CN112022872A - 磐龙墨玉提取物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医药学领域,特别是涉及一种磐龙墨玉提取物及其制备方法和用途。本发明的磐龙墨玉提取物可用于制备抗肿瘤药物。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域,特别是涉及一种矿物药提取物及其制备方法和用途。
背景技术
玉石作为一种天然矿产自古以来被人们所喜爱。玉石不仅佩戴美观,还有重要的医疗保健价值。在2000多年前玉石就被古人应用于医疗保健,古人有云"玉乃石之美者,味甘性平无毒"。磐龙墨玉有黑、黑绿、紫黑等颜色。磐龙墨玉的主要矿组成物为石英及绢云母,次要矿物有黄铁石等,主要化学成分为SiO2及Al2O3等。
《本草纲目》中描述:“云母性味甘,平。主要归心,肝,肺,脾,膀胱经。有安神镇惊,纳气坠痰,止血敛疮功效。用于心悸,失眠,眩晕,癫痫,虚喘,寒疟,久痢,金创出血,痈疽疮毒,湿疹。白石英性味甘,微温。归肺、肾、心经。有温肺肾,安心神,利小便的功效。可治肺寒咳喘,阳痿,消渴,心神不安,惊悸善忘,小便不利,黄疸,石水,风寒湿痹等症”。《证类本草》中说“紫石英,味甘,辛,温。有镇心,安神,降逆气,暖子宫功效。可用于心悸,怔忡,惊痫,肺寒咳逆上气,女子宫寒不孕”。
矿物药自古以来就是中药材的重要组成部分,在祖国中医药学的发展上有其独特的作用,磐龙墨玉由我国吉林省三河矿业开采及推广应用,资源较为集中,主要分布在吉林省磐石市石咀镇与富太镇交界处,距离红山文化遗址东部仅140km,海拔380-420米之间。围绕磐龙墨玉的药用价值进行系统现代专业的研究,能够开发矿物药资源新药,丰富祖国医学宝库,目前尚无有关磐龙墨玉药用作用的相关报道。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种磐龙墨玉提取物及其制备方法和用途。
具体地说,本发明的第一方面是提供了一种磐龙墨玉提取物,所述提取物可由如下方法制得:将150mg的磐龙墨玉溶于5mL溶剂中,超声提取2h,4000rpm离心30分钟,取上清液过0.22μm滤膜,旋干,得中间提取物;再用1mL的相同溶剂将所述中间提取物复溶,减压干燥即得;所述溶剂为无水甲醇、无水乙醇或水。
本发明的第二方面是提供了所述磐龙墨玉提取物的制备方法,所述方法包括:将150mg的磐龙墨玉溶于5mL溶剂中,超声提取2h,4000rpm离心30分钟,取上清液过0.22μm滤膜,旋干,得中间提取物;再用1mL的相同溶剂将所述中间提取物复溶,减压干燥即得;所述溶剂为无水甲醇、无水乙醇或水。
本发明的第三方面是提供了所述磐龙墨玉提取物在制备抗肿瘤药物中的用途,当所述溶剂为无水甲醇或无水乙醇时,所述肿瘤为胰腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、食管癌或前列腺癌;当所述溶剂为水时,所述肿瘤为宫颈癌、肝癌、黑色素瘤、食管癌或前列腺癌。
较优选的,当所述溶剂为无水甲醇或无水乙醇时,所述肿瘤为黑色素瘤。
本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述,本发明的特点、目的和优势将更为明显。
附图说明
图1磐龙墨玉提取物对不同细胞株增殖率的影响
与对照组相比,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001
图2磐龙墨玉提取物对黑色素瘤细胞增殖的影响
与对照组相比,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明,否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
除非另行定义,文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外,任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明提到的上述特征,或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用,说明书中所揭示的各个特征,可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明,所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。
实施例一、磐龙墨玉提取物的制备及抗肿瘤活性测试
实验材料
RPMI-1640、DMEM培养基(美国Gibco公司);胎牛血清(以色列BiologicalIndustries公司);噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT,美国Sigma公司);DMSO(美国Sigma公司)。人胰腺癌细胞MIA PaCa-2、人宫颈癌细胞He La、人肝癌细胞Hep G2、人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、小鼠黑色素瘤细胞B16F10、人黑色素瘤细胞A375、人食管癌细胞Eca109购自中国科学院细胞库,人前列腺癌细胞LNCaP、PC-3购自美国ATCC细胞库。
磐龙墨玉样品采自吉林省磐石市龙岗山脉。
实验方法
1.提取物制备:称取150mg的磐龙墨玉样品于50mL的离心管中,加入5mL提取溶剂(无水甲醇、无水乙醇、水),超声提取2h。4000rpm离心30分钟,取上清液过0.22μm滤膜,旋干,得中间提取物。用1mL的相同提取溶剂将中间提取物复溶于1.5mL EP管中,减压干燥。
2.取对数生长期细胞,调整密度为2×105个/mL,用含10%胎牛血清的RPMI-1640或DMEM培养基将细胞接种于96孔板中于37℃、5%CO2及饱和湿度的培养箱中培养24h,待细胞贴壁后,按照分组加入含药培养基100μL。共分为6组:DMSO对照组、磐龙墨玉甲醇提取物组(100μg/μL)、磐龙墨玉乙醇提取物组(100μg/μL)、磐龙墨玉水提取物组(100μg/μL)、二氧化硒(15μM)和多西他赛(1μM),置培养箱培养48h。
3.向各孔细胞中加入10μL的MTT(5g/L),孵育4h后吸弃上清,每孔再加入100μLDMSO,振荡混匀后,用酶标仪(波长为570nm)测定各孔OD值,记录结果并计算细胞增殖率,实验重复3次。细胞增殖率=(各实验组OD值-空白组OD值)/(对照组OD值-空白组OD值)×100%。
4.实验数据采用Excel 2020软件及SPSS16.0统计软件进行分析,并计算肿瘤细胞生长的半数抑制浓度IC50,用GraphPad Prism软件进行作图,最终结果以平均值±标准误差的形式表示。多组间数据的比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),p<0.05,p<0.01或p<0.001表明统计学结果具有显著性差异。
实验结果
1.磐龙墨玉不同溶剂提取物对肿瘤细胞的细胞毒活性比较
为检测磐龙墨玉不同溶剂提取物对肿瘤细胞生长的抑制作用,我们分别在十种肿瘤细胞株上测定了细胞毒活性。结果如图1所示,磐龙墨玉的甲醇、乙醇提取物(100μg/μL)体外作用48h对人胰腺癌细胞MIA PaCa-2、人宫颈癌细胞He La、人肝癌细胞Hep G2、人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MDA-MB-231、小鼠黑色素瘤细胞B16F10、人黑色素瘤细胞A375、人食管癌细胞Eca109、人前列腺癌细胞LNCaP、PC-3的细胞增殖均具有明显的抑制作用(P<0.001),且乙醇提取物的细胞毒作用强于甲醇提取物。通过进一步比较磐龙墨玉甲醇及乙醇提取物对不同细胞株增殖率的影响,发现黑色素瘤细胞B16F10和A375对磐龙墨玉甲醇及乙醇提取物最为敏感,表明磐龙墨玉对黑色素瘤具有一定的选择性。
磐龙墨玉水提取物的抑制作用相对较弱,仅在LNCaP,B16F10,A375,He La,Hep G2和Eca109细胞上显示出较弱的肿瘤细胞毒活性。阳性对照药二氧化硒和多西他赛在不同种类的细胞中表现出不同程度的抑制作用(p<0.001)。
2.磐龙墨玉甲醇及乙醇提取物能够抑制黑色素瘤细胞的增殖
我们进一步检测了不同浓度的磐龙墨玉甲醇和乙醇提取物对黑色素瘤细胞B16F10和A375的抑制作用,并测定了半数抑制生长所需的浓度(IC50)。结果如图2,不同浓度的甲醇、乙醇提取物(25μg/μL、50μg/μL、75μg/μL、100μg/μL)作用于B16F10和A375细胞48h,随着浓度的增加,抑制作用逐渐增强。磐龙墨玉的两种醇提物对黑色素瘤细胞的IC50值如表1所示。以上实验结果表明,磐龙墨玉的甲醇和乙醇提取物可有效地抑制黑色素瘤细胞的增殖,且呈剂量依赖关系。
表1磐龙墨玉提取物对黑色素瘤细胞的IC50(单位:μg/μL)
本发明所涉及的多个方面已做如上阐述。然而,应理解的是,在不偏离本发明精神之前提下,本领域专业人员可对其进行等同改变和修饰,所述改变和修饰同样落入本申请所附权利要求的覆盖范围。
Claims (4)
1.一种磐龙墨玉提取物,其特征在于,所述提取物可由如下方法制得:
将150mg的磐龙墨玉溶于5mL溶剂中,超声提取2h,4000rpm离心30分钟,取上清液过0.22μm滤膜,旋干,得中间提取物;再用1mL的相同溶剂将所述中间提取物复溶,减压干燥即得;所述溶剂为无水甲醇、无水乙醇或水。
2.如权利要求1所述的磐龙墨玉提取物的制备方法,所述方法包括:将150mg的磐龙墨玉溶于5mL溶剂中,超声提取2h,4000rpm离心30分钟,取上清液过0.22μm滤膜,旋干,得中间提取物;再用1mL的相同溶剂将所述中间提取物复溶,减压干燥即得;所述溶剂为无水甲醇、无水乙醇或水。
3.如权利要求1所述的磐龙墨玉提取物在制备抗肿瘤药物中的用途,其特征在于,当所述溶剂为无水甲醇或无水乙醇时,所述肿瘤为胰腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、黑色素瘤、食管癌或前列腺癌;当所述溶剂为水时,所述肿瘤为宫颈癌、肝癌、黑色素瘤、食管癌或前列腺癌。
4.如权利要求3所述的磐龙墨玉提取物在制备抗肿瘤药物中的用途,其特征在于,当所述溶剂为无水甲醇或无水乙醇时,所述肿瘤为黑色素瘤。
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Title |
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鲍康德 等: "非金属矿物在医药行业的应用与前景", 《中国非金属矿工业导刊》 * |
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