CN112135613A - 激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法 - Google Patents

激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112135613A
CN112135613A CN201980032475.XA CN201980032475A CN112135613A CN 112135613 A CN112135613 A CN 112135613A CN 201980032475 A CN201980032475 A CN 201980032475A CN 112135613 A CN112135613 A CN 112135613A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
beta
methyl
group
nmr
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980032475.XA
Other languages
English (en)
Inventor
K·库玛
P·王
R·桑切斯
A·G·奥卡尼亚
A·斯图尔特
R·戴维塔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Icahn School of Medicine at Mount Sinai
Original Assignee
Icahn School of Medicine at Mount Sinai
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Icahn School of Medicine at Mount Sinai filed Critical Icahn School of Medicine at Mount Sinai
Publication of CN112135613A publication Critical patent/CN112135613A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本文描述了具有以下结构式(I)的化合物：

Description

激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法
本申请要求2018年3月20日提交的美国临时专利申请序列号62/645,560的优先权权益，该申请特此通过引用整体并入。
本发明是在美国国家卫生研究院(National Institutes of Health)授予的合同号R01 DK105015下通过政府的支持完成的。政府拥有本发明的某些权利。
技术领域
本公开涉及激酶抑制剂化合物和组合物及它们的使用方法。
背景技术
双特异性酪氨酸调节激酶(“DYRK”)属于真核蛋白激酶CMCG家族，包括CDK样激酶(CLK)、糖原合酶激酶3(GSK3)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)。DYRK家族蛋白通过经活化环中保守性酪氨酸残基的自身磷酸化而自我激活，随后仅磷酸化底物的丝氨酸和苏氨酸残基(Lochhead等人,“Activation-LoopAutophosphorylation is Mediated by a Novel Transitional Intermediate Form ofDYRKs,”Cell 121(6):925-936(2005)；Walte等人,“Mechanism of Dual SpecificityKinase Activity of DYRK1A,”FEBS J.280(18):4495-4511(2013)；及Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBS J.278(2):246-256(2011))。DYRK家族有5个亚型，包括1A、1B、2、3和4。其中，DYRK1A是受到最广泛研究的亚型。它泛表达，并已证实在脑发育和功能(Becker等人,“DYRK1A:A Potential Drug Targetfor Multiple Down Syndrome Neuropathologies,”CNS Neurol.Disord.:Drug Targets13(1):26-33(2014))、神经退行性疾病(Wegiel等人,“The Role of DYRK1A inNeurodegenerative Diseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)和Smith等人,“RecentAdvances in the Design,Synthesis,and Biological Evaluation of SelectiveDYRK1A Inhibitors:A New Avenue for a Disease Modifying Treatment ofAlzheimer’s？,”ACS Chem.Neurosci.3(11):857-872(2012))、肿瘤发生、细胞凋亡(Ionescu等人,“DYRK1A Kinase Inhibitors With Emphasis on Cancer,”Mini-Rev.Med.Chem.12(13):1315-1329(2012)和Fernandez-Martinez等人,“DYRK1A:TheDouble-Edged Kinase as a Protagonist in Cell Growth and Tumorigenesis,”Mol.Cell.Oncol.2(1):e970048(2015))，以及人胰岛β细胞增殖(Wang等人,“A High-Throughput Chemical Screen Reveals That Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1AIncreases Human Pancreatic Beta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)；Shen等人,“Inhibition of DYRK1A and GSK3B Induces Humanβ-cellProliferation,”Nat.Commun.6:8372(2015)；Rachdi等人,“Dyrk1A Induces PancreaticβCell Mass Expansion and Improves Glucose Tolerance,”Cell Cycle 13(14):2221-2229(2014)；和Dirice等人,“Inhibition of DYRK1A Stimulates Human Beta-CellProliferation,”Diabetes 65:(6):1660-1671(2016))中起重要作用。
DYRK1A在胎儿、产后以及成人中的表达受调控对于正常的神经元发育和脑功能至关重要。DYRK1A位于人类21号染色体上的唐氏综合征关键区域(Down Syndrome Criticalregion，DSCR)，这是在唐氏综合征(DS)的发病机理中起着重要作用的基因组区域，唐氏综合征(DS)是人类最常见和最经常的遗传病之一(Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBS J.278(2):246-256(2011)和Becker等人,“Structuraland Functional Characteristics of Dyrk,a Novel Subfamily of Protein KinasesWith Dual Specificity,”Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.62:1-17(1999))。在小鼠和果蝇模型中DYRK1A的过表达酷似与DS相关的神经发育异常(Becker等人,“DYRK1A:APotential Drug Target for Multiple Down Syndrome Neuropathologies,”CNSNeurol.Disord.:Drug Targets 13(1):26-33(2014)；Wegiel等人,“The Role of DYRK1Ain Neurodegenerative Diseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)；Park等人,“Functionand Regulation of Dyrk1A:Towards Understanding Down Syndrome,”Cell.Mol.LifeSci.66(20):3235-3240(2009)；以及Ogawa等人,“Development of a Novel SelectiveInhibitor of the Down Syndrome-Related Kinase Dyrk1A,”Nat.Commun.1:ArticleNumber 86(2010))。最新证据还表明DYRK1A与阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease，AD)，路易氏体痴呆(dementia with Lewy bodies)和帕金森氏病(Parkinson’s disease)的τ蛋白功能障碍和τ蛋白病理学有牵连(Wegiel等人,“The Role of DYRK1A inNeurodegenerative Diseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)；Smith等人,“RecentAdvances in the Design,Synthesis,and Biological Evaluation of SelectiveDYRK1A Inhibitors:A New Avenue for a Disease Modifying Treatment ofAlzheimer’s？,”ACS Chem.Neurosci.3(11):857-872(2012)；以及Stotani等人,“DYRK1AInhibition as Potential Treatment for Alzheimer’s Disease,”Future Med.Chem.8(6):681-696(2016))。
据报道，DYRK1A在各种肿瘤(诸如卵巢癌、结肠癌、肺癌和胰腺癌)中过表达，表明了它在肿瘤发生和不受控制的细胞增殖中的作用(Ionescu等人,“DYRK1A KinaseInhibitors With Emphasis on Cancer,”Mini-Rev.Med.Chem.12(13):1315-1329(2012)和Fernandez-Martinez等人,“DYRK1A:The Double-Edged Kinase as a Protagonist inCell Growth and Tumorigenesis,”Mol.Cell.Oncol.2(1):e970048(2015))。抑制DYRK1A会引起成胶质细胞瘤中的EGFR不稳定和EGFR依赖性肿瘤的生长降低(Pozo等人,“Inhibition of DYRK1A Destabilizes EGFR and Reduces EGFR-DependentGlioblastoma Growth,”J.Clin.Invest.123(6):2475-2487(2013))。此外，DYRK1A抑制作用诱导半胱天冬酶-9活化，从而引起特定癌细胞类型发生大量细胞凋亡(Seifert等人,“DYRK1A Phosphorylates Caspase 9at an Inhibitory Site and is PotentlyInhibited in Human Cells by Harmine,”FEBS J.275(24):6268-6280(2008))。
与DYRK1A抑制作用在癌细胞中的作用相反，已证实所述DYRK1A抑制作用会驱动人β细胞增殖，使其成为1型和2型糖尿病中β细胞再生的潜在治疗靶标(Wang等人,“A High-Throughput Chemical Screen Reveals That Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1AIncreases Human Pancreatic Beta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)；Shen等人,“Inhibition of DYRK1A and GSK3B Induces Humanβ-cellProliferation,”Nat.Commun.6:8372(2015)；Rachdi等人,“Dyrk1A Induces PancreaticβCell Mass Expansion and Improves Glucose Tolerance,”Cell Cycle 13(14):2221-2229(2014)；Dirice等人,“Inhibition of DYRK1A Stimulates Human Beta-cellProliferation,”Diabetes 65:(6):1660-1671(2016))。已经提出DYRK1A抑制作用通过诱导活化T细胞核因子(NFAT)家族的转录因子向核易位，从而允许进入随后激活人β细胞增殖的基因启动子来驱动β细胞增殖(Wang等人,“A High-Throughput Chemical ScreenReveals That Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1A Increases Human PancreaticBeta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)和Rachdi等人,“Dyrk1AInduces PancreaticβCell Mass Expansion and Improves Glucose Tolerance,”CellCycle 13(14):2221-2229(2014))。
由于DYRK1A参与神经退行性疾病、癌症和糖尿病，DYRK1A作为潜在治疗靶标已引起越来越多的关注。已经进行了大量的工作以便不但了解DYRK1A在疾病中的基础性作用，而且还了解DYRK1A在鉴定新型DYRK1A抑制剂中的基础性作用(Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBS J.278(2):246-256(2011)；Becker等人,“DYRK1A:A Potential Drug Target for Multiple Down Syndrome Neuropathologies,”CNS Neurol.Disord.:Drug Targets 13(1):26-33(2014)；Wegiel等人,“The Role ofDYRK1A in Neurodegenerative Diseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)；Smith等人,“Recent Advances in the Design,Synthesis,and Biological Evaluation ofSelective DYRK1A Inhibitors:A New Avenue for a Disease Modifying Treatment ofAlzheimer’s？,”ACS Chem.Neurosci.3(11):857-872(2012)；Ionescu等人,“DYRK1AKinase Inhibitors with Emphasis on Cancer,”Mini-Rev.Med.Chem.12(13):1315-1329(2012)；Fernandez-Martinez等人,“DYRK1A:The Double-Edged Kinase as aProtagonist in Cell Growth and Tumorigenesis,”Mol.Cell.Oncol.2(1):e970048(2015)；Wang等人,“A High-Throughput Chemical Screen Reveals That Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1A Increases Human Pancreatic Beta CellReplication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)；Shen等人,“Inhibition of DYRK1A andGSK3B Induces Humanβ-cell Proliferation,”Nat.Commun.6:8372(2015)；以及Dirice等人,“Inhibition of DYRK1A Stimulates Human Beta-cell Proliferation,”Diabetes65:(6):1660-1671(2016))。
已经鉴定、合成并表征了几种DYRK1A抑制剂。除骆驼蓬碱(harmine)外，其它已证实会抑制DYRK1A和其它激酶的天然产物是EGCg和其它黄烷-3-醇(Guedj等人,“Green TeaPolyphenols Rescue of Brain Defects Induced by Overexpression of DYRK1A,”PLoSOne4(2):e4606(2009)和Bain等人,“The Specificities of Protein KinaseInhibitors:An Update,”Biochem.J.371(1):199-204(2003))、leucettine(Tahtouh等人,“Selectivity,Cocrystal Structures,and Neuroprotective Properties ofLeucettines,a Family of Protein Kinase Inhibitors Derived from the MarineSponge Alkaloid Leucettamine B,”J.Med.Chem.55(21):9312-9330(2012)和Naert等人,“Leucettine L41,a DYRK1A-preferential DYRKs/CLKs Inhibitor,Prevents MemoryImpairments and Neurotoxicity Induced by Oligomeric Aβ25-35PeptideAdministration in Mice,”Eur.Neuropsychopharmacol.25(11):2170-2182(2015))、醌茜素(quinalizarine)(Cozza等人,“Quinalizarin as a Potent,Selective and Cell-permeable Inhibitor of Protein Kinase CK2,”Biochem.J.421(3):387-395(2009))、盾木素类似物(peltogynoid)Acanilol A和B(Ahmadu等人,“Two New Peltogynoids fromAcacia nilotica Delile with Kinase Inhibitory Activity,”Planta Med.76(5):458-460(2010))、苯并香豆素(dNBC)(Sarno等人,“Structural Features Underlying theSelectivity of the Kinase Inhibitors NBC and dNBC:Role of a Nitro Group thatDiscriminates Between CK2 and DYRK1A,”Cell.Mol.Life Sci.69(3):449-460(2012))和吲哚并咔唑类(十字胞碱(Starosporine)、蝴蝶霉素(rebeccamycin)及其类似物)(Sanchez等人,“Generation of Potent and Selective Kinase Inhibitors byCombinatorial Biosynthesis of Glycosylated Indolocarbazoles,”Chem.Commun.27:4118-4120(2009))。在从小分子药物发现尝试中鉴定的其它支架中，INDY(Ogawa等人,“Development of a Novel Selective Inhibitor of the Down Syndrome-RelatedKinase Dyrk1A,”Nat.Commun.1:Article Number 86(2010))、DANDY(Gourdain等人,“Development of DANDYs,New3,5-Diaryl-7-Azaindoles Demonstrating Potent DYRK1AKinase Inhibitory Activity,”J.Med.Chem.56(23):9569-9585(2013))、FINDY(Kii等人,“Selective Inhibition of the Kinase DYRK1A by Targeting its Folding Process,”Nat.Commun.7:11391(2016))、吡唑烷二酮(Koo等人,“QSAR Analysis of Pyrazolidine-3,5-Diones Derivatives as Dyrk1A Inhibitors,”Bioorg.Med.Chem.Lett.19(8):2324-2328(2009)；Kim等人,“Putative Therapeutic Agents for the Learning and MemoryDeficits of People with Down Syndrome,”Bioorg.Med.Chem.Lett.16(14):3772-3776(2006))、氨基-喹唑啉(Rosenthal等人,“Potent and Selective Small MoleculeInhibitors of Specific Isoforms of Cdc2-Like Kinases(Clk)and Dual SpecificityTyrosine-Phosphorylation-Regulated Kinases(Dyrk),”Bioorg.Med.Chem.Lett.21(10):3152-3158(2011))、meriolin(Giraud等人,“Synthesis,Protein KinaseInhibitory Potencies,and In Vitro Antiproliferative Activities of MeridianinDerivatives,”J.Med.Chem.54(13):4474-4489(2011)；Echalier等人,“Meriolins(3-(Pyrimidin-4-yl)-7-Azaindoles):Synthesis,Kinase Inhibitory Activity,CellularEffects,and Structure of a CDK2/Cyclin A/Meriolin Complex,”J.Med.Chem.51(4):737-751(2008)；以及Akue-Gedu等人,“Synthesis and Biological Activities ofAminopyrimidyl-Indoles Structurally Related to Meridianins,”Bioorg.Med.Chem.17(13):4420-4424(2009))、吡啶和吡嗪(Kassis等人,“Synthesis andBiological Evaluation of New3-(6-hydroxyindol-2-yl)-5-(Phenyl)Pyridine orPyrazine V-Shaped Molecules as Kinase Inhibitors and Cytotoxic Agents,”Eur.J.Med.Chem.46(11):5416-5434(2011))、chromenoidole(Neagoie等人,“Synthesisof Chromeno[3,4-b]indoles as Lamellarin D Analogues:A Novel DYRK1A InhibitorClass,”Eur.J.Med.Chem.49:379-396(2012))、11H-吲哚并[3,2-c]喹啉-6-甲酸(Falke等人,“10-Iodo-11H-Indolo[3,2-c]Quinoline-6-Carboxylic Acids are SelectiveInhibitors of DYRK1A,”J.Med.Chem.58(7):3131-3143(2015))、噻唑并[5,4-f]喹唑啉(EHT 5372)(Foucourt等人,“Design and Synthesis of Thiazolo[5,4-f]Quinazolinesas DYRK1A Inhibitors,Part I.,”Molecules19(10):15546-15571(2014)和Coutadeur等人,“A Novel DYRK1A(Dual Specificity Tyrosine Phosphorylation-Regulated Kinase1A)Inhibitor for the Treatment of Alzheimer’s Disease:Effect on Tau andAmyloid Pathologies In Vitro,”J.Neurochem.133(3):440-451(2015))以及5-碘代杀结核菌素(Dirice等人,“Inhibition of DYRK1A Stimulates Human Beta-cellProliferation,”Diabetes 65:(6):1660-1671(2016)和Annes等人,“Adenosine KinaseInhibition Selectively Promotes Rodent and Porcine Isletβ-cell Replication,”Proc.Natl.Acad.Sci.109(10):3915-3920(2012))显示出有效的DYRK1A活性和不同程度的激酶选择性。这些化合物大多数是DYRK1A的非选择性抑制剂，并且表现出药理学副作用，诸如CNS活性或细胞凋亡。具体而言，已知骆驼蓬碱由于其对血清素、色胺和其它受体的亲和力，会表现出充当CNS刺激物的致幻特性(Brierley等人,“Developments in HarminePharmacology—Implications for Ayahuasca Use and Drug-Dependence Treatment,”Prog.Neuro-Psychopharmacol.Biol.Psychiatry 39(2):263-272(2012)和Airaksinen等人,“Tremorigenic Effect and Inhibition of Tryptamine and Serotonin ReceptorBinding byβ-Carbolines,”Pharmacol.Toxicol.(Copenhagen)60(1),5-8(1987))。研究揭示了骆驼蓬碱的多种精神作用，包括兴奋、震颤、惊厥和焦虑(Fuentes等人,“CentralEffects of Harmine,Harmaline,and Relatedβ-Carbolines,”Neuropharmacology 10(1):15-23(1971))。
在所有DYRK1A抑制剂中，骆驼蓬碱及其类似物(β-咔啉)是最常研究的，并且仍然是迄今为止涵盖的最有效和口服可生物利用类别的抑制剂(Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBS J.278(2):246-256(2011)和Smith等人,“Recent Advances in the Design,Synthesis,and Biological Evaluation ofSelective DYRK1A Inhibitors:A New Avenue for a Disease Modifying Treatment ofAlzheimer’s？,”ACS Chem.Neurosci.3(11):857-872(2012))。已发现骆驼蓬碱和几种相关类似物会抑制DYRK1A介导的τ蛋白磷酸化，τ蛋白磷酸化被认为与AD和DS有关(Frost等人,“β-Carboline Compounds,Including Harmine,Inhibit DYRK1A and TauPhosphorylation at Multiple Alzheimer’s Disease-Related Sites,”PLoS One 6:5e19264(2011)。
骆驼蓬碱也引起了针对癌症疗法的极大兴趣(Chen等人,“Antitumor andNeurotoxic Effects of Novel Harmine Derivatives and Structure-ActivityRelationship Analysis,”Int.J.Cancer 114(5):675-682(2005)；Ishida等人,“Antitumor Agents 201.1Cytotoxicity of Harmine andβ-carboline Analogs,”Bioorg.Med.Chem.Lett.9(23):3319-3324(1999)；Cao等人,“Synthesis,AcuteToxicities,and Antitumor Effects of Novel 9-Substitutedβ-CarbolineDerivatives,”Bioorg.Med.Chem.12(17):4613-4623(2004)；Cao等人,“Synthesis andStructure-Activity Relationships of Harmine Derivatives as PotentialAntitumor Agents,”Eur.J.Med.Chem.60:135-143(2013)；以及Zhang等人,“Synthesisand Mechanisms of Action of Novel Harmine Derivatives as Potential AntitumorAgents,”Sci.Rep.6:33204(2016))。使用系统性结构修饰，已确定几种骆驼蓬碱类似物会在体外和体内通过多种作用机制显示出有效的抗肿瘤活性，这些作用机制包括抑制拓扑异构酶I(Cao等人,“DNA Binding Properties of 9-Substituted Harmine Derivatives,”Biochem.Biophys.Res.Commun.338(3):1557-1563(2005)和Sobhani等人,“An In VitroEvaluation of Human DNA Topoisomerase I Inhibition by Peganum harmala L.SeedsExtract and itsβ-Carboline Alkaloids,”J.Pharm.Pharm.Sci.5(1):18-22(2002))，抑制CDK(Song等人,“Specific Inhibition of Cyclin-Dependent Kinases and CellProliferation by Harmine,”Biochem.Biophys.Res.Commun.317(1):128-132(2004))，诱导细胞凋亡(Cao等人,“Harmine Induces Apoptosis in HepG2 Cells viaMitochondrial Signaling Pathway,”Hepatobiliary Pancreatic Dis.Int.10(6):599-604(2011))和DNA嵌入(Taira等人,“Intercalation of Sixβ-Carboline Derivativesinto DNA,”Jpn.J.Toxicol.Environ.Health 43(2):83-91(1997))。
骆驼蓬碱还被鉴定为在人β细胞增殖方面引起大约10至15倍诱导的一类新化合物，这在治疗性人β细胞扩增的相关范围内(Wang等人,“A High-Throughput ChemicalScreen Reveals That Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1A Increases HumanPancreatic Beta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015))。通过基因沉默和其它研究将DYRK1A定义为骆驼蓬碱的可能性靶标，可能通过NFAT家族的转录因子作为人β细胞增殖和分化的介体而起作用(Wang等人.,“A High-Throughput Chemical ScreenReveals That Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1A Increases Human PancreaticBeta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015))。使用三种不同的小鼠、大鼠和人胰岛植入物模型，还证实骆驼蓬碱能够在小鼠和大鼠体内诱导β细胞增殖，增加胰岛质量并改善血糖控制(Wang等人,“A High-Throughput Chemical Screen Reveals ThatHarmine-Mediated Inhibition of DYRK1A Increases Human Pancreatic Beta CellReplication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015))。
由于DYRK1A和NFAT在β细胞外广泛表达，因此已知骆驼蓬碱类似物具有脱靶效应，导致包括CNS和抗肿瘤活性在内的药理副作用，从而限制了它的治疗实用性以及用于糖尿病等慢性疾病的药物开发的潜力。因此，迫切需要开发鉴定在激酶和其它受体处的脱靶活性有限的选择性骆驼蓬碱类似物的策略。对于特异性靶向递送至β细胞需要优化的选择性骆驼蓬碱类似物。
本公开涉及克服本领域中的缺陷。
发明内容
本公开的一个方面涉及一种具有以下结构的式(I)的化合物：
Figure BDA0002777618320000101
或其立体异构体、药学上可接受的盐、氧化物或溶剂化物，其中
R1是任选地被Y、-NHR5、-C(O)NHCH(CH3)2或-O(CH2)2OR6取代的支链或无支链的C1-6烷氧基，其中所述烷氧基任选地被卤化或氘化；
R2是H或支链或无支链的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基，其中所述支链或无支链的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基任选地被Z取代；
R3是C1-6烷基、卤素、支链或无支链的C1-6羟烷基、-C(O)CH3、-OH或任选地被R7取代的杂环基；
R4是H、-OH、支链或无支链的C1-6羟烷基或-C(O)CH3；
R5为H、-C(O)CH3或-C(O)Ar；
R6为支链或无支链的C1-6烷基、-(CH2)2NHBoc、-(CH2)2NH(O)CH3或-(CH2)2NH3Cl；
R7为-ArX或-CH2ArX；
R8是任选的，并且当存在时为O；
X为H或卤素；
Y为-CO2CH3、-NHBoc、-C(O)NH2、-CO2H、-NH3Cl、-NHC(O)CH3；并且
Z为-CO2CH3、-CO2H、-C(O)NH2，或选自由以下组成的组的氨基取代的杂芳基：呋喃、噻吩、吡咯、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、异噁唑、异噻唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,3-噻二唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、四唑和1,2,3,4-噁三唑；
附带以下条件：
当R1为-OCH3，R3为-CH3，并且R4为H时，R2不可以是-(CH2)2CO2CH3、-(CH2)2CO2H或-(CH2)2C(O)NH2；
当R1为-OCH3，R2为H，并且R4为H时，R3不可以是-CH2OH或Cl；并且
当R1为-OCH3，R2为H，R3为-CH3时，R4不可以是H。
本公开的另一方面涉及一种抑制细胞中双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)的活性的方法。该方法涉及在有效抑制所述细胞中的DYRK1A活性的条件下，使所述细胞与式(I)的化合物接触。
另一方面涉及一种增加胰岛β细胞群中的细胞增殖的方法。该方法涉及在有效增加胰岛β细胞群中的细胞增殖的条件下，使胰岛β细胞群与式(I)的化合物接触。
另一个方面涉及一种包含式(I)的化合物和载体的组合物。
另一方面涉及一种治疗受试者的与胰岛素分泌不足相关的疾患的方法。该方法涉及向需要治疗与胰岛素分泌水平不足相关的疾患的受试者，在有效治疗所述受试者的所述疾患的条件下施用本文所述的化合物或组合物。
另一方面涉及一种治疗受试者的神经障碍的方法。该方法涉及向需要治疗神经障碍的受试者，在有效治疗所述受试者的所述疾患的条件下施用式(I)的化合物。
尽管已经为发现有效和选择性的DYRK1A抑制剂做出了努力，但大多数仍处于超前鉴定的早期阶段。
下文描述了对高度有效的新型类别的基于骆驼蓬碱的DYRK1A抑制剂的鉴定和评价。
附图简述
图1是示出了1-氨基骆驼蓬碱类似物化合物的合成的示意图。试剂和条件：(a)NaNO2(1.03当量)、HCl，10℃，1小时，(b)2-氧代哌啶-3-甲酸乙酯(1.05当量)、KOH(1.2当量)、水，150℃，5小时；(c)甲酸，回流，1小时；(d)DDQ(1.2当量),1,4-二噁烷，0℃-室温，1小时，23％(4步)；(e)POCl3，150℃，24小时，79％；(f)R1R2NH(10当量)，170℃，24小时，43-87％(对于1-6b–1-6j)；(g)Ruphos(1摩尔％)、RuPhos预催化剂(1摩尔％)、氮杂环丁烷(1.2当量)、LiHMDS(1M在THF中的溶液，2.4当量)，90℃，96小时，12％(对于1-6a)。
图2是示出了1-羟甲基骆驼蓬碱和3-羟甲基骆驼蓬碱类似物化合物的合成的示意图。试剂和条件：(a)m-CPBA(3当量)、CHCl3，70℃，12小时，47％；(b)TFA酸酐(2.5当量)、CH2Cl2，回流，过夜，49％；(c)N2H4OH.HCl(1当量)、MeOH、CHCl3，室温，24小时，81％；(d)2-3(1当量)、K2CO3(5.5当量)、DCM，室温，24小时，34％；(e)Zn粉、AcOH，室温，过夜，96％；(f)乙醛(1当量)、TFA(5％)、DCM，室温，过夜；(g)S(2当量)、二甲苯，回流，过夜，75％；(h)LiAlH4(2当量)、THF，室温，12小时，91％；(i)Et3SiH(16当量)、PdCl2(0.2当量)、EtOH，90℃，5小时，27％。
图3是示出1-(1-羟基)乙基骆驼蓬碱和1-乙酰基骆驼蓬碱类似物化合物的合成的示意图。试剂和条件：(a(i))丙酮醛(1.2当量)、TFA(5％)、DCM，室温，12小时；(a(ii))KMnO4(4当量)、THF，室温，12小时，16％(2步)；(b)NaBH4(2当量)、MeOH，室温，12小时，49％。
图4A-图4F图解说明了本公开的骆驼蓬碱类似物化合物对人β细胞增殖的影响。图4A是示出了10μM下骆驼蓬碱类似物对人β细胞增殖的初步筛选结果的图表。DMSO用作阴性对照，而骆驼蓬碱用作阳性对照(n＝4)。图4B是示出了来自于图4A的受类似物2-8诱导的Ki-67和胰岛素双阳性细胞的代表性实例的图像。图4C-图4D是示出了在人β细胞中化合物2-2和化合物2-8的剂量-反应曲线的结果的图表(每个剂量n＝4)。图4E是示出了Ad的核频率定量的图表。用骆驼蓬碱、化合物2-2和化合物2-8(10μM，24小时；每种化合物n＝3)处理的R7T1啮齿动物β细胞系中的NFATC1-GFP。图4F是一对图像，其示出了增加R7T1啮齿动物β细胞系中的腺病毒NFATC1-GFP的核频率的化合物2-8(10μM，24小时)的代表性实例。在所有相关图中，误差条表示sem*p<0.05。每个图表最少计数1,000个β细胞。
图5是示出了7-取代的骆驼蓬碱类似物化合物的合成的示意图。试剂和条件：(a)AcOH、48％HBr，回流，12小时；(b)Cs2CO3(1.5当量)、RBr(1.5当量)、DMF，50℃，12小时；(c)7NNH3的MeOH溶液(20当量)，90℃，12小时；(d)TFA/DCM(1:1)，室温，12小时；(e)4N HCl的二噁烷溶液、二噁烷，室温，12小时；(f)乙酸酐(1当量)、Et3N(2.2当量)、DCM，室温，12小时；(g)TfO2(1.2当量)、吡啶、DCM，0℃-室温，12小时；(h)NaNO2(2当量)、Pd2(dba)3(5摩尔％)、BrettPhos(12摩尔％)、TDA(5摩尔％)、t-BuOH，150℃，24小时；(i)碳载10重量％钯、N2H4.H2O(20当量)、MeOH，回流，2小时；(j)苯甲酰氯(1.05当量)、Et3N(2当量)、THF，0℃-室温，12小时；(k)乙酸酐(1.2当量)、Et3N(2当量)、THF，室温，24小时；(l)异丙基异氰酸酯(1.1当量)、DMF，室温，12小时。
图6是示出了7-取代的骆驼蓬碱类似物化合物的合成的示意图。试剂和条件：(a)NaH(2当量)、RBr(2当量)、DMF、50℃，12小时；(b)7N NH3的MeOH溶液(20当量)，90℃，12小时；(c)TFA/DCM(1:1)，室温，12小时；(d)Et3SiH(8当量)、Pd-C、MeOH，回流；(e)一水合肼(20当量)、MeOH，回流，3小时；(f)乙酸酐(1当量)、Et3N(2.2当量)、DCM，室温，12小时；(g)(i)甲酸乙酯(0.5当量)、EtOH，微波，150℃，30分钟；(ii)LiAlH4(3当量)、THF，回流，4小时；(h)甲醛(2.5当量)、NaCNBH3(5当量)、EtOH，室温，2小时；(i)HATU(1.1当量)、DIPEA(2当量)、RNH2(1当量)、DMF，室温，12小时；(j)NH2OH.HCl(1.5当量)、Et3N(1.5当量)、EtOH，回流，12小时；(k)CCl3COCl(1.2当量)、吡啶(4当量)、甲苯，85℃，24小时；(l)7N NH3的MeOH溶液，室温，12小时；(m)(i)EtMgBr(2当量)、Ti(OiPr)4(1.1当量)、THF，室温，1小时；(ii)BF3.Et2O(2当量)，室温，1小时；(n)AcOH:THF:H2O(16:4:4mL)，回流，3小时；(o)(i)TMSCN(1.2当量)、ZnI2(0.05当量)、THF，回流，12小时；(ii)7N NH3的MeOH溶液，室温，12小时；(p)1N NaOH,H2O2(35％)、MeOH，室温，1小时；(q)(i)TMSCF3(1.2当量)、TBAF(0.01当量)、THF，0℃，室温，12小时；(ii)TBAF(0.1当量)、水(5.5当量)，0℃，室温，2小时；(r)Tf2O(1.1当量)、吡啶(2当量)、DCM，-40℃–室温，12小时；(s)叠氮化钠(2当量)、DMSO，40℃，4小时；(t)Pd-C(20摩尔％)、甲酸铵(5当量)、MeOH，回流，3小时；(u)HCl气体、EtOH，室温，12小时；(v)膦酸2-氧代丙基酯重氮二甲基酯(2当量)、MeOH/THF(1:1)、K2CO3(3当量)，室温，24小时；(w)MeOCH2CH2N3(1.05当量)、CuSO4.5H2O(0.01当量)、抗坏血酸钠(0.1当量)、t-BuOH/水，室温，12小时；(x)甲基炔丙基醚(1当量)、CuSO4.5H2O(0.1当量)、抗坏血酸钠(0.1当量)、t-BuOH/水，室温，12小时；(y)n-BuLi(1.2当量)、ZnCl2(1.1当量)、三氯乙酰异氰酸酯(1.1当量)、K2CO3(1.5当量)、MeOH、THF，-20℃–室温，2小时；(z)LiAlH4(1.5当量)、THF，回流，6小时。
图7是示出了7-氘代甲氧基骆驼蓬碱类似物的合成的示意图。试剂和条件：(a)Cs2CO3(1.1当量)、CD3I(1.1当量)、DMF，室温，12小时；(b)NaH(2当量)、4-溴烷基腈或炔丙基溴(2当量)、DMF，50℃，12小时；(c)H2O2(60％的水溶液)、K2CO3(0.15当量)、DMSO，室温，12小时；(d)NH2OH.HCl(1.5当量)、Et3N(1.5当量)、EtOH，回流，12小时；(e)CCl3COCl(1.2当量)、甲苯，85℃，24小时；(f)7N NH3的MeOH溶液，室温，12小时；(g)乙醛(1当量)、TFA、DCM，室温，12小时；(h)碳载10％钯、Li2CO3(2当量)，μW,150℃，10分钟。
具体实施方式
本文公开了激酶抑制剂化合物和组合物及它们的使用方法。
一方面涉及一种具有以下结构的式(I)的化合物：
Figure BDA0002777618320000151
Figure BDA0002777618320000161
或其立体异构体、药学上可接受的盐、氧化物或溶剂化物，其中
R1是任选地被Y、-NHR5、-C(O)NHCH(CH3)2或-O(CH2)2OR6取代的支链或无支链的C1-6烷氧基，其中所述烷氧基任选地被卤化或氘化；
R2是H或支链或无支链的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基，其中所述支链或无支链的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基任选地被Z取代；
R3是C1-6烷基、卤素、支链或无支链的C1-6羟烷基、-C(O)CH3、-OH或任选地被R7取代的杂环基；
R4是H、-OH、支链或无支链的C1-6羟烷基或-C(O)CH3；
R5为H、-C(O)CH3或-C(O)Ar；
R6为支链或无支链的C1-6烷基、-(CH2)2NHBoc、-(CH2)2NH(O)CH3或-(CH2)2NH3Cl；
R7为-ArX或-CH2ArX；
R8是任选的，并且当存在时为O；
X为H或卤素；
Y为-CO2CH3、-NHBoc、-C(O)NH2、-CO2H、-NH3Cl、-NHC(O)CH3；并且
Z为-CO2CH3、-CO2H、-C(O)NH2，或选自由以下组成的组的氨基取代的杂芳基：呋喃、噻吩、吡咯、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、异噁唑、异噻唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,3-噻二唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、四唑和1,2,3,4-噁三唑；
附带以下条件：
当R1为-OCH3，R3为-CH3，并且R4为H时，R2不可以是-(CH2)2CO2CH3、-(CH2)2CO2H或-(CH2)2C(O)NH2；
当R1为-OCH3，R2为H，并且R4为H时，R3不可以是-CH2OH或Cl；并且
当R1为-OCH3，R2为H，R3为-CH3时，R4不可以是H。
如以上以及本文整个说明书中所用，除非另有说明，否则以下术语应理解为具有以下含义。如果本文没有另外定义，则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本技术所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。
术语“烷氧基”意指直链、支链或环状构型及其组合通过氧附接于母体结构的1至6个碳原子的基团。实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环己氧基等。烷氧基还包括亚甲二氧基和亚乙二氧基，其中每个氧原子键合至亚甲二氧基或亚乙二氧基从中悬垂的原子、链或环上以形成环。因此，例如，被烷氧基取代的苯基可以是，例如，
Figure BDA0002777618320000171
术语“卤素”意指氟、氯、溴或碘。术语“卤代”意指含有卤素取代基。因此，例如，卤代烷氧基是被卤素取代的烷氧基。
术语“氘代”意指化合物中所含的一个或多个氢原子已被其较重的稳定同位素氘置换。
术语“ArX”意指芳基-X，或被H或卤素取代的芳基。术语“芳基”意指6至约19个碳原子，优选6至约10个碳原子的芳族单环或多环(multicyclic/polycyclic)环系(包括稠环、桥环或螺环环系)，并且包括芳基烷基基团。在多环环系的情况下，仅需其中一个环是芳族，就可以将该环系定义为“芳基”。芳基基团的环系可以任选地被卤素取代。代表性的芳基基团包括但不限于诸如苯基、萘基、薁基、菲基、蒽基、芴基、芘基、三亚苯基、
Figure BDA0002777618320000181
基(chrysenyl)和并四苯基(naphthacenyl)的基团。
术语“烷基”意指可以是直链或支链且在链中具有约1至约6个碳原子(或由“Cn-Cn”表示的碳数量，其中n为碳原子的数量范围)的脂肪烃基团。支链意指一个或多个低碳数烷基基团，诸如甲基、乙基或丙基附接至线性烷基链。示例性的烷基基团包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基和3-戊基等。
术语“烯基”意指含有碳-碳双键并且可以是直链或支链，在链中具有约2至约6个碳原子或在链中具有2至约4个碳原子的脂肪烃基团。支链意指一个或多个低碳数烷基基团，诸如甲基、乙基或丙基附接至线性烯基链。示例性的烯基包括但不限于乙烯基、丙烯基、正丁烯基和异丁烯基。
术语“炔基”意指含有碳-碳三键并且可以是直链或支链，在链中具有约2至约6个碳原子或在链中具有2至约4个碳原子的脂肪烃基团。支链意指一个或多个低碳数烷基基团，诸如甲基、乙基或丙基附接至线性烯基链。示例性的炔基包括乙炔基、丙炔基、正丁炔基、2-丁炔基、3-甲基丁炔基和正戊炔基。
术语“杂环基”是指具有多个碳原子和1至5个选自氮、氧和硫的杂原子的稳定的3至18元环(基团)。杂环基可以是单环或多环环系，这些环系可以包括稠环、桥环或螺环环系；并且杂环基中的氮、碳或硫原子可以任选地被氧化；氮原子可以任选地被季铵化；并且环可以是部分或完全饱和的。此类杂环基的实例包括但不限于氮杂环庚三烯基(azepinyl)、氮杂环辛烷基(azocanyl)、吡喃基二噁烷基、二噻烷基、1,3-二氧戊环基、四氢呋喃基、二氢吡咯烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、异噻唑啉基、异噁唑啉基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂环庚三烯基、噁唑烷基、环氧乙烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、噻唑烷基、四氢吡喃基、硫吗啉基、硫吗啉基亚砜和硫吗啉基砜。
术语“杂芳基”意指约5至约14个环原子或约5至约10个环原子的芳族单环或多环环系，其中环系中的一个或多个原子是除碳以外的元素，例如氮、氧或硫。在多环环系的情况下，仅需其中一个环是芳族，就可以将该环系定义为“杂芳基”。杂芳基可含有约5至6个环原子。杂芳基前面的前缀氮杂、氧杂、硫杂或硫代分别意指至少一个氮、氧或硫原子作为环原子存在。杂芳基的氮原子任选地被氧化成相应的N-氧化物。代表性的杂芳基包括吡啶基、2-氧代-吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、二氢吲哚基、2-氧代二氢吲哚基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并三唑基、苯并[1,3]二氧杂环戊烯基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基(pthalazinyl)、喹喔啉基、2,3-二氢-苯并[1,4]二氧杂环己烯基、苯并[1,2,3]三嗪基、苯并[1,2,4]三嗪基、4H-色烯基、吲哚嗪基、喹嗪基、6aH-噻吩并[2,3-d]咪唑基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、吡唑并[1,5-a]吡啶基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶基、噻吩并[2,3-b]呋喃基、噻吩并[2,3-b]吡啶基、噻吩并[3,2-b]吡啶基、呋喃并[2,3-b]吡啶基、呋喃并[3,2-b]吡啶基、噻吩并[3,2-c]嘧啶基、呋喃并[3,2-c]嘧啶基、噻吩并[2,3-b]吡嗪基、咪唑并[1,2-a]吡嗪基、5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪基、6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪基、2-氧代-2,3-二氢苯并[d]噁唑基、3,3-二甲基-2-氧吲哚基、2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、苯并[c][1,2,5]噁二唑基、苯并[c][1,2,5]噻二唑基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基、3-氧代-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-2(3H)-基等。
另外的杂环基和杂芳基描述于Katritzky等人编辑的ComprehensiveHeterocyclic Chemistry:The Structure,Reactions,Synthesis and Use ofHeterocyclic Compounds,第1-8卷,Pergamon Press,N.Y.(1984)中，其特此通过引用整体并入。
短语“经取代的或未取代的”和“任选取代的”意指基团可以(但不一定)在该基团的每个可取代原子上具有取代基(包括在单个原子上具有一个以上的取代基)，并且每个取代基的特性独立于其它取代基。
术语“经取代的”意指指定原子上的一个或多个氢被来自所示组的选择所置换，条件是不超过指定原子的正常化合价。“未取代的”原子带有由其化合价决定的所有氢原子。当取代基为氧代基时(即，＝O)时，则原子上的2个氢被置换。然而，式(I)的化合物中存在这些规则的例外，特别是对于N-氧化物而言(即，当R8作为O存在时)。取代基和/或变量的组合只有在此类组合产生稳定的化合物时才是可容许的。“稳定的化合物”意指足够稳固以在从反应混合物中分离到有用的纯度并配制成有效的治疗剂后继续存在的化合物。
术语“一种或多种化合物”和等同表述意指本文所述的化合物，在背景允许的情况下，该表述包括前药、药学上可接受的盐、氧化物和溶剂化物，例如水合物。
本文所述的化合物可以含有一个或多个不对称中心，且因此可以产生对映异构体、非对映异构体和其它立体异构体形式。每个手性中心可以根据绝对立体化学定义为(R)-或(S)-。本发明意在包括所有此类可能的异构体及其混合物，包括外消旋和光学纯形式。具有光学活性的(R)-异构体和(S)-异构体、(-)-异构体和(+)-异构体或(D)-异构体和(L)-异构体可使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分。也意图包括所有互变异构体形式。
对“化合物”的叙述意图包括该化合物的盐、溶剂化物、氧化物和包合物，以及任何立体异构体形式，或该化合物的任何此类形式的任何比率的混合物。因此，根据一些实施方案，以盐形式提供如本文(包括在药物组合物、治疗方法和化合物本身的上下文中)描述的化合物。
术语“溶剂化物”是指固态的化合物，其中合适的溶剂分子掺入晶格中。用于治疗性施用的合适溶剂在所施用的剂量下是生理上可耐受的。用于治疗性施用的合适溶剂的实例是乙醇和水。当水为溶剂时，溶剂化物称为水合物。一般而言，通过将化合物溶解在适当的溶剂中并通过冷却或使用反溶剂分离溶剂化物来形成溶剂化物。溶剂化物通常在环境条件下干燥或共沸。
在Remington,The Science and Practice of Pharmacy,第19版1:176-177(1995)中描述了包合物，其特此通过引用整体并入。最常用的包合物是具有环糊精的那些包合物，并且所有天然和合成的环糊精包合物均明确地被本发明涵盖。
术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒碱或酸(包括无机酸和碱以及有机酸和碱)制备的盐。
术语“药学上可接受的”意指在合理的医学判断范围内适合与人和低等动物的细胞接触使用而无不当毒性、刺激、过敏反应等，并且与合理的效益/风险比相称。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R1是支链或无支链的C1-6烷氧基。例如但不限于，R1可以是甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环己氧基。在一个实施方案中，C1-6烷氧基是无支链的。在另一个实施方案中，C1-6烷氧基是支链的。在一个实施方案中，支链或无支链的C1-6烷氧基被如本文所定义的Y(即，-CO2CH3、-NHBoc、-C(O)NH2、-CO2H、-NH3Cl、-NHC(O)CH3)取代。在另一个实施方案中，支链或无支链的C1-6烷氧基被-NHR5、-C(O)NHCH(CH3)2或-O(CH2)2OR6取代。在一个实施方案中，烷氧基是卤代的。在另一个实施方案中，烷氧基是氘代的。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R2为H。在另一个实施方案中，R2是支链或无支链的C1-6烷基、支链或无支链的C2-6烯基或支链或无支链的C2-6炔基。支链或无支链的C1-6烷基、支链或无支链的C2-6烯基或支链或无支链的C2-6炔基在一个实施方案中任选地被如本文所定义的Z取代。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R3选自C1-6烷基、卤素、支链或无支链的C1-6羟烷基、-C(O)CH3、-OH，或任选地被如本文所定义的R7(即，-ArX或-CH2ArX)取代的杂环基。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R4选自H、-OH、支链或无支链的C1-6羟烷基或-C(O)CH3。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R5为H、-C(O)CH3或-C(O)Ar。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R6是支链或无支链的C1-6烷基、-(CH2)2NHBoc、-(CH2)2NH(O)CH3或-(CH2)2NH3Cl。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R7为-ArX或-CH2ArX，其中“Ar”意指如本文所定义的“芳基”。“芳基”意指被H或卤素取代的芳基。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，R8是任选的，并且当存在时为O。因此，当R8存在时，式(I)的化合物是N-氧化物。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，X为H或卤素。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，Y选自以下取代基：-CO2CH3、-NHBoc、-C(O)NH2、-CO2H、-NH3Cl、-NHC(O)CH3。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，Z为-CO2CH3、-CO2H、-C(O)NH2或氨基取代的杂芳基。当Z为氨基取代的杂芳基时，合适的杂芳基取代基包括呋喃、噻吩、吡咯、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、异噁唑、异噻唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,3-噻二唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、四唑和1,2,3,4-噁三唑。
式(I)的化合物具有以下附带条件：
当R1为-OCH3，R3为-CH3，并且R4为H时，R2不可以是-(CH2)2CO2CH3、-(CH2)2CO2H或-(CH2)2C(O)NH2；
当R1为-OCH3，R2为H，并且R4为H时，R3不可以是-CH2OH或Cl；并且
当R1为-OCH3，R2为H，R3为-CH3时，R4不可以是H。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，
R1为–OCH3；
R2是被-CO2CH3取代的支链或无支链的C1-6烷基；
R3为甲基；并且
R4为H。
根据该实施方案，R2选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000231
在式(I)的化合物的另一个实施方案中，
R1为–OCH3；
R2是被-CO2H取代的支链或无支链的C1-6烷基；R3为甲基；并且
R4为H。
根据该实施方案，R2选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000241
在式(I)的化合物的另一个实施方案中，
R1为–OCH3；
R2是被-C(O)NH2取代的支链或无支链的C1-6烷基；R3为甲基；并且
R4为H。
根据该实施方案，R2选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000242
在式(I)的化合物的另一个实施方案中，
R1为–OCH3；
R2是被氨基取代的杂芳基取代的支链或无支链的C1-6烷基；
R3为甲基；并且
R4为H。
在一个特定的实施方案中，氨基取代的杂芳基是1,2,4-噁二唑。根据该实施方案，R2选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000251
在式(I)的化合物的另一个实施方案中，
R2为H；
R3为甲基；并且
R4为H。
根据该实施方案，R1是被-CO2CH3取代的C1-6烷氧基。在特定实施方案中，R1选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000252
在另一个实施方案中，R1是被-NHBoc取代的C1-6烷氧基。在特定实施方案中，R1选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000261
在另一个实施方案中，R1是被-C(O)NH2取代的C1-6烷氧基。在特定实施方案中，R1选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000262
在另一个实施方案中，R1是被-CO2H取代的C1-6烷氧基。在特定实施方案中，R1选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000263
在另一个实施方案中，R1是被-NH3Cl取代的C1-6烷氧基。根据该实施方案，R1可以选自由
Figure BDA0002777618320000264
Figure BDA0002777618320000265
组成的组。
在一个实施方案中，R1是被-NHC(O)CH3取代的C1-6烷氧基。在特定实施方案中，R1选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000266
在另一个实施方案中，R1为-NH2。
在另一个实施方案中，R1选自由
Figure BDA0002777618320000271
Figure BDA0002777618320000272
组成的组。
在另一个实施方案中，R1为-O(CH2)2OR6。在特定实施方案中，R1选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000273
在另一个实施方案中，R1选自-OCD3或-OCF3。
在式(I)的化合物的另一个实施方案中，
R1为–OCH3；
R2为H；并且
R4为H。
根据该实施方案，R3可以是卤素。在一个特定实施方案中，R3为Cl。
在另一个实施方案中，R3选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000274
Figure BDA0002777618320000281
在式(I)的化合物的另一个实施方案中，
R1为–OCH3；
R3为甲基；并且
R4为H。
根据该实施方案，R2选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000282
在另一个实施方案中，式(I)的化合物选自由以下组成的组：
Figure BDA0002777618320000283
Figure BDA0002777618320000291
另一方面涉及一种抑制细胞中双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)的活性的方法。该方法涉及使细胞与式(I)的化合物接触以抑制细胞中的DYRK1A活性。
根据这一方面，在一个实施方案中，所述细胞是哺乳动物细胞。哺乳动物细胞可以包括来自例如小鼠、仓鼠、大鼠、牛、绵羊、猪、山羊、马、猴子、狗(例如，家犬)、猫、兔、豚鼠和灵长类动物(包括人)的细胞。例如，所述细胞可以是人细胞。
在一个实施方案中，所述细胞是胰岛β细胞。如果需要，用于确定细胞是否具有胰岛β细胞表型的方法是本领域已知的，并且包括但不限于将细胞与葡萄糖一起孵育并测试细胞中的胰岛素表达是否增加或受到诱导。其它方法包括测试是否表达β细胞特异性转录因子，借助RNA定量PCR检测β细胞特异性基因产物，在糖尿病小鼠中移植候选细胞并随后在所述移植后测试生理反应以及用电子显微镜对细胞进行很好地分析。
在另一个实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在另一个实施方案中，所述细胞是神经细胞。
本文所述的方法可以离体或在体内进行。当离体进行时，根据一个实施方案，可以通过从胰腺获得细胞并在适合体外或离体培养哺乳动物细胞(尤其是人细胞)的液体培养基中培养细胞来提供细胞群。例如但不限于，合适且非限制性的培养基可以基于可商购的培养基，诸如来自Invitrogen的RPMI1640。
另一方面涉及一种增加胰岛β细胞群中的细胞增殖的方法。该方法涉及使胰岛β细胞群与式(I)的化合物接触以增加胰岛β细胞群中的细胞增殖。
在一个实施方案中，用包含该化合物的组合物(即，单一组合物)进行接触。
该方法还可包括使胰岛β细胞群与转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导途径抑制剂接触。根据该实施方案，该方法可以用包含式(I)的化合物和TGFβ超家族信号传导途径抑制剂的组合物进行。在另一个实施方案中，式(I)的化合物和TGFβ超家族信号传导途径抑制剂分开地同时或依次接触胰岛β细胞群。
TGFβ超家族信号传导途径抑制剂包括BMP家族受体、激活素和抑制素受体以及GDF11受体和相关受体的小分子抑制剂和其它抑制剂(例如，中和性单克隆抗体、合成/重组肽抑制剂和siRNA)。
TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是本领域已知的，并且包括但不限于SB431542、SB505124、A-83-01、Decorin、可溶性TGF-β受体、乐地利单抗(Ierdelimumab)、美替木单抗(metelimumab)、AP-12009、卵泡抑素(Follistatin)、FLRG、GAST-1、GDF8前肽、MYO-029、Noggin、腱蛋白(chordin)、Cer/Dan、ectodin和Sclerostin(参见Tsuchida等人,“Inhibitors of the TGF-beta Superfamily and their Clinical Applications,”MiniRev.Med.Chem.6(11):1255-61(2006)，其特此通过引用整体并入)。
其它TGF-β信号传导抑制剂包括但不限于2-(3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)-1,5-萘啶；[3-(吡啶-2-基)-4-(4-喹啉基)]-1H-吡唑；3-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(4-喹啉基)-1-苯基硫代氨基甲酰基-1H-吡唑；SB-431542；SM16；SB-505124；和2-(3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)-1,5萘啶(ALK5抑制剂II)(参见美国专利号8,298,825，其特此通过引用整体并入)。
TGF-β信号传导的抑制剂在以下参考文献中有描述：Callahan等人,“Identification of Novel Inhibitors of the Transforming Growth Factorβ1(TGF-β1)Type 1Receptor(ALK5),”J.Med.Chem.45:999-1001(2002)；Sawyer等人,“Synthesisand Activity of New Aryl-and Heteroaryl-substituted Pyrazole Inhibitors ofthe Transforming Growth Factor-beta Type I Receptor Kinase Domain,”J.Med.Chem.46:3953-3956(2003)；Gellibert等人,“Identification of 1,5-naphthyridine Derivatives as a Novel Series of Potent and Selective TGF-betaType I Receptor Inhibitors,”J.Med.Chem.47:4494-4506(2004)；Tojo等人,CancerSci.96:791-800(2005)；Valdimarsdottir等人,“Functions of the TGFbetaSuperfamily in Human Embryonic Stem Cells,”APMIS 113:773-389(2005)；Petersen等人,“Oral Administration of GW788388,an Inhibitor of TGF-beta Type I and IIReceptor Kinases,Decreases Renal Fibrosis,”Kidney International 73:705-715(2008)；Yingling等人,“Development of TGF-beta Signalling Inhibitors for CancerTherapy,”Nature Rev.Drug Disc.3:1011-1022(2004)；Byfield等人,“SB-505124Is aSelective Inhibitor of Transforming Growth Factor-βType Receptors ALK4,ALK5,and ALK7,”Mol.Pharmacol.65:744-752(2004)；Dumont等人,“Targeting the TGF BetaSignaling Network in Human Neoplasia,”Cancer Cell 3:531-536(2003)；PCT公布号WO2002/094833；PCT公布号WO 2004/026865；PCT公布号WO 2004/067530；PCT公布号WO2009/032667；PCT公布号WO 2004/013135；PCT公布号WO 2003/097639；PCT公布号WO 2007/048857；PCT公布号WO 2007/018818；PCT公布号WO 2006/018967；PCT公布号WO 2005/039570；PCT公布号WO 2000/031135；PCT公布号WO 1999/058128；美国专利号6,509,318；美国专利号6,090,383；美国专利号6,419,928；美国专利号9,927,738；美国专利号7,223,766；美国专利号6,476,031；美国专利号6,419,928；美国专利号7,030,125；美国专利号6,943,191；美国专利申请公布号2005/0245520；美国专利申请公布号2004/0147574；美国专利申请公布号2007/0066632；美国专利申请公布号2003/0028905；美国专利申请公布号2005/0032835；美国专利申请公布号2008/0108656；美国专利申请公布号2004/015781；美国专利申请公布号2004/0204431；美国专利申请公布号2006/0003929；美国专利申请公布号2007/0155722；美国专利申请公布号2004/0138188和美国专利申请公布号2009/0036382，这些专利特此通过引用整体并入。
示例性的TGF-β信号传导抑制剂包括但不限于AP-12009(TGF-β受体II型反义寡核苷酸)、乐德木单抗(Lerdelimumab)(CAT 152，抗TGF-β受体II型抗体)GC-1008(人TGF-β所有同种型的抗体)、ID11(鼠TGF-β所有同种型的抗体)、可溶性TGF-β、可溶性TGF-β受体II型、二氢吡咯并咪唑类似物(例如，SKF-104365)、三芳基咪唑类似物(例如，SB-202620(4-(4-(4-氟苯基)-5-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基)苯甲酸)和SB-203580(4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑)、RL-0061425、1,5-萘吡啶氨基噻唑和吡唑衍生物(例如，4-(6-甲基-吡啶-2-基)-5-(1,5-萘啶-2-基)-1,3-噻唑-2-胺和2-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-1,5-萘啶)、SB-431542(4-(5-苯并l[1,3]二氧杂环戊烯-5-基-4-吡啶-2-基-1H-咪唑-2-基)-苯甲酰胺)、GW788388(4-(4-(3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯甲酰胺)、A-83-01(3-(6-甲基-2-吡啶基)-N-苯基-4-(4-喹啉基)-1H-吡唑-1-硫代酰胺)、Decorin、Lefty 1、Lefty 2、卵泡抑素、Noggin、Chordin、Cerberus、Gremlin、抑制素(Inhibin)、BIO(6-溴-靛红-3'-肟)、Smad蛋白(例如，Smad6、Smad7)和胱抑素C(Cystatin C)。
TGF-β信号传导抑制剂还包括抑制TGF-β受体I型的分子。TGF-β受体I型的抑制剂包括但不限于可溶性TGF-β受体类型I；AP-11014(TGF-β受体I型反义寡核苷酸)；美替木单抗(Metelimumab)(CAT 152，TGF-β受体I型抗体)；LY550410；LY580276(3-(4-氟苯基)-5,6-二氢-2-(6-甲基吡啶-2-基)-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑)；LY364947(4-[3-(2-吡啶基)-1H-吡唑-4-基]-喹啉)；LY2109761；LY573636(N-((5-溴-2-噻吩基)磺酰基)-2,4-二氯苯甲酰胺)；SB-505124(2-(5-苯并[1,3]二氧杂环戊烯-5-基-2-叔丁基-3H-咪唑-4-基)-6-甲基吡啶)；SD-208(2-(5-氯-2-氟苯基)-4-[(4-吡啶基)氨基]蝶啶)；SD-093；KI2689；SM16；FKBP12蛋白；和3-(4-(2-(6-甲基吡啶-2-基)H-咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)喹啉-7-基氧基)-N,N-二甲基丙-1-胺。
TGF-β受体I型的抑制剂在以下参考文献中有描述：Byfield和Roberts,“LateralSignaling Enhances TGF-beta Response Complexity,”Trends Cell Biol.14:107-111(2004)；Sawyer等人,“Synthesis and Activity of New Aryl-and Heteroaryl-substituted5,6-dihydro-4H-pyrrolo[1,2-b]pyrazole Inhibitors of theTransforming Growth Factor-beta Type I Receptor Kinase Domain,”Bioorg.Med.Chem.Lett.14:3581-3584(2004)；Sawyer等人,“Synthesis and Activity ofNew Aryl-and Heteroaryl-substituted Pyrazole Inhibitors of the TransformingGrowth Factor-beta Type I Receptor Kinase Domain,”J.Med.Chem.46:3953-3956(2003)；Byfield等人,“SB-505124Is a Selective Inhibitor of Transforming GrowthFactor-beta Type I Receptors ALK4,ALK5,and ALK7,”Mol.Pharmacol.65:744-752(2004)；Gellibert等人,“Identification of 1,5-naphthyridine Derivatives as aNovel Series of Potent and Selective TGF-beta Type I Receptor Inhibitors,”J.Med.Chem.47:4494-4506(2004)；Yingling等人,“Development of TGF-betaSignalling Inhibitors for Cancer Therapy,”Nature Rev.Drug Disc.3:1011-1022(2004)；Dumont等人,“Targeting the TGF Signaling Network in Human Neoplasia,”Cancer Cell3:531-536(2003)；Tojo等人,“The ALK-5Inhibitor A-83-01Inhibits SmadSignaling and Epithelial-to-mesenchymal Transition by Transforming GrowthFactor-β,”Cancer Sci.96:791-800(2005)；PCT公布号WO 2004/026871；PCT公布号WO2004/021989；PCT公布号WO 2004/026307；PCT公布号WO 2000/012497；美国专利号5,731,424；美国专利号5,731,144；美国专利号7,151,169；美国专利申请公布号2004/00038856和美国专利申请公布号2005/0245508，这些全部整体并入本文。
在一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂包括干扰TGFβ超家族配体、受体和/或下游信号传导分子(例如，SMAD)或核靶标(例如，染色质修饰复合物和转录因子)的化合物。
在一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂可以是中和例如TGFβ配体的抗血清。
在另一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂选自由以下组成的组：TGFβ/TGFβ受体结合抑制剂、激活素或抑制素/激活素受体结合抑制剂和骨形态发生蛋白(BMP)/BMP受体结合抑制剂。
在一个特定实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是选自LY364947和GW788388的TGFβ/TGFβ受体结合抑制剂。
在另一个特定实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是选自SB431542和Alk5抑制剂II的激活素或抑制素/激活素受体结合抑制剂。激活素或抑制素/激活素受体结合的其它示例性抑制剂可以选自SB-505124、BYM388、卵泡抑素、卵泡抑素相关蛋白(FSRP)、卵泡抑素结构域(即，Fs2、Fs12、Fs123)、A-83-01、Cripto、GW788388、BAMBI和Sotatercept(参见Byfield等人,“SB-505124is a Selective Inhibitor of Transforming GrowthFactor-Beta Type I Receptors ALK4,ALK5,and ALK7,”Mol.Pharmacol.65(3):744-52(2004)；Lach-Trifilieffa等人,“An Antibody Blocking Activin Type II ReceptorsInduces Strong Skeletal Muscle Hypertrophy and Protects from Atrophy,”Mol.Cell.Biol.34(4):606-18(2014)；Zhang等人,“Inhibition of Activin SignalingInduces Pancreatic Epithelial Cell Expansion and Diminishes TerminalDifferentiation of Pancreaticβ-Cells,”Diabetes 53(8):2024-33(2004)；Harrington等人,“Structural Basis for the Inhibition of Activin Signalling byFollistatin,”EMBO J.25(5):1035–45(2006)；Tojo等人,“The ALK-5Inhibitor A-83-01Inhibits Smad Signaling and Epithelial-to-Mesenchymal Transition byTransforming Growth Factor-Beta,”Cancer Sci.96(11):790-800(2005)；Yan等人,“Human BAMBI Cooperates with Smad7 to Inhibit Transforming Growth Factor-BetaSignaling,”J.Biol.Chem.284(44):30097-104(2009)；Tan等人,“Targeted Inhibitionof Activin Receptor-Like Kinase 5Signaling Attenuates Cardiac DysfunctionFollowing Myocardial Infarction,”Am.J.Physiol.Heart Circ.Physiol.298(5):H1415-25(2010)；以及Gokoffski等人,“Activin and GDF11 Collaborate in FeedbackControl of Neuroepithelial Stem Cell Proliferation and Fate,”Develop.138(19):4131-42(2011)，其特此通过引用整体并入)。
在另一个特定实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是BMP/BMP受体结合抑制剂。示例性的BMP/BMP受体结合抑制剂是LDN193189。其它示例性BMP抑制剂可以选自由以下组成的组：头蛋白，硬化蛋白，软骨素，CTGF，卵泡抑素，gremlin，抑制素，DMH1，DMH2，Dorsomorphin，K02288，LDN212854，DM 3189，BMP-3和BAMBI(参见PCT公布号WO 2014/018691和Mohedas等人，“Development of an ALK2-Biased BMP Type I Receptor KinaseInhibitor,”ACS Chem.Biol.8(6):1291-302(2013)；Yan等人,“Human BAMBI Cooperateswith Smad7 to Inhibit Transforming Growth Factor-Beta Signaling,”J.Biol.Chem.284(44):30097-104(2009)，其全部内容通过引用并入本文)。
根据另一个实施方案，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是SMAD信号传导途径抑制剂。示例性的SMAD信号传导途径抑制剂可以选自包括但不限于以下的组：SMAD3 siRNA、SMAD 2/3siRNA、PD169316、SB203580、SB202474、Smad3(SIS3)、HSc025和SB525334的特异性抑制剂(参见Qureshi等人,“Smad Signaling Pathway is a Pivotal Component ofTissue Inhibitor of Metalloproteinases-3Regulation by Transforming GrowthFactor Beta in Human Chondrocytes,”BBA Mol.Cell Res.1783(9):1605-12(2008)；Hasegawa等人,“A Novel Inhibitor of Smad-Dependent Transcriptional ActivationSuppresses Tissue Fibrosis in Mouse Models of Systemic Sclerosis,”ArthritisRheum.60(11):3465-75(2009)；和Ramdas等人,“Canonical Transforming GrowthFactor-βSignaling Regulates Disintegrin Metalloprotease Expression inExperimental Renal Fibrosis via miR-29,”Am.J.Pathol.183(6):1885-96(2013)，其特此通过引用整体并入)。
其它示例性的SMAD信号传导途径抑制剂包括但不限于miR-100、LDN 193189、SMAD结合肽适体(例如，Trx-FoxH1、Trx-Le1、Trx-CBP、Trx-SARA)、吡非尼酮(pirfenidone)和LDN193189(参见Fu等人,“MicroRNA-100Inhibits Bone Morphogenetic Protein-InducedOsteoblast Differentiation by Targeting Smad,”Eur.Rev.Med.Pharmacol.Sci.20(18):3911-19(2016)；Boergermann等人,“Dorsomorphin and LDN-193189Inhibit BMP-Mediated Smad,p38 and Akt signalling in C2C12 Cells,”Int.J.Biochem.CellBiol.42(11):1802-7(2010)；Cui等人,“Selective Inhibition of TGF-ResponsiveGenes by Smad-Interacting Peptide Aptamers from FoxH1,Lef1 and CBP,”Oncogene24:3864-74(2005)；Zhao等人,“Inhibition of Transforming Growth Factor-Beta1-Induced Signaling and Epithelial-to-Mesenchymal Transition by the Smad-Binding Peptide Aptamer Trx-SARA,”Mol.Biol.Cell 17:3819-31(2006)；Li等人,“OralPirfenidone Protects Against Fibrosis by Inhibiting Fibroblast Proliferationand TGF-βSignaling in a Murine Colitis Model,”Biochem.Pharmacol.117:57-67(2016)；和Cook等人,“BMP Signaling Balances Murine Myeloid Potential ThroughSMAD-Independent p38MAPK and NOTCH Pathways,”Blood 124(3):393-402(2014)，其特此通过引用整体并入)。
在另一个特定实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是三胸复合物(trithorax complex)抑制剂。示例性的三胸复合抑制剂包括但不限于WDR5-0103、MI-1、MI-2、MI-2-2、MLS001171971-01、ML227、MCP-1、RBB5 siRNA和MLL1 siRNA(参见Senisterra等人,“Small-Molecule Inhibition of MLL Activity by Disruption of itsInteraction with WDR5,”Biochem.J.449(1):151-9(2013)；Cierpicki等人,“Challengesand Opportunities in Targeting the Menin-MLL Interaction,”Future Med.Chem.6(4):447-62(2014)；Lee等人,“Roles of DPY30 in the Proliferation and Motility ofGastric Cancer Cells,”PLOS One 10(7):e0131863(2015)；和Zhou等人,“CombinedModulation of Polycomb and Trithorax Genes RejuvenatesβCell Replication,”J.Clin.Invest.123(11):4849-4858(2013)，其特此通过引用整体并入)。
在另一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是多梳抑制复合物2(“PRC2”)的抑制剂。示例性的PRC2抑制剂包括GSK926、EPZ005687、GSK126、GSK343、E11、UNC1999、EPZ6438、星座化合物3(Constellation Compound 3)、EZH2 siRNA和3-去氮腺嘌呤A(参见Verma等人,“Identification of Potent,Selective,Cell-Active Inhibitorsof the Histone Lysine Methyltransferase EZH2,”ACS Med.Chem.Lett.3:1091-6(2012)；Xu等人,“Targeting EZH2 and PRC2Dependence as Novel AnticancerTherapy,”Exp.Hematol.43:698-712(2015)；Knutson等人,“A Selective Inhibitor ofEZH2 Blocks H3K27Methylation and Kills Mutant Lymphoma Cells,”Nat.Chem.Biol.8:890-6(2012)；Qi等人,“Selective Inhibition of Ezh2 by a SmallMolecule Inhibitor Blocks Tumor Cells Proliferation,”Proc.Natl Acad.Sci.USA109:21360-65(2012)；McCabe等人,“EZH2 Inhibition as a Therapeutic Strategy forLymphoma with EZH2-Activating Mutations,”Nature 492:108-12(2012)；Nasveschuk等人,“Discovery and Optimization of Tetramethylpiperidinyl Benzamides asInhibitors of EZH2,”ACS Med.Chem.Lett.5:378-83(2014)；Brooun等人,“PolycombRepressive Complex 2Structure with Inhibitor Reveals a Mechanism ofActivation and Drug Resistance,”Nature Comm.7:11384(2016)；Fiskus等人,“HistoneDeacetylase Inhibitors Deplete Enhancer of Zeste 2and Associated PolycombRepressive Complex 2Proteins in Human Acute Leukemia Cells,”Mol.Cancer Ther.5(12):3096-104(2006)；和Fiskus等人,“Combined Epigenetic Therapy with theHistone Methyltransferase EZH2 Inhibitor 3-Deazaneplanocin A and the HistoneDeacetylase Inhibitor Panobinostat Against Human AML Cells,”Blood114(13):2733-43(2009)，其据此通过引用整体并入)。该方法还可涉及使胰岛β细胞群与胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂或二肽基肽酶IV(“DPP4”)抑制剂接触。根据该实施方案，该方法可以用包含本发明的根据式(I)的化合物和胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂或DPP4抑制剂，并且任选地包含TGFβ超家族信号传导途径抑制剂的组合物进行。在另一个实施方案中，式(I)的化合物、GLP1R激动剂或DPP4抑制剂以及任选地TGFβ超家族信号传导途径抑制剂各自同时或依次接触胰岛β细胞群。
胰高血糖素样肽-1受体激动剂模拟响应于食物摄入从肠中释放的肠降血糖素激素GLP-1的作用。它们的作用包括增加胰岛素分泌，减少胰高血糖素释放，增加饱腹感和减缓胃排空。增强血液中GLP1浓度的一种替代方法是防止其受二肽基肽酶IV(“DPP4”)降解。GLP1受体激动剂和DPP4抑制剂是用于治疗2型糖尿病的最广泛使用的药物(Campbell等人,“Pharmacology,Physiology and Mechanisms of Incretin Hormone Action,”CellMetab.17:819-37(2013)；Guo X-H.,“The Value of Short-and Long-Acting Glucagon-Like Peptide Agonists in the Management of Type 2Diabetes Mellitus:Experiencewith Exenatide,”Curr.Med.Res.Opinion 32(1):61-76(2016)；Deacon等人,“DipeptidylPeptidase-4Inhibitors for the Treatment of Type 2Diabetes:Comparison,Efficacyand Safety,”Expert Opinion on Pharmacotherapy 14:2047-58(2013)；Lovshin,“Glucagon-Like Peptide-1Receptor Agonists:A Class Update for Treating Type2Diabetes,”Can.J.Diabetes41:524-35(2017)；和Yang等人,“Lixisenatide AcceleratesRestoration of Normoglycemia and Improves Human Beta Cell Function andSurvival in Diabetic Immunodeficient NOD-scid IL2rg(null)RIP-DTR MiceEngrafted With Human Islets,”Diabetes Metab.Syndr.Obes.8:387-98(2015)，其特此通过引用整体并入)。
合适的GLP1R激动剂包括，例如但不限于艾塞那肽(exenatide)、利拉鲁肽(liraglutide)、艾塞那肽LAR、他司鲁肽(taspoglutide)、利西那肽(lixisenatide)、阿必鲁肽(albiglutide)、杜拉鲁肽(dulaglutide)和索马鲁肽(semaglutide)。艾塞那肽和艾塞那肽LAR是合成的毒蜥外泌肽-4类似物，获自钝尾毒蜥(Heloderma suspectum)(蜥蜴)的唾液。利拉鲁肽是GLP-1的酰化类似物，其自身缔合成七聚体结构，从而延迟从皮下注射部位的吸收。他司鲁肽与天然GLP-1享有3％同源性，并且完全抵抗DPP-4降解。利西那肽是人GLP1R激动剂。阿必鲁肽是长效的GLP-1模拟物，抵抗DPP-4降解。杜拉鲁肽是长效的GLP1类似物。索马鲁肽是批准用于T2D的GLP1R激动剂。临床上可用的GLP1R激动剂包括，例如，艾塞那肽、利拉鲁肽、阿必鲁肽、杜拉鲁肽、利西那肽、索马鲁肽。
在本文公开的方法和组合物的一些实施方案中，GLP1R激动剂选自由以下组成的组：GLP1(7-36)、GLP1类似物、毒蜥外泌肽-4、利拉鲁肽、利西那肽、索马鲁肽以及其组合。
其它合适的GLP1激动剂包括但不限于二取代-7-芳基-5,5-双(三氟甲基)-5,8-二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮化合物及其衍生物，例如，7-(4-氯苯基)-1,3-二甲基-5,5-双(三氟甲基)-5,8-二氢嘧啶并[4,5-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(参见，例如，Nance等人,“Discovery of a Novel Series of Orally Bioavailable and CNSPenetrant Glucagon-like Peptide-1Receptor(GLP-1R)Noncompetitive AntagonistsBased on a 1,3-Disubstituted-7-aryl-5,5-bis(trifluoromethyl)-5,8-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidine-2,4(1H,3H)-dione Core,”J.Med.Chem.60:1611-1616(2017)，其特此通过引用整体并入)。
其它合适的GLP1激动剂包括GLP1R的正向别构调节剂(“PAMS”)，例如，(S)-2-环戊基-N-((1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-2-环戊基-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；2-环戊基-N-(((S)-1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；N-(((S)-1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-2-((S)-四氢呋喃-3-基)-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；N-(((R)-1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-2-((S)-四氢呋喃-3-基)-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-2-环戊基-8-氟-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-2-环戊基-8-氟-N-((1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-2-环戊基-N-(((S)-1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-2-环戊基-N-(((S)-1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-10-氯-2-环戊基-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-10-氯-2-环戊基-N-((1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-10-溴-2-环戊基-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-10-溴-2-环戊基-N-((1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-2-苯基-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-10-氰基-2-环戊基-N-((1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-2-环戊基-N-((1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-1-氧代-10-乙烯基-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-N-((1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-2-(l-甲基-lH-吡唑-4-基)-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-2-(1-甲基-lH-吡唑-4-基)-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(S)-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-l-氧代-2-(吡啶-3-基)-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；(R)-N-((l-异丙基吡咯烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-2-(吡啶-3-基)-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；N-(氮杂环丁烷-2-基甲基)-2-环戊基-10-甲基-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；以及2-环戊基-N-((1-异丙基氮杂环丁烷-2-基)甲基)-10-甲基-1-氧代-1,2-二氢吡嗪并[1,2-a]吲哚-4-甲酰胺；或其药学上可接受的盐(参见PCT公布号WO 2017/117556，其特此通过引用整体并入)。
合适的DPP4抑制剂包括但不限于西他列汀(sitagliptin)、维格列汀(vildagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)、阿格列汀(alogliptin)、替格列汀(teneligliptin)和阿拉格列汀(anagliptin)。
根据一个实施方案，“胰岛β细胞”是原代人胰岛β细胞。
在实施本文所述的这种和其它方法的一个实施方案中，接触不会诱导β细胞死亡或DNA损伤。而且，接触可诱导β细胞分化并增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
在另一个实施方案中，进行该方法以增加细胞存活率。例如，可以进行该方法以增加经过处理的细胞群相对于未处理的细胞群的细胞存活率。可替代地，可以进行该方法以减少经过处理的细胞群相对于未处理的细胞群的细胞死亡或细胞凋亡。
另一方面涉及一种包含式(I)的化合物和载体的组合物。
在一个实施方案中，所述组合物还可包含转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导途径抑制剂。
在另一个实施方案中，所述组合物还可包含胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂或二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂。
所述载体是药学上可接受的载体。
虽然可以将式(I)的化合物作为化学原料施用，但是可优选将它们作为药物组合物呈现。根据一个实施方案，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，及其一种或多种药物载体和任选地一种或多种其它治疗成分。
从与制剂的其它成分相容并且对其受者无害的意义上说，载体必须是“可接受的”。此外，尽管本文中关于术语“化合物”的陈述也包括其盐，所以叙述“一种化合物”的独立权利要求应理解为也提及其盐，如果在独立权利要求中提及化合物或其药学上可接受的盐，可以理解的是，即使在从属权利要求中没有明确提及所述盐，从属于提及此类化合物的独立权利要求的权利要求也包括该化合物的药学上可接受的盐。
制剂包括适合口服、肠胃外(包括皮下、真皮内、肌肉内、静脉内和关节内)、直肠和外用(包括真皮、颊、舌下和眼内)施用的那些制剂。最合适的途径可取决于接受者的疾患和病症。制剂可方便地以单位剂型呈现并且可通过药学领域中熟知的任何方法来制备。此类方法包括使式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(“活性成分”)与构成一种或多种辅助成分的载体缔合的步骤。一般而言，制剂通过使活性成分与液体载体或微细固体载体或两者均匀且紧密地缔合，然后在需要时使产物成型为所需制剂来制备。
适于口服施用的制剂可以如下形式呈现：离散单位，诸如胶囊、扁囊剂或片剂，各自含有预定量的活性成分；粉末或颗粒剂；水性液体或非水性液体中的溶液或混悬液；或水包油液体乳液或油包水液体乳液。活性成分也可以大丸剂、干药糖剂或糊剂形式呈现。
可以任选地用一种或多种辅助成分通过压制或模制来制备片剂。压制片剂可以通过在适合的机器中压制任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、润滑剂、表面活性剂或分散剂混合的呈自由流动形式的活性成分如粉末或颗粒剂来制备。可通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物来制备模制片剂。片剂可以任选地有包衣或刻痕，并且可以配制成提供其中的活性成分的持续、延迟或控制释放。
药物组合物可以包括“药学上可接受的惰性载体”，并且该表述意在包括一种或多种惰性赋形剂，惰性赋形剂包括例如但不限于淀粉、多元醇、制颗粒剂、微晶纤维素、稀释剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。如果需要，所公开的组合物的片剂剂型可以通过标准的水性或非水性技术进行包衣。“药学上可接受的载体”也涵盖控释手段。
药物组合物还可任选地包括其它治疗成分、抗结块剂、防腐剂、甜味剂、着色剂、调味剂、干燥剂、增塑剂、染料等。任何此类任选成分必须与式(I)的化合物相容以确保制剂的稳定性。所述组合物可以根据需要含有其它添加剂，包括例如乳糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、海藻糖、蔗糖、麦芽糖、棉子糖、麦芽糖醇、松三糖、水苏糖、乳糖醇、方辉玄质岩(palatinite)、淀粉、木糖醇、甘露醇、肌醇等及其水合物，以及氨基酸(例如丙氨酸、甘氨酸和甜菜碱)，以及肽和蛋白质(例如白蛋白)。
用作药学上可接受的载体和药学上可接受的惰性载体的赋形剂及上述其它成分的实例包括但不限于粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、抗微生物剂和包衣剂。
成人的剂量范围不同，但通常可为口服约0.005mg/天至10g/天。以离散单位提供的片剂或其它呈现形式可以方便地含有一定量的式(I)的化合物，该化合物在此类剂量下或作为多个相同的(例如含有5mg至500mg或大约10mg至200mg)的单位是有效的。施用于患者的化合物的精确量将由主治医师负责。然而，所采用的剂量将取决于许多因素，包括患者的年龄和性别、所治疗的确切病症及其严重程度。
剂量单位(例如，口服剂量单位)可以包括例如1至30mg、1至40mg、1至100mg、1至300mg、1至500mg、2至500mg、3至100mg、5至20mg、5至100mg(例如，1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg)的本文所述的化合物。
关于药物组合物及其制剂的其它信息在Remington:The Science and Practiceof Pharmacy,第20版,2000中有描述，其特此通过引用整体并入。
可以例如通过静脉内注射、肌肉内注射、皮下注射、腹膜内注射、外用、舌下、关节内(在关节内)、真皮内、经颊、眼部(包括眼内)、鼻内(包括使用套管)或通过其它途径来施用所述药剂。所述药剂可以口服施用，例如作为含有预定量的活性成分的片剂或扁囊剂、凝胶剂、丸剂、糊剂、糖浆剂、大丸剂、干药糖剂、糖浆、胶囊、粉剂、颗粒剂，作为水性液体或非水性液体中的溶液或混悬剂，作为水包油液体乳液或油包水液体乳液，经由胶束制剂(参见，例如，PCT公布号WO 97/11682，其特此通过引用整体并入)，经由脂质体制剂(参见，例如，EP专利号736299、PCT公布号WO 99/59550和PCT公布号WO 97/13500，其特此通过引用整体并入)，经由PCT公布号WO 03/094886中描述的制剂(其特此通过引用整体并入)或以一些其它形式施用。所述药剂也可以经皮施用(即，经由储库型或基质型贴剂、微针、热穿孔、皮下注射针头、离子电渗疗法、电穿孔、超声或其它形式的超声促渗、射流注射或任何前述方法的组合)(Prausnitz等人,“Current Status and Future Potential of TransdermalDrug Delivery,”Nature Reviews Drug Discovery 3:115(2004)，其特此通过引用整体并入)。所述药剂可以局部施用。
所述药剂可以栓剂形式或通过其它阴道或直肠方式施用。可以如特此通过引用整体并入的PCT公布号WO 90/07923中所述，以跨膜制剂的形式施用所述药剂。可以经由特此通过引用整体并入的美国专利号6,485,706中描述的脱水颗粒以非侵入性的方式施用所述药剂。可以如特此通过引用整体并入的PCT公布号WO 02/49621中所述，以肠溶衣药物制剂的形式施用所述药剂。可以使用特此通过引用整体并入的美国专利号5,179,079中描述的制剂在鼻内施用所述药剂。适于肠胃外注射的制剂在PCT公布号WO 00/62759中有描述，其特此通过引用整体并入。可以使用特此通过引用整体并入的美国专利申请公布号2003/0206939和PCT公布号WO 00/06108中描述的酪蛋白制剂施用所述药剂。可以使用在特此通过引用整体并入的美国专利申请公布号20020034536中描述的颗粒制剂来施用所述药剂。
单独的或与其它合适的成分组合的药剂可以通过利用几种技术的肺部途径来施用，所述技术包括但不限于气管内滴注(通过注射器将溶液递送到肺部中)、气管内递送脂质体、吹入(通过注射器或任何其它类似装置将粉末制剂施用到肺部)和气雾剂吸入。气雾剂(例如，射流式或超声雾化器、定量吸入器(“MDI”)和干粉吸入器(“DPI”))也可用于鼻内应用。气雾剂制剂是固体材料和液滴在气体介质中的稳定分散体或悬浮液，可以放入加压的可接受推进剂中，可接受推进剂诸如氢氟烷烃(HFA，即HFA-134a和HFA-227，或其混合物)、二氯二氟甲烷(或其它氯氟烃推进剂，诸如推进剂11、12和/或114的混合物)、丙烷、氮气等。肺部制剂可包括渗透增强剂(诸如脂肪酸和糖类)、螯合剂、酶抑制剂(例如，蛋白酶抑制剂)、佐剂(例如，甘胆酸盐、表面活性素、span 85和萘莫司他(nafamostat))、防腐剂(例如，苯扎氯铵或氯代丁醇)和乙醇(通常按重量计高达5％，但可以高达20％)。在气雾剂组合物中通常包含乙醇，因为它可以改善计量阀的功能，并且在一些情况下还可以改善分散体的稳定性。
肺部制剂还可以包括表面活性剂，所述表面活性剂包括但不限于胆汁盐和美国专利号6,524,557及其参考文献中描述的那些表面活性剂，该专利及其参考文献特此通过引用整体并入。美国专利号6,524,557中描述的表面活性剂，例如C8-C16脂肪酸盐、胆汁盐、磷脂或烷基糖是有利的，因为据报道它们中的一些增强了制剂中化合物的吸收。
同样合适的是包含治疗有效量的掺混有适当载体的活性化合物并适于与干粉吸入器结合使用的干粉制剂。可以添加到干粉制剂中的吸收促进剂包括美国专利号6,632,456中描述的那些吸收促进剂，其特此通过引用整体并入。特此通过引用整体并入的PCT公布号WO 02/080884描述了用于粉末表面改性的新方法。气雾剂制剂可包括美国专利号5,230,884和5,292,499；PCT公布号WO 017/8694和01/78696；以及美国专利申请公布号2003/019437、2003/0165436；和PCT公布号WO 96/40089中描述的那些气雾剂制剂(包括植物油)，这些专利特此通过引用整体并入。适于吸入的缓释制剂在美国专利申请公布号2001/0036481、2003/0232019和2004/0018243以及PCT公布号WO 01/13891、02/067902、03/072080和03/079885中有描述，这些专利特此通过引用整体并入。
包含微粒的肺部制剂在PCT公布号WO 03/015750、美国专利申请公布号2003/0008013和PCT公布号WO 00/00176中有描述，这些专利特此通过引用整体并入。包含稳定的玻璃态粉末的肺部制剂在美国专利申请公布号2002/0141945和美国专利号6,309,671中有描述，这些专利特此通过引用整体并入。其它气雾剂制剂在欧洲专利号1338272、PCT公布号WO 90/09781、美国专利号5,348,730和6,436,367、PCT公布号WO 91/04011以及美国专利号6,294,153和6,290,987中有描述，这些专利特此通过引用整体并入，描述了可以经由气雾剂或其它方式施用的基于脂质体的制剂。
用于吸入的粉末制剂在美国专利申请公布号2003/0053960和PCT公布号WO 01/60341中有描述，这些专利特此通过引用整体并入。可以如特此通过引用整体并入的美国专利申请公布号2001/0038824中所述，在鼻内施用所述药剂。
药物在缓冲盐水和类似媒介物中的溶液通常用于在雾化器中产生气雾剂。简单的雾化器按照伯努利原理(Bernoulli’s principle)操作，并采用空气气流或氧气流产生喷雾粒子。较复杂的雾化器采用超声波产生喷雾粒子。两种类型均是本领域中熟知的，并且在药学标准教材中进行了描述，诸如Joseph Barnett Sprowls,Sprowls’American Pharmacy(第7版,Lippincott 1974)和Remington:The Science and Practice of Pharmacy(第21版，Lippincott 2005)，所述教材特此通过引用整体并入。
用于产生气雾剂的其它装置采用压缩气体，通常是氢氟烃和氯氟烃，所述气体在加压容器中与药物和所有必要的赋形剂混合。这些装置同样在标准教材中也有描述，诸如Joseph Barnett Sprowls,Sprowls’American Pharmacy(第7版,Lippincott 1974)和Remington:The Science and Practice of Pharmacy(第21版,Lippincott 2005)，所述教材特此通过引用整体并入。
可将药剂掺入脂质体中以改善半衰期。该药剂也可以与聚乙二醇(“PEG”)链缀合。用于聚乙二醇化的方法及其它含PEG缀合物的制剂(即，基于PEG的水凝胶、PEG改性脂质体)可以在Harris和Chess,“Effect of Pegylation on Pharmaceuticals,”Nature ReviewsDrug Discovery 2:214-221(特此通过引用整体并入)及其中的参考文献中找到。可以经由纳米螺旋形或螺旋形递送媒介物来施用该药剂(BioDelivery Sciences International)。可以使用诸如美国专利号5,204,108中描述的制剂经粘膜(即，跨诸如阴道、眼睛或鼻子的粘膜表面)递送该药剂，该专利特此通过引用整体并入。可以如特此通过引用整体并入的PCT公布号WO 88/01165中所述，将药剂配制成微胶囊。可以使用美国专利申请公布号2002/0055496、PCT公布号WO 00/47203和美国专利号6,495,120中描述的制剂口内施用该药剂，所述专利特此通过引用整体并入。可以使用在PCT公布号WO 01/91728中描述的纳米乳液制剂来递送该药剂，所述专利特此通过引用整体并入。
另一个方面涉及一种治疗受试者的与胰岛素分泌水平不足相关的疾患的方法。该方法涉及向需要治疗与胰岛素分泌水平不足相关的疾患的受试者，在有效治疗所述受试者的所述疾患的条件下施用本文所述的化合物或组合物。
在一个实施方案中，本文所述的治疗方法在有效增加受试者的胰岛β细胞团块的条件下进行以治疗受试者胰岛素分泌水平不足。
在一个实施方案中，所述化合物或组合物可以与TGFβ超家族信号传导途径抑制剂一起施用或与之同时施用。合适的转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导途径抑制剂在上面有详细描述。
在另一个实施方案中，所述化合物或组合物可以与胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂或二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂一起施用或与之同时施用。合适的胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂或二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂在上面有详细描述。根据该实施方案，所述施用在有效引起受试者的胰岛β细胞团块协同增加的条件下进行以治疗受试者胰岛素分泌水平不足。
如本文所用，与胰岛素分泌水平不足相关的疾患意指受试者产生的胰岛素血浆水平低于维持血液中正常葡萄糖水平所需的胰岛素水平，使得患有与胰岛素分泌不足相关的疾患的受试者变成高血糖。在此类情况下，患病受试者的胰岛β细胞分泌的胰岛素水平不足以维持血液中正常浓度的葡萄糖(即，正常血糖)的存在。
根据一个实施方案，与胰岛素分泌水平不足相关的疾患之一是胰岛素抗性。胰岛素抗性是受试者的细胞对胰岛素的降糖作用变得不太敏感的疾患。肌肉和脂肪细胞中的胰岛素抗性减少了葡萄糖摄取(并且，因此减少了葡萄糖作为糖原和甘油三酯的局部储存)，而肝细胞中的胰岛素抗性导致糖原的合成和储存减少，并且无法抑制葡萄糖产生和释放到血液中。胰岛素抗性通常是指胰岛素的降糖作用降低。然而，胰岛素的其它功能也可受到影响。例如，脂肪细胞中的胰岛素抗性会降低胰岛素对脂质的正常作用，并导致循环脂质的摄取减少和储存的甘油三酯的水解增加。这些细胞中储存的脂质的动员性增加，使血浆中的游离脂肪酸升高。升高的血液脂肪酸浓度、减少的肌肉葡萄糖摄取以及增加的肝葡萄糖生成，全部促成血糖水平升高。如果存在胰岛素抗性，则胰腺需要分泌更多的胰岛素。如果没有发生这种代偿性增加，则血糖浓度增加并且发生II型糖尿病。
根据另一个实施方案，与胰岛素分泌水平不足相关的疾患之一是糖尿病。糖尿病可分为两大类疾病：I型(T1D)和II型(T2D)。术语“糖尿病”在本文中还指其中患者具有高血糖水平的一类代谢疾病，包括例如，I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成年发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着病相关糖尿病、药物诱发的糖尿病(例如，类固醇糖尿病)以及若干种形式的单基因糖尿病。
因此，在一个实施方案中，该受试者已被诊断为患有I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成年发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着病相关糖尿病、药物诱发的糖尿病或单基因糖尿病中的一种或多种。例如，该受试者已被诊断患有1型糖尿病。或者，该受试者已被诊断患有II型糖尿病。
根据另一个实施方案，与胰岛素分泌水平不足相关的疾患是代谢综合征。代谢综合征通常用于定义与II型糖尿病和动脉粥样硬化性血管疾病的患病风险增加相关的一系列异常情况。相关的疾患和症状包括但不限于空腹高血糖(II型糖尿病或空腹葡萄糖减低、葡萄糖耐量减低或胰岛素抗性)、高血压；向心性肥胖(又称为内脏肥胖、男性模式肥胖或苹果形肥胖)，这意味着超重，主要在腰部周围有脂肪沉积；HDL胆固醇降低；以及甘油三酯升高。
在一个实施方案中，所述受试者已被诊断为患有代谢综合征或胰岛素抗性。
可能与胰岛素分泌水平不足相关的其它疾患包括但不限于高尿酸血症、脂肪肝(特别是并发肥胖)发展为非酒精性脂肪肝、多囊卵巢综合征(女性)和黑棘皮病。
还可以治疗相关病症，包括但不限于与正常范围以外的血液或血浆葡萄糖水平相关的任何疾病，优选高血糖症。因此，术语“相关病症”包括葡萄糖耐量(IGT)减低、空腹血糖(IFG)减低、胰岛素抗性、代谢综合征、餐后高血糖和超重/肥胖。此类相关病症还可以通过血液和/或血浆胰岛素水平异常来表征。
根据另一个实施方案，进行本文所述的方法以治疗患有与β细胞衰竭或缺乏相关的疾患的受试者。此类疾患包括但不限于I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成年发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着病相关糖尿病、药物诱发的糖尿病或单基因糖尿病。术语“药物诱发的糖尿病”是指因使用对β细胞具有毒性的药物(例如，类固醇、抗抑郁药、第二代抗精神病药和免疫抑制药)造成的疾患。示例性的
免疫抑制药包括但不限于可的松(cortisone)家族的成员(例如，强的松(prednisone)和地塞米松(dexamethasome))、雷帕霉素(rapamycin)/西罗莫司(sirolimus)、依维莫司(everolimus)和钙调神经磷酸酶抑制剂(例如，FK-506/他克莫司(tacrolimus))。
与β细胞缺乏相关的其它疾患包括但不限于无症状低血糖、不稳定性胰岛素依赖性糖尿病、胰腺切除术、部分胰腺切除术、胰腺移植、胰岛同种异体移植、胰岛自体移植和胰岛异种移植。因此，可以进行本文所述的方法以治疗患有胰腺切除术诱发的糖尿病的受试者。在一些实施方案中，进行本文所述的方法以治疗已经进行了胰岛同种异体移植(例如，对于T1D)或胰岛自体移植(例如，对于进行针对慢性胰腺炎的胰腺切除术的受试者)的受试者。
如本文所用，无症状低血糖是糖尿病的并发症，其中患者对血糖急剧下降没有意识，因为它不能触发肾上腺素的分泌，肾上腺素的分泌会产生高血糖的特征性症状(例如心悸、出汗、焦虑)，这些症状用以警告患者血糖下降。
胰腺移植可以单独进行，在肾脏移植之后或与肾脏移植组合进行。例如，尽管进行了最佳的医疗管理，但由于仍持续存在无症状低血糖和不稳定性胰岛素依赖性糖尿病而患有严重致残且可能危及生命的并发症的患者，单独的胰腺移植可被认为在医学上是必需的。在胰岛素依赖型糖尿病患者中，在先前的肾脏移植后可以进行胰腺移植。在患有尿毒症的胰岛素依赖型糖尿病患者中，胰腺移植可以与肾脏移植联合进行。在原发性胰腺移植失败后，可以考虑进行胰腺再移植。
如本文所用，胰岛移植是其中仅分离含有胰脏的内分泌细胞(包括产生胰岛素的β细胞和产生胰高血糖素的α细胞)的朗格汉斯胰岛并将其移植到患者体内的手术。当从一个或多个人类供体胰腺中分离出朗格汉斯胰岛时，进行胰岛同种异体移植。胰岛也可以源自人胚胎干细胞或诱导多能干细胞。当从一个或多个非人类胰腺(例如，猪胰腺或灵长类胰腺)中分离出朗格汉斯胰岛时，进行胰岛异种移植。当从接受胰腺切除术(例如，对于因胆结石、药物和/或家族遗传原因引起的慢性胰腺炎)的患者的胰腺中分离出朗格汉斯胰岛并放回到同一名患者体内，例如，经由输注到门静脉，经由对网膜的腹腔镜检查，经由对胃壁的内窥镜检查或皮下经由小切口来放回时，进行胰岛自体移植。与胰腺移植一样，胰岛移植可以单独进行，在肾脏移植之后或与肾脏移植联合进行。例如，胰岛移植可以单独进行以恢复低血糖意识，提供血糖控制，和/或保护患者免受严重的低血糖事件(Hering等人,“Phase3Trial of Transplantation of Human Islets in Type 1Diabetes Complicated bySevere Hypoglycemia,”Diabetes Care 39(7):1230-1240(2016)，其特此通过引用整体并入)。
胰岛移植可与全胰腺切除术联合进行。例如，胰岛移植可在全胰腺切除术后进行，以通过保留β细胞功能来预防或改善手术诱发的糖尿病(Johnston等人,“FactorsAssociated with Islet Yield and Insulin Independence after TotalPancreatectomy and Islet Cell Autotransplantation in Patients with ChronicPancreatitis Utilizing Off-Site Islet Isolation:Cleveland Clinic Experience,”J.Chem.Endocrinol.Metab.100(5):1765-1770(2015)，其特此通过引用整体并入)。因此，胰岛移植可提供持续的长期胰岛素不依赖性。
在一些实施方案中，胰岛移植在包封装置的情况下进行，以保护移植的胰岛细胞免受宿主自身免疫反应，同时允许葡萄糖和营养物到达移植的胰岛细胞。
可以进行本文所述的方法以通过在患者体内再生胰岛β细胞而增强胰腺、胰岛同种异体移植、胰岛自体移植和/或胰岛异种移植。例如，所述方法可用于通过保留β细胞功能来预防或改善手术诱发的糖尿病，恢复低血糖意识，提供血糖控制，和/或保护患者免于严重的低血糖事件。因此，本公开的另一方面涉及一种在移植患者体内再生胰岛β细胞的方法。该方法涉及向移植患者施用式(I)的化合物，和任选地，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂、胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂和/或二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂，其中所述施用在有效再生患者体内的胰岛β细胞的条件下进行。
在另一个实施方案中，进行本文所述的方法以治疗处于患上II型糖尿病的风险中的受试者。在一个实施方案中，处于患上II型糖尿病的风险中的患者患有前驱糖尿病(pre-diabete)/代谢综合征。在另一个实施方案中，处于患上II型糖尿病的风险中的患者已经用精神药物进行治疗，所述精神药物包括但不限于用于抑郁症、强迫症(OCD)等的选择性血清素再摄取抑制剂(“SSRI”)。
在进行所述治疗方法时，在有效增加受试者的胰岛β细胞团块的条件下施用本发明的化合物或组合物，和任选地，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂、胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂和/或DPP4抑制剂，以治疗受试者的与胰岛素分泌水平不足相关的疾患。
根据一个实施方案，施用式(I)的化合物或含有式(I)的化合物和/或TGFβ超家族信号传导途径抑制剂的组合物以增加受试者的胰岛β细胞团块，从而引起受试者的胰岛素分泌水平增加。
所述化合物和/或组合物和TGFβ超家族信号传导途径抑制剂，根据一个实施方案，配制成单独的药物组合物或包含式(I)的化合物和TGFβ超家族信号传导途径抑制剂的单一药物组合物。根据一个实施方案，此类药物组合物包含治疗有效量的式(I)的化合物和/或TGFβ超家族信号传导途径抑制剂。
因此，根据一个实施方案，施用本发明的化合物和TGFβ超家族信号传导途径抑制剂的组合或组合疗法或治疗。术语“组合”或“组合疗法”或组合治疗“”意指将至少两种化合物共同施用给受试者以引起生物学效应(在这种情况下为协同效应)的治疗。在组合疗法中，所述至少两种药物可以一起或分开，同时或依次施用。只要药物在受试者中产生协同效应以改善受试者的疾患，就不需要同时施用。同样，所述至少两种药物可以通过不同的途径和方案施用。因此，尽管它们可以一起配制，但是组合中的药物也可以分开配制。
另一方面涉及一种治疗受试者的神经障碍的方法。该方法涉及向需要治疗神经障碍的受试者，在有效治疗所述受试者的所述疾患的条件下施用本发明的化合物。
在一个实施方案中，所述受试者患有糖尿病和/或已被诊断为患有唐氏综合征和神经退行性疾病中的一种或多种。
在进行治疗方法时，向受试者施用化合物可涉及以治疗有效量施用含有一种或多种化合物(即，式(I)的化合物和TGFβ超家族信号途径抑制剂)的药物组合物，所述治疗有效量意指治疗受试者的所述疾患和/或病症有效的化合物的量。此类量通常根据普通技术人员的能力范围内的许多因素变化。这些因素包括但不限于特定的受试者，以及其年龄、体重、身高、总体身体状况和病史，所用的特定化合物，以及配制该药物组合物的载体和对其选定的施用途径；治疗的时长或持续时间；和所治疾患的性质和严重程度。
施用通常涉及施用药学上可接受的剂型，药学上可接受的剂型意指本文所述的化合物的剂型，包括例如片剂、糖衣丸、粉剂、酏剂、糖浆、液体制剂(包括混悬剂)、喷雾剂、吸入剂片剂、锭剂、乳剂、溶液、颗粒、胶囊和栓剂，以及用于注射的液体制剂(包括脂质体制剂)。技术和制剂通常可以在Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack PublishingCo.,Easton,Pa.,最新版本中找到，其特此通过引用整体并入。
在进行治疗方法时，药物(即，式(I)的化合物，和任选地，TGFβ超家族信号传导途径抑制剂、胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂和/或二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂)可以以任何适当的量包含在任何合适的载体物质中。药物可以以组合物总重量的至多99重量％的量存在。组合物可以以适合于口服、肠胃外(例如，静脉内、肌肉内)、直肠、皮肤、鼻、阴道、吸入剂、皮肤(贴剂)或眼内施用途径的剂型提供。因此，组合物可以是例如片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液、凝胶剂(包括水凝胶)、糊剂、软膏、乳膏、膏药、兽用顿服药(drench)、渗透递送装置、栓剂、灌肠剂、注射剂、植入物、喷雾剂或气雾剂的形式。
可以将根据本发明的药物组合物配制成在施用后基本上立即释放活性药物或在施用后的任何预定时间或时间段释放活性药物。
控释制剂包括：(i)在很长一段时间内在体内产生基本上恒定浓度的一种或多种药物的制剂；(ii)在预定的滞后时间后，在很长一段时间内在体内产生基本上恒定浓度的一种或多种药物的制剂；(iii)在预定时间段内通过在体内维持相对恒定、有效的药物水平来持续一种或多种药物的作用并同时使与活性药物的血浆水平波动相关的不良副作用最小化的制剂；(iv)通过例如使控释组合物的空间位置处于患病组织或器官附近或患病组织或器官中来定位一种或多种药物的作用的制剂；和(v)通过使用载体或化学衍生物将药物递送至特定靶细胞类型来靶向一种或多种药物的作用的制剂。
控释制剂形式的药物的施用在下述情况中尤其优选，其中药物具有(i)狭窄的治疗指数(即，产生有害副作用或毒性反应的血浆浓度与产生疗效的血浆浓度之间的差异很小；一般而言，治疗指数(“TI”)定义为中值致死剂量(LD50)与中值有效剂量(ED50)之比)；(ii)狭窄的胃肠道吸收窗；或(iii)非常短的生物学半衰期，使得需要在一天中频繁给药以将血浆水平维持在治疗水平。
可以寻求多种策略中的任何一种来获得控释，其中释放速率超过所讨论的药物的代谢速率。可以通过适当选择各种制剂参数和成分来获得控释，包括例如各种类型的控释组合物和包衣。因此，将药物与适当的赋形剂一起配制成药物组合物，该药物组合物在施用后以受控方式释放药物(单个或多个单位的片剂或胶囊组合物、油溶液、混悬剂、乳剂、微胶囊、微球、纳米粒子、贴剂和脂质体)。
因此，施用可以口服、外用、经皮、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内、通过鼻内滴注、通过腔内或膀胱内滴注、眼内、动脉内、病变内或通过对粘膜的施加来进行。在一个实施方案中，所述施用是口服、经皮、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内或腹膜内进行的。化合物可以单独施用或与合适的药物载体一起施用，并且可以为固体或液体形式，诸如片剂、胶囊、粉剂、溶液、混悬剂或乳剂。
受试者可以是哺乳动物受试者。在一些实施方案中，受试者是人受试者。合适的人类受试者包括但不限于具有β细胞和/或胰岛素缺乏的儿童、成人和老年受试者。
在其它实施方案中，受试者可以是牛、绵羊、猪、猫、马、鼠、犬、兔等。
在一个实施方案中，所述施用步骤可使受试者中的增殖性胰岛β细胞的数量增加至少约5％、6％、7％或更多。
在一些实施方案中，所述施用增加了受试者的胰岛β细胞中葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
在这个和其它方面的一个实施方案中，化合物的名称意在指该化合物本身以及其任何药学上可接受的盐、水合物、异构体、外消旋物、酯或醚。化合物的名称意在指本身具体指定的化合物以及其任何药学上可接受的盐。
在本发明的上下文中，“治疗”意指预防性或治愈性治疗。
在一个实施方案中，术语治疗尤其指矫正，降低变化速率，或减少葡萄糖稳态受损。血液中的葡萄糖水平全天波动。葡萄糖水平通常在早晨，当天第一餐之前较低，而在餐后几小时升高。因此，术语治疗包括根据受试者的状况和日间时间通过增加或降低血糖水平来控制血糖水平，以便达到正常的血糖水平。术语治疗更具体地包括患有糖尿病或相关病症的受试者的血糖水平的暂时性或持续性降低。术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”也指胰岛素释放(例如，通过胰岛β细胞释放)的改善。
如本文所用，短语“控制血糖水平”是指对具有异常水平(即，低于或高于葡萄糖稳态正常的相应受试者的已知参考值、中值或平均值的水平)的受试者中血液或血浆葡萄糖水平进行的正常化或调节。
实施例
实施例1-用于实施例2-5的材料和方法
1H和13C NMR光谱。1H和13C NMR光谱是在Bruker DRX-600光谱仪上对于1H在600MHz下和对于13C在150MHz下获得的。TLC在由Sorbent Technologies提供的涂有二氧化硅的铝板(厚度为200μm)或涂有氧化铝(厚度为200μm)的铝板上进行的，并且柱色谱法是在配备有可变波长检测器和馏分收集器的Teledyne ISCO combiflash上，使用Teledyne ISCO提供的RediSep Rf高效二氧化硅快速柱进行的。LCMS分析是在连接到Agilent Technologies1200HPLC系统的Agilent Technologies G1969A高分辨率API-TOF质谱仪上进行的。通过电喷雾电离(ESI)以正模式将样品电离。在2.1×150mm Zorbax300SB-C18 5-μm柱上用含有0.1％甲酸的水作为溶剂A和含有0.1％甲酸的乙腈作为溶剂B以0.4mL/分钟的流速进行色谱。梯度程序如下：1％B(0-1分钟)、1-99％B(1-4分钟)和99％B(4-8分钟)。对于整个分析而言，柱温均保持在50℃。化学品和试剂购自Aldrich Co.,Alfa Aesar,Enamine,TCI USA。所有溶剂均以无水形式购自Acros Organics，无需进一步纯化即可使用。
DYRK1A结合测定法。在Life Technologies商业激酶分析服务中心测试化合物的DYRK1A结合活性，该服务中心使用基于FRET的
Figure BDA0002777618320000571
Eu激酶结合测定法。一式两份，以1000nM和300nM的浓度对化合物进行DYRK1A活性筛选。IC50通过一式两份的10点
Figure BDA0002777618320000572
Eu激酶结合测定法测定。
Β细胞增殖测定法。人胰岛从NIH/NIDDK支持的综合胰岛分发计划(IIDP)获得。如先前所述(Wang等人，2015，其特此通过引用整体并入)，首先用Accutase(Sigma,St.Louis,MO)将胰岛分散到盖玻片上。2小时后，在RPMI1640完全培养基中用化合物处理分散的人胰岛细胞96小时。然后将细胞固定并进行胰岛素和Ki67染色(Wang等人，2015，其特此通过引用整体并入)。对总胰岛素阳性细胞及Ki67和胰岛素双阳性细胞成像并计数。计数至少1000个细胞。
NFAT2T易位测定法。用表达NFAT2-GFP的腺病毒感染R7T1啮齿动物β细胞48小时，然后用10μM的不同化合物将细胞再处理24小时。对细胞成像并计数NFAT2-GFP核易位。计数至少1000个细胞。
激酶组(kinome)扫描谱。在DiscoverX针对468种激酶使用它们的专有
Figure BDA0002777618320000581
测定法，一式两份以M的单一浓度对化合物进行筛选(Fabian等人,“ASmall Molecule-Kinase Interaction Map for Clinical Kinase Inhibitors,”Nat.Biotechnol.23(3):329-336(2005)，其特此通过引用整体并入)。初级筛选结合相互作用的结果报告为“％DMSO对照”，其中值越低表示亲和力越强。
7-甲氧基-2,9-二氢-β-咔啉-1-酮(1-4)的合成。将间茴香胺(1.096mL，38.56mmol)溶于15mL浓盐酸中，冷却后向溶液中添加15mL水。将在15mL水中的亚硝酸钠(2.74g，39.71mmol)滴加到冷的悬浮液中并搅拌1小时，同时保持温度低于10℃。将该溶液添加到乙基3-羧基-2-哌啶酮(7.0g，40.88mmol)和氢氧化钾(2.63g，47.01mmol)在20mL水中的冷溶液中，该溶液已在室温下保持过夜。用饱和乙酸钠水溶液将反应混合物的pH调节至4-5。将所得混合物在室温下搅拌5小时。过滤黄色固体并用少量水和乙醇洗涤，得到6-甲氧基苯腙1-2，将其立即用于下一步。使苯腙1-2在25mL甲酸中回流1小时。用饱和碳酸钠水溶液中和该溶液，并用100mL乙酸乙酯萃取三次。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤，并将溶剂旋转蒸发，得到所需的四氢-氧代-β-咔啉2-3。在0℃下，向化合物2-3在60mL的1,4-二噁烷中的溶液中滴加DDQ(2.65g，11.7mmol)在40mL的1,4-二噁烷中的溶液，并在室温下搅拌1小时。反应完成后，向反应中添加100mL水。将产物混合物转移至分液漏斗并用乙酸乙酯(100mLX3)萃取三次。用0.1N氢氧化钠溶液(50mLX3)洗涤有机层。然后将合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色固体的所需的7-甲氧基-2,9-二氢-β-咔啉-1-酮1-4(1.91g，23％，4个步骤)。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ7.85(d,1H,J＝9Hz),7.12(d,1H,J＝4.8Hz),7.06-7.08(m,2H),6.86(d,1H,J＝6.6Hz),3.89(s,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.40,155.72,140.74,127.75,125.12,122.58,116.40,110.78,99.85,94.69,55.61；HRMS(ESI):C12H11N2O2+的m/z[M+H]+计算值：215.0815，实测值：215.0806。
1-氯-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-5)的合成。在150℃下将7-甲氧基-2,9-二氢-β-咔啉-1-酮(1.80g，8.49mmol)在POCl3(20mL)中的溶液搅拌24小时。用饱和碳酸钠水溶液中和该混合物。将该溶液转移至分液漏斗并用乙酸乙酯(50mLX3)萃取。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色固体的所需的1-氯-7-甲氧基-9H-β-咔啉1-5(1.56g，79％)。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.31(s,1H),8.19(d,1H,J＝5.4Hz),7.96(d,1H,J＝8.4Hz),7.78(s,1H,J＝5.4Hz),7.0(s,1H),6.95(m,1H),3.93(s,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ161.14,142.87,138.10,132.93,132.83,130.73,123.44,115.06,114.39,110.60,95.28,55.78；HRMS(ESI):C12H10ClN2O+的m/z[M+H]+计算值：233.0476，实测值：233.0471。
合成1-氨基-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6)的一般程序。将密封压力容器中的1-氯-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1mmol)和胺(10mmol)的溶液加热至170℃，保持24小时。通过LCMS监测反应完成后，将反应混合物浓缩并使用DCM/MeOH作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需的1-氨基-7-甲氧基-9H-β-咔啉1-6。
1-(氮杂环丁烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6a)的合成。在配备有磁力搅拌棒的螺帽压力容器中装入1-5(50mg，0.21mmol)RuPhos(1mg，1mol％)和RuPhos预催化剂(P1)(1.75mg，1mol％)。将该小瓶抽真空并用氩气回填，并用特氟隆螺帽密封。经由注射器添加LiHMDS(1M的THF溶液，2.4当量)，随后添加氮杂环丁烷(0.25mmol，1.2当量)。在90℃下将反应混合物加热96小时。使溶液冷却至室温，然后通过添加1M HCl(1mL)淬灭，用EtOAc稀释并倒入饱和NaHCO3中。用EtOAc萃取后，将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，然后浓缩并使用MeOH/DCM(10/90)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的化合物1-6a(6.5mg，12％)。收率64％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ7.98(m,1H),7.90(d,1H,J＝9Hz),7.30(m,1H),6.94(m,1H),6.89(d,1H,J＝8.4Hz),4.38(t,4H,J＝7.2Hz),3.90(s,H),2.52(m,2H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):159.83,149.05,141.87,136.84,128.30,123.52,122.33,115.48,109.56,106.39,95.22,55.61,51.82,17.42；HRMS(ESI):C15H16N3O+的m/z[M+H]+计算值：254.1288，实测值：254.1284；纯度>95％
1-(吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6b)。白色固体。收率64％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.32(s,1H),7.94(d,1H,J＝5.4Hz),7.89(d,1H,J＝8.4Hz),7.22(d,1H,J＝5.4Hz),6.93(s,H),6.88(d,1H,J＝8.4Hz),3.90(m,7H),2.07(s,4H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.64,146.72,141.52,136.88,128.60,123.63,122.09,115.48,109.43,104.82,95.28,55.58,48.39,25.35；HRMS(ESI):C16H18N3O+的m/z[M+H]+计算值：268.1444，实测值：268.1460；纯度>95％。
1-(哌啶-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6c)。白色固体。收率87％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.05(d,1H,J＝5.4Hz),7.90(d,1H,J＝8.4Hz),7.48(d,1H,J＝4.8Hz),7.04(s,1H),6.90(m,1H),3.90(s,3H),3.48(宽s,4H),1.84(宽s,4H),1.70(m,2H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.98,149.23,141.74,136.57,129.05,126.62,122.33,115.66,109.43,108.75,95.20,55.60,49.92,26.09,24.82；HRMS(ESI):C17H20N3O+的m/z[M+H]+计算值：282.1601，实测值：282.1590；纯度>95％。
1-(2-苯基吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6d)。褐色固体。收率80％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ7.98(d,1H,J＝5.4Hz),7.82(d,1H,J＝8.4Hz),7.61(s,1H),7.51(d,2H,J＝7.2Hz),7.44(t,2H,J＝7.8Hz),7.34(t,2H,J＝7.2Hz),7.24(d,1H,J＝5.4Hz),6.79(m,1H),6.49(d,1H,J＝1.8Hz),5.48(d,1H,J＝8.4Hz),4.06(m,1H),4.01(m,1H),3.82(s,3H),2.46(m,1H),2.04(m,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.75,146.24,145.92,141.60,136.78,128.85,128.39,126.45,126.28,124.43,122.15,115.49,109.43,105.63,95.25,61.35,55.62,50.48,24.53；HRMS(ESI):C22H22N3O+的m/z[M+H]+计算值：344.1757，实测值：344.1761；纯度>95％。
1-(3-苯基吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6e)。褐色固体。收率59％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(s,1H),7.98(d,1H,J＝6Hz),7.91(d,1H,J＝9Hz),7.37(m,4H),7.27(m,2H),6.91(s,1H),6.88(d,2H,J＝9Hz),4.33(t,(d,1H,J＝8.4Hz),4.09(m,1H),4.01(m,1H),3.94(t,1H,J＝8.4Hz),3.81(s,3H),3.60(m,1H),2.49(m,1H),2.24(m,1H)；13C-NMR(150MHz,CDCl3):δ161.19,143.50,141.54,139.47,130.03,128.60,126.97,121.83,114.64,112.61,104.69,95.30,55.53,50.12,43.47,32.24；HRMS(ESI):C22H22N3O+的m/z[M+H]+计算值：344.1757，实测值：344.1750；纯度>95％。
1-(2-苄基吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6f)。褐色固体。收率65％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.05(d,1H,J＝5.4Hz),7.91(d,2H,J＝9Hz),7.28(m,5H),6.88(m,2H),4.68(s,1H),3.90(m,5H),3.22(m,1H),2.79(m,1H),1.97(m,3H),1.84(m,1H)；13C-NMR(150MHz,CDCl3):δ160.66,142.04,138.44,129.63,128.26,126.31,121.94,115.48,110.80,105.33,94.95,60.45,55.54,50.04,39.36,29.77,23.65；HRMS(ESI):C23H24N3O+的m/z[M+H]+计算值：358.1914，实测值：358.1900；纯度>95％。
1-(3-苄基吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6g)。褐色固体。收率71％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.14(s,1H),7.96(d,1H,J＝5.4Hz),7.90(d,2H,J＝9Hz),7.32(m,2H),7.25(m,4H),6.93(s,1H),6.87(d,1H,J＝5.4Hz),4.01(m,2H),3.90(m,4H),1.08(t,1H,J＝9Hz),2.87(m,1H),2.81(m,1H),2.69(m,1H),2.17(m,1H),1.83(m,1H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.62,146.71,141.52,141.15,137.03,129.15,128.76,126.38,123.56,122.08,115.49,109.41,104.81,95.29,55.58,53.80,47.95,31.18；HRMS(ESI):C23H24N3O+的m/z[M+H]+计算值：358.1914，实测值：358.1901；纯度>95％。
1-(2-(2-氯苯基)吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6h)。黄色固体。收率77％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ7.98(d,1H,J＝5.4Hz),7.83(d,1H,J＝8.4Hz),7.52(m,3H),7.25(m,3H),6.80(m,1H),6.59(d,1H,J＝2.4Hz),5.80(d,1H,J＝8.4Hz),4.10(m,2H),3.84(s,3H),2.54(m,1H),2.04(m,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.82,145.77,142.92,141.72,136.88,131.91,129.73,129.08,128.20,127.30,124.39,122.17,115.53,109.47,105.73,95.33,59.41,55.62,50.31,32.65,24.60；HRMS(ESI):C22H21ClN3O+的m/z[M+H]+计算值：378.1368，实测值：378.1366；纯度>95％。
1-(2-(3-氯苯基)吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6i)。黄色固体。收率68％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ7.96(d,1H,J＝5.4Hz),7.86(d,1H,J＝8.4Hz),7.69(s,1H),7.39(m,1H),7.37(d,1H,J＝7.8Hz),7.33(t,1H,J＝7.2Hz),7.28(m,2H),6.83(m,1H),6.65(m,1H),5.51(d,1H,J＝8.4Hz),4.07(m,2H),3.84(s,3H),2.46(m,1H),2.04(m,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.84,148.77,146.08,141.72,136.73,133.18,130.33,129.03,126.48,125.14,122.20,115.53,109.51,105.94,95.30,61.51,55.62,50.60,35.23,24.75；HRMS(ESI):C22H21ClN3O+的m/z[M+H]+计算值：378.1368，实测值：378.1377；纯度>95％。
1-(2-(4-氯苯基)吡咯烷-1-基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(1-6j)。黄色固体。收率43％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ7.97(d,1H,J＝5.4Hz),7.84(d,1H,J＝8.4Hz),7.66(s,1H),7.44(d,2H,J＝8.4Hz),7.38(d,2H,J＝8.4Hz),7.27(m,1H),6.83(m,1H),6.64(m,1H),5.50(d,1H,J＝8.4Hz),4.06(m,2H),3.84(s,3H),2.47(m,1H),2.04(m,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.80,146.08,144.98,141.66,136.78,130.85,128.95,128.33,124.47,122.16,115.51,109.46,105.81,95.28,60.99,55.61,50.49,35.26,24.63；HRMS(ESI):C22H21ClN3O+的m/z[M+H]+计算值：378.1368，实测值：378.1365；纯度>95％。
β-咔啉-N-氧化物(2-1)的合成。向骆驼蓬碱(500mg，2.35mmol)在8mL氯仿中的溶液中，添加3-氯过氧苯甲酸(1.22g，7.05mmol)，并使其回流24小时。将反应混合物浓缩并使用DCM/MeOH作为洗脱剂，通过快速色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物β-咔啉-N-氧化物2-1(255mg，47％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.60(s,1H),8.04(d,1H,J＝6.6Hz),8.00(d,1H,J＝8.4Hz),7.86(d,1H,J＝6.6Hz),6.97(s,1H),6.85(m,1H),3.85(s,3H),2.61(s,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ159.82,143.39,136.55,132.79,131.31,122.35,119.13,115.62,113.67,109.57,95.18,55.78,13.00；HRMS(ESI):C13H13N2O2+的m/z[M+H]+计算值：229.0972，实测值：229.0962；纯度>95％。
1-羟甲基-7-甲氧基-9H-β-咔啉(2-2)的合成。在0℃下将三氟乙酸酐(2.20mL，15.87mmol)添加到β-咔啉-N-氧化物(2-1)(724mg，3.17mmol)和CH2Cl2(20mL)中的搅拌混合物中。搅拌30分钟后，使混合物回流12小时。通过TLC监测反应完成后，将混合物浓缩并使用DCM/MeOH作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的1-羟甲基-7-甲氧基-9H-β-咔啉2-2(358mg，49％)。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.39(d,1H,J＝6Hz),8.27(d,1H,J＝6Hz),8.22(d,1H,J＝9Hz),7.15(s,1H),7.06(m,1H),5.31(s,2H),3.96(s,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ163.11,145.98,140.04,133.09,131.95,129.49,124.80,115.17,113.83,112.77,94.96,58.27,56.10；HRMS(ESI):C13H13N2O2+的m/z[M+H]+计算值：229.0972，实测值：229.0967；纯度>95％。
3-溴-2-羟基亚氨基-丙酸乙酯(2-3)的合成。在室温下，将盐酸羟胺(1.81g，25.63mmol)添加到溴丙酮酸乙酯(5.01g，25.63mmol)在氯仿(50mL)和甲醇(70mL)中的搅拌溶液中。将反应物搅拌18小时并减压浓缩。将粗制物溶于二氯甲烷(300mL)中，并用0.1N盐酸和盐水洗涤。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到呈白色固体的3-溴-2-羟基亚氨基-丙酸乙酯2-3(4.36g，81％)。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ10.08(bs,1H),4.38(q,J＝7.2Hz,2H),4.27(s,2H),1.39(t,J＝7.2Hz,3H)；ESI:m/z[M+H]+209.97。
3-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-丙酸乙酯(2-4)的合成。在室温下将3-溴-2-羟基亚氨基-丙酸乙酯2-2(1.75g，8.35mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液缓慢滴加到6-甲氧基吲哚(1.23g，8.35mmol)和Na2CO3(4.86g，45.92mmol)在CH2Cl2(20mL)中的搅拌混合物中。将混合物搅拌48小时，通过硅藻土过滤，浓缩，并使用乙酸乙酯\己烷作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的3-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙酸乙酯2-4(800mg，34％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ7.91(s,1H),7.65(d,1H,J＝12Hz),7.00(s,1H),6.81(m,1H),4.05(s,2H),4.26(m,2H),1.31(t,3H,J＝6Hz)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ164.20,155.94,150.66,137.05,122.75,121.74,119.65,109.07,94.78,61.15,55.53,20.47,14.36；HRMS(ESI):C14H17N2O4+的m/z[M+H]+计算值：227.1183，实测值：227.1192；纯度>95％。
2-氨基-3-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-丙酸乙酯(2-5)的合成。在30分钟内，将锌粉(3.11g，47.62mmol)分批添加到2-4(1.64g，5.95mmol)在乙酸(20mL)中的搅拌溶液中。添加后，将混合物在室温下搅拌过夜。通过LCMS监测反应完成后，将混合物通过硅藻土过滤，用乙酸(20mL)洗涤并浓缩。用饱和碳酸氢钠水溶液中和残余物并且用乙酸乙酯(30mLX3)萃取。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤，浓缩，得到呈白色固体的2-氨基-3-(6-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-丙酸乙酯2-5(1.5g，96％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.64(s,1H),7.35(d,1H,J＝8.4Hz),6.96(s,1H),6.82(s,1H),6.63(m,1H),3.99(m,2H),3.74(s,3H),3.56(m,1H),2.86-2.97(m,2H),1.90(s,1H),1.10(t,3H,J＝7.2Hz)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ155.85,137.21,122.60,119.31,110.32,108.92,94.81,60.28,55.60,31.29,14.42；HRMS(ESI):C14H19N2O3+的m/z[M+H]+计算值：263.1390，实测值263.1399；纯度>95％。
1-甲基-7-甲氧基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-甲酸乙酯(2-7)的合成。在0℃下，向2-4(1g，3.81mmol)和乙醛(40％的水溶液，0.46mL，4.19mmol)在15mL二氯甲烷中的混合物中滴加0.4mL三氟乙酸。然后，将反应混合物在室温下搅拌18小时。通过TLC监测反应完成后，将反应混合物转移至分液漏斗中，并用50mL饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到呈白色固体的2-6，其无需纯化即可用于下一步。将2-6(1.04g，3.81mmol)和硫(248mg，7.63mmol)在二甲苯(150mL)中的混合物加热回流12小时。然后将混合物减压浓缩并使用DCM\/MeOH作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈褐色固体的1-甲基-7-甲氧基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-甲酸乙酯2-7(755mg，75％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.49(s,1H),9.10(s,1H),8.62(d,1H,J＝8.4Hz),7.54(s,1H),7.38(m,1H),4.84(q,2H,J＝7.2Hz),4.33(s,3H),3.22(s,3H),1.82(t,1H,J＝6.6Hz)；13C-NMR(150MHz,d6-Acetone):δ166.31,161.50,143.09,141.66,137.98,136.84,128.25,123.03,116.01,115.32,110.61,95.33,60.72,55.36,19.94,14.30；HRMS(ESI):C16H17N2O3+的m/z[M+H]+计算值：185.1234，实测值：285.1237；纯度>95％。
(1-甲基-7-甲氧基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-3-基)甲醇(2-8)的合成。在0℃下向酯2-7(160mg，0.56mmol)在THF(15mL)中的溶液中分批添加LiAlH4(44mg，1.17mmol)，然后将混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应物用水淬灭并在室温下搅拌2小时，将浆液过滤，将滤饼用二氯甲烷洗涤，将滤液浓缩，得到呈白色固体的2-8(135mg，91％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.31(s,1H),8.05(d,1H,J＝8.4Hz),7.83(s,1H),6.98(s,1H),6.82(d,1H,J＝8.4Hz),5.25(s,1H),4.64(d,2H,J＝5.4Hz)3.86(s,3H),2.68(s,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ160.43,150.39,142.71,140.30,133.87,128.53,122.95,115.41,109.31,108.51,94.99,65.02,55.71,20.56；HRMS(ESI):C14H15N2O2+的m/z[M+H]+计算值：243.1128，实测值：243.1131；纯度>95％。
1-甲基-3-甲基-7-甲氧基-9H-β咔啉(2-9)的合成。向2-8(20mg，0.082mmol)和PdCl2(4mg，0.016mmol)在EtOH(1mL)中的溶液中添加Et3SiH(0.201mL，1.28mmol)，并将混合物在90℃下搅拌5小时。通过TLC监测反应完成后，将催化剂经硅藻土过滤，并将滤液蒸发。使用乙酸乙酯作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化粗制反应混合物，得到呈白色固体的2-9(5mg，27％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.01(d,1H,J＝7.8Hz),7.66(s,1H),6.96(s,1H),6.81(d,1H,J＝7.8Hz),3.86(s,3H),2.68(s,3H),2.53(s,3H)。
1-乙酰基-7-甲氧基-9H-β-咔啉(3-2)的合成。在0℃下向6-甲氧基色胺(300mg，1.57mmol)和丙酮醛(45％的水溶液，0.34mL，1.89mmol)在6mL二氯甲烷中的混合物中，滴加0.157mL的三氟乙酸。然后，将反应混合物在室温下搅拌18小时。通过TLC监测反应完成后，将反应混合物转移至分液漏斗中，并用50mL饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到呈黄色固体的3-1，其无需纯化即可用于下一步。在室温下将3-1(1.57mmol)和KMnO4(744mg，4.71mmol)在THF(5mL)中的混合物搅拌12小时。然后将混合物减压浓缩并使用乙酸乙酯作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈褐色固体的1-乙酰基-7-甲氧基-9H-β-咔啉3-2(60mg，16％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.75(s,1H),8.45(d,1H,J＝5.4Hz),8.30(d,1H,J＝4.8Hz),8.16(d,1H,J＝8.4Hz),7.31(m,1H),6.92(m,1H),3.86(s,3H),2.77(s,3H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ201.88,161.20,144.06,138.14,135.78,134.69,131.58,123.18,118.88,113.89,110.24,96.40,55.76,26.32；HRMS(ESI):C14H13N2O2+的m/z[M+H]+计算值：241.0972，实测值：241.0966；纯度>95％。
1-(1-羟乙基)-7-甲氧基-9H-β-咔啉(3-3)的合成。向3-2(12mg，0.05mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中添加NaBH4(4mg，0.1mmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应物用水淬灭，转移至分液漏斗中并用乙酸乙酯萃取。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并旋转蒸发，得到呈黄色固体的所需化合物3-3(6mg，49％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.09(s,1H),8.17(d,1H,J＝4.8Hz),8.05(d,1H,J＝8.4Hz),7.86(d,1H,J＝4.8Hz),7.17(m,1H),6.82(m,1H),5.67(d,1H,J＝4.8Hz),5.16(m,1H),3.85(s,3H),1.53(d,3H,J＝6Hz)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ160.46,148.37,142.56,137.25,132.78,128.93,122.66,114.66,113.15,109.32,95.46,69.59,55.67,23.36；HRMS(ESI):C14H15N2O2+的m/z[M+H]+计算值：243.1128，实测值：243.1131；纯度>95％。
实施例2-选定的骆驼蓬碱类似物的化学合成
1-位骆驼蓬碱类似物按照图1概述的反应序列合成。间茴香胺进行经典重氮化，形成相应的芳基重氮盐，将芳基重氮盐与3-羧基-2-哌啶酮偶联产生芳基腙1-2(Luis等人,“The Fischer Indole Synthesis of 8-Methyl-5-Substituted-1-Oxo-β-Carbolines:ARemarkable High Yield of a[1,2]-Methyl Migration,”Tetrahedron 47(9):1737-44(1991)，其特此通过引用整体并入)。在甲酸的存在下，将所得的芳基腙进行费舍尔吲哚环化(Fisher indole cyclization)，得到1,2,3,4-四氢-1-氧代-β-咔啉1-3(Luis等人，“TheFischer Indole Synthesis of8-Methyl-5-Substituted-1-Oxo-β-Carbolines:ARemarkable High Yield of a[1,2]-Methyl Migration,”Tetrahedron 4(9):1737-44(1991)，其特此通过引用整体并入)。使用DDQ氧化1-3，然后用三氯氧磷进行氯化以79％的收率生成1-氯-β-咔啉1-5(Roggero等人,“Efficient Synthesis of Eudistomin U andEvaluation of its Cytotoxicity,”Bioorg.Med.Chem.Lett.24(15):3549-3551(2014)和Thompson等人,“Synthesis and Evaluation of 1-Amino-6-Halo-β-Carbolines asAntimalarial and Antiprion Agents,”ChemMedChem 7(4):578-586(2012)，其特此通过引用整体并入)。最后，通过在170℃下与过量的纯胺一起加热，对1-氯-前体1-5进行胺化来制备1-氨基-β-咔啉1-6(10种类似物)，收率为43-87％(Thompson等人,“Synthesis andEvaluation of 1-Amino-6-Halo-β-Carbolines as Antimalarial and AntiprionAgents,”ChemMedChem 7(4):578-586(2012)，其特此通过引用整体并入)。类似物1-6a是通过Pd催化1-5胺化而合成的(Henderson等人，“Palladium-Catalyzed Amination ofUnprotected Halo-7-Azaindoles,”Org.Lett.12(20):4438-4441(2010)，其特此通过引用整体并入)。
使用图2所示的顺序合成1-羟甲基和3-羟甲基取代的-β-咔啉。用间-CPBA氧化骆驼蓬碱生成相应的N-氧化物2-1，其随后在三氟乙酸酐的存在下进行Boekelheide重排，以49％的收率得到呈白色固体的所需的1-羟甲基β-咔啉2-2(Lin等人，“A Facile Synthesisof 3-Substituted 9H-Pyrido[3,4-b]Indol-1(2H)-One Derivatives from 3-Substitutedβ-Carbolines,”Molecules 15:5680-5691(2010)和Fontenas等人，“TheBoekelheide Reaction:Trifluoroacetic Anhydride as a Convenient AcylatingAgent,”Synth.Commun.25(5):629-33(1995)，其特此通过引用整体并入)。可替代地，在室温下在碳酸钠的存在下，使6-甲氧基吲哚与由3-溴-2-氧代丙酸乙酯制备的肟2-3反应，得到吲哚-肟2-4(Park等人，“Synthesis and Activity of Tryptophan SulfonamideDerivatives as Novel Non-Hydroxamate TNF-αConverting Enzyme(TACE)Inhibitors,”Bioorg.Med.Chem.17(11):3857-3865(2009)，其特此通过引用整体并入)。然后用锌粉在乙酸中对2-4进行肟还原，提供色氨酰酯2-5，将其与乙醛进行Pictet-Spengler环化，提供1-甲基-3-羟甲基四氢-β-咔啉2-6(Park等人，“Synthesis and Activity of TryptophanSulfonamide Derivatives as Novel Non-Hydroxamate TNF-αConverting Enzyme(TACE)Inhibitors,”Bioorg.Med.Chem.17(11):3857-3865(2009)和Song等人，Synthesis andAntiviral and Fungicidal Activity Evaluation ofβ-Carboline,Dihydro-β-carboline,Tetrahydro-β-carboline Alkaloids,and Their Derivatives,”J.Agric.Food Chem.62(5):1010-1018(2014)，其特此通过引用整体并入)。将化合物2-6芳香化，然后进行酯还原，得到呈白色固体的最终化合物2-8(Song等人，Synthesis andAntiviral and Fungicidal Activity Evaluation of β-Carboline,Dihydro-β-carboline,Tetrahydro-β-carboline Alkaloids,and Their Derivatives,”J.Agric.Food Chem.62(5):1010-1018(2014)，其特此通过引用整体并入)。
图3中概述了1-(1-羟基)乙基和1-乙酰基骆驼蓬碱类似物的合成。6-甲氧基色胺在5％TFA的存在下与丙酮醛进行Pictet-spengler环化，提供1-乙酰基-7-甲氧基-四氢-β-咔啉3-1。将化合物3-1芳香化，然后进行乙酰基的还原，以49％的收率得到呈白色固体的1-(1-羟乙基)骆驼蓬碱类似物3-3。
实施例3-选定的骆驼蓬碱类似物的结构-活性关系研究(SAR)
向骆驼蓬碱的1-位引入结构修饰，以鉴定新的基于骆驼蓬碱的DYRK1A抑制剂，该抑制剂可与GLP-1激动剂连接以进行β细胞靶向递送。按照图1-2中描述的路线，总共合成15种骆驼蓬碱类似物。使用基于FRET的LanthaScreen结合测定法(Life Technologies)，最初在1000nM和300nM下筛选这些类似物的DYRK1A结合活性。使用十种连续三倍稀释液(一式两份)滴定在300nM下显示出≥50％抑制作用的那些化合物，以测定IC50。
研究了在骆驼蓬碱的1-位上的环烷基胺对DYRK1A结合的效应。首先，合成在1-位具有氮杂环丁烷(1-6a)、吡咯烷(1-6b)和哌啶(1-6c)取代基的三种类似物。化合物1-6a显示出最佳活性，IC50为159nM。然而，该化合物的活性比骆驼蓬碱低5倍。将环的大小增加到5-元(吡咯烷，1-6b)和6-元(哌啶，1-6c)使DYRK1A抑制活性降低，DYRK1A IC50分别为264nM和1500nM。从市售的在骆驼蓬碱1-位的吡咯烷上带有取代基的构建组元(building block)合成7种骆驼蓬碱类似物。如预测的，吡咯烷环上的取代模式对DYRK1A抑制活性非常敏感。在这些类似物中，1-6d和1-6f显示出有效的DYRK1A抑制活性(表1)。与3-取代的类似物相比，2-取代的吡咯烷类似物是更有效的抑制剂。具有2-苯基吡咯烷取代基的化合物1-6d显示出的DYRK1A IC50为123nM，与1-6a(氮杂环丁烷)相当，并且比相应的类似物1-6b提高了2倍(表1)。在吡咯烷1-骆驼蓬碱类似物的2-苯基上引入3-氯基团对于活性而言是有害的(化合物1-6i，在300nM下抑制作用为22％)(表1)。
表1.实施例的DYRK1A抑制作用
Figure BDA0002777618320000701
a＝使用十种连续三倍稀释液(一式两份)测定IC50值
nd＝未测定
如表1所示，用氯原子仅取代骆驼蓬碱的1-甲基基团(1-5)，与IC50为8.81nM的骆驼蓬碱相比，使DYRK1A抑制作用显著地提高3倍。还研究了在骆驼蓬碱的1-位引入极性基团(如羟基、羟甲基和乙酰基)的效应。用羟基取代基置换1-甲基明显地降低了DYRK1A抑制作用，致使该化合物失去活性。相比之下，引入1-羟甲基基团(2-2)显示出有效的DYRK1A抑制作用，IC50为55nM，与骆驼蓬碱相当但效力稍弱，并且比1-(2-苯基吡咯烷-1-基)骆驼蓬碱类似物1-6d提高2倍(表1)。如图4B所示，合成在骆驼蓬碱的3-咔啉位置具有羟甲基基团的一种形式的化合物2-2。3-羟甲基取代的类似物2-8显示出的IC50与化合物2-2相当(表1)。去除羟基(3-甲基咔啉类似物)的IC50＝971nM，表明了2-8中羟基的重要性。
向骆驼蓬碱3-3的1-羟甲基取代基引入α甲基导致在筛选浓度下DYRK1A结合活性完全丧失，而平面的1-乙酰基取代的类似物(3-2)的IC50(66.7nM)与化合物2-2和2-8相似。这表明2-2的1-羟甲基基团占据的空间有限，很可能在任何一种结合模式下该有限空间都无法容纳更多的空间体积。
实施例4-人β细胞增殖测定
评估八种化合物1-5、1-6a、1-6b、1-6d、1-6f、2-2、2-8和3-2(显示出DYRK1A抑制IC50<250nM(表1))诱导体外人β细胞增殖的能力。在骆驼蓬碱类似物中，如通过胰岛素细胞的KI67标记所测量的，化合物2-2、2-8和1-5在10μM下表现出与骆驼蓬碱相当的非常良好的人β细胞增殖(图4A-4B)(Wang等人，2015，其特此通过引用整体并入)。在骆驼蓬碱1-位具有乙酰基取代基的化合物3-2尽管其IC50与2-2和2-8相当(表1)，但在10μM显示出β-细胞增殖降低(表2)。然而，当在30μM的较高浓度下测试该化合物时，观察到的增殖在与骆驼蓬碱相当的范围内。化合物2-2和2-8均以剂量依赖性方式引起增殖(图4C-4D)，而化合物2-8与2-2相比在较低的剂量下显示出优良的人β细胞增殖。与在高于10μM的剂量下会引起β细胞毒性的骆驼蓬碱不同，化合物2-2和2-8即使在30μM下也不会引起毒性。这表明这些化合物可能在体内/体外以更高的浓度(>10μM)施用以使β-细胞增殖，并且细胞毒性的潜力降低。化合物2-2和2-8还驱动NFAT2易位至细胞核，如对骆驼蓬碱所观察到的那样。这些数据表明，这些化合物像骆驼蓬碱一样通过以下方式驱动β细胞增殖：诱导NFAT易位到细胞核，从而可能允许接近基因的启动子，启动子随后驱动人β细胞增殖(图4E-4F)。
不幸的是，1-氨基取代的骆驼蓬碱类似物1-6a、1-6b、1-6d和1-6f没有显示出任何β细胞增殖，尽管显示出DYRK1A抑制作用<200nM，这可以指示β-细胞增殖的DYRK1A效力阈值。一种替代性的解释是，一些β-细胞增殖降低的化合物可以除了DYRK1A以外还靶向其它抗增殖激酶。
表2.示例性骆驼蓬碱类似物的β细胞增殖
Figure BDA0002777618320000721
实施例5-激酶组扫描谱
为了了解化合物子集的激酶选择性，在10μM浓度下对468种激酶进行化合物2-2和骆驼蓬碱的激酶组分析(表3，如下所示活性<20％)。在10μM的筛选浓度下，除DYRK1A以外，骆驼蓬碱还抑制16种激酶(剩余<20％活性)。化合物2-2与骆驼蓬碱相比表现出更明显的激酶组谱，在10μM下对DYRK1B、CSNK1G2、CSNK2A1、HIPK2、HIPK3、IRAK1和VPS3没有抑制作用(表3)。此外，与骆驼蓬碱相比，在筛选浓度下，它对PIK4CB显示出比骆驼蓬碱更高的亲和力。更具选择性的激酶组谱表明，与骆驼蓬碱相比，对于化合物2-2而言已经实现选择性的改善。
表3.化合物2-2和骆驼蓬碱的激酶组扫描a
Figure BDA0002777618320000741
a在10μM下针对468种激酶对化合物进行筛选，并且初级筛选结合相互作用的结果报告为“％DMSO对照”，其中值越低表示亲和力越强。
b≤10。
c11≤20。
实施例6-实施例1-5的讨论
实施例1-4描述了新的骆驼蓬碱类似物的DYRK1A抑制作用和β细胞增殖的结构-活性关系。合成几种1-氨基骆驼蓬碱类似物(1-6a至1-6j)，以研究它们对DYRK1A激酶结合和人β细胞增殖的效应。大多数化合物在10uM的筛选浓度下表现出降低的DYRK1A抑制活性，骆驼蓬碱类似物1-6a、1-6b、1-6d除外。与骆驼蓬碱相比，这些类似物显示出DYRK1A抑制活性降低5至9倍。
相比之下，骆驼蓬碱类似物2-2、2-8和3-2(各自带有小的极性基团，例如羟甲基或乙酰基)表现出有效的DYRK1A抑制作用，IC50在49-67nM的范围内，活性是1-氮杂环丁烷骆驼蓬碱类似物1-6b的2倍。然而，引入直接附接的1-羟基取代基对于DYRK1A抑制作用是有害的。1-氯取代的骆驼蓬碱类似物显著改善DYRK1A抑制作用，是最有效的化合物，其IC50为8.8nM。在针对DYRK1A的IC50<250nM的8种化合物(1-5、1-6a、1-6b、1-6d、1-6f、2-2、2-8、3-2)中，1-5、2-2、2-8和3-2在相似或降低的浓度下表现出与骆驼蓬碱相当的人β细胞增殖。骆驼蓬碱类似物2-2和2-8对诱导人β细胞增殖最有效，表明在骆驼蓬碱的1-位和3-位引入极性基团(如羟甲基)通过改善激酶选择性来改善β细胞增殖。1-氨基骆驼蓬碱类似物均未引起任何增殖。化合物2-2针对468种激酶的激酶组扫描显示，与骆驼蓬碱相比，它表现出更明显的激酶组谱。这些数据表明改善骆驼蓬碱支架以改善激酶选择性的潜力，从而在体外在较低的浓度下导致β细胞增殖，可能导致更安全的脱靶特性。这些结果显示成功修饰了骆驼蓬碱以鉴定β细胞增殖能力改善的新型激酶选择性DYRK1A抑制剂2-8。
实施例7-实施例8的材料和方法
1-甲基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-7-醇(10-1)的合成。将骆驼蓬碱(1.0g，4.02mmol)在冰乙酸(16mL)和48％氢溴酸溶液(20mL)中的溶液加热回流10小时。冷却至室温后，用NaHCO3饱和水溶液将混合物调节至pH 8。过滤黄色浆液，并用水洗涤滤饼，得到呈白色固体的骆驼蓬醇10-1(0.91g，99％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.24(s,1H),9.72(s,1H),8.11(d,J＝5.2Hz,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.75(d,J＝5.2Hz,1H),6.90(d,J＝1.2Hz,1H),6.69(dd,J＝8.4Hz,1H,),2.69(s,3H)；MS(ESI)m/z 199.08(M+H)+。
合成10-2的一般程序。在60℃下将骆驼蓬醇10-1(2.02mmol)和碳酸铯(1.5当量)在DMF(7mL)中的溶液搅拌1小时。向该溶液中添加烷基溴(1.5当量)并在50℃下搅拌12小时。通过TLC确认反应完成后，将反应混合物用水稀释，转移至分液漏斗中，并用乙酸乙酯(50mLX2)萃取。有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发并通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物10-2。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙酸甲酯(10-2a)。白色固体。收率59％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.96(d,J＝9Hz,1H),7.75(d,J＝5.4Hz,1H),6.96(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(m,1H),4.79(s,2H),3.80(s,3H),2.73(s,3H)；MS(ESI)m/z271.18(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丙酸甲酯(10-2b)。白色固体。收率44％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),6.92(s,1H),6.79(m,1H),4.84(t,J＝7.2Hz,2H),3.57(s,3H),2.98(s,3H),2.80(t,J＝7.2Hz,2H)；MS(ESI)m/z 285.6(M+H)+。
4-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丁酸甲酯(10-2c)。白色固体。收率68％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(d,J＝5.4Hz,1H),7.02(s,1H),6.84(d,J＝9Hz,1H),4.11(t,J＝6Hz,2H),3.68(s,3H),2.75(s,3H),2.56(t,J＝7.2Hz,2H),2.13(t,J＝6.6Hz,2H)；MS(ESI)m/z 299.8(M+H)+。
5-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)戊酸甲酯(10-2d)。白色固体。收率50％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(d,J＝6Hz,1H),7.02(d,J＝1.8Hz,1H),6.85(m,1H),4.10(t,J＝6Hz,2H),3.65(s,3H),2.75(s,3H),2.45(t,J＝7.2Hz,2H),1.85(m,2H)；MS(ESI)m/z 313.6(M+H)+。
6-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)己酸甲酯(10-2e)。白色固体。收率50％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝9Hz,1H),7.78(d,J＝5.4Hz,1H),7.01(d,J＝2.4Hz,1H),6.83(m,1H),4.06(t,J＝6Hz,2H),3.65(s,3H),2.75(s,3H),2.38(t,J＝7.8Hz,2H),1.84(m,2H),1.70(m,2H),1.54(m,2H)；MS(ESI)m/z 327.5(M+H)+。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙酸叔丁酯(10-2f)。白色固体。收率42％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.49(s,1H),8.15(d,J＝5.4Hz,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝5.4Hz,1H),6.93(d,J＝2.4Hz,1H),6.83(m,1H),4.77(s,2H),2.73(s,3H),1.45(s,9H)；MS(ESI)m/z 313.1(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丙酸叔丁酯(10-2g)。白色固体。收率32％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ9.82(s,1H),8.12(d,J＝4.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝4.8Hz,1H),6.93(d,J＝1.2Hz,1H),6.74(m,1H),4.72(t,J＝7.2Hz,2H),2.92(s,3H),2.62(t,J＝7.2Hz,2H),1.24(s,9H)；MS(ESI)m/z 327.1(M+H)+。
4-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丁酸叔丁酯(10-2h)。白色固体。收率55％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.37(s,1H),8.13(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝9Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),6.98(d,J＝1.8Hz,1H),6.83(m,1H),4.08(t,J＝6.6Hz,2H),2.71(s,3H),2.41(t,J＝7.2Hz,2H),1.99(m,2H),1.41(s,9H)；MS(ESI)m/z 341.1(M+H)+。
5-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)戊酸叔丁酯(10-2i)。白色固体。收率40％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ9.40(s,1H),8.31(d,J＝4.8Hz,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(d,J＝5.4Hz,1H),6.89(d,J＝1.8Hz,1H),6.86(m,1H),4.00(t,J＝6Hz,2H),2.79(s,3H),2.31(t,J＝6.6Hz,2H),1.81(m,4H),1.45(s,9H)；MS(ESI)m/z 355.2(M+H)+。
6-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)己酸叔丁基酯(10-2j)。白色固体。收率39％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ9.83(s,1H),8.31(d,J＝5.4Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(d,J＝5.4Hz,1H),6.88(s,1H),6.84(d,J＝8.4Hz,1H),3.96(t,J＝6.6Hz,2H),2.79(s,3H),2.25(t,J＝7.8Hz,2H),1.81(m,2H),1.65(m,2H),1.50(m,2H),1.44(s,9H)；MS(ESI)m/z369.2(M+H)+。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙基氨基甲酸叔丁酯(10-2k)。白色固体。收率67％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝9Hz,1H),7.78(d,J＝5.4Hz,1H),7.05(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(m,1H),4.10(t,J＝5.4Hz,2H),3.48(t,J＝6Hz,2H),2.75(s,3H),1.44(s,9H)；MS(ESI)m/z 342.21(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丙基氨基甲酸叔丁酯(10-2l)。白色固体。收率57％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.38(s,1H),8.13(d,J＝4.8Hz,1H),8.04(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(d,J＝4.8Hz,1H),6.97(d,J＝1.8Hz,1H),6.94(t,J＝5.4Hz,1H),6.82(m,1H),4.07(t,J＝6.6Hz,2H),3.12(t,J＝6.6Hz,2H),2.71(s,3H),1.89(m,2H),1.38(s,9H)；MS(ESI)m/z 356.21(M+H)+。
4-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丁基氨基甲酸叔丁酯(10-2m)。白色固体。收率67％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.39(s,1H),8.13(d,J＝4.8Hz,1H),8.04(d,J＝9Hz,1H),7.81(d,J＝5.4Hz,1H),6.97(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(t,J＝5.4Hz,1H),6.82(m,1H),4.06(t,J＝6Hz,2H),2.99(m,2H),2.71(s,3H),1.75(m,2H),1.56(m,2H),1.37(s,9H)；MS(ESI)m/z 370.22(M+H)+。
2-((7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(10-2n)。白色固体。收率46％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.40(s,1H),8.13(d,J＝4.8Hz,1H),8.04(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),7.0(d,J＝1.8Hz,1H),6.84(m,1H),6.81(t,J＝5.4Hz,1H),4.19(t,J＝4.8Hz,2H),3.78(t,J＝4.2Hz,2H),3.48(t,J＝6Hz,2H),3.12(m,2H),2.71(s,3H),1.37(s,9H)；MS(ESI)m/z 386.22(M+H)+。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)甲氧基乙基(10-2o)。白色固体。收率38％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.10(d,J＝6Hz,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.83(d,J＝5.4Hz,1H),7.05(d,J＝2.4Hz,1H),6.89(m,1H),4.22(t,J＝4.8Hz,2H),3.80(t,J＝4.2Hz,2H),3.45(s,3H),2.77(s,3H)；MS(ESI)m/z 257.34(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙氧基乙基(10-2p)。白色固体。收率48％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.10(d,J＝5.4Hz,1H),8.0(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),7.06(d,J＝1.2Hz,1H),6.90(m,1H),4.22(t,J＝4.8Hz,2H),3.84(t,J＝4.2Hz,2H),3.63(m,2H),3.45(s,3H),2.76(s,3H),1.23(t,J＝6.6Hz,2H),；MS(ESI)m/z 271.76(M+H)+。
合成10-3的一般程序。在密封压力容器中，将10-2a至10-2e(0.175mmol)和7N氨在甲醇(4mL)中的溶液于90℃搅拌12小时。反应完成后，将混合物蒸发并使用DCM/MeOH/氨(90/9/1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需最终化合物10-3。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙酰胺(10-3a)。白色固体。收率91％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.45(s,1H),8.14(d,J＝5.4Hz,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),7.63(s,1H),7.46(s,1H),7.0(d,J＝1.8Hz,1H),6.90(m,1H),4.53(s,2H),2.71(s,3H)；MS(ESI)m/z 256.1(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丙酰胺(10-3b)。白色固体。收率97％。MS(ESI)m/z 270.1(M+H)+.1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ9.84(s,1H),8.13(d,J＝5.4Hz,1H),8.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(d,J＝5.4Hz,1H),7.44(s,1H),6.96(s,2H),6.73(m,1H),4.67(t,J＝7.8Hz,2H),2.95(s,3H),2.54(t,J＝7.8Hz,2H),4.53(s,2H),2.71(s,3H)；MS(ESI)m/z270.1(M+H)+。
4-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丁酰胺(10-3c)。白色固体。收率84％。MS(ESI)m/z 284.16(M+H)+.1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.39(s,1H),8.13(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),7.35(s,1H),6.98(s,1H),6.82(m,2H),4.06(t,J＝6Hz,2H),2.71(s,3H),2.27(t,J＝7.8Hz,2H),1.98(m,2H)；MS(ESI)m/z 284.16(M+H)+。
5-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)戊酰胺(10-3d)。白色固体。收率85％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.38(s,1H),8.13(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),7.29(s,1H),6.98(d,J＝2.4Hz,1H),6.82(m,1H),6.75(s,1H),4.07(t,J＝6.6Hz,2H),2.71(s,3H),2.13(t,J＝7.2Hz,2H),1.76(m,2H),1.69(m,2H)；MS(ESI)m/z298.1(M+H)+。
6-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)己酰胺(10-3e)。白色固体。收率94％。MS(ESI)m/z 312.1(M+H)+.1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.38(s,1H),8.13(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(d,J＝4.8Hz,1H),7.26(s,1H),6.98(d,J＝2.4Hz,1H),6.82(m,1H),6.72(s,1H),4.07(t,J＝6.6Hz,2H),2.71(s,3H),2.09(t,J＝7.2Hz,2H),1.77(m,2H),1.57(m,2H),1.45(m,2H)；MS(ESI)m/z 312.1(M+H)+。
合成10-4的一般程序。将10-2f至10-2j(0.18mmol)和TFA/DCM(1:1，4mL)的溶液在室温下搅拌24小时。蒸发反应混合物并用乙醚研磨，得到呈白色固体的所需的酸10-4。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙酸(10-4a)。白色固体。收率89％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ12.73(s,1H),8.48(d,J＝6Hz,1H),8.43(d,J＝6Hz,1H),8.38(d,J＝9Hz,1H),7.09(m,2H),4.90(s,2H),2.97(s,3H)；MS(ESI)m/z 257.1(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丙酸(10-4b)。白色固体。收率98％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ12.59(s,1H),10.64(s,1H),8.45(d,J＝6Hz,1H),8.40(d,J＝6.6Hz,1H),8.30(d,J＝9Hz,1H),7.14(s,1H),6.97(d,J＝9Hz,1H),4.81(t,J＝7.8Hz,2H),3.16(s,3H),2.82(t,J＝7.2Hz,2H),2.97(s,3H)；MS(ESI)m/z 271.4(M+H)+。
4-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丁酸(10-4c)。白色固体。收率82％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ12.71(s,1H),12.23(s,1H),8.45(d,J＝6Hz,1H),8.40(d,J＝6Hz,1H),8.35(d,J＝9Hz,1H),7.12(s,1H),7.05(d,J＝9Hz,1H),4.17(t,J＝6Hz,2H),2.97(s,3H),2.45(t,J＝7.2Hz,2H),2.03(m,2H)；MS(ESI)m/z 285.4(M+H)+。
5-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)戊酸(10-4d)。白色固体。收率85％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ12.68(s,1H),12.10(s,1H),8.45(d,J＝6.6Hz,1H),8.40(d,J＝6Hz,1H),8.35(d,J＝9Hz,1H),7.11(s,1H),7.05(d,J＝9Hz,1H),4.16(t,J＝6.6Hz,2H),2.97(s,3H),2.32(t,J＝7.2Hz,2H),1.83(m,2H),1.83(m,2H)；MS(ESI)m/z 299.8(M+H)+。
6-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)己酸(10-4e)。白色固体。收率91％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ12.71(s,1H),8.45(d,J＝6.6Hz,1H),8.40(d,J＝6Hz,1H),8.35(d,J＝9Hz,1H),7.11(s,1H),7.05(d,J＝9Hz,1H),4.16(t,J＝6.6Hz,2H),2.97(s,3H),2.26(t,J＝7.8Hz,2H),1.80(m,2H),1.59(m,2H),1.47(m,2H)；MS(ESI)m/z 313.5(M+H)+。
合成10-5的一般程序。向10-2k至10-2n(1.93mmol)在1,4-二噁烷(4mL)中的溶液中，添加4N HCl在二噁烷中的溶液(4当量)，并在室温下搅拌24小时。通过LCMS监测反应完成后，将混合物蒸发，得到呈白色固体的所需产物10-5。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙胺盐酸(10-5a)。白色固体。收率90％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ13.08(s,1H),8.47(d,J＝6.6Hz,1H),8.38(m,2H),8.33(bs,2H),7.19(d,J＝1.8Hz,1H),7.10(m,1H),4.37(t,J＝5.4Hz,2H),3.30(t,J＝4.8Hz,2H),3.03(s,3H)；MS(ESI)m/z 242.22(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丙胺盐酸(10-5b)。白色固体。收率98％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ13.03(s,1H),8.45(d,J＝6Hz,1H),8.38(d,J＝6.6Hz,1H),8.35(s,1H),8.09(bs,2H),7.15(d,J＝2.4Hz,1H),7.06(m,1H),4.25(t,J＝6Hz,2H),3.03(m,5H),2.12(m,2H)；MS(ESI)m/z 256.11(M+H)+。
4-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)丁胺盐酸(10-5c)。白色固体。收率99％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ12.98(s,1H),8.45(d,J＝6Hz,1H),8.38(d,J＝6Hz,1H),8.35(d,J＝8.4Hz,1H),7.97(bs,2H),7.14(d,J＝1.8Hz,1H),7.05(d,J＝9Hz,1H),4.17(t,J＝6Hz,2H),3.02(s,3H),2.87(t,J＝6.6Hz,2H),1.87(m,2H),1.77(m,2H)；MS(ESI)m/z270.45(M+H)+。
2-((7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙氧基)乙胺盐酸(1-5d)。白色固体。收率97％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ13.14(s,1H),8.45(d,J＝6Hz,1H),8.36(m,2H),8.10(bs,2H),7.18(d,J＝1.8Hz,1H),7.06(d,J＝9Hz,1H),4.31(t,J＝4.8Hz,2H),3.88(t,J＝4.2Hz,2H),3.73(t,J＝5.4Hz,2H),3.03(s,3H),3.0(t,J＝5.4Hz,2H),1.87(m,2H),1.77(m,2H)；MS(ESI)m/z 286.27(M+H)+。
合成10-6的一般程序。向10-5(0.36mmol)和三乙胺(2.2当量)在DCM中的溶液中滴加乙酸酐，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完成后，将混合物用DCM稀释，转移至分液漏斗中，并用水洗涤。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到呈白色固体的所需产物10-6。
2-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)-2-乙酰基-乙胺(10-6a)。白色固体。收率74％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.39(s,1H),8.14(d,J＝5.4Hz,1H),8.36(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(t,J＝5.4Hz,1H),7.90(t,J＝5.4Hz,1H),6.99(d,J＝2.4Hz,1H),6.82(m,1H),4.08(t,J＝6Hz,2H),3.21(t,J＝6.6Hz,2H),2.71(s,3H),1.81(s,3H)；MS(ESI)m/z 284.62(M+H)+。
3-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)-2-乙酰基-丙胺(10-6b)。白色固体。收率79％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.39(s,1H),8.14(d,J＝5.4Hz,1H),8.36(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(t,J＝5.4Hz,1H),7.90(t,J＝5.4Hz,1H),6.99(d,J＝2.4Hz,1H),6.82(m,1H),4.08(t,J＝6Hz,2H),3.22(m,2H),2.71(s,3H),1.90(m,2H),1.81(s,3H)；MS(ESI)m/z298.71(M+H)+。
4-(7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)-2-乙酰基-丁胺(10-6c)。白色固体。产率70％。M1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.47(s,1H),8.14(d,J＝5.4Hz,1H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.93(m,1H),7.80(d,J＝4.8Hz,1H),7.01(d,J＝2.4Hz,1H),6.84(m,1H),4.08(t,J＝5.4Hz,2H),3.10(m,2H),2.73(s,3H),1.80(m,5H),1.59(m,2H)；MS(ESI)m/z 312.18(M+H)+。
2-((7-氧基-1-甲基-9-H-b-咔啉)乙氧基)-2-乙酰基-乙胺(10-6d)。白色固体。收率49％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.40(s,1H),8.14(d,J＝5.4Hz,1H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(m,1H),7.84(t,J＝5.4Hz,1H),6.99(d,J＝1.8Hz,1H),6.84(m,1H),4.20(t,J＝4.8Hz,2H),3.79(m,2H),3.50(t,J＝6Hz,2H),3.55(m,2H),2.71(s,3H),1.79s,3H)；MS(ESI)m/z 328.44(M+H)+。
O-三氟甲磺酰基-1-甲基-9H-b-咔啉-7-醇(10-7)。在0℃下，向10-1(500mg，2.52mmol)和吡啶(25.2mmol)在DCM(4mL)中的溶液中滴加三氟甲磺酸酐(1.2当量)。使反应混合物升温至室温并搅拌12小时。反应完成后，将混合物蒸发并使用DCM/MeOH(95/5)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物10-7(875mg，92％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ13.01(s,1H),8.67(d,J＝9Hz,1H),8.61(d,J＝6Hz,1H),8.51(d,J＝6Hz,1H),7.87(m,1H),7.51(d,J＝9Hz,1H),2.99(s,3H)；MS(ESI)m/z 331.5(M+H)+。
7-硝基-1-甲基-9H-b-咔啉(10-8)。在压力容器中装入1-7(100mg，0.30mmol)、Pd2(dba)3(5摩尔％)、BrettPhos(6摩尔％)和亚硝酸钠(42mg，0.6mmol)，并且抽真空并用氩气回填三次。在氩气下，向混合物中添加叔丁醇(0.6ml)和TDA(5摩尔％)。密封压力并加热至150℃，保持24小时。反应完成后，蒸发混合物并通过柱色谱法纯化，得到呈黄色固体的10-8(80mg，77％)。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.41(m,1H),8.30(d,J＝8.4Hz,1H),8.23(d,J＝5.4Hz,1H),8.08(m,1H),8.01(d,J＝5.4Hz,1H),2.82(s,3H)；MS(ESI)m/z 228.31(M+H)+。
7-氨基-1-甲基-9H-b-咔啉(10-9)。向10-8(80mg，0.35mmol)和碳载钯(按重量计10％，100mg)在甲醇(4mL)中的溶液添加一水合肼(0.34mL，7mmol)，并加热至85℃，保持1小时。反应完成后，经硅藻土过滤催化剂并蒸发滤液，并且使用DCM/MeOH(90/10)作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化，得到呈褐色固体的所需的氨基化合物10-9(65mg,98％)。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.02(d,J＝5.4Hz,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.69(d,J＝4.8Hz,1H),6.80(s,1H),6.68(d,J＝8.4Hz,1H),2.71(s,3H)；MS(ESI)m/z 198.16(M+H)+。
7-苯甲酰胺-1-甲基-9H-b-咔啉(10-10)。在0℃下，向10-9(20mg，0.10mmol)和三乙胺(0.028mL，0.20mmol)在THF(1mL)中的溶液中添加苯甲酰氯，并在室温下搅拌2小时。通过LCMS监测反应完成后，将混合物蒸发并使用DCM/MeOH(95/5)作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物10-10(23mg，77％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.53(s,1H),10.47(s,2H),8.32(s,1H),8.17(d,J＝4.8Hz,1H),8.13(d,J＝8.4Hz,1H),8.0(d,J＝7.2Hz,2H),7.85(d,J＝5.4Hz,1H),7.61(t,J＝7.8Hz,1H),2.55(m,3H),2.74(s,3H)；MS(ESI)m/z 302.29(M+H)+。
7-乙酰胺-1-甲基-9H-b-咔啉(10-11)。在0℃下，向10-9(20mg，0.10mmol)和三乙胺(0.028mL，0.20mmol)在THF(2mL)中的溶液中滴加乙酸酐，并将反应混合物在室温下搅拌12小时。反应完成后，将混合物用DCM稀释，转移至分液漏斗中，并用水洗涤。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到呈白色固体的所需产物10-6(18mg，75％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.44(s,1H),10.16(s,1H),8.19(s,1H),8.15(d,J＝5.4Hz,1H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(m,1H),7.23(d,J＝8.4Hz,1H),2.71(s,3H),2.10(s,3H)；MS(ESI)m/z240.52(M+H)+。
1-甲基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚-7-基异丙基氨基甲酸酯(10-12)。向骆驼蓬醇10-1(50mg，0.25mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加异氰酸异丙酯(0.030mL，0.3mmol)，并在室温下搅拌12小时。蒸发反应混合物，并使用DCM/MeOH(95/5)作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物10-12(23mg，32％)。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.09(d,J＝5.4Hz,1H),8.12(d,J＝8.4Hz,1H),7.90(d,J＝5.4Hz,1H),7.31(m,1H),7.09(m,1H),3.80(m,1H),2.79(s,3H),1.23(d,J＝6.6Hz,6H)；MS(ESI)m/z 298.77(M+H)+。
DYRK1A结合测定法。在Life Technologies商业激酶分析服务中心测试化合物的DYRK1A结合活性，该服务中心使用基于FRET的
Figure BDA0002777618320000851
Eu激酶结合测定法。一式两份，以1000nM和300nM的浓度对化合物进行DYRK1A活性筛选。IC50通过一式两份的10点
Figure BDA0002777618320000852
Eu激酶结合测定法测定。
Β细胞增殖测定法。人胰岛从NIH/NIDDK支持的综合胰岛分发计划(IIDP)获得。如先前所述(Wang等人，2015，其特此通过引用整体并入)，首先用Accutase(Sigma,St.Louis,MO)将胰岛分散并接种到盖玻片上。2小时后，在RPMI1640完全培养基中用化合物处理分散的人胰岛细胞96小时。然后将细胞固定并进行胰岛素和Ki67染色(Wang等人，2015，其特此通过引用整体并入)。对总胰岛素阳性细胞及Ki67和胰岛素双阳性细胞成像并计数。计数至少1000个细胞。
实施例8-7-取代的骆驼蓬碱类似物的合成、SAR分析和人β细胞增殖测定
按照图5中概述的反应序列合成7-取代的骆驼蓬碱类似物。表4显示类似物10-3b对DYRK1A的IC50为91nM，而类似物10-4a抑制DYRK1A的IC50为71nM。相比之下，类似物10-4b和10-11对DYRK1A的IC50分别为1810nM和389nM。评估化合物10-2b、10-3b和10-3e在体外诱导人β细胞增殖的能力。表5显示，在所测试的剂量下，这些化合物与骆驼蓬碱相比，显示出β细胞增殖减少。
表4.示例性的经取代的骆驼蓬碱类似物的DYRK1A抑制作用
Figure BDA0002777618320000871
a＝使用十种连续三倍稀释液(一式两份)测定IC50值
表5.示例性的经取代的骆驼蓬碱类似物的β细胞增殖
Figure BDA0002777618320000881
实施例9-实施例10的材料和方法
合成1-1的一般程序。向骆驼蓬碱(1mmol)在DMF(7mL)中的溶液中添加NaH(2当量)，并在室温下搅拌1小时。在50℃下向该溶液中添加烷基溴(1.5当量)并在该温度下搅拌12小时。通过TLC确认反应完成后，将反应混合物用水稀释，转移至分液漏斗中，并用乙酸乙酯(50mLX2)萃取。有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发并使用DCM/MeOH(9/1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物1-1。
2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙酸甲酯(20-1a)。白色固体。收率67％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.12(d,J＝4.8Hz,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝5.4Hz,1H),7.03(d,J＝1.2Hz,1H),6.91(m,1H),5.41(s,2H),3.92(s,3H),3.78(s,3H),2.87(s,3H)；MS(ESI)m/z 285.33(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙酸甲酯(20-1b)。白色固体。收率81％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝4.2Hz,1H),7.10(s,1H),6.90(d,J＝8.4Hz,1H),4.90(t,J＝7.2Hz,2H),3.91(s,3H),3.55(s,3H),2.99(s,3H),2.82(t,J＝7.2Hz,2H)；MS(ESI)m/z 299.18(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸甲酯(20-1c)。白色固体。收率74％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),7.02(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝5.4Hz,1H),7.18(s,1H),6.90(m,1H),4.61(t,J＝7.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.64(s,3H),3.00(s,3H),2.47(t,J＝6.6Hz,2H),2.10(m,2H)；MS(ESI)m/z 213.33(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)戊酸甲酯(20-1d)。白色固体。收率79％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(d,J＝5.4Hz,1H),7.03(d,J＝1.8Hz,1H),6.85(m,1H),4.52(t,J＝8.4Hz,2H),3.93(s,3H),3.60(s,3H),2.96(s,3H),2.37(t,J＝7.2Hz,2H),1.80(m,2H),1.70(m,2H)；MS(ESI)m/z327.19(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)己酸甲酯(20-1e)。白色固体。收率82％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(d,J＝5.4Hz,1H),7.01(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),4.50(t,J＝7.8Hz,2H),3.92(s,3H),3.59(s,3H),2.94(s,3H),2.29(t,J＝7.2Hz,2H),1.78(m,2H),1.64(m,2H),1.40(m,2H)；MS(ESI)m/z341.23(M+H)+。
2-甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸甲酯(20-1f)。白色固体。收率72％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.09(d,J＝4.8Hz,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(d,J＝5.4Hz,1H),7.06(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(m,1H),4.50(m,2H),3.94(s,3H),3.66(s,3H),2.95(s,3H),2.65(m,1H),2.12(m,1H),1.87(m,1H),1.23(d,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z327.76(M+H)+。
2,2-二甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸甲酯(20-1g)。白色固体。收率68％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.11(d,J＝9Hz,1H),7.88(d,J＝4.8Hz,1H),7.04(s,1H),6.90(d,J＝9Hz,1H),4.49(t,J＝8.4Hz,2H),3.92(s,3H),3.72(s,3H),2.95(s,3H),1.92(t,J＝8.4Hz,1H),1.30(s,6H)；MS(ESI)m/z 341.92(M+H)+。
2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙酸叔丁酯(20-1h)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.13(d,J＝5.4Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝4.8Hz,1H),7.03(bs,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),5.30(s,2H),3.92(s,3H),2.89(s,3H),1.42(s,9H)；MS(ESI)m/z 327.44(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙酸叔丁酯(20-1i)。白色固体。收率21％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝9Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(m,1H),4.84(t,J＝7.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.95(s,3H),2.71(t,J＝7.2Hz,2H),1.23(s,9H)；MS(ESI)m/z 341.54(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸叔丁酯(20-1j)。白色固体。收率82％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.24(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(m,1H),4.55(t,J＝7.8Hz,2H),3.91(s,3H),2.94(s,3H),2.35(t,J＝6.6Hz,2H),1.94(m,2H),1.38(s,9H)；MS(ESI)m/z 355.31(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)戊酸叔丁酯(20-1k)。白色固体。收率80％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.28(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.74(d,J＝5.4Hz,1H),6.89(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),4.48(t,J＝7.8Hz,2H),3.96(s,3H),3.02(s,3H),2.28(t,J＝7.2Hz,2H),1.86(m,2H),1.72(m,2H),1.41(s,9H)；MS(ESI)m/z369.45(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)己酸叔丁酯(20-1l)。白色固体。收率76％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.28(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.74(d,J＝5.4Hz,1H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),6.84(d,J＝1.8Hz,1H),4.46(t,J＝7.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.01(s,3H),2.21(t,J＝7.2Hz,2H),1.84(m,2H),1.64(m,2H),1.41(m,11H)；MS(ESI)m/z383.81(M+H)+。
N-(3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙基)邻苯二甲酰亚胺(20-1m)。白色固体。收率60％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.08(d,J＝5.4Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.83-7.78(m,5H),7.02(d,J＝2.4Hz,1H),6.85(m,1H),4.64(t,J＝7.8Hz,2H),3.88(s,3H),3.84(t,J＝7.8Hz,2H),2.92(s,3H),2.24(m,2H)；MS(ESI)m/z 400.71(M+H)+。
N-(4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁基)邻苯二甲酰亚胺(20-1n)。白色固体。收率84％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.14(d,J＝5.4Hz,1H),8.06(d,J＝9Hz,1H),7.86(d,J＝4.8Hz,1H),7.83(m,4H),7.20(d,J＝2.4Hz,1H),6.84(m,1H),4.57(t,J＝7.8Hz,2H),3.88(s,3H),3.61(t,J＝6Hz,2H),2.90(s,3H),1.74(m,4H)；MS(ESI)m/z414.23(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙腈(20-1o)。白色固体。收率80％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.00(d,J＝8.4Hz,1H),7.82(d,J＝5.4Hz,1H),7.09(s,1H),6.90(m,1H),4.65(t,J＝7.8Hz,2H),3.93(s,3H),2.97(s,3H),2.54(t,J＝7.2Hz,2H),2.11(m,2H)；MS(ESI)m/z 280.71(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙醛二甲基缩醛(20-1p)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.2Hz,1H),8.10(d,J＝9Hz,1H),7.87(d,J＝5.4Hz,1H),7.14(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(m,1H),4.60(t,J＝7.2Hz,2H),4.42(t,J＝5.4Hz,1H),3.91(s,3H),3.23(s,6H),2.95(s,3H),2.11(m,2H)；MS(ESI)m/z 315.90(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁醛二甲基缩醛(20-1q)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.09(d,J＝5.4Hz,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(d,J＝5.4Hz,1H),7.01(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(m,1H),4.52(t,J＝7.8Hz,2H),4.36(t,J＝5.4Hz,1H),3.92(s,3H),3.27(s,6H),2.95(s,3H),1.81(m,2H),1.68(m,2H)；MS(ESI)m/z329.96(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-戊-1-炔(20-1r)。白色固体。收率63％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝5.4Hz,1H),8.02(d,J＝9Hz,1H),7.90(d,J＝5.4Hz,1H),7.03(d,J＝1.8Hz,1H),6.98(m,1H),4.67(t,J＝7.2Hz,2H),3.97(s,3H),3.22(s,3H),2.35(m,2H),2.15(m,1H),2.07(m,2H)；MS(ESI)m/z 279.52(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-己-1-炔(20-1s)。白色固体。收率62％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.20(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),4.56(t,J＝7.2Hz,2H),3.90(s,3H),2.94(s,3H),2.78(m,1H),2.23(m,2H),1.83(m,2H),1.54(m,2H)；MS(ESI)m/z 293.36(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丙-1-烯(20-1t)。白色固体。收率72％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.66(d,J＝4.8Hz,1H),8.54(d,J＝8.4Hz,1H),8.29(d,J＝4.8Hz,1H),7.54(m,1H),7.34(m,1H),6.64(m,1H),5.72(m,2H),5.59(d,J＝10.2Hz,1H),5.19(d,J＝16.8Hz,1H),4.37(s,3H),3.38(s,3H)；MS(ESI)m/z 253.23(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丁-1-烯(20-1u)。白色固体。收率81％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.66(d,J＝5.4Hz,1H),8.52(d,J＝8.4Hz,1H),8.28(d,J＝4.8Hz,1H),7.63(m,1H),7.35(m,1H),6.37(m,1H),5.61(d,J＝16.8Hz,1H),5.49(d,J＝10.8Hz,1H),5.15(t,J＝7.2Hz,2H),4.30(s,3H),3.44(s,3H),3.08(m,2H)；MS(ESI)m/z267.44(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-戊-1-烯(20-1v)。白色固体。收率77％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.65(d,J＝5.4Hz,1H),8.52(d,J＝8.4Hz,1H),8.27(d,J＝4.8Hz,1H),7.60(m,1H),7.34(m,1H),6.37(m,1H),5.55(d,J＝16.8Hz,1H),5.47(d,J＝9.6Hz,1H),5.08(d,J＝7.2Hz,2H),4.39(s,3H),3.44(s,3H),2.69(m,2H),2.40(m,2H)；MS(ESI)m/z 281.28(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-己-1-烯(20-1w)。白色固体。收率82％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.18(d,J＝1.2Hz,1H),6.87(m,1H),5.78(m,1H),5.00(d,J＝16.8Hz,1H),4.94(d,J＝10.2Hz,1H),4.55(t,J＝7.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.93(s,3H),2.07(d,J＝7.2Hz,2H),1.72(m,2H),1.47(m,2H)；MS(ESI)m/z 295.66(M+H)+。
1-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-苯基甲烷(20-1x)。白色固体。收率69％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.18(d,J＝4.8Hz,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),7.93(d,J＝4.8Hz,1H),7.28(t,J＝7.2Hz,2H),7.23(t,J＝7.2Hz,2H),7.19(s,1H),6.91(m,3H),5.89(s,2H),3.82(s,3H),2.73(s,3H)；MS(ESI)m/z 303.54(M+H)+。
2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-苯基乙烷(20-1y)。白色固体。收率54％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.24(m,5H),7.08(d,J＝1.2Hz,1H),6.85(m,1H),4.78(t,J＝7.8Hz,2H),3.87(m,3H),3.06(t,J＝7.2Hz,2H),2.93(s,3H)；MS(ESI)m/z 317.82(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-苯基丙烷(20-1z)。白色固体。收率55％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.15(d,J＝4.8Hz,1H),8.08(d,J＝9Hz,1H),7.86(d,J＝4.8Hz,1H),7.30(m,4H),7.20(m,1H),7.02(s,1H),6.86(m,1H),4.53(t,J＝7.8Hz,2H),3.85(s,3H),2.79(s,3H),2.73(t,J＝7.2Hz,2H),2.06(m,2H)；MS(ESI)m/z 331.52(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-苯基丁烷(20-1z’)。白色固体。收率74％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.64(d,J＝4.8Hz,1H),8.51(d,J＝8.4Hz,1H),8.26(d,J＝4.8Hz,1H),7.70(t,J＝7.2Hz,2H),7.65(d,J＝7.2Hz,2H),7.58(m,2H),7.32(m,1H),5.09(t,J＝7.2Hz,2H),4.37(s,3H),3.39(s,3H),3.15(t,J＝7.2Hz,2H),2.35(m,2H),2.27(m,2H)；MS(ESI)m/z 345.13(M+H)+。
1-叠氮基-3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙烷(20-1a')。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝5.4Hz,1H),8.00(d,J＝8.4Hz,1H),7.83(d,J＝5.4Hz,1H),6.95(s,1H),6.94(m,1H),7.02(s,1H),6.86(m,1H),4.61(t,J＝7.2Hz,2H),3.97(s,3H),3.40(t,J＝6Hz,2H),3.13(s,3H),2.09(m,2H)；MS(ESI)m/z 297.15(M+H)+。
1-叠氮基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁烷(20-1b')。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝5.4Hz,1H),8.01(d,J＝9Hz,1H),7.83(d,J＝5.4Hz,1H),6.90(m,1H),6.88(m,1H),4.53(t,J＝7.8Hz,2H),3.97(s,3H),3.35(t,J＝6Hz,2H),3.12(s,3H),1.95(m,2H),1.69(m,2H)；MS(ESI)m/z 311.16(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)叔丁基羧基-1-丙酰胺(20-1c’)。白色固体。收率78％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.27(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.75(d,J＝4.8Hz,1H),6.95(m,1H),6.88(m,1H),4.54(t,J＝7.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.23(m,2H),3.04(s,3H),2.03(m,2H),1.44(s,9H)；MS(ESI)m/z 370.21(M+H)+。
合成20-2的一般程序。在90℃下将密封压力容器中20-1a至20-1f(0.175mmol)和7N氨在甲醇(4mL)中的溶液搅拌12小时。反应完成后，将混合物蒸发并使用DCM/MeOH/氨(90/9/1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需的最终化合物20-2。
2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙酰胺(20-2a)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.15(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.71(s,1H),7.35(s,1H),715(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),5.18(s,2H),3.88(s,3H),2.85(s,3H)；MS(ESI)m/z 270.61(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙酰胺(20-2b)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝5.4Hz,1H),7.41(s,1H),7.23(d,J＝1.8Hz,1H),6.96(s,1H),6.87(m,1H),4.78(t,J＝7.2Hz,2H),3.90(s,3H),2.97(s,3H),2.57(t,J＝7.8Hz,2H)；MS(ESI)m/z 284.43(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-2c)。白色固体。收率99％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.36(s,1H),7.28(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(s,1H),6.86(m,1H),4.53(t,J＝7.8Hz,2H),3.91(s,3H),2.95(s,3H),2.19(t,J＝7.2Hz,2H),1.94(m,2H)；MS(ESI)m/z 298.31(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)戊酰胺(20-2d)。白色固体。收率99％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.26(s,1H),7.19(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),6.73(s,1H),4.54(t,J＝7.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.94(s,3H),2.10(t,J＝7.2Hz,2H),1.70(m,2H),1.59(m,2H)；MS(ESI)m/z312.26(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)己酰胺(20-2e)。白色固体。收率80％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.22(s,1H),7.17(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),6.70(s,1H),4.53(t,J＝7.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.94(s,3H),2.02(t,J＝7.2Hz,2H),1.72(m,2H),1.53(m,2H),1.36(m,2H)；MS(ESI)m/z 326.66(M+H)+。
2-甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-2f)。白色固体。收率40％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(d,J＝4.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.91(bs,1H),7.46(s,1H),7.19(s,1H),6.99(s,1H),6.89(d,J＝7.8Hz,1H),4.52(m,1H),4.40(m,1H),3.91(s,3H),2.98(s,3H),2.46(m,1H),1.96(m,1H),1.72(m,1H),1.11(d,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z 312.21(M+H)+。
合成20-3的一般程序。在室温下将20-1h至20-1l(0.18mmol)和TFA/DCM(1:1，4mL)的溶液搅拌24小时。蒸发反应混合物并用乙醚研磨，得到呈白色固体的所需的酸1-3。
2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙酸(20-3a)。白色固体。收率91％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.54(d,J＝6.6Hz,1H),8.41(d,J＝6.6Hz,1H),8.38(d,J＝9Hz,1H),7.50(d,J＝2.4Hz,1H),7.07(m,1H),5.60(s,2H),3.94(s,3H),3.10(s,3H)；MS(ESI)m/z271.17(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙酸盐酸盐(20-3b)。白色固体。收率60％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.31(d,J＝6Hz,1H),8.25(d,J＝9Hz,2H),7.37(s,1H),6.99(m,1H),4.88(t,J＝7.2Hz,2H),3.95(s,3H),3.10(s,3H),2.82(t,J＝7.8Hz,2H)；MS(ESI)m/z285.67(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸盐酸盐(20-3c)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.53(d,J＝6.6Hz,1H),8.44(d,J＝6.6Hz,1H),8.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.45(s,1H),7.09(d,J＝8.4Hz,1H),4.66(t,J＝7.8Hz,2H),3.98(s,3H),3.18(s,3H),2.44(t,J＝6.6Hz,2H),2.00(m,2H)；MS(ESI)m/z 299.13(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)戊酸盐酸盐(20-3d)。白色固体。收率99％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.53(d,J＝6Hz,1H),8.43(d,J＝6Hz,1H),8.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.40(s,1H),7.08(d,J＝7.8Hz,1H),4.68(t,J＝7.8Hz,2H),3.97(s,3H),3.16(s,3H),2.30(t,J＝7.2Hz,2H),1.81(m,2H),1.63(m,2H)；MS(ESI)m/z 313.38(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)己酸盐酸盐(20-3e)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.53(d,J＝6Hz,1H),8.43(d,J＝6.6Hz,1H),8.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.39(s,1H),7.08(d,J＝9Hz,1H),4.66(t,J＝7.8Hz,2H),3.97(s,3H),3.16(s,3H),2.20(t,J＝7.2Hz,2H),1.79(m,2H),1.56(m,2H),1.41(m,2H)；MS(ESI)m/z327.17(M+H)+。
2-甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸(20-4a)。向2-甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸苄基酯(216mg，0.53mmol)和Pd-C(45mg)在MeOH(3mL)中的溶液滴加三乙基硅烷(0.84mL，5.3mmol)，并在室温下搅拌1小时。反应完成后，将通过硅藻土过滤催化剂，将滤液旋转蒸发并使用DCM/MeOH(9/1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需的酸20-4a。收率64％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(d,J＝4.8Hz,1H),8.11(d,J＝8.4Hz,1H),7.89(bs,1H),7.19(s,1H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),4.55(t,J＝4.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.95(s,3H),2.59(m,1H),2.00(m,1H),1.79(m,1H),1.19(d,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z 313.63(M+H)+。
2,2-二甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸(20-4b)。与化合物20-4a相似，获得呈白色固体的2,2-二甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酸(20-4b)。收率60％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝4.8Hz,1H),7.11(d,J＝1.2Hz,1H),6.89(m,1H),4.51(t,J＝8.4Hz,2H),3.90(s,3H),2.96(s,3H),1.90(m,2H),1.27(s,6H)；MS(ESI)m/z 327.99(M+H)+。
合成20-5的一般程序。使20-1m或20-1n(0.12mmol)和一水合肼(20当量)在甲醇(4mL)中的溶液回流4小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH/Et3N(9:1:0.1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-5。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙胺(20-5a)。白色固体。收率36％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.02(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝5.4Hz,1H),7.10(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(m,1H),4.61(t,J＝7.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.00(s,3H),2.75(m,2H),1.97(m,2H)；MS(ESI)m/z 270.30(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁胺(20-5b)。白色固体。收率34％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.13(d,J＝5.4Hz,1H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝5.4Hz,1H),7.17(d,J＝1.8Hz,1H),6.84(m,1H),4.52(t,J＝7.8Hz,2H),3.88(s,3H),2.93(s,3H),2.54(m,2H),1.72(m,2H),1.40(m,2H)；MS(ESI)m/z 284.27(M+H)+。
合成20-6的一般程序。在0℃下向20-5(0.21mmol)和DIPEA(1.2当量)在亚甲基氯(2mL)中的溶液中添加乙酸酐(1.1当量)并且在室温下搅拌1小时。蒸发反应混合物，并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物20-6。
N-乙酰基-3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙胺(20-6a)。白色固体。收率47％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.20(t,J＝6Hz,1H),8.06(m,2H),7.40(m,1H),7.06(d,J＝8.4Hz,1H),6.96(s,1H),4.67(t,J＝8.4Hz,2H),4.01(s,3H),3.52(m,5H),2.16(m,2H),2.08(s,3H)；MS(ESI)m/z 312.39(M+H)+。
N-乙酰基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁胺(20-6b)。白色固体。收率63％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.12(d,J＝5.4Hz,1H),8.05(d,J＝9Hz,1H),7.91(d,J＝5.4Hz,1H),7.09(m,1H),6.92(s,1H),4.61(m,2H),3.95(s,3H),3.19(t,J＝7.2Hz,2H),3.00(s,3H),1.88(s,3H),1.58(m,2H)；MS(ESI)m/z 326.34(M+H)+。
合成20-7的一般程序。将20-5(0.35mml)和甲酸乙酯(0.5当量)在乙醇(1mL)中的溶液在CEM微波中于150℃加热30分钟。反应完成后，蒸发溶剂，并将粗反应混合物溶于THF(2mL)中，并在室温下分批添加LiAlH4(3当量)。添加之后，将反应混合物回流4小时。蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗反应混合物，得到呈白色固体的所需产物20-7。
N-甲基-3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙胺(20-7a)。白色固体。收率41％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.10(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.82(d,J＝5.4Hz,1H),7.06(d,J＝2.4Hz,1H),6.89(m,1H),4.60(t,J＝7.2Hz,2H),3.94(s,3H),3.04(t,J＝7.2Hz,2H),2.96(s,3H),2.61(s,3H)；MS(ESI)m/z 284.53(M+H)+。
N-甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁胺(20-7b)。白色固体。收率27％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.96(d,J＝9Hz,1H),7.78(d,J＝5.4Hz,1H),6.98(m,1H),6.86(m,1H),4.46(t,J＝7.8Hz,2H),3.91(s,3H),2.92(s,3H),2.53(t,J＝7.2Hz,2H),2.31(s,3H),1.78(s,2H),1.54(m,2H)；MS(ESI)m/z 298.41(M+H)+。
合成20-8的一般程序。在0℃下向20-7(0.03mmol)和DIPEA(1.2当量)在亚甲基氯(1mL)中的溶液中添加乙酸酐(1.1当量)并在室温下搅拌1小时。蒸发反应混合物，并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物20-8。
N-乙酰基-N-甲基-3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙胺(20-8a)。白色固体。收率41％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.27(d,J＝5.4Hz,1H),7.97(d,J＝9Hz,1H),7.77(d,J＝5.4Hz,1H),6.91(m,1H),6.86(m,1H),4.51(t,J＝7.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.52(t,J＝6.6Hz,2H),3.05(s,3H),2.97(s,3H),2.09(s,3H),2.02(m,2H)；MS(ESI)m/z326.80(M+H)+。
N-乙酰基-N-甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁胺(20-8b)。白色固体。收率38％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.26(d,J＝5.4Hz,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.75(d,J＝4.8Hz,1H),6.94(m,1H),6.87(m,1H),4.51(t,J＝7.8Hz,2H),3.96(s,3H),3.41(t,J＝7.2Hz,2H),3.03(s,3H),2.89(s,3H),2.05(s,3H),1.79(m,2H),1.62(m,2H)；MS(ESI)m/z340.83(M+H)+。
合成20-9的一般程序。向20-5(0.21mmol)和甲醛(37％的水溶液，2.5当量)在乙醇(1mL)中的溶液中添加氰基硼氢化钠(5当量)和几滴乙酸。将反应混合物在室温下搅拌1小时。蒸发反应混合物，并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物20-9。
N,N-二甲基-3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙胺(20-9a)。白色固体。收率38％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.27(s,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.73(s,1H),6.97(m,1H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),4.56(t,J＝7.8Hz,2H),3.94(s,3H),3.03(s,3H),2.33(t,J＝6.6Hz,2H),2.24(s,6H),1.98(m,2H)；MS(ESI)m/z 298.27(M+H)+。
N,N-二甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁胺(20-9b)。白色固体。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.44(d,J＝6Hz,1H),8.38(d,J＝6Hz,1H),8.34(d,J＝8.4Hz,1H),7.35(m,1H),6.51(m,1H),4.65(t,J＝7.8Hz,2H),3.94(s,3H),3.10(s,3H),3.03(t,J＝7.8Hz,2H),2.70(s,6H),2.46(s,3H),1.76(m,2H),1.70(m,2H)；MS(ESI)m/z312.42(M+H)+。
合成20-10的一般程序。向20-3c或20-4a、4b(0.24mmol)和HATU(1.2当量)在DMF(2mL)中的溶液中添加DIPEA(2当量)并在室温下搅拌反应物2小时。将烷基胺(1当量)添加到反应混合物中，并在室温下再搅拌12小时。反应完成后，将反应混合物用水(50mL)淬灭并转移至分液漏斗中。将反应混合物用乙酸乙酯萃取三次，随后将合并的有机层用盐水和水洗涤。将有机层用硫酸镁干燥，过滤，蒸发并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物20-10。
N-(异丙基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-10a)。白色固体。收率31％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.28(d,J＝6Hz,1H),8.21(m,2H),7.82(d,J＝6Hz,1H),7.27(d,J＝2.4Hz,1H),7.06(m,1H),4.68(t,J＝7.8Hz,2H),4.01(s,3H),3.91(m,1H),3.18(s,3H),2.32(t,J＝6.6Hz,2H),2.16(m,2H),1.10(d,J＝6.6Hz,6H)；MS(ESI)m/z 340.42(M+H)+。
N-(叔丁基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-10b)。白色固体。收率52％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.32(d,J＝6Hz,1H),8.22(m,2H),7.52(bs,1H),7.30(d,J＝1.8Hz,1H),7.08(m,1H),4.67(t,J＝7.8Hz,2H),4.02(s,3H),3.19(s,3H),2.31(t,J＝6.6Hz,2H),2.14(m,2H),1.30(s,9H)；MS(ESI)m/z 354.37(M+H)+。
N-(2-甲氧基乙基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-10c)。收率36％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.28-8.33(m,2H),7.96(t,J＝5.4Hz,1H),7.38(bs,1H),7.02(d,J＝9Hz,1H),4.61(t,J＝7.8Hz,2H),3.96(s,3H),3.31(m,5H),3.21(m,2H),3.10(s,3H),2.25(t,J＝7.2Hz,2H),1.99(m,2H)；MS(ESI)m/z 356.51(M+H)+。
N-(丁基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-10d)。白色固体。收率44％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.29(d,J＝6Hz,1H),8.21(m,2H),7.90(bs,1H),7.28(d,J＝1.8Hz,1H),7.06(m,1H),4.69(t,J＝8.4Hz,2H),4.02(s,3H),3.14(s,3H),3.19(t,J＝7.2Hz,2H),2.39(t,J＝6.6Hz,2H),2.17(m,2H),1.44(m,2H),1.34(m,2H),0.92(t,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z 354.90(M+H)+。
N-(1-甲基丁基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-10e)。白色固体。收率46％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.43(bs,1H),8.39(m,1H),8.35(d,J＝7.8Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(s,1H),7.06(d,J＝8.4Hz,1H),4.64(t,J＝4.8Hz,2H),3.97(s,3H),3.76(m,1H),3.14(s,3H),2.22(m,2H),2.08(s,3H),2.00(m,2H),1.25(m,4H),2.75(d,J＝6.6Hz,3H),2.70(s,6H),0.84(t,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z 368.45(M+H)+。
N-(异丙基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-α-甲基丁酰胺(20-10f)。白色固体。收率33％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.14(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.99(d,J＝5.4Hz,1H),7.10(d,J＝1.8Hz,1H),6.96(m,1H),4.61(m,1H),4.47(m,1H),3.99(m,4H),3.05(s,3H),2.48(m,1H),2.14(m,1H),1.86(m,1H),1.14-1.18(m,9H)；MS(ESI)m/z354.57(M+H)+。
N-(叔丁基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-α-甲基丁酰胺(20-10g)。收率28％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11-8.16(m,3H),7.60(bs,1H),7.15(d,J＝2.4Hz,1H),7.00(m,1H),4.59(m,1H),4.44(m,1H),4.00(s,3H),3.10(s,3H),2.53(m,1H),2.13(m,1H),1.83(m,1H),1.36(s,9H),1.16(d,J＝6.6Hz,3H)；MS(ESI)m/z 368.59(M+H)+。
N-(2-甲氧基乙基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-α-甲基丁酰胺(20-10h)。白色固体。收率41％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.13(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(d,J＝6Hz,1H),7.15(d,J＝1.8Hz,1H),6.99(m,1H),4.60(m,1H),4.50(m,1H),4.00(m,3H),3.39-3.48(m,3H),3.33-3.35(m,4H),3.09(s,3H),2.56(m,1H),2.15(m,1H),1.87(m,1H),1.20(d,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z370.87(M+H)+。
N-(丁基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-α-甲基丁酰胺(20-10i)。白色固体。收率42％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.16-8.19(m,3H),7.96(bs,1H),7.18(bs,1H),7.03(d,J＝7.8Hz,1H),4.63(m,1H),4.50(m,1H),4.01(s,3H),3.18(m,1H),3.13(s,3H),2.52(m,1H),2.19(m,1H),1.90(m,1H),1.49(m,2H),1.36(m,2H),1.20(d,J＝6.6Hz,3H),0.94(t,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z 368.87(M+H)+。
N-(1-甲基丁基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-α-甲基丁酰胺(20-10j)。白色固体。收率44％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.02(d,J＝8.4Hz,1H),7.89(d,J＝4.8Hz,1H),7.06(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),4.57(m,1H),4.42(m,1H),3.96(m,4H),3.00(s,3H),2.49(m,1H),2.15(m,1H),1.82(m,1H),1.38-1.45(m,4H),1.18(d,J＝7.2Hz,3H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H),0.93(t,J＝6.6Hz,3H)；MS(ESI)m/z 382.60(M+H)+。
N-(2-甲氧基乙基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)–α,α-二甲基丁酰胺(20-10k)。白色固体。收率31％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.12(d,J＝5.4Hz,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,1H),7.96(d,J＝4.2Hz,1H),7.73(bs,1H),7.13(bs,1H),6.94(d,J＝8.4Hz,1H),4.52(t,J＝8.4Hz,2H),3.98(s,3H),3.53(m,2H),3.47(m,2H),3.34(s,3H),3.05(s,3H),2.01(m,2H),1.34(s,6H)；MS(ESI)m/z 385.02(M+H)+。
N-(1-甲基丁基)-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-α,α-二甲基丁酰胺(20-10l)。白色固体。收率29％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.15(d,J＝6Hz,1H),8.13(d,J＝9Hz,1H),8.09(d,J＝5.4Hz,1H),7.31(d,J＝9Hz,1H),7.20(bs,1H),6.99(d,J＝8.4Hz,1H),4.57(m,2H),4.06(m,1H),4.00(s,3H),3.11(s,3H),3.05(s,3H),2.04(m,2H),1.56(m,1H),1.46(m,1H),1.38(m,8H),1.18(d,J＝6.6Hz,3H),0.94(t,J＝7.8Hz,3H)；MS(ESI)m/z396.99(M+H)+。
N′-羟基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-11)。使20-1o(300mg，1.07mmol)、盐酸羟胺(93mg，1.34mmol)和三甲胺(0.22mL，1.60mmol)在乙醇(2mL)中的溶液回流12小时。蒸发溶剂，并使用DCM/MeOH/NH3(9:1:0.5)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-11。收率74％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.15(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.20(d,J＝1.2Hz,1H),6.87(m,1H),5.50(bs,2H),4.54(t,J＝7.8Hz,2H),3.91(s,3H),3.76(m,1H),2.94(s,3H),2.10(t,J＝7.2Hz,2H),1.95(m,2H)；MS(ESI)m/z 313.46(M+H)+。
3-(3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙基)-5-三氯甲基-1,2,4-噁二唑(20-12)。在0℃下向20-11(150mg，0.48mmol)和吡啶(0.154mL，1.92mmol)在甲苯中的溶液添加三氯乙酰氯(0.06mL,0.57mmol)并且在相同温度下再搅拌一小时。然后将反应混合物加热至85℃，保持12小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-12。收率8％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.31(d,J＝4.8Hz,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝4.8Hz,1H),6.98(m,2H),4.66(t,J＝7.8Hz,2H),3.97(s,3H),3.15(s,3H),2.97(t,J＝7.2Hz,2H),2.38(m,2H)；MS(ESI)m/z 439.27(M+H)+。
3-(3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙基)-5-氨基-1,2,4-噁二唑(20-13)。将20-12(18mg，0.04mmol)和7N氨在甲醇(2mL)中的溶液在室温下搅拌12小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH/NH3(9:1:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-13。收率46％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝4.8Hz,1H),7.72(bs,2H),7.23(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),4.62(t,J＝7.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.90(s,3H),2.57(t,J＝7.2Hz,2H),2.06(m,2H)；MS(ESI)m/z 338.43(M+H)+。
1-(3-(3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基))丙基)-1-氨基环丙烷(20-14)。在室温下向20-1o(146mg，0.52mmol)和异丙氧基钛(IV)(0.168mL，0.57mmol)在THF(5mL)中的溶液中滴加乙基溴化镁(1M的THF溶液，1.04mL,1.04mmol)并搅拌1小时。之后，将BF3.OEt2(0.128mL，1.04mmol)添加到反应中并且再搅拌30分钟。通过添加水(10mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)淬灭反应。将该溶液转移至分液漏斗中并用乙酸乙酯萃取(3次，20mL)。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物20-14。收率5％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.17(d,J＝5.4Hz,1H),8.12(d,J＝8.4Hz,1H),8.07(d,J＝5.4Hz,1H),7.17(d,J＝1.2Hz,1H),6.87(m,1H),4.66(t,J＝7.2Hz,2H),3.98(s,3H),3.09(s,3H),2.01(m,2H),1.80(m,2H),0.88(m,2H),0.80(m,2H)；MS(ESI)m/z 310.55(M+H)+。
合成20-15的一般程序。将20-1p或20-1q(5.44mmol)在AcOH/1,4-二噁烷/水(4:2:1，14mL)中的溶液加热至110℃，保持4小时。将反应物冷却并用碳酸氢钠饱和溶液中和。将反应混合物转移至分液漏斗中并用乙酸乙酯萃取(3次，50mL)。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到呈白色固体的最终化合物20-15。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙醛(20-15a)。收率95％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝5.4Hz,1H),7.12(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),4.70(t,J＝7.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.02(s,3H),2.06(m,2H)；MS(ESI)m/z 269.20(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁醛(20-15b)。收率92％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.09(d,J＝5.4Hz,1H),8.00(d,J＝9Hz,1H),7.84(d,J＝5.4Hz,1H),7.05(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),4.54(t,J＝7.8Hz,2H),3.93(s,3H),2.97(s,3H),1.88(m,2H),1.67(m,2H)；MS(ESI)m/z 283.50(M+H)+。
合成20-16的一般程序。在0℃下将氢氧化铵(1.59mL)添加到氰化钾(109mg，1.67mmol)和氯化铵(89mg，1.67mmol)的混合物中，并将该溶液在室温下搅拌30分钟。向该反应混合物中添加20-15(150mg，0.56mmol)和MeOH(2mL)的溶液并在80℃下搅拌12小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH/NH3(9:1:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-16。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-氰基丙胺(20-16a)。收率31％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(d,J＝5.4Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝4.8Hz,1H),7.24(d,J＝2.4Hz,1H),6.87(m,1H),4.73(m,1H),4.64(m,1H),3.91(s,3H),3.82(m,1H),2.97(s,3H),2.12(m,1H),2.04(m,1H)；MS(ESI)m/z 295.28(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-氰基丁胺(20-16b)。收率61％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.23(bs,1H),6.88(m,1H),4.59(t,J＝7.8Hz,2H),3.90(s,3H),3.77(m,1H),2.95(s,3H),1.85(m,2H),1.75(m,2H)；MS(ESI)m/z 309.36(M+H)+。
合成20-17的一般程序。向20-16(15mg，0.05mmol)和MeOH(0.5mL)的溶液中添加1NNaOH溶液(0.104mL)，然后添加35％的过氧化氢(0.02mL)，并在室温下搅拌1小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH/NH3(9:1:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-17。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-(羧酰胺)丙胺(20-17a)。收率60％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.86(d,J＝5.4Hz,1H),7.15(d,J＝2.4Hz,1H),6.89(m,1H),4.68(t,J＝7.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.54(m,1H),3.01(s,3H),2.17(m,1H),2.04(m,1H)；MS(ESI)m/z 313.42(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-(羧酰胺)丁胺(20-17b)。收率61％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.10(d,J＝5.4Hz,1H),8.02(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝5.4Hz,1H),7.09(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(m,1H),4.59(t,J＝7.8Hz,2H),3.94(s,3H),3.41(m,1H),2.99(s,3H),1.91(m,2H),1.78(m,1H),1.68(m,1H)；MS(ESI)m/z 327.18(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-三氟甲基丁醇(20-18)。在0℃下向20-15b(384mg，1.36mmol)和TMSCF3(0.5M的THF溶液，1.77mmol)在THF(2mL)中的溶液添加TBAF(1M的THF溶液，0.013mL，0.013mmol)并且将该溶液在该温度下搅拌30分钟，并在室温下搅拌12小时。将反应物冷却至0℃并添加水(0.134mL，7.48mmol)和TBAF(1M的THF溶液，0.136mL，0.136mmol)并在室温下搅拌4小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用乙酸乙酯作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-18。收率75％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.11(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝7.8Hz,1H),7.85(d,J＝5.4Hz,1H),7.09(bs,1H),6.90(d,J＝9Hz,1H),3.94(m,4H),2.99(s,3H),1.94-2.04(m,2H),1.79(m,1H),1.66(m,1H)；MS(ESI)m/z 353.79(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-1-三氟甲基丁胺(20-21)。在-40℃下向20-18(78mg，0.22mmol)和吡啶(0.035mL，0.44mmol)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中滴加三氟甲磺酸酐(0.044mL，0.265mmol)在二氯甲烷(0.2mL)中的溶液。搅拌溶液并使其升温至室温过夜。通过添加水(10mL)淬灭反应物并用乙酸乙酯萃取(3次，20mL)。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到呈白色固体的化合物20-19，该化合物无需纯化即可用于下一步。将20-19(115mg，0.23mmol)和叠氮化钠(30mg，0.47mmol)在DMSO(2mL)中的溶液加热至40℃，保持5小时。通过添加水(10mL)淬灭反应物并用乙酸乙酯萃取(3次，20mL)。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发，得到呈白色固体的化合物20-20，该化合物无需纯化即可用于下一步。使20-20(60mg，0.16mmol)、甲酸铵(50mg，0.80mmol)和10摩尔％的Pd/C在甲醇(2mL)中的溶液回流3小时。用硅藻土过滤催化剂并蒸发溶剂。使用DCM/MeOH(9:1:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗反应混合物，得到呈白色固体的所需产物20-21。收率51％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝9Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.26(d,J＝1.2Hz,1H),6.87(d,J＝8.4Hz,1H),4.57(m,2H),3.90(m,3H),3.24(m,1H),2.96(s,3H),1.94(m,2H),1.82(m,1H),1.73(m,1H),1.46(m,1H)；MS(ESI)m/z 352.42(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁烷甲亚胺酸乙酯盐酸盐(20-22)。向1-10(100mg，0.35mmol)在乙醇(0.3mL)中的溶液中鼓入盐酸气体1小时，并将该反应物在室温下搅拌12小时。通过LCMS监测反应完成后，蒸发溶剂，得到呈白色固体的最终化合物20-22。收率100％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.38(d,J＝5.4Hz,1H),8.27(d,J＝8.4Hz,1H),8.23(m,1H),7.29(s,1H),7.09(d,J＝9Hz,1H),4.60(m,2H),3.92(s,3H),3.88(m,2H),3.11(s,3H),2.43(m,2H),2.02(m,2H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)；MS(ESI)m/z 327.39(M+H)+。
合成20-23的一般程序。向3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙醛或2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙醛(1.12mmol)和K2CO3(3当量)在MeOH/THF(1:1，3mL)中的溶液中添加(1-重氮-2-氧丙基)膦酸二甲酯(10％的乙腈溶液，2当量)，并在室温下搅拌24小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-23。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丙-1-炔(20-23a)。收率71％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.20(d,J＝5.4Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.33(d,J＝2.4Hz,1H),6.91(m,1H),5.45(s,2H),3.91(s,3H),3.37(t,J＝2.4Hz,1H),3.04(s,3H)；MS(ESI)m/z 251.94(M+H)+。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丁-1-炔(20-23b)。收率67％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝4.8Hz,1H),7.98(d,J＝9Hz,1H),7.73(d,J＝4.8Hz,1H),7.91(m,2H),4.70(t,J＝7.2Hz,2H),3.95(s,3H),3.05(s,3H),2.70(m,2H),2.05(t,J＝3Hz,1H)；MS(ESI)m/z265.86(M+H)+。
合成20-24的一般程序。向3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丙-1-炔或4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-戊-1-炔(0.44mmol)和1-叠氮基-2-甲氧基乙烷(10当量)在叔丁醇/水(1:1，4mL)中的溶液，依次添加抗坏血酸钠(0.1当量)和五水合硫酸铜(0.01当量)，并在室温下搅拌24小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-24。
4-(2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙基)-1-(2-甲氧基乙基)-1,2,3-三唑(20-24a)。收率73％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝5.4Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.73(d,J＝5.4Hz,1H),7.97(s,1H),6.84(m,1H),6.69(d,J＝1.8Hz,1H),4.86(t,J＝7.2Hz,2H),4.34(t,J＝5.4Hz,2H),3.89(s,3H),3.53(t,J＝5.4Hz,2H),3.22(m,5H),3.01(s,3H)；MS(ESI)m/z 367.14(M+H)+。
4-(3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙基)-1-(2-甲氧基乙基)-1,2,3-三唑(20-24b)。收率64％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.76(bs,1H),7.40(s,1H),6.93(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(m,1H),4.61(t,J＝7.8Hz,2H),4.49(t,J＝4.8Hz,2H),3.94(s,3H),3.73(t,J＝4.8Hz,2H),3.34(s,3H),2.94(s,3H),2.82(t,J＝7.2Hz,2H),2.26(m,2H)；MS(ESI)m/z 381.07(M+H)+。
合成20-25的一般程序。向3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丙基叠氮化物或4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-戊基叠氮化物(0.31mmol)和甲基炔丙基醚(1.05当量)在叔丁醇/水(1:1，4mL)中的溶液中依次添加抗坏血酸钠(0.1当量)和五水合硫酸铜(0.01当量)，并在室温下搅拌24小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-25。
1-(3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙基)-4-(甲氧基甲基)-1,2,3-三唑(20-25a)。收率72％.％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝5.4Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.74(d,J＝5.4Hz,1H),7.50(s,1H),6.89(m,1H),6.81(d,J＝1.8Hz,1H),4.61(m,4H),4.40(t,J＝6Hz,2H),3.93(s,3H),3.43(s,3H),2.92(s,3H),2.47(m,2H),3.01(s,3H)；MS(ESI)m/z 366.96(M+H)+。
1-(4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁基)-1-(甲氧基甲基)-1,2,3-三唑(20-25b)。收率63％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.30(d,J＝5.4Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,1H),7.74(d,J＝5.4Hz,1H),7.41(s,1H),6.89(m,1H),6.84(d,J＝1.8Hz,1H),4.55(s,2H),4.51(t,J＝7.8Hz,2H),3.96(s,3H),3.39(s,3H),2.97(s,3H),2.00(m,2H),1.86(m,2H)；MS(ESI)m/z 381.04(M+H)+。
合成20-26的一般程序。在-20℃下向20-1r–20-1s或20-23(0.179mmol)在THF(0.2mL)中的溶液中添加BuLi(2.5M的己烷溶液，1.05当量)并搅拌30分钟，然后添加氯化锌(0.7M的THF溶液，1.1当量)，同时保持-20℃的温度。搅拌5分钟后，将三氯乙酰基异氰酸酯(1.1当量)添加到反应物中，并使其在2小时内升温至室温。随后，依次添加碳酸钾(1.5当量)和MeOH(2mL)，并将反应物在室温下搅拌12小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-25。
4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丁-1-炔酰胺(20-26a)。收率75％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.31(s,1H),8.20(d,J＝4.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.97(s,1H),7.89(d,J＝6.6Hz,1H),7.55(s,1H),7.36(d,J＝1.8Hz,1H),6.92(m,1H),5.65(s,2H),3.92(s,3H),3.04(s,3H)；MS(ESI)m/z 294.26(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-戊-1-炔酰胺(20-26b)。收率70％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.31(s,1H),8.18(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.72(s,1H),7.43(s,1H),7.28(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(m,1H),4.80(t,J＝7.2Hz,2H),3.92(s,3H),2.98(s,3H),2.88(t,J＝7.2Hz,2H)；MS(ESI)m/z 308.22(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-己-1-炔酰胺(20-26c)。收率28％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.18(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.89(m,2H),7.46(s,1H),7.23(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(m,1H),4.65(t,J＝7.2Hz,2H),3.91(s,3H),2.97(s,3H),2.45(t,J＝6.6Hz,2H),1.96(m,2H)；MS(ESI)m/z 322.67(M+H)+。
合成20-27的一般程序。在0℃下，向10-1a/b(2.32mmol)在THF(25m)中的溶液中分批添加LiAlH4(1.5当量)。添加之后，将反应物回流6小时。将反应物用水淬灭并在室温下搅拌1小时。过滤沉淀物，并将滤液转移至分液漏斗中并用乙酸乙酯(50mLX3)萃取。收集有机层，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-27。
2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙醇(20-27a)。收率100％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.10(d,J＝5.4Hz,1H),8.00(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝5.4Hz,1H),7.09(d,J＝1.2Hz,1H),6.89(m,1H),4.69(t,J＝6Hz,2H),3.92(m,5H),3.01(s,3H)；MS(ESI)m/z257.42(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙醇(20-27b)。收率100％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.10(d,J＝5.4Hz,1H),8.00(d,J＝9Hz,1H),7.83(d,J＝4.8Hz,1H),7.12(s,1H),6.88(m,1H),4.67(t,J＝7.2Hz,2H),3.93(s,3H),3.63(t,J＝6Hz,2H),3.00(s,3H),2.01(m,2H)；MS(ESI)m/z 271.69(M+H)+。
DYRK1A结合测定法。在Life Technologies商业激酶分析服务中心测试化合物的DYRK1A结合活性，该服务中心使用基于FRET的
Figure BDA0002777618320001111
Eu激酶结合测定法。一式两份，以1000nM和300nM的浓度对化合物进行DYRK1A活性筛选。IC50通过一式两份的10点
Figure BDA0002777618320001112
Eu激酶结合测定法测定。
Β细胞增殖测定法。人胰岛从NIH/NIDDK支持的综合胰岛分发计划(IIDP)获得。如先前所述(Wang等人，2015，其特此通过引用整体并入)，首先用Accutase(Sigma,St.Louis,MO)将胰岛分散到盖玻片上。2小时后，在RPMI1640完全培养基中用化合物处理分散的人胰岛细胞96小时。然后将细胞固定并进行胰岛素和Ki67染色(Wang等人，2015，其特此通过引用整体并入)。对总胰岛素阳性细胞及Ki67和胰岛素双阳性细胞成像并计数。计数至少1000个细胞。
实施例10-9-取代的骆驼蓬碱类似物的SAR分析和人β细胞增殖测定
如图6中所述，合成9-取代的骆驼蓬碱类似物。表6显示，各种9-取代的骆驼蓬碱类似物对DYRK1A的IC50与骆驼蓬碱相当。更具体地说，化合物20-1c和20-2c的IC50分别为26.8nM和25nM(表6)。表7和表8示出了各种另外的9-取代的骆驼蓬碱类似物抑制DYRK1A的能力。表9显示这些化合物差异性地调节β细胞增殖。具体而言，来自表6的浓度为5μM的化合物20-13诱导人β-细胞增殖的程度比浓度为10μM的骆驼蓬碱更高。
表6.示例性的经取代的骆驼蓬碱类似物的DYRK1A抑制作用
Figure BDA0002777618320001131
a＝使用十种连续三倍稀释液(一式两份)测定IC50值
表7.其它示例性的骆驼蓬碱类似物的DYRK1A抑制作用
Figure BDA0002777618320001141
a＝使用十种连续三倍稀释液(一式两份)测定IC50值
表8.其它示例性的经取代的骆驼蓬碱类似物的DYRK1A抑制作用
Figure BDA0002777618320001151
a＝使用十种连续三倍稀释液(一式两份)测定IC50值
表9.示例性的经取代的骆驼蓬碱类似物的β细胞增殖
Figure BDA0002777618320001161
实施例11-激酶组扫描谱
为了了解化合物子集的激酶选择性，在10μM浓度下对468种激酶进行化合物2-23a、20-13、20-2c和2-8的激酶组分析(表10，如下所示活性<20％)。
表10.化合物2-23a、20-13、20-2c和2-8的激酶组扫描a
Figure BDA0002777618320001171
Figure BDA0002777618320001181
Figure BDA0002777618320001191
a在10μM下针对468种激酶对化合物进行筛选，并且初级筛选结合相互作用的结果报告为“％DMSO对照”，其中值越低表示亲和力越强。
b≤10。
c11≤20。
d突变体
实施例12-骆驼蓬碱和化合物20-2c的CNS脱靶活性
因为已知骆驼蓬碱由于其对血清素、色胺和其它相关受体的亲和力，通过充当中枢神经系统兴奋剂而表现出致幻性，针对骆驼蓬碱已知的一组CNS脱靶靶标(和密切相关的靶标)，在10μM的浓度下对化合物20-2c和骆驼蓬碱进行筛选(Eurofins CEREP筛选)(表11)。化合物20-2c的选择性比骆驼蓬碱更高，在筛选剂量下除单胺氧化酶A外，对任何受体均未显示出结合活性。因此，可以通过对骆驼蓬碱的系统性修饰来鉴定具有有效的DYRK1A抑制活性、改善的β细胞增殖能力和更安全的脱靶特性的类似物。
表11.骆驼蓬碱类似物的CNS脱靶活性a
Figure BDA0002777618320001201
a几种CNS药物靶标的Eurofins CEREP筛选；数字越大表示对靶标的亲和力越高。在10μM下对化合物进行筛选
b≥45％抑制作用
实施例13-实施例14的材料和方法
7-氘代甲氧基-1-甲基-9H-吡啶并[3,4-b]-吲哚(20-28)。在室温下搅拌骆驼蓬醇(600mg，3.03mmol)和碳酸铯(1.18g，3.63mmol)在DMF(10mL)中的溶液1小时。向该溶液中添加d3-甲基碘(0.224mL，3.63mmol)，并在室温下搅拌12小时。通过TLC确认反应完成后，将反应混合物用水稀释，转移至分液漏斗中并用乙酸乙酯(50mLX2)萃取。将有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发，并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物20-28。收率45％1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.36(d,J＝6Hz,1H),8.25(d,J＝8.4Hz,1H),7.17(s,1H),7.09(d,J＝9Hz,1H),3.04(s,3H)；MS(ESI)m/z 216.32(M+H)+。
4-(7-氘代甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁腈(20-29)。向20-28(177mg，0.82mmol)在DMF(3mL)中的溶液中添加NaH(66mg，1.64mmol)并在室温下搅拌1小时。在50℃下向该溶液中添加4-溴丁腈(0.163mL，1.64mmol)并在该温度下搅拌12小时。通过TLC确认反应完成后，将反应混合物用水稀释，转移至分液漏斗并用乙酸乙酯(50mLX2)萃取。将有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发，并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈白色固体的所需产物20-29。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.21(d,J＝5.4Hz,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(d,J＝5.4Hz,1H),7.24(d,J＝2.4Hz,1H),6.91(m,1H),4.63(t,J＝7.8Hz,2H),2.98(s,3H),2.66(t,J＝7.2Hz,2H),2.06(t,J＝7.8Hz,2H)；MS(ESI)m/z 283.24(M+H)+。使用相同程序合成20-33、20-36a至20-36d和20-39。
4-(7-氘代甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-30)。在0℃下向20-29(60mg，0.21mmol)在DMSO(0.5mL)中的溶液中添加50％的过氧化氢溶液(0.024mL)，然后添加碳酸钾(5mg，0.03mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。反应完成后，将反应混合物真空干燥，并用DCM/MeOH(9:1)的混合物作为洗脱剂，使用快速色谱法纯化，得到呈白色固体的最终产物。收率81％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(m,1H),8.08(d,J＝7.8Hz,1H),7.87(s,1H),7.35(m,1H),7.27(s,1H),6.87(m,2H),4.54(t,J＝7.8Hz,2H),2.95(s,3H),2.19(t,J＝7.2Hz,2H),1.94(m,2H)；MS(ESI)m/z 301.42(M+H)+。使用相同的程序合成20-40。
N'-羟基-4-(7-氘代甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁脒(20-31)。使20-29(142mg，0.50mmol)、盐酸羟胺(139mg，2.01mmol)和三甲胺(0.28mL，2.01mmol)在乙醇(2mL)中的溶液回流12小时。蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-31。收率74％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.26(d,J＝6Hz,1H),8.22(d,J＝9.6Hz,1H),8.15(m,1H),7.27(s,1H),6.96(m,1H),4.60(t,J＝7.8Hz,2H),3.04(s,3H),2.23(m,2H),2.02(m,2H)；MS(ESI)m/z 316.46(M+H)+。使用相同的程序合成20-37a至20-37d。
3-(3-(7-氘代甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙基)-5-氨基-1,2,4-噁二唑(20-32)。在0℃下向20-11(150mg，0.48mmol)和吡啶(0.154mL，1.92mmol)在甲苯中的溶液添加三氯乙酰氯(0.06mL，0.57mmol)，并在相同温度下再搅拌一小时。然后将反应混合物加热至85℃，保持12小时。反应完成后，蒸发溶剂并且将7N氨的甲醇溶液(2mL)添加到粗产物中，并在室温下搅拌12小时。反应完成后，蒸发溶剂并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化粗产物，得到呈白色固体的所需产物20-32。收率46％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.72(bs,2H),7.23(d,J＝1.8Hz,1H),6.87(m,1H),4.62(t,J＝7.8Hz,2H),2.90(s,3H),2.57(t,J＝7.2Hz,2H),2.08(m,2H)；MS(ESI)m/z 341.72(M+H)+。使用相同的程序合成20-38a至20-38d。
3-(7-氘代甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)-丙-1-炔(20-33)。白色固体。收率51％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.19(d,J＝4.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.33(d,J＝2.4Hz,1H),6.89(m,1H),5.78(d,J＝6.6Hz,1H),5.45(d,J＝2.4Hz,2H),3.04(s,3H)；MS(ESI)m/z 354.72(M+H)+。
7-三氟甲氧基-1-甲基-9H-吡啶并[3,4-b]-吲哚(20-35)。在0℃下向6-三氟甲氧基色胺(200mg，0.81mmol)和乙醛(40％的水溶液，0.058mL，0.81mmol)在1.5mL二氯甲烷中的混合物中，滴加0.08mL三氟乙酸。然后将反应混合物在室温下搅拌12小时。通过LCMS监测反应完成后，蒸发反应混合物，得到呈白色固体的20-34，其无需纯化即可用于下一步。将20-34、碳酸锂(60mg，0.81mmol)和碳载钯(10mg，0.008mmol)在乙醇(2.5mL)中的混合物在CEM微波反应器中于150℃加热10分钟。经硅藻土过滤催化剂，减压浓缩，并使用DCM/MeOH(9:1)作为洗脱剂，通过快速柱色谱法纯化，得到呈褐色固体的20-35。收率25％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.82(s,1H),8.34(d,J＝8.4Hz,1H),8.25(d,J＝5.4Hz,1H),7.98(d,J＝4.8Hz,1H),7.50(s,1H),7.21(d,J＝7.8Hz,1H),2.76(s,3H)；MS(ESI)m/z 367.72(M+H)+。
2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙腈(20-36a)。白色固体。收率61％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.25(d,J＝4.8Hz,1H),8.13(d,J＝8.4Hz,1H),7.92(d,J＝4.8Hz,1H),7.47(s,1H),6.96(m,1H),5.89(s,2H),3.92(s,3H),3.02(s,3H)；MS(ESI)m/z 252.61(M+H)+。
3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙腈(20-36b)。白色固体。收率57％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.19(d,J＝4.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.89(d,J＝4.8Hz,1H),7.36(d,J＝1.8Hz,1H),6.90(m,1H),4.92(t,J＝6.6Hz,2H),3.91(s,3H),3.09(t,J＝6.6Hz,2H),2.98(s,3H)；MS(ESI)m/z 266.45(M+H)+。
5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)戊腈(20-36c)。白色固体。收率34％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(d,J＝4.8Hz,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝4.8Hz,1H),7.23(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(m,1H),4.59(t,J＝7.2Hz,2H),3.91(s,3H),2.94(s,3H),2.57(t,J＝7.2Hz,2H),1.81(m,2H),1.65(m,2H)；MS(ESI)m/z 294.23(M+H)+。
6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)己腈(20-36d)。白色固体。收率42％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.87(d,J＝5.4Hz,1H),7.20(d,J＝1.8Hz,1H),6.885(m,1H),4.55(t,J＝7.8Hz,2H),3.91(s,3H),2.94(s,3H),1.73(m,2H),1.60(m,2H),1.48(m,2H)；MS(ESI)m/z 308.33(M+H)+。
N'-羟基-2-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙脒(20-37a)。白色固体。收率54％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ9.99(bs,2H),8.48(d,J＝4.8Hz,1H),8.36(m,2H),7.88(d,J＝5.4Hz,1H),7.43(d,J＝1.8Hz,1H),7.06(m,1H),1.86(s,2H),3.95(s,3H),3.16(s,3H)；MS(ESI)m/z285.71(M+H)+。
N'-羟基-3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丙脒(20-37b)。白色固体。收率69％。MS(ESI)m/z 299.53(M+H)+。
N'-羟基-5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)戊脒(20-37c)。白色固体。收率44％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(m,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.90(m,1H),7.18(s,1H),6.88(d,J＝8.4Hz,1H),5.50(bs,2H),4.55(t,J＝7.2Hz,2H),3.91(s,3H),2.95(s,3H),2.05(m,2H),1.71(m,2H),1.62(m,2H)；MS(ESI)m/z 327.88(M+H)+。
N'-羟基-6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)己脒(20-37d)。白色固体。收率74％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.24(d,J＝5.4Hz,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,1H),8.10(s,1H),7.26(s,1H),6.94(m,1H),4.58(t,J＝7.8Hz,2H),3.93(s,3H),3.03(s,3H),2.18(t,J＝7.2Hz,2H),1.76(m,2H),1.61(m,2H),1.40(m,2H)；MS(ESI)m/z 341.22(M+H)+。
1-(1-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)甲基)-5-氨基-1,2,4-噁二唑(20-38a)。白色固体。收率35％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.17(d,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝4.8Hz,1H),7.85(bs,2H),7.28(s,1H),6.89(m,1H),5.72(s,2H),3.87(s,3H),2.95(s,3H)；MS(ESI)m/z 310.33(M+H)+。
3-(3-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)乙基)-5-氨基-1,2,4-噁二唑(20-38b)。白色固体。收率46％。MS(ESI)m/z 324.55(M+H)+。
5-(5-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁基)-5-氨基-1,2,4-噁二唑(20-38c)。白色固体。收率72％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.26(m,1H),8.21(d,J＝6.6Hz,1H),8.15(m,1H),7.63(bs,2H),7.28(s,1H),6.95(m,1H),4.61(t,J＝7.8Hz,2H),3.94(s,3H),3.03(s,3H),1.80(m,2H),1.71(m,2H)；MS(ESI)m/z 352.27(M+H)+。
6-(6-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)戊基)-5-氨基-1,2,4-噁二唑(20-38d)。白色固体。收率46％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.16(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.88(d,J＝4.8Hz,1H),7.62(bs,2H),7.17(s,1H),6.86(m,1H),4.54(t,J＝7.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.93(s,3H),2.42(m,2H),1.74(m,2H),1.65(tm,2H),1.42(m,2H)；MS(ESI)m/z 366.82(M+H)+。
2,2-二甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁腈(20-39)。黄色固体。收率71％。1H-NMR(600MHz,CD3OD):δ8.12(d,J＝5.4Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.85(d,J＝5.4Hz,1H),7.01(s,1H),6.91(d,J＝8.4Hz,1H),4.67(t,J＝8.4Hz,2H),3.94(s,3H),3.00(s,3H),2.03(m,2H),1.49(s,6H)；MS(ESI)m/z 308.23(M+H)+。
2,2-二甲基-4-(7-甲氧基-1-甲基-β-咔啉-9-基)丁酰胺(20-40)。黄色固体。收率81％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.29(d,J＝6Hz,1H),8.25(d,J＝8.4Hz,1H),7.21(bs,1H),7.35(s,1H),7.28(d,J＝1.8Hz,1H),7.15(s,1H),6.99(m,1H),4.51(m,2H),3.95(s,3H),3.08(s,3H),1.91(d,J＝7.2Hz,1H),1.24(s,6H)；MS(ESI)m/z 326.71(M+H)+。
实施例14-7-氘代甲氧基骆驼蓬碱类似物的DYRK1A抑制作用
按照图7中概述的反应序列合成7-氘代甲氧基骆驼蓬碱类似物。表12显示类似物20-33显示出最佳活性，其IC50为8nM。类似物20-28、20-30和20-32对DYRK1A的IC50分别为39nM、37nM和35nM。
表12.新型骆驼蓬碱类似物的DYRK1A抑制作用
Figure BDA0002777618320001261
a＝使用十种连续三倍稀释液(一式两份)测定IC50值
尽管本文已经详细描绘和描述了优选实施方案，但是对于相关领域的技术人员而言将显而易见的是，在不脱离本发明的精神的情况下，可以作出各种修改、添加、取代等并且因此这些被视为处于以下权利要求所限定的本发明的范围内。

Claims (75)

1.一种具有以下结构的式(I)的化合物：
Figure FDA0002777618310000011
或其立体异构体、药学上可接受的盐、氧化物或溶剂化物，其中
R1是任选地被Y、-NHR5、-C(O)NHCH(CH3)2或-O(CH2)2OR6取代的具支链或无支链的C1-6烷氧基，其中所述烷氧基任选地被卤化或氘化；
R2是H或具支链或无支链的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基，其中所述具支链或无支链的C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基任选地被Z取代；
R3是C1-6烷基、卤素、具支链或无支链的C1-6羟烷基、-C(O)CH3、-OH或任选地被R7取代的杂环基；
R4是H、-OH、具支链或无支链的C1-6羟烷基或-C(O)CH3；
R5为H、-C(O)CH3或-C(O)Ar；
R6为具支链或无支链的C1-6烷基、-(CH2)2NHBoc、-(CH2)2NH(O)CH3或-(CH2)2NH3Cl；
R7为-ArX或-CH2ArX；
R8是任选的，并且当存在时为O；
X为H或卤素；
Y为-CO2CH3、-NHBoc、-C(O)NH2、-CO2H、-NH3Cl、-NHC(O)CH3；并且
Z为-CO2CH3、-CO2H、-C(O)NH2，或选自由以下组成的组的氨基取代的杂芳基：呋喃、噻吩、吡咯、噁唑、噻唑、咪唑、吡唑、异噁唑、异噻唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,3-噻二唑、1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、四唑和1,2,3,4-噁三唑；
附带以下条件：
当R1为-OCH3，R3为-CH3，并且R4为H时，R2不可以是-(CH2)2CO2CH3、-(CH2)2CO2H或-(CH2)2C(O)NH2；
当R1为-OCH3，R2为H，并且R4为H时，R3不可以是-CH2OH或Cl；并且
当R1为-OCH3，R2为H，R3为-CH3时，R4不可以是H。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1为-OCH3；
R2是被-CO2CH3取代的具支链或无支链的C1-6烷基；
R3为甲基；并且
R4为H。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中R2选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000031
4.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1为-OCH3；
R2是被-CO2H取代的具支链或无支链的C1-6烷基；
R3为甲基；并且
R4为H。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中R2选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000032
6.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1为-OCH3；
R2是被-C(O)NH2取代的具支链或无支链的C1-6烷基；
R3为甲基；并且
R4为H。
7.根据权利要求6所述的化合物，其中R2选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000041
8.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1为-OCH3；
R2是被经取代的杂芳基取代的具支链或无支链的C1-6烷基；
R3为甲基；并且
R4为H。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中R2选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000051
10.根据权利要求1所述的化合物，其中
R2为H；
R3为甲基；并且
R4为H。
11.根据权利要求10所述的化合物，其中R1是被-CO2CH3取代的C1-6烷氧基。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000052
13.根据权利要求10所述的化合物，其中R1是被-NHBoc取代的C1-6烷氧基。
14.根据权利要求13所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000061
15.根据权利要求10所述的化合物，其中R1是被-C(O)NH2取代的C1-6烷氧基。
16.根据权利要求15所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000062
17.根据权利要求10所述的化合物，其中R1是被-CO2H取代的C1-6烷氧基。
18.根据权利要求17所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000071
19.根据权利要求10所述的化合物，其中R1是被-NH3Cl取代的C1-6烷氧基。
20.根据权利要求19所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000072
21.根据权利要求10所述的化合物，其中R1是被-NHC(O)CH3取代的C1-6烷氧基。
22.根据权利要求21所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000073
23.根据权利要求10所述的化合物，其中R1为-NH2。
24.根据权利要求10所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000081
25.根据权利要求10所述的化合物，其中R1为-O(CH2)2OR6。
26.根据权利要求25所述的化合物，其中R1选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000082
27.根据权利要求10所述的化合物，其中R1选自-OCD3或-OCF3。
28.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1为-OCH3；
R2为H；并且
R4为H。
29.根据权利要求28所述的化合物，其中R3为卤素。
30.根据权利要求28所述的化合物，其中R3选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000083
Figure FDA0002777618310000091
31.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1为-OCD3；
R3为甲基；并且
R4为H。
32.根据权利要求31所述的化合物，其中R2选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000092
33.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自由以下组成的组：
Figure FDA0002777618310000101
Figure FDA0002777618310000111
34.一种抑制细胞中双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)的活性的方法，所述方法包括：
在有效抑制所述细胞中的DYRK1A活性的条件下，使所述细胞与根据权利要求1所述的化合物接触。
35.根据权利要求34所述的方法，其中所述方法是离体进行的。
36.根据权利要求34所述的方法，其中所述方法是在体内进行的。
37.一种增加胰腺β细胞群中的细胞增殖的方法，所述方法包括：
在有效增加胰腺β细胞群中的细胞增殖的条件下，使所述胰腺β细胞群与根据权利要求1所述的化合物接触。
38.根据权利要求37所述方法，其还包括：
使所述胰腺β细胞群与转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导途径抑制剂接触。
39.根据权利要求38所述的方法，其中所述方法是用包含所述化合物和所述TGFβ超家族信号传导途径抑制剂两者的组合物进行的。
40.根据权利要求38所述的方法，其中所述TGFβ超家族信号传导途径抑制剂选自由以下组成的组：TGFβ/TGFβ受体结合抑制剂、激活素或抑制素/激活素受体结合抑制剂和骨形态发生蛋白(BMP)/BMP受体结合抑制剂。
41.根据权利要求38所述的方法，其中所述TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是选自由SB431542和Alk5抑制剂II组成的组的激活素或抑制素/激活素受体结合抑制剂。
42.根据权利要求38所述的方法，其中所述TGFβ超家族信号传导途径抑制剂是SMAD信号传导途径抑制剂。
43.根据权利要求37所述方法，其还包括：
使所述胰腺β细胞群与胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)激动剂接触。
44.根据权利要求43所述的方法，其中所述方法是用包含所述化合物和所述胰高血糖素样肽-1受体(GLP1R)激动剂两者的组合物进行的。
45.根据权利要求44所述的方法，其中所述GLP1R激动剂选自由以下组成的组：GLP1类似物、毒蜥外泌肽-4、利拉鲁肽、利西那肽、索马鲁肽及其组合。
46.根据权利要求37所述方法，其还包括：
使所述胰腺β细胞群与二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂接触。
47.根据权利要求46所述的方法，其中所述方法是用包含所述化合物和所述二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂两者的组合物进行的。
48.根据权利要求47所述的方法，其中所述DPP4抑制剂选自由以下组成的组：西他列汀、维格列汀、沙格列汀、阿格列汀、替格列汀和阿拉格列汀。
49.根据权利要求37-48中任一项所述的方法，其中所述方法是离体进行的。
50.根据权利要求37-48中任一项所述的方法，其中所述方法是在体内进行的。
51.根据权利要求37-50中任一项所述的方法，其中所述胰腺β细胞是原代人胰腺β细胞。
52.根据权利要求37-51中任一项所述的方法，其中所述接触不会诱导β细胞死亡或DNA损伤。
53.根据权利要求37-52中任一项所述的方法，其中所述接触诱导β细胞分化。
54.根据权利要求37-53中任一项所述的方法，其中所述接触增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
55.一种组合物，其包含：
根据权利要求1所述的化合物和
载体。
56.根据权利要求55所述的组合物，其还包含：
转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导途径抑制剂。
57.根据权利要求55所述的组合物，其还包含：
胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)激动剂。
58.根据权利要求55所述的组合物，其还包含：
二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂。
59.根据权利要求55-58中任一项所述的组合物，其中所述载体是药学上可接受的载体。
60.一种治疗受试者的与胰岛素分泌不足相关的疾患的方法，所述方法包括：
向需要治疗与胰岛素分泌水平不足相关的疾患的受试者，在有效治疗所述受试者的所述疾患的条件下施用根据权利要求1所述的化合物。
61.根据权利要求60所述的方法，其还包括：
施用转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导途径抑制剂。
62.根据权利要求60所述的方法，其还包括：
施用胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)激动剂。
63.根据权利要求60所述的方法，其还包括：
施用二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂。
64.根据权利要求60-63中任一项所述的方法，其中所述施用是在有效增加所述受试者体内的胰腺β细胞质量的条件下进行的。
65.根据权利要求60所述的方法，其中所述受试者已被诊断为患有I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成熟期发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着病相关糖尿病、药物诱发的糖尿病或单基因糖尿病中的一种或多种。
66.根据权利要求60所述的方法，其中所述受试者已被诊断为患有代谢综合征或胰岛素抗性。
67.根据权利要求60所述的方法，其中所述受试者接受过胰腺切除术、胰腺移植或胰岛移植。
68.根据权利要求60所述的方法，其中所述施用是经口、经皮、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内或腹膜内进行的。
69.根据权利要求60所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物受试者。
70.根据权利要求60所述的方法，其中所述受试者是人类受试者。
71.一种治疗受试者的神经障碍的方法，所述方法包括：
向需要治疗神经障碍的受试者，在有效治疗所述受试者的所述疾患的条件下施用权利要求1所述的化合物。
72.根据权利要求71所述的方法，其中所述受试者已被诊断为患有糖尿病、唐氏综合征或神经退行性疾病中的一种或多种。
73.根据权利要求71所述的方法，其中所述施用是经口、经皮、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内或腹膜内进行的。
74.根据权利要求71所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物受试者。
75.根据权利要求71所述的方法，其中所述受试者是人类受试者。
CN201980032475.XA 2018-03-20 2019-03-20 激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法 Pending CN112135613A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862645560P 2018-03-20 2018-03-20
US62/645,560 2018-03-20
PCT/US2019/023206 WO2019183245A1 (en) 2018-03-20 2019-03-20 Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112135613A true CN112135613A (zh) 2020-12-25

Family

ID=67988050

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980032475.XA Pending CN112135613A (zh) 2018-03-20 2019-03-20 激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法

Country Status (7)

Country Link
US (2) US11866427B2 (zh)
EP (1) EP3768267A4 (zh)
JP (1) JP2021518413A (zh)
CN (1) CN112135613A (zh)
AU (1) AU2019240065A1 (zh)
CA (1) CA3093340A1 (zh)
WO (1) WO2019183245A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114907346A (zh) * 2022-05-19 2022-08-16 暨南大学 一种生物碱类化合物、提取物及其在制备具有抗呼吸道合胞病毒作用的产品中的应用
CN115322089A (zh) * 2022-07-18 2022-11-11 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) 一种覆盆子酮半抗原、人工抗原及其制备方法、抗体和应用
WO2023123834A1 (zh) * 2021-12-28 2023-07-06 大连医科大学附属第一医院 Norharman在制备预防或治疗急性胰腺炎药物中的应用

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3717475B1 (en) 2017-11-20 2023-06-07 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
CA3086925A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Ichan School Of Medicine At Mount Sinai Method of increasing proliferation of pancreatic beta cells, treatment method, and composition
US11802129B1 (en) 2023-03-20 2023-10-31 King Faisal University Pyrido[3,4-b]indol-1-one compounds as anticancer agents
US11773092B1 (en) 2023-03-27 2023-10-03 King Faisal University Pyrido[3,4-b]indol-1-one compounds as antibacterial agents

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012024433A2 (en) * 2010-08-17 2012-02-23 Translational Genomics Research Institute Compounds that inhibit tau phosphorylation
CN102977096A (zh) * 2012-12-07 2013-03-20 中国药科大学 具有靶向特性的去氢骆驼蓬碱衍生物的抗肿瘤前药
WO2015011331A1 (es) * 2013-07-25 2015-01-29 Fundación Para La Investigación Biomédica Del Hospital Universitario La Paz (Fibhulp) Uso de compuestos derivados de sales de piridazino[1',6':1,2]pirido[3,4-b]indolinio y piridazino[3,2-b]benzimidazolio como agentes antiinflamatorios
CN105884767A (zh) * 2015-11-24 2016-08-24 西华大学 9-位取代的吡啶并[3,4-b]吲哚衍生物及其制备方法和作为SIRT蛋白抑制剂的用途

Family Cites Families (140)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU612591B2 (en) 1986-08-11 1991-07-18 Innovata Biomed Limited Pharmaceutical formulations comprising microcapsules
US5179079A (en) 1986-12-16 1993-01-12 Novo Nordisk A/S Nasal formulation and intranasal administration therewith
GB8723846D0 (en) 1987-10-10 1987-11-11 Danbiosyst Ltd Bioadhesive microsphere drug delivery system
US5571714A (en) 1988-12-22 1996-11-05 Celtrix Pharmaceuticals, Inc. Monoclonal antibodies which bind both transforming growth factors β1 and β2 and methods of use
US4994439A (en) 1989-01-19 1991-02-19 California Biotechnology Inc. Transmembrane formulations for drug administration
CA2050905A1 (en) 1989-02-23 1990-08-24 George R. Felt Therapeutic aerosol formulations
GB8921222D0 (en) 1989-09-20 1989-11-08 Riker Laboratories Inc Medicinal aerosol formulations
US5731144A (en) 1990-06-11 1998-03-24 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. High affinity TGFβ nucleic acid ligands
US5731424A (en) 1990-06-11 1998-03-24 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. High affinity TGFβ nucleic acid ligands and inhibitors
US5230884A (en) 1990-09-11 1993-07-27 University Of Wales College Of Cardiff Aerosol formulations including proteins and peptides solubilized in reverse micelles and process for making the aerosol formulations
US5292499A (en) 1990-09-11 1994-03-08 University Of Wales College Of Cardiff Method of preparing medical aerosol formulations including drug dissolved in reverse micelles
US6632456B1 (en) 1993-06-24 2003-10-14 Astrazeneca Ab Compositions for inhalation
US6524557B1 (en) 1994-12-22 2003-02-25 Astrazeneca Ab Aerosol formulations of peptides and proteins
CH689139A5 (de) 1995-04-03 1998-10-30 Cerbios Pharma Sa Verfahren zur Herstellung einer liposomalen, in Wasser dispergierbaren, oral zu verabreichenden, festen, trockenen therapeutischen Formulierung.
US6309671B1 (en) 1995-04-14 2001-10-30 Inhale Therapeutic Systems Stable glassy state powder formulations
US5635161A (en) 1995-06-07 1997-06-03 Abbott Laboratories Aerosol drug formulations containing vegetable oils
US6120794A (en) 1995-09-26 2000-09-19 University Of Pittsburgh Emulsion and micellar formulations for the delivery of biologically active substances to cells
DE69628909T2 (de) 1995-10-12 2003-12-24 Supergen Inc Liposomformulierung von 5-beta steroiden
US6806358B1 (en) 1997-12-16 2004-10-19 University Of California San Diego Peptide inhibitor of TGF-β growth factors
CA2321307A1 (en) 1998-02-27 1999-09-02 Venkatachala L. Narayanan Disubstituted lavendustin a analogs and pharmaceutical compositions comprising the analogs
GB9809869D0 (en) 1998-05-09 1998-07-08 Medical Res Council Inhibition of protein kinases
IL139541A0 (en) 1998-05-20 2004-02-08 Liposome Co Inc Novel particulate formulations
GB9814172D0 (en) 1998-06-30 1998-08-26 Andaris Ltd Formulation for inhalation
US6451349B1 (en) 1998-08-19 2002-09-17 Quadrant Healthcare (Uk) Limited Spray-drying process for the preparation of microparticles
AUPP494798A0 (en) 1998-07-29 1998-08-20 Pacific Biolink Pty Limited Protective protein formulation
US6184226B1 (en) 1998-08-28 2001-02-06 Scios Inc. Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α
US6290987B1 (en) 1998-09-27 2001-09-18 Generex Pharmaceuticals, Inc. Mixed liposome pharmaceutical formulation with amphiphiles and phospholipids
ES2146552B1 (es) 1998-11-24 2001-04-16 Inst Cientifico Tecnol Navarra Peptidos inhibidores de tgf/31
US6436367B1 (en) 1998-12-21 2002-08-20 Generex Pharmaceuticals Inc. Aerosol formulations for buccal and pulmonary application
US6294153B1 (en) 1998-12-21 2001-09-25 Generex Pharmaceuticals, Inc. Aerosol pharmaceutical formulation for pulmonary and nasal delivery
EP1338272A1 (en) 1998-12-21 2003-08-27 Generex Pharmaceuticals Inc. Aerosol formulations for buccal and pulmonary application comprising chenodeoxycholate or deoxycholate
AU2879100A (en) 1999-02-12 2000-08-29 Miles A. Libbey Iii Formulation and system for intra-oral delivery of pharmaceutical agents
AU3957400A (en) 1999-04-16 2000-11-02 Novo Nordisk A/S Dry, mouldable drug formulation
US6492497B1 (en) 1999-04-30 2002-12-10 Cambridge Antibody Technology Limited Specific binding members for TGFbeta1
CA2375914A1 (en) 1999-06-04 2000-12-14 Delrx Pharmaceutical Corporation Formulations comprising dehydrated particles of pharmaceutical agents and process for preparing the same
US20010036481A1 (en) 1999-08-25 2001-11-01 Advanced Inhalation Research, Inc. Modulation of release from dry powder formulations
CA2382821A1 (en) 1999-08-25 2001-03-01 Advanced Inhalation Research, Inc. Modulation of release from dry powder formulations
AU3728001A (en) 2000-01-20 2001-07-31 Basilea Pharmaceutica Ag Nasally administrable cyclic peptide compositions
EP1129705A1 (en) 2000-02-17 2001-09-05 Rijksuniversiteit te Groningen Powder formulation for inhalation
JP2004500424A (ja) 2000-04-17 2004-01-08 ヴェクトゥラ　リミテッド 吸入器で使用するための製剤
GB0009468D0 (en) 2000-04-17 2000-06-07 Vectura Ltd Improvements in or relating to formulations for use in inhaler devices
US20020155084A1 (en) 2000-06-02 2002-10-24 The Regents Of The University Of The Michigan Nanoemulsion formulations
US6509318B1 (en) 2000-09-29 2003-01-21 The Regents Of The University Of California TGF-B inhibitors and methods
FI20002768A (fi) 2000-12-18 2002-06-19 Licentia Oy Enteropäällysteisiä lääkekoostumuksia ja niiden valmistus
GB0107106D0 (en) 2001-03-21 2001-05-09 Boehringer Ingelheim Pharma Powder inhaler formulations
DE60221392T2 (de) 2001-05-24 2008-04-17 Eli Lilly And Co., Indianapolis Neue pyrrolderivate als pharmazeutische mittel
US20030019437A1 (en) 2001-07-26 2003-01-30 John Fore Ungulate game animal feed system and method
US20030028905A1 (en) 2001-07-31 2003-02-06 Petra Knaus Mutant forms of the TGF-beta type II receptor which bind all TGF-beta isoforms
ES2307779T3 (es) 2001-08-16 2008-12-01 Baxter International Inc. Formulaciones de microparticulas a base de propelentes.
TW200301123A (en) 2001-12-21 2003-07-01 Astrazeneca Uk Ltd New use
US20030232019A1 (en) 2002-02-22 2003-12-18 Advanced Inhalation Research, Inc. Inhalable formulations for sustained release
JP2005520843A (ja) 2002-03-20 2005-07-14 アドバンスト インハレーション リサーチ，インコーポレイテッド 呼吸用持続性治療製剤
CA2484724C (en) 2002-05-07 2007-01-16 Ferring B.V. Pharmaceutical formulations
JP2005530800A (ja) 2002-05-15 2005-10-13 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ベンゾオキサジンおよびベンゾオキサジノン置換トリアゾール
EP1511738A4 (en) 2002-05-17 2007-05-09 Scios Inc TREATMENT OF FIBROPROLIFERATIVE DISEASES USING TGF BETA INHIBITORS
US7190468B2 (en) 2002-07-17 2007-03-13 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Background document rendering system and method
JP2005539000A (ja) 2002-07-31 2005-12-22 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション Ａｌｋ５阻害剤としての２−フェニルピリジン−４−イル誘導体
UA80296C2 (en) 2002-09-06 2007-09-10 Biogen Inc Imidazolopyridines and methods of making and using the same
DE60315677T2 (de) 2002-09-17 2008-06-05 Eli Lilly And Co., Indianapolis Pyrazolopyridin derivate als tgf beta hemmstoffe zur behandlung von krebs
CN1681501A (zh) 2002-09-18 2005-10-12 辉瑞产品公司 作为转化生长因子(tgf)抑制剂的吡唑衍生物
WO2004026865A1 (en) 2002-09-18 2004-04-01 Pfizer Products Inc. Novel isothiazole and isoxazole compounds as transforming growth factor (tgf) inhibitors
AU2003260810A1 (en) 2002-09-18 2004-04-08 Pfizer Products Inc. Triazole derivatives as transforming growth factor (tgf) inhibitors
US20040138188A1 (en) 2002-11-22 2004-07-15 Higgins Linda S. Use of TGF-beta inhibitors to counteract pathologic changes in the level or function of steroid/thyroid receptors
ES2571779T3 (es) 2002-12-13 2016-05-26 Ym Biosciences Australia Pty Inhibidores de cinasa a base de nicotinamida
WO2004056352A1 (en) 2002-12-19 2004-07-08 Scios, Inc. TREATMENT OF OBESITY AND ASSOCIATED CONDITIONS WITH TGF-β INHIBITORS
JP2006516603A (ja) 2003-01-27 2006-07-06 ファイザー・プロダクツ・インク イソチアゾール誘導体
EP1603908B1 (en) 2003-03-12 2008-06-11 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Quinazoline derivatives as tgf-beta inhibitors
WO2004087056A2 (en) 2003-03-28 2004-10-14 Scios Inc. BI-CYCLIC PYRIMIDINE INHIBITORS OF TGFβ
ES2389258T3 (es) 2003-06-17 2012-10-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Composiciones y métodos para inhibir TGF-s
US20050032869A1 (en) 2003-07-08 2005-02-10 Pharmacia Italia S.P.A. Pyrazolyl-indole derivatives active as kinase inhibitors, process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
WO2005039570A1 (ja) 2003-10-28 2005-05-06 Riken ＴＧＦ－β情報伝達経路阻害剤
CN1921864A (zh) 2003-12-24 2007-02-28 西奥斯公司 使用TGF－β抑制剂治疗神经胶质瘤
US7368445B2 (en) 2004-03-01 2008-05-06 Eli Lilly And Company Fused pyrazole derivatives as TGF-β signal transduction inhibitors for the treatment of fibrosis and neoplasms
EP1789393A2 (en) 2004-07-30 2007-05-30 GPC Biotech AG Pyridinylamines
JP2007176795A (ja) 2004-08-18 2007-07-12 Univ Nihon ＴＧＦ−β遺伝子発現抑制剤
EP1789044B1 (en) 2004-09-06 2010-10-27 Basilea Pharmaceutica AG Phenylaminopyridines and phenylaminopyrazines
ES2369282T3 (es) 2005-03-25 2011-11-29 Tibotec Pharmaceuticals Inhibidores heterobicíclicos de vhc.
US7872020B2 (en) 2005-07-22 2011-01-18 Eli Lilly And Company TGF-β inhibitors
JP5112322B2 (ja) 2005-10-24 2013-01-09 プロイェクト、デ、ビオメディシナ、シーマ、ソシエダッド、リミターダ 免疫応答調節剤の製造におけるＴＧＦ−β１インヒビターペプチドの使用
US20070208053A1 (en) 2006-01-19 2007-09-06 Arnold Lee D Fused heterobicyclic kinase inhibitors
ITMI20060181A1 (it) 2006-02-03 2007-08-04 Univ Padova Modulatori del tgf-b e loro uso
CA2678036A1 (en) 2007-02-13 2008-08-21 Schering Corporation Functionally selective alpha2c adrenoreceptor agonists
GB0705566D0 (en) * 2007-03-23 2007-05-02 Univ Dundee Method of treating learning impairment in down's syndrome subjects
EP2178537A4 (en) 2007-07-19 2011-08-17 Merck Sharp & Dohme BETA-CARBOLIN DERIVATIVES AS ANTIDIBLE COMPOUNDS
US20110190280A1 (en) 2007-08-29 2011-08-04 George Adjabeng Thiazole And Oxazole Kinase Inhibitors
JP5638961B2 (ja) 2008-03-13 2014-12-10 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション Ｂｍｐシグナル伝達経路のインヒビター
US8298825B1 (en) 2008-08-25 2012-10-30 The General Hospital Corporation TGF-beta receptor inhibitors to enhance direct reprogramming
US20100173931A1 (en) 2009-01-06 2010-07-08 Osteogenex Inc. Harmine derivatives for reducing body weight
US8329723B2 (en) * 2009-04-24 2012-12-11 John K Buolamwini 1-aryl- or 1-heteroaryl-pyrido[B]indoles and uses thereof in treating cancers
EP2430011A1 (en) 2009-05-15 2012-03-21 Novartis AG 5-pyridin-3-yl-1,3-dihydro-indol-2-on derivatives and their use as modulators of aldosterone synthase and/or cyp11b1
US20110123651A1 (en) 2009-05-20 2011-05-26 Mower Thomas E Dietary supplement drink for delivery of resveratrol and other polyphenols
JP2011006408A (ja) 2009-05-29 2011-01-13 Sumitomo Chemical Co Ltd 神経栄養因子の活性が関与する疾患の治療または予防剤
EP2506717B1 (en) 2009-12-04 2015-03-25 PerkinElmer, Inc. Method of using dopamine reuptake inhibitors and their analogs for treating diabetes symptoms and delaying or preventing diabetes-associated pathologic conditions
EP2513298A4 (en) 2009-12-18 2013-03-27 Harvard College COMPOUNDS PROMOTING BETA CELL REPLICATION AND METHODS OF USE THEREOF
US20130102627A1 (en) 2010-04-09 2013-04-25 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Acridines As Inhibitors Of Haspin And DYRK Kinases
WO2011133795A2 (en) 2010-04-22 2011-10-27 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Beta-carbolines as inhibitors of haspin and dyrk kinases
AR081331A1 (es) 2010-04-23 2012-08-08 Cytokinetics Inc Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos
AR081626A1 (es) 2010-04-23 2012-10-10 Cytokinetics Inc Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos
WO2011138421A1 (en) 2010-05-05 2011-11-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy
CA2803697A1 (en) * 2010-06-25 2011-12-29 Facultes Universitaires Notre Dame De La Paix Beta carboline derivatives useful in the treatment of proliferative disorders
RU2576000C2 (ru) 2010-08-09 2016-02-27 Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед Способ получения клеток, продуцирующих панкреатические гормоны
PL2744797T3 (pl) 2011-08-19 2016-01-29 Diaxonhit Inhibitory dyrk1 i ich zastosowanie
CN111012779A (zh) 2011-10-25 2020-04-17 新疆华世丹药物研究有限责任公司 去氢骆驼蓬碱衍生物在制备抗菌药物中的应用
WO2013119518A1 (en) 2012-02-06 2013-08-15 The Regents Of The University Of California Small molecules for islet expansion
CA2877986A1 (en) 2012-06-27 2014-01-03 Orban Biotech Llc Ctla4 fusion proteins for the treatment of diabetes
US9988606B2 (en) 2012-07-24 2018-06-05 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Generation of airway and lung progenitors and epithelial cells and three-dimensional anterior foregut spheres
WO2014064215A1 (en) 2012-10-24 2014-05-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) TPL2 KINASE INHIBITORS FOR PREVENTING OR TREATING DIABETES AND FOR PROMOTING β-CELL SURVIVAL
JP2016500080A (ja) 2012-11-26 2016-01-07 新疆華世丹薬物研究有限責任公司 ビスβ−カルボリン系化合物、その製造方法、医薬組成物および用途
WO2014058080A1 (ja) 2012-11-30 2014-04-17 独立行政法人理化学研究所 体細胞のリプログラミングを亢進させる方法、及び細胞作製キット
EP2928893A1 (en) 2012-12-10 2015-10-14 F. Hoffmann-La Roche AG Novel bi-ring phenyl-pyridines/pyrazines for the treatment of cancer
US20150174034A1 (en) 2013-03-13 2015-06-25 Avon Products, Inc. Tyrosinase inhibitors
EP2968331B1 (en) 2013-03-14 2020-07-01 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Pyrimidine compounds as kinase inhibitors
PT2968284T (pt) 2013-03-14 2021-06-28 Osteoqc Inc Derivados alquilamina de harmina para promoção de crescimento ósseo
CA2854542A1 (en) 2013-06-18 2014-12-18 4Sc Discovery Gmbh Method of inhibiting dyrk1b
EP3010920A1 (en) 2013-06-18 2016-04-27 4SC Discovery GmbH 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl compounds as dyrk kinase inhibitors
EP3010586A1 (en) 2013-06-21 2016-04-27 Lupin Limited Substituted heterocyclic compounds as crac modulators
SI3057959T1 (en) 2013-10-17 2018-07-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated DNA-PK INHIBITORS
US10233170B2 (en) 2014-04-08 2019-03-19 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,3-disubstituted pyridine compounds as TGF-beta inhibitors and methods of use
WO2016044585A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
JP6937237B2 (ja) 2014-10-21 2021-09-22 アンク、ライフ、サイエンシズ、リミテッドＡｎｋｈ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ ヒト治療薬
WO2016100909A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 President And Fellows Of Harvard College METHODS FOR GENERATING STEM CELL-DERIVED β CELLS AND USES THEREOF
US10167334B2 (en) 2015-04-03 2019-01-01 Xoma Technology Ltd. Treatment of cancer using anti-TGF-BETA and PD-1 antibodies
DE202016008927U1 (de) 2015-07-11 2020-10-08 CHANGZHOU CREATE ELECTRIC APPLIANCE Co.,Ltd. Gleichstrom-Vertikutierer
EP3328404A4 (en) 2015-07-27 2018-12-26 The Regents of The University of California Methods and compositions for producing pancreatic beta cells
AU2016315881B2 (en) 2015-09-03 2019-09-19 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Small molecule inhibitors of DYRK1A and uses thereof
CR20180323A (es) 2015-11-20 2018-08-06 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados de indol n-sustituídos como moduladores de los receptores de pge2
US11433136B2 (en) 2015-12-18 2022-09-06 The General Hospital Corporation Polyacetal polymers, conjugates, particles and uses thereof
US10487087B2 (en) 2015-12-30 2019-11-26 Vanderbilt University Positive allosteric modulators of the GLP-1 receptor
WO2017168245A1 (en) 2016-04-01 2017-10-05 University Of Limerick Pharmaceutical compositions and methods for the treatment of diabetes
EP3454852A4 (en) 2016-05-11 2020-02-26 Emory University Phosphatidylinositol-3-Kinase Inhibitors
JP6596390B2 (ja) 2016-06-29 2019-10-23 株式会社沖データ 現像剤収容器、現像装置、画像形成装置、及び基板支持構造
JP2019531753A (ja) 2016-10-26 2019-11-07 アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ 膵β細胞における細胞増殖を増加させるための方法、治療方法、及び組成物
EP3318563A1 (en) 2016-11-07 2018-05-09 Sanofi Substituted pyrido[3,4-b]indoles for the treatment of cartilage disorders
EP3548496A4 (en) 2016-12-01 2020-05-13 Aptose Biosciences Inc. PYRIMIDINE COMPOUNDS FUSED AS DUAL INHIBITORS OF BRD4 AND JAK2 AND METHODS OF USE THEREOF
ES2893452T3 (es) 2017-05-18 2022-02-09 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados de pirimidina como moduladores del receptor de PGE2
EP3717475B1 (en) 2017-11-20 2023-06-07 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
CA3086925A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Ichan School Of Medicine At Mount Sinai Method of increasing proliferation of pancreatic beta cells, treatment method, and composition
WO2020142486A1 (en) 2018-12-31 2020-07-09 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
CA3124700A1 (en) 2018-12-31 2020-07-09 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
US20230234935A1 (en) 2020-06-26 2023-07-27 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012024433A2 (en) * 2010-08-17 2012-02-23 Translational Genomics Research Institute Compounds that inhibit tau phosphorylation
CN102977096A (zh) * 2012-12-07 2013-03-20 中国药科大学 具有靶向特性的去氢骆驼蓬碱衍生物的抗肿瘤前药
WO2015011331A1 (es) * 2013-07-25 2015-01-29 Fundación Para La Investigación Biomédica Del Hospital Universitario La Paz (Fibhulp) Uso de compuestos derivados de sales de piridazino[1',6':1,2]pirido[3,4-b]indolinio y piridazino[3,2-b]benzimidazolio como agentes antiinflamatorios
CN105884767A (zh) * 2015-11-24 2016-08-24 西华大学 9-位取代的吡啶并[3,4-b]吲哚衍生物及其制备方法和作为SIRT蛋白抑制剂的用途

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BALAZS BALINT等: "Structure-Based Design and Synthesis of Harmine Derivatives with Different Selectivity Profiles in Kinase versus Monoamine Oxidase Inhibition" *
ERCUMENT DIRICE等: "Inhibition of DYRK1A Stimulates Human β-Cell Proliferation" *
INSAF FILALI等: "Synthesis of new isoxazoline derivatives from harmine and evaluation of their anti-Alzheimer, anti-cancer and anti-inflammatory activities" *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023123834A1 (zh) * 2021-12-28 2023-07-06 大连医科大学附属第一医院 Norharman在制备预防或治疗急性胰腺炎药物中的应用
CN114907346A (zh) * 2022-05-19 2022-08-16 暨南大学 一种生物碱类化合物、提取物及其在制备具有抗呼吸道合胞病毒作用的产品中的应用
CN115322089A (zh) * 2022-07-18 2022-11-11 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) 一种覆盆子酮半抗原、人工抗原及其制备方法、抗体和应用
CN115322089B (zh) * 2022-07-18 2023-10-03 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) 一种覆盆子酮半抗原、人工抗原及其制备方法、抗体和应用

Also Published As

Publication number Publication date
EP3768267A1 (en) 2021-01-27
US11866427B2 (en) 2024-01-09
CA3093340A1 (en) 2019-09-26
US20240132494A1 (en) 2024-04-25
US20210094950A1 (en) 2021-04-01
EP3768267A4 (en) 2022-04-20
WO2019183245A1 (en) 2019-09-26
AU2019240065A1 (en) 2020-09-24
JP2021518413A (ja) 2021-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112135613A (zh) 激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法
US12006304B2 (en) Substituted indazoles, methods for the production thereof, pharmaceutical preparations that contain said substituted indazoles, and use of said substituted indazoles to produce drugs
JP6776446B2 (ja) Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての置換ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン化合物
EP3601281B1 (en) CRYSTALLINE FORMS OF 4-(1-(1,1-DI(PYRIDIN-2-YL)ETHYL)-6-(3,5-DIMETHYLISOXAZOL-4-YL)-1H-&amp;#xA;PYRROLO[3,2-B]PYRIDIN-3-YL)BENZOIC ACID THAT INHIBITS BROMODOMAIN
CN102264743B (zh) Mlk抑制剂及其使用方法
CN103153994B (zh) 双环杂芳基激酶抑制剂及使用方法
EP3906233B1 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
US20230234935A1 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
JP2015533181A (ja) Ｐｉ３ｋ阻害剤としてのピロロトリアジノン誘導体
US20220064146A1 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
JP6472450B2 (ja) ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン系化合物、それを含む組成物、及びそれらの使用方法
JP2019537587A (ja) 置換ピリド［３，４−ｂ］インドールおよび医薬品としてのその使用
US11547712B2 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination