CN112881541A - 一种北柴胡与南柴胡配方颗粒的检测方法 - Google Patents

一种北柴胡与南柴胡配方颗粒的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种北柴胡与南柴胡配方颗粒的检测方法。该检测方法包括先比较供试品溶液和对照标准药材溶液的色谱，然后再进一步根据柴胡皂苷c与柴胡皂苷a的峰面积的比值β进行检测，该方法先对供试品进行初步检测，然后再进一步检测，通过对柴胡皂苷a和柴胡皂苷c峰面积比值的方法对北柴胡与南柴胡配方颗粒进行检测，该UPLC方法检测分离度较好，大大缩短了检测时间、简便、直观，并具有良好的重复性和准确性。本发明以标准对照药材溶液作为评价基准，与临床应用中的标准对照物达到一致，通过控制检测方法的各个环节，能够精准检测配方颗粒是否为北柴胡配方颗粒，具有实际应用价值。

Description

一种北柴胡与南柴胡配方颗粒的检测方法
技术领域
本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种北柴胡与南柴胡配方颗粒的检测方法。
背景技术
柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurumscorzonerifolium Willd.的干燥根，按性状分别习称“北柴胡”和“南柴胡”。始载于《神农本草经》，味辛、苦、微寒，归肝、胆、肺经。南柴胡长于升阳散邪，疏肝解郁，气味俱轻，外感在表在上兼清阳下陷者用之最宜。北柴胡长于解热泄下，推陈致新，对饮食积聚及痰热结实有良好的疏导和解效用。因此建立药材不同基源的检测方法，对于提升中药用药疗效具有重要意义。
北柴胡及南柴胡药材传统的鉴定方法包括性状、显微及理化鉴定等，现代的检测方法包括色谱法、质谱法、核磁共振法、差热分析法、扫描电镜技术、电泳、DNA条形码等。由于柴胡、南柴胡性状相似，通过形态学及常规理化方法难以对其进行快速而准确的检测，近年来学者多采用DNA条形码及HPLC指纹图谱等方法进行区分，但由于DNA条形码对实验技术要求较高，不易推广使用；而HPLC指纹图谱方法主要针对共有峰个数的比较，不够直观，且需要较长的检测时间。
对于中药配方颗粒，由于其失去外观形状，且经提取、浓缩、干燥、制粒等环节导致化学成分的变化，更增加了检测难度。因此目前缺少一种简便、直观检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法。
发明内容
因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中检测北柴胡和南柴胡配方颗粒方法难度较大、不直观、检测时间长等缺陷，从而提供一种北柴胡与南柴胡配方颗粒的检测方法。
为此，本发明提供了以下技术方案。
本发明提供了一种检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，包括如下步骤，
对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a，加入第一溶剂制成所述对照品溶液；
对照标准药材溶液的制备：对照标准药材加水过滤后得到第一滤液，回收水后得到第一残渣，然后加入第二溶剂，经超声、过滤后得到所述对照标准药材溶液；
供试品溶液的制备：供试品配方颗粒研磨后加入第三溶剂，经超声、过滤后得到所述供试品溶液；
色谱条件：照超高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱；检测波长为211-250nm；柱温35℃；流速0.4ml/min；
测定法：分别吸取对照品溶液、对照标准药材溶液和供试品溶液，注入超高效液相色谱仪，测定；
检测方法：依次采用第一检测方法和第二检测方法对供试品溶液进行检测；
所述第一检测方法为，所述供试品溶液的超高效液相色谱与所述对照标准药材溶液的超高效液相色谱进行检测；
所述第二检测方法为，以供试品溶液中柴胡皂苷c与柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积的比值进行检测。
所述北柴胡对照标准药材溶液在211nm波长下包括4个特征峰：
1号峰的相对保留时间RRT为0.61；2号峰的相对保留时间RRT为0.69；3号峰的相对保留时间RRT为1.00；4号峰的相对保留时间RRT为1.04；
所述北柴胡对照标准药材溶液在250nm波长下包括5个特征峰：
5号峰的相对保留时间RRT为0.78；6号峰的相对保留时间RRT为1.00；7号峰的相对保留时间RRT为1.04；8号峰的相对保留时间RRT为1.17；9号峰的相对保留时间RRT为1.20。
所述梯度洗脱的程序包括：0-8min，流动相A：流动相B的体积比为25-28％：75-72％；8-15min，流动相A：流动相B的体积比为28-29％：72-71％；15-20min，流动相A：流动相B的体积比为29-36％：71-64％；20-28min，流动相A：流动相B的体积比为36-36％：64-64％；28-31min，流动相A：流动相B的体积比为36-40％：64-60％；31-37min，流动相A：流动相B的体积比为40-40％：60-60％。
所述色谱条件：照超高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱；检测波长为211和250nm；流速0.4ml/min；柱长为10cm，柱内径为2.1mm，粒径为1.7μm，柱温35℃；理论板数均按柴胡皂苷a峰计算应均不低于10000。
所述第二检测方法包括，采用公式Ⅰ进行检测，当β小于0.35时，所述供试品配方颗粒为北柴胡配方颗粒；β大于0.35时，所述供试品配方颗粒为南柴胡配方颗粒；
Figure BDA0002297062810000031
其中，Sc为供试品配方颗粒中柴胡皂苷c的超高效液相色谱的峰面积，Sa为供试品配方颗粒中柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积。
所述检测波长为211nm和250nm。
所述检测方法包括依次采用第一检测方法和第二检测方法对供试品溶液进行检测；
所述第一检测方法为，在检测波长为211nm和250nm下，分别对所述供试品溶液的超高效液相色谱与所述对照标准药材溶液的超高效液相色谱进行对比；
所述第二检测方法为，在检测波长为211nm下，采用公式Ⅰ进行检测，当β不大于0.35时，所述供试品配方颗粒为北柴胡配方颗粒；β大于0.35时，所述供试品配方颗粒为南柴胡配方颗粒；
Figure BDA0002297062810000041
其中，Sc为供试品配方颗粒中柴胡皂苷c的超高效液相色谱的峰面积，Sa为供试品配方颗粒中柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积。
本发明技术方案，具有如下优点：
1.本发明提供的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，包括先比较供试品溶液和对照标准药材溶液的色谱，然后再进一步根据柴胡皂苷c与柴胡皂苷a的峰面积的比值β进行检测，该方法先对供试品进行初步检测，然后再进一步进行检测，通过对柴胡皂苷a和柴胡皂苷c峰面积比值的方法对北柴胡与南柴胡配方颗粒进行检测，该UPLC方法检测分离度较好，大大缩短了检测时间、简便、直观，并具有良好的重复性和准确性。
本发明以对照标准药材溶液作为评价基准，与临床应用中的标准对照物达到一致，通过控制检测方法的各个环节，能够精准检测配方颗粒是否为北柴胡配方颗粒，具有实际应用价值。
2.本发明提供的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，该方法先比较供试品溶液和对照标准药材溶液在211nm和250nm波长下的色谱进行初步检测，然后根据211nm波长下的柴胡皂苷c与柴胡皂苷a的峰面积的比值β进行进一步检测，该方法简便、直观，具有良好的重复性和准确性，这是因为，在211nm波长下，对柴胡皂苷c与柴胡皂苷a的相对含量进行限定，该检测波长为原生皂苷a、c的最大吸收波长，能够提高限值的准确度；而250nm波长主要反映次生皂苷的分布情况。由于南柴胡的原生皂苷和次生皂苷含量均与北柴胡存在一定差异，因此为准确、快速的反映二者的差异性，选择211nm、250nm双波长对北柴胡与南柴胡的进行进一步地对比分析。
3.本发明提供的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，该方法通过对梯度洗脱的程序进行限定，明确洗脱目标物质，即柴胡中水溶性成分及主要的柴胡皂苷，缩短了梯度洗脱时间，并采用UPLC缩短了分析时间，进而缩短了整个检测方法的检测周期。
在20-28min可以优化色谱图的峰形，提高分离度；31-37min有利于保证多次采集数据图谱的稳定性、重复性。
4.本发明提供的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，对照品溶液、对照标准药材溶液、供试品溶液的配制方法，由于柴胡原生皂苷在酸性及高温条件下，其环氧醚键会断裂，转化为次生皂苷，因此在供试品制备方法时，加入5％的浓氨试液，使样品处于碱性环境，减少原生皂苷的转化，进而反映配方颗粒中柴胡皂苷成分原始的分布情况。
其次在制备对照标准药材溶液时，首先对其进行水提取，后续操作同供试品溶液的制备方法，目的是使其所含物质基础与对照标准药材溶液的一致性，保证衡量标准的准确性。
同时由于对照标准药材溶液是衡量中药配方颗粒是否与临床汤剂基本一致的标准参照物，因此本发明以对照标准药材溶液的限度范围作为评价基准，控制工艺各环节，最终制得符合对照标准药材溶液限度范围的配方颗粒，能够精准的表达所制备的配方颗粒其药效物质与对照标准药材溶液具有一致性
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例1中波长211nm下的北柴胡对照标准药材溶液的液相色谱图；
图2是本发明实施例1中波长250nm下的北柴胡对照标准药材溶液的液相色谱图；
图3是本发明实施例1中波长211nm下的南柴胡对照标准药材溶液的液相色谱图；
图4是本发明实施例1中波长250nm下的南柴胡对照标准药材溶液的液相色谱图；
图5是实施例1中第一供试品配方颗粒的液相色谱图；
图6是实施例1中第二供试品配方颗粒的液相色谱图。
具体实施方式
提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。
本发明试药及仪器：
试药：
柴胡皂苷a(批号：110777-201711，纯度，91.1％，中国食品药品检定研究院)；
北柴胡对照药材(批号：120992-201509，中国食品药品检定研究院)；
乙腈为色谱纯；甲醇、乙醇为分析纯；水为屈臣氏纯化水；
仪器：Waters ACQUITY
Figure BDA0002297062810000071
H-Class超高效液相色谱仪，TUV Detector紫外检测器，Empower 3色谱工作站；
ME104E电子天平(梅特勒·托利多)和JY20002电子天平(梅特勒·托利多)；
KQ-500DB超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；
电子恒温水浴锅DZKW-4(北京中兴伟业仪器有限公司)。
实施例1
本实施例提供了一种检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，包括如下步骤，
对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a，精密称定，加入第一溶剂甲醇制成0.75μg/ml的对照品溶液；
对照标准药材溶液的制备：分别取0.5g北柴胡对照药材和南柴胡药材，精密称定，置锥形瓶中，精密加水25ml，密塞，称定重量，加热回流30min，过滤得到第一滤液，取第一滤液20ml，回收溶剂水至干得到第一残渣，精密加入5％浓氨50％乙醇25ml，密塞，称定重量，超声(功率250W，频率40kHz)30min，取出，放冷，再称定重量，用5％浓氨的50％乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为对照标准药材溶液；
供试品溶液的制备：分别取1.0g第一供试品配方颗粒和第二供试品配方颗粒，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含5％浓氨试液的50％乙醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30min，放冷，再称定重量，用5％浓氨试液的50％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得到第一供试品溶液和第二供试品溶液；
色谱条件：照超高效液相色谱法测定，色谱柱为Waters ACQUITY
Figure BDA0002297062810000081
BEHC18(2.1×100mm，1.7μm)；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按照表1所示梯度洗脱程序进行测定；检测波长为211和250nm；柱温35℃；流速0.4ml/min；理论板数均按柴胡皂苷a峰计算应均不低于10000；
表1洗脱梯度
时间(min) 流动相A(％) 流动相B(％)
0～8 25→28 75→72
8～15 28→29 72→71
15～20 29→36 71→64
20～28 36→36 64→64
28～31 36→40 64→60
31～37 40→40 60→60
测定法：分别吸取3μL对照品溶液、对照药标准材溶液和供试品溶液，注入超高效液相色谱仪，分别在211nm波长和250nm波长条件下测定；
特征峰的确定：图1是波长211nm下北柴胡对照标准药材溶液超高效液相色谱图，特征峰的相对保留时间在规定值的±10％内，即，
1号峰的相对保留时间RRT为0.61；
2号峰的相对保留时间RRT为0.69；
3号峰的相对保留时间RRT为1.00；
4号峰的相对保留时间RRT为1.04；
其中，3号峰为参照物峰；
图2是波长250nm下北柴胡对照标准药材溶液超高效液相色谱图，特征峰的相对保留时间在规定值的±10％内，即，
5号峰的相对保留时间RRT为0.78；
6号峰的相对保留时间RRT为1.00；
7号峰的相对保留时间RRT为1.04；
8号峰的相对保留时间RRT为1.17；
9号峰的相对保留时间RRT为1.20；
图3是波长211nm下南柴胡对照标准药材溶液超高效液相色谱图，特征峰的相对保留时间在规定值的±10％内，即，
1号峰的相对保留时间RRT为0.61；
2号峰的相对保留时间RRT为0.69；
3号峰的相对保留时间RRT为1.00；
4号峰的相对保留时间RRT为1.04；
其中，3号峰为参照物峰；
图4是波长250nm下南柴胡对照标准药材溶液超高效液相色谱图，特征峰的相对保留时间在规定值的±10％内，即，
5号峰的相对保留时间RRT为0.78；
6号峰的相对保留时间RRT为1.00；
7号峰的相对保留时间RRT为1.04。
峰1是柴胡皂苷c，峰2是柴胡皂苷f，峰3是柴胡皂苷a，峰4是柴胡皂苷b2；峰6是柴胡皂苷a，峰7是柴胡皂苷b2，峰9是柴胡皂苷b1。
检测方法包括依次采用第一检测方法和第二检测方法对第一供试品溶液和第二供试品溶液进行检测；
第一检测方法为，分别在211nm和250nm波长下对第一供试品溶液和第二供试品溶液进行测定，得到图5和图6，然后分别与对照标准药材溶液在211nm和250nm波长下的色谱图进行比较，初步得出结论；
第二检测方法为，采用公式Ⅰ进行检测，
Figure BDA0002297062810000101
其中，Sc为211nm下供试品配方颗粒中柴胡皂苷c的超高效液相色谱的峰面积，Sa为211nm下供试品配方颗粒中柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积；
第一供试品溶液的图谱结果分析，图5中，第一供试品溶液在211nm下呈现4个特征峰，与图1中北柴胡对照标准药材溶液色谱图中的4个特征峰相对应，图5中的峰3与参照物峰的保留时间相一致，以3号峰为S峰，计算各特征峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内，规定值为0.61(峰1)、0.69(峰2)、1.04(峰4)；供试品溶液在250nm下呈现5个特征峰，与图2中北柴胡对照标准药材溶液色谱图中的5个特征峰相对应，以3号峰为S峰，计算各特征峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％内，规定值为0.78(峰5)、1.00(峰6)、1.04(峰7)、1.17(峰8)、1.20(峰9)。因此，初步认为第一供试品溶液为北柴胡配方颗粒；
图5中，在211nm波长下，柴胡皂苷a的峰面积为279331，柴胡皂苷c的峰面积为80730，β为0.29，说明第一供试品溶液为北柴胡配方颗粒；
通过第一检测方法和第二检测方法结合，确认第一供试品配方颗粒为北柴胡配方颗粒。
第二供试品溶液的图谱结果分析，图6中，第二供试品溶液在211nm下呈现4个特征峰，与图3中南柴胡对照标准药材溶液色谱图中的4个特征峰相对应，图6中的峰3与参照物峰的保留时间相一致，以3号峰为S峰，计算各特征峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内，规定值为0.58(峰1)、0.65(峰2)、1.03(峰4)；供试品溶液在250nm下呈现3个特征峰，与图4中南柴胡对照标准药材溶液色谱图中的3个特征峰相对应，以3号峰为S峰，计算各特征峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内，规定值为0.78(峰5)、1.00(峰6)、1.04(峰7)。因此，初步认为第一供试品溶液为南柴胡配方颗粒；
图6中，在211nm波长下，柴胡皂苷a的峰面积为89237，柴胡皂苷c的峰面积为48872，β为0.56，说明第二供试品溶液为北柴胡配方颗粒；
通过第一检测方法和第二检测方法结合，确认第二供试品配方颗粒为南柴胡配方颗粒。
实施例2
本实施例为超高效液相色谱方法学考察
1重复性考察
按照实施例1中供试品溶液的制备方法平行制备6份供试品溶液，按照上述方法色谱条件和测定法进行测试，得到特征图谱，以峰3柴胡皂苷a作为参照峰，计算相对峰面积和相对保留时间，各特征峰的相对保留时间RSD在0-0.1％范围内，相对峰面积的RSD在0.6％-2.2％，说明该特征图谱的重复性较好。
2精密度考察
按照实施例1中供试品溶液的制备方法平行制备6份供试品溶液，按照上述方法色谱条件和测定法，采用不同仪器进行测试，得到特征图谱，以峰3柴胡皂苷a作为参照峰，计算相对峰面积和相对保留时间，各特征峰的相对保留时间RSD在0.1％-0.2％范围内，相对峰面积的RSD在0.3％-1.6％范围内。不同仪器间的相对保留时间RSD范围是0.1％-0.5％，相对峰面积RSD范围是0.1％-0.5％，相对峰面积范围是1.5％-21.8％，说明该特征图谱在不同仪器间相对保留时间符合分析要求，不同仪器间相对峰面积差异较大。
3稳定性考察
取同一供试品溶液按照上述方法色谱条件和测定法，分别于0、2、4、6、8、10、12、24h后进样进行测试，获得特征图谱，以峰3柴胡皂苷a作为参照峰，计算相对峰面积和相对保留时间，结果各特征峰的相对保留时间RSD在0.1％-4.0％范围内，相对峰面积的RSD在1.0％-4.1％范围内，说明溶液中化学成分在24小时内具有较好的稳定性。
4β值验证
取不同批号的北柴胡标准汤剂、北柴胡配方颗粒、南柴胡标准汤剂和南柴胡配方颗粒，分别采用实施例1中的方法测定β值，批号和β值见表2和表3；
表2北柴胡标准汤剂和北柴胡配方颗粒β测定结果
Figure BDA0002297062810000131
表3南柴胡标准汤剂和南柴胡配方颗粒β测定结果
Figure BDA0002297062810000141
从表2中可知，北柴胡标准汤剂的β值范围为0.18-0.33，北柴胡配方颗粒的β值分别为0.29、0.26、0.27，与本发明检测方法相符；
从表3中可知，南柴胡标准汤剂的β值为0.74-0.86，南柴胡配方颗粒β值分别为0.56、0.55、0.59，与本发明检测方法相符，因此，本发明提供的检测方法，即通过β值可作为北柴胡与狭叶北柴胡配方颗粒检测的评价手段。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (7)

1.一种检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，包括如下步骤，
对照品溶液的制备：取柴胡皂苷a，加入第一溶剂制成所述对照品溶液；
对照标准药材溶液的制备：对照标准药材加水过滤后得到第一滤液，回收水后得到第一残渣，然后加入第二溶剂，经超声、过滤后得到所述对照标准药材溶液；
供试品溶液的制备：供试品配方颗粒研磨后加入第三溶剂，经超声、过滤后得到所述供试品溶液；
色谱条件：照超高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱；检测波长为211-250nm；柱温35℃；流速0.4ml/min；
测定法：分别吸取对照品溶液、对照标准药材溶液和供试品溶液，注入超高效液相色谱仪，测定；
检测方法：依次采用第一检测方法和第二检测方法对供试品溶液进行检测；
所述第一检测方法为，所述供试品溶液的超高效液相色谱与所述对照标准药材溶液的超高效液相色谱进行检测；
所述第二检测方法为，以供试品溶液中柴胡皂苷c与柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积的比值进行检测。
2.根据权利要求1所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述北柴胡对照标准药材溶液在211nm波长下包括4个特征峰：
1号峰的相对保留时间RRT为0.61；2号峰的相对保留时间RRT为0.69；3号峰的相对保留时间RRT为1.00；4号峰的相对保留时间RRT为1.04；
所述北柴胡对照标准药材溶液在250nm波长下包括5个特征峰：
5号峰的相对保留时间RRT为0.78；6号峰的相对保留时间RRT为1.00；7号峰的相对保留时间RRT为1.04；8号峰的相对保留时间RRT为1.17；9号峰的相对保留时间RRT为1.20。
3.根据权利要求1或2所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序包括：0-8min，流动相A：流动相B的体积比为25-28％：75-72％；8-15min，流动相A：流动相B的体积比为28-29％：72-71％；15-20min，流动相A：流动相B的体积比为29-36％：71-64％；20-28min，流动相A：流动相B的体积比为36-36％：64-64％；28-31min，流动相A：流动相B的体积比为36-40％：64-60％；31-37min，流动相A：流动相B的体积比为40-40％：60-60％。
4.根据权利要求1所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述色谱条件：照超高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱；检测波长为211和250nm；流速0.4ml/min；柱长为10cm，柱内径为2.1mm，粒径为1.7μm，柱温35℃；理论板数均按柴胡皂苷a峰计算应均不低于10000。
5.根据权利要求1-4任一项所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述第二检测方法包括，采用公式Ⅰ进行检测，当β小于0.35时，所述供试品配方颗粒为北柴胡配方颗粒；β大于0.35时，所述供试品配方颗粒为南柴胡配方颗粒；
Figure FDA0002297062800000021
其中，Sc为供试品配方颗粒中柴胡皂苷c的超高效液相色谱的峰面积，Sa为供试品配方颗粒中柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积。
6.根据权利要求5所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述检测波长为211nm和250nm。
7.根据权利要求6所述的检测北柴胡与南柴胡配方颗粒的方法，其特征在于，所述检测方法包括依次采用第一检测方法和第二检测方法对供试品溶液进行检测；
所述第一检测方法为，在检测波长为211nm和250nm下，分别对所述供试品溶液的超高效液相色谱与所述对照标准药材溶液的超高效液相色谱进行对比；
所述第二检测方法为，在检测波长为211nm下，采用公式Ⅰ进行检测，当β不大于0.35时，所述供试品配方颗粒为北柴胡配方颗粒；β大于0.35时，所述供试品配方颗粒为南柴胡配方颗粒；
Figure FDA0002297062800000031
其中，Sc为供试品配方颗粒中柴胡皂苷c的超高效液相色谱的峰面积，Sa为供试品配方颗粒中柴胡皂苷a的超高效液相色谱的峰面积。
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