CN111826328A - 乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，乳酸片球菌制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，涉及微生物制备技术领域，其原料来源广泛，配比科学合理，能够在喷雾干燥过程中，对乳酸片球菌进行较佳的保护，提高乳酸片球菌的存活率。使得乳酸片球菌的喷雾干燥得以实现，从而实现乳酸片球菌制剂的高效生产。一种乳酸片球菌制剂及其制备方法，该制备方法是将乳酸片球菌发酵液与上述喷雾干燥保护剂混合进行喷雾干燥。采用该制备方法，不仅生产周期短，生产效率高，得到的乳酸片球菌制剂还具备含菌量高、稳定性高的优点，适合进行大规模的工业化应用。

Description

乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，乳酸片球菌制剂及其制备 方法

技术领域

本发明涉及微生物制备技术领域，具体而言，涉及一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，乳酸片球菌制剂及其制备方法。

背景技术

乳酸片球菌（Pediococcusacidilactici），革兰氏阳性菌，不运动，兼性厌氧。细胞圆球状，在直角连个平皿胶体分裂形成四联状，一般细胞对生，单身着罕见，不成链状排列。在MRS培养基上菌落小，呈白色。接触酶阴性，不产细胞色素。

乳酸片球菌主要功用包括产酸，调节胃肠道菌群，维持肠道微生态平衡。在动物体内对病原微生物有颉颃作用，可竞争性地抑制病原微生物，增强动物机体的免疫功能，产生有益的代谢产物，激活酸性蛋白酶的活性，参与机体的新陈代谢，防止有害物质产生。其可以直接加入配合饲料中或先按一定倍数稀释后，再加入饲料中混匀使用。

现有技术中，对于乳酸片球菌制剂的制备，存在着生产周期过长，生产效率低下的问题，难以实现工业化的大规模生产，限制了其在饲料添加剂中的应用发展。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，其能够在喷雾干燥过程中，对乳酸片球菌进行较佳的保护，使得乳酸片球菌的喷雾干燥得以实现，从而提高乳酸片球菌制剂的生产效率。

本发明的第二目的在于提供一种乳酸片球菌制剂的制备方法，其采用喷雾干燥工艺，不仅操作简单方便，而且生产周期短，生产效率高，便于实现乳酸片球菌制剂的大规模工业化生产。

本发明的第三目的在于提供一种乳酸片球菌制剂，其采用上述乳酸片球菌制剂的制备方法制备得到，其不仅含菌量较高，而且具有较佳的稳定性、耐酸性和耐胆盐性，使其可以更好地在饲料添加剂中应用。

本发明的实施例是这样实现的：

一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，其按重量份数计，包括：

脱脂奶粉1~5份，蔗糖1~3份，海藻糖1~5份，谷氨酸钠0.5~2份，抗坏血酸钠0.5~3份、吐温-80 0.1~0.5份，明胶0.1~1份，黄原胶0.1~1份，以及阿拉伯胶0.1~0.5份。

一种乳酸片球菌制剂的制备方法，其包括：

将乳酸片球菌发酵液与上述喷雾干燥保护剂混合，制成乳酸片球菌悬液；

将乳酸片球菌悬液进行喷雾干燥，得到乳酸片球菌制剂。

一种乳酸片球菌制剂，其由上述乳酸片球菌制剂的制备方法制备得到。

本发明实施例的有益效果是：

本发明实施例提供了一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，其原料来源广泛，配比科学合理，能够在喷雾干燥过程中，对乳酸片球菌进行较佳的保护，提高乳酸片球菌的存活率。使得乳酸片球菌的喷雾干燥得以实现，从而实现乳酸片球菌制剂的高效生产。

本发明实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂及其制备方法，该制备方法是将乳酸片球菌发酵液与上述喷雾干燥保护剂混合进行喷雾干燥。采用该制备方法，不仅生产周期短，生产效率高，得到的乳酸片球菌制剂还具备含菌量高、稳定性高的优点，适合进行大规模的工业化应用。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

下面对本发明实施例的一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，乳酸片球菌制剂及其制备方法进行具体说明。

本发明实施例提供了一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，其按重量份数计，包括：

脱脂奶粉1~5份，蔗糖1~3份，海藻糖1~5份，谷氨酸钠0.5~2份，抗坏血酸钠0.5~3份、吐温-80 0.1~0.5份，明胶0.1~1份，黄原胶0.1~1份，以及阿拉伯胶0.1~0.5份。

优选地，按照重量份数计，所述喷雾干燥保护剂包括：

脱脂奶粉2~4份，蔗糖1~2份，海藻糖2~4份，谷氨酸钠0.5~1份，抗坏血酸钠0.5~2份、吐温-80 0.3~0.5份，明胶0.3~0.8份，黄原胶0.3~0.8份，以及阿拉伯胶0.2~0.4份。

该喷雾干燥保护剂是在发明人付出大量创造性劳动后，得到的产品，该喷雾干燥保护剂的原料来源广泛，配比科学合理。其可以在乳酸片球菌的喷雾干燥过程中，有效地保护乳酸片球菌，极大地提高乳酸片球菌的存活率。使得通过喷雾干燥法来制备乳酸片球菌制剂得以实现，填补了现有技术中，乳酸片球菌无法通过喷雾干燥法制取的技术空白。

本发明实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂的制备方法，其包括：

S1. 将乳酸片球菌发酵液与上述喷雾干燥保护剂混合，制成乳酸片球菌悬液。

其中，乳酸片球菌发酵液是采用商业可得的乳酸片球菌液，通过菌种活化和扩大培养后，得到乳酸片球菌的种子，再对种子进行液体发酵得到的。

可选地，菌种活化的方法包括：将乳酸片球菌的甘油管通过划线接入到MRS固体的平板上，36~38℃下倒置培养24~48h，然后挑取单菌落接入到MRS液体摇瓶中，36~38℃静置培养 15~18 h，然后将其稀释涂布到MRS平板，36~38℃倒置培养24~36h，作为种子平板。

扩大培养的方法包括：用接种环从上述种子平板上挑取单菌落接入到装有MRS培养基中的三角摇瓶中，30~40℃静置培养12~24h，作为一级种子摇瓶。按照5%~10%的比例将一级种子药瓶的种子接入到装有MRS液体培养基的种子罐中，装液量为20~40L，发酵温度30~40℃、搅拌转速100~200转/min，培养12~24h，作为二级种子罐。

对种子进行液体发酵则是将上述二级种子罐中的种子接入到预先配置的发酵培养基中培养。其中，按照重量份数计，发酵培养基包括：蔗糖20~40份，蛋白胨10~30份，酵母粉20~40份，玉米浆膏0~20份，葡萄糖10~30份，吐温80 0~2份，硫酸镁0~0.5份，硫酸锰0~0.5份，碳酸钙10~20份，以及水800~1000份。在实际操作中，可以将上述成分按比例加入到发酵罐中，用NaOH或者氨水将pH调节为6.0~7.5之间，升温至105~121℃进行灭菌15~30min。随后，降温至30~45℃，再加入二级种子罐中的种子。上述发酵培养基经过发明人的精心配置，针对乳酸片球菌的生长特性，能够最大限度地满足乳酸片球菌生长所需，可以在短时间内得到高含菌量的乳酸片球菌发酵液。

进一步地，二级种子罐中的种子接入比例为5%~10%，发酵条件为：温度为30~40℃，时间为12~20 h，pH为5.5~6.5，压强为0.03~0.05 Mpa。发酵过程中的pH值，通过NaOH或者氨水随时进行调控。在pH值不再发生明显改变时，继续培养1~2 h，然后准备放罐、同时检测放罐时乳酸片球菌的菌落数。在上述发酵条件下，发酵效率高，利于得到高含菌量的乳酸片球菌发酵液，通常情况下，得到的乳酸片球菌发酵液含菌量可达到1×10¹⁰~2.5×10¹⁰cfu/ml。

可选地，在乳酸片球菌发酵液和喷雾干燥保护剂混合过程中，只有保证喷雾干燥保护剂的充分溶解，才能使二者混合均匀，才能达到最好的保护效果。而直接将喷雾干燥保护剂与乳酸片球菌发酵液混合时，由于乳酸片球菌发酵液的干扰，很难看清楚喷雾干燥保护剂是否充分溶解，为此，发明人采用将喷雾干燥保护剂预先用水溶解的方式，确保喷雾干燥保护剂充分溶解后，再与乳酸片球菌发酵液混合。同时，在将喷雾干燥保护剂用水溶解时，根据原料颜色的深浅，按照由浅到深顺序溶解，避免深色对溶解效果的观察造成干扰。

除此之外，由于需要预先用水对喷雾干燥保护剂进行溶解，实际上等于对乳酸片球菌发酵液进行了稀释，乳酸片球菌发酵液的稀释又会造成喷雾干燥效率的降低。为此，发明人在混合之前，先将乳酸片球菌发酵液进行离心浓缩，以保证喷雾干燥的效率。具体地，若采用管式离心机，乳酸片球菌发酵液可以以300~600 L/h的速度，得到含菌量为5.0×10¹¹~8.0×10¹¹ cfu/g的菌泥；若采用蝶式离心机，浓缩比可达到1:10，最终得到含菌量为1.0×10¹¹~2.0×10¹¹ cfu/ml的浓缩液。

进一步地，为了统一喷雾干燥工艺，根据得到的菌泥、浓缩液的不同，再与喷雾干燥保护剂、水的混合过程中，比例也会有所调整。可选地，若得到的是菌泥，则按照重量份数计，乳酸片球菌悬液由2~10份菌泥、4~22份喷雾干燥保护剂以及40~60份水混合而成。若得到的是浓缩液，则按照重量份数计，乳酸片球菌悬液由20~50份浓缩液、4~22份喷雾干燥保护剂以及20~40份水混合而成。按上述比例制成的乳酸片球菌悬液，不仅溶解混合效果较佳，而且能够保证较高的喷雾干燥效率。

进一步地，本发明实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂的制备方法，其包括：

S2. 将乳酸片球菌悬液进行喷雾干燥，得到乳酸片球菌制剂。

其中，对乳酸片球菌悬液的喷雾干燥是在喷雾干燥塔中进行的，喷雾干燥塔的进风温度为130~170℃，出风温度为60~90℃，乳酸片球菌悬液的进液速度为30~60 L/h。在上述喷雾干燥条件下，产品的收率可达到80%以上，具有较佳的生产效率，适合大规模的工业化生产。

本发明实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂，其由上述乳酸片球菌制剂的制备方法制备得到。该乳酸片球菌制剂的含菌量为1.2×10¹¹~2.5×10¹¹cfu/g，不仅含菌量高，而且具有较佳的稳定性、耐酸和耐胆盐性能，在饲料添加剂方面有更好的应用。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。实施例中所采用的乳酸片球菌来源于中国工业微生物保藏中心，菌株保藏编号为CICC 10346。

实施例1

本实施例提供了一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，按照重量份数计，其包括：

脱脂奶粉5份，蔗糖1份，海藻糖5份，谷氨酸钠0.5份，抗坏血酸钠3份、吐温-80 0.5份，明胶0.1份，黄原胶0.1份，以及阿拉伯胶0.5份。

本实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂，其制备方法包括以下步骤：

S1.将乳酸片球菌的甘油管通过划线接入到MRS固体的平板上，37℃下倒置培养24 h，然后挑取单菌落接入到MRS液体摇瓶中，37℃静置培养 16 h，然后将其稀释涂布到MRS平板，37℃倒置培养24 h，作为种子平板。

S2. 用接种环从上述种子平板上挑取单菌落接入到装有MRS培养基中的三角摇瓶中，35℃静置培养18 h，作为一级种子摇瓶。按照10%的比例将一级种子药瓶的种子接入到装有MRS液体培养基的种子罐中，装液量为40 L，发酵温度35~40℃、搅拌转速200转/min，培养12 h，作为二级种子罐。

S3. 在发酵罐中，加入发酵培养基，用NaOH或者氨水将pH调节为6.0~7.0之间，升温至110~121℃进行灭菌20 min。其中，按照重量份数计，发酵培养基包括：蔗糖40份，蛋白胨10份，酵母粉40份，玉米浆膏2份，葡萄糖30份，吐温80 1份，硫酸镁0.5份，硫酸锰0.5份，碳酸钙10份，以及水800份。

S4. 降温至30~40℃，按照10%的比例加入上述二级种子罐中的种子，在温度为30~40℃，时间为15 h，pH为5.5~6.5，压强为0.03~0.05 Mpa的条件下发酵，发酵过程中的pH值，通过NaOH或者氨水随时进行调控。在pH值不再发生明显改变时，继续培养2 h，得到乳酸片球菌发酵液。

S5. 采用管式离心机，对上述乳酸片球菌发酵液进行浓缩，以300~600 L/h的速度，得到菌泥。

S6. 将本实施例喷雾干燥保护剂加水充分溶解，再加入上述菌泥，得到乳酸片球菌悬液。其中，菌泥、喷雾干燥保护剂、水的质量比为2：4：40。

S7. 将上述乳酸片球菌悬液通入喷雾干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥塔的进风温度为170℃，出风温度为90℃，乳酸片球菌悬液的进液速度为60 L/h，得到所需的乳酸片球菌制剂。

本实施例的乳酸片球菌制剂为粉状，经测试，其含菌量为2.2×10¹¹ cfu/g。

实施例2

本实施例提供了一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，按照重量份数计，其包括：

脱脂奶粉1份，蔗糖3份，海藻糖1份，谷氨酸钠2份，抗坏血酸钠0.5份、吐温-80 0.1份，明胶1份，黄原胶1份，以及阿拉伯胶0.1份。

本实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂，其制备方法包括以下步骤：

S1.将乳酸片球菌的甘油管通过划线接入到MRS固体的平板上，36~38℃下倒置培养24~48h，然后挑取单菌落接入到MRS液体摇瓶中，36~38℃静置培养 15~18 h，然后将其稀释涂布到MRS平板，36~38℃倒置培养24~36h，作为种子平板。

S2. 用接种环从上述种子平板上挑取单菌落接入到装有MRS培养基中的三角摇瓶中，40℃静置培养12 h，作为一级种子摇瓶。按照5%的比例将一级种子药瓶的种子接入到装有MRS液体培养基的种子罐中，装液量为20 L，发酵温度40℃、搅拌转速200转/min，培养12h，作为二级种子罐。

S3. 在发酵罐中，加入发酵培养基，用NaOH或者氨水将pH调节为6.0~7.5之间，升温至105~115℃进行灭菌30 min。其中，按照重量份数计，发酵培养基包括：蔗糖20份，蛋白胨30份，酵母粉20份，玉米浆膏20份，葡萄糖10份，吐温80 2份，硫酸镁0.5份，硫酸锰0.1份，碳酸钙15份，以及水1000份。

S4. 降温至30~45℃，按照5%的比例加入上述二级种子罐中的种子，在温度为40℃，时间为12 h，pH为5.5~6.5，压强为0.03~0.05 Mpa的条件下发酵，发酵过程中的pH值，通过NaOH或者氨水随时进行调控。在pH值不再发生明显改变时，继续培养1 h，得到乳酸片球菌发酵液。

S5. 采用管式离心机，对上述乳酸片球菌发酵液进行浓缩，以300~600 L/h的速度，得到菌泥。

S6. 将本实施例喷雾干燥保护剂加水充分溶解，再加入上述菌泥，得到乳酸片球菌悬液。其中，菌泥、喷雾干燥保护剂、水的质量比为10：22：60。

S7. 将上述乳酸片球菌悬液通入喷雾干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥塔的进风温度为130℃，出风温度为60℃，乳酸片球菌悬液的进液速度为60 L/h，得到所需的乳酸片球菌制剂。

本实施例的乳酸片球菌制剂为粉状，经测试，其含菌量为1.8×10¹¹ cfu/g。

实施例3

本实施例提供了一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，按照重量份数计，其包括：

脱脂奶粉4份，蔗糖2份，海藻糖3份，谷氨酸钠1份，抗坏血酸钠2份、吐温-80 0.2份，明胶0.5份，黄原胶0.5份，以及阿拉伯胶0.2份。

本实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂，其制备方法包括以下步骤：

S1.将乳酸片球菌的甘油管通过划线接入到MRS固体的平板上，36℃下倒置培养48 h，然后挑取单菌落接入到MRS液体摇瓶中，36℃静置培养 18 h，然后将其稀释涂布到MRS平板，36℃倒置培养24 h，作为种子平板。

S2. 用接种环从上述种子平板上挑取单菌落接入到装有MRS培养基中的三角摇瓶中，30℃静置培养24h，作为一级种子摇瓶。按照8%的比例将一级种子药瓶的种子接入到装有MRS液体培养基的种子罐中，装液量为30 L，发酵温度30℃、搅拌转速100转/min，培养24h，作为二级种子罐。

S3. 在发酵罐中，加入发酵培养基，用NaOH或者氨水将pH调节为6.0~7.5之间，升温至105~121℃进行灭菌15 min。其中，按照重量份数计，发酵培养基包括：蔗糖30份，蛋白胨20份，酵母粉30份，玉米浆膏10份，葡萄糖20份，吐温80 1份，硫酸镁0.5份，硫酸锰0.5份，碳酸钙15份，以及水900份。

S4. 降温至30~45℃，按照8%的比例加入上述二级种子罐中的种子，在温度为30~40℃，时间为20 h，pH为5.5~6.5，压强为0.03~0.05 Mpa的条件下发酵，发酵过程中的pH值，通过NaOH或者氨水随时进行调控。在pH值不再发生明显改变时，继续培养1.5 h，得到乳酸片球菌发酵液。

S5. 采用蝶式离心机，对上述乳酸片球菌发酵液进行浓缩，浓缩比1:10，得到浓缩液。

S6. 将本实施例喷雾干燥保护剂加水充分溶解，再加入上述浓缩液，得到乳酸片球菌悬液。其中，浓缩液、喷雾干燥保护剂、水的质量比为20：8：40。

S7. 将上述乳酸片球菌悬液通入喷雾干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥塔的进风温度为150℃，出风温度为80℃，乳酸片球菌悬液的进液速度为50 L/h，得到所需的乳酸片球菌制剂。

本实施例的乳酸片球菌制剂为粉状，经测试，其含菌量为2.0×10¹¹ cfu/g。

实施例4

本实施例提供了一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，按照重量份数计，其包括：

脱脂奶粉2份，蔗糖3份，海藻糖2份，谷氨酸钠1.5份，抗坏血酸钠1.5份、吐温-80 0.3份，明胶0.6份，黄原胶0.6份，以及阿拉伯胶0.2份。

本实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂，其制备方法包括以下步骤：

S1.将乳酸片球菌的甘油管通过划线接入到MRS固体的平板上， 38℃下倒置培养24 h，然后挑取单菌落接入到MRS液体摇瓶中， 38℃静置培养 15 h，然后将其稀释涂布到MRS平板， 38℃倒置培养36 h，作为种子平板。

S2. 用接种环从上述种子平板上挑取单菌落接入到装有MRS培养基中的三角摇瓶中，37℃静置培养15 h，作为一级种子摇瓶。按照10%的比例将一级种子药瓶的种子接入到装有MRS液体培养基的种子罐中，装液量为40 L，发酵温度35~40℃、搅拌转速200转/min，培养12 h，作为二级种子罐。

S3. 在发酵罐中，加入发酵培养基，用NaOH或者氨水将pH调节为6.0~7.5之间，升温至110~121℃进行灭菌30min。其中，按照重量份数计，发酵培养基包括：蔗糖20份，蛋白胨10份，酵母粉40份，玉米浆膏20份，葡萄糖10份，硫酸镁0.5份，碳酸钙15份，以及水850份。

S4. 降温至30~40℃，按照10%的比例加入上述二级种子罐中的种子，在温度为30~40℃，时间为18 h，pH为5.5~6.5，压强为0.03~0.05 Mpa的条件下发酵，发酵过程中的pH值，通过NaOH或者氨水随时进行调控。在pH值不再发生明显改变时，继续培养2 h，得到乳酸片球菌发酵液。

S5. 采用蝶式离心机，对上述乳酸片球菌发酵液进行浓缩，浓缩比为1:8，最终得到浓缩液。

S6. 将本实施例喷雾干燥保护剂加水充分溶解，再加入上述浓缩液，得到乳酸片球菌悬液。其中，浓缩液、喷雾干燥保护剂、水的质量比为30：6：50。

S7. 将上述乳酸片球菌悬液通入喷雾干燥塔进行喷雾干燥，喷雾干燥塔的进风温度为140℃，出风温度为70℃，乳酸片球菌悬液的进液速度为45 L/h，得到所需的乳酸片球菌制剂。

本实施例的乳酸片球菌制剂为粉状，经测试，其含菌量为1.8×10¹¹ cfu/g。

试验例

采用实施例1~4所提供的乳酸片球菌制剂，分别对其稳定性、耐酸性和耐胆盐性进行测试，测试方法如下：

1、稳定性测试

将待测的乳酸片球菌制剂的喷粉装到自封袋中，在室温下放置12个月检测其活性。

2、耐酸性测试

取待测乳酸片球菌制剂的喷粉1g接入9ml的人工胃液中，充分溶解后，在37℃下作用2h，检测其活菌数。其中人工胃液制备：取稀盐酸16.4ml加水摇匀稀释至1000ml，用浓盐酸或10%的NaOH调整pH值为2.0，于121℃灭菌30min，在无菌室以1g/100ml比例加入胃蛋白酶。

3、耐胆盐测试

取待测乳酸片球菌制剂的喷粉1g接入9ml胆盐浓度为0.3%的人工肠液中充分溶解后，在37℃下作用2 h，然后检测其活菌数。其中人工肠液制备为：取KH₂PO₄ 6.8g，加蒸馏水500ml溶解，用0.4%（w/v）的NaOH溶液调节pH值至6.8，加水至1000ml，每100ml中加入0.3g猪胆盐、充分溶解后，115℃灭菌15min。

测试结果如表1所示。

表1 乳酸片球菌制剂性能测试结果

	稳定性	耐酸性	耐胆盐性
				实施例1	92%	71%	88%
实施例2	94%	77%	85%
				实施例3	91%	63%	89%
实施例4	96%	68%	92%

如表1所示，本发明实施例所提供的乳酸片球菌制剂在常温下放置1年，其收率仍然能够达到90%以上，具有较佳的稳定性。同时，骑在pH为2的人工胃液中作用2 h仍然具有60%以上的收率，耐酸性能优异。除此之外，在0.3 wt%浓度的猪胆盐下作用2 h，其收率仍然达到85%以上，可见其耐胆盐性能同样优异。

综上所述，本发明实施例提供了一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，其原料来源广泛，配比科学合理，能够在喷雾干燥过程中，对乳酸片球菌进行较佳的保护，提高乳酸片球菌的存活率。使得乳酸片球菌的喷雾干燥得以实现，从而实现乳酸片球菌制剂的高效生产。

本发明实施例还提供了一种乳酸片球菌制剂及其制备方法，该制备方法是将乳酸片球菌发酵液与上述喷雾干燥保护剂混合进行喷雾干燥。采用该制备方法，不仅生产周期短，生产效率高，得到的乳酸片球菌制剂还具备含菌量高、稳定性高的优点，适合进行大规模的工业化应用。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种乳酸片球菌的喷雾干燥保护剂，其特征在于，按重量份数计，包括：

脱脂奶粉1~5份，蔗糖1~3份，海藻糖1~5份，谷氨酸钠0.5~2份，抗坏血酸钠0.5~3份、吐温-80 0.1~0.5份，明胶0.1~1份，黄原胶0.1~1份，以及阿拉伯胶0.1~0.5份。

2.一种乳酸片球菌制剂的制备方法，其特征在于，包括：

将乳酸片球菌发酵液与权利要求1所述的喷雾干燥保护剂混合，制成乳酸片球菌悬液；

将所述乳酸片球菌悬液进行喷雾干燥，得到所述乳酸片球菌制剂。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，对所述乳酸片球菌悬液的喷雾干燥是在喷雾干燥塔中进行的，所述喷雾干燥塔的进风温度为130~170℃，出风温度为60~90℃，所述乳酸片球菌悬液的进液速度为30~60 L/h。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，先将所述乳酸片球菌发酵液离心浓缩成菌泥或浓缩液，再与所述喷雾干燥保护剂、水混合制成所述乳酸片球菌悬液；其中，所述菌泥含菌量为5.0×10¹¹~8.0×10¹¹ cfu/g；所述浓缩液的含菌量为1.0×10¹¹~2.0×10¹¹ cfu/ml。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，按照重量份数计，所述乳酸片球菌悬液由2~10份所述菌泥、4~22份所述喷雾干燥保护剂以及40~60份水混合而成。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，按照重量份数计，所述乳酸片球菌悬液由20~50份所述浓缩液、4~22份所述喷雾干燥保护剂以及20~40份水混合而成。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述乳酸片球菌发酵液是将所述乳酸片球菌的种子接种到发酵培养基中发酵得到的；其中，按照重量份数计，所述发酵培养基包括：

蔗糖20~40份，蛋白胨10~30份，酵母粉20~40份，玉米浆膏0~20份，葡萄糖10~30份，吐温80 0~2份，硫酸镁0~0.5份，硫酸锰0~0.5份，碳酸钙10~20份，以及水800~1000份。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述乳酸片球菌发酵液的发酵条件为：温度为30~40℃，时间为12~20 h，pH为5.5~6.5，压强为0.03~0.05Mpa。

9.一种乳酸片球菌制剂，其特征在于，由权利要求2~8任一项所述的乳酸片球菌制剂的制备方法制备得到。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述乳酸片球菌制剂的含菌量为1.2×10¹¹~2.5×10¹¹cfu/g。