CN112680370A - 一株高核酸酿酒酵母及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及微生物技术领域。具体而言，本发明涉及一株酿酒酵母ZB418，以及其在生产核酸及食品发酵中的应用。本发明的酿酒酵母ZB418的核酸含量可高达24.87%。本发明的酿酒酵母ZB418为非转基因工程菌，且遗传稳定、且易于获得理想新品种，安全无毒，可直接应用在医药、食品、农业、化妆品等领域。

Description

一株高核酸酿酒酵母及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域。具体而言，本发明涉及一株酿酒酵母ZB418，以及其在生产核酸及食品发酵中的应用。

背景技术

核酸（DNA/RNA）是一类重要的生物大分子，它不仅是主要的遗传物质、在基因的表达和蛋白质的生物合成中起着关键的作用，而且核酸及其衍生物在医药、食品、农业生产等领域都有广泛的用途。在自然界中，核酸含量最丰富的微生物是酵母，含量达到10%～16%的酵母被称为高核酸酵母。工业上主要利用酵母发酵培养提取生产核酸的原料，通过发酵培养来获取高核酸酵母的DNA/RNA，该方法具有下列特点:①酵母菌体中核酸含量普遍高于其他微生物，胞 内RNA含量高于DNA含量；②与其他微生物相比，酵母菌容易收集，并且酵母核酸提取工艺简单；③可以采用连续培养的方法培养酵母；④酵母对培养基的要求低，容易培养。

酿酒酵母中核酸含量一般为6%～8%，从生产经济效益方面来看，成本较高，因此，选育核酸含量高的酵母菌种就成为了核酸工业生产的重要组成部分。对于高核酸酵母的研究是当今的研究热点之一。

虽然我国是酵母生产大国之一，但在生产过程中主要存在着以下三个问题，制约着我国酵母产业以及核酸产业的发展：

1.核酸含量高的酵母菌多属于假丝酵母，但是基于食用安全性考虑，对假丝酵母的应用需十分谨慎，所以对高核酸酿酒酵母的筛选显得格外重要；

2.生产富含I+G酵母抽提物所需要的高核酸酿酒酵母菌种的性能较低，且核酸含量不高；

3.一直以来，国内外主要通过诱变等筛选方式选育高核酸酵母菌种，却忽略了对高核酸酵母本身的选育和筛选。

因此，选育核酸含量高、产孢能力及抗氧化能力强的酿酒酵母菌种，对于进一步制备天然核酸系列产品至关重要，并且将很好地促进整个核酸产业的发展，同时带动下游产业发展，通过添加天然核酸系列产品促进酱油、醋等食品调味料品质的提高，同时为调合型天然调味料或汤料提供天然鲜味，以适应当前市场对调味品越来越高的要求。

发明内容

为了解决目前酵母核酸含量低，工业化生产成本高的难题，本申请的发明人通过传统的选育方法出人意料地从酿酒酵母中筛选获得了富含高核酸的酵母菌株，其遗传稳定、且易于获得理想新品种，安全无毒。本发明的酵母菌株生长旺盛，遗传稳定性良好，生产核酸的性能保持稳定，将极大的推动核酸产业的发展。

因此，在第一方面，本申请提供了一株酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）ZB418，其于2020年9月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC.NO：61172，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

在某些实施方案中，本发明提供的酵母菌的核酸含量（例如DNA和/或RNA含量）为酵母菌干重的至少10％（例如至少10%，至少15%，至少20%，至少21%，至少22%，至少23%，至少24%，或至少24.87%）。在某些实施方案中，所述酵母菌的核酸含量（例如DNA和/或RNA含量）为酵母菌干重的至少24%，例如约24.87%。

在某些实施方案中，本发明提供的酵母菌的酵母营养细胞呈圆形，芽殖。菌落形态为圆形，边缘整齐，有明显突出，菌落为乳白色，透明度较差，质地光滑湿润，具有酒酿气味。

在某些实施方案中，本发明提供的酵母菌接种到麦芽汁培养基后（例如12h后）瓶底出现大量乳白色沉淀，生长旺盛。

在某些实施方案中，本发明提供的酵母菌经过5代或更多代（例如5代、6代、7代、8代、9代或10代）传代后，生产核糖核酸的性能保持稳定，不易发生回复突变，适于工业化生产应用。

在另一方面，本申请还提供了本发明的酿酒酵母ZB418的孢子。本发明的孢子具有优良的抗氧化能力，可作为天然抗氧化剂应用于食品领域（例如酱或酱油）。在某些实施方案中，所述孢子可以通过将本发明的酿酒酵母ZB418在孢子形成诱导培养基中培养而获得。在某些实施方案中，所述孢子形成诱导培养基中含非发酵碳源，如醋酸钾，其可以诱导天然的酿酒酵母细胞停止细胞有丝分裂周期而进入减数分裂和孢子形成。在某些实施方案中，所述孢子通过以下步骤获得：将酵母菌株ZB418接种在YPD固体培养基中培养；将培养产物接种到KAc固体培养基中培养，从而获得孢子。在某些实施方案中，所述YPD固体培养基包含：酵母粉（例如5-20 g/L，如10 g/L），蛋白胨（例如10-30 g/L，如20 g/L），葡萄糖（例如10-30 g/L，如20 g/L），琼脂（例如10-30 g/L，如20 g/L）。在某些实施方案中，所述KAc固体培养基包含：醋酸钾（例如10-30 g/L，如20 g/L），琼脂（例如10-30 g/L，如20 g/L）。

在第二方面，本申请提供了培养本发明的酿酒酵母ZB418的方法，其包括如下步骤：

（1）种子培养：将酵母菌株ZB418接种在培养液中培养，得到种子培养液；

（2）发酵培养：将步骤（1）中得到的种子培养液接种到发酵培养基中培养，得到发酵培养液。

在某些实施方案中，在进行步骤（1）之前还包括菌株活化的步骤（例如将酿酒酵母ZB418在固体培养基或液体培养基中活化培养的步骤）。

在某些实施方案中，所述步骤（1）是多级种子培养。

在某些实施方案中，所述步骤（2）是多级发酵培养。在某些实施方案中，所述多级发酵培养包括初级发酵培养、一级发酵培养以及任选的二级发酵培养。

在某些实施方案中，用于培养本发明菌株的培养液是麦芽汁培养基。在某些实施方案中，所述麦芽汁培养基包含麦芽膏粉（例如100-150 g/L，如130 g/L）。在某些实施方案中，所述麦芽汁培养基进一步包含氯霉素（例如0.05-0.2 g/L，如0.1 g/L）。在某些实施方案中，所述麦芽汁培养基为pH 5.6±0.2。在某些实施方案中，所述麦芽汁培养基包含麦芽膏粉130 g/L；氯霉素 0.1 g/L，pH 5.6±0.2。

在第三方面，本申请提供了第一方面所述的酿酒酵母ZB418或其孢子的培养物、裂解物或提取物。

菌株的“培养物”是指，将菌株在培养基中培养后获得的产物。培养物可以通过在培养基中培养本发明的酿酒酵母ZB418来获得，并且本领域技术人员已知如何根据菌株性质选择合适的培养基及培养条件。在某些实施方案中，所述培养物包含本发明的酿酒酵母ZB418和培养基。

菌株的“裂解物”是指，菌株的细胞壁和/或细胞膜经破碎后得到的产物，其包含胞内物质。菌株的裂解物可通过本领域已知的各种技术获得，例如超声破碎法、均质法、渗透压冲击法、冻融破碎法、酶溶法等。

菌株的“提取物”是指从菌株获得的任何级份，例如核酸（如DNA和/或RNA）提取物，或通过化学、物理和/或酶处理从菌体产生的任何制备物，其基本上不含活菌。在某些实施方案中，所述提取物是核酸提取物，其包含从本发明的酿酒酵母ZB418中分离的核酸部分（例如DNA和/或RNA）。在某些实施方案中，所述核酸部分包含核苷酸、寡核苷酸和/或多核苷酸。

在某些实施方案中，所述酿酒酵母ZB418经过发酵培养。在某些实施方案中，所述发酵培养包括使用第二方面中定义的方法对所述酿酒酵母ZB418进行培养。

在第四方面，本申请提供了一种组合物，其包含本发明的酿酒酵母ZB418或其孢子、或第三方面所述的培养物、裂解物或提取物。

在某些实施方案中，所述组合物是微生物菌剂，其包含本发明的酿酒酵母ZB418或其孢子。在某些实施方案中，所述微生物菌剂包含活菌。在某些实施方案中，所述微生物菌剂包含至少10⁵个/g（例如至少10⁵个/g，至少10⁶个/g，至少10⁷个/g，至少10⁸个/g，或至少10⁹个/g）的酿酒酵母ZB418。在某些实施方案中，所述微生物菌剂是液体、固体或凝胶形式，例如为糊剂或粉状物。

在第五方面，本申请提供了本发明的酿酒酵母ZB418或其孢子在生产核酸（例如DNA和/或RNA）中的用途。本申请还提供了生产核酸（例如DNA和/或RNA）的方法，其包括：裂解本发明的酿酒酵母ZB418并分离核酸部分，或者从所述菌株的裂解物中分离核酸部分。在某些实施方案中，所述核酸部分包含核苷酸、寡核苷酸和/或多核苷酸。

在某些实施方案中，所述酿酒酵母ZB418经过发酵培养。在某些实施方案中，所述发酵培养包括使用第二方面中定义的方法对所述酿酒酵母ZB418进行培养。

在第六方面，本申请提供了本发明的酿酒酵母ZB418或其孢子在食品发酵中的用途。在某些实施方案中，所述食品发酵包括谷物发酵制品或豆类发酵制品的发酵。在某些实施方案中，所述食品发酵为酒曲、酿造酒（例如米酒）、食醋（例如香醋、米醋、白醋或果醋）、酱油或面包的发酵。

在第七方面，本申请提供了本发明的酿酒酵母ZB418或其孢子、第三方面所述的培养物、裂解物或提取物、或第四方面所述的组合物，在生产食品、调味品、食品添加剂、药品、保健品或化妆品中的用途。在某些实施方案中，所述调味品为发酵型调味品（例如酱油、酱、醋、豆豉或腐乳）或鲜味剂。

在另一方面，本申请还提供了本发明的酿酒酵母ZB418在生产高核酸酵母菌中的应用，其中，所述高核酸酵母菌的核酸含量（例如DNA和/或RNA含量）为酵母菌干重的至少10％（例如至少10%，至少15%，至少20%，至少21%，至少22%，至少23%，至少24%，或至少24.87%）。在某些实施方案中，所述高核酸酵母的核酸含量（例如DNA和/或RNA含量）为酵母菌干重的至少24%，例如24.87%。在某些实施方案中，所述高核酸酵母菌由所述酿酒酵母ZB418经发酵获得。在某些实施方案中，所述高核酸酵母菌由所述酿酒酵母ZB418经诱变筛选或基因工程手段获得。

在另一方面，本申请还提供了生产高核酸酵母菌的方法，其包括使用第二方面中定义的方法对所述酿酒酵母ZB418进行发酵培养。在某些实施方案中，所述方法包括如下步骤：

（1）种子培养：将酵母菌株ZB418接种在培养液中培养，得到种子培养液；和

（2）发酵培养：将步骤（1）中得到的种子培养液接种到发酵培养基中培养，得到发酵培养液。

在某些实施方案中，在进行步骤（1）之前还包括菌株活化的步骤（例如将酿酒酵母ZB418在固体培养基或液体培养基中活化培养的步骤）。

在某些实施方案中，所述步骤（1）是多级种子培养。

在某些实施方案中，所述步骤（2）是多级发酵培养。在某些实施方案中，所述多级发酵培养包括初级发酵培养、一级发酵培养以及任选的二级发酵培养。

在另一方面，本申请还提供了一种高核酸酿酒酵母，其由本发明的酿酒酵母ZB418制备获得。在某些实施方案中，所述高核酸酿酒酵母由酿酒酵母ZB418经发酵培养获得。在某些实施方案中，所述高核酸酵母菌的核酸含量（例如DNA和/或RNA含量）为酵母菌干重的至少10％（例如至少10%，至少15%，至少20%，至少21%，至少22%，至少23%，至少24%，或至少24.87%）。在某些实施方案中，所述高核酸酵母的核酸含量（例如DNA和/或RNA含量）为酵母菌干重的至少24%，例如约24.87%。

有益效果

本发明至少具有以下一种或多种技术优势和积极效果：本发明的ZB418菌株的核酸含量可高达24.87%。本发明的ZB418菌株通过传统的选育方法从酿酒酵母中筛选，与诱变、工程改造等方法获得的酵母相比，其遗传稳定、安全无毒，可直接应用在医药、食品、农业、化妆品等领域。本发明的ZB418菌株遗传稳定性好，生长旺盛，生产核酸的性能保持稳定，适合工业化生产高核酸酵母菌。因此，本发明提供的酿酒酵母ZB418解决了目前酵母核酸含量低，工业化生产成本高的难题，将极大的推动核酸产业的发展。此外，本发明的ZB418菌株孢子具有优良的抗氧化性能，可作为天然抗氧化剂应用于食品领域。

下面将结合附图和实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将理解，下列附图和实施例仅用于说明本发明，而不是对本发明的范围的限定。根据附图和优选实施方案的下列详细描述，本发明的各种目的和有利方面对于本领域技术人员来说将变得显然。

附图说明

图1为筛选菌株YL-1~6经摇瓶发酵不同培养时间的生物量变化曲线。

图2为ZB418的菌落形态和显微形态。

序列信息

本发明涉及的序列的信息提供于下面的表1中。

表1 序列信息

关于生物材料保藏的说明

本发明涉及下列已在广东省微生物菌种保藏中心（广州市先烈中路100号大院59号楼）进行保藏的生物材料：

酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）ZB418，其具有保藏号GDMCC No: 61172，且保藏日期为2020年09月01日。

具体实施方式

现参照下列意在举例说明本发明（而非限定本发明）的实施例来描述本发明。

除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，本发明实施例所用培养基和试验条件为本领域常规培养基和试验条件。除非特别说明，本发明实施例所用试剂均为市购。

实施例1：酵母菌株的分离筛选与鉴定

1.1 实验材料

麦芽汁固体培养基：麦芽膏粉 130 g/L；氯霉素 0.1 g/L最终pH 5.6±0.2。

客家酒镇酒厂内土壤样品。

实验方法

从客家酒镇酒厂内土壤中分离酿酒酵母菌株，步骤如下：

（1）称取0.15g客家酒镇酒厂内的土壤到2ml离心管内，加入1.5ml 0.85%的生理盐水，用生物样品均质机（型号：Bioprep-6）4000 rpm/min均质30s，制成1:10的样品匀液。

（2）用剪过的无菌枪头吸取1:10的样品匀液1ml，沿着管壁缓慢加入装有9ml稀释液的离心管中，摇匀后继续稀释，制备10倍系列稀释样品匀液。

（3）选择稀释10³，10⁴，10⁵倍后的匀液进行涂板，吸取1ml样品匀液于无菌平皿中，每个稀释度做两个平皿，同时分别吸取1ml空白稀释液加入到平皿内做空白对照。

（4）将麦芽汁固体培养基冷却至46℃时及时倾注平板，转到平板使其混合均匀，加入1/10灭菌的土壤与培养基混合保证营养成分与之前类似，防止部分菌无法生长。

（5）待平板凝固后，平板倒置放于30℃烘箱里培养2～3d。待长出菌落后，选择具有典型酵母菌菌落特征的单菌落进一步划线分离纯化，培养2d后将拍照记录菌落形态并在显微镜下观察细胞形态。

挑选具备酵母典型菌落形态和显微形态的菌株进行菌种鉴定，步骤如下：

（1）基因组的制备：取10μL无菌水于PCR小管内，用枪头挑选少量6株酵母菌菌株菌体于小管内并混合均匀，采用液氮反复冻融的方法裂解细胞，粗提基因组。

（2）测序鉴定：用上述提取的菌株基因组为模板，利用18S rDNA通用引物（SEQ IDNOs: 1-2）扩增菌株的18S核糖体基因序列，扩增产物送至广州华大基因有限公司进行测序，将测序结果与NCBI数据库中序列进行比对分析。

实验结果

拼接后的测序结果表明，挑选出的6株菌的18S rDNA核苷酸序列（如SEQ NO ID:3所示）相同，并且，经NCBI数据库Blast比对后，该序列与酿酒酵母18S rDNA核苷酸序列匹配度超过99%。证实挑选出的这6株菌为酿酒酵母。

实施例2：菌株生长曲线和核酸含量测定

2.1实验材料

麦芽汁培养基：麦芽膏粉130 g/L；氯霉素 0.1 g/L最终pH 5.6±0.2。

实验方法

进一步对实施例1分离获得的6株酵母（分别编号为YL-1、YL-2、YL-3、YL-4、YL-5和YL-6）进行生长曲线绘制和核酸含量测定，具体方法如下：

（1）发酵培养条件优化

将酿酒酵母培养条件进行优化，包括培养基成分、接种量和培养温度等，确定最适的培养条件。

（2）酵母菌发酵培养

将4℃保存的酿酒酵母菌种接种到麦芽汁培养基中，30℃培养16～20h。以1%接种量转接到装有100 mL培养基的250 mL摇瓶中，置摇床中以200 r/min振荡，30℃发酵培养。

（3）生物量测定

分别收集发酵培养4h、6h、8h、10h、12h、14h、16h、18h、20h、22h和24h的酿酒酵母发酵液，吸取1ml酵母菌液于离心管中（离心管提前干燥并称取重量），8000r/min离心10min，收集酵母菌体。用去离子水将酵母菌体洗涤2次，放入105℃烘箱中烘干至恒重，称量干重并得出生物量DCM（mg/mL）。

（4）核酸含量测定

收集转接培养6-8小时的酵母发酵液，吸取6份1 mL的菌液，其中3份测核酸含量，另外3份烘干测干重；将1 mL菌液于8000 rpm/min离心2 min离心收集菌体，并用无菌水洗涤2次，用枪头吸干水分。菌体加1 mL 0.5 M高氯酸，充分重悬后，72℃水浴加热15min，期间每隔2min颠倒混匀一次，加热后1000 rpm/min离心10min，取0.5mL上清加入4.5mL无菌水中稀释后，用分光光度计在260nm处测定核酸浓度，并用无菌水做空白，得到吸光值后按如下公式计算核酸含量：

核酸含量=（A*660）/(M*800)*100%；

其中A：分光光度计测得核酸浓度值（mg/mL），M：菌体细胞干重(mg)。

实验结果

筛选菌株YL-1~6经摇瓶发酵不同培养时间的生物量变化曲线如图1所示，由图1可知，YL-1~6这6株菌株生物量及生长情况差异不大，在0～4h生长缓慢，菌体处于生长延迟期，4～16h为对数生长期，此时核酸合成处于高峰期，在6-8h时检测核酸含量；16～36h为稳定生长期。摇瓶培养24h时，生物量达到12mg/mL。

核酸含量测定结果如表2所示：

表2：筛选菌株核酸含量

由表2的数据可知，YL-1~6的核酸含量均较高，处于22%~25%之间，因此YL-1~6菌株属于高核酸酵母。其中YL-4（命名为ZB418）的最为突出，达到24.87%，具备产业化潜力，将其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC No: 61172。取0.5ml培养18h的ZB418菌体于菌种保藏管中，加上0.5ml 灭菌的50%的甘油混合均匀，置于-80℃冰箱保藏备用。

实施例3：酵母菌ZB418遗传稳定性测试

3.1实验材料

麦芽汁培养基：麦芽膏粉130 g/L；氯霉素0.1 g/L最终pH 5.6±0.2。

实验方法

ZB418菌株核酸含量更高，因而进一步对其遗传稳定性进行检测。具体方法如下：

将高核酸酿酒酵母菌株ZB418连续传代培养至10代，测试每代的核酸含量，核酸含量测定方法同实施例2。

实验结果

ZB418的菌落形态和显微形态如图2所示，由图2可知，ZB418形成的菌落具有明显酵母菌菌落特征，单个菌落形态为圆形，边缘整齐，有明显突出，菌落为乳白色，透明度较差，质地光滑湿润；在显微镜下细胞形态较大，呈圆球形，且分散均匀，符合酵母菌形态特征。

连续传代后的核酸含量如表3所示：

表3：ZB418连续传代后的核酸生产性能

由表3结果可知，菌株ZB418连续传10代后其核酸含量仍然较高且比较稳定，传代稳定性良好，不易发生回复突变，适于工业化生产。

实施例4：酵母菌ZB418产孢性能测试

4.1实验材料

YPD固体培养基：酵母粉10 g/L，蛋白胨20 g/L，葡萄糖20 g/L，琼脂20 g/L。

固体培养基：醋酸钾 20 g/L，琼脂 20 g/L。

固体培养基：酵母粉10 g/L，蛋白胨20 g/L，葡萄糖20 g/L，硫酸腺嘌呤0.04 g/L，琼脂20 g/L。

实验方法

对ZB418的产孢性能进行测试，将ZB418菌株划线在YPD固体平板上生长，30℃培养24h后将YPD固体平板上的菌株转移至KAc固体平板上进行产孢，30℃培养48h-72h后，其产孢效率可达到40%左右。

对ZB418营养细胞和孢子进行抗氧化实验。主要的操作步骤如下：

（1）当ZB418营养细胞或者孢子生长到稳定期后，收集菌体，调节菌体浓度为10⁵ cells/mL，加入氧化剂（FeCl₃/H₂O₂），氧化剂终浓度为2 mmol/L FeCl₃/2 mmol/L H₂O₂。

（2）混合液在30 ℃培养1 h，依次按梯度稀释10倍后震荡混匀，分别取5 μL点板到YPAD 培养基上，30℃培养至菌体长出，观察生长情况。

实验结果

氧化剂处理前后ZB418营养细胞和孢子的生长情况如表4所示：

表4：营养细胞和孢子的抗氧化性对比

注：“-”表示未生长，“+”表示生长，“+”越多生长状况越好

由表4可知，用FeCl₃/H₂O₂处理的孢子与未处理的孢子生长状况相似。然而，FeCl₃/H₂O₂处理后的营养细胞的生存力显著降低。这些结果表明，产孢后的ZB418抗氧化能力明显优于其未产孢时期的营养细胞，即ZB418的孢子抗氧化能力强，这也是天然的抗氧化剂，在酱油/黄豆酱生产过程中加入酿酒酵母孢子对其抗氧化方面有重要作用。

实施例5：酵母菌ZB418孢子在发酵中的应用

5.1实验材料

ZB418孢子、发酵30天的黄豆酱酱醪、α-淀粉酶

5.2实验方法

在发酵30天的黄豆酱酱醪中添加ZB418孢子，添加量分别为10⁵孢子/g酱醪（水平1）、10⁶孢子/g酱醪（水平2）、10⁷孢子/g酱醪（水平3），至发酵60天，检测黄豆酱褐变指数，并组织专业鉴评人员进行感官鉴评。褐变指数一般作为黄豆酱货架期色泽变化的检测指标，为了将发酵结束黄豆酱的色泽量化展示对比，本实施例将其作为色泽的指征，褐变指数越高，色泽越深。

（1）褐变指数测定方法：取样品50g，加入α-淀粉酶（20 u/mL）后于60℃条件下水解2 h。准确称取1.00 g样品定容至100 mL，经定性滤纸过滤后，以蒸馏水做空白，测定样品在420 nm处吸光度，即为褐变指数。

（2）感官鉴评方法，由10名具有多年经验的专业鉴评人员组成评价小组，从色泽、香气、体态、口感四个方面对黄豆酱进行打分，每一项为10分，权重分别为20%，25%，25%，30%，最终结果取平均分。

实验结果

不同添加量黄豆酱的褐变指数和感官品质见表5所示，其中水平1的添加量为10⁵孢子/g酱醪，水平2添加量为10⁶孢子/g酱醪，水平3添加量为10⁷孢子/g酱醪。

表5：黄豆酱褐变指数与感官得分对比

由表5可知，添加ZB418孢子后，黄豆酱的褐变指数明显下降，即色泽更浅，随着添加孢子数的增加，黄豆酱的色泽越浅，所以ZB418孢子的添加有助于获得色泽红壮的黄豆酱，这可能是由于ZB418孢子具有抗氧化性所导致。同时，ZB418孢子的添加对黄豆酱口感提升也有一定作用，这可能是因为少量孢子的自溶作用可以增加风味物质。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，但本领域技术人员将理解：根据已经公布的所有教导，可以对细节进行各种修改和变动，并且这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部分为由所附权利要求及其任何等同物给出。

序列表

<110> 广东海天创新技术有限公司

佛山市海天（高明）调味食品有限公司

佛山市海天调味食品股份有限公司

<120> 一株高核酸酿酒酵母及其应用

<130> IDC200486

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

gtagtcatat gcttgtctc 19

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

tccgcaggtt cacctacgga 20

<210> 3

<211> 1612

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

gatcctgagg cctcactaag ccattcaatc ggtactaccg acgggcggtg tgtacaaagg 60

gcagggacgt aatcaacgca agctgatgac ttgcgcttac taggaattcc tcgttgaaga 120

gcaataatta caatgctcta tccccagcac gacggagttt cacaagatta ccaagacctc 180

tcggccaagg ttagactcgc tggctccgtc agtgtagcgc gcgtgcggcc cagaacgtct 240

aagggcatca cagacctgtt attgcctcaa acttccatcg gcttgaaacc gatagtccct 300

ctaagaagtg gataaccagc aaatgctagc accactattt agtaggttaa ggtctcgttc 360

gttatcgcaa ttaagcagac aaatcactcc accaactaag aacggccatg caccaccacc 420

cacaaaatca agaaagagct ctcaatctgt caatccttat tgtgtctgga cctggtgagt 480

ttccccgtgt tgagtcaaat taagccgcag gctccactcc tggtggtgcc cttccgtcaa 540

ttcctttaag tttcagcctt gcgaccatac tccccccaga acccaaagac tttgatttct 600

cgtaaggtgc cgagtgggtc attaaaaaaa caccacccga tccctagtcg gcatagttta 660

tggttaagac tacgacggta tctgatcatc ttcgatcccc taactttcgt tcttgattaa 720

tgaaaacgtc cttggcaaat gctttcgcag tagttagtct tcaataaatc caagaatttc 780

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Claims (10)

1.酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）ZB418，其于2020年9月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC.NO：61172，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

2.权利要求1所述的酿酒酵母ZB418的孢子。

3.权利要求1所述的酿酒酵母ZB418在生产核酸中的用途。

4.权利要求1所述的酿酒酵母ZB418或其孢子在食品发酵中的用途。

5.权利要求4所述的用途，其中，所述食品发酵包括谷物发酵制品或豆类发酵制品的发酵。

6.权利要求4所述的用途，其中，所述食品发酵为酒曲、酿造酒、食醋、酱油或面包的发酵。

7.权利要求1所述的酿酒酵母ZB418的培养物、裂解物或提取物，或所述酿酒酵母ZB418的孢子的培养物、裂解物或提取物。

8.权利要求7所述的培养物、裂解物或提取物，其中，所述提取物是核酸提取物，其包含从权利要求1所述的酿酒酵母ZB418中分离的核酸部分。

9.一种组合物，其包含权利要求1所述的酿酒酵母ZB418、权利要求2所述的孢子或权利要求7或8所述的培养物、裂解物或提取物。

10.权利要求1所述的酿酒酵母ZB418，权利要求2所述的孢子，或权利要求7或8所述的培养物、裂解物或提取物，或权利要求9所述的组合物，在生产食品、调味品、食品添加剂、药品、保健品或化妆品中的用途。

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