CN112294868B - 用于病毒灭活与卫生消毒、激活机体免疫能力产生的药物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于病毒灭活与卫生消毒、激活机体免疫能力产生的药物，属于医药技术领域。该药物的活性成分是由肉桂及三七茎叶组方而成，该方具有通过初期快速的直接抑杀、后期免疫抗病机制的新型抗病毒作用，该组方中的植物多酚、皂苷通过对膜病毒进行快速包合固化使其失去感染和复制功能，同时又能刺激机体产生免疫反应，达到免疫样治疗效果；该发明的产品还具有较好的广谱抑制/直接杀灭多种病毒的作用，应用该发明的药物，可以做成口服制剂、漱口制剂、外用制剂和雾化剂等临床可用产品，可用于预防、治疗各种病毒性疾病和免疫低下疾病。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种用于病毒灭活与卫生消毒、激活机体免疫能力产生的药物。
背景技术
随着科技的发展，很多疾病已得到一定程度的控制、甚至消灭了，但是病毒的特性使其仍然成为难于预防、治疗的疾病。2003年春的“非典”惊醒了人类，但是不同的HnNm型流感每年都在发生，造成流行和死亡。病毒性疾病是当前远未被满足的临床需求。在与病毒的抗争中，植物药仍然是重要的武器，免疫疗法仍然是根除病毒的主流。
肉桂和三七茎叶是我国常用的药食两用中药材。肉桂始载于《神农本草经》，列为上品，历代重要本草均有记载。传统中医认为，肉桂性辛、甘、热，归肾、脾心、肝经，具有补火助阳、散寒止痛、温通经脉之功效。桂皮为少常用中药，功用同肉桂，唯药力较小，作为香料和调味品广泛应用。此外，肉桂的嫩枝(桂枝)亦供药用。
三七茎叶是中国药典三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的地上部分，传统民间用于清热解毒，1985年卫生行政部门批准其提取物片剂——七叶神安片用于安神镇静，目前扩大至心脑血管疾病。肉桂用于预防和治疗病毒感染的报道较少。中国专利CN1897958B公开了一种从肉桂提取物中获得的天然抗病毒制剂(CEppt)。该专利采用水性磷酸盐缓冲液提取肉桂药材，提取液经KCl或MgCl2盐析获得抗病毒组分，其活性物质分子量大于10Kda，在紫外280nm处的吸光度约为15O.D./mg.cm。该专利没有阐明活性成分的物质基础，化学成分不明确。后也有多个改进型专利和文献报道。三七茎叶也有应用于病毒的报道和专利。但是未检索到肉桂和三七茎叶配伍用于病毒的研究，更没有肉桂多酚、多糖和三七叶皂苷配伍的研究报道。两者分别使用，都有一定的功效，但是肉桂的热性和三七茎叶的凉性都分别使其各自易造成使用者的不适、甚至伤害，更不别说难于长期使用。
注释：
1、肉桂 是指中国药典规定的肉桂Cinnanomum sassia Presl的干燥树皮。是传统的药食两用药材。
2、肉桂提取物 是指上述1所述的肉桂中提取的含有8％-50％的肉桂多酚类化合物及20％以上多糖的有效部位。是国内外常常使用的药食两用提取物，可从市场购买得到。
3、三七茎叶 是指中国药典三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的地上部分。
4、三七茎叶提取物 是指由上述3所述的三七茎叶中提取的哒码烷醇人参二醇型皂苷为主。三七茎叶提取物中的人参皂苷含量在65％-95％，其余为黄酮及多糖等。是国内外常常使用的药食两用提取物，可从市场购买得到。
5、HEP 是指按该技术方案配制的组合物，即药物，含有肉桂和三七茎叶、或含有肉桂提取物和三七茎叶提取物。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种用于病毒灭活与卫生消毒、激活机体免疫能力产生的药物，可用于预防、治疗病毒感染诱发的传染性疾病的发生和发展。该药物将背景技术中提到的两者配伍使用，不仅可以克服各自的缺陷，尚能显著提高功效，减少使用剂量，增加顺应性和安全性。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种用于病毒灭活与卫生消毒、激活机体免疫能力产生的药物，所述药物的活性成分是由肉桂和三七茎叶组成，其中，肉桂的重量百分比为10％-90％，三七茎叶的重量百分比为90％-10％，总计100％。
进一步，优选的是，所述药物的活性成分是由肉桂提取物和三七茎叶提取物组成；其中，肉桂提取物的重量百分比为10％-90％，三七茎叶提取物的重量百分比为90％-10％，总计100％；
所述的肉桂提取物中肉桂多酚含量为18％-50％，，其余成分为多糖等；三七茎叶提取物中三七叶皂苷含量为65％-95％，其余成分为多糖等。
进一步，优选的是，肉桂提取物中肉桂多酚类含量为20％-40％。
进一步，优选的是，三七茎叶提取物中三七叶皂苷含量为75％-90％。
进一步，优选的是，所述的药物剂型包括口服制剂、漱口制剂、外用制剂和雾化剂。
申请人经过大量基础研究，发明通过使用肉桂或其提取物和三七叶或其提取物通过对膜病毒(H1N1流感病毒、带状疱疹病毒、单纯性疱疹病毒等)进行快速包合固化使其失去感染细胞能力和病毒复制能力，即病毒灭活效应。然而被灭活的病毒的中和抗原在灭活过程中被完整的保留下来，它达到了一种非常有效的直接快速灭活病毒的效果，并能有效地刺激机体免疫系统产生免疫反应，达到免疫样治疗效果。肉桂和三七茎叶两个药材或其提取物、两种作用途径很好的在抗病毒上起到协同增效的作用。
从中医临床使用角度和真实世界使用情况看，肉桂属于热性，易上火，不能长期使用；而三七茎叶属于寒性，尤其是对胃寒的人群，也不能使用。我们研究发现，两者一个属热、一个属寒，且对病毒都有较好的抑杀作用，从整体上两者在热寒方面互相平衡、在抗病毒上互补，是很巧妙、很好的组合物。
研究显示，本发明组合物是一种广谱灭活病毒、以及激活机体产生免疫力的广谱抗病毒药物，其抗病毒范围涉及单纯疱疹、带状疱疹、感冒病毒、流感病毒、猪流感、禽流感以及HxNy型病毒和HIV、HPV、塞卡病毒、埃博拉病毒等。
且三七叶皂苷的皂苷特性，从制剂学上更好的促进肉桂多酚、多糖的制剂学改善和生物学提高。使用有效部位，有利于制剂开发，有利于制备出使用更方便、顺应性更好的产品。
科学研究和试验证实本发明药物中活性成分的口服剂量为30mg/d-500mg/d、口含剂量为10mg/d-160mg/d、皮肤给药剂量为5mg/d-100mg/d较好。
本发明药物可以做成口服制剂、漱口制剂、外用制剂等临床可接受的产品。还可以用于医疗器械、口罩中。
本发明与现有技术相比，其有益效果为：
(1)本发明方中肉桂多酚、三七叶皂苷等成分具有较好的广谱抑制/直接杀灭病毒的作用；肉桂多酚、多糖和三七叶皂苷等成分通过对膜病毒进行快速包合固化使其失去感染和复制功能，然而又能刺激机体产生免疫反应，达到免疫样治疗效果。两个药材或其提取物、两种作用途径很好的在抗病毒上起到协同增效的作用。
(2)肉桂是大热药物，不宜多吃、长期吃。配伍三七茎叶这个凉性药物后，不仅提高疗效，而且很好的减轻了肉桂太热易燥、易上火的不良反应。两者配伍，增加了使用顺应性，尤其对易上火的人群更具优势。
附图说明
图1为不同组合的提取物对H1N1病毒小鼠攻毒感染的保护作用；
图2为小鼠鼻腔感染H1N1病毒后第三天和第二十八天后肺组织病毒载毒量分析；
图3为小鼠鼻腔感染H1N1病毒后第二十八天后抗血凝素血清滴度分析；
图4为肉桂多酚/三七叶皂苷组合物(HEP)对H1N1流感病毒诱发的溶血反应的抑制作用；其中，第一组实心填柱(Virus+)，为加入病毒对照；空白填(V iru-)柱为加入PBS对照。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用材料或设备未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。
实施例1
处方(1000剂)：
肉桂 3000g
三七茎叶 4000g
两者置于50L的罐里，加饮用水40L，加热回流1h，滤出罐内提取液；再同样处理三次，合并回提取液。这可作为流感期1000个流感患者一次服用量。本品可刺激机体产生对感染流感病毒的免疫能力，有利于患者康复。
实施例2
处方(1000剂)：
肉桂 4500g
三七茎叶 500g
两者置于50L的罐里，加饮用水30L，加热回流1h，滤出回流液；再同样处理三次，合并回流液。这可作为H1N9病毒感1000个患者一次服用量。本品可刺激机体产生对H1N1病毒的免疫能力，有利于患者康复。
实施例3
处方(1000剂)：
肉桂 400g
三七茎叶 3600g
两者置于50L的罐里，加饮用水35L，加热回流1h，滤出回流液；再同样处理三次，合并回流液。这可作为流感期1000个咽喉发炎的流感患者一次服用量。本品可刺激机体产生对流感病毒的免疫能力，且较好的消炎利嗓，有利于患者康复。
实施例4
处方(1000剂)：
肉桂提取物 300g(肉桂多酚含量为18％-50％)
三七茎叶提取物 200g(三七叶皂苷含量为65％-95％)
将处方量的肉桂提取物和三七茎叶提取物置5L的混合器里充分混匀，再加入药用淀粉1000g、微晶纤维素500g、羧甲基纤维素钠20g、硬脂酸镁5g，用50％酒精适量作润湿剂制备软材、制粒、干燥，以每片0.5g规格压片，可得4000片，每次2-4片服用。本品可刺激机体产生对感染流感病毒的免疫能力，有利于流感患者康复。
实施例5
处方(1000剂)：
肉桂提取物 360g(肉桂多酚含量为18％)
三七茎叶提取物 40g(三七叶皂苷含量为65％)
将处方量的肉桂提取物和三七茎叶提取物置5L的混合器里充分混匀，再加入药用淀粉1000g、微晶纤维素500g、糊精100g、羧甲基纤维素钠20g、硬脂酸镁5g，用体积浓度为50％的酒精适量作润湿剂制备软材、制粒、干燥，以每片1g规格压片，可得2000片，每次1-2片服用。本品可刺激机体产生对H1N5流感病毒的免疫能力，有利于患者康复。
实施例6
处方(1000剂)：
肉桂提取物 30g(肉桂多酚含量为50％)
三七茎叶提取物 270g(三七叶皂苷含量为95％)
将处方量的肉桂提取物和三七茎叶提取物5L的混合器里充分混匀，再加入药用淀粉300g、微晶纤维素20g、糊精10g、可溶性淀粉10g、羧甲基纤维素钠5g、硬脂酸镁1g，用50％酒精适量作润湿剂制备软材、制粒、干燥，以每片0.67g规格压片，可得1000片，每次1片服用。本品可刺激机体产生对感染流感病毒的免疫能力，消炎润喉，有利于流感患者康复。
实施例7
处方(1000剂)：
肉桂提取物 160g(肉桂多酚含量为20％)
三七茎叶提取物 80g(三七叶皂苷含量为75％)
在20L的配液罐里，加入10L去离子水，在搅拌条件下将处方量的肉桂提取物和三七茎叶提取物依次徐徐加入，并搅拌至溶解。过滤，取滤液分装成10ml一瓶(喷雾瓶)，得1000瓶规格为10ml的产品。置避光室温条件下保管。使用时涂抹(或喷)在皮肤病灶上，阴干即可。本品可用于单纯疱疹、带状疱疹等皮肤病。
实施例8
处方(1000剂)：
肉桂提取物 160g(肉桂多酚含量为40％)
三七茎叶提取物 80g(三七叶皂苷含量为90％)
在20L的配液罐里，加入10L去离子水，在搅拌条件下将处方量的肉桂提取物和三七茎叶提取物依次徐徐加入，并搅拌至溶解。过滤，取滤液分装成10ml一瓶(喷雾瓶)，得1000瓶规格为10ml的产品。置避光室温条件下保管。使用时涂抹(或喷)在皮肤病灶上，阴干即可。本品可用于单纯疱疹、带状疱疹等皮肤病。
实施例9
处方(1000剂)：
肉桂提取物 190g(肉桂多酚含量为30％)
三七茎叶提取物 120g(三七叶皂苷含量为80％)
在20L的配液罐里，加入15L去离子水，在搅拌条件下将处方量的肉桂提取物、三七茎叶提取物和研细的0.3g薄荷醇依次徐徐加入，并搅拌至溶解。过滤，取滤液分装成15mL一瓶，得1000瓶规格为15mL的产品。置避光室温条件下保管。使用时每次一瓶，含漱10分钟以上。本品可用于单纯疱疹引起的口腔疾病、也可预防感冒、流感，对口腔炎症性疼痛、溃疡也有效。
本发明技术方案所选用的肉桂和三七叶，一个是树皮、一个是茎叶，都存在体积较大，直接做成现代制剂较难。两者所需有效部位的含量均在10％左右，但植物因产地、采收季节等不同，其生物质含量是有较大差异的。直接做成制剂有效成分含量差异较大，也影响药效。故，用它们的提取物肉桂多酚和三七叶皂苷，则质量稳定、药效稳定，使用顺应性更好。
本发明肉桂提取物采用市售产品或自制产品皆可，肉桂多酚含量通常在10％-50％，从制剂学和药效学筛选和综合考虑，肉桂多酚类含量优选为18％-50％，较佳的含量为20％-40％。其中，现有的市售肉桂多酚为肉桂的提取物，非纯品。
三七叶含哒码烷型人参二醇皂苷在8％-12％，鲜品含量较高，随着放置时间增加，皂苷含量下降。因三七是人工种植的品种，且对生境有较严格的要求，因此，三七叶的质量相对比较稳定。一般市售的三七叶皂苷，其皂苷含量在65％-95％，对于本技术方案使用较佳的含量为75％-90％。其中，市售的三七叶皂苷为三七的提取物，非纯品。
实施例10：肉桂和三七茎叶组合物临床试用流感
方案设计：
试验试药：
1、A-肉桂组
2、B-三七茎叶组
3、C-实施例1制得的样品
4、D-空白对照组 注意休息、多饮水
肉桂组和三七茎叶组的试验样品均采用与实施例1的方式制取。1000剂的药材用量分别均为7000g，与实施例1等量。
试验周期7天 根据流感临床试验确定。
参试人数：选择流感流行期，已经得流感的成年人自愿参加试验的人员1600人。结果如表1：
表1
注：初始收录人数人数a，最终收录统计人数b，反映有上火(咽喉疼等)c，反映胃不舒服(胃寒)d，试验后流感3天好转e，试验后感冒5天好转f，试验后感冒10天好转g，试验后感冒症状持续加重h，试验后感冒症状明显减轻i，10天总有效率％。
从上表可见，C组-即本发明组合物的效果显著，是三个试验组中较好的，也体现复方的优势。从安全性和五天好转率上效果更好。
实施例11：肉桂和三七茎叶组合物临床试用于单纯性疱疹
方案设计：
试验试药：
1、A-肉桂提取物组
2、B-三七茎叶提取物组
3、C-实施例7制得的样品
4、D-阳性对照药 利巴韦林液体制剂
A、B两组的试验样品与实施例7相同，A组采用240g肉桂提取物，B组采用240g三七茎叶提取物，与实施例7等量，其余制备方法与实施例7均相同
试验周期5天 根据单纯疱疹临床试验确定。
参试人数：选择生殖器或口腔单纯疱疹成年患者，自愿参加试验的患者160人。结果如表2：
表2
注：初始收录人数人数a，最终收录统计人数b，试验1天后症状好转c，试验2天后症状好转d，试验3天后好转e，试验后5天好转f，试验后症状持续加重g，试验后症状明显减轻h，5天总有效率％。
从上表可见，C组-即本发明组合物的效果显著，是三个试验组中较好的，不仅见效快(1天有效率最高)、总有效率也最高。也体现复方的优势、及意想不到的效果——在快速见效方面，组合物的结果远远高于其他各组，意想不到地体现了组合物的优势和临床价值。
实施例12：肉桂和三七茎叶组合物临床试用带状疱疹
方案设计：
试验试药：
1、A-肉桂提取物组
2、B-三七茎叶提取物组
3、C-实施例7制得的样品
4、D-阳性对照药 利巴韦林液体制剂
A、B两组的试验样品与实施例7相同，A组采用240g肉桂提取物，B组采用240g三七茎叶提取物，与实施例7等量，其余制备方法与实施例7均相同
试验周期15天 根据单纯疱疹临床试验确定。
参试人数：选择带状疱疹成年患者，自愿参加试验的患者180人。结果如表3：
表3
注：初始收录人数人数a，最终收录统计人数b，试验1天后症状好转c，试验1天后疼痛症状明显好转d，试验3天后好转e，试验3天后疼痛症状显著好转f，试验15天后症状明显好转总数g，试验15天后疼痛显著减轻总数h，15天总有效率％i，15天疼痛改善总有效率j。
从上表可见，C组-即本发明组合物在治疗带状疱疹上效果显著，是三个试验组中最好的，不仅见效快(前3天有效率最高、尤其是止疼效果更显著)、总有效率和止疼最高。也体现组合物的优势、及意想不到的效果——在前三天快速见效方面，组合物的结果远远高于其他各组(总有效率70.73％、总止痛率48.78％)，意想不到地体现了组合物的优势和临床价值。
实施例13：肉桂和三七茎叶组合物临床试用于牙龈炎及预防感冒
方案设计：
试验试药：
1、A-肉桂提取物组
2、B-三七茎叶提取物组
3、C-实施例9制得的样品
4、D-安慰剂对照组 太乙薄荷饮用水
A、B两组的试验样品与实施例9相同，A组采用310g肉桂提取物，B组采用310g三七茎叶提取物，与实施例9等量，其余制备方法与实施例9均相同
试验时间选在感冒易发的季节2017年2月20号-4月20号，共59天。
试人数：选择有牙龈炎、并易感冒的成年患者，自愿参加试验的患者1600人。结果如表4：
表4
注：初始收录人数人数a，最终收录统计人数b，试验30天后没有牙疼发生c，试验30天后没有发生感冒d，试验59天没有牙疼发生e，试验59天没有发生感冒f，实验结束时没有牙疼发生率％g，试验结束时没有发生感冒率％h。
从上表可见，C组-即本发明组合物在牙痛和预防感冒方面效果显著，是三个试验组中较好的，体现复方的优势、及意想不到的效果——组合物的综合结果高于其他各组，意想不到地体现了组合物的优势和临床价值。
实施例14：肉桂和三七茎叶组合物抗病毒活性测试
研究目的：使用市售肉桂提取物(肉桂多酚含量为25.4％)与三七茎叶提取物(三七叶皂苷含量为85.6％)。用体外细胞感染实验和动物病毒攻毒感染实验证实HEP、PNS各自的抗病毒药效以及二者组合后的抗病毒药效活性。
实验分组：
A组：肉桂提取物组
B组：三七茎叶提取物组
C组：肉桂提取物/三七茎叶提取物组合物组(HEP)
D组：对照无菌水溶液组
测试样品制备
A组储液：市售肉桂提取物用除菌双蒸水至8mg/ml并于80℃水浴中加热15分钟溶解。溶液于2000RPM离心2分钟后取上清储存于4℃作为肉桂提取物储液；
B组储液：市售三七茎叶提取物用无菌水溶至8mg/ml并于80℃水浴中加热15分钟溶解。溶液于2000RPM离心2分钟后取上清储存于4℃作为三七茎叶提取物储液；
C组储液：将配制的A储液与B储液按体积比(1：1)比例混匀，得到组合物储液。
D组储液：除菌双蒸水。
一、抗多种包膜类病毒活性体外实验(CE50)
实验目的：用体外实验证明C组对多种病毒有非常卓越的病毒灭活作用。
在EC50测定实验中，各组供试品和参照化合物以3倍倍比稀释测试8个浓度点，每个浓度测试双复孔。最高测试浓度为1000μg/ml。细胞培养基中的DMSO(二甲亚砜)最终浓度为0.5％。参照化合物为对应病毒株的标准抑制物。
表5.抗病毒实验测试化合物列表
病毒：本研究选用了4个不同类型的病毒测定肉桂提取物和三七茎叶提取物的抗病毒活性(表6)，其中副粘液病毒选用了两个不同株病毒RSV B9320和RSV Along。
表6.测试病毒列表
细胞：Hep-2细胞、Vero E6细胞、MRC5细胞和MT-4细胞。
试剂：细胞活力检测试剂CellTiter-Glo(Promega)、细胞活力检测试剂C CK-8(天津百萤)。
实验方法
所测试的4个病毒中，其中3个是以病毒的细胞病变效应(CPE)实验测定样品的抗病毒活性。HCMV实验则采用荧光衰减实验测定。病毒实验方法总结于表7。
表7.抗病毒实验方法列表
RSV Along/B9320、HSV-1病毒致细胞病变实验：细胞以一定密度(表7)接种到微孔板并于37℃，5％CO2培养箱中培养过夜。第二天，不同浓度的化合物和病毒(表7)的预混液加入细胞板中于37℃，5％CO2培养3-5天至病毒对照孔中的细胞病变完全。细胞活性随后使用CCK8细胞活力检测试剂盒按照检测试剂的说明进行检测。化合物不同浓度下的抗病毒活性由对病毒引起的细胞病变效应的抑制作用来决定。所有数据经空白感染对照校准。EC50由Gra phPad Prism软件进行分析计算得出。
HIV-1病毒致细胞病变实验：测试化合物和参照化合物倍比稀释后与病毒(表7)混合，随后化合物和病毒的混合液与MT-4细胞加入微孔板并于33℃或37℃，5％CO2培养箱中培养2-6天至病毒对照孔中的细胞病变完全。细胞活性随后使用CCK8或CellTiter Glo细胞活力检测试剂盒按照检测试剂的说明进行检测。化合物在不同浓度下的抗病毒活性由对病毒引起的细胞病变效应的抑制作用来决定。EC50由GraphPad Prism软件进行分析计算。
HCMV荧光衰减实验：本实验中使用的人巨细胞病毒(HCMV)通过基因重组插入报告基因EGFP，病毒的复制由GFP的表达水平来反映。化合物的抗病毒活性可以通过化合物对感染细胞中的GFP的表达水平的影响来测定。MRC5细胞以20,000细胞/孔的密度种入96孔板，随后置于37℃，5％CO2培养箱中培养过夜。第二天，不同浓度的化合物和病毒的预混液加入细胞板中并于37℃,5％CO2培养4天。GFP的荧光强度由Acumen eX3(TTP LabTech)检测。化合物的抗病毒活性可以通过化合物对感染细胞中的GFP的表达水平的影响来测定。EC50由GraphPad Prism软件进行分析计算得出。
数据分析：
因为肉桂提取物和三七茎叶提取物的颜色在450nm有吸光度。为了消除化合物颜色对CCK8检测的影响，实验测试板在加入CCK8之前检测了本底的吸光度值。
原始数据＝加入CCK8后的吸光度值－加入CCK8前的吸光度值
化合物的抗病毒活性表示为抑制率(％)，计算公式如下：
抑制率(％)＝(Raw datacpd-AverageVC)/(AverageCC-AverageVC)*100
Raw datacpd表示化合物样品孔的信号值，AverageVC、AverageCC分别表示病毒对照、细胞对照的平均信号值。
化合物的EC50值由GraphPad Prism软件进行数据处理得出。
实验结果
本实验所有抗病毒活性实验的参照化合物的抗病毒活性与预期符合，证明本实验结果可靠。各测试组样品的抗病毒活性结果见表8。
表8.抗病毒活性列表
注：C组CE50值为A与B两组物质含量综合值。
讨论：
1、本实验抗病毒活性实验的参照化合物的抗病毒活性与预期符合，证明本实验结果可靠。
2、之前有报道通过特殊的提取方法所制备的肉桂的水提物对多种包膜病毒有强烈的抑制作用，这一结论在之后的跟踪研究中得以证实。不过后续的研究在比较了不同制备工艺的所得的肉桂提取物抗病毒活性，发现通过不同制备工艺获取的市售肉桂提取物不具有抗病毒作用。本研究重复了市售肉桂提取物的抗病毒作用，发现市售肉桂提取物也具有一定的抗病毒活性。三七叶皂苷是三七茎叶的主要药效活性成分，主要是哒码烷型人参二醇皂苷。近期有研究发现三七叶皂苷不但具有改善心血管系统的药效，还具有抗肿瘤和抗多种病毒(法式囊病毒、禽流感病毒和新城疫病毒病毒)作用。本研究证明三七叶皂苷各类包膜病毒具有一定的灭活作用，然而当与肉桂提取物组合后其抗病毒的活性有意想不到的提高。因此提示肉桂提取物与三七茎叶提取物组合可用于抗多种病毒的制剂、卫生用品的制作。
二、对H5N1流感病毒的体外抑制作用实验
材料：禽流感病毒毒株为某重大动物疾病中心保存的H5亚型禽流感病毒毒株。
表9
方法：采用克利恩–德福雷斯特悬浮试验进行病毒灭杀测定。
分别取未经稀释的禽流感病毒悬液0.1ml(5×107EID/ml)和各试验浓度的样品(表9)0.9ml混合，在室温条件下作用10分钟；取上述混合液0.2ml加入到1.8ml中和液(1％吐温/生理盐水、v/v)中；中和后的混合液用灭菌生理盐水做10倍稀释至10-8，之后将各组稀释液接种至十日龄鸡胚尿囊腔，每个稀释度接种四个鸡胚(0.2ml/胚)；将接种的鸡胚植37℃孵育，抛弃24小时内死亡的鸡胚，及时收集24小时后死亡的鸡胚并取尿囊液做血凝试验；血凝试验阳性为鸡胚感染，表明仍然有活病毒存在。根据鸡胚的感染结果，依以下公式计算个试验组和对照组鸡胚的阳性率、样品病毒EID50含量及病毒的灭杀率。
阳性率＝感染鸡胚数/接种鸡胚数
样品含EID50量的对数＝L-d(S-0.5)
L为最低稀释倍数的对数，d为稀释度间差的对数，S为各稀释列的阳性率之和
病毒灭活率＝(对照样品含EID50量-试验样品含EID50量)/对照样品含EID50量×100％
结果：
不同浓度A样品对禽流感病毒的杀灭试验：浓度为分别1000、200、50、和10ug的样品A与禽流感病毒作用5分钟后进行悬浮灭杀试验，病毒灭杀率分别为100％、99％、90％、80％。
不同浓度B样品对禽流感病毒的杀灭试验：浓度为分别1000、200、50、和10ug的样品A与禽流感病毒作用5分钟后进行悬浮灭杀试验，病毒灭杀率分别为100％、99％、90％、80％。
不同浓度C样品对禽流感病毒的杀灭试验：浓度为分别1000、200、50、和10ug的样品A与禽流感病毒作用5分钟后进行悬浮灭杀试验，病毒灭杀率分别为100％、100％、100％、100％。
对照样品百毒杀S对禽流感病毒的杀灭试验：对照样品百毒杀S在1/300、，1/600、1/1200和1/2400等个稀释度时与病毒作用5分钟后，病毒灭杀率均为100％。
因此，A、B、C三种制剂在高浓度(1000ug/ml)时均有对禽流感100％的灭杀作用，但在低浓度时(8ug/ml)只有C组合制剂仍然保持对禽流感病毒100％的灭杀作用。
实施例15：组合物对H1N1流感病毒的体内抑制作用实验
实验目的：用动物感染模型证明肉桂提取物/三七茎叶提取物组合有针对H1N1流感病毒强烈的灭活作用，并激发动物产生相应的免疫保护应答反应。
实验分组：
A组：肉桂提取物组
B组：三七茎叶提取物组
C组：肉桂提取物和三七茎叶提取物组合物组
D组：对照无菌磷酸缓冲液组
E组：病毒模型组
实验病毒株：
流感病毒为小鼠适应株H1N1(A/Puerto Rico/8/1934)。病毒通过狗肾细胞进行繁殖。病毒株在-70℃储存前测得其HA滴定度(HAU)为256；实验中使用的病毒滴度为250HAU。
实验动物与分组：使用28-30天年龄的小鼠。
A组：肉桂提取物组(50ug肉桂提取物/250HAU病毒/只)，十二只小鼠；
B组：三七茎叶提取物组(50ug三七茎叶提取物/250HAU病毒/只)，十二只小鼠；
C组：组合物组(50ug肉桂提取物/50ug三七茎叶提取物/250HAU病毒/只)，十二只小鼠；
D组：病毒模型组(250HAU/只)，十二只小鼠。
E组：对照无菌磷酸缓冲液组，八只小鼠
实验方法
按以上指定剂量的药物与病毒量(50ug的提取物/250HAU/只)用适量体积的PBS调整至总体积50ul,在室温温育5-10分钟。取28-30天年龄的小鼠于鼻黏膜点种50ul通过上述处理获得的病毒/药物样品。PBS做为空白对照(E组)。观察：1)小鼠28天存活水平；2)观察动物感染后体重增长与鼻腔表皮毛发变化；3)检测动物攻毒感染后第三天(D3)和第二十八天(D28)小鼠肺组织病毒含量；4)检测动物感染后D3和D28小鼠血清中抗血液凝集素(HI)滴度水平。
结果：
1.小鼠28天存活水平：如图1所示，病毒模型组小鼠(D组)在攻毒后第三天出现死亡，攻毒后一周内死亡过半，四周存活率为33.3％(12只小鼠共计死亡8只)。肉桂提取物组(A组)仅在攻毒后第三天死亡两只，四周存活率达到83.3％，表明肉桂提取物对小鼠有显著保护性效果。三七茎叶提取物组(B组)在攻毒后第三天死亡四小鼠只，存活率为66.6％，表明皂苷对小鼠有一定保护性效果。而肉桂提取物和三七茎叶提取物组合物组(C组)对小鼠显现出100％的保护作用，表明肉桂提取物与三七茎叶提取物组合对H1N1病毒预处理已导致流感病毒完全灭活，失去感染小鼠的能力。
2.动物感染后鼻腔表皮毛发变化：小鼠接受H1N1攻毒后，模型组体重急剧下降，并在第3天出现死亡，至第7天只有4/12只存活(见表10)。存活后小鼠体重逐渐恢复，说明已渡过病毒攻击危险期，但观察到第15天其鼻毛出现严重的脱离现象。而C组药物组动物得到100％保护，且该组小鼠均未出现鼻毛脱落的现象。A组和B组动物在攻毒后体重增长有减弱，但一周后迅速回到增长速率，也没有出现典型的鼻毛脱落现象。
表10
3.小鼠肺部病毒载量检测：选取C、D、E三组动物的肺组织材料进行载毒量分析。感染动物后第3天和实验终点(28天)。获取鼠肺，研磨制备匀浆后利用TRNzol A+试剂提取总RNA。RNA样品浓度利用紫外分光光度计进行定量测定。每100ng总RNA逆转录为cDNA并进行RT-PCR定量检测病毒载量。检测引物针对甲型流感病毒M基因编码区进行设定，序列如下：
FluA-F：gaccaatcctgtcacctctgac(SEQ ID NO.1)；
FluA-R：agggcattttggacaaagcgtcta(SEQ ID NO.2)；
Flu-probe：(FAM)-tgcagtcctcgctcactgggcacg-(BHQ1)(SEQ ID NO.3)；
RT-PCR的反应程序和体系如下：
1)用Bio-Rad的iScriptTMcDNA Synthesis Kit(Bio-Rad Hercules,CA)把100ng总RNA逆转录为cDNA，总反应体积为20ul，46.0℃温育20分钟，95℃热变性1分钟。
2)RT-PCR反应在7500 fast Real-Time PCR仪(Applied Biosystem,FosterCity,CA)内进行。用Bio-Rad的SsoFastTMEvaSupermixes(Bio-Rad Hercules,CA)，5ul SsoFast EvaGreen supermix,1ul forwar d primer(5uM),1ul reverse primer(5uM),2ul三蒸水,1ul cDNA，总反应体积为10ul。
3)所使用的荧光才料为SsoFast Evagreen Super mix(Bio-Rad,Hercu les,CA)荧光染料。
4)温控周期循环设置：42.0℃温育5分钟；95℃热变性10秒；之后进行40个循环的温控：95℃ 5秒，随即进行60℃ 40秒反应。
5)根据DAN标样与内设软件制作DNA标准曲线，计算扩增得到的DNA相对含量，以定量病毒拷贝数。
表11
如表11和图2所示，对攻毒后3天的动物肺组织进行病毒载毒量分析发现，除了对照无菌磷酸缓冲液组(E组)外，各组小鼠肺部病毒载量均达到107/50mg，表明各组动物在鼻黏膜攻毒后病毒进入血液达到小鼠的敏感器官肺部组织，动物感染实验成功，结果可靠。在实验终点28天对所有攻毒动物(包括模型组存活的三只动物)的肺组织进行载毒量分析，没有在肺组织发现有残留的病毒存在。表明病毒在体内已被小鼠免疫系统有效清除。
4.小鼠血清中抗红细胞凝集素(HI)水平：选取C、D、E三组动物的肺组织材料进行抗红细胞凝集素滴度分析。通过HA-HI实验，可用已知病毒来检查被检血清中的相应抗体滴定抗体的含量，我们使用了该测定法确定动物接受点鼻攻毒后抗H1N1病毒抗体产生情况。实验终点(28天)眼球采血收集小鼠血清，根据国家流感中心标准操作规程进行红细胞凝集抑制试验(HI)检测小鼠血清中针对H1N1病毒的血凝抑制效价(HI titer)。血凝抑制结果≧20为阳性有效HI效价。小鼠感染28天后，分别对攻毒模型组(D组)，药物保护组(C组)和正常对照组(E组)小鼠血清进行抗凝集素效价测定发现，如表12和图3所示，模型组小鼠血清中分别可检测出高滴度(128H1N1)的血凝抑制效价，表明病毒对小鼠的攻击使存活下来的小鼠免疫系统产生了相应抗体和保护性。相对应的药物组(C组)也检测出同样水平(128H1N1)的血凝抑制效价，提示病毒+药物也对小鼠免疫系统产生了抗病毒免疫保护效应。模型组存活动物应该是天然免疫，而C组动物则是药物处理灭活了病毒，并激活了小鼠体内的免疫系统。因此肉桂提取物/三七茎叶提取物组合(HEP)与流感病毒的接触使病毒失去攻击活性，但完整的保留了病毒的中和免疫原性。
表12
| 感染28天后抗HA滴度 | N | |
| C组 | 129-/+10 | 3 |
| D组 | 130-/+15 | 3 |
| E组 | 0 | 3 |
实施例16：肉桂提取物/三七茎叶提取物组合物对H1N1流感病毒的体外抑制作用实验
实验目的：使用兔血流感病毒诱导溶血抑制试验模型证明，肉桂提取物/三七茎叶提取物组合物(实施例14中的C组合)针对H1N1流感病毒强烈的灭活作用剂量与灭活病毒所需的最短时间。
测定方法：
抽取新鲜兔血适量，用磷酸缓冲液(PBS)洗涤三次。用PBS配制成3％(V/W)的红细胞悬液。
实验设计分四组：A组(病毒对照)；B组(缓冲液对照)；C组(50ug低浓度药物组)；D组(100ug高浓度药物对照)。使用1.5ml离心管，于预定的管中按表13分别加入确定体积的PBS或HEP药物储液。
表13
于A组、C组和D组中各加入50ul病毒液(250HAU/毒株H1N1A/Pue rto Rico/8/1934)，B组中加入100ul PBS。
轻度混匀后反应管置于室温开始计时。对药物处理组(C组和D组)按以下温育时间顺序(1、5、10、30分钟)移除20ul的反应物至80ul的红细胞悬液中，混匀、保温20分钟至凝集反应结束。而对照组A与B则仅取20ul的5分钟时间点样品与红细胞悬液混合。
将反应管移至37℃温育120分钟至溶血反应结束。1000RPM离心5分钟，取上清测定450nm光密度。数据处理：以A组样品的光密度值为100％溶血度，处理各组的样品的光密度在450nm的值，得到相对溶血率(相对溶血率＝X/A450nm×100％)。
红细胞溶血实验显示：当病毒悬液在与红细胞接触前若与HEP(肉桂提取物/三七茎叶提取物组合)做预保温处理，则HEP两个剂量组(50ug/100ug)均可以在短时间内阻断H1N1流感病毒导致的红细胞凝集与溶血现象(图4)，表明HEP对H1N1流感病毒具有快速的体外抑制作用。
总结：以上数据证明了肉桂提取物与三七茎叶提取物组合对H1N1流感病毒有强大的灭活作用，而且保留了病毒表面抗原蛋白的免疫原性，它激发动物产生了强大的免疫反应。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
序列表
<110> 昆明扬添生物科技有限公司
<120> 一种用于病毒灭活与卫生消毒、激活机体免疫能力产生的药物
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列()
<400> 1
gaccaatcct gtcacctctg ac 22
<210> 2
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列()
<400> 2
agggcatttt ggacaaagcg tcta 24
<210> 3
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列()
<400> 3
tgcagtcctc gctcactggg cacg 24
Claims (5)
1.一种用于抗病毒的药物，其特征在于：所述药物的活性成分由肉桂提取物和三七茎叶提取物组成；其中，肉桂提取物的重量百分比为10%-90%，三七茎叶提取物的重量百分比为90%-10%，总计100%；
所述的肉桂提取物中肉桂多酚含量为18%-50%；三七茎叶提取物中三七叶皂苷含量为65%-95%；
所述的抗病毒为单纯疱疹、带状疱疹、感冒病毒和HIV；
所述药物的剂型包括口服制剂或外用制剂。
2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述的肉桂提取物中肉桂多酚含量为20%-40%。
3.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述的三七茎叶提取物中三七叶皂苷含量为75%-90%。
4.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述的感冒病毒为流感病毒。
5.根据权利要求1所述的药物，其特征在于：所述的外用制剂是漱口制剂或雾化剂。
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|---|---|---|---|---|
| CN101380472A (zh) * | 2008-10-27 | 2009-03-11 | 秦枫 | 一种三七茎叶总皂苷在制备免疫佐剂的应用 |
| CN105506183A (zh) * | 2016-01-21 | 2016-04-20 | 长江大学 | 一种筛选抗病毒植物乙醇提取物的方法 |
| CN106606539A (zh) * | 2016-12-16 | 2017-05-03 | 昆药集团股份有限公司 | 一种肉桂多酚组合物的应用 |
| CN106957826A (zh) * | 2017-03-14 | 2017-07-18 | 昆药集团股份有限公司 | 一种病毒灭活剂及其应用 |
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