种玉方剂的指纹图谱构建方法和检测方法 | |
| CN107064402B (zh) | 一种益气养血、补肾壮阳的药物制剂的检测方法 | |
| CN110308213B (zh) | 滋肾育胎丸指纹图谱构建方法及其在质量检测中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190430 |