TWI641585B - 純化茄尼醇的方法 - Google Patents

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Abstract

一種純化茄尼醇的方法，包括提供菸葉原料，利用超臨界二氧化碳提取菸葉原料中的粗萃物，其中所述粗萃物包括茄尼醇成分以及混合成分。接著，以模擬移動床層析法將粗萃物中的茄尼醇成分分離開來。運用此模擬移動床層析法可將粗萃物中的茄尼醇成分與混合成分分離開來，以產生高純度的茄尼醇。

Description

純化茄尼醇的方法
本發明是有關於一種純化方法，且特別是有關於一種純化茄尼醇的方法。
輔酶Q10(Coenzyme Q10；簡稱CoQ10)存在於動物體內的每個細胞中，其主要生理角色是在粒線體內膜協助電子的傳遞，以輔助粒線體中能量物質ATP的產生，讓細胞能量供應系統能快速運作，並且穩定細胞膜結構不受電子或高能量物質的傷害。臨床上輔酶Q10用在治療心臟疾病已超過30年，研究發現其亦可改善皮膚粗糙、抗紫外線、清除自由基、治療癌症、延緩老化、心血管疾病與神經退化病變等。目前可使用半化學合成法，以菸葉中提取得到的茄尼醇(solanesol)為原料合成輔酶Q10，在合成過程可保持雙鍵的幾何構型以及立體選擇性，將是工業化生產輔酶Q10的主要途徑。
茄尼醇主要存在於茄科植物中，特別是在菸草葉子，含量約為0.5~4%。目前有關從菸葉中提取茄尼醇之方法主要包括熱迴流提取(heat reflux extraction；HRE)、微波輔助提取(microwave assisted extraction；MAE)、超音波提取(ultrasonic assisted extraction；UAE)和超臨界流體萃取(supercritical fluid extraction；SFE)。目前，因層析技術之演進，較容易從天然產物獲得高純度的活性物質。例如利用大孔樹脂和矽膠作為層析柱填充物和固定相，提升茄尼醇的吸附能力，進而改善茄尼醇的純度。然而，現有的分離純化的方法皆為間歇式進料的層析系統，這種常用的吸附與層析技術在實際的生產過程中往往會導致產物稀釋嚴重，且溶劑耗量大、吸附劑效能低、操作成本高等局限，不適宜工業化的生產。
本發明提供一種純化茄尼醇的方法可以連續式進料，產物稀釋較少，大大降低了固體吸附劑的使用量，並且提高了其使用效率，進而能產生高純度的茄尼醇。
本發明實施例提供一種純化茄尼醇的方法。所述方法包括提供菸葉原料，並利用超臨界二氧化碳提取菸葉原料中的粗萃物，其中粗萃物包括茄尼醇成分以及混合成分。再來，以模擬移動床層析法將粗萃物中的茄尼醇成分分離開來。所述模擬移動床層析法包含：(i)提供模擬移動床，所用之模擬移動床依序包括第一區段、第二區段以及第三區段，其中模擬移動床是由移動相及固定相所組成，移動相包括沖滌液，固定相顆粒內部是具有孔隙，移動相對於模擬移動床中是朝同一方向流經第一區段、第二區段 以及第三區段之間，固定相是相對於移動相朝反方向模擬移動；(ii)將粗萃物注入模擬移動床的第二區段與第三區段之間，並使茄尼醇成分隨固定相移動至第一區段與第二區段之間的萃出端並使混合成分隨移動相移動至第三區段的萃餘端，又或是使混合成分隨固定相移動至第一區段與第二區段之間的萃出端並使茄尼醇成分隨移動相移動至第三區段的萃餘端，以分離純化出茄尼醇成分。
在本發明的一實施例中，所述利用超臨界二氧化碳提取菸葉原料中的粗萃物的方式是將菸葉原料載入萃取槽，並使用純二氧化碳進行萃取，經過6個小時的萃取後，添加乙醇輔助溶劑後進行2個小時的萃取，以萃取出粗萃物，其中萃取條件為：萃取溫度50℃、壓力為35MPa、二氧化碳流速為60克/分鐘且乙醇流速為4.99毫升/分鐘。
在本發明的一實施例中，所述第一區段、第二區段以及第三區段各自包含兩根管柱，且每根管柱內填充顆粒內部具有孔隙之固定相。
在本發明的一實施例中，當茄尼醇成分是隨固定相移動至第一區段與第二區段之間的萃出端，並且混合成分是隨移動相移動至第三區段的萃餘端時，模擬移動床使用的分離條件為：流動相為選擇乙醇/水體積比為95/5的溶液，固定相為C-18，且沖滌端入口的流速為8.0毫升/分鐘，進料入口的流速為0.4毫升/分鐘，萃出端的流速為4.5毫升/分鐘，萃餘端的流速為3.95毫升/ 分鐘，且模擬移動床的切換時間為5分15秒。
在本發明的一實施例中，所述的純化茄尼醇的方法更包括將在萃出端所收集到的茄尼醇成分進行第二次分離步驟以將茄尼醇成分中的強滯留性雜質分離，其中第二次分離步驟包括將萃出端所收集到的茄尼醇成分以及強滯留性雜質注入模擬移動床的第二區段與第三區段之間，並使強滯留性雜質隨固定相移動至第一區段與第二區段之間的萃出端並使茄尼醇成分隨移動相移動至第三區段的萃餘端。
在本發明的一實施例中，所述第二次分離步驟使用的分離條件為：流動相為選擇乙醇/水體積比為95/5的溶液，固定相為C-18，且沖滌端入口的流速為6.0毫升/分鐘，進料入口的流速為0.4毫升/分鐘，萃出端的流速為2.5毫升/分鐘，萃餘端的流速為3.9毫升/分鐘，且模擬移動床的切換時間為6分35秒。
在本發明的一實施例中，當茄尼醇成分是隨固定相移動至第一區段與第二區段之間的萃出端，並且混合成分是隨移動相移動至第三區段的萃餘端時，模擬移動床使用的分離條件為：移動相為選擇質量百分比為10%的超臨界二氧化碳添加無水乙醇的輔助溶劑，固定相為矽膠，且模擬移動床的切換時間為6分鐘。
在本發明的一實施例中，當混合成分是隨固定相移動至第一區段與第二區段之間的萃出端，並且茄尼醇成分是隨移動相移動至第三區段的萃餘端時，模擬移動床使用的分離條件為：移動相為選擇正己烷/異丙醇體積比為95/5的混合溶液，固定相為矽 膠，且沖滌端入口的流速為5.4毫升/分鐘，進料入口的流速為0.2毫升/分鐘，萃出端的流速為3.3毫升/分鐘，萃餘端的流速為2.3毫升/分鐘，且模擬移動床的切換時間為9分鐘。
在本發明的一實施例中，所分離的茄尼醇成分含量大於74%。
在本發明的一實施例中，茄尼醇成分以及混合成分可分別具有第一滯留常數或第二滯留常數，第一滯留常數大於第二滯留常數，且第一區段之第一相對流速比值m1應大於第一滯留常數，且第二區段的相對流速比值m2以及第三區段的流速比值m3應介於第一滯留常數及第二滯留常數之間。
基於上述，本發明所提供的一種純化茄尼醇的方法能夠有效的分離出高純度的茄尼醇，解決傳統技術中產物稀釋嚴重、溶劑耗量大、吸附劑效能低、操作成本高等問題。
為讓本發明的上述特徵和優點能更明顯易懂，下文特舉實施例，並配合所附圖式作詳細說明如下。
100‧‧‧模擬移動床
102‧‧‧粗萃物
102A‧‧‧茄尼醇成分
102A’‧‧‧強滯留性雜質
102B‧‧‧混合成分
110A‧‧‧第一區段
110B‧‧‧第二區段
110C‧‧‧第三區段
C1、C2、C3、C4、C5、C6‧‧‧管柱
D1‧‧‧沖滌端入口
E1‧‧‧萃出端
F1‧‧‧進料入口
KA、KB‧‧‧滯留常數
R1‧‧‧萃餘端
X1‧‧‧方向
圖1是依照本發明實施例的一種菸葉原料粗萃物的層析圖譜。
圖2是顯示模擬移動床層析法依照三角形理論中可分離溶質的操作條件座標圖。
圖3A為本發明實施例的一種純化茄尼醇的方法中所使用的模 擬移動床之組態設計圖。
圖3B為本發明實驗例利用模擬移動床層析法分離純化出茄尼醇的結果分析圖。
圖4A為本發明另一實施例的一種純化茄尼醇的方法中所使用的模擬移動床之組態設計圖。
圖4B為本發明實驗例利用模擬移動床層析法分離純化出茄尼醇的結果分析圖。
圖4C為分離出茄尼醇後進行第二次分離步驟時所使用的模擬移動床之組態設計圖。
圖4D為本發明實驗例進行第二次分離步驟後所分離純化出茄尼醇的結果分析圖。
圖5A為本發明另一實施例的一種純化茄尼醇的方法中所使用的模擬移動床之組態設計圖。
圖5B為本發明實驗例利用模擬移動床層析法分離純化出茄尼醇的結果分析圖。
本發明實施例的純化茄尼醇的方法，是可用以將茄尼醇以及其它混合成分從菸葉原料中的粗萃物分離開來的一種方法。茄尼醇的分子機構是由以下式(1)所表示。
更詳細來說，本發明是以廢棄菸葉為原料，並先使用超臨界二氧化碳進行萃取。利用超臨界二氧化碳提取菸葉原料中的粗萃物的方式是將菸葉原料載入萃取槽中，並使用純二氧化碳進行萃取，經過6個小時的萃取後，添加乙醇輔助溶劑後進行2個小時的萃取，再將菸葉原料泵入分離槽的背壓閥，以提取出粗萃物，其中萃取條件為：萃取溫度50℃、壓力為35MPa、二氧化碳流速為60克/分鐘且乙醇流速為4.99毫升/分鐘。藉由以上的萃取方式能夠從每公斤的菸葉中萃取得到40.2克的粗萃物，其中含有的茄尼醇累積總量為6.1克。將從菸葉原料萃取出的粗萃物利用高效能液相層析儀紫外線偵測器(HPLC/UV)進行分析，得到的圖譜如圖1所示。
圖1是依照本發明實施例的一種菸葉原料粗萃物的層析圖譜。參考圖1，粗萃物102可包括有茄尼醇成分102A以及其它混合成分102B。另外，在一些實施例中，茄尼醇成分102A還可以包括強滯留性雜質102A’。據此，可藉由圖1所示的結果做為分析標準。
在提取出粗萃物102之後，是利用模擬移動床層析法將粗萃物102中的茄尼醇成分102A分離開來。為了有效地進行分離，本發明採用三角理論對模擬移動床的參數進行設定。圖2是 顯示模擬移動床層析法依照三角形理論中可分離溶質的操作條件座標圖。在三角理論中定義mj為模擬移動床中j區段內流動相體積流速與固體體積流速的比值，其計算方法如式(2)所示：
式(2)中Qj為j區段的流量，tsw為切換時間，Vc為層析柱體積，ε為層析柱的空隙度，KA與KB則為成分A與成分B的滯留常數。那麼假如固體的等溫吸附是線性的，因此滿足兩個成分(A/B)的分離條件為：
假設以包含三區段之模擬移動床層析法來看，其是藉由固定相及移動相於三區段之間的相對流動，以分離混合物中的物質。固定相是填充於各區段之數個管柱中，移動相是於管柱中朝同一方向流動，並藉由進料口切換裝置改變混合物之進料位置，以模擬固定相與移動相之相對流動方向。混合物進入層析管柱(進料)後，混合物所包含之物質A及B會依照各物質的滯留常數K分別被固定相滯留或隨該移動相移動，進而分離或純化各物質A及B。如圖2所示，若欲分離成分A及成分B，且以第二區段的 m 2 為橫軸，第三區段的m 3 為縱軸，則可以完全分離的操作條件正好座落於三角形內，也就是說可分離的操作範圍為此座標圖中的三角形。在三角形的頂點則具有最佳的分離效果以及分離效率。
實驗例：
以下，將列舉實施例以說明本案純化茄尼醇的方法的細節或條件。
菸葉原料的萃取：
將菸葉以50℃烘箱乾燥4小時去除水分之後，再秤取155克載入萃取槽專用的內膽中。自萃取開始即使用純二氧化碳進行萃取，在經過6小時的萃取後，再添加乙醇輔溶劑，將其泵入分離槽的背壓閥之前，進行2小時萃取，以便完整萃取出菸葉中的茄尼醇，也同時能夠收集到全部粗萃物。如同上述針對圖1說明的萃取條件以及實驗結果，運用此萃取方式能夠從每公斤的菸葉中萃取得到40.2克的粗萃物，其中含有的茄尼醇累積總量為6.1克。
含量計算：
實驗過程中，分別從模擬移動床各出口端吸取一定體積的液體樣品(V)至離心管(先稱重M1)中，再將離心管置於真空乾燥箱中，待溶劑揮乾後稱重M2。再依據式(4)與式(5)計算其茄尼醇在各出口端中的含量與回收率。
含量(E)計算如式(4)所示：
回收率(Recovery)的計算如式(5)所示：
其中，Ca、Cb分別表示各出口端茄尼醇的濃度，Qa、Qb則分別表示各出口端的流速。
進料溶液的製備：
將上述模擬移動床萃取得到的粗萃物全部進行混合，稱量一定體積的進料溶液進行乾燥實驗，測得總萃取物的濃度約為12090毫克/升；將進料溶液進樣20微升(μL)按照上述的分析方法進行分析，依據檢量線計算得其中的茄尼醇濃度約為638.83毫克/升，那麼茄尼醇在進料溶液中的含量百分比為5.28%。
實驗例1： 模擬移動床的組態設計
圖3A為本發明實施例的一種純化茄尼醇的方法中所使用的模擬移動床之組態設計圖。本實驗例是以提供有3A所示的模擬移動床100來進行模擬移動床層析法。參考圖3A，模擬移動床100包括第一區段110A、第二區段110B與第三區段110C。模擬移動床100是由移動相(未繪示)及固定相(未繪示)所組成，其中移動相包括沖滌液，而固定相顆粒內部是具有孔隙。移動相是相對於模擬移動床100中是朝同一方向從沖滌端入口D1流經第一區段 110A、第二區段110B以及第三區段110C之間，而固定相是相對於移動相朝反方向模擬移動。舉例來說，參考圖3A，若固定相是朝X1方向模擬移動(例如向左移動)，則移動相會朝與X1相反的方向移動(例如向右移動)。
此外，在本實施例中，第一區段110A包含兩根管柱C1與C2，第二區段110B包含兩根管柱C3與C4、且第三區段110C各自包含兩根管柱C5與C6，而上述每根管柱(C1~C6)內是填充顆粒內部具有孔隙之固定相。一般而言，固定相以及移動相的選擇可以依據所欲分離的產物之需求而進行調整。
茄尼醇的分離純化
在本實驗例中，是將包括有粗萃物102的進料溶液從進料入口F1注入模擬移動床100的第二區段110B與第三區段110C之間，並且使混合成分102B隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1並使茄尼醇成分102A隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。為了達到上述的分離結果，模擬移動床100使用的分離條件為：移動相選擇正己烷/異丙醇體積比為95/5的混合溶液，固定相為矽膠，且沖滌端入口D1的流速為5.4毫升/分鐘，進料入口F1的流速為0.2毫升/分鐘，萃出端E1的流速為3.3毫升/分鐘，萃餘端R1的流速為2.3毫升/分鐘，且模擬移動床100的切換時間為9分鐘。
上述的分離條件是符合三角理論的操作。舉例來說，基於上述條件，混合成分102B具有第一滯留常數X1而茄尼醇成分 102A具有第二滯留常數X2，且第一滯留常數X1大於第二滯留常數X2。此外，第一區段110A之第一相對流速比值m1應大於第一滯留常數X1，且第二區段110B的相對流速比值m2以及第三區段110C的流速比值m3應介於該第一滯留常數X1及該第二滯留常數X2之間。也就是說，由於茄尼醇成分102A的移動速度是大於混合成分102B的移動速度，因此，會使混合成分102B隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1並使茄尼醇成分102A隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。採用以上條件進行模擬移動床層析法所得到的結果分析如圖3B所示。
圖3B為本發明實驗例利用模擬移動床層析法分離純化出茄尼醇的結果分析圖。參考圖3B，比對一開始在進料入口F1針對粗萃物102中所檢測到的混合物之分析圖，可以得知的是，茄尼醇成分102A是從萃餘端R1分離出來，而大部分的其它混合成分102B是從萃出端E1分離出來。據此，可得到純度為60.3%的茄尼醇成分102A。
實驗例2： 模擬移動床的組態設計
實驗例2的模擬移動床100與實驗例1所使用的模擬移動床100相同，因此，相同元件以相同標號表示，且不予贅述。實驗例2與實驗例1的差異僅在於分離的條件不同。詳細來說，實驗例2的分離純化可以分為兩次的分離步驟。
茄尼醇的分離純化
詳細來說，圖4A為本發明另一實施例的一種純化茄尼醇的方法中所使用的模擬移動床之組態設計圖。參考圖4A，在本實驗例的第一個分離步驟中，是將包括有粗萃物102的進料溶液從進料入口F1注入模擬移動床100的第二區段110B與第三區段110C之間，並且使茄尼醇成分102A隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1，並且使混合成分102B隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。在本實驗例中，茄尼醇成分102A可以例如包括強滯留性雜質102A’，而強滯留性雜質102A’同樣是從萃出端E1分離出來。為了達到上述的分離結果，模擬移動床100使用的分離條件為：流動相為選擇乙醇/水體積比為95/5的溶液，固定相為C-18，且沖滌端入口D1的流速為8.0毫升/分鐘，進料入口F1的流速為0.4毫升/分鐘，萃出端E1的流速為4.5毫升/分鐘，萃餘端R1的流速為3.95毫升/分鐘，且模擬移動床100的切換時間為5分15秒。
上述的分離條件是符合三角理論的操作。在本實驗例的第一個分離步驟中，由於混合成分102B的移動速度是大於茄尼醇成分102A的移動速度，因此，茄尼醇成分102A會隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1，並且混合成分102B會隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。採用以上條件進行模擬移動床層析法所得到的結果分析如圖4B所示。
圖4B為本發明實驗例利用模擬移動床層析法分離純化 出茄尼醇的結果分析圖。參考圖4B，比對一開始在進料入口F1針對粗萃物102中所檢測到的混合物之分析圖，可以得知的是，茄尼醇成分102A以及其強滯留性雜質102A’是從萃出端E1分離出來，而大部分的其它混合成分102B是從萃餘端R1分離出來。此時，茄尼醇的含量會從一開始在進料溶液中的5.28%提高至31.38%。
為了進一步將強滯留性雜質102A’從茄尼醇成分102A分離，是如圖4C所示的進行第二次分離步驟。圖4C為分離出茄尼醇後進行第二次分離步驟時所使用的模擬移動床之組態設計圖。參考圖4C，第二次分離步驟包括將第一次分離步驟中在萃出端E1所收集到的茄尼醇成分102A以及強滯留性雜質102A’注入模擬移動床100的第二區段110B與第三區段110C之間，並使強滯留性雜質102A’隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1並使茄尼醇成分102A隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。為了達到上述的分離結果，模擬移動床100在第二次分離步驟所使用的分離條件為：流動相選擇乙醇/水體積比為95/5的溶液，固定相為C-18，且沖滌端入口D1的流速為6.0毫升/分鐘，進料入口F1的流速為0.4毫升/分鐘，萃出端E1的流速為2.5毫升/分鐘，萃餘端R1的流速為3.9毫升/分鐘，且模擬移動床100的切換時間為6分35秒。
上述的分離條件仍是符合三角理論的操作。在本實驗例的第二個分離步驟中，由於茄尼醇成分102A的移動速度是大於其 強滯留性雜質102A’的移動速度，因此，強滯留性雜質102A’會隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1，並且茄尼醇成分102A會隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。採用以上條件進行模擬移動床層析法所得到的結果分析如圖4D所示。
圖4D為本發明實驗例進行第二次分離步驟後所分離純化出茄尼醇的結果分析圖。參考圖4D，比對一開始在進料入口F1中針對茄尼醇成分102A與其強滯留性雜質102A’所檢測到的混合物之分析圖，可以得知的是，強滯留性雜質102A’是從萃出端E1分離出來，而大部分的茄尼醇成分102A是從萃餘端R1分離出來。此時，茄尼醇的含量會從31.38%提高至74.95%。據此，可得到高純度的茄尼醇成分102A。
實驗例3： 模擬移動床的組態設計
實驗例3的模擬移動床100與實驗例1所使用的模擬移動床100相同，因此，相同元件以相同標號表示，且不予贅述。實驗例3與實驗例1的差異僅在於分離的條件不同，且是使用添加輔溶劑之超臨界二氧化碳做為流動相。
茄尼醇的分離純化
詳細來說，圖5A為本發明另一實施例的一種純化茄尼醇的方法中所使用的模擬移動床之組態設計圖。參考圖5A，在本實驗例中，是將包括有粗萃物102的進料溶液從進料入口F1注入模 擬移動床100的第二區段110B與第三區段110C之間，並且使茄尼醇成分102A隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1，並且使混合成分102B隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。為了達到上述的分離結果，模擬移動床100使用的分離條件為：移動相端壓力設定為180bar，萃餘端壓力設定為160bar，溫度設定為40℃，所設定的二氧化碳流速分別有移動相端為8.4克/分鐘，萃餘端為5.4克/分鐘，進料入料口為0.48克/分鐘；所設定的輔溶劑流速分別有移動相端為1.176毫升/分鐘；進料入料口為0.06毫升/分鐘，固定相為矽膠，且模擬移動床的切換時間為6分鐘。
在本實驗例中，由於混合成分102B的移動速度是大於茄尼醇成分102A的移動速度，因此，茄尼醇成分102A會隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E1，並且混合成分102B會隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R1。採用以上條件進行模擬移動床層析法所得到的結果分析如圖5B所示。
圖5B為本發明實驗例利用模擬移動床層析法分離純化出茄尼醇的結果分析圖。參考圖5B，比對一開始在進料入口F1針對粗萃物102中所檢測到的混合物之分析圖，可以得知的是，茄尼醇成分102A是從萃出端E1分離出來，而大部分的其它混合成分102B是從萃餘端R1分離出來。據此，可得到高純度的茄尼醇成分102A。
綜上所述，本發明所提供的一種純化茄尼醇的方法能夠 有效的分離出高純度的茄尼醇，解決傳統技術中產物稀釋嚴重、溶劑耗量大、吸附劑效能低、操作成本高等問題。由於本發明所提供的模擬移動床技術具有可以連續式進料，因此，產物稀釋較少，大大降低了固體吸附劑的使用量，並且提高了其使用效率，在未來進行菸葉中茄尼醇分離純化方面具有重大地意義。
雖然本發明已以實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何所屬技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明的精神和範圍內，當可作些許的更動與潤飾，故本發明的保護範圍當視後附的申請專利範圍所界定者為準。

Claims (5)

  1. 一種純化茄尼醇的方法，包括：提供一菸葉原料，利用超臨界二氧化碳提取該菸葉原料中的一粗萃物，其中該粗萃物包括一茄尼醇成分以及一混合成分；以模擬移動床層析法將該粗萃物中的該茄尼醇成分分離開來，其中該模擬移動床層析法包含：(i)提供一模擬移動床，該模擬移動床依序包括一第一區段、一第二區段以及一第三區段，其中該模擬移動床是由一移動相及一固定相所組成，該移動相包括沖滌液，該固定相顆粒內部是具有孔隙，該移動相對於該模擬移動床中是朝同一方向流經該第一區段、該第二區段以及該第三區段之間，該固定相是相對於該移動相朝反方向模擬移動；(ii)將該粗萃物注入該模擬移動床的該第二區段與該第三區段之間，並使該茄尼醇成分隨該固定相移動至該第一區段與該第二區段之間的一萃出端並使該混合成分隨該移動相移動至該第三區段的一萃餘端，又或是使該混合成分隨該固定相移動至該第一區段與該第二區段之間的一萃出端並使該茄尼醇成分隨該移動相移動至該第三區段的一萃餘端，以分離純化出該茄尼醇成分，其中利用超臨界二氧化碳提取該菸葉原料中的該粗萃物的方式是將該菸葉原料載入萃取槽，並使用純二氧化碳進行萃取，經過6個小時的萃取後，添加乙醇輔助溶劑後進行2個小時的萃取，再將該菸葉原料泵入分離槽的背壓閥，以萃取出該粗萃物，其中萃取條件為：萃取溫度50℃、壓力為35MPa、二氧化碳流速為60 克/分鐘且乙醇流速為4.99毫升/分鐘，其中該第一區段、該第二區段以及該第三區段各自包含兩根管柱，且每根管柱內填充顆粒內部具有該孔隙之該固定相。
  2. 申請專利範圍第1項所述的純化茄尼醇的方法，其中當該茄尼醇成分是隨該固定相移動至該第一區段與該第二區段之間的該萃出端，並且該混合成分是隨該移動相移動至該第三區段的該萃餘端時，該模擬移動床使用的分離條件為：該流動相為選擇乙醇/水體積比為95/5的溶液，該固定相為C-18，且沖滌端入口的流速為8.0毫升/分鐘，進料入口的流速為0.4毫升/分鐘，該萃出端的流速為4.5毫升/分鐘，該萃餘端的流速為3.95毫升/分鐘，且該模擬移動床的切換時間為5分15秒，其中該純化茄尼醇的方法更包括將在該萃出端所收集到的該茄尼醇成分進行一第二次分離步驟以將該茄尼醇成分中的一強滯留性雜質分離，其中該第二次分離步驟包括將該萃出端所收集到的該茄尼醇成分以及該強滯留性雜質注入該模擬移動床的該第二區段與該第三區段之間，並使該強滯留性雜質隨該固定相移動至該第一區段與該第二區段之間的該萃出端並使該茄尼醇成分隨該移動相移動至該第三區段的該萃餘端，其中該第二次分離步驟使用的分離條件為：該流動相為選擇乙醇/水體積比為95/5的溶液，該固定相為C-18，且沖滌端入口的流速為6.0毫升/分鐘，進料入口的流速為0.4毫升/分鐘，該萃出端 的流速為2.5毫升/分鐘，該萃餘端的流速為3.9毫升/分鐘，且該模擬移動床的切換時間為6分35秒，其中所分離的該茄尼醇成分含量大於74%。
  3. 如申請專利範圍第1項所述的純化茄尼醇的方法，其中當該茄尼醇成分是隨該固定相移動至該第一區段與該第二區段之間的該萃出端，並且該混合成分是隨該移動相移動至該第三區段的該萃餘端時，該模擬移動床使用的分離條件為：該移動相端壓力設定為180bar，該萃餘端壓力設定為160bar，溫度設定為40℃，所設定的二氧化碳流速分別有該移動相端為8.4克/分鐘，該萃餘端為5.4克/分鐘，進料入口為0.48克/分鐘；所設定的輔助溶劑流速分別有該移動相端為1.176毫升/分鐘；進料入口為0.06毫升/分鐘，該固定相為矽膠，且該模擬移動床的切換時間為6分鐘。
  4. 如申請專利範圍第1項所述的純化茄尼醇的方法，其中當該混合成分是隨該固定相移動至該第一區段與該第二區段之間的該萃出端，並且該茄尼醇成分是隨該移動相移動至該第三區段的該萃餘端時，該模擬移動床使用的分離條件為：該移動相為選擇正己烷/異丙醇體積比為95/5的混合溶液，該固定相為矽膠，且沖滌端入口的流速為5.4毫升/分鐘，進料入口的流速為0.2毫升/分鐘，該萃出端的流速為3.3毫升/分鐘，該萃餘端的流速為2.3毫升/分鐘，且該模擬移動床的切換時間為9分鐘。
  5. 如申請專利範圍第1項所述的純化茄尼醇的方法，其中該茄尼醇成分以及該混合成分可分別具有第一滯留常數或第二滯 留常數，該第一滯留常數大於該第二滯留常數，且該第一區段之一第一相對流速比值m1應大於該第一滯留常數，且該第二區段的相對流速比值m2以及該第三區段的流速比值m3應介於該第一滯留常數及該第二滯留常數之間。
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