CN106010979B - 一种芬娜金针菇菌种及其栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种新菌种，尤其涉及一种芬娜金针菇新菌种及其栽培方法，所述菌种为芬娜金针菇Flammulina fennae，保藏编号为CCTCC M 2016179，所述栽培方法包括组织分离菌种后制作母种，制作原种，制作生产种，栽培培养。本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M2016179还具有栽培性状佳，包括转化率高，菇形好等，有效成分含量高的特点，与普通金针菇相比，其菌柄底部不粘连，不形成褐变，对于生产加工非常有利，适温范围广，出菇温度高于普通金针菇，节能；此外，其菇质脆嫩，鲜美，菇香浓郁，入口无渣，口感优于普通金针菇；其营养价值丰富全面，是一个极具开发潜力的品种。

Description

一种芬娜金针菇菌种及其栽培方法

技术领域

本发明涉及一种新菌种，尤其涉及一种芬娜金针菇新菌种及其栽培方法。

背景技术

目前，食用菌的产业发展迅猛，我国食用菌每年的产量达到2000万吨以上，占全球70％以上，从业人员超过2000万人，食用菌产业在种植业中排在除了粮、棉、油、菜之后的第五位，超过了果、茶叶和蚕桑。

在食用菌产业蓬勃发展的今天，越来越多的珍稀食用菌品种逐渐进入人们的视野，许多原有的珍稀品种逐渐被驯化，如竹荪、茶薪菇、离褶伞等。但是也有大批的野生食药用菌由于未能被人类认识，没有得到研究。在目前有的15万种大型真菌中，仅仅有80种左右的野生食药用菌被人类驯化，而且规模化栽培的品种更只有20多种。随着人们生活水平的逐步上升，对于生活品质的要求更高，而大型真菌由于其富含具有营养及功能作用的各种成分，包括真菌多糖、三萜类、甾醇等，对于人体健康具有非常良好的作用，日益受到人们的重视。

金针菇是目前人工广泛栽培的食用菌之一，也是一种经济价值很高的食药用真菌。金针菇含有多种营养成分，其中人体生长所需的8种氨基酸含量较高，而尤以赖氨酸和精氨酸含量特别丰富，能促进儿童的健康成长和智力发育，因此被称为“增智菇”。金针菇含有朴菇素，具有显著的抗癌功能。经常食用金针菇还可以预防高血压。治疗肝炎及肠胃溃疡等疾病。

发明内容

本发明旨在提供一种对珍稀食用菌品种芬娜金针菇的新菌种及其人工栽培方法。

本发明提供的一种芬娜金针菇新菌种，分离自蒙古乌素图国家森林公园的腐木上，经形态学及分子生物学鉴定为芬娜金针菇Flammulina fennae新菌种，通过进行组织分离得到原始菌株，命名为芬娜金针菇Flammulina fennae HMGIM-M140658，已于2016年4月7日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，湖北省武汉市洪山区八一路，武汉大学)，保藏号为：CCTCC M 2016179。

本发明还提供一种芬娜金针菇新菌种的栽培方法，所述方法包括组织分离菌种后制作母种，制作原种，制作生产种，栽培培养。

在一个优选的实施例中，所述栽培培养包括：将生产种接种至栽培料袋，在25℃±1℃、相对湿度60-70％避光培养，待菌丝长满栽培料后，25±1℃、相对湿度95％避光培养3-4天后，调节温度5-6℃、相对湿度85-90％条件下，每天光照2小时，维持3-4天后，控制温度16-20℃、相对湿度85-90％、二氧化碳浓度小于5％，培养至采子实体成熟。

在一个优选的实施例中，所述栽培料按质量百分比计包括48-52％棉籽壳、28-32％木屑、 16-20％麸皮、1-2％糖、1-2％碳酸钙。

在一个优选的实施例中，所述的芬娜金针菇新菌种的栽培方法包括：将组织分离的菌种接种至母种培养基培养得到母种，将母种接种至原种料袋中培养得到原种，将原种接种至生产种料袋中培养得到生产种，将生产种接种至栽培料袋中，栽培培养至子实体成熟。

在一个优选的实施例中，所述的芬娜金针菇新菌种的栽培方法包括：将组织分离的菌种接种至母种培养基25℃±1℃暗培养至菌丝基本长满斜面得到母种，将母种埋入至原种料中 25℃±1℃暗培养至菌丝基本覆满料得到原种，将原种埋入生产料中25℃±1℃暗培养至菌丝基本覆满料得到生产种，将生产种接种至栽培料袋中，栽培培养至子实体成熟。

在一个优选的实施例中，所述母种培养基按照质量百分比计包括马铃薯18-20％、葡萄糖 1.5-2％、琼脂1.8-2％、磷酸二氢钾0.15-0.3％、硫酸镁0.05-0.15％、维生素B1微量，其余为水。

在一个优选的实施例中，所述原种料按照质量百分比计包括38-45％棉籽壳、35-40％木屑、 18-20％麸皮、1-2％碳酸钙。

在一个优选的实施例中，所述生产种料按照质量百分比包括38-45％棉籽壳、35-40％木屑、 18-20％麸皮、1-2％碳酸钙。

在一个优选的实施例中，获得组织分离的菌种的方法包括：将芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体接种至分离培养基25℃±1℃暗培养至菌丝基本长满培养基得到组织分离的菌种。

在一个优选的实施例中，所述分离培养基按照质量百分比计包括马铃薯18-20％、葡萄糖 1.5-2％、琼脂1.8-2％、磷酸二氢钾0.15-0.3％、硫酸镁0.05-0.15％、维生素B1微量，其余为水。

本发明还提供通过以上所述的栽培方法栽培得到的芬娜金针菇新菌种或其子实体。

在一个优选的实施例中，一种芬娜金针菇新菌种的子实体特征主要包括：呈淡黄至黄色，底部无粘连、无褐变，培养过程中，菌盖不开伞。

本发明中从野生环境下采集到的芬娜金针菇经过分离纯化获得其纯菌株，通过形态学鉴定并结合分子生物学鉴定，为芬娜金针菇的新菌种。

本发明经过人工驯化栽培工艺研究得到其人工栽培的子实体，人工驯化的子实体品质较野生状态更佳，一方面为芬娜金针菇的利用提供了一个重要途径，同时对于野生食药用菌资源利用也是一个新的发现。

本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体营养价值丰富，多糖含量与普通金针菇(例如白色金针菇、黄色金针菇)相比，高出20％以上，富含磷、钾、钙、镁等多种矿物质元素，及18种氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，氨基酸种类齐全，具有很高的营养价值和保健效果。

本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179还具有栽培性状佳，包括转化率高，菇形好等，有效成分含量高的特点，与普通金针菇相比，其菌柄底部不粘连，不形成褐变，对于生产加工非常有利，适温范围广，出菇温度高于普通金针菇，节能；此外，其菇质脆嫩，鲜美，菇香浓郁，入口无渣，口感优于普通金针菇；其营养价值丰富全面，是一个极具开发潜力的品种。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。

芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179

本发明提供的一种芬娜金针菇新菌种，分离自蒙古乌素图国家森林公园的腐木上，经形态学及分子生物学鉴定为芬娜金针菇Flammulina fennae新菌种，通过进行组织分离得到原始菌株，命名为芬娜金针菇Flammulina fennae HMGIM-M140658，已于2016年4月7日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，湖北省武汉市洪山区八一路，武汉大学)，保藏号为：CCTCC M 2016179。

芬娜金针菇(Flammulina fennae)属担子菌门(Basidiomycota)，伞菌目(Agaricaies)，口蘑科(Trichofomataceae)，小火焰菌属(Flammulina)。

对本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的子实体DNA基因组进行提取，PCR 扩增进行鉴定，发现与芬娜金针菇(Flammulina fennae)相似性高达95％以上，经过形态学鉴定，鉴定结果为芬娜金针菇(Flammulina fennae)的新菌种。

芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的外观学形态特征为：菌盖直径1-1.8cm，凸镜形至平展形，肉质，中央浅褐色，近边缘白色，甚粘，光滑无毛，边缘内卷。菌肉白带黄色，薄。菌褶白带黄色，盖缘处每厘米13-14片，不等长，直生，褶缘平滑至波状。菌柄中生，圆柱形，长2-5cm，近柄顶粗1-2mm，空心，白色，被粉末状颗粒或纤毛，具假根。孢子椭圆形，6-8.5*3.5-4.5μm，光滑，无色至微黄色，非淀粉质。担子棒形，26-34*6.2-6.6μm，4 个孢子。未见典型的囊状体。菌褶菌髓平等。菌盖外皮层为粘皮层，有锁状联合。

本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体的多糖含量高达3.5％以上，进一步地，高达3.8％以上，更进一步地，高达4％以上。

本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体的钙含量高达2mg/100g子实体，进一步地，高达3mg/100g子实体，更进一步地，高达3.5mg/100g子实体。

本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体的含有磷、钾、钙、镁等多种矿物质元素，18种氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，氨基酸种类丰富齐全，在测定子实体氨基酸含量的实施例中，氨基酸重量高达约14.34％。

芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的栽培方法

一种芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的栽培方法，包括组织分离菌种后制作母种，制作原种，制作生产种，栽培培养，得到成熟的子实体。

上述栽培方法步骤在菌种栽培方法中是广泛应用的方法，为本领域技术人员所熟知，然而，发明人针对本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的栽培经过反复摸索，得到了一种产量较高，整齐度较好，生物转化率较高的栽培方法。特别是栽培培养步骤，对于芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的产量、生物转化率等具有显著的意义。

在一个优选的实施例中，栽培培养包括：将生产种接种至栽培料袋，在25℃±1℃、相对湿度60-70％避光培养，待菌丝长满栽培料后，25±1℃、相对湿度95％避光培养3-4天，在避光培养过程中，在菌面出现水滴后，优选更换新风，包括每天2次，每次1小时，避光培养后，调节温度5-6℃、相对湿度85-90％条件下，每天光照2小时，维持3-4天后，控制温度16-20℃、相对湿度85-90％、二氧化碳浓度小于5％，培养至子实体成熟，可以对子实体进行采摘，在培养至子实体成熟过程中，其中一种方法可以观察菌盖开始平展，则可能说明子实体已趋于成熟，此时就可以开始采收。

在一个优选的实施例中，上述栽培料例如按质量百分比计包括48-52％棉籽壳、28-32％木屑、16-20％麸皮、1-2％糖、1-2％碳酸钙。

在一个优选的实施例中，所述的芬娜金针菇新菌种的栽培方法包括：

(1)将芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体接种至分离培养基25℃±1℃暗培养至菌丝基本长满培养基得到组织分离的菌种，将组织分离的菌种接种至母种培养基25℃± 1℃暗培养至菌丝基本长满斜面得到母种；

其中，分离培养基例如可以为：按照质量百分比计包括马铃薯18-20％、葡萄糖1.5-2％、琼脂1.8-2％、磷酸二氢钾0.15-0.3％、硫酸镁0.05-0.15％、维生素B1微量，其余为水；

其中，母种培养基例如可以为：按照质量百分比计包括马铃薯18-20％、葡萄糖1.5-2％、琼脂1.8-2％、磷酸二氢钾0.15-0.3％、硫酸镁0.05-0.15％、维生素B1微量，其余为水；

(2)将母种埋入至原种料中25℃±1℃暗培养至菌丝基本覆满料得到原种；

其中，原种料例如可以为：按照质量百分比计包括38-45％棉籽壳、35-40％木屑、18-20％麸皮、1-2％碳酸钙；

(3)将原种埋入生产料中25℃±1℃暗培养至菌丝基本覆满料得到生产种；

其中，生产种料例如可以为：按照质量百分比包括38-45％棉籽壳、35-40％木屑、18-20％麸皮、1-2％碳酸钙；

(4)将生产种接种至栽培料袋中，栽培培养至子实体成熟；

其中，栽培料例如可以为：按质量百分比计包括48-52％棉籽壳、28-32％木屑、16-20％麸皮、1-2％糖、1-2％碳酸钙。

其中，栽培培养例如包括：将生产种接种至栽培料袋，在25℃±1℃、相对湿度60-70％避光培养，待菌丝长满栽培料后，25±1℃、相对湿度95％避光培养3-4天，在避光培养过程中，在菌面出现水滴后，优选更换新风，包括每天2次，每次1小时，避光培养后，调节温度5-6℃、相对湿度85-90％条件下，每天光照2小时，避光培养维持3-4天后，控制温度16-20℃、相对湿度85-90％、二氧化碳浓度小于5％，培养至子实体成熟，可以对子实体进行采摘，在培养至子实体成熟过程中，其中一种方法可以观察菌盖开始平展，则可能说明子实体已趋于成熟，此时就可以开始采收，得到芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的子实体。

上述栽培方法的总体生物转化率约在70％以上，进一步地，约在80％以上。

上述方法栽培得到的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的子实体呈淡黄至黄色，底部无粘连、无褐变，培养过程中，菌盖不开伞。

上述栽培方法得到的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体的多糖含量高达3.5％以上，进一步地，高达3.8％以上，更进一步地，高达4％以上。

上述栽培方法得到的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体的钙含量高达2mg/100g子实体，进一步地，高达3mg/100g子实体，更进一步地，高达3.5mg/100g子实体。

上述栽培方法得到的的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体的含有磷、钾、钙、镁等多种矿物质元素，18种氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，氨基酸种类丰富齐全，在测定子实体氨基酸含量的实施例中，氨基酸重量高达约14.34％。

芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的应用

本发明的芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体的多糖和钙等含量高，含有包括人体必需的8种氨基酸在内的18种氨基酸，可以用于制备食品或保健品或药物，例如调节免疫力或抗衰老的食品或保健品或药物，例如补充钙质的食品或保健品或药物，例如补充蛋白质或氨基酸的食品或保健品或药物。

实施例

实施例1：芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的栽培方法及得到的子实体

一、栽培方法如下：

1、培养基制作：

(1)分离培养基为：按照质量百分比计马铃薯20％、葡萄糖2％、琼脂2％、磷酸二氢钾0.3％、硫酸镁0.15％、维生素B1微量，其余为水；

(2)母种培养基为：按照质量百分比计马铃薯20％、葡萄糖2％、琼脂2％、磷酸二氢钾0.3％、硫酸镁0.15％、维生素B1微量，其余为水；

(3)原种料为：按照质量百分比计40％棉籽壳、38％木屑、20％麸皮、2％碳酸钙；

原种料袋的制备过程为：称取棉籽壳，经水泡湿过夜，按比例混入木屑、麸皮、碳酸钙，装入13cm*25cm耐高温的透明聚丙烯菌种袋中，折合每袋装干料250-300g，装好料后在袋口套上塑料环，扣上配套的盖子，在0.147MPa大气压、128℃高温高压湿热灭菌90min，冷却备用，得到可以直接使用的原种料袋；

(4)生产种料为：按质量百分比计40％棉籽壳、38％木屑、20％麸皮、2％碳酸钙；

生产种料袋的制作过程基本与原种料袋相同，但所用菌种袋为15cm*30cm耐高温的透明聚丙烯菌种袋。折合每袋装干料350-400g；

(5)栽培料为：按质量百分比计50％棉籽壳、30％木屑、18％麸皮、1％糖、1％碳酸钙；

栽培料袋的制作过程基本与原种料袋相同，但配方中在混入木屑、麸皮、碳酸钙时按比例一并混入糖，所用菌种袋采用15cm*30cm耐高温的透明聚丙烯菌种袋，折合每袋装干料 300-350g；

2、组织分离菌种：将芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179子实体接种至分离培养基25℃±1℃暗培养至菌丝基本长满培养基得到组织分离的菌种；

3、将组织分离的菌种接种至母种培养基，25℃±1℃暗培养至菌丝基本长满斜面得到母种，母种长满的时间约需要10天至15天；

4、将母种接种至原种料袋中，确保母种埋入原种料中，25℃±1℃暗培养至菌丝基本吃满料得到原种，该过程约需要30天左右；

5、将原种接种至生产料袋中，确保原种埋入生产料中，25℃±1℃暗培养至菌丝基本吃满料得到生产种，该过程约需要30天左右；

6、将生产种接种至栽培料袋中，在25℃±1℃、相对湿度60-70％避光培养，待菌丝长满栽培料后(该过程约需要30天左右)，打开栽培袋盖子，将栽培袋竖排放置，袋与袋之间适当留有空隙，25±1℃、相对湿度95％避光培养，待菌面出现水滴后，每天更换新风2次，每次1小时，3-4天后，调节温度5-6℃、相对湿度85-90％条件下，每天光照共2小时，分早、中、晚分别进行，避光培养维持3-4天后，控制温度18℃、相对湿度85-90％、二氧化碳浓度小于5％，培养，约经1-2天原基即可长出，待幼菇长至3-4cm后，将袋口竖起，直至菌柄长至12cm以上，菌盖开始平展，说明子实体已趋成熟，即可采收，从长出幼菇到子实体成熟约需5-7天。

二、栽培结果：

1.出菇期：该菌种的出菇期约25天左右，出菇2潮，每潮菇之间的间隔为约14天左右，在16℃-20℃都可以正常出菇。

2.产量：每个菇袋每潮出菇约103-241克之间，总体生物转化率约在80-85％之间，最高可达150％以上。

3.子实体性状：子实体呈淡黄至黄色，柄长13-18cm，出菇整齐，簇生，底部无粘连及褐变，培养过程中，菌盖不开伞。

4.栽培性状较佳：出菇较早，出菇较整齐，产量较高，整齐度好，菌质较脆嫩且不开伞，耐高温性能更好。

实施例2：芬娜金针菇新菌种CCTCC M 2016179的营养成分测定

对实施例1栽培得到的CCTCC M 2016179子实体、市售白色金针菇子实体、市售黄色金针菇子实体进行营养成分测定，其中蛋白质的测定方法采用：GB 5009.5-2010，第一法；粗多糖(以葡萄糖计)的测定方法采用：NY/T 1676-2008；磷的测定方法采用：GB5009.87-2003，第一法；钾的测定方法采用：GB 5009:91-2003；钙的测定方法采用：GB5009:92-2003，AAS；镁的测定方法采用：GB 5009:90-2003；测定结果如表1所示。

表1芬娜金针菇CCTCC M 2016179子实体与白色金针菇、黄色金针菇的营养成分含量对比表

与市售白色金针菇子实体与市售黄色金针菇子实体相比，芬娜金针菇CCTCC M2016179 的蛋白质含量近似，多糖含量高出20％以上，而金针菇多糖是其活性的主要物质之一；在矿物质元素中，磷、钾、钙、镁都高于另两种金针菇，特备是白色金针菇，尤其是钙含量，是另两种金针菇的3倍左右。

此外，对芬娜金针菇CCTCC M 2016179子实体的氨基酸含量进行测定发现，其含有18 种氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，氨基酸种类齐全，氨基酸总和在14.34g/100g。

以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种芬娜金针菇菌株，其特征在于，所述菌株为芬娜金针菇Flammulina fennae，保藏编号为CCTCC M 2016179。

2.根据权利要求1所述的芬娜金针菇菌株的栽培方法，其特征在于，所述方法包括组织分离菌株后制作母种，制作原种，制作生产种，栽培培养。

3.根据权利要求2所述的芬娜金针菇菌株的栽培方法，其特征在于，所述栽培培养包括：将生产种接种至栽培料袋，在25℃±1℃、相对湿度60-70％避光培养，待菌丝长满栽培料后，25±1℃、相对湿度95％避光培养3-4天后，调节温度5-6℃、相对湿度85-90％条件下，每天光照2小时，维持3-4天后，控制温度16-20℃、相对湿度85-90％、二氧化碳浓度小于5％，培养至子实体成熟。

4.根据权利要求3所述的芬娜金针菇菌株的栽培方法，其特征在于，所述栽培料按质量百分比计包括48-52％棉籽壳、28-32％木屑、16-20％麸皮、1-2％糖、1-2％碳酸钙。

5.根据权利要求2-4中任一权利要求所述的芬娜金针菇菌株的栽培方法，其特征在于，所述方法包括：将组织分离的菌株接种至母种培养基培养得到母种，将母种接种至原种料袋中培养得到原种，将原种接种至生产种料袋中培养得到生产种，将生产种接种至栽培料袋中，栽培培养至子实体成熟。

6.根据权利要求5所述的芬娜金针菇菌株的栽培方法，其特征在于，所述方法包括：将组织分离的菌株接种至母种培养基25℃±1℃暗培养至菌丝基本长满斜面得到母种，将母种埋入至原种料中25℃±1℃暗培养至菌丝基本覆满料得到原种，将原种埋入生产料中25℃±1℃暗培养至菌丝基本覆满料得到生产种，将生产种接种至栽培料袋中，栽培培养至子实体成熟。

7.根据权利要求5所述的芬娜金针菇菌株的栽培方法，其特征在于，所述母种培养基按照质量百分比计包括马铃薯18-20％、葡萄糖1.5-2％、琼脂1.8-2％、磷酸二氢钾0.15-0.3％、硫酸镁0.05-0.15％、维生素B1微量，其余为水；和/或；所述原种料按照质量百分比计包括38-45％棉籽壳、35-40％木屑、18-20％麸皮、1-2％碳酸钙；和/或；所述生产种料按照质量百分比包括38-45％棉籽壳、35-40％木屑、18-20％麸皮、1-2％碳酸钙。

8.根据权利要求2所述的芬娜金针菇菌株的栽培方法，其特征在于，将芬娜金针菇菌株CCTCC M 2016179子实体接种至分离培养基25℃±1℃暗培养至菌丝基本长满培养基得到组织分离的菌株；和/或；所述分离培养基按照质量百分比计包括马铃薯18-20％、葡萄糖1.5-2％、琼脂1.8-2％、磷酸二氢钾0.15-0.3％、硫酸镁0.05-0.15％维生素B1微量，其余为水。

9.根据权利要求2-8中任一权利要求所述的栽培方法栽培得到的芬娜金针菇菌株或其子实体。

10.根据权利要求1或9所述的一种芬娜金针菇菌株，其特征在于，子实体呈淡黄至黄色，底部无粘连、无褐变，培养过程中，菌盖不开伞。