CN111944701B - 一种玉米蜜环菌的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，拧紧盖子；灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理；在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养。本发明的方法通过成型管设置可以增加透气性，使玉米蜜环菌培养时间缩短一半，原来要4个月才能培养长满，采用本发明的方法只需要2个月就能完成；采用本发明的培养基进行培养蜜环菌，降低了生产成本，提高了产品的成品率，本发明的培养基不适合其他杂菌的生长，可以最大程度的提高蜜环菌生长的数量和质量。

Description

一种玉米蜜环菌的制备方法
技术领域
本发明属于微生物生产技术领域，具体涉及一种玉米蜜环菌的制备方法。
背景技术
天麻(Gastrodia elata Blue)无根无绿叶，是一种异养型兰科植物，须与萌发菌(如紫萁小菇)和蜜环菌共生获取营养，完成生长发育。同时天麻作为传统名贵中药材，以其干燥块茎入药，对失眠、高血压、偏头痛、中风、神经衰弱及心脑血管疾病等有显著的治疗效果。随着人民生活水平的不断提高，医疗、餐饮以及保健等事业的不断发展，天麻的应用范围越来越广，需求量也越来越大，天麻人工栽培过程中如何提高天麻产量及品质显得格外重要。
蜜环菌属于伞菌目、蜜环菌属，子实体一般中等大。菌盖直径4-14厘米，淡土黄色、蜂蜜色至浅黄褐色。老后棕褐色，中部有平伏或直立的小鳞片，有时近光滑，边缘具条纹。菌肉白色。菌褶白色或稍带肉粉色，老后常出现暗褐色斑点。菌柄细长，圆柱形，稍弯曲，同菌盖色，纤维质，内部松软变至空心，基部稍膨大。菌环白色，生柄的上部，幼时常呈双层，松软，后期带奶油色。
天麻需要与蜜环菌共生才能生长、发育，因此，蜜环菌菌种质量的好坏直接影响到天麻的品质和质量，目前蜜环菌种分离和制种工艺是：从分离材料(基质、菌索、子实体)上获得菌种即试管种(15d)－试管种(15d)－原种(45d)－栽培种(50d)。且一支试管种只能扩接原种6瓶左右。
现有的蜜环菌接种后透气性差，容易后杂菌污染，周期长，成品率低，生产成本高等缺点。
鉴于以上原因，特提出本发明。
发明内容
为了解决现有技术存在的以上问题，本发明提供了一种玉米蜜环菌的制备方法，本发明的方法采用成型管增加了透气性，缩短了玉米蜜环菌的生长周期，同时采用本发明的培养基进行培养，提高了蜜环菌生产的成品率。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：
(1)将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，拧紧盖子；
(2)灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理；
(3)在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养。
进一步的，步骤(1)中所述的成型管为圆柱形管。
进一步的，步骤(2)中灭菌温度为120-140℃，灭菌时间为8-12h，压力为0.08-0.12MPa。
进一步的，步骤(2)中灭菌温度为130℃，灭菌时间为10h，压力为0.1MPa。
进一步的，步骤(3)中培养的温度为23-26℃。
进一步的，步骤(3)中培养需要在避光的条件下进行。
进一步的，接种好后的菌种与培养基的质量比为1:20-30。
进一步的，步骤(3)中培养基为磷酸二氢钾、琼脂、海藻多糖和硫酸镁，pH值为6.2-6.8。
进一步的，按照重量份，所述的培养基为磷酸二氢钾2-4份、琼脂14-20份、海藻多糖20-30份和硫酸镁3-5份。
进一步的，按照重量份，所述的培养基为磷酸二氢钾3份、琼脂17份、海藻多糖25份和硫酸镁4份。
进一步的，所述的培养基还包括玉米秸秆6-10份。
本申请人经过大量的试验发现，在培养基中加入海藻多糖可以提高产品的成品率，另外，加入玉米秸秆可以提高蜜环菌的产量。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明的方法通过成型管设置可以增加透气性，使玉米蜜环菌培养时间缩短一半，原来要4个月才能培养长满，采用本发明的方法只需要2个月就能完成；采用本发明的培养基进行培养蜜环菌，降低了生产成本，提高了产品的成品率，本发明的培养基不适合其他杂菌的生长，可以最大程度的提高蜜环菌生长的数量和质量。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
实施例1
本实施例的一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：
(1)将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，所述的成型管为圆柱形管，拧紧盖子；
(2)灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理，灭菌温度为120℃，灭菌时间为12h，压力为0.08MPa；
(3)在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养，培养的温度为23℃，在避光的条件下进行培养，所述的培养基为磷酸二氢钾2kg、琼脂20kg、海藻多糖20kg和硫酸镁5kg，接种好后的菌种与培养基的质量比为1:20。
实施例2
本实施例的一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：
(1)将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，所述的成型管为圆柱形管，拧紧盖子；
(2)灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理，灭菌温度为130℃，灭菌时间为10h，压力为0.1MPa；
(3)在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养，培养的温度为24.5℃，在避光的条件下进行培养，所述的培养基为磷酸二氢钾3kg、琼脂17kg、海藻多糖25kg和硫酸镁4kg，接种好后的菌种与培养基的质量比为1:25。
实施例3
本实施例的一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：
(1)将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，所述的成型管为圆柱形管，拧紧盖子；
(2)灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理，灭菌温度为140℃，灭菌时间为8h，压力为0.12MPa；
(3)在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养，培养的温度为26℃，在避光的条件下进行培养，所述的培养基为磷酸二氢钾4kg、琼脂14kg、海藻多糖30kg和硫酸镁3kg，接种好后的菌种与培养基的质量比为1:30。
实施例4
本实施例的一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：
(1)将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，所述的成型管为圆柱形管，拧紧盖子；
(2)灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理，灭菌温度为110℃，灭菌时间为9h，压力为0.09MPa；
(3)在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养，培养的温度为24℃，在避光的条件下进行培养，所述的培养基为磷酸二氢钾2.5kg、琼脂15kg、海藻多糖23kg、硫酸镁3.5kg、玉米秸秆6kg，接种好后的菌种与培养基的质量比为1:23。
实施例5
本实施例的一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：
(1)将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，所述的成型管为圆柱形管，拧紧盖子；
(2)灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理，灭菌温度为130℃，灭菌时间为11h，压力为0.11MPa；
(3)在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养，培养的温度为25℃，在避光的条件下进行培养，所述的培养基为磷酸二氢钾3.5kg、琼脂18kg、海藻多糖28kg、硫酸镁4.5kg、玉米秸秆8kg，接种好后的菌种与培养基的质量比为1:27。
实施例6
本实施例的一种玉米蜜环菌的制备方法，包括如下步骤：
(1)将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，放入成型管，所述的成型管为圆柱形管，拧紧盖子；
(2)灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理，灭菌温度为115℃，灭菌时间为10.5h，压力为0.09MPa；
(3)在无菌的环境下，将培养好的母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养，培养的温度为24℃，在避光的条件下进行培养，所述的培养基为磷酸二氢钾4kg、琼脂18kg、海藻多糖26kg、硫酸镁3.5kg、玉米秸秆10kg，接种好后的菌种与培养基的质量比为1:30。
对比例1
本对比例的玉米蜜环菌的制备方法与实施例3相同，不同之处，不添加成型管。
对比例2
本对比例的玉米蜜环菌的制备方法与实施例3相同，不同之处，培养基中不添加海藻多糖。
试验例1
分别按照实施例1-6和对比例1的方法制备玉米蜜环菌，检测长满菌种瓶蜜环菌的时间及成品率结果见表1。
表1
Figure BDA0002629709960000061
从表1可以看出，采用本发明的方法制备的蜜环菌的生长周期短，成品率高，实施例1-3与实施例4-6相比，培养基中增加玉米秸秆可以缩短生长周期，提高成品率，对比例1与实施例1-6相比，增加成型管可以明显缩短生长周期，对比例2中的数据可知海藻多糖具有提高成品率的作用。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (10)

1.一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将玉米倒入菌种瓶中，罐满水，将成型管放入装有玉米的菌种瓶中，拧紧盖子；
（2）灭菌定型：将上述菌种瓶在高温高压下灭菌处理；
（3）在无菌的环境下，将培养好的玉米蜜环菌母种放入，拧紧盖子，接种好后进行培养，培养基由磷酸二氢钾、琼脂、海藻多糖和硫酸镁组成，pH值为6.2-6.8。
2.根据权利要求1所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的成型管为圆柱形管。
3.根据权利要求1所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，步骤（2）中灭菌温度为120-140℃，灭菌时间为8-12h，压力为0.08-0.12MPa。
4.根据权利要求3所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，步骤（2）中灭菌温度为130℃，灭菌时间为10h，压力为0.1MPa。
5.根据权利要求1所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，步骤（3）中培养的温度为23-26℃。
6.根据权利要求1所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，步骤（3）中培养需要在避光的条件下进行。
7.根据权利要求6所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，步骤（3）中接种好后的菌种与培养基的质量比为1:20-30。
8.根据权利要求1所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，按照重量份，所述的培养基为磷酸二氢钾2-4份、琼脂14-20份、海藻多糖20-30份和硫酸镁3-5份。
9.根据权利要求8所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，按照重量份，所述的培养基为磷酸二氢钾3份、琼脂17份、海藻多糖25份和硫酸镁4份。
10.根据权利要求8所述的一种玉米蜜环菌的制备方法，其特征在于，所述的培养基由磷酸二氢钾2-4份、琼脂14-20份、海藻多糖20-30份和硫酸镁3-5份和玉米秸秆6-10份组成。
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