CN112806605A - 一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法 - Google Patents

一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112806605A
CN112806605A CN202011632224.6A CN202011632224A CN112806605A CN 112806605 A CN112806605 A CN 112806605A CN 202011632224 A CN202011632224 A CN 202011632224A CN 112806605 A CN112806605 A CN 112806605A
Authority
CN
China
Prior art keywords
kyara
cigar
extract
tobacco
cigar tobacco
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202011632224.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112806605B (zh
Inventor
谌琪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hainan Guibennan Pharmaceutical Technology Co ltd
Original Assignee
Hainan Guibennan Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hainan Guibennan Pharmaceutical Technology Co ltd filed Critical Hainan Guibennan Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority to CN202011632224.6A priority Critical patent/CN112806605B/zh
Publication of CN112806605A publication Critical patent/CN112806605A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112806605B publication Critical patent/CN112806605B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/24—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by extraction; Tobacco extracts
    • A24B15/26—Use of organic solvents for extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/28—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances
    • A24B15/30—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24D—CIGARS; CIGARETTES; TOBACCO SMOKE FILTERS; MOUTHPIECES FOR CIGARS OR CIGARETTES; MANUFACTURE OF TOBACCO SMOKE FILTERS OR MOUTHPIECES
    • A24D1/00—Cigars; Cigarettes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/83—Thymelaeaceae (Mezereum family), e.g. leatherwood or false ohelo
    • A61K36/835—Aquilaria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Manufacture Of Tobacco Products (AREA)

Abstract

本发明提出一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法。所述烟叶中含有质量分数为0.1％～3％的奇楠沉香。所述奇楠沉香提取物中色酮类化合物的总相对含量达到65％以上，单体2‑(2‑苯乙基)色酮和单体2‑[2‑(4‑甲氧基)苯乙基]色酮的相对含量之和达到45％以上。本发明发现奇楠沉香提取物具有很好的清除DPPH的作用，色酮类化合物含量越高，其清除能力越强。制得的奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟气味芳香、口感醇和度和燃吸满意度均较佳，具有一定的抗氧化作用，可以减少雪茄烟叶中的有害成分，还具有预防口腔癌和肺癌的作用，达到保健的目的，而且烟气中致癌物质苯并[α]芘含量较低。

Description

一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法
技术领域
本发明涉及雪茄烟技术领域，具体涉及一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法。
背景技术
沉香是瑞香科沉香属(Aquilaria)植物带有树脂的木材。奇楠是沉香中最上等和最珍贵的品种，又名奇楠、伽南、伽楠、伽羅等，英文名有Kanankoh、Kyara、Chi-Nan、Qi-Nan等。国产奇楠沉香源植物是瑞香科白木香。奇楠的成因与普通沉香基本相同，但二者性状有所差异，例如，①奇楠加热后散发的味道与普通沉香不同，熏烧时普通沉香香味较为稳定，而奇楠的头香、本香和尾香有明显变化；②相同含油量的奇楠较软，普通沉香较硬；③奇楠嚼之味道辛辣但回甘。
目前发现一些白木香新品种(例如热科2号)受伤后可快速产生沉香，并且结香1-3年后，所产沉香具有奇楠沉香的品质，油脂丰厚、香味浓郁，而且其化学成分与奇楠沉香一致，种植周期比普通白木香周期短，所产香头香有清凉味，本香甜香味和花香味浓郁，油脂丰厚，市场认可度非常高，而且种植面积广，能产奇楠沉香的新品种统称为奇楠品种，所产沉香常称为奇楠沉香。这是一种新资源，资源较丰富。
雪茄，属于香烟的一类，由干燥及经过发酵的烟草卷成的香烟。雪茄的甜味深受烟民喜欢，但普通全叶卷雪茄烟辛辣味重、刺激性大，使大部分消费者对其敬而远之。雪茄制作过程中有一个发酵过程，该发酵过程会产生较高浓度的硝酸盐，且由于用来卷雪茄烟的茄衣透气度低，雪茄烟的燃吸过程未能彻底燃烧雪茄，因此产生较多的有害物质，其有害物质甚至比香烟的多，而且，消散雪茄烟烟气所需要的时间也比香烟的长，因此，吸二手雪茄烟的危险比吸二手香烟更高。所以，开发对人类健康损坏更小的、口感更加的雪茄是市场所需。
发明内容
鉴于现有技术的不足，本发明提供一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法。
本发明方案包括以下方面：
一种奇楠沉香香型雪茄烟叶，所述烟叶含有奇楠沉香，奇楠沉香原料质量是烟叶质量的0.1％～3％。
优选的，所述奇楠沉香包括人工种植的白木香新品种所产的奇楠沉香，所述新品种包括热科1号和/或热科2号。
优选的，所述奇楠沉香含有奇楠沉香提取物，所述奇楠沉香提取物通过以下方法制得：奇楠沉香粉碎后，经加热回流提取，浓缩，即得奇楠沉香提取物。
优选的，所述加热回流提取所用溶剂为体积浓度50～95％的乙醇水溶液，所述加热回流提取的温度为70～100℃。
优选的，所述浓缩为减压浓缩，浓缩至料液比1g:1mL。
优选的，所述奇楠沉香提取物通过以下方法制得：
S1：奇楠沉香粉碎后，过50～100目筛，得奇楠沉香粉；按料液比1g：3～20mL加入乙醇水溶液进行第一次回流提取，提取时间是1.5～2h，过滤得滤渣A和滤液A；其中，乙醇水溶液的体积浓度为55～60％，回流提取的温度为70～80℃；
S2：按料液比1g：3～20mL加入乙醇水溶液对滤渣A进行第二次加热回流提取，提取时间是1.5-2.5h，过滤得到滤渣B和滤液B；其中，乙醇水溶液的体积浓度为80～95％，回流提取的温度为70～80℃；
S3：按料液比1g：3～20mL加入乙醇水溶液对滤渣B进行第三次回流提取，提取时间1～2h，过滤得滤液C；其中，乙醇水溶液的体积浓度为80～95％，回流提取的温度为95～100℃；
S4：合并所有滤液，然后减压浓缩至料液比1g:1mL，即得奇楠沉香提取物。
优选的，奇楠沉香提取物中色酮类化合物的总相对含量达到65％以上，单体2-(2-苯乙基)色酮和单体2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]色酮的相对含量之和达到45％以上。
另一方面，本发明还提供了所述的奇楠沉香香型雪茄烟叶的制备方法，该方法包括以下步骤：将奇楠沉香提取物与雪茄烟叶混匀，室内晾干。
优选的，所述室内晾干温度为20～30℃，相对湿度为60～65％。
优选的，室内晾干至烟叶含水质量为12～15％。
本发明还进一步提供一种包含所述的奇楠沉香香型雪茄烟叶的烟。所述烟为雪茄，所述雪茄可由本领域技术人员按照常规的雪茄制作工艺要求制成。
本发明采用的雪茄烟叶的种类不限，皆可与本发明提供方法制备的奇楠沉香提取物混合制备本发明提供的烟叶。采用任意雪茄烟叶与本发明提供的奇楠沉香提取物混合制备的烟叶皆在本发明的保护范围之内。
本发明所取得的有益效果：
本发明提供一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法，所述烟叶含有奇楠沉香，奇楠沉香原料质量是烟叶质量的0.1％～3％。将所述奇楠沉香香型雪茄烟叶制成雪茄后进行感官评价，结果显示本发明所制雪茄气味芳香、口感醇和度和燃吸满意度均较佳。
本发明实验研究发现本发明所制备烟叶的提取物对口腔鳞状细胞株Tac8113具有一定的细胞毒活性，而普通雪茄烟叶提取物对其没有表现出抑制活性。由此表明本发明提供的雪茄烟叶具有抗口腔癌的活性，说明本发明提供的奇楠沉香香型雪茄烟叶具有预防口腔癌的作用，可达到保健的目的。
本发明所制得雪茄的烟气中致癌物质苯并[α]芘含量较低，说明本发明提供的奇楠沉香香型雪茄烟中的奇楠沉香对苯并[α]芘具有一定的清除能力。
本发明还进一步优化了奇楠沉香提取物提取工艺，所得奇楠沉香提取物中色酮类化合物的总相对含量达到65％以上，单体2-(2-苯乙基)色酮和单体2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]色酮的相对含量之和达到45％以上。
含有本发明所述奇楠沉香的雪茄烟叶提取物的抗口腔癌能力得到提高，烟气中致癌物质苯并[α]芘含量进一步降低。
本发明发现奇楠沉香提取物具有很好的清除DPPH的作用，色酮类化合物含量越高，其清除能力越强。制得奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟具有一定的抗氧化作用，减少雪茄烟叶中的有害成分。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例与对比例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例与对比例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
本发明所述奇楠沉香包括本领域已知的任意来源或任意瑞香科植物所产奇楠沉香。
以下实施例与对比例所述奇楠沉香选自白木香新品种热科2号所产奇楠沉香。以下实施例与对比例所述奇楠沉香和普通沉香结香年份相同。
实施例1雪茄烟叶制备：
取奇楠沉香10g，粉碎后过50目筛，得奇楠沉香粉，用120mL体积分数为75％的乙醇水溶液加热回流提取，重复提取3次，提取温度为70℃，每次提取2h。减压浓缩至料液比1:1，再与330g雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为30℃，相对湿度为60％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
实施例2雪茄烟叶制备：
取奇楠沉香6g，粉碎后过100目筛，得奇楠沉香粉，用120mL体积分数为95％的乙醇水溶液加热回流提取，重复提取3次，提取温度为80℃，每次提取2h。减压浓缩至料液比1:1，再与6kg雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为20℃，相对湿度为60％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
实施例3雪茄烟叶制备：
取奇楠沉香5g，粉碎后过100目筛，得奇楠沉香粉，用100mL体积分数为50％的乙醇水溶液加热回流提取，重复提取3次，提取温度为100℃，每次提取2h。减压浓缩至料液比1:1，再与500g雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为25℃，相对湿度为65％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
实施例4雪茄烟叶制备：
S1：取奇楠沉香5g，粉碎后过50目筛，得奇楠沉香粉；按料液比1g：20mL加入乙醇水溶液进行第一次回流提取，提取时间是2h，过滤得滤渣A和滤液A；其中，乙醇水溶液的体积浓度为55％，回流提取的温度为80℃；
S2：按料液比1g：20mL加入乙醇水溶液对滤渣A进行第二次加热回流提取，提取时间是2.5h，过滤得到滤渣B和滤液B；其中，乙醇水溶液的体积浓度为80％，回流提取的温度为80℃；
S3：按料液比1g：20mL加入乙醇水溶液对滤渣B进行第三次回流提取，提取时间2h，过滤得滤液C；其中，乙醇水溶液的体积浓度为80％，回流提取的温度为100℃；
S4：合并所有滤液，然后减压浓缩至料液比1g:1mL，即得奇楠沉香提取物。
S5：奇楠沉香提取物与500g雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为25℃，相对湿度为65％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
实施例5雪茄烟叶制备：
S1：取奇楠沉香5g，粉碎后过100目筛，得奇楠沉香粉；按料液比1g：3mL加入乙醇水溶液进行第一次回流提取，提取时间是1.5h，过滤得滤渣A和滤液A；其中，乙醇水溶液的体积浓度为60％，回流提取的温度为70℃；
S2：按料液比1g：3mL加入乙醇水溶液对滤渣A进行第二次加热回流提取，提取时间是1.5-2.5h，过滤得到滤渣B和滤液B；其中，乙醇水溶液的体积浓度为95％，回流提取的温度为70℃；
S3：按料液比1g：3mL加入乙醇水溶液对滤渣B进行第三次回流提取，提取时间1h，过滤得滤液C；其中，乙醇水溶液的体积浓度为95％，回流提取的温度为95℃；
S4：合并所有滤液，然后减压浓缩至料液比1g:1mL，即得奇楠沉香提取物。
S5：奇楠沉香提取物与500g雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为25℃，相对湿度为65％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
实施例6雪茄烟叶制备：
取奇楠沉香5g，粉碎后过100目筛，得奇楠沉香粉，用100mL体积分数为35％的乙醇水溶液加热回流提取，重复提取3次，提取温度为100℃，每次提取2h。减压浓缩至料液比1:1，再与500g雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为25℃，相对湿度为65％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
实施例7雪茄烟叶制备：
取奇楠沉香5g，粉碎后过100目筛，得奇楠沉香粉，将奇楠沉香粉直接与500g雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为25℃，相对湿度为65％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
对比例1雪茄烟叶制备：
取奇楠沉香6g，粉碎后过100目筛，得奇楠沉香粉，用100mL体积分数为95％的乙醇水溶液加热回流提取，提取次数为3次，提取温度为80℃，每次提取2h。减压浓缩至料液比1:1，再与10kg雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为20℃，相对湿度为60％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得奇楠沉香香型的雪茄烟叶。
对比例2雪茄烟叶制备：
取普通沉香6g，粉碎后过100目筛，得奇楠沉香粉，用100mL体积分数为95％的乙醇水溶液加热回流提取，提取次数为3次，提取温度为80℃，每次提取2h。减压浓缩至料液比1:1，再与6kg雪茄烟叶(已经发酵干燥后的烟叶)混匀，在室内温度为20℃，相对湿度为60％条件下晾干至烟叶含水质量为12～15％，即得沉香香型的雪茄烟叶。
以上实施例与对比例的雪茄烟叶均按照常规的雪茄制备工艺要求制成雪茄。
实验例1
将实施例、对比例的雪茄与市售普通雪茄相比，比较气味芳香、口感醇和度和燃吸满意度，采用小组5人评吸取得分平均值，评定结果如下表1：
表1各样品品吸结果
组别 气味芳香 口感醇和度 燃吸满意度
实施例1制得雪茄 4.9 5.0 5.0
实施例2制得雪茄 4.5 4.4 4.5
实施例3制得雪茄 4.8 4.7 4.7
实施例4制得雪茄 4.9 4.8 4.7
实施例5制得雪茄 4.8 4.8 4.9
实施例6制得雪茄 4.0 4.2 4.4
实施例7制得雪茄 4.4 4.3 4.4
对比例1制得雪茄 4.1 3.9 4.1
对比例2制得雪茄 3.9 4.0 4.2
市售普通雪茄1 4.0 3.5 3.8
市售普通雪茄2 3.2 2.5 2.6
市售普通雪茄3 3.8 4.3 3.5
如表1可知，实施例所制雪茄气味芳香、口感醇和度和燃吸满意度均优于对比例制得的雪茄和市售普通雪茄。将实施例6、实施例7分别与实施例3对比发现，实施例6、7在气味芳香、口感醇和度和燃吸满意度方面有所降低，原因在于实施例6采用较低浓度乙醇水溶液回流提取，未能充分将有效成分提取出来，从而影响奇楠沉香在烟叶中的使用效果，实施例7将奇楠沉香粉直接与烟叶混合，粉末状的物质粘度较低，容易在烟叶加工过程中损失，而且未经提取的奇楠沉香香味、口感较杂，夹杂的其他异香影响雪茄气味芳香、口感醇和度和燃吸满意度。
实验例2抑制口腔鳞状细胞株活性检测
实验方法：
1)细胞培养人OSCC Tac8113细胞置于含有10％胎牛血清、100IU/mL青霉素和100mg/ml的RPMI1604培养基中，于37℃、5％CO2的恒温细胞培养箱中培养。选取处于对数生长期的细胞进行实验。
2)采用MTT法检测抗肿瘤活性，实验设试验组、阴性对照组(普通雪茄烟叶的提取物，40μg/mL、80μg/mL)、阳性对照组(顺铂，3μg/mL、5μg/mL、10μg/mL)，试验组采用实施例与对比例任一项提供的雪茄烟叶提取物。每个样品设5个浓度梯度，浓度依次为：5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL。其中，雪茄烟叶提取物的提取方法是：取烟叶粉碎，用95％乙醇水溶液回流提取2h，过滤得提取物。每克烟叶提取得1mL提取物。
3)选取对数生长期的细胞，用RPMI1640完全培养基将人OSCC Tac8113细胞株培养制成单细胞悬浮液，用血球计数板计数，按50000个/mL的浓度接种90μL于96孔平底细胞培养板，设阴性对照组、阳性对照组和试验组。各细胞株中加入样品后继续培养48h，培养条件为37℃，5％CO2，湿度90％以上，之后取出，置于显微镜下观察每孔细胞形态。
4)然后加入5mg/mL的MTT溶液20μL，37℃避光反应4h后，吸弃上清，再向各孔加入150μL DMSO，充分溶解，用ELX-800酶标仪测量各孔的OD值(测量波长为490nm)，按(公式1)计算抑制率。
Figure BDA0002875173340000071
5)以样品浓度为横坐标，样品的抑制率为纵坐标，作图并求出抑制率为50％时样品的浓度(IC50)，样品活性结果即以半数抑制浓度(IC50)表示。
表2各样品对人OSCC Tac8113细胞的细胞半数抑制浓度检测结果
Figure BDA0002875173340000072
注：/表示无抑制活性。
如表2可知，实施例1～7所制备烟叶的提取物对口腔鳞状细胞株Tac8113均具有一定的细胞毒活性，而普通雪茄烟叶提取物对其没有表现出抑制活性。由此表明本发明提供的雪茄烟叶具有抗口腔癌的活性，说明本发明提供的奇楠沉香香型雪茄烟叶具有预防口腔癌的作用，可达到保健的目的。
实验例3抑制肺癌细胞株活性检测
1)将人肺癌细胞株A549在培养箱37℃，5％CO2，湿度90％以上的条件下，于含有10％小牛血清RPMI1640完全培养基中培养。贴壁细胞用0.25％胰酶消化。
2)采用MTT法检测抗肿瘤活性，实验设试验组、阴性对照组(普通雪茄烟叶的提取物)、阳性对照组(丝裂霉素C溶液)，试验组采用本发明实施例1～7和对比例1-2任一项提供的雪茄烟叶提取物。其中，雪茄烟叶提取物的提取方法是：取烟叶粉碎，用95％乙醇水溶液回流提取2h，过滤得提取物。每克烟叶提取得1mL提取物。每个样品设5个浓度梯度，浓度依次为：5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL。
3)选取对数生长期的细胞，用RPMI1640完全培养基将肿瘤细胞株分别培养制成单细胞悬浮液，用血球计数板计数，按50000个/mL的浓度分别接种90μL于96孔平底细胞培养板，每种细胞皆设阴性对照组、阳性对照组和试验组，在培养箱37℃，5％CO2，湿度90％以上的条件下培养。
4)直接向人肺癌细胞株A549中，分别加入10μL普通雪茄烟叶的提取物、10μL丝裂霉素C溶液、10μL本发明实施例1～7和对比例1-2任一项提供的雪茄烟叶提取物。
5)各细胞株中加入样品后继续培养72h，培养条件为37℃，5％CO2，湿度90％以上，之后取出，置于显微镜下观察每孔细胞形态。
6)然后加入5mg/mL的MTT溶液15μL，37℃反应4h后，吸弃上清，再向各孔加入100μLDMSO，充分溶解，用ELX-800酶标仪测量各孔的OD值(测量波长为490nm)，按下式计算抑制率。
Figure BDA0002875173340000081
7)以样品浓度为横坐标，样品的抑制率为纵坐标，作图并求出抑制率为50％时样品的浓度(IC50)，样品活性结果即以半数抑制浓度(IC50)表示。
表3各样品对肺瘤细胞株的细胞半数抑制浓度检测结果
Figure BDA0002875173340000082
Figure BDA0002875173340000091
注：/表示无抑制活性。
如表3可知，实施例1～7和对比例1～2所制备雪茄的提取物对肺癌细胞株均具有一定的细胞毒活性，而普通雪茄烟叶提取物对人肺癌细胞株A549没有表现出抑制活性。由此表明本发明提供的雪茄烟叶具有抗肺瘤的活性，说明本发明提供的奇楠沉香香型雪茄烟叶具有抗肺癌的作用，而且本发明所述的制作方法得到的雪茄烟叶抗肺癌的功效更好，可达到保健的目的。
实验例4烟叶致癌物质苯并芘的检测
参照国家标准GB/T 21130-2007卷烟烟气总粒相物中苯并[α]芘的测定的方法，对实施例与对比例任一项提供的雪茄烟以及三种市售普通雪茄烟气总粒相物中苯并[α]芘进行测定。三次平行试验取均值，结果见表4。
表4苯并芘的检测结果
Figure BDA0002875173340000092
Figure BDA0002875173340000101
如表4可知，与对比例所制得的雪茄以及3种市售雪茄相比，实施例所制得雪茄的烟气中致癌物质苯并[α]芘含量较低，说明本发明提供的奇楠沉香香型雪茄烟中的奇楠沉香对苯并[α]芘具有一定的清除能力。其中，实施例4和实施例5雪茄烟气中苯并[α]芘达到最低4.8～5.2，相比于市售普通雪茄2，苯并[α]芘含量降低了50％左右。
实验例5沉香提取物中色酮类成分含量测试
采用GC-MS对实施例1-6和对比例2中提取的沉香馏分进行测试，具体测试条件如下，测试结果见表5。
质谱条件：电子轰击(EI)离子源；电子能量70eV；离子源温度230℃；四极杆温度150℃；接口温度280℃；发射电流34.6μA；倍增器电压1434V；质量扫描范围20-550m/z。对总离子流图中的各峰经质谱数据系统检索及核对Nist2005和Wiley275标准质谱图，并借鉴前人和本研究组前期的鉴定方法，比对鉴定化合物。
色谱条件：色谱柱为弹性石英毛细管柱HP-5MS 5％Phenyl Methyl Siloxane(30m×0.25mm×0.25μm)；升温程序：柱温50℃，保持2min，以5℃/min升温至310℃，保持10min；汽化室温度250℃；载气为高纯He(99.999％)；载气流量1.0mL/min；不分流；溶剂延迟时间：3.0min。
表5沉香提取物中成分检测结果
Figure BDA0002875173340000102
Figure BDA0002875173340000111
如表5可知，实施例1～6沉香提取物中色酮类成分相对含量达到65％以上，2-(2-苯乙基)色酮和单体2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]色酮的相对含量之和达到45％以上。
实验例6 DPPH自由基清除实验
沉香中的色酮类成分具有较好的清除自由基，抗氧化的作用。对实施例1-6和对比例2的沉香提取物进行DPPH自由基清除用无水乙醇配制0.05，0.10，0.20，0.50，1.00mg/ml样品溶液。向96孔板加入不同浓度的样品溶液50μl和DPPH溶液(0.38mg/ml)50μl，室温黑暗处反应30min。用酶标仪在517nm波长处检测吸光值Asample，空白组用50μl无水乙醇代替样品溶液，测得吸光值Acontrol。对照组用50μl无水乙醇代替DPPH溶液，测得吸光值为Ablack。以维生素C为阳性对照。清除率(I％)计算公式为:
I％＝[1－(Asample－Ablack)/Acontrol]×100％
表6 DPPH自由基清除实验结果
试样浓度(mg/ml) 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00
实施例1 10％ 21％ 46％ 72％ 100％
实施例2 3％ 11％ 29％ 45％ 69％
实施例3 6％ 18％ 45％ 65％ 89％
实施例4 6％ 20％ 51％ 79％ 93％
实施例5 7％ 22％ 56％ 81％ 98％
实施例6 - - 12％ 34％ 51％
对比例2 - - - 15％ 28％
阳性对照 30％ 100％ 100％ 100％ 100％
如表6可知，奇楠沉香提取物对DPPH具有较好的清除作用，奇楠沉香中色酮类化合物的含量越高，清除效果越好。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种奇楠沉香香型雪茄烟叶，其特征在于，含有奇楠沉香，奇楠沉香原料质量是烟叶质量的0.1％～3％。
2.根据权利要求1所述奇楠沉香香型雪茄烟叶，其特征在于，所述奇楠沉香包括人工种植的白木香新品种所产的奇楠沉香，所述新品种包括热科1号和/或热科2号。
3.根据权利要求1所述奇楠沉香香型雪茄烟叶，其特征在于，所述奇楠沉香含有奇楠沉香提取物，所述奇楠沉香提取物通过以下方法制得：奇楠沉香粉碎后，经加热回流提取，浓缩，即得奇楠沉香提取物。
4.根据权利要求3所述奇楠沉香香型雪茄烟叶，其特征在于，所述加热回流提取所用溶剂为体积浓度50～95％的乙醇水溶液，所述加热回流提取的温度为70～100℃。
5.根据权利要求3所述奇楠沉香香型雪茄烟叶，其特征在于，所述浓缩为减压浓缩，浓缩至料液比1g:1mL。
6.根据权利要求3所述奇楠沉香香型雪茄烟叶，其特征在于，所述奇楠沉香提取物通过以下方法制得：
S1：奇楠沉香粉碎后，过50～100目筛，得奇楠沉香粉；按料液比1g：3～20mL加入乙醇水溶液进行第一次回流提取，提取时间是1.5～2h，过滤得滤渣A和滤液A；其中，乙醇水溶液的体积浓度为55～60％，回流提取的温度为70～80℃；
S2：按料液比1g：3～20mL加入乙醇水溶液对滤渣A进行第二次加热回流提取，提取时间是1.5-2.5h，过滤得到滤渣B和滤液B；其中，乙醇水溶液的体积浓度为80～95％，回流提取的温度为70～80℃；
S3：按料液比1g：3～20mL加入乙醇水溶液对滤渣B进行第三次回流提取，提取时间1～2h，过滤得滤液C；其中，乙醇水溶液的体积浓度为80～95％，回流提取的温度为95～100℃；
S4：合并所有滤液，然后减压浓缩至料液比1g:1mL，即得奇楠沉香提取物。
7.根据权利要求3所述奇楠沉香香型雪茄烟叶，其特征在于，奇楠沉香提取物中色酮类化合物的总相对含量达到65％以上，单体2-(2-苯乙基)色酮和单体2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]色酮的相对含量之和达到45％以上。
8.权利要求1～7任一项所述的奇楠沉香香型雪茄烟叶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将奇楠沉香提取物与雪茄烟叶混匀，室内晾干。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述室内晾干温度为20～30℃，相对湿度为60～65％，室内晾干至烟叶含水质量为12～15％。
10.一种包含权利要求1所述的奇楠沉香香型雪茄烟叶的烟。
CN202011632224.6A 2020-12-31 2020-12-31 一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法 Active CN112806605B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011632224.6A CN112806605B (zh) 2020-12-31 2020-12-31 一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011632224.6A CN112806605B (zh) 2020-12-31 2020-12-31 一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112806605A true CN112806605A (zh) 2021-05-18
CN112806605B CN112806605B (zh) 2023-03-10

Family

ID=75856490

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011632224.6A Active CN112806605B (zh) 2020-12-31 2020-12-31 一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112806605B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113264912A (zh) * 2021-05-20 2021-08-17 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一种奇楠沉香中2-(2-苯乙基)色酮类成分的提取方法及其应用
CN115260139A (zh) * 2022-08-01 2022-11-01 中国医学科学院药用植物研究所海南分所 色酮的提取方法及其应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004073168A (ja) * 2002-08-20 2004-03-11 Boodaresu Human Center:Kk 沈香木の素材を活用した新商品たばこの開発
CN103005696A (zh) * 2012-12-14 2013-04-03 袁恩泽 沉香雪茄及其制备方法
CN103190694A (zh) * 2013-04-26 2013-07-10 梅文莉 一种中药提取物、其制备方法、用途及制得的烟丝、卷烟
CN103789094A (zh) * 2014-01-21 2014-05-14 广州大学 一种从沉香木屑中提取沉香精油的方法
CN106290613A (zh) * 2016-07-28 2017-01-04 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一种鉴定奇楠沉香真伪的方法
CN107904017A (zh) * 2017-11-20 2018-04-13 杨敦阶 一种沉香精油制备工艺

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004073168A (ja) * 2002-08-20 2004-03-11 Boodaresu Human Center:Kk 沈香木の素材を活用した新商品たばこの開発
CN103005696A (zh) * 2012-12-14 2013-04-03 袁恩泽 沉香雪茄及其制备方法
CN103190694A (zh) * 2013-04-26 2013-07-10 梅文莉 一种中药提取物、其制备方法、用途及制得的烟丝、卷烟
CN103789094A (zh) * 2014-01-21 2014-05-14 广州大学 一种从沉香木屑中提取沉香精油的方法
CN106290613A (zh) * 2016-07-28 2017-01-04 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一种鉴定奇楠沉香真伪的方法
CN107904017A (zh) * 2017-11-20 2018-04-13 杨敦阶 一种沉香精油制备工艺

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113264912A (zh) * 2021-05-20 2021-08-17 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一种奇楠沉香中2-(2-苯乙基)色酮类成分的提取方法及其应用
CN115260139A (zh) * 2022-08-01 2022-11-01 中国医学科学院药用植物研究所海南分所 色酮的提取方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN112806605B (zh) 2023-03-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105848502B (zh) 烟草处理方法
CN106165906B (zh) 适用于卷烟制品的麦芽焦甜香香料及在烟草制品中的应用
CN112806605B (zh) 一种奇楠沉香香型雪茄烟叶及烟的制备方法
CN109938396B (zh) 一种烟草内源性Maillard反应香料的制备方法及在新型烟草制品中的应用
CN101538509B (zh) 从玉米芯中提取烟用香料的方法及其用途
CN106010797B (zh) 一种以焦麦芽为原料制备的麦芽焦甜香香料及其在电子烟中的应用
CN112795428A (zh) 一种荷花香味风格烟用香精及其制备方法和应用
CN113951552B (zh) 一种krk26烟草提取物、其制备方法和用途
CN106617253A (zh) 一种绿茶制备电子烟香精的方法
CN114041623B (zh) 一种旱烟特征致香成分、其制备方法和用途
CN109171011A (zh) 一种替烟茶片
CN110305735A (zh) 一种甜玉米烟用香料的制备及其在烟草中应用
CN106834357B (zh) 百香果发酵物、其制备方法及含该发酵物的烟草制品
CN113951534B (zh) 一种茉莉提取物、其制备方法和用途
CN102504952A (zh) 云南食用玫瑰花精油及其在烟草中的应用
CN113951557A (zh) 一种葡萄籽原花青素微粉及其制备方法和应用
CN107485048A (zh) 一种复合香料的提取方法及其在卷烟中的应用
CN110373266B (zh) 一种烟草增香剂及其应用
CN110373271B (zh) 一种去除植物蜡质用添加剂及植物蜡质的去除方法
CN105154235B (zh) 一种烟用石楠香料、制备方法及其应用
CN112120271A (zh) 一种麦芽烟用香料的制备及其在烟草中应用
CN113796565A (zh) 一种藤茶香型新型卷烟香精的制备方法
CN108402512B (zh) 一种电子烟液及其制备方法
CN108236127B (zh) 一种发酵烟用鸢尾提取物的制备方法及其应用
CN112772962A (zh) 一种含有奇楠沉香提取物的烟丝、卷烟及制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant