CN112568437B - 一种富硒青钱柳中硒多糖的提取方法和由该提取方法得到的硒多糖及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种富硒青钱柳中硒多糖的提取方法和由该提取方法得到的硒多糖及其应用，所述提取方法包括：采用包括纤维素酶在内的酶对富硒青钱柳原料进行酶解提取，得到富硒青钱柳提取液；将所述富硒青钱柳原料提取液进行浓缩、干燥。本发明通过采用包括纤维素酶在内的酶酶解提取富硒青钱柳中的硒多糖，产物硒多糖不仅提取得率、总硒含量和多糖含量较高，而且全部为有机硒；另外该提取方法简单、环保、高效、成本低，且易于大规模工业化生产。

Description

一种富硒青钱柳中硒多糖的提取方法和由该提取方法得到的 硒多糖及其应用

技术领域

本发明涉及生物提取领域，尤其涉及一种富硒青钱柳中硒多糖的提取方法和由该提取方法得到的硒多糖及其应用。

背景技术

青钱柳又名摇钱树、麻柳、串钱柳、金钱柳，胡桃科，属落叶乔木，雌雄同株，树高10～30m，是冰川世纪幸存下来的珍稀树种，被誉为植物界的大熊猫，医学界的第3棵树。青钱柳叶具有生津止渴、清热解暑的作用，在被民间称为甜茶。现代医学研究表明青钱柳中含有的多糖具有降血糖的功效。硒是人体必须的微量元素之一，被誉为“生命的火种”，具有抗癌、抗氧化和增强免疫力等功效。而富硒青钱柳中由于富含硒和多糖，两者结合得到的硒多糖在抗癌、抗氧化和增强免疫力等方面效果更好。

现有的富硒青钱柳中硒多糖提取技术一般是采用加热提取得到，提取过程中不仅耗时较长，效率低，生产成本高，且易导致富硒青钱柳中一些成分被碳化破坏产生较多杂质。

发明内容

本发明的目的在于提供富硒青钱柳中硒多糖的提取方法和由该提取方法得到的硒多糖及其应用，通过采用包括纤维素酶在内的酶酶解提取富硒青钱柳中的硒多糖，不仅不会破坏富硒青钱柳中的营养成分，而且富硒青钱柳中硒多糖的提取得率较高、多糖含量高、总硒含量高并且全部为有机硒；另外该提取方法简单、环保、高效、成本低，且易于大规模工业化生产。

为实现以上目的，本发明提供技术方案如下：

一种富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，包括：

采用包括纤维素酶在内的酶对富硒青钱柳原料进行酶解提取，得到富硒青钱柳提取液；

将所述富硒青钱柳提取液进行干燥；

优选地，所述富硒青钱柳原料包括富硒青钱柳叶。

作为上述技术方案的进一步改进，所述采用包括纤维素酶在内的酶对富硒青钱柳原料进行酶解提取过程包括：

提供富硒青钱柳原料，将所述富硒青钱柳原料和溶剂混合得到混合物；

将包括纤维素酶在内的酶和所述混合物混合进行酶解提取，然后进行第一次固液分离，液体即为富硒青钱柳提取液。

作为上述技术方案的进一步改进，在进行所述酶解之前还包括：使用pH调节剂将所述混合物的pH值调节为4.0-6.0；

优选地，所述pH调节剂包括醋酸；

优选地，所述溶剂包括水；

优选地，所述水的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的20-30倍；

优选地，所述第一次固液分离包括过滤和离心分离；

优选地，所述过滤采用滤网进行过滤；所述滤网的孔径为0.2-0.75mm；

优选地，所述离心分离采用碟式离心机进行。

作为上述技术方案的进一步改进，所述提取的温度为50-60℃，所述提取的时间为1-3h；

优选地，所述纤维素酶的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的3-5%；所述纤维素酶的酶活力≥5.0万u/g。

作为上述技术方案的进一步改进，所述酶还包括木聚糖酶和果胶酶中的至少一种；

优选地，所述木聚糖酶的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的0.1-0.2%；所述木聚糖酶的酶活力≥40万u/g；

优选地，所述果胶酶的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的1-2%；所述果胶酶的酶活力≥5万u/g。

优选地，所述果胶酶的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的1-2%；所述果胶酶的酶活力≥5万u/g。

作为上述技术方案的进一步改进，所述干燥之前还包括将所述富硒青钱柳提取液进行浓缩，得到浓缩液；

优选地，所述浓缩采用膜分离浓缩方式；可选地，所述膜分离浓缩方式为纳滤膜浓缩；

优选地，所述纳滤膜浓缩采用的纳滤膜为100-1000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为0.1-1nm；

优选地，所述纳滤膜浓缩过程中温度为15-25℃，膜压力为0.8-1.5MPa。

作为上述技术方案的进一步改进，所述浓缩之后还包括：将所述浓缩液进行醇沉，然后进行第二次固液分离，得到沉淀物；

优选地，将所述浓缩液进行醇沉过程包括：将所述浓缩液和醇混合，使醇沉浓度为70-80wt%，静置；

优选地，所述醇包括无水乙醇；

优选地，所述第二次固液分离包括离心分离；更优地，所述离心分离的转速为800-1200rpm，时间为2-5min；

优选地，所述静置时间为4-6h；

优选地，在进行所述浓缩之前还包括：采用超滤膜对所述富硒青钱柳提取液进行过滤；

优选地，所述超滤膜采用1000-3000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为1-20nm；

优选地，所述超滤膜过滤过程中温度为15-25℃，膜压力为0.3-0.8MPa。

作为上述技术方案的进一步改进，所述干燥采用真空冷冻干燥；

优选地，所述真空冷冻干燥的温度为-50～-40℃。

一种由上述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法得到的硒多糖。

一种由上述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法得到的硒多糖在食品中的应用。

本发明的有益效果：

（1）本发明通过采用包括纤维素酶在内的酶酶解提取富硒青钱柳中硒多糖，不仅不会破坏富硒青钱柳中的营养成分，而且富硒青钱柳中硒多糖的提取得率较高、多糖含量高、总硒含量高并且全部为有机硒；另外该提取方法简单、环保、高效、成本低，且易于大规模工业化生产。

（2）进一步地，本发明通过添加果胶酶，将富硒青钱柳原料主要包括富硒青钱柳叶中少量木聚糖酶和果胶酶解，促进富硒青钱柳组织更充分地分解，释放更多硒多糖，同时酶解大分子多糖，得到分子量小的多糖。

（3）进一步地，本发明通过采用膜分离浓缩方式，可选择性分离不同的物质，获得浓度更高纯度更高的小分子硒多糖浓缩液，且保证所要得到小分子硒多糖的结构不被破坏，并进一步采用真空冷冻干燥方式减少硒多糖在干燥过程中的损失，进而获得提取率更高且纯度更高的小分子硒多糖。

为使本发明的上述目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，作详细说明如下。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面结合实施例的方式对本发明的技术方案做详细说明，在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。

但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。

除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。

如本文所用之术语：

“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。

连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。

当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。

在这些实施例中，除非另有指明，所述的份和百分比均按质量计。

“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位，1份可表示任意的单位质量，如可以表示为1g，也可表示2.689g等。假如我们说A组分的质量份为a份，B组分的质量份为b份，则表示A组分的质量和B组分的质量之比a：b。或者，表示A组分的质量为aK，B组分的质量为bK（K为任意数，表示倍数因子）。不可误解的是，与质量份数不同的是，所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。

“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)。

本发明提供一种富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，包括：

采用包括纤维素酶（食品级）在内的酶对富硒青钱柳原料进行酶解提取，得到富硒青钱柳提取液；

将所述富硒青钱柳提取液进行干燥。

优选地，上述富硒青钱柳原料包括富硒青钱柳叶。

需要说明的是，纤维素酶能够有效促进富硒青钱柳原料如富硒青钱柳叶的分解，加速硒多糖的溶出。本发明通过采用包括纤维素酶在内的酶酶解提取富硒青钱柳中硒多糖，无需高温条件，不仅不会破坏富硒青钱柳中的营养成分，而且富硒青钱柳中硒多糖的提取得率较高、多糖含量高、总硒含量高并且全部为有机硒；另外该提取方法简单、环保、高效、成本低，且易于大规模工业化生产。

优选地，上述溶剂为水；且上述溶剂的用量为富硒青钱柳原料的总质量的20-30倍。

优选地，上述纤维素酶的用量为富硒青钱柳原料的总质量的3-5%；且该纤维素酶的酶活力≥5万u/g。

优选地，上述酶还包括果胶酶（食品级）和木聚糖酶（食品级）中的至少一种，该果胶酶和木质素可进一步将富硒青钱柳原料中少量果胶和木聚糖酶解，促进富硒青钱柳组织更充分地分解，释放更多硒多糖等营养成分，同时酶解大分子多糖，得到分子量小的多糖。

上述木聚糖酶的用量为富硒青钱柳原料的总质量的0.1-0.2%，且该木聚糖酶的酶活力≥40万u/g。

上述果胶酶的用量为富硒青钱柳原料的总质量的1-2%，且该果胶酶的酶活力≥5万u/g。

进一步地，所述采用包括纤维素酶在内的酶对富硒青钱柳原料进行酶解提取的过程包括：

提供富硒青钱柳原料，将所述富硒青钱柳原料和溶剂混合得到混合物；

将包括纤维素酶在内的酶和所述混合物混合进行酶解提取，然后进行第一次固液分离，液体即为富硒青钱柳提取液。

优选地，上述第一次固液分离包括过滤和离心分离。

上述过滤可采用滤网等进行过滤，所述滤网的孔径为0.2-0.75mm；通过该步过滤用于酶解提取后得到的提取液和渣进行初步分离。上述离心分离优选采用碟式离心机进一步对过滤得到的滤液进行固液分离，将滤液中残留的渣等固体杂质分离掉，取离心液即富硒青钱柳提取液。

需要说明的是，碟式离心机离心分离过程为循环式的一边进料一边排渣；进料速度优选为0.8-1t/h，转速优选为6500-7000r/min，排渣时间优选为2-4s，排渣周期优选为3-6min，冲洗时间优选为3-5s。

进一步地，在进行所述酶解之前还包括：使用pH调节剂将所述混合物的pH值调节为4.0-6.0。优选地，所述pH调节剂包括醋酸（食品级）。

进一步地，上述酶解提取过程中温度为50-60℃，不仅条件温和，而且酶解提取效率更高，提取时间为1-3h。

进一步地，所述干燥之前还包括将上述富硒青钱柳提取液进行浓缩，得到浓缩液。

优选地，上述浓缩采用膜分离浓缩方式，可选择性分离不同的物质，获得浓度更高纯度更高的小分子硒多糖浓缩液，且保证所要得到的硒多糖的结构不被破坏。而采用其它浓缩方式如高温蒸发浓缩法会导致硒多糖的结构被破坏的问题。

可选地，上述膜分离浓缩为纳滤膜浓缩；且纳滤膜浓缩采用的纳滤膜为100-1000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为0.1-1nm。

优选地，上述浓缩过程中温度为15-25℃，膜压力为0.8-1.5MPa。

进一步地，上述浓缩之后还包括：将上述浓缩液进行醇沉，然后进行第二次固液分离，得到沉淀物。

优选地，将上述浓缩液进行醇沉过程包括：将浓缩液和无水乙醇混合，使醇沉浓度（即浓缩液和无水乙醇的混合液中乙醇的质量百分比）为70-80wt%，静置4-6h。

优选地，上述第二次固液分离包括离心分离；该离心分离采用三角离心机进行离心分离，离心分离的转速为800-1200rpm，离心分离的时间为2-5min。

优选地，在进行上述浓缩之前还包括：采用超滤膜对上述富硒青钱柳提取液进行过滤，用于除去上述富硒青钱柳提取液中的粉层、细菌和大分子的胶体，达到澄清富硒青钱柳提取液和除菌的效果，同时减轻后续浓缩负担，提高浓缩效率。

优选地，上述超滤膜采用1000-3000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为1-20nm。

优选地，上述超滤膜过滤过程中温度为15-25℃，膜压力为0.3-0.8MPa。

作为上述技术方案的进一步改进，所述干燥采用真空冷冻干燥，干燥效果好，且可有效减少硒多糖在干燥过程中的损失，进而获得提取率更高且纯度更高的硒多糖。

可选地，上述真空冷冻干燥的温度为-50～-40℃。

一种由上述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法得到的硒多糖。

一种由上述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法得到的硒多糖在食品的应用。

下面将结合具体实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1

（1）取3kg富硒青钱柳叶(总硒含量：5.0mg/kg)，加入75L的纯净水，得到混合物用食品级醋酸调节pH为5.0，加入纤维素酶，用量为120g，搅拌提取2h，并通过恒温水浴保持提取温度为50℃；然后对提取后的混合物用滤框进行过滤，得到的滤液继续使用碟式离心机进行离心分离，收集上清液；该离心过程中，进料速度0.9t/h，碟式离心机转速为6500r/min，排渣时间4s，排渣周期6min，冲洗时间5s。

（2）将步骤（1）得到的上清液过超滤膜，超滤膜采用1000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为1nm，膜压力为0.5MPa，温度为20℃，收集透过液；然后使用纳滤膜浓缩罐对透过液进行浓缩，纳滤膜为150Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为0.1nm，膜压力为1.2MPa，温度为20℃，得到浓缩液；将浓缩液转移至醇沉罐中，加入无水乙醇，使醇沉浓度达70wt%，搅拌均匀，静置4h，使用自吸泵吸出上清液，对剩下的浑浊液使用三角离心机以800rpm的转速离心5min，收集沉淀物。

（3）将步骤（2）得到的沉淀物置于真空冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥过程中：温度设置为-50℃；然后将干燥后的沉淀物进行粉碎并过80目筛，得到硒多糖粉末。

实施例2

（1）取3kg富硒青钱柳叶(总硒含量：5mg/kg)，加60L的纯净水，得到混合物用食品级醋酸调节pH为6.0，加入纤维素酶，纤维素酶的用量为90g，搅拌提取1h，并通过恒温水浴保持提取温度为60℃；然后对提取后的混合物用滤框进行过滤，得到的滤液继续使用碟式离心机进行离心分离，收集上清液；该离心过程中，进料速度0.8t/h，碟式离心机转速为6700r/min，排渣时间2s，排渣周期3min，冲洗时间2s。

（2）将步骤（1）得到的上清液过超滤膜，超滤膜采用1000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为1nm，膜压力为0.5MPa，温度为20℃，收集透过液；然后使用纳滤膜浓缩罐对透过液进行浓缩，纳滤膜为150Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为0.1nm，膜压力为1.2MPa，温度为15℃，得到浓缩液；将浓缩液转移至醇沉罐中，加入无水乙醇，使醇沉浓度达75wt%，搅拌均匀，静置5h，使用自吸泵吸出上清液，对剩下的浑浊液使用三角离心机以1000rpm的转速离心4min，收集沉淀物。

（3）将步骤（2）得到的沉淀物置于真空冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥过程中：温度设置为-50℃；然后将干燥后的沉淀物进行粉碎并过100目筛，得到硒多糖粉末。

实施例3

（1）取3kg富硒青钱柳叶(总硒含量：5mg/kg)，加90L的纯净水，得到混合物用食品级醋酸调节pH为4.0，加入纤维素酶，纤维素酶的用量为150g，搅拌提取3h，并通过恒温水浴保持提取温度为55℃；然后对提取后的混合物用滤框进行过滤，得到的滤液继续使用碟式离心机进行离心分离，收集上清液；该离心过程中，进料速度1t/h，碟式离心机转速为7000r/min，排渣时间3s，排渣周期5min，冲洗时间3s。

（2）将步骤（1）得到的上清液过超滤膜，超滤膜采用1000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为1nm，膜压力为0.5MPa，温度为20℃，收集透过液；然后使用纳滤膜浓缩罐对透过液进行浓缩，纳滤膜为150Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为0.1nm，膜压力为1.2MPa，温度为25℃，得到浓缩液；将浓缩液转移至醇沉罐中，加入无水乙醇，使醇沉浓度达80wt%，搅拌均匀，静置6h，使用自吸泵吸出上清液，对剩下的浑浊液使用三角离心机以1200rpm的转速离心2min，收集沉淀物。

（3）将步骤（2）得到的沉淀物置于真空冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥过程中：温度设置为-50℃；然后将干燥后的沉淀物进行粉碎并过90目筛，得到硒多糖粉末。

实施例4

本实施例与实施例1的区别在于：步骤（1）中“加入纤维素酶，纤维素酶的用量为120g”替换为“加入纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶，纤维素酶的用量为120g，木聚糖酶用量为3g，果胶酶的用量为30g”，其它同实施例1。

实施例5

本实施例与实施例2的区别在于：步骤（1）中“加入纤维素酶，纤维素酶的用量为90g”替换为“加入纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶，纤维素酶的用量为90g，木聚糖酶用量为6g，果胶酶的用量为60g”，其它同实施例2。

实施例6

本实施例与实施例3的区别在于：步骤（1）中“加入纤维素酶，纤维素酶的用量为150g”替换为“加入纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶，纤维素酶的用量为150g，木聚糖酶用量为3g，果胶酶的用量为30g”，其它同实施例3。

实施例7

本实施例与实施例1的区别在于：步骤（1）中“加入纤维素酶，纤维素酶的用量为120g”替换为“加入纤维素酶和木聚糖酶，纤维素酶的用量为120g，木聚糖酶用量为3g，其它同实施例1。

实施例8

本实施例与实施例1的区别在于：步骤（1）中“加入纤维素酶，纤维素酶的用量为120g”替换为“加入纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的用量为120g，果胶酶的用量为30g”，其它同实施例1。

实施例9

本实施例与实施例4的区别在于：将“取3kg富硒青钱柳叶(总硒含量：5mg/kg)”替换为“取50kg富硒青钱柳叶(总硒含量：5mg/kg)”，其它同实施例4。

实施例10

本实施例与实施例4的区别在于：将“取3kg富硒青钱柳叶(总硒含量：5mg/kg)”替换为“取200kg富硒青钱柳叶(总硒含量：5mg/kg)”，其它同实施例4。

对比例1

本对比例与实施例1的区别在于：去掉纤维素酶，其它同实施例1。

对比例2

本对比例与实施例4的区别在于：去掉纤维素酶，其它同实施例4。

对比例3

本对比例与实施例5的区别在于：去掉纤维素酶，其它同实施例5。

称量上述实施例1-10及对比例1-3得到的产物硒多糖的质量，计算产物硒多糖得率（即产物硒多糖的质量与原料富硒青钱柳叶的质量的百分比）；以及检测实施例1-10及对比例1-4得到的产物硒多糖中总硒含量和多糖含量，结果如下表1所示。

上述总硒含量、无机硒和多糖含量分别按照国标GB 2009.93-2017中第一法、DBS42-010-2018中第一法检测和蒽酮-硫酸法检测得到。

表1

原料富硒青钱柳叶的质量

原料富硒青钱柳叶中总硒含量

产物硒多糖得率

产物硒多糖中总硒含量

产物硒多糖中多糖含量

产物硒多糖中无机硒含量

实施例1

3kg

5mg/kg

3.64%

15.23mg/kg

34.89%

/

实施例2

3kg

5mg/kg

3.11%

15.06mg/kg

34.12 %

/

实施例3

3kg

5mg/kg

3.3%

14.51 mg/kg

34.54%

/

实施例4

3kg

5mg/kg

5.04%

16.38 mg/kg

36.83%

/

实施例5

3kg

5mg/kg

4.25%

14.25 mg/kg

36.49%

/

实施例6

3kg

5mg/kg

4.72%

15.72 mg/kg

36.21%

/

实施例7

3kg

5mg/kg

4.08%

13.51 mg/kg

33.49%

/

实施例8

3kg

5mg/kg

4.39%

14.88mg/kg

34.21%

/

实施例9

50kg

5mg/kg

5.06%

16.73mg/kg

38.85%

/

实施例10

200kg

5mg/kg

5.19%

17.51mg/kg

39.63%

/

对比例1

3kg

5mg/kg

2.04%

10.74mg/kg

30.2%

/

对比例2

3kg

5mg/kg

2.85%

13.26 mg/kg

34.54%

/

对比例3

3kg

5mg/kg

2.49%

12.49 mg/kg

33.17%

/

需要说明的是，上述富硒青钱柳叶中总硒含量为每千克富硒青钱柳叶中的总硒含量；而产物硒多糖中总硒含量为每千克产物硒多糖中的总硒含量。

由上述表1结果可得出，通过采用本发明实施例的提取方法得到的硒多糖的得率达到3.11%以上，得到的硒多糖中总硒以及多糖含量高，且硒多糖中硒均为有机硒。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

此外，本领域的技术人员能够理解，尽管在此的一些实施例包括其它实施例中所包括的某些特征而不是其它特征，但是不同实施例的特征的组合意味着处于本发明的范围之内并且形成不同的实施例。例如，在上面的权利要求书中，所要求保护的实施例的任意之一都可以以任意的组合方式来使用。公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在加深对本发明的总体背景技术的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域技术人员所公知的现有技术。

Claims (9)

1.一种富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，包括：

提供富硒青钱柳柳叶，将所述富硒青钱柳柳叶和水混合得到混合物；

使用pH调节剂将所述混合物的pH值调节为4.0-6.0；

将纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶和所述混合物混合进行酶解提取，所述提取的温度为50-60℃，所述提取的时间为1-3h，然后进行第一次固液分离，液体即为富硒青钱柳提取液；

将所述富硒青钱柳提取液进行浓缩，得到浓缩液；

将所述浓缩液进行醇沉，然后进行第二次固液分离，得到沉淀物；

将所述沉淀物进行干燥得到所述硒多糖的粉末；

其中，所述纤维素酶的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的3-5%；所述纤维素酶的酶活力≥5.0万u/g；

所述木聚糖酶的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的0.1-0.2%；所述木聚糖酶的酶活力≥40万u/g；

所述果胶酶的用量为所述富硒青钱柳原料的总质量的1-2%；所述果胶酶的酶活力≥5万u/g。

2.如权利要求1所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，所述pH调节剂为醋酸。

3.如权利要求1所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，所述水的用量为所述富硒青钱柳柳叶的总质量的20-30倍。

4.如权利要求1所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，所述第一次固液分离包括过滤和离心分离；

所述过滤采用滤网进行过滤；所述滤网的孔径为0.2-0.75mm；

所述离心分离采用碟式离心机进行。

5.如权利要求1所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，所述浓缩采用膜分离浓缩；所述膜分离浓缩为纳滤膜浓缩。

6.如权利要求5所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，所述纳滤膜浓缩采用的纳滤膜为100-1000Da分子量的中空纤维膜，膜孔径为0.1-1nm；

所述纳滤膜浓缩过程中温度为15-25℃，膜压力为0.8-1.5MPa。

7.如权利要求1所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，将所述浓缩液进行醇沉过程包括：将所述浓缩液和醇混合，使醇沉浓度为70-80wt%，静置；

所述醇包括无水乙醇；

所述第二次固液分离包括离心分离；所述离心分离的转速为800-1200rpm，时间为2-5min；

所述静置时间为4-6h。

8.如权利要求1所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，在进行所述浓缩之前还包括：采用超滤膜对所述富硒青钱柳提取液进行过滤；

所述超滤膜采用1000-3000DaDa分子量的中空纤维膜，膜孔径为1-20nm；

所述超滤膜过滤过程中温度为15-25℃，膜压力为0.3-0.8MPa。

9.如权利要求1-8任一项所述的富硒青钱柳中硒多糖的提取方法，其特征在于，所述干燥采用真空冷冻干燥；

所述真空冷冻干燥的温度为-50～-40℃。