CN108477381A - 一种饲用肠道益生菌剂及其生产方法 - Google Patents

一种饲用肠道益生菌剂及其生产方法 Download PDF

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赖水明
柒启恩
李炯明
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陈志敏
傅心锋
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Fujian Aonong Biological Technology Group Co Ltd
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Fujian Aonong Biological Technology Group Co Ltd
Zhangzhou Aonong Animal Husbandry Technology Co Ltd
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Abstract

本发明涉及一种饲用肠道益生菌剂及其生产方法,包括以下步骤:(1)制备高密度益生菌菌体发酵液;(2)将高密度益生菌菌体发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合,得到第一混合液;(3)将菌体包被和热保护剂加入步骤(2)的混合液中,搅拌,得到第二混合液;(4)使用喷雾干燥对第二混合液进行干燥处理,得到所述的饲用肠道益生菌剂。与现有技术相比,本发明生产的肠道益生菌固态粉剂包被粒径均匀、成囊性能良好、存活率高、稳定性好,生产成本低,便于储存和运输,货架期长,可以用于多种常用益生菌剂的生产;通过包被能够有效降低益生菌在经动物的口腔、食道和胃造成的活性损失。

Description

一种饲用肠道益生菌剂及其生产方法
技术领域
本发明涉及饲用益生菌剂生产领域,具体涉及一种饲用肠道益生菌剂及其生产方法。
背景技术
在动物的肠道中存在一个庞大的微生物菌群,各种菌群相互依存、相互制约,处于相对平衡状态,组成体内最大的微生态环境,成为维护动物健康的天然防线。健康动物肠道内的微生态处于平衡状态,有益微生物占据绝对多数,对整个生态系统起控制作用,一旦有益微生物种群受到破坏,失去优势地位,就会导致肠道微生态失衡,导致动物发病。
为了应对肠道微生态失衡,很多养殖业者在饲养过程中使用抗生素来预防和控制有害菌,但是抗生素的长期和大量使用带来的种种弊端也让抗生素越来越受到人们的质疑和抵触,现在很多国家已经禁止在禽畜养殖中使用抗生素。作为一种绿色的饲料添加剂,饲用益生菌剂是一种理想的抗生素替代品。
饲用益生菌剂是利用健康动物肠道内的有益微生物经特殊工艺制成的活菌制剂,可以补充正常微生物优势菌群的数量,调节失调的菌群,恢复优势种群,使失调的肠道微生态重新达到平衡,从而使动物的健康得到恢复。
益生菌剂一般为液态菌剂和固态粉剂两种形态:液态菌剂微生物活性高、代谢产物丰富,但是存在不耐储存和不便运输的缺点,限制了液态菌剂的应用;而固态粉剂通常又存在生产成本高、菌体分散不均匀及制备过程中因高温死亡率高的问题。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种饲用肠道益生菌剂及其生产方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现:
一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,包括以下步骤:
(1)制备高密度益生菌菌体发酵液;
(2)将高密度益生菌菌体发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合,得到第一混合液;
(3)将菌体包被和热保护剂加入步骤(2)的混合液中,搅拌,得到第二混合液;
(4)使用喷雾干燥对第二混合液进行干燥处理,得到所述的饲用肠道益生菌剂。
优选地,所述的益生菌为乳酸杆菌、粪链球菌、芽孢杆菌或双歧杆菌。
优选地,当所述的益生菌为乳酸杆菌时,高密度菌体发酵液中乳酸菌数>1×1010cfu/ml,当所述的益生菌为芽孢杆菌时,高密度菌体发酵液中芽孢杆菌芽孢数>1×1010cfu/ml。
优选地,所述的步骤(2)中,每1吨发酵液中使用微孔玉米淀粉50-100kg,微孔玉米淀粉粒径100目~120目,微孔直径1~10μm,且微孔容积占淀粉颗粒体积的50%以上,搅拌混合时间为15~30min。
优选直接将微孔玉米淀粉投入高密度益生菌菌体发酵液中,这样能够提高吸附效果。
微孔玉米淀粉能够有效吸附益生菌菌体,包被和热保护剂材料包裹微孔玉米淀粉形成微胶囊结构,提高了包被率,从而减少热对菌体的损伤,提高菌体存活率。
优选地,所述的步骤(3)中菌体包被和热保护剂为乳糖、海藻糖、蔗糖、阿拉伯胶、黄原胶、瓜尔豆胶、脱脂奶粉、β-环糊精、谷氨酸钠、甘油和吐温80中的任四种或更多种。
优选地,所述的菌体包被和热保护剂由以下重量百分比含量的组分组成:海藻糖20%、阿拉伯胶25%、β-环糊精50%及谷氨酸钠5%。
阿拉伯胶遇到吸附益生菌菌体的微孔玉米淀粉颗粒会形成包裹,继而包裹住菌体;海藻糖和谷氨酸钠能帮助益生菌菌体对抗高温、快速脱水和动物消化道等极端环境以保持菌体的生物活性;β-环糊精对混合液体的均匀性和稳定性有重要贡献,还对喷雾干燥后干粉菌剂颗粒的均匀性、储存期的抗分解性和防潮性、饲喂时的增溶和缓释等有重要作用。正是由于菌体包被和热保护剂各组分之间的协同作用,最大限度减少了喷雾干燥过程的热和快速脱水对菌体的损害,又提高了菌剂在动物肠道中的存活率。
优选地,所述的步骤(3)中每1吨发酵液中使用菌体包被和热保护剂20-50kg,搅拌混合时间为8~12min。
优选地,所述的喷雾干燥采用常州力马干燥科技有限公司的LPG-100型高速离心喷雾干燥机,喷雾干燥的条件为进风温度125-135℃,进料流量为100-150kg/h,出风温度60-70℃。
上述工艺条件范围内,干燥出粉均匀流畅,出粉温度低,且基本无沾壁现象,最大限度兼顾了菌体存活率和干燥效率。
一种饲用肠道益生菌剂,该饲用肠道益生菌剂采用所述的方法制备得到。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
(1)生产的肠道益生菌固态粉剂包被粒径均匀、成囊性能良好、存活率高、稳定性好,生产成本低,便于储存和运输,货架期长,可以用于多种常用益生菌剂(如乳酸杆菌、粪链球菌、芽孢杆菌、双歧杆菌等)的生产。
(2)本发明中益生菌剂的包被能够有效降低益生菌在经动物的口腔、食道和胃造成的活性损失。
附图说明
图1为实施例2制备的枯草芽孢杆菌菌剂的显微照片。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。
本发明中使用到的喷雾干燥设备为常州力马干燥科技有限公司的LPG-100型高速离心喷雾干燥机。
实施例1
一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,包括以下步骤:
(1)制备高密度益生菌菌体发酵液,益生菌可以是乳酸杆菌、粪链球菌、芽孢杆菌、双歧杆菌等;
(2)将高密度益生菌菌体发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合,得到第一混合液;
(3)将菌体包被和热保护剂加入步骤(2)的混合液中,搅拌,得到第二混合液,菌体包被和热保护剂为乳糖、海藻糖、蔗糖、阿拉伯胶、黄原胶、瓜尔豆胶、脱脂奶粉、β-环糊精、谷氨酸钠、甘油、吐温80中的任四种或更多种;
(4)使用喷雾干燥对第二混合液进行干燥处理,得到所述的饲用肠道益生菌剂。
具体地:
本实施例的益生菌为乳酸杆菌,乳酸杆菌菌种为粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)CICC 20417,购于中国工业微生物菌种保藏管理中心。
(a)发酵菌液的制备,使用MRS液体培养基和数控发酵罐生产高密度粪肠球菌发酵液(粪肠球菌菌数>1×1010cfu/ml)。
(b)将粪肠球菌发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合20min,每1吨发酵液中使用微孔玉米淀粉50kg。
(c)每1吨粪肠球菌发酵液中使用菌体包被和热保护剂组成如下:麦芽糊精20kg,乳糖10kg、黄原胶1.5kg、脱脂奶粉2kg、β-环糊精2kg、谷氨酸钠2.5kg、甘油2kg、吐温801kg。
(d)将步骤(c)中菌体包被和热保护剂混合均匀后放入2的混合液中搅拌混合10min。
(e)使用喷雾干燥对步骤(d)的混合液进行干燥处理:进风温度125℃,进料流量为100kg/h,出风温度65℃,收集得到益生菌干粉制剂,即为饲用肠道益生菌剂。
本实施例制备的粪肠球菌菌剂,含水量为7.2%,对粪肠球菌的包埋率可达88%,活菌数达5.51×1010cfu/g,菌体存活率为60%以上,存放30天活菌数下降为3.37×1010cfu/g,具有很好的存储稳定性。
实施例2
本实施例选用芽孢杆菌菌种为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC 04396,购于中国农业微生物菌种保藏管理中心。
本实施例的饲用肠道益生菌剂的生产方法,包括以下步骤:
(a)发酵菌液的制备,使用牛肉膏蛋白胨液体培养基和数控发酵罐生产高密度枯草芽孢杆菌发酵液(枯草芽孢杆菌芽孢数>1×1010cfu/ml)。
(b)将枯草芽孢杆菌发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合20min,每1吨发酵液中使用微孔玉米淀粉60kg。
(c)每1吨粪枯草芽孢杆菌发酵液中使用菌体包被和热保护剂组成为:麦芽糊精25kg,海藻糖10kg、阿拉伯胶1.5kg、脱脂奶粉5kg、β-环糊精3kg、谷氨酸钠2kg、甘油1kg、吐温80 2kg。
(d)将步骤(c)中菌体包被和热保护剂混合均匀后放入2的混合液中搅拌混合10min。
(e)使用喷雾干燥对步骤(d)的混合液进行干燥处理:进风温度135℃,进料流量为150kg/h,出风温度60℃,收集得到益生菌干粉制剂。
(f)本实施例制备的枯草芽孢杆菌菌剂的显微图像如图1(a)和图1(b)所示,可见包被粒径均匀,粒径为0.20~0.30mm,成囊性能良好,包被率高。
(g)通过模拟人工肠胃环境和耐酸性实验,本发明中的包被和保护剂对枯草芽孢杆菌菌体有较好保护作用。
实施例3
本实施例与实施例1基本相同,不同之处在于,本实施例的步骤(b)中将粪肠球菌发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合30min,每1吨发酵液中使用微孔玉米淀粉100kg。
实施例4
本实施例与实施例1基本相同,不同之处在于,本实施例的步骤(b)中将粪肠球菌发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合15min,每1吨发酵液中使用微孔玉米淀粉50kg。
实施例5
本实施例与实施例1基本相同,不同之处在于,本实施例的步骤(c)中每1吨发酵液中使用菌体包被和热保护剂20kg,步骤(d)搅拌混合时间为8min。
实施例6
本实施例与实施例1基本相同,不同之处在于,本实施例的步骤(c)中每1吨发酵液中使用菌体包被和热保护剂50kg,步骤(d)搅拌混合时间为12min。
实施例7
本实施例与实施例1基本相同,不同之处在于,本实施例的步骤(e)喷雾干燥的条件为进风温度130℃,进料流量为130kg/h,出风温度70℃。
实施例8
本实施例与实施例1基本相同,不同之处在于,本实施例中,菌体包被和热保护剂由以下重量百分比含量的组分组成:海藻糖20%、阿拉伯胶25%、β-环糊精50%及谷氨酸钠5%。本实施例制备的菌剂粒径均匀、成囊性能良好、存活率高、稳定性好。
上述对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改,并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此,本发明不限于上述实施例,本领域技术人员根据本发明的揭示,不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备高密度益生菌菌体发酵液;
(2)将高密度益生菌菌体发酵液与微孔玉米淀粉搅拌混合,得到第一混合液;
(3)将菌体包被和热保护剂加入步骤(2)的混合液中,搅拌,得到第二混合液;
(4)使用喷雾干燥对第二混合液进行干燥处理,得到所述的饲用肠道益生菌剂。
2.根据权利要求1所述的一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,所述的益生菌为乳酸杆菌、粪链球菌、芽孢杆菌或双歧杆菌。
3.根据权利要求2所述的一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,当所述的益生菌为乳酸杆菌时,高密度菌体发酵液中乳酸菌数>1×1010cfu/ml,当所述的益生菌为芽孢杆菌时,高密度菌体发酵液中芽孢杆菌芽孢数>1×1010cfu/ml。
4.根据权利要求1所述的一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,所述的步骤(2)中,每1吨发酵液中使用微孔玉米淀粉50-100kg,微孔玉米淀粉粒径100目~120目,微孔直径1~10μm,且微孔容积占淀粉颗粒体积的50%以上,搅拌混合时间为15~30min。
5.根据权利要求1所述的一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,所述的步骤(3)中菌体包被和热保护剂为乳糖、海藻糖、蔗糖、阿拉伯胶、黄原胶、瓜尔豆胶、脱脂奶粉、β-环糊精、谷氨酸钠、甘油和吐温80中的任四种或更多种。
6.根据权利要求5所述的一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,所述的菌体包被和热保护剂由以下重量百分比含量的组分组成:海藻糖20%、阿拉伯胶25%、β-环糊精50%及谷氨酸钠5%。
7.根据权利要求1所述的一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,所述的步骤(3)中每1吨发酵液中使用菌体包被和热保护剂20-50kg,搅拌混合时间为8~12min。
8.根据权利要求1所述的一种饲用肠道益生菌剂的生产方法,其特征在于,所述的喷雾干燥采用常州力马干燥科技有限公司的LPG-100型高速离心喷雾干燥机,喷雾干燥的条件为进风温度125-135℃,进料流量为100-150kg/h,出风温度60-70℃。
9.一种饲用肠道益生菌剂,其特征在于,该饲用肠道益生菌剂采用权利要求1~8任一所述的方法制备得到。
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