CN112367967B

CN112367967B - 肌肉松弛用组合物

Info

Publication number: CN112367967B
Application number: CN201980042074.2A
Authority: CN
Inventors: 郑镕池; 金银美; 李应智
Original assignee: Caregen Co Ltd
Current assignee: Caregen Co Ltd
Priority date: 2018-12-26
Filing date: 2019-10-22
Publication date: 2023-04-04
Anticipated expiration: 2039-10-22
Also published as: IL279386A; US11306121B2; UA125331C2; TWI730562B; MX2020014330A; KR20200080108A; EA202092820A1; CA3103204C; KR102132274B1; EP3815674A4; PH12020552142A1; CN112367967A; SG11202100812UA; TW202024116A; US20210246165A1; JP2021526154A; AR117730A1; BR112020026825A2; CA3103204A1; JP7110405B2

Abstract

本发明涉及一种表现出生理活性的肽以及包含所述肽的组合物。因为本发明的肽表现出各种生理活性，如松弛肌肉、改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生等，因此可将所述肽用作肌肉松弛用药物组合物、或者用于改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生或减少痤疮的化妆品中的活性成分。

Description

肌肉松弛用组合物

技术领域

本发明涉及一种具有生理活性的肽以及一种包含所述肽的组合物，更具体而言，本发明涉及一种用于肌肉松弛或用于改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生或改善痤疮的组合物(例如，药物组合物或化妆品组合物)，其包含所述具有生理活性的肽。

背景技术

构成动物的神经系统的神经元(即，神经细胞)具有轴突，轴突具有其他细胞中找不到的独特结构。轴突具有从神经细胞体凸起的细长结构，从而使轴突与目标神经元相连，通过该轴突进行信号传输和物质传递。

神经肌肉突触具有特异性分化的突触结构，其中轴突的末梢突触连接至骨骼肌细胞，从而由神经元向肌肉进行冲动传导。到达骨骼肌的轴突是由髓磷脂包围的有髓鞘的轴突，并且当轴突接近骨骼肌时，轴突分支为多个末梢树突。分支的轴突被髓磷脂包围，但是在轴突进入骨骼肌的位置，髓磷脂消失。在这种情况下，分支的轴突形成末梢扣结，类似于构成其他突触的轴突末梢，并且末梢扣结位于受抑制的肌细胞的表面。这种结构称为“运动终板”或“神经肌肉突触”。

与其他突触一样，在神经肌肉突触的轴突末梢处有许多的线粒体和突触囊泡。神经肌肉突触的突触囊泡包含乙酰胆碱作为神经递质。SNARE分子对于乙酰胆碱的释放非常关键，因而对乙酰胆碱释放的抑制作用会导致弛缓性麻痹。在轴突末梢和肌肉之间存在突触间隙，并且作为突触后部分的骨骼肌细胞的细胞膜向肌质凹陷并形成多个接头褶皱。由于在接头褶皱周围的细胞膜处存在乙酰胆碱受体，因此认为该结构能够起到扩大该受体可连接至乙酰胆碱的面积的作用。

当神经冲动传递至神经肌肉突触时，末梢细胞膜的电压敏感性钙通道打开，从而使钙离子进入该钙通道。由此，突触囊泡与细胞膜融合从而将囊泡中的乙酰胆碱释放到突触裂隙中。释放的乙酰胆碱可与存在于肌细胞膜中的乙酰胆碱受体结合，由此打开钠通道，从而引发细胞膜的去极化。起始于神经肌肉突触的冲动分布于肌纤维的表面，并传递至肌细胞的深部。冲动传递至三联体(triad)以打开肌质网的网膜钙通道，并将钙离子释放至肌质中。钙离子与肌钙蛋白C结合，由此肌肉开始收缩。当冲动中断时，钙离子通过主动运输从而返回肌质网的小池中，从而引发肌肉松弛。因此，当由神经肌肉突触分泌乙酰胆碱受到抑制时，产生于神经肌肉突触处的冲动不会传递至肌肉。在这种情况下，由于冲动中断，因此肌肉得到松弛。

同时，面部表情皱纹的形成原因或其机理取决于沿向内方向牵拉皮肤的表皮肌肉的张力。这种肌肉张力源自衰弱的面部肌肉以及过高的神经活性。神经活性过高的特征为会刺激肌肉纤维的神经递质的不受控的过度释放。因此，起到控制神经递质的释放作用的分子使肌肉张力松弛，从而有助于消除面部皱纹。因此，需要能够有效控制神经递质的释放以治疗肌肉痉挛并减轻或消除面部不对称和/或面部皱纹(尤其是面部表情皱纹)的新型活性成分。

已知肉毒杆菌(Botulinum)毒素与肌肉松弛作用有关。肉毒杆菌毒素最常用于临床试验和化妆品以消除面部皱纹。肉毒杆菌毒素会造成SNARE蛋白的功能受损，并且肉毒杆菌毒素通过干扰SNARE复合体以抑制神经递质(即，乙酰胆碱)的分泌从而具有肌肉松弛作用。

肉毒杆菌毒素被用作肌肉松弛剂(韩国专利公开No.2010-0020972)，或者通过利用肉毒杆菌毒素的肌肉松弛作用从而将其用于减少皱纹。然而，由于肉毒杆菌毒素的麻痹作用是可逆的，平均时间为6个月，因此这种治疗需要重复注射肉毒杆菌毒素。此外，由于肉毒杆菌毒素的尺寸可被患者的免疫系统识别，因此肉毒杆菌毒素可引发对药物的免疫应答。由于针对肉毒杆菌毒素的抗体的形成会导致治疗效果显著丧失，这是非常严重的问题。因此，需要研发表现出与肉毒杆菌毒素类似的麻痹作用的分子，这种分子具有更简单且稳定的分子结构，不会引起免疫应答，并且在制造成本方面是有效的。

同时，皮脂由皮脂腺产生并且通过皮肤毛孔释放，皮脂通过在皮肤和毛发表面形成薄膜来保护我们的身体以抵御入侵的微生物，从而具有抗菌作用和细胞生长抑制作用。当皮脂腺分泌的皮脂逐渐增多时，毛孔会变大，或者当皮脂通过毛孔时，会产生问题。皮脂会累积于这种变大的毛孔中，并且该皮脂会进一步累积并与死皮细胞、化妆品残留物或灰尘混合在一起。混合的皮脂废物通过与空气中的自由基接触而被氧化并因此而变为棕色或黑色，从而产生黑头。此外，由于皮脂会引发痤疮，因此需要研发能够抑制皮脂过度产生的物质。

发明内容

[技术问题]

因此，本发明的目的是提供一种肽以及包含所述肽的药物组合物或化妆品组合物，所述肽具有各种生理活性，如松弛肌肉、改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生或改善痤疮。

[技术方案]

为了实现该目的，根据本发明的一个方面，提供了包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽。

根据本发明的另一方面，提供了一种肌肉松弛用组合物，其包含包括由SEQ IDNO:1表示的氨基酸序列的肽作为活性成分。

根据本发明的一个实施方案，该组合物可为药物组合物或化妆品组合物的形式，但是本发明不限于此。

根据本发明的另一实施方案，基于100重量％的肌肉松弛用组合物，肽的含量可为0.001重量％至60重量％，但本发明不限于此。

根据本发明的又另一实施方案，该组合物可用于预防或治疗神经肌肉疾病。在本发明的一个优选实施方案中，神经肌肉疾病可包括眼睑抽搐、斜颈、颈肌张力障碍、强直性眼睑痉挛、腋窝多汗症、肛裂、阴道痉挛、失弛缓症、头痛症、特发性和神经源性逼尿肌过度活动症、局灶性肌张力障碍、颞下颌关节疼痛/疾病、糖尿病性神经病、声带功能障碍、斜视、慢性神经病、面部肌肥大、逼尿肌-括约肌功能障碍或良性前列腺增生，并且头痛症可以是偏头痛，但是本发明不限于此。

根据本发明的又另一实施方案，所述肽可抑制乙酰胆碱的分泌。

根据本发明的又另一方面，提供了一种化妆品组合物，其包含包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽作为活性成分。

根据本发明的一个实施方案，该化妆品组合物可用于改善皮肤状况的目的，例如，改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生或改善痤疮，但本发明不限于此。

根据本发明的另一实施方案，基于100重量％的化妆品组合物，肽的含量可为0.001重量％至60重量％，但本发明不限于此。

根据本发明的又另一实施方案，所述肽可提高胶原的表达，但本发明不限于此。

[有利效果]

因为根据本发明的包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽具有诸如松弛肌肉、改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生等生理活性，因此所述肽可用作肌肉松弛用组合物、改善皮肤皱纹用组合物、抑制皮脂产生用组合物、抑制黑头产生用组合物或改善痤疮用组合物中的活性成分。

附图说明

图1示出了包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽在长时间储存时的高温稳定性的评价结果。

图2示出了包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的高温稳定性的评价结果。

图3示出了在包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的作用下，重组突触融合蛋白1A的分解程度。

图4示出了在包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的作用下，内源性突触融合蛋白1A的分解程度。

图5示出了包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽对SNARE复合体的形成的抑制作用。

图6示出了包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽对SNARE复合体的形成的抑制作用。

图7示出了包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽对乙酰胆碱的分泌的抑制作用。

图8示出了包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的肌肉松弛作用。

图9和图10示出了Botox和包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的肌肉松弛作用的对比结果。

图11示出了确定包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽是否渗透至细胞中的结果。

图12示出了验证包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的组织渗透模式的结果。

图13示出了验证包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的组织渗透模式存在于毛囊周围的结果。

图14示出了验证包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的组织渗透模式存在于皮脂腺周围的结果。

图15和图16示出了包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽的皱纹减轻作用。

图17示出了在施用包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽时提高的胶原水平。

图18示出了在施用包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽时提高的弹性蛋白水平。

图19示出了在施用包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽时提高的纤连蛋白水平。

图20示出了在施用包含由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽时减少的皮脂腺数量以及与皮脂产生相关的标志物表达降低的结果。

具体实施方式

下面将详细描述本发明。

1.本发明的肽

本发明提供了具有有用的生理活性的肽，例如具有诸如松弛肌肉、改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生或改善痤疮之类的各种生理活性的肽。

本发明的肽包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列。根据一个实施方案，本发明的肽可由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列构成，但本发明不限于此。

在本说明书中，术语“肽”是指氨基酸残基通过肽键相互连接而形成的线性分子。可以根据本领域已知的常规生物或化学合成方法、特别是固相合成技术来制备肽。

肽可包括在不影响肽的功能的范围内，通过一个或多个氨基酸残基的缺失、插入、置换或它们的组合而得到的具有不同序列的氨基酸的变体或片段。不改变肽作为整体的活性的氨基酸交换在本领域中是已知的。在一些情况下，可以通过磷酸化、硫酸化、丙烯酰化、糖基化、甲基化、法尼基化等对肽进行修饰。因此，本发明包括具有与包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽基本上相同的氨基酸序列的肽，以及该肽的变体或活性片段。表述“基本上相同的蛋白”是指具有与SEQ ID NO:1的氨基酸序列的序列同源性为60％以上、优选75％以上、例如80％以上、90％以上、95％以上、98％以上或99％以上的氨基酸序列的蛋白，但本发明不限于此。氨基酸序列同源性为60％以上且表现出相同活性的蛋白落入本发明的范围内。此外，本发明的肽还可包括为了增加肽的半衰期或稳定性的特定目的而制备的靶向序列、标签、经标记的残基或氨基酸序列。

此外，可以通过本领域公知的各种方法获得本发明的肽。根据本发明的一个实施方案，可以通过使用多核苷酸重组和蛋白表达系统制备本发明的肽，或者可以使用由通过诸如肽合成和无细胞蛋白合成法等化学合成的体外肽合成方法来制备本发明的肽。

此外，为了获得更高的化学稳定性、增强的药理学性质(半衰期、吸收性、效价、功效等)、经修饰的特异性(例如，宽的生物活性谱)和降低的抗原性，可以将保护基结合至本发明的肽的N端或C端。例如，保护基可为乙酰基、芴基甲氧基羰基、甲酰基、棕榈酰基、肉豆蔻基、硬脂基或聚乙二醇(PEG)。然而，对于保护基的使用没有限制，只要保护基可修饰肽、尤其可增强肽的稳定性即可。所使用的术语“稳定性”的含义包括保护本发明的肽在体内免受蛋白裂解酶的攻击的体内稳定性，以及储存稳定性(例如，室温储存稳定性)。

2.包含本发明的肽的药物组合物

本发明的另一方面提供了一种包含肽的肌肉松弛用药物组合物，所述肽包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列。

因为包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽与“1.本发明的肽”的部分中描述的肽相同，因此关于包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽的详细描述请参见“1.本发明的肽”的部分。下文中，将仅描述药物组合物的具体构成。

根据本发明的一个实施方案，本发明的肽具有肌肉松弛活性，因此可用作肌肉松弛用组合物中的活性成分。因此，本发明提供了一种肌肉松弛用药物组合物，其包含包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽作为活性成分。

基于100重量％的肌肉松弛用药物组合物，肽的含量可为0.001重量％至60重量％，例如，含量为0.01重量％至50重量％。当肌肉松弛用药物组合物中的肽的含量小于下限时，可能不能充分表现出肽的肌肉松弛作用。另一方面，当肽的含量大于上限时，相对于增加的肽的浓度，所获得的肽的效果可能相对较低。

本发明的药物组合物可用于预防或治疗神经肌肉疾病。在这种情况中，本发明的药物组合物可不受限制地用于神经肌肉疾病，只要神经肌肉疾病为以肌肉松弛为治疗目的疾病即可。

本发明中使用的术语“保护”是指其中本发明的药物组合物延迟神经肌肉疾病的发作的所有类型的作用。

本发明中使用的术语“抑制”是指其中本发明的药物组合物减少神经肌肉疾病的发作的所有类型的作用。

本发明中使用的术语“治疗”是指其中本发明的药物组合物改善或缓解神经肌肉疾病的症状的所有类型的作用。

本发明中使用的术语“施用”是指通过采用适当的方法将特定物质引入受试者。在这种情况中，可通过可使本发明的药物组合物到达体内靶标的任何常见施用途径来施用该组合物。对本发明的药物组合物的施用途径没有特别的限制，但是根据本发明的药物组合物可以口服施用或者胃肠外施用。特别地，本发明的药物组合物可胃肠外施用，更特别地，可将该组合物施加于皮肤上(即，经皮施用)。特别地，本发明的组合物可每日施用一次至四次、每日施用两次至三次、或每日施用两次。此外，本发明的药物组合物的施用可持续4周以上、8周以上、4周至12周或8周至12周的一段时间。

本发明中使用的术语“神经肌肉疾病”是指外周神经和肌肉中发生的疾病。外周神经是指由脑或脊髓中的中枢神经系统分支出来并使末梢器官(如肌肉或皮肤)与中枢神经系统相连的神经网络，并且起到将中枢神经系统中产生的指令传送至诸如肌肉之类的末梢器官、或将诸如痛感之类的感官信息传送至中枢神经系统的作用。外周神经系统的疾病包括外周神经障碍、神经肌肉突触(其中外周神经连接至肌肉)或肌肉本身中造成的疾病等。

神经肌肉疾病的非限制性实例包括如下疾病，如眼睑抽搐、斜颈(颈部因肌肉收缩而向一侧歪斜的颈部姿势异常)、颈肌张力障碍、强直性眼睑痉挛、腋窝多汗症、肛裂、阴道痉挛、失弛缓症、头痛症、特发性和神经源性逼尿肌过度活动症、局灶性肌张力障碍(在四肢、颞下颌关节、声带等之中)、颞下颌关节疼痛/疾病、糖尿病性神经病、声带功能障碍、斜视、慢性神经病、面部肌肥大(在咀嚼肌等之中)、逼尿肌-括约肌功能障碍、良性前列腺增生等。头痛可以是偏头痛。

根据本发明的一个实施方案，本发明的药物组合物还可包含常用于制备药物组合物的适当的载体、辅料或稀释剂。

可用于本发明的药物组合物中的载体、辅料或稀释剂包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、无定形纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石粉、硬脂酸镁、矿物油等。

根据所使用的常规方法，可将本发明的药物组合物用于如下剂型：粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、口服制剂(例如气雾剂)、外用制剂、栓剂和无菌注射液。

在配制时，采用本领域通常所用的稀释剂或辅料(例如填料、增量剂、粘结剂、润湿剂、崩解剂和表面活性剂等)来制备药物组合物。用于口服施用的固体制剂包括片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂等。这类固体制剂可通过将化合物与至少一种辅料(例如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等)混合而制备。

此外，除了简单的辅料之外，这里还可使用润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉等。用于口服施用的液相制剂包括混悬剂、内用溶液、乳剂和糖浆剂等。除了本领域中常用的惰性稀释剂(例如水、液体石蜡)之外，这种液相制剂还可包含各种辅料，例如润湿剂、甜味剂、调味剂、防腐剂等。

胃肠外施用的制剂包括无菌水溶液、非水溶液、混悬剂、乳剂、冻干制剂和栓剂等。作为非水溶剂和混悬剂，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)、可注射的酯类(例如油酸乙酯)等。作为栓剂的基质，可使用合成脂肪酸酯、聚乙二醇、吐温61、可可脂、月桂酸甘油酯、甘油、明胶等。

用于口服施用的固体制剂包括片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂等。这类固体制剂可通过将本发明的药物组合物与至少一种辅料(例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等)混合而制备。除了简单的辅料之外，这里还可使用润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉等。

用于口服施用的液相制剂包括混悬剂、内用溶液、乳剂和糖浆剂等。除了本领域中常用的惰性稀释剂(例如水、液体石蜡)以外，这种液相制剂还可包含各种辅料，例如润湿剂、甜味剂、调味剂、防腐剂等。

用于施加至皮肤的制剂包括扑粉剂、乳剂、混悬剂、油剂、喷雾剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、泡沫剂或溶液。本发明的药物制剂可为无水软膏，并且可包含适合于局部施加且在体温下呈液相的石蜡，尤其可包含低粘度石蜡，或者可包含天然脂肪或部分合成脂肪，例如椰子油脂肪酸甘油三酯、氢化油(例如，氢化花生油或蓖麻油)、甘油的部分脂肪酸酯(例如，单硬脂酸甘油酯和二硬脂酸甘油酯)、硅树脂(例如聚甲基硅氧烷，如六甲基二硅氧烷或八甲基三硅氧烷)等。例如，药物制剂可包含与水性乳霜相关并起到提高吸湿能力的作用的脂肪醇、以及甾醇、羊毛脂、其他乳化剂和/或其他添加剂。

本发明的药物组合物中所含的包含所述氨基酸序列的肽的剂量可根据患者的状况和体重、疾病严重程度、药物形式、施用途径和施用时间而变化，但是当需要时，可适当选择其剂量。例如，包含所述氨基酸序列的肽可按照0.0001mg/kg至1,000mg/kg的剂量、尤其为0.1mg/kg至1,000mg/kg的剂量每日施用。肽可每日施加一次，或者分若干次施加。然而，本发明的范围并不受药物组合物的剂量的限制。根据本发明的包含所述氨基酸序列的肽的剂量可根据施用途径、疾病的严重程度、患者的性别、体重和年龄等而变化。因此，肽的剂量并不旨在以某些方式限制本发明的范围。

本发明的药物组合物可通过各种施用途径而施用于哺乳动物(例如，小鼠、大鼠、家畜、人等)。可预期施用模式。在这种情况中，例如，可通过所有施用模式施用肽，例如口服施用、直肠或静脉施用、肌肉施用、皮下施用、子宫内施用或脑室内注射。

除了包括氨基酸序列的肽之外，根据本发明的用于预防、抑制或治疗神经肌肉疾病的药物组合物还可包含具有改善、缓解或预防神经肌肉疾病的作用的一种或多种活性成分。

为了改善、缓解或预防神经肌肉疾病，本发明的药物组合物可单独使用，或者可与手术、激素疗法、药物治疗和利用生物应答调节剂的其他疗法组合使用。

根据本发明的一个实施方案，本发明的肽在高温下稳定(见图1和图2)，使参与神经递质释放的突触融合蛋白1A分解，抑制SNARE复合体的形成(见图3至图6)，抑制乙酰胆碱的分泌(见图7)，具有肌肉松弛作用(见图8至图10)，可渗透至细胞中，并且能够渗透至组织的肌层并与神经标志物共存，从而表现出肌肉松弛作用(见图11至图14)。

3.包含本发明的肽的化妆品组合物

本发明的又一方面提供了一种化妆品组合物，其包含包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽作为活性成分。

因为包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽与“1.本发明的肽”的部分中描述的肽相同，因此关于包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽的详细描述请参见“1.本发明的肽”的部分。下文中，将仅描述化妆品组合物的具体构成。

在本发明中，术语“毛孔”是指存在于面部、前额、鼻子等处的通过其分泌皮脂的小孔，并且术语“黑头”是指呈黑色的皮脂，这是因为变性的皮脂、旧的死皮细胞等的混合物累积于毛孔中，并且污染物沉积于毛孔周围。

根据本发明的一个实施方案，本发明的化妆品组合物可为用于改善皮肤状况的化妆品组合物。术语“改善皮肤状况”通常可表示治疗、缓解或减轻由皮肤的内在因素或外在因素造成的皮肤伤害的过程。例如，改善可表示使用该化妆品组合物来改善皱纹、增强皮肤弹性、使伤口再生、抑制皮脂产生或改善痤疮等，但本发明不限于此。

根据本发明的一个实施方案，本发明的肽在高温下是稳定的(见图1和图2)，并且因肌肉松弛或真皮成分增加而具有改善皮肤皱纹的作用(见图15至图19)。真皮成分可包括胶原，但本发明不限于此。

根据本发明的一个实施方案，本发明的肽在高温下是稳定的(见图1和图2)，并且皮脂腺数量减少且与皮脂产生相关的标志物的表达水平降低(见图20)。

可通过使用化妆品领域中常用的基础物质、佐剂和添加剂来制备液体形式或固体形式的本发明的化妆品组合物。液体或固体形式的化妆品(例如)可包括化妆水、乳霜、沐浴用制品等，但本发明不限于此。例如，常用于化妆品领域的基础物质、佐剂和添加剂包括水、醇、丙二醇、硬脂酸、甘油、鲸蜡醇、液体石蜡等，但本发明不特别局限于此。

除了包括氨基酸序列的肽之外，本发明的化妆品组合物可包含化妆品组合物中常用的成分。例如，化妆品组合物可包含常规佐剂和载体，如抗氧化剂、稳定剂、增溶剂、维生素、色素和香料。

本发明的化妆品组合物可以制备成在本领域中通常获得的任意剂型。例如，可将化妆品组合物配制为溶液、混悬剂、乳剂、糊剂、凝胶剂、霜剂、洗剂、粉末剂、肥皂、含表面活性剂的清洗剂、油剂、粉末粉底、乳液粉底、蜡粉底、喷雾剂等，但本发明不限于此。更具体而言，可配制化妆品组合物以制备爽肤水、洗剂、滋养霜、按摩霜、精华液、眼霜、清洁霜、清洁泡沫、洁肤水、面膜、喷雾或粉末。

当本发明的化妆品组合物的制剂为糊剂、霜剂或者凝胶剂时，可使用动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅树脂、膨润土、二氧化硅、滑石粉或者氧化锌等作为载体成分。

当本发明的化妆品组合物的制剂为粉末剂或喷雾剂时，可使用乳糖、滑石粉、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或者聚酰胺粉末作为载体成分。特别地，当制剂为喷雾剂时，制剂还可包含氯氟烃、丙烷/丁烷或者二甲醚等推进剂。

当本发明的化妆品组合物的制剂为乳剂时，可使用溶剂、增溶剂或者乳化剂作为载体成分。例如，载体成分包括水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、丙三醇脂肪族酯、聚乙二醇或者山梨糖醇的脂肪酸酯。

当本发明的化妆品组合物的制剂为混悬剂时，可使用诸如水、乙醇和丙二醇之类的液体稀释剂、诸如乙氧基异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯及聚氧乙烯山梨聚糖酯之类的混悬剂、微晶性纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶等作为载体成分。

当本发明的化妆品组合物的制剂为含表面活性剂的清洗剂时，可使用脂肪醇硫酸盐、脂肪醇醚硫酸盐、磺基琥珀酸单酯、咪唑晽盐衍生物、甲基牛磺酸盐、肌氨酸盐、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、烷基酰胺甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或者乙氧基化甘油脂肪酸酯等作为载体成分。

本发明的化妆品组合物可单独使用，或者可双重施加，或者可与除本发明的化妆品组合物以外的另一种化妆品组合物一起进行双重施加。此外，具有优异的皮肤保湿作用和优异的皮肤隔离改善作用的本发明的化妆品组合物可根据常规使用方法进行使用，并且其使用次数可根据使用者的皮肤状态或偏好而变化。

当本发明的化妆品组合物为肥皂、含表面活性剂的清洗剂或无表面活性剂的清洗剂制剂时，在将化妆品组合物施加至皮肤之后，可将其擦除、卸除或用水洗去。作为具体实例，肥皂为液体皂、皂粉、固体皂和油皂，含表面活性剂的清洗剂制剂为清洁泡沫、洁肤水、清洁巾和清洁面膜，并且无表面活性剂的清洗剂制剂为清洁霜、清洁洗剂、洁肤水和清洁凝胶，但本发明不限于此。

4.包含本发明的肽的药物组合物或化妆品组合物的用途

本发明的又一方面提供了药物组合物或化妆品组合物的用途，该药物组合物或化妆品组合物包含包括由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的肽。

因为包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽与“1.本发明的肽”的部分中描述的肽相同，因此关于包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽的详细描述请参见“1.本发明的肽”的部分。下文中，将仅描述包含肽的组合物的用途。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种肌肉松弛方法，其包括将肽或药物组合物施加至皮肤，或施加至其中肌肉收缩的皮肤。施加可包括施加至皮肤，但本发明不限于此。

根据本发明的另一方面，本发明提供了一种预防、抑制或治疗神经肌肉疾病的方法，其包括向受试者或患有神经肌肉疾病的受试者施用所述肽或药物组合物。

该药物组合物已在“2.包含本发明的肽的药物组合物”的部分中进行了描述。

可向有需要的受试者施加/施用有效量的包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽、或包含所述肽的药物组合物。

根据本发明的另一方面，本发明提供了一种改善皮肤皱纹的方法，其包括向皮肤或其上出现有皱纹的皮肤施加所述肽或化妆品组合物。

根据本发明的又一方面，本发明提供了一种抑制皮脂产生的方法，其包括向皮肤施加所述肽或化妆品组合物。

根据本发明的又一方面，本发明提供了一种缓解痤疮的方法，其包括向皮肤或其上出现有痤疮的皮肤施加所述肽或化妆品组合物。

根据本发明，施加可包括施加至皮肤上，但本发明不限于此。

该化妆品组合物已在“3.包含本发明的肽的化妆品组合物”的部分中进行了描述。

可向有需要的受试者施加/施用有效量的包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的肽、或包含所述肽的化妆品组合物。下面将参照制备例、实施例和实验例详细描述本发明。

然而，应当理解，给出以下制备例、实施例和实验例仅旨在说明本发明，并且不旨在限制本发明的范围。

制备例1.具有各种生理活性的新型肽的制备

使用已知方法制备具有由SEQ ID NO:1表示的氨基酸序列的新型肽序列“KFLIK”。该新型肽的分子量为647.4Da。

实验例1.肽的高温稳定性的评价

1-1.长时间储存时的高温稳定性的评价

将具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的本发明的肽以1,000ppm的浓度溶解于无菌蒸馏水中，在45℃储存7天、14天、28天、60天和75天，然后进行HPLC分析。

作为结果，如图1所示，可看出在45℃的条件下，在75天的最长观察时间内，本发明的肽的稳定性得以维持。

1-2.高温稳定性的评价

将本发明的肽以1,000ppm的浓度溶解于无菌蒸馏水中，在121℃温热15分钟和30分钟，然后进行HPLC分析。

作为结果，如图2所示，可看出在121℃，在30分钟的最长温热时间内，本发明的肽的稳定性得以维持。

实验例2.在肽的作用下突触融合蛋白1A的分解程度的确认可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感性因子附着型的蛋白受体(SNARE)蛋白参与发生于细胞中的膜融合。参与神经传递的神经元SNARE与突触囊泡结合至突触前膜相关。携带神经递质并同时释放神经递质的突触囊泡应与突触前膜融合，以形成神经递质释放通道。在这种情况中，借助于作为蛋白质复合体存在的SNARE发生融合。特别地，t-SNARE复合体(其为SNAP-25蛋白和附着于靶膜的突触融合蛋白1A蛋白的复合体)和附着于囊泡的v-SNARE参与该融合。当SNARE缀合和扭曲过程未充分完成时，膜融合失败。因此，由于未释放神经递质，肌肉松弛。确认了本发明的肽是否具有使构成t-SNARE的突触融合蛋白1A分解的能力。

2-1.重组突触融合蛋白1A的分解程度的确认

在实验组中，用1μg的重组突触融合蛋白1A蛋白(Novus biologicals，美国)和浓度逐渐增加的本发明的肽(20μM、100μM和200μM)处理反应缓冲液(50mM HEPES，40mM 2-ME，20μM ZnCl₂，pH 7.4)。在阴性对照组(对照)中，仅用重组突触融合蛋白1A蛋白处理反应缓冲液。在37℃的条件下使所得混合物反应4小时，然后使用突触融合蛋白1A抗体(SynapticSystems，德国)对其进行蛋白质印迹。

结果确认，与其中的溶液未用本发明的肽处理的阴性对照组相比，当用本发明的肽处理该溶液时，本发明的肽以浓度依赖的方式使重组突触融合蛋白1A蛋白的条带减少(图3)。

2-2.在细胞中表达的内源性突触融合蛋白1A的分解程度的确认

用30μg的SH-SY5Y细胞裂解物和浓度逐渐增加的本发明的肽(20μM、100μM和200μM)处理反应缓冲液(50mM HEPES，40mM 2-ME，20μM ZnCl₂，pH 7.4)。在阳性对照组(BoNT/CLC)中，使用0.2μM的C型肉毒杆菌神经毒素的轻链(BoNT/C LC)代替本发明的肽，并且在阴性对照组(对照)中，仅用30μg的SH-SY5Y细胞裂解物处理样品。使各混合物在37℃反应4小时。使用突触融合蛋白1A抗体(Synaptic Systems，德国)对反应混合物进行蛋白质印迹。

结果确认，与用BoNT/C LC处理溶液的阳性对照组一样，当用本发明的肽处理溶液时，本发明的肽以浓度依赖的方式使重组突触融合蛋白1A蛋白的条带减少(图4)。

实验例2的总结：本发明的肽使重组突触融合蛋白1A或内源性突触融合蛋白1A分解，因而未形成SNARE复合体。因此，预计因为未进行神经递质的释放，所以本发明的肽具有肌肉松弛作用。

实验例3.SNARE复合体的形成的分析

3-1.使用蛋白质印迹的分析

确认本发明的肽对突触融合蛋白1A的分解作用是否抑制细胞中SNARE复合体的形成。具体而言，在进行蛋白质印迹之后，确定具有预期尺寸的SNARE复合体条带的密度。将SH-SY5Y细胞以3×10⁵个细胞/孔的密度接种在6孔板中。在将细胞培育过夜之后，将培养基更换为无血清DMEM。用浓度逐渐增加的本发明的肽(10μM、50μM和100μM)处理所得培养液。在阳性对照组中，用0.2μM BoNT/C LC处理该溶液。在阴性对照组(对照)中，未处理样品。在样品处理24小时之后，收集细胞，并获得裂解物，然后使用突触融合蛋白1A抗体(SynapticSystems，德国)对其进行蛋白质印迹。SNARE复合体的条带尺寸为75kDa。

基于蛋白质印迹的结果，观察到与用BoNT/C LC处理该溶液的阳性对照组一样，当用本发明的肽处理该溶液时，抑制了SH-SY5Y细胞中SNARE复合体的形成(图5)。考虑到实验例2的结果，预计是由于本发明的肽对突触融合蛋白1A的分解作用，从而抑制了SNARE复合体的形成。

3-2.使用免疫共沉淀的分析(Co-IP)

使用免疫共沉淀，以检测在非变性条件下与另一特定蛋白结合的蛋白。将SH-SY5Y细胞以3×10⁵个细胞/孔的密度接种在6孔板中。在将细胞培育过夜之后，将培养基更换为无血清DMEM。用浓度为50μM的本发明的肽处理所得培养液24小时。在阳性对照组中，用0.2μM的BoNT/C LC处理该溶液。在阴性对照组(对照)中，未处理样品。获得细胞裂解物，并使用SNAP-25抗体(Synaptic Systems，德国)对其进行免疫共沉淀，随后使用SNAP-25抗体和突触融合蛋白1A抗体(Synaptic System，德国)进行蛋白质印迹。

结果确认，通过用本发明的肽进行处理，抑制了SH-SY5Y细胞中SNARE复合体的形成，因此抑制了SNAP-25和突触融合蛋白1A之间的相互作用(图6)。在图6中，“IP input”表示IP之前获得的细胞裂解物中的突触融合蛋白1A蛋白SNAP-25的量，并且“免疫沉淀：抗SNAP-25”表示通过使用SNAP-25抗体或突触融合蛋白1A抗体对所得产物(用SNAP-25抗体进行免疫沉淀后获得的产物)进行处理后获得的结果。即，在“免疫沉淀：抗SNAP-25”中，“SNAP-25”组示出了对通过SNAP-25抗体而沉淀于细胞裂解物中的SNAP-5进行再检测而获得的结果，并且“突触融合蛋白1A”组示出了通过使用突触融合蛋白1A抗体检测沉淀物而获得的结果，其中沉淀物为通过SNAP-25抗体而沉淀于细胞裂解物中的沉淀物。可看出在“突触融合蛋白1A”组中，在样品未经处理的阴性对照组(对照)中，由于突触融合蛋白1A的量得到保持，因此未形成SNARE复合体。此外，可看出在本发明的肽处理组和BoNT/C LC处理组中，由于突触融合蛋白1A的量减少，因此抑制了SNARE复合体的形成。

实施例3的总结：

可看到在用本发明的肽进行处理时，SNARE复合体的形成受到抑制。考虑到实验例2的结果，还可看出通过本发明的肽的处理，突触融合蛋白1A发生分解，从而抑制了SNARE复合体的形成。因此预计由于抑制了SNARE复合体的形成从而未释放神经递质，因而本发明的肽具有肌肉松弛作用。

实验例4.肽对乙酰胆碱分泌的抑制作用的确认

确认包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列的本发明的肽是否具有对乙酰胆碱分泌的抑制作用。在二氧化碳培养箱中接种人骨髓神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞并培育24小时。将培养基更换为无血清培养基，并将细胞培育48小时。用浓度逐渐增加的本发明的肽(1μM、10μM和50μM))处理所得培养液，然后用50nM的破伤风毒素(tetanus)进行处理以作为阳性对照组。此外，用作为促进乙酰胆碱分泌的诱发因素的尼古丁(NIC)+氯化钾(KCl)处理培养液，然后培育30分钟。将用尼古丁和氯化钾处理培养液而并未用本发明的肽或破伤风毒素进行处理的组用作阴性对照组。当完成培育时，分离培养基，并使用胆碱/乙酰胆碱分析试剂盒测量培养基中所含的乙酰胆碱的分泌水平。

如图7所示，经确认相对于正常组(正常对照)中的乙酰胆碱分泌水平，本发明的肽以浓度依赖的方式降低了乙酰胆碱的含量。此外，确认了与用破伤风毒素处理样品的阳性对照组相比，当用浓度为50μM的本发明的肽处理样品时，本发明的肽对乙酰胆碱分泌具有优异的抑制作用。

实验例5.对小鼠脚趾肌肉的松弛作用的确认

将100μg的本发明的肽施用于7周龄雌性C57BL/6小鼠的腓肠肌，然后进行观察。使用趾伸展评分(DAS)评定确定肌肉松弛作用。伸展是指拉伸四肢的动作，并且DAS是通过测定动物触发腓肠肌的惊恐反应的能力的降低程度而获得的。DAS分为评分0至4。在这种情况中，评分越高，表示肌肉松弛作用越高(图8A)。即，评分越高，表示在诸如乙酰胆碱分泌抑制等机制的作用下，惊恐反应受抑制的程度越高。评分为0表示所有五个脚趾分开，评分为1表示小鼠的两个脚趾在伸展中碰在一起(fixed)，评分为2表示一个大脚趾和两个脚趾未分开，评分为3表示一个大脚趾和三个脚趾碰在一起，并且评分4表示所有五个脚趾碰在一起。

如图8b所示，惊恐反应发生于用本发明的肽的处理之前，所有五个脚趾分开，获得的评分为0。另一方面，在注射本发明的肽3小时之后，本发明的肽的肌肉松弛作用使DAS评分提高，并且在注射本发明的肽17小时之后，获得的评分为4。

实验例6.肽和Botox的肌肉松弛作用之间的对比

将100μg的本发明的肽和0.6单位的BTX-A型(BoNT-A)注射至两只7周龄雌性C57BL/6小鼠的腓肠肌，然后进行DAS评定。

如图9和图10所示，与未使用本发明的肽的组相比，施用了本发明的肽的组在施用20小时之后，显示出优异的肌肉松弛作用，并且具有与BoNT-A相似的作用。

实验例4至6的总结：

由于本发明的肽抑制了体外乙酰胆碱分泌，并且显示出与Botox类似的体内肌肉松弛作用，因此本发明的肽可有效用于改善神经肌肉疾病或改善皱纹。

实验例7.肽渗透至细胞或组织中的渗透模式的确认

如下制备用于确认本发明的肽渗透至细胞或组织中的渗透模式的“罗丹明-本发明的肽”缀合物。使用100mM的碳酸氢钠(pH 9.0)制备10mg/mL的本发明的肽溶液。使用二甲基甲酰胺制备1mg/mL的NHS-罗丹明(Thermo Scientific，46406)溶液。将这些溶液混合，使得本发明的肽和NHS-罗丹明缀合物的摩尔比为1:10。在遮光后，在倒置的同时使所得混合物在室温反应1小时。将反应溶液透析，然后进行LC/MS，以确认罗丹明和本发明的肽之间的缀合。

7-1.肽渗透至细胞中的确认

将SH-SY5Y细胞以3×10⁵个细胞/孔的密度接种在6孔板中。在将细胞培育过夜之后，将培养基更换为无血清DMEM。用浓度逐渐增加的标记了荧光物质(即，罗丹明)的本发明的肽处理培养液4小时。在4小时后，用4％的多聚甲醛处理培养液，以固定细胞。随后，使用DAPI染色试剂盒(Invitrogen，美国)对细胞进行核染色。通过使用荧光显微镜观察到肽渗透至细胞中。蓝色表示被DAPI染色的细胞核，而红色表示“罗丹明-本发明的肽”缀合物。

如图11所示，确认了当用本发明的肽处理培养液时，本发明的肽渗透至SH-SY5Y细胞中。

7-2.肽的组织渗透模式的确认

除去7周龄SD大鼠背部的毛发，并将罗丹明和本发明的肽施加至大鼠的背部。1小时后处死大鼠以进行分析。收集皮肤组织的施加部分，并在福尔马林中固定一天。由固定的组织制得石蜡块，并用显微镜用薄片切片机切片，然后使用神经元标志物TrkB Ab(CellSignaling，美国)对其进行免疫组化染色。随后，使用DAPI染色试剂盒(Invitrogen，美国)对细胞进行核染色。使用荧光显微镜观察到肽渗透至细胞中。蓝色表示被DAPI染色的细胞核，红色表示“罗丹明-本发明的肽”缀合物，而绿色表示TrkB(神经纤维标志物)。

由所得结果确认，如图12所示，当用本发明的肽处理皮肤时，本发明的肽渗透至皮肤组织的肌层。此外，还确认了本发明的肽与神经元标志物共定位。当观察图12的放大图像时，确认了本发明的肽和毛囊或皮脂腺周围的神经元共定位(图13和图14)。

实验例7的总结：

本发明的肽可渗透至细胞中，渗透至皮肤组织的肌层，并且与肌层中的神经元标志物共定位。因此，预计本发明的肽会参与SNARE复合体的形成，而SNARE复合体参与神经元的神经递质的传递，由此使本发明的肽显示出肌肉松弛作用。

实验例8.肽的皱纹改善效果(真皮成分的表达增加)的确认

将包含4,000ppm的本发明的肽的脂质体溶液施加至7周龄无毛小鼠的背部，每日施加两次，总共持续12周。用肉眼观察施加部位之后，收集皮肤组织并固定于福尔马林中。由固定的组织制得石蜡块，并用显微镜用薄片切片机切片以制备组织切片。

8-1.皱纹减轻作用的确认

在施加了12周包含本发明的肽的脂质体溶液的小鼠组中，用肉眼观察小鼠并在显微镜下观察。结果观察到与仅施加了脂质体溶液的对照组相比，在所有小鼠中，通过肌肉松弛作用使皱纹显著减少(图15和图16)。

8-2.胶原表达水平的评价

使用Masson’s Trichrome染色试剂盒(Abcam，美国)将组织切片染色，然后使用光学显微镜进行观察。

经确认，与仅施加了脂质体溶液的对照组相比，在持续12周施加了包含本发明的肽的脂质体溶液的小鼠组中，胶原的表达水平提高(图17)。

8-3.弹性蛋白和纤连蛋白的表达水平的评价

使用弹性蛋白抗体和纤连蛋白抗体(Cell signaling，美国)对组织切片进行免疫组化染色，随后使用DAPI染色试剂盒(Invitrogen，美国)进行核染色。使用荧光显微镜观察经过染色的组织切片。

经确认，与仅施加了脂质体溶液的对照组相比，在持续12周施加了包含本发明的肽的脂质体溶液的小鼠组中，弹性蛋白和纤连蛋白的表达水平提高(图18和图19)。

实验例9.肽对皮脂产生的抑制作用的确认

将包含4,000ppm的本发明的肽的脂质体溶液施加至7周龄无毛小鼠的背部，每日施加两次，总共持续12周。用肉眼观察施加部位之后，收集皮肤组织并固定于福尔马林中。由固定的组织制得石蜡块，并用显微镜用薄片切片机切片以制备组织切片。使用作为皮脂产生相关标志物的脂肪酸合酶抗体(Cell Signaling，美国)对组织切片进行免疫组化染色，并使用光学显微镜观察经过染色的组织切片。

经确认，与仅施加了脂质体溶液的对照组相比，在持续12周施加了包含本发明的肽的脂质体溶液的小鼠组中，皮脂腺数量减少，并且皮脂产生相关标志物的表达水平降低(图20)。图20中的左图示出了通过持续12周施加不含肽的脂质体而获得的结果，并且右图示出了通过持续12周施加包含4,000ppm的肽的脂质体而获得的结果。在此方面，可看出由于施加了肽脂质体，呈棕色的免疫染色部分的颜色逐渐变淡，并且免疫染色部分的数量减少。

制备例2.化妆品制剂的制备

2-1.精华液的制备

使用本发明的肽并基于下表1中所列出的含量(重量份)制备精华液。

[表1]

组成	含量(重量份)
		三乙醇胺	0.25
羧乙烯基聚合物	0.22
		甘油	4
丁二醇	2
		本发明的肽	1.5
蜂蜡	0.5
		十八十六醇	1
单硬脂酸甘油酯	1
		角鲨烯	4
纯净水	适量

2-2.爽肤水的制备

如下表2所示，制备包含本发明的肽作为活性成分的爽肤水。

[表2]

原材料	含量(重量份)
		1,3-丁二醇	1.00
乙二胺四乙酸二钠	0.05
		尿囊素	0.10
甘草酸二钾	0.05
		柠檬酸	0.01
柠檬酸钠	0.02
		甘油聚醚-26	1.00
熊果苷	2.00
		PEG-40氢化蓖麻油	1.00
乙醇	30.00
		本发明的肽	1.5
色素	痕量
		增香剂	痕量
纯净水	余量

2-3.滋养霜的制备

基于下表3中所列出的组成来制备包含本发明的肽作为活性成分的滋养霜。

[表3]

原材料	含量(重量份)
		1,3-丁二醇	7.0
甘油	1.0
		D-泛醇	0.1
硅酸镁铝	0.3
		PEG-40硬脂酸酯	1.2
硬脂酸	2.0
		聚山梨醇酯60	1.5
甘油硬脂酸酯，亲脂性	2.0
		倍半油酸山梨坦	1.5
鲸蜡硬脂醇	3.0
		矿物油	4.0
角鲨烯	3.8
		本发明的肽	1.5
植物油	1.8
		二甲聚硅氧烷	0.4
甘草酸二钾	痕量
		尿囊素	痕量
透明质酸钠	痕量
		生育酚乙酸酯	适量
三乙醇胺	适量
		增香剂	适量
纯净水	余量

2-4.洗剂的制备

基于下表4中所列出的组成来制备包含本发明的肽作为活性成分的洗剂。

[表4]

原材料	含量(重量份)
		十八十六醇	1.6
硬脂酸	1.4
		单硬脂酸甘油，亲脂性	1.8
PEG-100硬脂酸酯	2.6
		倍半油酸山梨坦	0.6
角鲨烯	4.8
		澳洲坚果油	2
荷荷巴油	2
		醋酸生育酚	0.4
甲基聚硅氧烷	0.2
		生育酚乙酸酯	0.4
1,3-丁二醇	4
		黄原胶	0.1
甘油	4
		D-泛醇	0.15
本发明的肽	1.0
		尿囊素	0.1
卡波姆(2％水溶液)	4
		三乙醇胺	0.15
乙醇	3
		纯净水	适量

制备例3.药物组合物的制备

3-1.粉剂的制备

本发明的肽 2g

乳糖 1g

将这些成分混合，然后装入密封包装中以制备粉剂。

3-2.片剂的制备

将这些成分混合，然后按常规的片剂制备方法压片，从而制得片剂。

3-3.胶囊剂的制备

将这些成分混合，然后按常规的胶囊剂制备方法将其填充到明胶胶囊中，从而制得胶囊剂。

3-4.丸剂的制备

将这些成分混合，然后按常规方法加工以制备丸剂，从而使这些成分的总含量为4g/丸。

3-5.颗粒剂的制备

将这些成分混合，然后将100mg的30％乙醇加入其中。将所得的混合物在摄氏温度为60℃的条件下干燥以形成颗粒剂，然后将颗粒剂装入包装中。

<110> 2019-DPA-3340

<120> 肌肉松弛用组合物

<130> 2019-OPA-3208/PCT

<150> KR 10-2018-0169495

<151> 2018-12-26

<150> KR 10-2019-0083008

<151> 2019-07-10

<160> 1

<170> KoPatentIn 3.0

<210> 1

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列（Artificial Sequence）

<220>

<223> 具有生理活性的肽

<400> 1

Lys Phe Leu Ile Lys

1 5

Claims

1.一种肽的用途，所述肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其用于制备肌肉松弛用药物组合物。

2.根据权利要求1所述的肽的用途，其中基于100重量％的所述肌肉松弛用药物组合物，所述肽的含量为0.001重量％至60重量％。

3.根据权利要求1所述的肽的用途，其中所述药物组合物用于预防或治疗神经肌肉疾病。

4.根据权利要求3所述的肽的用途，其中所述神经肌肉疾病包括选自由如下疾病组成的组中的任意一种：眼睑抽搐、斜颈、颈肌张力障碍、强直性眼睑痉挛、腋窝多汗症、肛裂、阴道痉挛、失弛缓症、头痛症、特发性和神经源性逼尿肌过度活动症、局灶性肌张力障碍、颞下颌关节疼痛/疾病、糖尿病性神经病、声带功能障碍、斜视、慢性神经病、面部肌肥大、逼尿肌-括约肌功能障碍和良性前列腺增生。

5.根据权利要求4所述的肽的用途，其中所述头痛症为偏头痛。

6.根据权利要求1所述的肽的用途，其中所述肽抑制乙酰胆碱的分泌。

7.一种肽的用途，所述肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其用于制备改善皮肤状况用化妆品组合物。

8.根据权利要求7所述的肽的用途，其中所述化妆品组合物用于改善皮肤皱纹、抑制皮脂产生或改善痤疮。

9.根据权利要求7所述的肽的用途，其中基于100重量％的所述化妆品组合物，所述肽的含量为0.001重量％至60重量％。

10.根据权利要求7所述的肽的用途，其中所述肽提高胶原的表达。