CN112662567B - 一株元蘑新菌株及其人工栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一株元蘑新菌株及其人工栽培方法。元蘑(Panellus edulis)HMGIM‑A151349，保藏编号为：GDMCC No.61373。本发明通过采集野生的元蘑新菌株‑元蘑HMGIM‑A151349并确认其分类，通过人工驯化的研究，发掘出具有产量高，较耐高温，适于在南方栽培，抗性好，生长周期短(比市场种生长周期缩短15天)，蛋白质含量较高，色泽特别的元蘑新菌株‑元蘑HMGIM‑A151349。本发明的元蘑HMGIM‑A151349可以在广州地区正常出菇，可为南方地区提供新的珍稀食用菌品种，从而为元蘑的新菌株的利用提供了一个重要途径。

Description

一株元蘑新菌株及其人工栽培方法

技术领域：

本发明属于珍稀食用菌栽培领域，具体涉及一株元蘑新菌株及其人工栽培方法。

背景技术：

元蘑Sarcomyxa edulis(Y.C.Dai,

&G.F.Qin)T.Saito,T.Tonouchi&T.Harada，其合格学名亦包括Panellus edulis Y.C.Dai,

&G.F.Qin，隶属于担子菌门Basidiomycota，蘑菇亚门Agaricomycotina，蘑菇纲Agaricomycetes，蘑菇亚纲Agaricomycetidae，蘑菇目Agaricales，小菇科Mycenaceae，扇菇属Sarcomyxa。

元蘑分布于中国东北、日本北部、美国和俄罗斯远东等地区，属特色的低温食药用菌，被普遍称为新秀牡蛎菇Later oyster。在亚洲东北部地区较常见，特别是在中国和日本，很多书中都记录元蘑是一种美味的蘑菇。在中国又名亚侧耳、美味扇菇、黄蘑、冬蘑(东北地区)、冻蘑、美味冬菇等，在日本又名“Mukitake”剥茸。元蘑是中国东北重要的特色栽培蘑菇，仅次于黑木耳和猴头菇。由于元蘑子实体形状跟灵芝相似，但颜色偏黄色，所以又叫“黄灵菇”。该菌营养丰富，口感鲜嫩柔滑，蛋白质和氨基酸含量较高，且含有多种维生素、矿物质及微量元素。此外它还具有很高的药用价值，如防止动脉硬化、提高免疫力、抑制肿瘤增值等。中药研究表明，元蘑性甘、温，有舒筋活络、清热祛湿和预防癌症、肿瘤等作用，具有极高的食用价值。甚至有报道将元蘑子实体在白酒中浸泡后，直接饮用，具有较好的药用价值。虽然其具有较高的营养价值、药用价值和经济效益，但由于元蘑地域性分布较狭窄，多生于中国东北东部山区，且于每年9月份温度低于20℃以后开始生长，故元蘑野生资源较稀缺，目前对其研究也相对较少。。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供一种具有产量高，较耐高温，适于在南方栽培，抗性好，生长周期短(比市场种生长周期缩短15天)，蛋白质含量较高，色泽特别的元蘑新菌株-元蘑(Panellus edulis)HMGIM-A151349，其于2020年12月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCC No.61373。

本发明的第二个目的是提供元蘑HMGIM-A151349的人工栽培方法，包括元蘑HMGIM-A151349的菌丝培养、栽培管理和采收子实体。

优选，具体为：

a、菌丝培养：元蘑HMGIM-A151349菌块接种于生产母种培养基上，直至菌丝体长满斜面，将母种菌丝体转接至生产种培养基上扩大培养，培养至菌丝体长满袋，取生产种菌丝体接种于栽培料培养基，至菌丝长满带后，继续培养进行后熟期培养；

b、栽培管理和采收子实体：菌丝后熟期满后打开栽培袋盖子进行出菇，当菌盖开始平展，采收子实体。

所述的菌丝培养优选为：

元蘑HMGIM-A151349菌块接种于母种培养基上，25℃恒温暗培养直至菌丝体长满斜面，将母种菌丝体转接至生产种培养基上扩大培养，25℃恒温暗培养，培养至菌丝体长满袋，取生产种菌丝体接种于栽培料培养基中，25℃±1℃、空气相对湿度60-70％，至菌丝长满袋；

所述的母种培养基是综合PDA，按质量分数计，包括马铃薯20％、葡萄糖2％、琼脂2％、磷酸二氢钾0.3％、硫酸镁0.15％、维生素B10.001％，余量为水；

所述的生产种培养基是按质量分数计，包括棉籽壳38-42％、木屑35-40％、麸皮18-20％、1-2％碳酸钙；

所述的栽培料培养基是按质量分数计，包括棉籽壳38-42％、木屑48-52％、麸皮8-10％、碳酸钙1-2％。

优选，所述的栽培管理和采收子实体是：

待栽培袋中的菌丝长满袋中栽培料并经后熟处理后，打开栽培袋盖子，把栽培袋竖排放置，置于25℃遮光处，保持95％的相对湿度，待菌面出现水滴后，每天更换新风2次，每次1小时，维持3-4天后，控制温度18℃，空气相对湿度85-90％之间，增加每天13小时的光照，通风，使空气中二氧化碳浓度小于5％，同时去掉菌环打开菌盖，待原基长出，保持温度18℃，空气相对湿度85-90％之间，每天13小时的光照，当菌盖开始平展，说明子实体已趋成熟，此时应采收。

优选，所述的菌丝培养为：元蘑HMGIM-A151349菌块接种于母种培养基上，25℃恒温暗培养直至菌丝体长满斜面，将母种菌丝体转接至原种培养基上，扩大培养，25℃恒温暗培养，培养至菌丝体长满袋，取原种接种到生产种培养基上扩大培养，25℃恒温暗培养，培养至菌丝体长满袋，取生产种菌丝体接种于栽培料培养基中，25℃±1℃、空气相对湿度60-70％，至菌丝长满袋；

所述的原种培养基与生产种培养基相同。

本发明通过采集野生的元蘑新菌株-元蘑HMGIM-A151349并确认其分类，通过人工驯化的研究，发掘出具有产量高，较耐高温，适于在南方栽培，抗性好，生长周期短(比市场种生长周期缩短15天)，蛋白质含量较高，色泽特别的元蘑新菌株-元蘑HMGIM-A151349。本发明的元蘑HMGIM-A151349可以在广州地区正常出菇，可为南方地区提供新的珍稀食用菌品种，从而为元蘑的新菌株的利用提供了一个重要途径。

元蘑(Panellus edulis)HMGIM-A151349，其于2020年12月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCC No.61373。

附图说明

图1是野生菌株HMGIM-A151349的子实体图；

图2是元蘑HMGIM-A151349驯化后的子实体图；

图3是元蘑HMGIM-A151349的中试栽培

图4是厚片元蘑(元蘑市场种)。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：

2015年9月29日本发明人研究团队成员莫伟鹏、邵威铭在辽宁老秃顶子国家自然保护区进行大型真菌资源采集和调查时，得到一份元蘑标本，采集回来的元蘑标本野生子实体(图1)在无菌条件下用75％酒精擦拭表面后，撕开，以无菌操作方式接入0.2-0.5mm×0.2-0.5mm的菌肉组织至加富综合PDA培养基中，置于25℃培养箱中恒温暗培养，待菌丝长满斜面后后则可进行转接，由此分离得到菌株HMGIM-A151349。

所述的加富综合PDA(按质量分数计，包括马铃薯20％+葡萄糖2％+琼脂2％+蛋白胨0.5％+磷酸二氢钾0.3％+硫酸镁0.15％+维生素B10.001％，余量为水)，其配制方法是将200g去皮马铃薯切成小块，加水煮烂(煮沸20～30分钟，能被玻璃棒戳破即可)，用八层纱布过滤，加热，滤液中加入20g葡萄糖、琼脂20g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B10.01g，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管，加塞、包扎，在0.11MPa大气压、121℃高温高压湿热灭菌30min，取出冷却摆成斜面。

取菌株HMGIM-A151349新鲜菌丝使用液氮研磨，利用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒【商品编号SK8259，生工生物工程(上海)股份有限公司生产】，进行DNA基因组的提取，得到的DNA溶液-20℃冷藏备用。通过真菌核糖体基因间隔区通用引物ITS1/ITS4(ITS1:TCCGTAGGTGAACCTGCGG，ITS4:TCCTCCGCTTATTGATATGC，由生工生物工程(上海)股份有限公司合成)进行材料的ITS-PCR实验，扩增在Biometra PCR仪上进行，PCR反应液组成(共50μl)为：TaKaRaTaq(5units/μl)0.25μl、10×PCR Buffer 5μl、dNTP Mixture(各2.5mM)4μl、DNA模板2μl、引物1(ITS1，10μmol·L-1)5μl、引物2(ITS4、10μmol·L-1)5μl、灭菌蒸馏水补齐50μl、相关试剂(商品编号R001A)由宝生物工程(大连)有限公司生产。反应条件为:94℃反应5min；94℃反应1min，55℃反应1min，72℃反应1min，30个循环；72℃反应10min.PCR产物直接送检进行双向测序，由华大基因完成。

由于其ITS-PCR出现碱基缺失的情况，继续委托上海美吉生物医药科技有限公司开展克隆测序，即将PCR产物插入pMD 18-T Vector，筛选阳性克隆，获得3个克隆子，对克隆子进行测序。

其中克隆子1结果如下：

TTCCTCCGCTTATTGATATGCTTAAGTTCAGCGGGTAGTCCTACCTGATTTGAGGTCAAAATGTCAATTAAGTTGTTATCCCTTGCGGGATGGTTAGAAGCTGAACCCCCATATAACAGCGTCCGCGTCGATGGCGTAGATAATTATCACACCAATAGACGGTCCACAAAGGTTCCGCTAATGCATTTAAGGGGAGCCGACTTCTGAGGAAGCCCGCAAACCCCCACGTCCAAGCACGACCCCGTCAGCAAAGACGGAGAAGGTTGAGAATTTAATGACACTCAAACAGGCATGCTCCTCGGAATACCAAGGAGCGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTGTATAATTTAAAGCTCGCTTTTTTAGGGCGAACCGTTGATGACATTCTGTTGACATTTTTAAAAAGGGTTTGTAAAAACGTAGACGCGCGAGTCAAACGATTAGAGGGAAGCCGACCGTCCGAAGAGGCCCGCAACCCTCACATCCGAGTTTCCTCGACAAGAGTTTGTCTCGGGTCTACAAGAGGTGCACAGGTGAATGTGAGAACTAAGAAGAGAGGCGTGCACATGCTCCTGAAAGCCAGCGACAACCATCTCTCTTGAAATTCAATAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGA，其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

克隆子2结果如下：

TTCCTCCGCTTATTGATATGCTTAAGTTCAGCGGGTAGTCCTACCTGATTTGAGGTCAAAATGTCAATTAAGTTGTTATCCCTTGCGGGATGGTTAGAAGCTGAACCCCATATAACAGCGTCCGCGTCGATGGCGTAGATAATTACCACACCAATAGACGGTCCACAAAGGTTCCGCTAATGCATTTAAGGGGAGCCGACTTCTGAGGAAGCCCGCAAACCCCCACGTCCAAGCACGACCCCGTCAGCAAAGACGGAGAAGGTTGAGAATTTAATGACACTCAAACAGGCATGCTCCTCGGAATACCAAGGAGCGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTGTATAATTTAAAGCTCGCTTTTTTAGGGCGAACCGTTGATGACATTCTGTTGACATTTTTAAAAAGGGTTTGTAAAAACGTAGACGCGCGAGTCAAACGATTAGAGGGAAGCCGACCGTCCGAAGAGGCCCGCAACCCTCACATCCGAGTTTCCTCGACAAGAGTTTGTCTCGGGTCTACAAGAGGTGCACAGGTGAATGTGAGAACTAAGAAGAGAGGCGTGCACATGCTCCTGAAAGCCAGCGACAACCAATCTCTCTTGAAATTCAATAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAA，其核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。

克隆子3结果如下：

TTCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTATTGAATTTCAAGAGAGATTGGTTGTCGCTGGCTTTCAGGAGCATGTGCACGCCTCTCTTCTTAGTTCTCACATTCACCTGTGCACCTCTTGTAGACCCGAGACAAACTCTTGTCGAGGAAACTCGGATGTGAGGGTTGCGGGCCTCTTCGGACGGTCGGCTTCCCTCTAATCGTTTGACTCGCGCGTCTACGTTTTTACAAACCCTTTTTAAAAATGTCAACAGAATGTCATCAACGGTTCGCCCTAAAAAAGCGAGCTTTAAATTATACAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACCTTGCGCTCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTAAATTCTCAACCTTCTCCGTCTTTGCTGACGGGGTCGTGCTTGGACGTGGGGGTTTGCGGGCTTCCTCAGAAGTCGGCTCCCCTTAAATGCATTAGCGGAACCTTTGTGGACCGTCTATTGGTGTGATAATTATCTACGCCATCGACGCGGACGCTGTTATATGGGGTTCAGCTTCTAACCATCCCGCGAGGGATAACAACTTAATTGACATTTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAA，其核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。

测序结果在GenBank进行序列Blast，发现与元蘑(Panellus edulis)相似性高达99.73％，99.59％及99.86％。

菌株HMGIM-A151349的形态特征为：菌盖宽可达20cm，呈半球形、扇形或肾形，鲜时盖面黏，覆有胶质膜，黄色、黄绿色或带褐色或带紫色，有短细绒毛，有时近光滑；盖缘处平滑，初期内卷。菌肉厚达1cm，白色，柔软。菌褶延生，薄，幅宽，极密，白色至淡黄色。菌柄长1～2cm，直径1.5～3cm，短，粗壮，侧生，被有刺状绒毛或鳞片，淡黄色或黄绿色。子实体无味或具有新鲜的蘑菇味。担孢子4.5～5.5×1.2～1.5μm，光滑，无色，腊肠形。秋季生于榆、桦等枯立木、倒木腐木上。该品种菌盖表面为棕黄色到墨绿色，在元蘑品种中属于颜色较少见的品种。

经过形态学鉴定，菌株HMGIM-A151349宏观特征和显微特征与元蘑(Panellusedulis)描述一致，结合分子生物学特征，鉴定菌株HMGIM-A151349为元蘑(Panellusedulis)，命名为元蘑(Panellus edulis)HMGIM-A151349，其于2020年12月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广东省广州市越秀区先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCC No.61373。

实施例2：元蘑HMGIM-A151349的人工栽培方法

一、菌种

元蘑HMGIM-A151349，采自辽宁老秃顶子国家自然保护区。

1.生产母种培养基

配方：综合PDA(按质量分数计，包括马铃薯20％+葡萄糖2％+琼脂2％+磷酸二氢钾0.3％+硫酸镁0.15％+维生素B10.001％，余量为水)，其配制方法是将200g去皮马铃薯切成小块，加水煮烂(煮沸20～30分钟，能被玻璃棒戳破即可)，用八层纱布过滤，加热，滤液中加入20g葡萄糖、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1 0.01g，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管，加塞、包扎，在0.11MPa大气压、121℃高温高压湿热灭菌30min，取出冷却。

2.原种培养基

配方：按质量分数计，包括40％棉籽壳+38％木屑+20％麸皮+2％碳酸钙。

3.生产种培养基

配方：按质量分数计，包括40％棉籽壳+38％木屑+20％麸皮+2％碳酸钙。

4.栽培料培养基

配方：按质量分数计，包括40％棉籽壳+50％木屑+8％麸皮+2％碳酸钙。

二、栽培过程

1生产母种

无菌操作接入分离成功的元蘑HMGIM-A151349至生产母种培养基上。置于25℃培养箱中恒温暗培养，待菌丝长满斜面后则可进行转接。生产母种长满的时间大概在10-15d之间。

2.原种制作

原种培养基的制作：称取所需比例的棉籽壳，经水泡湿过夜，按比例混入木屑、麸皮、碳酸钙，装入13cm×25cm耐高温的透明聚丙烯菌种袋中，折合每袋装干料250-300g。装好料后用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，然后在袋口套上塑料环，扣上配套的盖子，即得一个制好的原种袋料。在0.147MPa大气压、128℃高温高压湿热灭菌90min，取出冷却后无菌操作接入生产母种。接种时确保母种料块埋入原种料中。把已接种的原种置于25℃培养箱中恒温暗培养，待菌丝吃满料后(30d左右)则可作为原种使用接入生产种袋中。

3.生产种制作

制作过程同原种，但所用袋子为15cm×30cm耐高温的透明聚丙烯菌种袋。折合每袋装干料350-400g。生产种长满时间大约为30d。

4.栽培袋制作

栽培料培养基的制备：称取所需比例的棉籽壳，经水泡湿过夜，按比例混入木屑、麸皮、碳酸钙，装入17cm×35cm耐高温的透明聚丙烯菌种袋。折合每袋装干料400-420g。装好料后用小木棒在袋料中打洞，洞深至袋底，然后在袋口套上塑料环，扣上配套的盖子，即得一个制好的栽培袋料。在0.147MPa大气压、128℃高温高压湿热灭菌90min，取出冷却后无菌操作接入生产种。接种时确保生产种料块埋入栽培料培养基中。栽培袋接种后在25℃±1℃、空气相对湿度60-70％的培养室中避光培养，大约15d长满栽培袋，同期制作(按相同方法)的“厚片元蘑”(市场种)及另一野生元蘑品种HMGIM-A151429菌丝满袋时间分别为28和30d。

5.栽培管理

待栽培袋中的菌丝长满袋中栽培料并经后熟处理后，打开栽培袋盖子，把栽培袋竖排放置(袋与袋之间应留有空隙)，置于25℃遮光处，保持95％的相对湿度，待菌面出现水滴后，每天更换新风2次，每次1小时，维持3-4天后，控制温度18℃，空气相对湿度85-90％之间，增加每天13小时的光照，加大通风，使空气中二氧化碳浓度小于5％，同时去掉菌环打开菌盖，约经1-2天原基即可长出。保持温度18℃，空气相对湿度85-90％之间，每天13小时的光照，当菌盖开始平展，说明子实体已趋成熟，此时应采收。从长出幼菇到子实体成熟约经过7d。

出菇情况：

a、出菇期：元蘑HMGIM-A151349出菇较整齐，出菇期约24天，出菇2潮。两潮菇之间的间隔为10天。

b、产量：每个菇袋两潮出菇172-190克之间，总体生物转化率在41.0-45.2％之间，出菇率97％。按相同的人工栽培方法栽培的“厚片元蘑”(市场种)两潮出菇在100-123克之间，总体生物转化率在23.8-29.3％之间，出菇率约为90％。另一野生种HMGIM-A141329出菇更低，约在68-90克之间，且出菇率仅为50％。说明本发明中的菌株的产量远高于市场种，约高出50％。

c、子实体性状(图2)：担子果单生、散生或呈覆瓦状丛生，菌柄无或略具柄，子实体直径约3-20cm不等，菌盖厚度平均约1cm，可达3m，菌盖表面略微凸起至扁平，半圆形至肾形或扇形，菌盖颜色从赭黄色到墨绿色。菌盖表面开始时具短绒毛，随着生长逐渐减少，子实体表面呈粘滑状，子实体表面薄膜易剥落。担子果菌柄侧生，极短或无，赭黄色，具短绒毛。菌褶赭黄色至淡黄色，15-20片层/cm，菌肉白色至乳白色，柔软。由于野生采集时该品种已经是老化状态，人工驯化后商品性状良好。与其他野生元蘑相比，其栽培性状较佳。与同期实验的另一株元蘑野生菌株相比，菌丝满袋时间较早，出菇较整齐，产量较高。

d、菌种稳定性：该菌种自驯化以来连续栽培了10个月，共计栽培2000余袋，菌种稳定性较好(图3)，每个菇袋单产均在180克左右，且其抗逆性较好，污染率不足3％。

6、菌种特性

a.菌种人工驯化后的性状

(1)元蘑HMGIM-A151349的菌丝活力非常好，同期栽培的菌株“厚片元蘑”(元蘑市场种，东北地区广泛使用的市场种，图4)菌丝满袋时间为28天，同期试验的另一株野生元蘑菌株HMGIM-A151329菌丝满袋也用了30天，而本例中的元蘑菌株菌丝长满袋子只用了15天，说明其活力非常好。

(2)元蘑HMGIM-A151349出菇一致，色泽特别，肉厚耐贮存，色泽呈现墨绿色，在元蘑品种中不到9％，具备商业化转化的优势。目前80％的元蘑菌株的子实体是黄绿色的，包括“厚片元蘑”，市面上出售的元蘑菌株子实体也多为黄绿色，该颜色菌株较少。

(3)目前元蘑的市场种栽培通常是在22-24℃条件下培养25-30d，长满袋后进行10-12℃低温刺激，20-25d，出菇时设定温度15-18℃。元蘑HMGIM-A151349培养约15d左右可以满袋，后熟期10d，在17℃-20℃的条件下经15d左右可以正常出菇(子实体发生阶段)，不需要进行10-12℃低温刺激，且抗逆性强，栽培得率为100％，具有较好活性。

(4)菌肉厚实，耐贮存，味道鲜美，略带独特的苦味，具有很好的商品特性。

b.菌株营养成分测定

对元蘑HMGIM-A151349栽培子实体进行多项营养成分测定(表1)，以两个东北著名的食用菌黄伞及滑子蘑作为对照，对营养成分对比可以看出，其蛋白质含量更高，多糖含量高出滑子蘑2倍以上。与“厚片元蘑”(元蘑市场种)相比虽然多糖含量不如市场种，但其蛋白质含量高出市场种0.8倍，说明该品种是一个高蛋白的优良品种。

通过对矿物质元素的测定，发现它是一种高钾食物，也非常符合目前的健康食物的要求。从其他营养成分上看，含有18种氨基酸，其中包括人体必需的8种氨基酸，氨基酸种类齐全且与多脂鳞伞，滑子蘑等相当。呈味氨基酸中的谷氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、甘氨酸和酪氨酸含量也较高，呈现特殊的鲜味。水解氨基酸总和在15.4g/100g，与多脂鳞伞，滑子蘑等著名食用菌相比较高。其中组氨酸含量非常高。组氨酸在营养学的范畴里被认为是一种儿童的必需氨基酸，成年后人类开始可以自己合成，是尿毒症患者的必需氨酸，且与多种变态反应及发炎有关。所以组胺酸也是重要的一类氨基酸，同时异亮氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，亮氨酸，精氨酸及组氨酸的味特征为苦味，该品种这几种氨基酸的含量都比较高，尤其是组氨酸，这也部分地解释了为何元蘑在食用时带有特殊的淡淡的苦味，而这种特殊的风味，恰恰是元蘑在市场上有独特地位的原因，也与其有保健作用相关。经过与《中国食药用菌学》中的食药用的营养成分比较，其组氨酸的含量高于99％以上的食药用菌，含量很高。

表1元蘑的营养成分对比

注1：黄伞及滑子蘑数据来源于2015年吉林农业大学硕士论文：黄伞化学成分及药理活性研究-王晓岩。其中氨基酸检测方法为：GB/T 5009.124-2003。其余与表同。个别缺失的数据参考了2017年昆明理工大学硕士论文：滑菇营养成分及化学成分研究-姚星宇并已标在表格内。元蘑数据来源于郭兴等，黑木耳菌糠栽培元蘑配方试验(食用菌，2019，41(5)：41-42。由于数据量较少，所以先取黄伞及滑子蘑进行进一步比较。注2：带*为必需氨基酸注3：碳水化合物(g/100g)＝100-(蛋白质+脂肪+水分+灰分+膳食纤维)

与其他野生元蘑相比，其栽培性状较佳。与同期实验的另一株元蘑野生菌株相比，菌丝满袋时间较早，出菇较整齐，产量较高。

本发明通过采集野生的元蘑新菌株元蘑HMGIM-A151349并确认其分类，通过人工驯化的研究，发掘出具有较耐高温，适于在南方栽培，抗性好，生长周期短(比市场种生长周期缩短15天)，蛋白质含量较高，其子实体的色泽特别(呈现墨绿色)的元蘑新菌株-元蘑HMGIM-A151349。

序列表

<110> 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）

<120> 一株元蘑新菌株及其人工栽培方法

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 728

<212> DNA

<213> 元蘑HMGIM-A151349(Panellus edulis)

<400> 1

ttcctccgct tattgatatg cttaagttca gcgggtagtc ctacctgatt tgaggtcaaa 60

atgtcaatta agttgttatc ccttgcggga tggttagaag ctgaaccccc atataacagc 120

gtccgcgtcg atggcgtaga taattatcac accaatagac ggtccacaaa ggttccgcta 180

atgcatttaa ggggagccga cttctgagga agcccgcaaa cccccacgtc caagcacgac 240

cccgtcagca aagacggaga aggttgagaa tttaatgaca ctcaaacagg catgctcctc 300

ggaataccaa ggagcgcaag gtgcgttcaa agattcgatg attcactgaa ttctgcaatt 360

cacattactt atcgcatttc gctgcgttct tcatcgatgc gagagccaag agatccgttg 420

ttgaaagttg tataatttaa agctcgcttt tttagggcga accgttgatg acattctgtt 480

gacattttta aaaagggttt gtaaaaacgt agacgcgcga gtcaaacgat tagagggaag 540

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cgggtctaca agaggtgcac aggtgaatgt gagaactaag aagagaggcg tgcacatgct 660

cctgaaagcc agcgacaacc atctctcttg aaattcaata atgatccttc cgcaggttca 720

cctacgga 728

<210> 2

<211> 729

<212> DNA

<213> 元蘑HMGIM-A151349(Panellus edulis)

<400> 2

ttcctccgct tattgatatg cttaagttca gcgggtagtc ctacctgatt tgaggtcaaa 60

atgtcaatta agttgttatc ccttgcggga tggttagaag ctgaacccca tataacagcg 120

tccgcgtcga tggcgtagat aattaccaca ccaatagacg gtccacaaag gttccgctaa 180

tgcatttaag gggagccgac ttctgaggaa gcccgcaaac ccccacgtcc aagcacgacc 240

ccgtcagcaa agacggagaa ggttgagaat ttaatgacac tcaaacaggc atgctcctcg 300

gaataccaag gagcgcaagg tgcgttcaaa gattcgatga ttcactgaat tctgcaattc 360

acattactta tcgcatttcg ctgcgttctt catcgatgcg agagccaaga gatccgttgt 420

tgaaagttgt ataatttaaa gctcgctttt ttagggcgaa ccgttgatga cattctgttg 480

acatttttaa aaagggtttg taaaaacgta gacgcgcgag tcaaacgatt agagggaagc 540

cgaccgtccg aagaggcccg caaccctcac atccgagttt cctcgacaag agtttgtctc 600

gggtctacaa gaggtgcaca ggtgaatgtg agaactaaga agagaggcgt gcacatgctc 660

ctgaaagcca gcgacaacca atctctcttg aaattcaata atgatccttc cgcaggttca 720

cctacggaa 729

<210> 3

<211> 729

<212> DNA

<213> 元蘑HMGIM-A151349(Panellus edulis)

<400> 3

ttccgtaggt gaacctgcgg aaggatcatt attgaatttc aagagagatt ggttgtcgct 60

ggctttcagg agcatgtgca cgcctctctt cttagttctc acattcacct gtgcacctct 120

tgtagacccg agacaaactc ttgtcgagga aactcggatg tgagggttgc gggcctcttc 180

ggacggtcgg cttccctcta atcgtttgac tcgcgcgtct acgtttttac aaaccctttt 240

taaaaatgtc aacagaatgt catcaacggt tcgccctaaa aaagcgagct ttaaattata 300

caactttcaa caacggatct cttggctctc gcatcgatga agaacgcagc gaaatgcgat 360

aagtaatgtg aattgcagaa ttcagtgaat catcgaatct ttgaacgcac cttgcgctcc 420

ttggtattcc gaggagcatg cctgtttgag tgtcattaaa ttctcaacct tctccgtctt 480

tgctgacggg gtcgtgcttg gacgtggggg tttgcgggct tcctcagaag tcggctcccc 540

ttaaatgcat tagcggaacc tttgtggacc gtctattggt gtgataatta tctacgccat 600

cgacgcggac gctgttatat ggggttcagc ttctaaccat cccgcgaggg ataacaactt 660

aattgacatt ttgacctcaa atcaggtagg actacccgct gaacttaagc atatcaataa 720

gcggaggaa 729

Claims (6)

1.元蘑（Panellus edulis）HMGIM-A151349，保藏编号为：GDMCC No.61373。

2.一种如权利要求1所述的元蘑HMGIM-A151349的人工栽培方法，包括元蘑HMGIM-A151349的菌丝培养、栽培管理和采收子实体。

3.根据权利要求2所述的人工栽培方法，其特征在于，具体为：

a、菌丝培养：元蘑HMGIM-A151349菌块接种于母种培养基上，直至菌丝体长满斜面，将母种菌丝体转接至生产种培养基上扩大培养，培养至菌丝体长满袋，取生产种菌丝体接种于栽培料培养基，至菌丝长满带后，继续培养进行后熟期培养；

b、栽培管理和采收子实体：菌丝后熟期满后打开栽培袋盖子进行出菇，当菌盖开始平展，采收子实体。

4.根据权利要求3所述的人工栽培方法，其特征在于，所述的菌丝培养为：

元蘑HMGIM-A151349菌块接种于母种培养基上，25℃恒温暗培养直至菌丝体长满斜面，将母种菌丝体转接至生产种培养基上扩大培养，25℃恒温暗培养，培养至菌丝体长满袋，取生产种菌丝体接种于栽培料培养基中，25℃±1℃、空气相对湿度60-70%，至菌丝长满袋；

所述的母种培养基是综合PDA，按质量分数计，包括马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂2%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.15%、维生素B10.001%，余量为水；

所述的生产种培养基是按质量分数计，包括棉籽壳38-42%、木屑35-40%、麸皮18-20%、1-2%碳酸钙；

所述的栽培料培养基是按质量分数计，包括棉籽壳38-42%、木屑48-52%、麸皮8-10%、碳酸钙1-2%。

5.根据权利要求3所述的人工栽培方法，其特征在于，所述的栽培管理和采收子实体是：

待栽培袋中的菌丝长满袋中栽培料并经后熟处理后，打开栽培袋盖子，把栽培袋竖排放置，置于25℃遮光处，保持95%的相对湿度，待菌面出现水滴后，每天更换新风2次，每次1小时，维持3-4天后，控制温度18℃，空气相对湿度85-90%之间，增加每天13小时的光照，通风，使空气中二氧化碳浓度小于5%，同时去掉菌环打开菌盖，待原基长出，保持温度18℃，空气相对湿度85-90%之间，每天13小时的光照，当菌盖开始平展，说明子实体已趋成熟，此时应采收。

6.根据权利要求4所述的人工栽培方法，其特征在于，所述的菌丝培养为：元蘑HMGIM-A151349菌块接种于母种培养基上，25℃恒温暗培养直至菌丝体长满斜面，将母种菌丝体转接至原种培养基上，扩大培养，25℃恒温暗培养，培养至菌丝体长满袋，取原种接种到生产种培养基上扩大培养，25℃恒温暗培养，培养至菌丝体长满袋，取生产种菌丝体接种于栽培料培养基中，25℃±1℃、空气相对湿度60-70%，至菌丝长满袋；

所述的原种培养基与生产种培养基相同。

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