CN112816589A - Uplc-ms/ms测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法 - Google Patents

Uplc-ms/ms测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112816589A
CN112816589A CN202011633245.XA CN202011633245A CN112816589A CN 112816589 A CN112816589 A CN 112816589A CN 202011633245 A CN202011633245 A CN 202011633245A CN 112816589 A CN112816589 A CN 112816589A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
nitroglycerin
acrolein
uplc
content
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011633245.XA
Other languages
English (en)
Inventor
李美玲
秦秋明
付佳佳
刘建丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Microspectrum Chemical Technology Service Co Ltd
Original Assignee
Shanghai Microspectrum Chemical Technology Service Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Microspectrum Chemical Technology Service Co Ltd filed Critical Shanghai Microspectrum Chemical Technology Service Co Ltd
Priority to CN202011633245.XA priority Critical patent/CN112816589A/zh
Publication of CN112816589A publication Critical patent/CN112816589A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8624—Detection of slopes or peaks; baseline correction
    • G01N30/8631—Peaks
    • G01N30/8634—Peak quality criteria
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/067—Preparation by reaction, e.g. derivatising the sample
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/884—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/8872—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample impurities

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Quality & Reliability (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明涉及硝酸甘油溶液中杂质的检测方法，具体涉及UPLC‑MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法。UPLC‑MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，步骤包括：在硝酸甘油样品溶液中加入衍生化溶液，再用稀释剂稀释，涡旋混匀，置于50～100℃下反应1～5h后取出得到预处理溶液，进UPLC‑MS/MS分析；基于同等条件下测试标准工作溶液所得到的标准工作曲线及回归方程，计算得出硝酸甘油样品溶液中的丙烯醛含量。发明中提供的UPLC‑MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法具有很好的分离效果，测试谱图中目标组分所对应的特征峰对称性好，目标组分所对应的特征峰不会受到杂质峰的影响。并且本发明的检测方法具有很好的准确度和重复性。

Description

UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法
技术领域
本发明涉及硝酸甘油溶液中杂质的检测方法，具体涉及UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法。
背景技术
硝酸甘油溶液主要是由于丙三醇和硝酸酯反应生成，其能够松弛血管平滑肌，扩张静脉与冠状动脉，具有吸收快、起效快的特点，可以适应症为用于冠心病心绞痛的治疗及预防，也可用于降低血压或治疗充血性心力衰竭。但是硝酸甘油溶液在碱性条件下会水解产生丙烯醛，这实际中生产、运输，硝酸甘油溶液避免不了有丙烯醛这种杂质产生，丙烯醛的存在具有刺激性气味，其存在还会影响硝酸甘油溶液的使用效果，因此，对硝酸甘油溶液生产和运输过程进行全程有效的检测成为企业必须解决的迫切研究课题。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明的第一个方面提供了一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，步骤包括：在硝酸甘油样品溶液中加入衍生化溶液，再用稀释剂稀释，涡旋混匀，置于50～100℃下反应1～5h后取出得到预处理溶液，进UPLC-MS/MS分析；基于同等条件下测试标准工作溶液所得到的标准工作曲线及回归方程，计算得出硝酸甘油样品溶液中的丙烯醛含量。
作为本发明一种优选的技术方案，每100mg硝酸甘油样品溶液所加入的衍生化溶液的体积为1.5～3ml。
作为本发明一种优选的技术方案，所述衍生化溶液与醛反应得到至少含一种有机发色基团的化合物。
作为本发明一种优选的技术方案，所述至少含一种有机发色基团的化合物为下式1所表示的化合物：
Figure BDA0002880582180000021
式1
其中，Z选自氧原子、氮原子或硫原子，R1仅在Z为氮原子时存在，在这种情形下，R1选自氢原子、烷基；R2选自氢原子、烷基、烷氧基、卤原子、羟基、硝基、卤代烷基、取代或未取代苯基；m为0或1-4的整数；当在环上存在多个R2时，每个R2相同或不同，每个R2各自独立或通过相互结合形成脂肪环或芳环；X选自氮原子、亚甲基或至少2个碳原子的直链，R3为烯丙基。
作为本发明一种优选的技术方案，所述Z为氮原子时，R1选自氢原子、烷基；R2选自氢原子、烷基、烷氧基、羟基、硝基；m为0或1-4的整数；当在环上存在多个R2时，每个R2相同或不同，每个R2各自独立或通过相互结合形成脂肪环或芳环；X为氮原子，R3为烯丙基。
作为本发明一种优选的技术方案，所述衍生化溶液中的溶剂为极性大于甲醇的溶剂。
作为本发明一种优选的技术方案，所述稀释剂为含有机酸的水溶液，有机酸为碳原子数小于4的脂肪酸。
作为本发明一种优选的技术方案，所述有机酸和水的体积比为0.1～0.3：100。
作为本发明一种优选的技术方案，所述UPLC-MS/MS分析的超高效液相色谱条件为：
色谱柱：ACQUITY UPLC HSST3(2.1mm×100mm，1.8μm)；柱温：20～40℃；进样量：1～10μL；流动相A：含有机酸的甲醇溶液；流动相B：稀释剂；流速：0.1～0.5mL/min。
作为本发明一种优选的技术方案，所述标准曲线溶液的配制方法为：
分别量取对照品母液25.0μL、50.0μL、100.0μL、150.0μL、200.0μL置于5个10ml量瓶，加入流动相B 5.00ml，再用流动相A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。
参考以下详细说明更易于理解本申请的上述以及其他特征、方面和优点。
有益效果：申请人意料不到的发现，本发明中提供的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法具有很好的分离效果，测试谱图中目标组分所对应的特征峰对称性好，目标组分所对应的特征峰不会受到杂质峰的影响。并且本发明的检测方法具有很好的准确度和重复性。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为具体实施方式中的线性关系图。
具体实施方式
参选以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本发明的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
如本文所用术语“由…制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
连接词“由…组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由…组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
单数形式包括复数讨论对象，除非上下文中另外清楚地指明。“任选的”或者“任意一种”是指其后描述的事项或事件可以发生或不发生，而且该描述包括事件发生的情形和事件不发生的情形。
说明书和权利要求书中的近似用语用来修饰数量，表示本发明并不限定于该具体数量，还包括与该数量接近的可接受的而不会导致相关基本功能的改变的修正的部分。相应的，用“大约”、“约”等修饰一个数值，意为本发明不限于该精确数值。在某些例子中，近似用语可能对应于测量数值的仪器的精度。在本申请说明书和权利要求书中，范围限定可以组合和/或互换，如果没有另外说明这些范围包括其间所含有的所有子范围。
此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。
为了解决上述技术问题，本发明的第一个方面提供了一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，步骤包括：在硝酸甘油样品溶液中加入衍生化溶液，再用稀释剂稀释，涡旋混匀，置于50～100℃下反应1～5h后取出得到预处理溶液，进UPLC-MS/MS分析；基于同等条件下测试标准工作溶液所得到的标准工作曲线及回归方程，计算得出硝酸甘油样品溶液中的丙烯醛含量。
在一种优选的实施方式中，一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，步骤包括：在硝酸甘油样品溶液中加入衍生化溶液，再用稀释剂稀释，涡旋混匀，置于70℃下反应2h后取出得到预处理溶液，进UPLC-MS/MS分析；基于同等条件下测试标准工作溶液所得到的标准工作曲线及回归方程，计算得出硝酸甘油样品溶液中的丙烯醛含量。
在一种优选的实施方式中，每100mg硝酸甘油样品溶液所加入的衍生化溶液的体积为1.5～3ml；进一步优选的，每100mg硝酸甘油样品溶液所加入的衍生化溶液的体积为2.5ml。
在一种优选的实施方式中，所述衍生化溶液与醛反应得到至少含一种有机发色基团的化合物。
在一种优选的实施方式中，所述至少含一种有机发色基团的化合物为下式1所表示的化合物：
Figure BDA0002880582180000051
式1
其中，Z选自氧原子、氮原子或硫原子，R1仅在Z为氮原子时存在，在这种情形下，R1选自氢原子、烷基；R2选自氢原子、烷基、烷氧基、卤原子、羟基、硝基、卤代烷基、取代或未取代苯基；m为0或1-4的整数；当在环上存在多个R2时，每个R2相同或不同，每个R2各自独立或通过相互结合形成脂肪环或芳环；X选自氮原子、亚甲基或至少2个碳原子的直链，R3为烯丙基。
在一种优选的实施方式中，所述Z为氮原子时，R1选自氢原子、烷基；R2选自氢原子、烷基、烷氧基、羟基、硝基；m为0或1-4的整数；当在环上存在多个R2时，每个R2相同或不同，每个R2各自独立或通过相互结合形成脂肪环或芳环；X为氮原子，R3为烯丙基。
在一种优选的实施方式中，所述衍生化溶液中的溶质为2，4-二硝基苯肼。
在一种优选的实施方式中，所述衍生化溶液中的溶剂为极性大于甲醇的溶剂，进一步优选的，所述衍生化溶液中的溶剂为乙腈。
此外在对衍生化溶液的筛选中，发现优选大于实用甲醇的溶剂，一来在检测微量丙烯醛时，甲醇中微量的醛类物质同样对检测结果带来干扰因此避免在尤其是衍生化时使用，而在后续的分离步骤中流动相的甲醇则不会对检测结构由影响；此外衍生化的乙腈溶液有助于反应物的分散溶解促进使衍生化完全，通过色谱柱分离时其实际流动相可以看成是乙腈-甲醇-水流动相体系，通过研究这种处理后在对硝酸甘油中的丙烯醛的检测背景下能具有良好的分离度和峰型，方法准确度更高。
在一种优选的实施方式中，所述稀释剂为含有机酸的水溶液，有机酸为碳原子数小于4的脂肪酸。
可以列举的碳原子数小于4的脂肪酸有甲酸、乙酸、丙酸等，优选的，所述有机酸为甲酸。
对于硝酸甘油中的丙烯醛检测时由于需要考虑在衍生化阶段硝酸甘油的影响，通过在稀释剂中加入一定量的有机酸，尤其是甲酸时，能够催化衍生化反应的进行，甲酸的存在在一定程度上有助于硝酸甘油的稳定，因而其用量不必太高，同时在衍生化反应的温度上进一步提高温度促进硝酸甘油的分解以及丙烯醛衍生化的同时进行。
在一种优选的实施方式中，所述有机酸和水的体积比为0.1～0.3：100；进一步优选的，所述有机酸和水的体积比为0.1：100。
通过研究调整稀释剂中甲酸与水体积比最好为0.1：100时检测方法最可靠，此外分解产物1,2-二硝酸甘油和1,3-二硝酸甘油和其余易挥发成分，这对检测的干扰影响较小，容易通过分离分开。进一步考虑到在流动相中加入有机酸能促进正离子化，而甲酸的加入不会引来外来杂质，其次其分子量较小时最合适添加到流动相中的。
在一种优选的实施方式中，所述UPLC-MS/MS分析的超高效液相色谱条件为：
色谱柱：ACQUITY UPLC HSST3(2.1mm×100mm，1.8μm)；柱温：20～40℃；进样量：1～10μL；流动相A：含有机酸的甲醇溶液；流动相B：稀释剂；流速：0.1～0.5mL/min。
在一种更优选的实施方式中，所述UPLC-MS/MS分析的超高效液相色谱条件为：
色谱柱：ACQUITY UPLC HSST3(2.1mm×100mm，1.8μm)；柱温：(30℃)；进样量：1μL；流动相A：含有机酸的甲醇溶液；流动相B：稀释剂；流速：0.3mL/min。
为避免过高的柱温导致的挥发问题，从分离的角度优选较低的柱温。但柱温太低，各物质的扩散速率减小，峰形变宽，不利于检测。通过实验研究最终确定柱温为30℃最佳。
在一种优选的实施方式中，所述标准曲线溶液的配制方法为：
分别量取对照品母液25.0μL、50.0μL、100.0μL、150.0μL、200.0μL置于5个10ml量瓶，加入流动相B 5.00ml，再用流动相A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。
具体的，UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法与步骤如下：1.溶液配制
1.1稀释剂
甲酸-纯化水(0.1：100)，量取纯化水500ml至500ml溶剂瓶中，加入甲酸500.0μl，振荡摇匀，超声脱气10min，记为A。
1.2衍生化溶液
称取2，4-二硝基苯肼120mg，加入200ml乙腈溶解，振荡摇匀，超声脱气10min，记为B。
1.3流动相
流动相A：甲酸-甲醇(0.1：100)，量取甲醇500ml至500ml溶剂瓶中，加入甲酸500.0μl，振荡摇匀，超声脱气10min。
流动相B：甲酸-纯化水(0.1：100)，量取纯化水500ml至500ml溶剂瓶中，加入甲酸500.0μl，振荡摇匀，超声脱气10min。
1.4对照品母液
对照品母液：量取丙烯醛溶液适量，置于10ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，涡旋混匀，配制成丙烯醛浓度约为8μg/ml的对照品母液。
1.5标准曲线溶液
分别量取对照品母液25.0μl、50.0μl、100.0μl、150.0μl、200.0μl置于5个10ml量瓶，加入B 5.00ml，再用A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。
1.6样品溶液
称取样品约200mg，置于10ml容量瓶中，加入B 5.00ml，再用A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。平行制备2份。
在本发明中，样品指的是硝酸甘油溶液样品；目标物指的是丙烯醛。
2.仪器方法
仪器方法详见表1。
表1
Figure BDA0002880582180000091
Figure BDA0002880582180000101
3、进样程序
进样程序详见表2。
表2
序号 溶液名称 进样针数
1 过程空白溶液 1针或更多
2 SST 6针
3 标准曲线溶液1 1针
4 标准曲线溶液2 1针
5 标准曲线溶液3 1针
6 标准曲线溶液4 1针
7 标准曲线溶液5 1针
8 过程空白溶液 1针
9 样品溶液(样品数量不超过10个) 各1针
为了验证本发明UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的可行性和准确性，本发明进行了如下验证：
4.线性
4.1本发明通过配制了稀释剂、衍生化溶液、对照品母液、标准曲线溶液，然后通过程序方法、进样程序对标准曲线溶液分别进样分析。
4.2验证要求：取标准曲线溶液分别进样分析，以目标物的浓度(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，进行线性回归，由仪器自动计算线性方程，并计算相关系数r，应不低于0.99。
4.3验证结果：线性结果如表3，线性关系图如图1所示：
表3
Figure BDA0002880582180000111
结果表明本发明目标物在19.87ng/ml～159.0ng/ml的浓度范围内呈良好的线性；r为0.999，大于0.99。
5.检测限(LOD)
5.1本发明通过配制了稀释剂、衍生化溶液、对照品母液、LOD溶液然后通过程序方法、进样程序对LOD溶液进样分析。
其中，LOD溶液的配制方法为：量取对照品母液12.5μl，置于10ml量瓶，加入B5.00ml，再用A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。
5.2验证要求：取LOD溶液连续进样2针，LOD溶液中目标峰的S/N应不小于3。
5.3验证结果：LOD结果参见表4。
表4
Figure BDA0002880582180000112
结果表明，LOD溶液中，目标峰的S/N均为10，说明本发明UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法的方法灵敏。
6.定量限(LOQ)
6.1LOQ溶液：为4中标准曲线溶液中的L-1溶液，通过程序方法、进样程序对LOQ溶液进样分析。
6.2验证要求：取LOQ溶液连续进样6针，LOQ溶液中目标峰的S/N应不小于10。6针LOQ溶液中目标物峰面积的RSD不得大于15％。
6.3验证结果：LOQ溶液浓度为25％限度水平，结果参见表5。
表5
Figure BDA0002880582180000121
结果表明，LOQ溶液浓度为25％限度水平，目标峰的S/N分别为19、20、19、19、19、19，6针LOQ溶液的峰面积RSD为3％，结果符合接受标准，方法灵敏。
7.准确度
7.1本发明通过配制了稀释剂、衍生化溶液、对照品母液、样品溶液，然后将样品溶液按照下述方法制备了准确度溶液：
称取样品约200mg，置于10ml容量瓶中，分别加入对照品母液25.0μl、100.0μl、150.0μl，加入B 5.00ml，再用A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。每个准确度水平平行配制3份。每个准确度水平平行配制3份，配制过程详见表6。最后通过程序方法、进样程序样品溶液和准确度溶液进样分析。
表6
Figure BDA0002880582180000131
7.2验证要求：取样品溶液和准确度溶液进行分析，计算各水平准确度溶液的回收率，应在75％～120％之间。计算同一水平准确度回收率的RSD，不得大于8％。
7.3验证结果：准确度结果参见表7-表8所示，其中表7准确度原始数据，表8为准确度结果：
表7
Figure BDA0002880582180000132
表8
Figure BDA0002880582180000141
结果表明：目标物在该批次样品中未检出。目标物在25％限度水平准确度溶液的回收率在84％～88％之间，RSD为2％；100％限度水平准确度溶液的回收率在94％～98％之间，RSD为2％；150％限度水平准确度溶液的回收率在98％～100％之间，RSD为1％。准确度良好。
8.重复性
8.1本发明通过配制稀释剂、衍生化溶液、对照品母液，重复性溶液，然后通过程序方法、进样程序对标准曲线溶液分别进样分析。
其中，重复性溶液的制备方法为：
称取样品约200mg，置于10ml容量瓶中，加入对照品母液100.0μl，加入B5.00ml，再用A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。平行配制3份，作为REP-4、REP-5、REP-6；重复性溶液中REP-1、REP-2、REP-3使用的是7.1准确度溶液中的ACC-REP-M-1、ACC-REP-M-2、ACC-REP-M-3，详见表格9。
表9
Figure BDA0002880582180000151
8.2验证要求：取重复性溶液进样分析，计算6份重复性溶液中目标物浓度的RSD，不得大于8％。
8.3验证结果：重复性原始数据参见表格10、扣除本底后重复性结果参见表格11。
表格10
Figure BDA0002880582180000152
表格11
Figure BDA0002880582180000153
结果表明，6份重复性溶液中目标物浓度的RSD为1％，符合接受标准，重复性良好。
下面通过实施例对本发明进行具体描述。有必要在此指出的是，以下实施例只用于对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的专业技术人员根据上述本发明的内容做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
另外，如果没有其它说明，所用原料都是市售的，购自Sigma-Aldrich化学试剂。
实施例
实施例1
本发明的实施例1具体提供了一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，步骤包括：
1.溶液配制
1.1稀释剂，甲酸-纯化水(0.1：100)，量取纯化水500ml至500ml溶剂瓶中，加入甲酸500.0μl，振荡摇匀，超声脱气10min，记为A；
1.2衍生化溶液，称取2，4-二硝基苯肼120mg，加入200ml乙腈溶解，振荡摇匀，超声脱气10min，记为B；
1.3流动相，流动相A：甲酸-甲醇(0.1：100)，量取甲醇500ml至500ml溶剂瓶中，加入甲酸500.0μl，振荡摇匀，超声脱气10min；流动相B：甲酸-纯化水(0.1：100)，量取纯化水500ml至500ml溶剂瓶中，加入甲酸500.0μl，振荡摇匀，超声脱气10min；
1.4对照品母液，量取丙烯醛溶液适量，置于10ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，涡旋混匀，配制成丙烯醛浓度约为8μg/ml的对照品母液；
1.5标准曲线溶液，分别量取对照品母液25.0μl、50.0μl、100.0μl、150.0μl、200.0μl置于5个10ml量瓶，加入B 5.00ml，再用A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温；
1.6硝酸甘油溶液样品溶液，称取样品约200mg，置于10ml容量瓶中，加入B5.00ml，再用A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温，平行制备2份；
2.仪器方法
仪器方法详见表12：
表12
Figure BDA0002880582180000181
Figure BDA0002880582180000191
3.进样程序
进样程序详见表13：
表13
序号 溶液名称 进样针数
1 过程空白溶液 1针或更多
2 SST 6针
3 标准曲线溶液1 1针
4 标准曲线溶液2 1针
5 标准曲线溶液3 1针
6 标准曲线溶液4 1针
7 标准曲线溶液5 1针
8 过程空白溶液 1针
9 样品溶液 各1针
在硝酸甘油样品溶液中加入衍生化溶液，再用稀释剂稀释，涡旋混匀，置于70℃下反应2h后取出得到预处理溶液，进UPLC-MS/MS分析，基于同等条件下测试标准工作溶液所得到的标准工作曲线及回归方程，计算得出硝酸甘油样品溶液中的丙烯醛含量。
结果表明，可以很好的将硝酸甘油溶液中丙烯醛分离出来，并且丙烯醛目标峰与杂质峰可以很好的区别开，丙烯醛目标峰的峰形尖锐。
实施例2
发明的实施例2提供了一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，仪器方法中的柱温为45℃。
最后测试结果表明，选择性降低，不利于分离。
实施例3
发明的实施例3提供了一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，仪器方法中的流速为0.6mL/min。
最后测试结果表明，丙烯醛目标峰与杂质峰难区分。
实施例4
发明的实施例4提供了一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，稀释剂中无甲酸。
最后测试结果表明，丙烯醛目标峰的峰形较宽，有拖尾现象。
实施例5
发明的实施例5提供了一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，甲酸与纯化水的体积比为0.45：100。
最后测试结果表明，丙烯醛目标峰会受到杂质峰干扰。
前述的实例仅是说明性的，用于解释本发明所述方法的一些特征。所附的权利要求旨在要求可以设想的尽可能广的范围，且本文所呈现的实施例仅是根据所有可能的实施例的组合的选择的实施方式的说明。因此，申请人的用意是所附的权利要求不被说明本发明的特征的示例的选择限制。在权利要求中所用的一些数值范围也包括了在其之内的子范围，这些范围中的变化也应在可能的情况下解释为被所附的权利要求覆盖。

Claims (10)

1.一种UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，其特征在于，步骤包括：在硝酸甘油样品溶液中加入衍生化溶液，再用稀释剂稀释，涡旋混匀，置于50～100℃下反应1～5h后取出得到预处理溶液，进UPLC-MS/MS分析；基于同等条件下测试标准工作溶液所得到的标准工作曲线及回归方程，计算得出硝酸甘油样品溶液中的丙烯醛含量。
2.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，其特征在于，每100mg硝酸甘油样品溶液所加入的衍生化溶液的体积为1.5～3ml。
3.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，其特征在于，所述衍生化溶液与醛反应得到至少含一种有机发色基团的化合物。
4.根据权利要求3所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，所述至少含一种有机发色基团的化合物为下式1所表示的化合物：
Figure FDA0002880582170000011
其中，Z选自氧原子、氮原子或硫原子，R1仅在Z为氮原子时存在，在这种情形下，R1选自氢原子、烷基；R2选自氢原子、烷基、烷氧基、卤原子、羟基、硝基、卤代烷基、取代或未取代苯基；m为0或1-4的整数；当在环上存在多个R2时，每个R2相同或不同，每个R2各自独立或通过相互结合形成脂肪环或芳环；X选自氮原子、亚甲基或至少2个碳原子的直链，R3为烯丙基。
5.根据权利要求4所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，所述Z为氮原子时，R1选自氢原子、烷基；R2选自氢原子、烷基、烷氧基、羟基、硝基；m为0或1-4的整数；当在环上存在多个R2时，每个R2相同或不同，每个R2各自独立或通过相互结合形成脂肪环或芳环；X为氮原子，R3为烯丙基。
6.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，所述衍生化溶液中的溶剂为极性大于甲醇的溶剂。
7.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，所述稀释剂为含有机酸的水溶液，有机酸为碳原子数小于4的脂肪酸。
8.根据权利要求7所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，所述有机酸和水的体积比为0.1～0.3：100。
9.根据权利要求1所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，所述UPLC-MS/MS分析的超高效液相色谱条件为：
色谱柱：ACQUITY UPLC HSST3(2.1mm×100mm，1.8μm)；柱温：20～40℃；进样量：1～10μL；流动相A：含有机酸的甲醇溶液；流动相B：稀释剂；流速：0.1～0.5mL/min。
10.根据权利要求9所述的UPLC-MS/MS测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法，所述标准曲线溶液的配制方法为：
分别量取对照品母液25.0μL、50.0μL、100.0μL、150.0μL、200.0μL置于5个10ml量瓶，加入流动相B 5.00ml，再用流动相A稀释至刻度，涡旋混匀，置70℃电热恒温鼓风干燥箱，反应2h，取出，冷却至室温。
CN202011633245.XA 2020-12-31 2020-12-31 Uplc-ms/ms测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法 Pending CN112816589A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011633245.XA CN112816589A (zh) 2020-12-31 2020-12-31 Uplc-ms/ms测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011633245.XA CN112816589A (zh) 2020-12-31 2020-12-31 Uplc-ms/ms测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112816589A true CN112816589A (zh) 2021-05-18

Family

ID=75858326

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011633245.XA Pending CN112816589A (zh) 2020-12-31 2020-12-31 Uplc-ms/ms测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112816589A (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102411034A (zh) * 2011-08-04 2012-04-11 湖南中烟工业有限责任公司 直接衍生高效液相色谱法测定水基胶中羰基化合物的方法
CN103163270A (zh) * 2013-03-28 2013-06-19 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种液相色谱-串联质谱法检测卷烟滤嘴中八种挥发性羰基化合物的方法
KR20140066513A (ko) * 2012-11-23 2014-06-02 삼성전기주식회사 금속 도금액 중의 알데히드 화합물의 분석방법
CN106248820A (zh) * 2016-07-18 2016-12-21 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种电子烟烟液中丙烯醛的测定方法
KR20200123339A (ko) * 2019-04-19 2020-10-29 주식회사 엘지화학 회전식 분석 시스템

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102411034A (zh) * 2011-08-04 2012-04-11 湖南中烟工业有限责任公司 直接衍生高效液相色谱法测定水基胶中羰基化合物的方法
KR20140066513A (ko) * 2012-11-23 2014-06-02 삼성전기주식회사 금속 도금액 중의 알데히드 화합물의 분석방법
CN103163270A (zh) * 2013-03-28 2013-06-19 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种液相色谱-串联质谱法检测卷烟滤嘴中八种挥发性羰基化合物的方法
CN106248820A (zh) * 2016-07-18 2016-12-21 中国烟草总公司郑州烟草研究院 一种电子烟烟液中丙烯醛的测定方法
KR20200123339A (ko) * 2019-04-19 2020-10-29 주식회사 엘지화학 회전식 분석 시스템

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AKIO SAKURAGAWA等: "Trace analysis of carbonyl compounds by liquid chromatography–mass spectrometry after collection as 2,4-dinitrophenylhydrazine derivatives", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 *
张建平等: "高效液相色谱法测定烟用酒精中羰基化合物", 《理化检验-化学分册》 *
李响丽等: "超高效液相色谱(UPLC)同时测定水性胶黏剂中甲醛、乙醛、丙烯醛", 《西南农业学报》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109406690B (zh) 一种检测水合氯醛中有关物质的方法
CN113466353B (zh) 一种6-氯-2-己酮有关物质的检测方法
WO2023065521A1 (zh) 一种测定基因毒杂质1,3-二氯-2-丙醇的气相色谱质谱联用方法
CN112816589A (zh) Uplc-ms/ms测定硝酸甘油溶液中丙烯醛的含量方法
CN115047093B (zh) 一种无水咖啡因中硫酸二甲酯检测方法
CN113311087B (zh) 一种共聚聚酯塑料中对苯二甲酸含量测定方法
CN114720584B (zh) 一种2-溴甲基-1,3-二氧戊烷有关物质的检测方法
CN108414661B (zh) 一种检测生物样品中氨含量的衍生化气相色谱-质谱方法
CN110873761A (zh) 草酸艾司西酞普兰中间体有关物质的气相色谱检测方法
CN110376302B (zh) 一种检测间氟苯甲醛和间氟苯肉桂醛的方法
CN108982706B (zh) 一种米格列奈钙中杂质顺式全氢异吲哚的检测方法
CN110161134B (zh) 一种检测核酸固体样品甲胺及甲胺盐溶剂残留的方法
CN112147209A (zh) 一种icp-ms测定地球化学样品中砷的方法
CN110988241B (zh) 一种班布特罗中有关物质的检测分离方法
CN112763603B (zh) 苯含量的检测方法及应用
CN111103374B (zh) 一种测定盐酸西那卡塞中2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物含量的方法
CN114705790B (zh) 一种(2r,4r)-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯异构体的检测方法
CN113917019B (zh) 一种三羟甲基丙烷及其副产物的检测方法
CN116794176B (zh) 一种3,4-二甲氧基苯乙胺中硫酸二甲酯的检验方法
CN113109462B (zh) 一种利多卡因中氯乙酸的检测方法
CN118090948A (zh) 一种环己烷中苯残留的检测分析方法
CN111269120A (zh) 一种奥扎格雷杂质ⅱ的环保型制备方法
CN116068101A (zh) 一种衍生化法定量分析硫酸二甲酯含量的方法
CN115754045A (zh) 一种左亚叶酸钙的质量控制方法
CN118914427A (zh) 异壬酰氯含量的测定方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination