TWI724419B - 純化皂苷的方法 - Google Patents

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Abstract

一種純化皂苷的方法,包括提供三七粗萃液,所述三七粗萃液包括弱滯留性成分、中間滯留性成分以及強滯留性成分。中間滯留性成分包括三七皂苷R1、人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1,強滯留性成分包括人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd。接著,以模擬移動床層析法將所述三七粗萃液中的中間滯留性成分與強滯留性成分分離開來。運用此模擬移動床層析法可將三七粗萃液中的弱滯留性成分、包括三七皂苷R1、人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1的中間滯留性成分以及包括人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd的強滯留性成分分離開來,以產生高純度的皂苷。

Description

純化皂苷的方法
本發明是有關於一種純化方法,且特別是有關於一種純化皂苷的方法。
三七作為傳統的中藥材具有很高的藥用價值,已經成為保健食品的主要原料之一。研究發現三七中主要包含人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd及三七皂苷R1。人參皂苷Rb1具有保護神經、改善學習及記憶、抗氧化、保護肝臟及抗癌等作用;人參皂苷Rd主要被用於進行腎臟保護、有抗氧化及神經保護等方面;人參皂苷Rg1主要被用於記憶及神經方面的保護作用、抗發炎、預防骨質疏鬆及抑制血小板凝集等方面;三七皂苷R1具有可以明顯改善動脈粥樣硬化病變、改善心功能障礙、增強細胞活力、減少細胞凋亡、減輕氧化壓力和發炎反應以及維持肌動蛋白骨架與線粒體形態的作用。
目前從三七粗萃物中分離純化出皂苷的方法通常是使用有害人體的溶劑(如甲醇或二氯甲烷)及採用傳統的製備色譜分離技術進行分離。然而,使用有害人體的溶劑會使產品安全產生疑慮,且現有的分離純化的方法皆為間歇式操作的純化方式,在實際的生產過程中往往會導致產物稀釋嚴重,操作重複性低,穩定性不佳,不適宜工業化的生產。
本發明提供一種純化皂苷的方法,可有效地分離出高純度的皂苷。
本發明的實施例提供一種純化皂苷的方法。所述方法包括以下步驟。首先,提供三七粗萃液,三七粗萃液包括弱滯留性成分、中間滯留性成分以及強滯留性成分,其中中間滯留性成分包括三七皂苷R1、人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1,強滯留性成分包括人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd。接著,以模擬移動床層析法將三七粗萃液中的中間滯留性成分與強滯留性成分分離開來。模擬移動床層析法包含:(i)提供模擬移動床,模擬移動床依序包括具有沿第一方向排列的第一區段、第二區段、第三區段的分離區以及再生區段,其中再生區段包括潤濕區段以及清洗區段,其中模擬移動床是由移動相及固定相所組成,固定相為內部具有孔隙的顆粒,移動相是朝第一方向從沖滌端入口流經第一區段、第二區段以及第三區段之間,固定相是相對於移動相朝相反於第一方向的第二方向模擬移動,移動相為包含水與乙醇的沖滌劑;(ii)將三七粗萃液從進料入口注入模擬移動床的第二區段與第三區段之間,並使中間滯留性成分隨固定相移動至第一區段與第二區段之間的萃出端脫附,使強滯留性成分隨固定相移動至清洗區段脫附,以及使弱滯留性成分移動至萃餘端脫附,以分離純化出弱滯留性成分、中間滯留性成分及強滯留性成分。
在本發明的一實施例中,上述的固定相為反相矽膠填料。
在本發明的一實施例中,上述的第一區段、第二區段以及第三區段各自包含2根管柱,且每根管柱內填充有固定相。
在本發明的一實施例中,上述的潤濕區段以及清洗區段各自包含1根管柱,且每根管柱內填充有固定相。
在本發明的一實施例中,上述的移動相以第一方向流經第一區段、第二區段、第三區段以及潤濕區段,且以第二方向流經清洗區段。
在本發明的一實施例中,上述沖滌劑是藉由95%乙醇與水混合而形成。
在本發明的一實施例中,上述沖滌劑是藉由95%乙醇與水以35:65的比例混合而形成。
在本發明的一實施例中,上述的模擬移動床使用的分離條件為:沖滌劑的流速在沖滌端入口為5.0 毫升/分鐘、在萃出端為2.5 毫升/分鐘、在進料入口為0.2 毫升/分鐘、在萃餘端為2.7 毫升/分鐘、在潤濕區段的潤濕入口為5.0 毫升/分鐘以及在清洗區段的清洗入口為5.0 毫升/分鐘,且模擬移動床的切換時間為10分鐘至11分鐘。
在本發明的一實施例中,其中所分離的中間滯留性成分中三七皂苷R1的含量大於10%,所分離的中間滯留性成分中人參皂苷Re的含量以及人參皂苷Rg1的含量總和大於60%。
在本發明的一實施例中,其中所分離的強滯留性成分中人參皂苷Rb1的含量大於70%,所分離的強滯留性成分中人參皂苷Rd的含量大於10%。
在本發明的一實施例中,其中所分離的中間滯留性成分中還包括人參皂苷Rb1,且人參皂苷Rb1的含量小於2.5%。
在本發明的一實施例中,其中所分離的強滯留性成分中還包括人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1,且人參皂苷Re的含量以及人參皂苷Rg1的含量總和小於2.0%。
在本發明的一實施例中,上述三七粗萃液的製備方法包括使用70%乙醇水溶液對三七主根進行萃取,以得到三七粗萃液。
基於上述,本發明的皂苷的純化方法透過應用模擬移動床層析法將三七粗萃液中的弱滯留性成分、包括三七皂苷R1、人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1的中間滯留性成分以及包括人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd的強滯留性成分分離開來,所述方法操作穩定、無需使用有害人體的溶劑且可實現自動化,不僅可有效提升分離效率,更可獲得高純度的皂苷。
為讓本發明的上述特徵和優點能更明顯易懂,下文特舉實施例,並配合所附圖式作詳細說明如下。
本發明實施例的純化皂苷的方法,可用以將弱滯留性成分、中間滯留性成分以及強滯留性成分從三七粗萃液中分離純化出來。藉此,能夠得到高純度的皂苷。更具體來說,本發明純化皂苷的方法可將三七粗萃液中不同種類的皂苷分離。
圖1為依照本發明一實施例的純化皂苷的方法的步驟圖。
請參照圖1。首先,進行步驟S100,提供三七粗萃液。三七粗萃液包括弱滯留性成分、中間滯留性成分及強滯留性成分,其中中間滯留性成分包括三七皂苷R1、人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1,強滯留性成分包括人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd。接著,進行步驟S110,以模擬移動床(Simulated Moving Bed,SMB)層析法將三七粗萃液中的中間滯留性成分與強滯留性成分分離開來。
以下列舉實施例以說明本發明的生產方法的細節或條件,但這些實施例非用以限制本發明保護範圍。所繪圖式係為示意圖僅為說明方便而繪製,並非代表限制其實際的方法、條件或裝置等。
[ 三七粗萃液的製備 ]
在本實施例中,三七粗萃液的製備方法包括使用70%乙醇水溶液對三七主根進行萃取而取得。舉例而言,可將三七主根研磨成粉,取粉末300克(含水量3.6%)置於圓底燒瓶中,加入5倍體積的70%乙醇水溶液進行加熱回流3小時。接著,過濾後保留濾液,此濾液即為三七粗萃液。然後,將溶劑揮發,可得到濾液中的總固含量為62.4 g/L。
[ 分析方法 ]
使用高效液相層析儀紫外線偵測器(HPLC/UV)(泵:日立2130;紫外線偵測器:日立L-2455)進行樣品的分析。分析管柱採用Kromasil 100-5C18 (250 mm × 4.6 mm,5 μm);移動相以1毫升/分鐘(mL/min)的流速進行沖滌,沖滌方式則使用乙腈(acetonitrile,ACN)及純水的梯度沖滌,梯度沖滌的設定整理於表1,檢測波長則設定為203 nm。
[表1]
時間(分鐘) 0.0 25 25.1 35
乙腈比例(%) 25 50 25 25
純水比例(%) 75 50 75 75
圖2為依照本發明一實施例的三七粗萃液的HPLC/UV圖譜。在本實施例中,三七粗萃液中的皂苷包括三七皂苷R1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd。將所得之三七粗萃液的高效液相層析分析圖與三七皂苷R1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd各自的標準品溶液所得之高效液相層析分析圖相比較,可從圖2的分析圖中清楚判讀出上述皂苷的波鋒位置,藉由此結果做為分析標準。後續的分離純化及分析將人參皂苷Re與人參皂苷Rg1兩者合併計算,並以人參皂苷Rg1/Re(或Rg1/Re)表示。如圖2所示,三七皂苷R1、人參皂苷Rg1/Re、人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd的滯留時間分別為4.14分鐘、4.94分鐘、14.64分鐘、16.14分鐘。
為進行皂苷含量的定量分析,藉由製備一系列不同濃度的標準溶液以製作檢量線。對於不同皂苷所配製的標準溶液濃度分別為:三七皂苷R1,52、83.2、104、208、312、416 mg/L;人參皂苷Rg1與人參皂苷Re,102、163.2、204、408、612、816 mg/L;人參皂苷Rb1,65、104、130、260、390、520 mg/L;人參皂苷Rd,56、89.6、112、224、336、448 mg/L。設定橫坐標為進樣濃度(C j j 代表不同的皂苷,單位為mg/L),而縱坐標為HPLC圖譜的訊號峰面積(A j j 代表不同的皂苷),則可以製作出標準曲線並得三七皂苷R1、人參皂苷Rg1與人參皂苷Re、人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd的回歸方程分別為AR1 =2269.9 × CR1 、ARg1+Re = 2597.7 × CRg1+Re 、ARb1 = 1918.9 × CRb1 以及ARd = 2631.5× CRd
藉由圖2的結果,可計算得三七粗萃液中的固含量所包含的各皂苷含量,如表2所示。
[表2]
固含量 成分 進樣濃度 (mg/L) 含量 (wt%) 總皂苷含量
62.4 g/L 三七皂苷R1 2748 4.40 30.5%
人參皂苷Rg1/Re 7220 11.56
人參皂苷Rb1 8096 12.97
人參皂苷Rd 962 1.54
[ 模擬移動床的組態設計 ]
圖3為本發明實施例的一種純化皂苷的方法中所使用的模擬移動床之組態設計圖。本實驗例是以提供圖3所示的模擬移動床100來進行模擬移動床層析法。請參考圖3,模擬移動床100依序包括具有沿第一方向X1排列的第一區段110A、第二區段110B、第三區段110C的分離區以及再生區段120。再生區段120包括潤濕區段122以及清洗區段124。在本實施例中,第一區段110A包含兩根管柱C1與C2,第二區段110B包含兩根管柱C3與C4,且第三區段110C包含兩根管柱C5與C6,上述6根管柱串聯。潤濕區段122包含一根管柱C7,清洗區段124包含一根管柱C8。在本實施例中,管柱C7與管柱C8沿第一方向X1依序排列於第三區段110C的管柱C6旁。上述8根管柱形成開放迴路設計的模擬移動床100。在本實施例中,管柱(C1~C8)的規格為1 cmID × 15 cmL 的不鏽鋼填充柱。
模擬移動床100是由移動相(未繪示)及固定相(未繪示)所組成。移動相包括沖滌劑,而固定相為內部具有孔隙的顆粒。每根管柱(C1~C8)內是填充顆粒內部具有孔隙的固定相。在本實施例中,固定相為反相矽膠填料;而移動相為包含水與乙醇的沖滌劑。在一實施例中,沖滌劑是藉由95%乙醇與水混合而形成的沖滌劑。舉例來說,沖滌劑可藉由95%乙醇與水以35:65的比例混合而形成。然而,本發明不以此為限。一般而言,固定相以及移動相的選擇可以依據所欲分離的產物之需求而進行調整。
在本實施例中,藉由固定相及移動相於各區段之間的相對流動,以分離混合物中的物質。具體而言,移動相流入與流出管柱來沖洗吸附於固定相上的混合物,以將成分分離。如圖3所示,移動相於第一方向X1從沖滌端入口D流經第一區段110A、第二區段110B以及第三區段110C之間,而固定相是相對於移動相朝相反於第一方向X1的第二方向X2模擬移動。如圖3所示,從左到右的管柱依序為C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8,如果讓移動相的進出口及混合物的進口於一段時間後順時鐘方向切換至下一個管柱,則從左到右的管柱將依序為C8、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7。一段時間後再繼續沿順時鐘方向切換至下一個管柱,經過連續不斷的切換之後就會形成類似讓固定相沿逆時鐘方向流動的模擬狀態。而在此同時,移動相在第一區段110A、第二區段110B以及第三區段110C之間則一直連續不斷地順時鐘流動,而達到模擬固定相與移動相連續逆向流動接觸的過程。藉由第一區段110A、第二區段110B、第三區段110C的設計,可使移動相不直接在模擬移動床100中再生並循環使用。
在本實施例中,移動相分別於第一區段110A、第二區段110B、第三區段110C及潤濕區段122中朝第一方向X1流動,固定相是相對於移動相朝相反於第一方向X1的第二方向X2模擬移動。藉由移動相與固定相相互逆流接觸,可沖洗分離出弱滯留性成分。在再生區段120的清洗區段124中,移動相的移動方向與固定相的模擬移動方向相同(朝第二方向X2移動),使強滯留性成分會模擬移動地往第二方向X2移動而滯留於再生區段120的清洗區段124的固定相內。藉此,可改善強滯留性成分對管柱C1~C7造成汙染而使模擬移動床100無法長時間連續地作用的問題。在清洗區段124的固定相的強滯留性成分,例如可藉由另一種強脫附劑將強滯留性成分由固定相進行脫附,或者可藉由控制清洗區段124的移動相之流速大於強滯留性成分的滯留常數,以移除被吸附在固定相內的強滯留性成分。
當有滯留常數不同的兩成分進入模擬移動床,其吸附在固定相且被移動相所沖滌時,低滯留常數的成分會被移動相沖出固定相,而隨移動相一起往順時針方向移動到第一方向X1上的下一個管柱;高滯留常數的成分由於不易被移動相沖出,在進出口切換之後,會如同被固定相帶動而往逆時針方向移動到第二方向X2上的下一個管柱。
[ 回收率 r 的計算 ]
利用模擬移動床層析法分離的皂苷,在不同的出口端的回收率r的定義如下:
Figure 02_image001
式(1) 式(1)中: Q代表體積流速; C代表濃度;w 代表重量百分含量; 上標或下標的i 代表不同的出口端,例如萃出端E、萃餘端R或清洗區段124的清洗出口W2’; 下標j 代表不同的皂苷。
接著,以下將對利用模擬移動床層析法將皂苷成分從三七粗萃液中分離開來的方式進行說明。
實施例
[ 皂苷的分離 ]
在本步驟中,可將三七粗萃液添加適量的純水後,作為進料溶液使用。三七粗萃液的進料溶液經過濾後可得其固含量為20.8 g/L,其中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1/Re、人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd的含量分別為7.1%、17.2%、17.3%及2.9%。將三七粗萃液的進料溶液200從進料入口F注入模擬移動床100的第二區段110B與第三區段110C之間。接著,使包括中間滯留性成分與強滯留性成分的組成一併隨固定相移動,其中包括中間滯留性成分的成分200A隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E脫附,而成分200A中亦包含少量的強滯留性成分(即,中間滯留性成分與少量的強滯留性成分隨固定相移動至第一區段110A與第二區段110B之間的萃出端E脫附),並使包括大部分的強滯留性成分的成分200C繼續隨固定相移動至清洗區段124的清洗出口W2’脫附,而包括弱滯留性成分的成分200B隨移動相移動至第三區段110C的萃餘端R脫附。具體而言,成分200A包括三七皂苷R1以及人參皂苷Rg1/Re,成分200C包括人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd。
在本實施例中,移動相為包含乙醇和水的沖滌劑,其中移動相是採用95%乙醇與水以35:65的比例混合而成的乙醇水溶液。模擬移動床層析法的沖滌端入口D、進料入口F、萃出端E、萃餘端R、潤濕區段122的潤濕入口W1及清洗區段124的清洗入口W2的沖滌劑的流速設定如下表3所示。
[表3]
  乙醇水溶液(mL/min)
入口端 沖滌端入口D 5.0
進料入口F 0.2
潤濕入口W1 5.0
清洗入口W2 5.0
出口端 萃出端E 2.5
萃餘端R 2.7
在本步驟中,進行層析分離時的溫度為室溫。在本步驟中,當使用上述的方式操作一段時間以後,如6分鐘,便將所有的出口以及入口同時往下一根管柱切換。再持續一段相同時間後,再一次將所有出入口移往下一根管柱,如此持續的切換管柱,便可模擬固體沿著圖3的左手方向移動,而形成與液體逆向或同向流動的行為。在本實施例中,測試多種不同切換時間後,得切換時間為10分鐘至11分鐘時可有效分離低滯留性雜質。舉例來說,切換時間為10.5分鐘時可獲得有效分離低滯留性雜質的結果。當模擬移動床的操作達4次循環以上的穩態操作以後,便開始在萃餘端R、萃出端E及清洗出口W2’收集樣品。除了揮發溶劑以計算其固含量以外,也同時進行HPLC的分析,其結果顯示於表4及圖4中。
[表4]
進出口端 進樣濃度(mg/L) 含量(wt%)
三七皂苷 R1 人參皂苷 Rg1/Re 人參皂苷 Rb1 人參皂苷 Rd 三七皂苷 R1 人參皂苷 Rg1/Re 人參皂苷 Rb1 人參皂苷 Rd 皂苷 總含量
萃餘端R 0 0 1.397 0 0 0 0.2 0 0.2
萃出端E 71.42 307.8 9.074 0 15.4 66.3 2.0 0 83.7
清洗出口W2’ 0 2.820 141.7 22.24 0 1.5 75.8 11.9 89.2
進料入口F 1481 3586 3595 610.1 7.1 17.2 17.3 2.9 44.6
利用模擬移動床層析法對三七粗萃液進行分離純化,可在萃餘端R、萃出端E與清洗出口W2’分別收集到包含成分200B的溶液、包含成分200A的溶液與包含成分200C的溶液,其固含量分別為0.807 g/L、0.464 g/L及0.187 g/L。圖4為依照本發明一實施例的利用模擬移動床層析法從三七粗萃液中分離純化出皂苷結果分析圖。請參考圖4及表4,切換時間為10.5分鐘時,比對模擬移動床的進料入口F的溶液與在萃餘端R、萃出端E與清洗出口W2’收集到的溶液之分析結果,可以得知的是,中間滯留性成分可由萃出端E分離出來,而強滯留性成分可由清洗出口W2’分離出來。詳細而言,在切換時間為10.5分鐘的條件下,三七皂苷R1在萃出端E所收集到的含量可由進料的7.1%提高至15.4%,人參皂苷Rg1/Re在萃出端E所收集到的含量可由進料的17.2%提高至66.3%,人參皂苷Rb1在清洗出口W2’所收集到的含量可由進料的17.3%提高至75.8%,人參皂苷Rd在清洗出口W2’所收集到的含量可由進料的2.9%提高至11.9%。
另外,在萃出端E收集到的包括三七皂苷R1與人參皂苷Rg1/Re的中間滯留性成分中,還包括少量的人參皂苷Rb1,其中人參皂苷Rb1的含量約2.0%。當萃出端E收集到的皂苷總含量為83.7%時,三七皂苷R1與人參皂苷Rg1/Re的回收率分別達約100%及97.8%。另外,在清洗出口W2’收集到的包括人參皂苷Rb1與人參皂苷Rd的強滯留性成分中,還包括少量的人參皂苷Rg1/Re,其中人參皂苷Rg1/Re的含量約1.5%。當清洗出口W2’收集到的皂苷總含量為89.2%時,人參皂苷Rb1與人參皂苷Rd的回收率分別達97.2%及約100%。藉此,可有效地將中間滯留性成分與強滯留性成分分離,以提高上述各種皂苷的純度。
在本實施例中,萃餘端R收集到的成分200B的溶液之固含量為0.807 g/L,但其中僅有約0.2%的人參皂苷Rb1。也就是說,大部分的強滯留性成分都在再生區段120的清洗區段124的清洗出口W2’分離出來,大部分的中間留性成分都在萃出端E分離出來。亦即,成分200B包含大部分的弱滯留性成分。藉此,可有效分離弱滯留性雜質。
綜上所述,由於本發明所提供的模擬移動床技術可以連續式進料、操作步驟簡易且穩定性佳,與傳統的製備方法相比較具有實現自動化及高效連續生產等優勢,容易工業化生產高純度皂苷。因此,本發明所提供的藉由使用模擬移動床層析技術純化皂苷的方法能夠解決傳統技術中使用有害人體的溶劑、產物稀釋嚴重、操作重複性低及穩定性不佳等問題。
雖然本發明已以實施例揭露如上,然其並非用以限定本發明,任何所屬技術領域中具有通常知識者,在不脫離本發明的精神和範圍內,當可作些許的更動與潤飾,故本發明的保護範圍當視後附的申請專利範圍所界定者為準。
S100、S110:步驟 100:模擬移動床 110A:第一區段 110B:第二區段 110C:第三區段 120:再生區段 122:潤濕區段 124:清洗區段 200:進料溶液 200A、200B、200C:成分 C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8:管柱 D:沖滌端入口 E:萃出端 F:進料入口 R:萃餘端 W1:潤濕入口 W2:清洗入口 W2’:清洗出口 X1:第一方向 X2:第二方向
圖1為依照本發明一實施例的純化皂苷的方法的步驟圖。 圖2為依照本發明一實施例的三七粗萃液的HPLC/UV圖譜。 圖3為本發明實施例的一種純化皂苷的方法中所使用的模擬移動床之組態設計圖。 圖4為依照本發明一實施例的利用模擬移動床層析法從三七粗萃液中分離純化出皂苷結果分析圖。
S100、S110:步驟

Claims (10)

  1. 一種純化皂苷的方法,包括:提供三七粗萃液,所述三七粗萃液包括弱滯留性成分、中間滯留性成分以及強滯留性成分,其中所述中間滯留性成分包括三七皂苷R1、人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1,所述強滯留性成分包括人參皂苷Rb1以及人參皂苷Rd;以及以模擬移動床層析法將所述三七粗萃液中的所述中間滯留性成分與所述強滯留性成分分離開來,其中所述模擬移動床層析法包含:(i)提供模擬移動床,所述模擬移動床依序包括具有沿第一方向排列的第一區段、第二區段、第三區段的分離區以及再生區段,其中所述再生區段包括潤濕區段以及清洗區段,其中所述模擬移動床是由移動相及固定相所組成,所述固定相為內部具有孔隙的顆粒,所述移動相是朝所述第一方向從沖滌端入口流經所述第一區段、所述第二區段以及所述第三區段之間,所述固定相是相對於所述移動相朝相反於所述第一方向的第二方向模擬移動,所述移動相為包含水與乙醇的沖滌劑;(ii)將所述三七粗萃液從進料入口注入所述模擬移動床的所述第二區段與所述第三區段之間,並使所述中間滯留性成分隨所述固定相移動至所述第一區段與所述第二區段之間的萃出端脫附、使所述強滯留性成分隨所述固定相移動至所述清洗區段脫附,以及使所述弱滯留性成分移動至所述第三區段的萃餘端脫 附,以分離純化出所述弱滯留性成分、所述中間滯留性成分及所述強滯留性成分,其中所述固定相為反相矽膠填料,所述沖滌劑是藉由95%乙醇與水混合而形成,所述模擬移動床使用的分離條件為:所述沖滌劑的流速在所述沖滌端入口為5.0毫升/分鐘、在所述萃出端為2.5毫升/分鐘、在所述進料入口為0.2毫升/分鐘、在所述萃餘端為2.7毫升/分鐘、在所述潤濕區段的潤濕入口為5.0毫升/分鐘以及在所述清洗區段的清洗入口為5.0毫升/分鐘,且所述模擬移動床的切換時間為10分鐘至11分鐘。
  2. 如申請專利範圍第1項所述的純化皂苷的方法,其中所述第一區段、所述第二區段以及所述第三區段各自包含2根管柱,且每根管柱內填充有所述固定相。
  3. 如申請專利範圍第1項所述的純化皂苷的方法,其中所述潤濕區段以及所述清洗區段各自包含1根管柱,且每根管柱內填充有所述固定相。
  4. 如申請專利範圍第1項所述的純化皂苷的方法,其中所述移動相以所述第一方向流經所述第一區段、所述第二區段、所述第三區段以及所述潤濕區段,且以所述第二方向流經所述清洗區段。
  5. 如申請專利範圍第1項所述的純化皂苷的方法,其中所述沖滌劑是藉由95%乙醇與水以35:65的比例混合而形成。
  6. 如申請專利範圍第5項所述的純化皂苷的方法,其中所分離的中間滯留性成分中所述三七皂苷R1的含量大於10%,所分離的中間滯留性成分中所述人參皂苷Re的含量以及所述人參皂苷Rg1的含量總和大於60%。
  7. 如申請專利範圍第5項所述的純化皂苷的方法,其中所分離的強滯留性成分中所述人參皂苷Rb1的含量大於70%,所分離的強滯留性成分中所述人參皂苷Rd的含量大於10%。
  8. 如申請專利範圍第1項所述的純化皂苷的方法,其中所分離的所述中間滯留性成分中還包括人參皂苷Rb1,且所述人參皂苷Rb1的含量小於2.5%。
  9. 如申請專利範圍第1項所述的純化皂苷的方法,其中所分離的所述強滯留性成分中還包括人參皂苷Re以及人參皂苷Rg1,且所述人參皂苷Re的含量以及所述人參皂苷Rg1的含量總和小於2.0%。
  10. 如申請專利範圍第1項所述的純化皂苷的方法,其中所述三七粗萃液的製備方法包括:使用70%乙醇水溶液對三七主根進行萃取,以得到所述三七粗萃液。
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