CN111944007A - 纯化皂苷的方法 - Google Patents
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Abstract
一种纯化皂苷的方法，包括提供三七粗萃液，所述三七粗萃液包括弱滞留性成分、中间滞留性成分以及强滞留性成分。中间滞留性成分包括三七皂苷R1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1，强滞留性成分包括人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd。接着，以模拟移动床色谱法将所述三七粗萃液中的中间滞留性成分与强滞留性成分分离开来。运用此模拟移动床色谱法可将三七粗萃液中的弱滞留性成分、包括三七皂苷R1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1的中间滞留性成分以及包括人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd的强滞留性成分分离开来，以产生高纯度的皂苷。
Description
技术领域
本发明是有关于一种纯化方法，且特别是有关于一种纯化皂苷的方法。
背景技术
三七作为传统的中药材具有很高的药用价值，已经成为保健食品的主要原料之一。研究发现三七中主要包含人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd及三七皂苷R1。人参皂苷Rb1具有保护神经、改善学习及记忆、抗氧化、保护肝脏及抗癌等作用；人参皂苷Rd主要被用于进行肾脏保护、有抗氧化及神经保护等方面；人参皂苷Rg1主要被用于记忆及神经方面的保护作用、抗发炎、预防骨质疏松及抑制血小板凝集等方面；三七皂苷R1具有可以明显改善动脉粥样硬化病变、改善心功能障碍、增强细胞活力、减少细胞凋亡、减轻氧化压力和发炎反应以及维持肌动蛋白骨架与线粒体形态的作用。
目前从三七粗萃物中分离纯化出皂苷的方法通常是使用有害人体的溶剂(如甲醇或二氯甲烷)及采用传统的制备色谱分离技术进行分离。然而，使用有害人体的溶剂会使产品安全产生疑虑，且现有的分离纯化的方法皆为间歇式操作的纯化方式，在实际的生产过程中往往会导致产物稀释严重，操作重复性低，稳定性不佳，不适宜工业化的生产。
发明内容
本发明提供一种纯化皂苷的方法，可有效地分离出高纯度的皂苷。
本发明的实施例提供一种纯化皂苷的方法。所述方法包括以下步骤。首先，提供三七粗萃液，三七粗萃液包括弱滞留性成分、中间滞留性成分以及强滞留性成分，其中中间滞留性成分包括三七皂苷R1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1，强滞留性成分包括人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd。接着，以模拟移动床色谱法将三七粗萃液中的中间滞留性成分与强滞留性成分分离开来。模拟移动床色谱法包含：(i)提供模拟移动床，模拟移动床依序包括具有沿第一方向排列的第一区段、第二区段、第三区段的分离区以及再生区段，其中再生区段包括润湿区段以及清洗区段，其中模拟移动床是由移动相及固定相所组成，固定相为内部具有孔隙的颗粒，移动相是朝第一方向从冲涤端入口流经第一区段、第二区段以及第三区段之间，固定相是相对于移动相朝相反于第一方向的第二方向模拟移动，移动相为包含水与乙醇的冲涤剂；(ii)将三七粗萃液从进料入口注入模拟移动床的第二区段与第三区段之间，并使中间滞留性成分随固定相移动至第一区段与第二区段之间的萃出端脱附，使强滞留性成分随固定相移动至清洗区段脱附，以及使弱滞留性成分移动至萃余端脱附，以分离纯化出弱滞留性成分、中间滞留性成分及强滞留性成分。
在本发明的一实施例中，上述的固定相为反相硅胶填料。
在本发明的一实施例中，上述的第一区段、第二区段以及第三区段各自包含2根管柱，且每根管柱内填充有固定相。
在本发明的一实施例中，上述的润湿区段以及清洗区段各自包含1根管柱，且每根管柱内填充有固定相。
在本发明的一实施例中，上述的移动相以第一方向流经第一区段、第二区段、第三区段以及润湿区段，且以第二方向流经清洗区段。
在本发明的一实施例中，上述冲涤剂是通过95％乙醇与水混合而形成。
在本发明的一实施例中，上述冲涤剂是通过95％乙醇与水以35:65的比例混合而形成。
在本发明的一实施例中，上述的模拟移动床使用的分离条件为：冲涤剂的流速在冲涤端入口为5.0毫升/分钟、在萃出端为2.5毫升/分钟、在进料入口为0.2毫升/分钟、在萃余端为2.7毫升/分钟、在润湿区段的润湿入口为5.0毫升/分钟以及在清洗区段的清洗入口为5.0毫升/分钟，且模拟移动床的切换时间为10分钟至11分钟。
在本发明的一实施例中，其中所分离的中间滞留性成分中三七皂苷R1的含量大于10％，所分离的中间滞留性成分中人参皂苷Re的含量以及人参皂苷Rg1的含量总和大于60％。
在本发明的一实施例中，其中所分离的强滞留性成分中人参皂苷Rb1的含量大于70％，所分离的强滞留性成分中人参皂苷Rd的含量大于10％。
在本发明的一实施例中，其中所分离的中间滞留性成分中还包括人参皂苷Rb1，且人参皂苷Rb1的含量小于2.5％。
在本发明的一实施例中，其中所分离的强滞留性成分中还包括人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1，且人参皂苷Re的含量以及人参皂苷Rg1的含量总和小于2.0％。
在本发明的一实施例中，上述三七粗萃液的制备方法包括使用70％乙醇水溶液对三七主根进行萃取，以得到三七粗萃液。
基于上述，本发明的皂苷的纯化方法透过应用模拟移动床色谱法将三七粗萃液中的弱滞留性成分、包括三七皂苷R1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1的中间滞留性成分以及包括人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd的强滞留性成分分离开来，所述方法操作稳定、无需使用有害人体的溶剂且可实现自动化，不仅可有效提升分离效率，更可获得高纯度的皂苷。
附图说明
包含附图以便进一步理解本发明，且附图并入本说明书中并构成本说明书的一部分。附图说明本发明的实施例，并与描述一起用于解释本发明的原理。
图1为依照本发明一实施例的纯化皂苷的方法的步骤图。
图2为依照本发明一实施例的三七粗萃液的HPLC/UV图谱。
图3为本发明实施例的一种纯化皂苷的方法中所使用的模拟移动床的组态设计图。
图4为依照本发明一实施例的利用模拟移动床色谱法从三七粗萃液中分离纯化出皂苷结果分析图。
附图标号说明
S100、S110：步骤；
100：模拟移动床；
110A：第一区段；
110B：第二区段；
110C：第三区段；
120：再生区段；
122：润湿区段；
124：清洗区段；
200：进料溶液；
200A、200B、200C：成分；
C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8：管柱；
D：冲涤端入口；
E：萃出端；
F：进料入口；
R：萃余端；
W1：润湿入口；
W2：清洗入口；
W2’：清洗出口；
X1：第一方向；
X2：第二方向。
具体实施方式
本发明实施例的纯化皂苷的方法，可用以将弱滞留性成分、中间滞留性成分以及强滞留性成分从三七粗萃液中分离纯化出来。由此，能够得到高纯度的皂苷。更具体来说，本发明纯化皂苷的方法可将三七粗萃液中不同种类的皂苷分离。
图1为依照本发明一实施例的纯化皂苷的方法的步骤图。
请参照图1。首先，进行步骤S100，提供三七粗萃液。三七粗萃液包括弱滞留性成分、中间滞留性成分及强滞留性成分，其中中间滞留性成分包括三七皂苷R1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1，强滞留性成分包括人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd。接着，进行步骤S110，以模拟移动床(Simulated Moving Bed，SMB)色谱法将三七粗萃液中的中间滞留性成分与强滞留性成分分离开来。
以下列举实施例以说明本发明的生产方法的细节或条件，但这些实施例并非用以限制本发明保护范围。所绘附图为示意图仅为说明方便而绘制，并非代表限制其实际的方法、条件或装置等。
[三七粗萃液的制备]
在本实施例中，三七粗萃液的制备方法包括使用70％乙醇水溶液对三七主根进行萃取而取得。举例而言，可将三七主根研磨成粉，取粉末300克(含水量3.6％)置于圆底烧瓶中，加入5倍体积的70％乙醇水溶液进行加热回流3小时。接着，过滤后保留滤液，此滤液即为三七粗萃液。然后，将溶剂挥发，可得到滤液中的总固含量为62.4g/L。
[分析方法]
使用高效液相色谱仪紫外线侦测器(HPLC/UV)(泵：日立2130；紫外线侦测器：日立L-2455)进行样品的分析。分析管柱采用Kromasil 100-5C18(250mm×4.6mm，5μm)；移动相以1毫升/分钟(mL/min)的流速进行冲涤，冲涤方式则使用乙腈(acetonitrile，ACN)及纯水的梯度冲涤，梯度冲涤的设定整理于表1，检测波长则设定为203nm。
[表1]
| 时间(分钟) | 0.0 | 25 | 25.1 | 35 |
| 乙腈比例(％) | 25 | 50 | 25 | 25 |
| 纯水比例(％) | 75 | 50 | 75 | 75 |
图2为依照本发明一实施例的三七粗萃液的HPLC/UV图谱。在本实施例中，三七粗萃液中的皂苷包括三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd。将所得的三七粗萃液的高效液相色谱分析图与三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd各自的标准品溶液所得的高效液相色谱分析图相比较，可从图2的分析图中清楚判读出上述皂苷的波锋位置，通过此结果做为分析标准。后续的分离纯化及分析将人参皂苷Re与人参皂苷Rg1两者合并计算，并以人参皂苷Rg1/Re(或Rg1/Re)表示。如图2所示，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1/Re、人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd的滞留时间分别为4.14分钟、4.94分钟、14.64分钟、16.14分钟。
为进行皂苷含量的定量分析，通过制备一系列不同浓度的标准溶液以制作检量线。对于不同皂苷所配制的标准溶液浓度分别为：三七皂苷R1，52mg/L、83.2mg/L、104mg/L、208mg/L、312mg/L、416mg/L；人参皂苷Rg1与人参皂苷Re，102mg/L、163.2mg/L、204mg/L、408mg/L、612mg/L、816mg/L；人参皂苷Rb1，65mg/L、104mg/L、130mg/L、260mg/L、390mg/L、520mg/L；人参皂苷Rd，56mg/L、89.6mg/L、112mg/L、224mg/L、336mg/L、448mg/L。设定横坐标为进样浓度(Cj，j代表不同的皂苷，单位为mg/L)，而纵坐标为HPLC图谱的讯号峰面积(Aj，j代表不同的皂苷)，则可以制作出标准曲线并得三七皂苷R1、人参皂苷Rg1与人参皂苷Re、人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd的回归方程分别为AR1＝2269.9×CR1、ARg1+Re＝2597.7×CRg1+Re、ARb1＝1918.9×CRb1以及ARd＝2631.5×CRd。
通过图2的结果，可计算得三七粗萃液中的固含量所包含的各皂苷含量，如表2所示。
[表2]
[模拟移动床的组态设计]
图3为本发明实施例的一种纯化皂苷的方法中所使用的模拟移动床的组态设计图。本实验例是以提供图3所示的模拟移动床100来进行模拟移动床色谱法。请参考图3，模拟移动床100依序包括具有沿第一方向X1排列的第一区段110A、第二区段110B、第三区段110C的分离区以及再生区段120。再生区段120包括润湿区段122以及清洗区段124。在本实施例中，第一区段110A包含两根管柱C1与C2，第二区段110B包含两根管柱C3与C4，且第三区段110C包含两根管柱C5与C6，上述6根管柱串联。润湿区段122包含一根管柱C7，清洗区段124包含一根管柱C8。在本实施例中，管柱C7与管柱C8沿第一方向X1依序排列于第三区段110C的管柱C6旁。上述8根管柱形成开放回路设计的模拟移动床100。在本实施例中，管柱(C1～C8)的规格为1cmID×15cmL的不锈钢填充柱。
模拟移动床100是由移动相(未绘示)及固定相(未绘示)所组成。移动相包括冲涤剂，而固定相为内部具有孔隙的颗粒。每根管柱(C1～C8)内是填充颗粒内部具有孔隙的固定相。在本实施例中，固定相为反相硅胶填料；而移动相为包含水与乙醇的冲涤剂。在一实施例中，冲涤剂是通过95％乙醇与水混合而形成的冲涤剂。举例来说，冲涤剂可通过95％乙醇与水以35:65的比例混合而形成。然而，本发明不以此为限。一般而言，固定相以及移动相的选择可以依据所欲分离的产物的需求而进行调整。
在本实施例中，通过固定相及移动相于各区段之间的相对流动，以分离混合物中的物质。具体而言，移动相流入与流出管柱来冲洗吸附于固定相上的混合物，以将成分分离。如图3所示，移动相于第一方向X1从冲涤端入口D流经第一区段110A、第二区段110B以及第三区段110C之间，而固定相是相对于移动相朝相反于第一方向X1的第二方向X2模拟移动。如图3所示，从左到右的管柱依序为C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8，如果让移动相的进出口及混合物的进口于一段时间后顺时钟方向切换至下一个管柱，则从左到右的管柱将依序为C8、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7。一段时间后再继续沿顺时钟方向切换至下一个管柱，经过连续不断的切换之后就会形成类似让固定相沿逆时钟方向流动的模拟状态。而在此同时，移动相在第一区段110A、第二区段110B以及第三区段110C之间则一直连续不断地顺时钟流动，而达到模拟固定相与移动相连续逆向流动接触的过程。通过第一区段110A、第二区段110B、第三区段110C的设计，可使移动相不直接在模拟移动床100中再生并循环使用。
在本实施例中，移动相分别于第一区段110A、第二区段110B、第三区段110C及润湿区段122中朝第一方向X1流动，固定相是相对于移动相朝相反于第一方向X1的第二方向X2模拟移动。通过移动相与固定相相互逆流接触，可冲洗分离出弱滞留性成分。在再生区段120的清洗区段124中，移动相的移动方向与固定相的模拟移动方向相同(朝第二方向X2移动)，使强滞留性成分会模拟移动地往第二方向X2移动而滞留于再生区段120的清洗区段124的固定相内。由此，可改善强滞留性成分对管柱C1～C7造成污染而使模拟移动床100无法长时间连续地作用的问题。在清洗区段124的固定相的强滞留性成分，例如可通过另一种强脱附剂将强滞留性成分由固定相进行脱附，或者可通过控制清洗区段124的移动相的流速大于强滞留性成分的滞留常数，以移除被吸附在固定相内的强滞留性成分。
当有滞留常数不同的两成分进入模拟移动床，其吸附在固定相且被移动相所冲涤时，低滞留常数的成分会被移动相冲出固定相，而随移动相一起往顺时针方向移动到第一方向X1上的下一个管柱；高滞留常数的成分由于不易被移动相冲出，在进出口切换之后，会如同被固定相带动而往逆时针方向移动到第二方向X2上的下一个管柱。
[回收率r的计算]
利用模拟移动床色谱法分离的皂苷，在不同的出口端的回收率r的定义如下：
式(1)中：
Q代表体积流速；
C代表浓度；
w代表重量百分含量；
上标或下目标i代表不同的出口端，例如萃出端E、萃余端R或清洗区段124的清洗出口W2’；
下标j代表不同的皂苷。
接着，以下将对利用模拟移动床色谱法将皂苷成分从三七粗萃液中分离开来的方式进行说明。
实施例
[皂苷的分离]
在本步骤中，可将三七粗萃液添加适量的纯水后，作为进料溶液使用。三七粗萃液的进料溶液经过滤后可得其固含量为20.8g/L，其中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1/Re、人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd的含量分别为7.1％、17.2％、17.3％及2.9％。将三七粗萃液的进料溶液200从进料入口F注入模拟移动床100的第二区段110B与第三区段110C之间。接着，使包括中间滞留性成分与强滞留性成分的组成一并随固定相移动，其中包括中间滞留性成分的成分200A随固定相移动至第一区段110A与第二区段110B之间的萃出端E脱附，而成分200A中亦包含少量的强滞留性成分(即，中间滞留性成分与少量的强滞留性成分随固定相移动至第一区段110A与第二区段110B之间的萃出端E脱附)，并使包括大部分的强滞留性成分的成分200C继续随固定相移动至清洗区段124的清洗出口W2’脱附，而包括弱滞留性成分的成分200B随移动相移动至第三区段110C的萃余端R脱附。具体而言，成分200A包括三七皂苷R1以及人参皂苷Rg1/Re，成分200C包括人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd。
在本实施例中，移动相为包含乙醇和水的冲涤剂，其中移动相是采用95％乙醇与水以35:65的比例混合而成的乙醇水溶液。模拟移动床色谱法的冲涤端入口D、进料入口F、萃出端E、萃余端R、润湿区段122的润湿入口W1及清洗区段124的清洗入口W2的冲涤剂的流速设定如下表3所示。
[表3]
在本步骤中，进行色谱分离时的温度为室温。在本步骤中，当使用上述的方式操作一段时间以后，如6分钟，便将所有的出口以及入口同时往下一根管柱切换。再持续一段相同时间后，再一次将所有出入口移往下一根管柱，如此持续的切换管柱，便可模拟固体沿着图3的左手方向移动，而形成与液体逆向或同向流动的行为。在本实施例中，测试多种不同切换时间后，得切换时间为10分钟至11分钟时可有效分离低滞留性杂质。举例来说，切换时间为10.5分钟时可获得有效分离低滞留性杂质的结果。当模拟移动床的操作达4次循环以上的稳态操作以后，便开始在萃余端R、萃出端E及清洗出口W2’收集样品。除了挥发溶剂以计算其固含量以外，也同时进行HPLC的分析，其结果显示于表4及图4中。
[表4]
利用模拟移动床色谱法对三七粗萃液进行分离纯化，可在萃余端R、萃出端E与清洗出口W2’分别收集到包含成分200B的溶液、包含成分200A的溶液与包含成分200C的溶液，其固含量分别为0.807g/L、0.464g/L及0.187g/L。图4为依照本发明一实施例的利用模拟移动床色谱法从三七粗萃液中分离纯化出皂苷结果分析图。请参考图4及表4，切换时间为10.5分钟时，比对模拟移动床的进料入口F的溶液与在萃余端R、萃出端E与清洗出口W2’收集到的溶液的分析结果，可以得知的是，中间滞留性成分可由萃出端E分离出来，而强滞留性成分可由清洗出口W2’分离出来。详细而言，在切换时间为10.5分钟的条件下，三七皂苷R1在萃出端E所收集到的含量可由进料的7.1％提高至15.4％，人参皂苷Rg1/Re在萃出端E所收集到的含量可由进料的17.2％提高至66.3％，人参皂苷Rb1在清洗出口W2’所收集到的含量可由进料的17.3％提高至75.8％，人参皂苷Rd在清洗出口W2’所收集到的含量可由进料的2.9％提高至11.9％。
另外，在萃出端E收集到的包括三七皂苷R1与人参皂苷Rg1/Re的中间滞留性成分中，还包括少量的人参皂苷Rb1，其中人参皂苷Rb1的含量约2.0％。当萃出端E收集到的皂苷总含量为83.7％时，三七皂苷R1与人参皂苷Rg1/Re的回收率分别达约100％及97.8％。另外，在清洗出口W2’收集到的包括人参皂苷Rb1与人参皂苷Rd的强滞留性成分中，还包括少量的人参皂苷Rg1/Re，其中人参皂苷Rg1/Re的含量约1.5％。当清洗出口W2’收集到的皂苷总含量为89.2％时，人参皂苷Rb1与人参皂苷Rd的回收率分别达97.2％及约100％。由此，可有效地将中间滞留性成分与强滞留性成分分离，以提高上述各种皂苷的纯度。
在本实施例中，萃余端R收集到的成分200B的溶液的固含量为0.807g/L，但其中仅有约0.2％的人参皂苷Rb1。也就是说，大部分的强滞留性成分都在再生区段120的清洗区段124的清洗出口W2’分离出来，大部分的中间留性成分都在萃出端E分离出来。也就是说，成分200B包含大部分的弱滞留性成分。由此，可有效分离弱滞留性杂质。
综上所述，由于本发明所提供的模拟移动床技术可以连续式进料、操作步骤简易且稳定性佳，与传统的制备方法相比较具有实现自动化及高效连续生产等优势，容易工业化生产高纯度皂苷。因此，本发明所提供的通过使用模拟移动床色谱技术纯化皂苷的方法能够解决传统技术中使用有害人体的溶剂、产物稀释严重、操作重复性低及稳定性不佳等问题。
虽然本发明已以实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，应当可作些许的改动与润饰，因此本发明的保护范围应当以后附的权利要求书所界定的保护范围为准。
Claims (13)
1.一种纯化皂苷的方法，包括：
提供三七粗萃液，所述三七粗萃液包括弱滞留性成分、中间滞留性成分以及强滞留性成分，其中所述中间滞留性成分包括三七皂苷R1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1，所述强滞留性成分包括人参皂苷Rb1以及人参皂苷Rd；以及
以模拟移动床色谱法将所述三七粗萃液中的所述中间滞留性成分与所述强滞留性成分分离开来，其中所述模拟移动床色谱法包含：
(i)提供模拟移动床，所述模拟移动床依序包括具有沿第一方向排列的第一区段、第二区段、第三区段的分离区以及再生区段，其中所述再生区段包括润湿区段以及清洗区段，其中所述模拟移动床是由移动相及固定相所组成，所述固定相为内部具有孔隙的颗粒，所述移动相是朝所述第一方向从冲涤端入口流经所述第一区段、所述第二区段以及所述第三区段之间，所述固定相是相对于所述移动相朝相反于所述第一方向的第二方向模拟移动，所述移动相为包含水与乙醇的冲涤剂；
(ii)将所述三七粗萃液从进料入口注入所述模拟移动床的所述第二区段与所述第三区段之间，并使所述中间滞留性成分随所述固定相移动至所述第一区段与所述第二区段之间的萃出端脱附、使所述强滞留性成分随所述固定相移动至所述清洗区段脱附，以及使所述弱滞留性成分移动至萃余端脱附，以分离纯化出所述弱滞留性成分、所述中间滞留性成分及所述强滞留性成分。
2.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述固定相为反相硅胶填料。
3.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述第一区段、所述第二区段以及所述第三区段各自包含2根管柱，且每根管柱内填充有所述固定相。
4.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述润湿区段以及所述清洗区段各自包含1根管柱，且每根管柱内填充有所述固定相。
5.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述移动相以所述第一方向流经所述第一区段、所述第二区段、所述第三区段以及所述润湿区段，且以所述第二方向流经所述清洗区段。
6.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述冲涤剂是通过95％乙醇与水混合而形成。
7.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述冲涤剂是通过95％乙醇与水以35:65的比例混合而形成。
8.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述模拟移动床使用的分离条件为：所述冲涤剂的流速在所述冲涤端入口为5.0毫升/分钟、在所述萃出端为2.5毫升/分钟、在所述进料入口为0.2毫升/分钟、在所述萃余端为2.7毫升/分钟、在所述润湿区段的润湿入口为5.0毫升/分钟以及在所述清洗区段的清洗入口为5.0毫升/分钟，且所述模拟移动床的切换时间为10分钟至11分钟。
9.根据权利要求7所述的纯化皂苷的方法，其中所分离的中间滞留性成分中所述三七皂苷R1的含量大于10％，所分离的中间滞留性成分中所述人参皂苷Re的含量以及所述人参皂苷Rg1的含量总和大于60％。
10.根据权利要求7所述的纯化皂苷的方法，其中所分离的强滞留性成分中所述人参皂苷Rb1的含量大于70％，所分离的强滞留性成分中所述人参皂苷Rd的含量大于10％。
11.根据权利要求7所述的纯化皂苷的方法，其中所分离的所述中间滞留性成分中还包括人参皂苷Rb1，且所述人参皂苷Rb1的含量小于2.5％。
12.根据权利要求8所述的纯化皂苷的方法，其中所分离的所述强滞留性成分中还包括人参皂苷Re以及人参皂苷Rg1，且所述人参皂苷Re的含量以及所述人参皂苷Rg1的含量总和小于2.0％。
13.根据权利要求1所述的纯化皂苷的方法，其中所述三七粗萃液的制备方法包括：
使用70％乙醇水溶液对三七主根进行萃取，以得到所述三七粗萃液。
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