CN113215144B - 植物核酸提取与糖蜜处理结合的处理方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种植物核酸提取与糖蜜处理相结合的方法，属于核酸制备技术领域。将天然植物原料的核酸提取过程中收集到的中间产物及废液合理应用到酵母培养基糖蜜处理关键步骤中，使得两种工艺有机结合起来，所述方法不仅提取了所需的植物核酸原料，而且解决了提取过程中中间产物的处理问题，利用此方法处理所得的发酵培养基的发酵速率相较于普通酸法处理的发酵培养基明显提升，所得酵母核酸含量明显增加，因此，本发明提供了一种原料提取和废液利用的综合工艺。

Description

植物核酸提取与糖蜜处理结合的处理方法

技术领域

本发明属于核酸制备技术领域，具体涉及植物核酸提取与糖蜜处理结合的处理方法。

背景技术

核糖核酸(RNA)是一类十分重要的生物大分子，在基因的表达和蛋白质的生物合成起着关键的作用。随着科研水平的提高，核糖核酸在医药、保健品、食品加工和化妆品等方面的应用越来越广泛。在最新的医学研究表明，核糖核酸(RNA)可激活人体的T细胞及B细胞的活性，对于一些与人体免疫功能下降有关的疾病如慢性支气管炎、哮喘病、慢性乙型肝炎以及部分癌症有显著的疗效。另外通过对反义核酸的核酸骨架、核糖、碱基及其末端引入各种基团后用于治疗，能够有效的抑制肿瘤或病毒细胞基因的转录与翻译等，对人类未来攻克此类顽疾提供了无限可能。

目前工业上生产RNA最常用原料是酵母菌，酵母中核糖核酸(RNA)含量较多，一般在6％～9％，脱氧核糖核酸(DNA)很少，一般为0.03～0.516％，因此，提取RNA以酵母为原料较为为理想。酵母生长所需碳源、氮源、生长因子和无机离子都由发酵培养基提供，选取合适的培养基不仅可以加速酵母发酵时间，提高原料利用率，还可以增加酵母的核酸、多糖等其他营养物质的含量。为降低生产成本，当前培养酵母菌的培养基中最常见原料为糖蜜，糖蜜为产糖的副产品，价格低廉，是一种理想的发酵原料。其中含有可发酵糖30-60％，主要为蔗糖，还含有维生素、矿物质、菌体蛋白、核酸、表面活性物及促生长因子(生物活性物质)等成分。但是，糖蜜不可以直接作为发酵培养基使用，因为其中还有胶质、焦糖、黑色素组成的胶体物质，发酵过程中会吸附在酵母细胞上从而抑制细胞的生长，同时还会在发酵时产生大量气泡，影响发酵效率。所以在发酵前，必须对糖蜜进行预处理。

直接以植物为原材料提取核糖核酸也是本领域获得核糖核酸的另一主要的途径，以植物为原料提取核酸的方法主要有：碱提取法、酚提取法、氯仿-异戊醇提取法、电泳提取法等。尽管此类方法可以提纯出较高浓度的DNA和RNA，但是由于其所需材料成本昂贵、工艺繁杂、原料的综合利用率低，基本上不适合大规模的工业生产，并且产生的废水很难被利用，严重污染环境。利用核酸含量丰富的植物原料，探索提取率高、成本低、无污染、综合利用的核酸提取工艺仍是当务之急。

发明内容

基于此，本发明的目的是提供一种将植物核酸提取与发酵培养基处理有机结合的处理方法，所述方法使用新的工艺提取天然植物原料中的核酸，利用植物核酸提取过程中的中间产物对糖蜜液进行预处理，结合超声波处理，直接获得酵母发酵所需的培养基。所述方法不仅提取了所需的植物核酸原料，而且解决了提取过程中中间产物的处理问题，利用此方法处理所得的发酵培养基的发酵速率相较于普通酸法处理的发酵培养基明显提升，所得酵母核酸含量明显增加，因此该方法是一种可实现的节能环保新工艺。

本发明目的是通过以下方式实现：

本发明提供了一种植物核酸提取与糖蜜处理相结合的方法，所述方法包括植物核酸提取过程和利用植物核酸提取的中间产物对酵母培养基所用的糖蜜进行处理过程；所述植物核酸提取过程包括如下步骤：

1)将浸泡的植物原料于冰上研磨至粒径80～120目，加入0.5～2倍重量的蒸馏水，于-10～-30℃的温度下冷冻12～24h；

2)将步骤1)得到的冷冻物解冻至半融状态，研磨至粒径160～200目，加入5～10倍重量的蒸馏水，边加边搅拌，离心取上清液；

3)向步骤2)得到的上清液中加入等体积的0.2～0.4mol/L的柠檬酸盐和0.1～0.3mol/L硫酸盐的混合溶液，调节pH至6～7，保持40～60℃温水水浴0.5～3h，迅速降温到0～4℃；

4)向步骤3)得到的溶液中加入饱和硫酸铵或氯化铵溶液，边加边搅拌，调pH至4.5～5，0～4℃下静置过夜，分离上清液并收集沉淀，沉淀于0～4℃保存；

5)调节步骤4)得到的上清液的pH至2～2.5，静置0.5～10h，离心收集沉淀，上清液保留备用；

6)将步骤5)收集的沉淀用10～20倍重量的蒸馏水溶解，离心收集上清液，向上清液中加入等体积无水乙醇，静置1～10h，离心收集沉淀；向所得的上清液中继续加入等体积无水乙醇，静置1～10h，离心收集沉淀，合并所得沉淀，即为核糖核酸；

所述利用植物核酸提取的中间产物对酵母培养基所用的糖蜜进行处理过程包括酵母基础培养基所用糖蜜处理过程和酵母补料培养基所用糖蜜处理过程；

所述酵母基础培养基所用糖蜜处理过程包括如下步骤：

1)向糖蜜液中加入2～6倍重量的蒸馏水，搅拌均匀，静置，除去底层不溶物；

2)调节步骤1)得到的糖蜜稀释液的pH至4.8～5，静置后分离获得上层液体，加入上层液体总重量1％的所述植物核酸提取过程中步骤4)所得的沉淀，搅拌，使之完全溶解；

3)将步骤2)所得的糖蜜混合液置于超声波破碎仪中超声处理，然后于40～60℃下水浴1～10h；

4)将步骤3)所得的糖蜜处理液用1～2倍重量的蒸馏水稀释，调节pH为4.8～5，经澄清处理，获得上层清液即为基础培养基；

所述酵母补料培养基所用糖蜜处理过程包括如下步骤：

1)向糖蜜液中加入1～2倍重量的蒸馏水稀释，搅拌均匀，静置，除去底层不溶物；

2)向步骤1)得到的糖蜜稀释液中加入所述植物核酸提取过程中步骤5)所得的上清液，搅拌，调pH至4.8～5，静置后分离获得上层液体，加入上层液体总重量2％的所述植物核酸提取过程中步骤4)所得的沉淀，搅拌，使之完全溶解；

3)将步骤2)所得的糖蜜混合液置于超声波破碎仪中超声处理，然后于40～60℃下水浴1～10h；

4)将步骤3)所得的糖蜜处理液用1～2倍重量的蒸馏水稀释，加入总重量1％的所述植物核酸提取过程中步骤5)所得的上清液，调节pH为4.8～5，所得溶液经澄清处理，获得上层清液即为补料培养基。

进一步地，所述植物原料包括绿豆、赤小豆、豇豆、黑豆、红米、黑米。

进一步地，所述浸泡的植物原料的具体处理过程为将植物原料浸泡在蒸馏水中1-2d。

进一步地，所述离心的条件为1000～5000r/min，离心5～60min。

进一步地，所述调节pH的试剂包括盐酸、硫酸、硝酸。

进一步地，所述超声处理的条件为功率50～500W，温度30～60℃，处理5-15min。

进一步地，所述澄清处理的具体步骤为将所得溶液移入澄清系统中，加热至80～150℃维持30～200min,通入纯净空气0.5～2h，加入助滤剂，过滤分离。

进一步地，所述糖蜜包括甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜、葡萄糖蜜、玉米糖蜜。

进一步地，所述助滤剂包括聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、高岭土。

进一步地，所述柠檬酸盐包括柠檬酸钾、柠檬酸钠，所述硫酸盐包括硫酸镁、硫酸锌。

进一步地，所述方法还包括将所述植物核酸提取过程中步骤6)所得的上清液中的无水乙醇通过减压蒸馏回收过程。

本发明相对于现有技术具有的有益效果如下：

1.本发明的处理方法在植物核酸提取的基础上，增加了对过程中中间产物的利用，用其处理酵母发酵的主要原料－糖蜜，最后得到酵母培养基；经过实验检测，从植物原料中提取的RNA纯度高达92％，远超利用其他核酸提取方法得到的RNA纯度。

2.本发明利用核酸提取中间产物处理糖蜜，所得到的发酵培养基培养效果也要优于常用酸法处理糖蜜的方法，归因于利用植物核酸提取过程的中间产物处理糖蜜，其内诸多物质会加速糖蜜内大分子营养物质的分解，将许多糖蜜常规处理方法不易分解的营养物质充分分解，促进了酵母对其吸收利用，核酸提取的中间产物富含的维生素、金属离子也会被重复利用，极大提高了原料的利用能力，并且中间产物中相应酶会对糖蜜中的胶状物进行分解，使得糖蜜培养基的流动性大大加强，直接加速了酵母菌落的增殖。

3.本发明的处理方法获得的培养基营养成分更加丰富，并且能够充分的被酵母菌利用，发酵后生成的酵母异味明显减少，更加适用于各类食品、化妆品的生产加工，通过此方法把植物核酸提取工艺和酵母发酵工艺有效的结合起来，极大的提高了原料的利用效率，而且对废料进行重复利用，符合可持续发展这一长期战略。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例，下面将对实施例涉及的附图进行简单地介绍。

图1为酿酒酵母在实施例1制备的基础培养基中的生长曲线图。

图2为酿酒酵母分别在实验组和对照组的对应的培养基中的生长曲线图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行详细的说明，但本发明的实施方式不限于此，显而易见地，下面描述中的实施例仅是本发明的部分实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，获得其他的类似的实施例均落入本发明的保护范围。

实施例1

本发明提供了一种植物核酸提取与糖蜜处理相结合的处理方法，包括植物核酸提取过程和利用植物核酸提取的中间产物对酵母培养基所用的糖蜜进行处理过程；1.植物核酸提取

1)将天然干燥后的绿豆在蒸馏水中浸泡1～2d，之后在冰上研磨至粒径为80～120目，向研磨好的糊状物中加入其0.5～1倍重量的蒸馏水，于-20℃的温度下冷冻12h；

2)将步骤1)得到的冷冻物于10～20℃下水浴缓慢解冻至半融状态下，研磨至粒径为160～200目，加入5～10倍重量的蒸馏水，边加边搅拌，之后将所得溶液以3000r/min离心10min，取上清液；

3)向步骤2)得到的上清液中加入等体积的0.3mol/L的柠檬酸钠和0.2mol/L硫酸镁混合溶液，调节pH为6～7，保持40～60℃温水水浴2h，之后迅速将溶液降温到0-4℃；

4)向步骤3)得到的溶液中缓慢加入饱和氯化铵溶液，边加边搅拌，调pH在4.5～5之间，0～4℃下静置过夜，使上清液变得澄清透明，分离上清液并收集沉淀，沉淀继续保存在0～4℃下冷藏；

5)用稀盐酸调节步骤4)得到的上清液的pH到2～2.5，静置1h，3000r/min离心10min收集沉淀，上清液保留备用；

6)将步骤5)收集的沉淀用10～20倍重量的蒸馏水溶解，离心收集上清液，在密闭空间内向上清液中加入等体积99％食用乙醇，静置2h，离心收集沉淀；向所得的上清液中继续加入等体积99％的食用乙醇，静置2h，离心收集沉淀，合并上述所得沉淀，即为核糖核酸；

通过分光光度法对分离出的核酸浓度进行测定，所得核糖核酸中RNA纯度为92％，明显优于普通提取方法的85％的标准含量；

2.利用植物核酸提取工艺中的中间产物对酵母发酵培养基进行处理

酵母发酵培养基分为基础发酵培养基和补料培养基两种，由于两种培养基分别作用于酵母发酵的不同时期，其中成分含量都不相同，所以我们采用不同方法处理两种培养基；

2.1利用植物核酸提取中间产物对酵母基础培养基所用糖蜜处理：

1)向糖蜜液中缓慢加入4倍重量的蒸馏水稀释，不停搅拌，静置后除去底层不溶物；

2)将稀盐酸缓慢加入到步骤1)得到的糖蜜稀释液中，调节pH为4.8～5，静置后分离获得上层液体，向上层液体中加入总重量1％的植物核酸提取中步骤4)所得沉淀，不断搅拌，使之完全溶解；

3)将步骤2)所得的糖蜜混合液置于超声波破碎仪中，选用功率为500W，温度为40℃，处理10-15min；

4)将步骤3)所得的糖蜜处理液在40～60℃下水浴4h；

5)将步骤4)所得糖蜜液用1倍重量的蒸馏水稀释，稀释后加入少量盐酸，调节pH为4.8～5。之后将糖蜜液移入澄清系统中，加热至100℃维持100min,通入纯净空气1h，加入助滤剂聚丙烯酰胺，分离的上层清液即可作为基础培养基使用；

2.2利用植物核酸提取中间产物对酵母补料培养基所用糖蜜处理：

1)向糖蜜液中缓慢加入1倍重量的蒸馏水稀释，不停搅拌，静置后除去底层不溶物；

2)向所得的上层糖蜜液中加入植物核酸提取步骤5)所得上清液，缓慢搅拌，调pH为4.8-5，静置后分离上层液体，向上层液体中加入总重量2％的植物核酸提取步骤4)所得沉淀，不断搅拌，使之完全溶解；

3)将所得的糖蜜液置于超声波破碎仪中，选用功率为500W，温度为40℃，处理10-15min。

4)将所得的糖蜜液在40～60℃下水浴4h；

5)将所得的糖蜜液用1倍重量的蒸馏水稀释，稀释后加入总重量1％的植物核酸提取步骤5)所得上清液，调节pH为4.8～5，之后将糖蜜液移入澄清系统中，加热至100℃维持100min,通入纯净空气1h，加入助滤剂聚丙烯酰胺，分离的上层清液即可作为补料培养基使用。

实施例2

酵母发酵实验

1.种子培养：实验选用普通酿酒酵母，测得菌体RNA含量为6.9％。首先在30℃下活化酿酒酵母24h，取活化后的酿酒酵母接种一环至种子培养基在30℃温度下、摇床150r/min，扩大培养24h。而后以4％接种量接种到5L有氧培养基(培养基选用实施例1处理好的基础培养基)在30℃、150r/min下培养24h，最后以4％的接种量接种到装有实施例1中处理好的基础培养基发酵罐(500L)中进行高浓度发酵培养。

2.发酵参数：发酵罐内温度保持30±1℃，pH值为4.8±0.2，罐压0.04kPa,溶氧30％-35％。

3.发酵步骤：在发酵过程中，每2h取样，稀释100倍后，测定波长560nm处的吸光度值，其直接反应菌群生长情况。随时调整培养基的各参数在适合范围内。根据光度值和发酵时间绘制了一条酿酒酵母的生长曲线，结果为图1所示。

根据图1所示酿酒酵母的生长曲线可知，在发酵开始0-8h,发酵处于潜伏期，8-16h发酵处于对数成长期，在16-20h生长处于平缓期，20h后则进入酵母的衰亡期。通过实验表明选择在发酵过程的对数期进行补料，可以较大程度促进酵母菌的生长。通过实验筛选，选择最优补料时间及速率为在发酵开始的6h时进行补料，补料方式采用不间断流加方式补料，其中补料培养基的添加速率为150g/L.h。

实施例3

对比实验

1.实验方案：选择实施例1中处理糖蜜制成的培养基为实验组，对照组培养基选用常用盐酸或硫酸法处理糖蜜的培养基。

1.1对照组基础培养基处理：

1)向糖蜜液中缓慢加入4倍重量的蒸馏水稀释，不停搅拌，静置后除去底层不溶物；

2)将稀盐酸缓慢加入到步骤1)所得的糖蜜稀释液中，调节pH为4.8-5，静置后分离上层液体，向上层液体中加入总重量1％的蛋白胨，不断搅拌，使之完全溶解；

3)将步骤2)所得的糖蜜混合液用1倍重量的蒸馏水稀释，稀释后加入少量盐酸，调节pH为4.6-5。之后将糖蜜混合液移入澄清系统中，加热至100℃维持100min,通入纯净空气1h，加入助滤剂聚丙烯酰胺，分离上层清液，向其中加入适量淀粉酶及糖化酶，制成基础培养基。

1.2对照组补料培养基处理：

1)向糖蜜液中缓慢加入1倍重量的蒸馏水稀释，不停搅拌，静置后除去底层不溶物。

2)将稀盐酸缓慢加入到步骤1)所得的糖蜜稀释液中，调节pH为4.8-5，静置后分离上层液体，向液体中加入总重量2％的蛋白胨，不断搅拌，使之完全溶解。

3)将步骤2)所得的糖蜜混合液用1倍重量的蒸馏水稀释，稀释后加入总重量1％的氯化铵，少量盐酸调节pH为4.6～5。之后将糖蜜混合液移入澄清系统中，加热至100℃维持100min,通入纯净空气1h，加入助滤剂聚丙烯酰胺，分离上层清液，加入适量淀粉酶及糖化酶，制成补料培养基。

2实验方法：

2.1种子培养：实验选用普通发酵用酵母，已知菌体RNA含量为6.9％。首先在30℃下活化酿酒酵母24h，取活化后的酿酒酵母接种一环至种子培养基30℃、150r/min，扩大培养24h。而后以4％接种量分别接种进入5L基础培养基中(实验组和对照组)。30℃、150r/min培养24h，最后再以4％的接种量分别接种至实验组和对照组对应的发酵罐内(500L)开始发酵。

2.2发酵参数：发酵罐内温度保持30±1℃，pH值为4.8±0.2，罐压0.04kPa,溶氧30％-35％。

2.3发酵步骤：两组实验在正常发酵6h后开始进行补料，将实验组和对照组对应的补料培养基以150g/L.h的添加速率进行连续补料，在24小时停止补料，于32小时终止发酵。

2.4平行实验：按上述操作，进行3组平行实验。

3测试项目

3.1在发酵过程中，每2h取样，稀释100倍后，测定波长560nm处的吸光度值，取3次实验的平均值绘制对比实验酵母菌生长曲线，如图2所示。

3.2在发酵结束后，测定对比实验酵母菌体内RNA含量。

测定方法：吸取5ml培养液于10ml离心管内，在5000r/min离心10min，弃除上清液，称量菌体湿重；用生理盐水洗涤菌体3次，然后加入8ml冷的0.25mol/L高氯酸，4℃冷水浴锅中保温15min，4000r/min离心10min,倒出表面清液再加入5ml0.5mol/L高氯酸溶液，摇匀，在70℃水浴锅中保温15min(每4-5min振摇1次)；再于5000r/min离心5min,吸出1ml上清液，用蒸馏水定容至100ml紫外分光光度计260nm处测OD值，计算干菌体内RNA含量的质量分数(％)。

4结果：

4.1由图2中酵母生长曲线可以看出，实验组相对于对照组酵母生长过程中迟缓期有所缩短，对数生长期酵母菌株生长繁殖速度更快，平稳期所得到酵母菌浓度也远大于对照组。

4.2通过对对比实验得到的酵母RNA含量测定，实验组RNA含量为8.8％，对照组RNA含量为7.1％，具体是数值如下表所示。

经过对实验数据的分析可以看出，采用从植物核酸提取过程中分离的中间产物处理所得的发酵培养基，无论在发酵效果还是发酵速率上都要优于普通酸法处理所得培养基，而且发酵后所得酵母菌的RNA含量明显增加。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种植物核酸提取与糖蜜处理相结合的方法，其特征在于，所述方法包括植物核酸提取过程和利用植物核酸提取的中间产物对酵母培养基所用的糖蜜进行处理过程；

所述植物核酸提取过程包括如下步骤：

1)将浸泡的植物原料于冰上研磨至粒径80～120目，加入0.5～2倍重量的蒸馏水，于-10～-30℃的温度下冷冻12～24h；

2)将步骤1)得到的冷冻物解冻至半融状态，研磨至粒径160～200目，加入5～10倍重量的蒸馏水，边加边搅拌，离心取上清液；

3)向步骤2)得到的上清液中加入等体积的0.2～0.4mol/L的柠檬酸盐和0.1～0.3mol/L硫酸盐的混合溶液，调节pH至6～7，于40～60℃保持0.5～3h，迅速降温到0～4℃；

4)向步骤3)得到的溶液中加入饱和硫酸铵或氯化铵溶液，边加边搅拌，调pH至4.5～5，0～4℃下静置过夜，分离上清液并收集沉淀，沉淀于0～4℃保存；

5)调节步骤4)得到的上清液的pH至2～2.5，静置0.5～10h，离心收集沉淀，上清液保留备用；

6)将步骤5)收集的沉淀用10～20倍重量的蒸馏水溶解，离心收集上清液，向上清液中加入等体积无水乙醇，静置1～10h，离心收集沉淀；向所得的上清液中继续加入等体积无水乙醇，静置1～10h，离心收集沉淀，合并所得沉淀，即为核糖核酸；

所述利用植物核酸提取的中间产物对酵母培养基所用的糖蜜进行处理过程包括酵母基础培养基所用糖蜜处理过程和酵母补料培养基所用糖蜜处理过程；

所述酵母基础培养基所用糖蜜处理过程包括如下步骤：

1)向糖蜜液中加入2～6倍重量的蒸馏水，搅拌均匀，静置，除去底层不溶物；

2)调节步骤1)得到的糖蜜稀释液的pH至4.8～5，静置后分离获得上层液体，加入上层液体总重量1％的所述植物核酸提取过程中步骤4)所得的沉淀，搅拌，使之完全溶解；

3)将步骤2)所得的糖蜜混合液置于超声波破碎仪中超声处理，然后于40～60℃下保持1～10h；

4)将步骤3)所得的糖蜜处理液用1～2倍重量的蒸馏水稀释，调节pH为4.8～5，经澄清处理，获得上层清液即为基础培养基；

所述酵母补料培养基所用糖蜜处理过程包括如下步骤：

1)向糖蜜液中加入1～2倍重量的蒸馏水稀释，搅拌均匀，静置，除去底层不溶物；

2)向步骤1)得到的糖蜜稀释液中加入所述植物核酸提取过程中步骤5)所得的上清液，搅拌，调pH至4.8～5，静置后分离获得上层液体，加入上层液体总重量2％的所述植物核酸提取过程中步骤4)所得的沉淀，搅拌，使之完全溶解；

3)将步骤2)所得的糖蜜混合液置于超声波破碎仪中超声处理，然后于40～60℃下保持1～10h；

4)将步骤3)所得的糖蜜处理液用1～2倍重量的蒸馏水稀释，加入总重量1％的所述植物核酸提取过程中步骤5)所得的上清液，调节pH为4.8～5，所得溶液经澄清处理，获得上层清液即为补料培养基。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物原料包括绿豆、赤小豆、豇豆、黑豆、红米、黑米；所述浸泡的植物原料的具体处理过程为将植物原料浸泡在蒸馏水中1-2d。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离心的条件为1000～5000r/min，离心5～60min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述调节pH的试剂包括盐酸、硫酸、硝酸。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述超声处理的条件为功率50～500W，温度30～60℃，处理5-15min。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述澄清处理的具体步骤为将所得溶液移入澄清系统中，加热至80～150℃维持30～200min,通入纯净空气0.5～2h，加入助滤剂，过滤分离。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖蜜包括甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜、葡萄糖蜜、玉米糖蜜。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述助滤剂包括聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、高岭土。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述柠檬酸盐包括柠檬酸钾、柠檬酸钠，所述硫酸盐包括硫酸镁、硫酸锌。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将所述植物核酸提取过程中步骤6)所得的上清液中的无水乙醇通过减压蒸馏回收过程。

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