CN111676164A - 一种溶磷菌rp2及其发酵产物、菌剂与应用 - Google Patents

一种溶磷菌rp2及其发酵产物、菌剂与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111676164A
CN111676164A CN202010568288.8A CN202010568288A CN111676164A CN 111676164 A CN111676164 A CN 111676164A CN 202010568288 A CN202010568288 A CN 202010568288A CN 111676164 A CN111676164 A CN 111676164A
Authority
CN
China
Prior art keywords
phosphorus
fermentation product
bacterium
pseudomonas frederiksbergensis
growth
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010568288.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111676164B (zh
Inventor
焦如珍
韦宜慧
陈嘉琪
董玉红
厚凌宇
赵光宇
王超群
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Research Institute of Forestry of Chinese Academy of Forestry
Original Assignee
Research Institute of Forestry of Chinese Academy of Forestry
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Research Institute of Forestry of Chinese Academy of Forestry filed Critical Research Institute of Forestry of Chinese Academy of Forestry
Priority to CN202010568288.8A priority Critical patent/CN111676164B/zh
Publication of CN111676164A publication Critical patent/CN111676164A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111676164B publication Critical patent/CN111676164B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/38—Pseudomonas
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/27—Pseudomonas
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G3/00—Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
    • C05G3/80—Soil conditioners
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
    • C09K17/14—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing organic compounds only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2101/00—Agricultural use
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fertilizers (AREA)

Abstract

本发明涉及微生物学领域，具体公开了一种溶磷菌RP2及其发酵产物、菌剂与应用。本发明的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其保藏编号为CGMCC No.19865。本发明的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2具有溶磷、产铁载体、促进植物生长的作用，可改善土壤环境、促进磷肥利用率。将其用于植物幼苗，有促生效果，提高了株高、地径、根系生长量，尤其是可显著促进杉木苗木的生长。与化肥相比，溶磷微生物更环保生态，效果更持续，对于提高杉木苗木生长，进而提高造林成活率及造林后生长具有重要的价值。

Description

一种溶磷菌RP2及其发酵产物、菌剂与应用
技术领域
本发明涉及微生物学领域，具体地说，涉及一种溶磷菌RP2及其发酵产物、菌剂与应用。
背景技术
土壤中的磷大部分是难以利用的难溶性磷酸盐，可被植物直接吸收利用的水溶态磷含量低，土壤磷利用率通常只有10～15％，因此，磷常常成为限制杉木生产力的关键因素。目前磷肥主要为水溶性肥料，如过磷酸钙，重过磷酸钙，以及枸溶性磷肥如钙镁磷肥，以上肥料虽然能快速增加土壤磷含量，增加植物可利用磷，但施入的肥料利用率低，长期施用造成土壤板结、酸化、有害物质累积，营养元素和微生物种群结构严重失衡，土壤生态环境恶化。
溶磷微生物通过自身代谢作用，将土壤中的难溶性磷酸盐转化为植物可吸收利用的水溶性磷，可以提高肥料的利用率，还可以防止土壤板结，避免土壤酸化和有害物质的累积，具有安全、环保等优点。
杉木是一种速生用材树种，木材需求大。然而其常见生长地区淋溶强烈，土壤金属离子含量高，磷极易被固定，土壤磷利用率极低，严重制约了杉木人工林可持续发展。目前尚未有促进杉木生长的溶磷微生物及接种于杉木苗木的技术方法。因此，需要提供一种溶磷菌RP2及其发酵产物、菌剂与应用以解决上述问题。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种具有溶磷、产铁载体、促进植物生长作用的溶磷菌RP2及其发酵产物、菌剂与应用。
为了实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：
本发明的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
本发明的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2，其于2020年5月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称：CGMCC；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；邮编100101)，分类命名为Pseudomonasfrederiksbergensis，保藏号为CGMCC No.19865。
本发明的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2是从1年生杉木幼苗根部分离内生菌筛选得到，通过杉木幼苗盆栽试验，根据杉木幼苗株高、地径、根系生长量、活性来判断菌株的促生能力。
(1)筛选方法
a.菌株溶磷能力定量测定：选择菌液有效磷含量大于70mg·L-1的菌株。
b.菌株ACC脱氨酶活性测定：选择ACC脱氨酶活性大于0.5μmol·mg-1·h-1的菌株。
c.菌株产IAA能力测定：选择菌液中IAA含量大于15μg·mL-1的菌株。
d.菌株产铁载体测定：选择在CAS琼脂平板上产生黄色晕圈的菌株。
(2)盆栽试验
a.菌株扩大培养：将活化后的菌株接入牛肉膏蛋白胨培养基，制备种子液。将种子液接入牛肉膏蛋白胨液体培养基进行扩大培养。
b.接种杉木：扩大培养好的菌液用无菌水稀释，使用无菌注射器将稀释后的菌液通过1/2叶面喷施+1/2灌根的方式施入幼苗。90天后取样测定。
c.结果测定：测定幼苗株高、地径，计算生长量，测定根生物量及根活性，与对照进行对比。
进一步地，本发明提供上述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2的发酵产物。
本发明提供一种菌剂，其含有上述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2或所述的发酵产物。
优选地，所述菌剂为固体菌剂或液体菌剂。
本发明提供一种植物肥料，其含有上述溶磷菌(Pseudomonasfrederiksbergensis)RP2或所述的发酵产物。
优选地，所述植物为杉木。
本发明提供一种土壤生态环境调节剂，其含有上述溶磷菌(Pseudomonasfrederiksbergensis)RP2或所述的发酵产物。
该土壤生态环境调节剂可缓解长期施用磷肥造成的土壤板结、酸化、有害物质累积、营养元素和微生物种群结构失衡等土壤生态环境恶化问题。
本发明还提供一种上述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2或所述的发酵产物或所述的菌剂在如下任一方面的应用：
(1)在溶磷和/或产铁载体中的应用；
(2)在促进植物生长中的应用；优选地，所述植物为杉木；
(3)在提升磷肥利用率中的应用；
(4)在防止由施用所述磷肥引起的土壤板结、酸化、有害物质积累中的应用；
(5)在制备植物肥料和/或土壤生态环境调节剂中的应用。
在促进植物生长的应用中，优选地，所述应用的具体方式为：将所述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2、所述发酵产物或所述菌剂添加至所述植物的根系土壤中和/或喷施于所述植物的叶面。
优选地，将所述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2、所述发酵产物或所述菌剂稀释后，通过1/2叶面喷施+1/2灌根的方式施于植物幼苗。
本发明的有益效果至少在于：
本发明的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2具有溶磷、产铁载体、促进植物生长的作用，可改善土壤环境、促进磷肥利用率。将其用于植物幼苗，有促生效果，提高了株高、地径、根系生长量，尤其对于促生苗木生长有巨大潜力。与化肥相比，溶磷微生物更生态环保，对于提高苗木一级苗出圃率、提高造林成活率、利于造林后林木的生长具有重要的促进作用。
附图说明
图1为本发明实施例1中叶面喷施处理组(T2)的杉木幼苗栽培90天后的实验结果与CK组的实验结果对照照片。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
1、菌株分离、筛选
杉木幼苗冲洗干净后，将根部剪成2～3cm的小段，先在75％酒精中浸泡3min，再在6％次氯酸钠溶液中浸泡6min，无菌水冲洗7次，置于无菌研钵研磨成匀浆液，取0.05mL匀浆涂布于Pikovskaya(PVK)琼脂平板上，28℃培养5～7d，检查平板是否存在产生透明晕圈的菌落。挑取溶磷圈明显的菌落，用连续划线法进一步纯化。纯化后挑取单菌落接于斜面培养基，4℃保藏。
菌株溶磷能力定量测定：在250mL三角瓶中加入100mL PVK液体培养基(PVK培养基：葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.3g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，FeSO4·7H2O0.03g，MnSO4·H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 5.0g，CaCO3 1.0g，琼脂18g，蒸馏水补至1000mL，pH值7.0；磷酸钙灭菌后加入)，菌株经划线活化后接入摇瓶培养，用灭菌接种环刮取单菌落接入盛有200mL已冷却的上述灭菌培养液的摇瓶中，置于恒温摇床中28℃，180r/min培养5d(活菌数为5.3ⅹ108CFU/mL)。第5d测定菌液中有效磷含量，每个菌株3个重复，对照接入1ml经121℃灭菌处理的上述培养液，将培养物进行离心。取上清液用钼锑抗比色法测定培养液中的有效磷含量。溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2有效磷含量为109.20mg·L-1。
菌株ACC脱氨酶活性测定：使用ACC试剂盒(购自上海钦诚生物公司)测定菌株ACC脱氨酶活性，溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2 ACC脱氨酶活性为0.52μmol·mg-1·h-1。
菌株产IAA能力测定：使用IAA试剂盒(上海酶联生物科技有限公司)，溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2产IAA能力为15.64μg·mL-1。
菌株产铁载体测定：将溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2菌株接种于CAS琼脂平板，菌株周围产生黄色晕圈。产铁载体测定方法具体为：取出保存的菌株，刮取少量菌体接入LB培养基中，置于培养箱中28℃培养24h，挑取单菌落接入CAS平板培养基上，置于28℃培养箱48h，观察并记录菌落周围颜色的变化。CAS平板培养基：溶液A：60.5mgCAS，50mL蒸馏水，10mL氯化铁溶液(含1mM FeCl3·6H2O，10mM HCl)；溶液B：72.9mg HDTMA(十六烷基三甲基溴化铵)，40mL蒸馏水；溶液C：溶液A加入溶液B，混匀，121℃灭菌15min；2mL 1mM氯化钙溶液，2mL 1mM硫酸镁溶液，用生物缓冲液Pipes(sigma)调pH6.8～7.0。蒸馏水定容至1000ml，加入18g琼脂，121℃灭菌15min，温度降至60℃以下时，加入50mL溶液C，混合均匀后制作平板。铁载体圈与溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2菌落直径比值(D/d)为1.4。
2、菌株鉴定
16SrDNA序列测定：用水煮法提取各菌株DNA，用细菌通用引物27F(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示)和1492R(5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’，核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示)进行PCR扩增，扩增产物由华大基因进行测序。将测得的16SrDNA序列(核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示)在GenBank、EzTaxon、BIGSdb数据库中搜索，序列搜索结果显示RP2与Pseudomonasfrederiksbergensis同源，相似性高达99.61％。
3、接种菌液制备
将保藏的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上划线，挑取单菌落于牛肉膏蛋白胨液体培养基中进行摇瓶培养，28℃，180r/min培养24h，用未接种培养基将菌液调至OD600＝1制备得到种子液待用。按1％接种量将上述种子液接入牛肉膏蛋白胨液体培养基中，28℃，180r/min培养48h，待用。
4、接种杉木幼苗
接种设计见表1，接种菌液设置3个稀释倍数，分别为30倍、60倍、90倍，对照为自来水，共4个处理，每个处理16株，各5次重复。即每个处理苗木数量为16株×5＝80株；对照为等量自来水(CK)。试验合计：16株×5×4＝320株杉木幼苗，试验期间分别于8、9、10月中旬分别接种3次，每次每株接种30mL。接种方式为灌根、叶面喷施、灌根+叶面喷施。灌根采用注射器吸取稀释好的菌液，均匀注入幼苗四周，叶面喷施采用注射器吸取稀释后的菌液，均匀喷施于幼苗，灌根+叶面喷施接种量为灌根15mL，叶面喷施15mL。对照(CK)为自来水灌根施用，用量同上(每次每株30mL)。期间根据基质干湿情况采用自动喷灌设备进行灌溉，定期人工除草。2019年11月15日结束盆栽试验，进行样本采集和指标测定。
表1
Figure BDA0002548318410000071
5、接种效果测定
接种90d后，叶面喷施处理组(T2)与CK组的实验结果对比照片参见图1。
接种90d后进行各数据测定。各处理组的实验结果见表2-表8。各表中，各处理间字母不同代表差异显著。
杉木生长指标的测定(结果参见表2、表6)：
试验期间，每组开始接种前用直尺测量各幼苗株高，用游标卡尺测量幼苗地径。试验结束后，用清水将幼苗洗净并去除表面杂质，滤纸吸干水分后按根、茎、叶分别装入信封袋，在105℃下杀青0.5h，70℃烘干至恒重后称重并记录各部分的生物量。苗木质量指数计算公式为QI＝苗木总生物量(g)/[(苗高cm/地径mm)+(茎干重g/根干重g)]。
杉木根系指标的测定(结果参见表5)：
剪取整株根系，用清水洗净后迅速用根系扫描仪进行扫描，通过WinRHIZO(根系分析系统)分析计算幼苗根长、根表面积、根体积、根直径、根尖数。根系活力采用TTC(氯化三苯基四氮唑)法测定。
杉木叶片养分含量的测定(结果参见表4)：
将烘干的杉木叶片样品粉碎过筛后，用凯氏定氮仪2300Kjeltec(FOSS，瑞典)测定叶片全氮含量。
磷、钾、镁、铁元素全量测定：样品经HNO3消煮后，采用电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)测定。
杉木叶片生理指标的测定(结果参见表3)：
样品准备：将杉木植株叶片洗净后用滤纸吸干，用锡箔纸包好后用置于液氮中30s，然后在低温条件下将叶片制备成粉末，放入-80℃冰箱待测。
采用丙酮-乙醇浸提法测定叶绿素含量，考马斯亮蓝法测定叶片可溶性蛋白含量，蒽酮比色法测定叶片可溶性糖含量。硝酸还原酶活性(NR)采用采用双抗体夹心法测定，测定试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。
基质养分测定(结果参见表7)：
全氮采用凯氏定氮法测定，用2300Kjeltec分析仪(FOSS，瑞典)进行分析。磷、钾元素全量测定：样品经HNO3消煮后，采用电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)测定。有效磷、速效钾测定：样品经NaHCO3浸提后用电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)测定。
基质酶活性的测定(结果参见表8)：
脲酶、纤维素酶、蔗糖酶、脱氢酶、酸性磷酸酶、硝酸还原酶均采用双抗体夹心法测定，测定试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。
表2不同施用方式杉木苗株高、地径增长量
Figure BDA0002548318410000081
表3不同施用方式杉木苗部分生理指标
Figure BDA0002548318410000091
表4不同施用方式杉木苗叶片养分含量
Figure BDA0002548318410000092
表5不同施用方式杉木苗根系形态及活力
Figure BDA0002548318410000093
表6不同施用方式杉木苗生物量和苗木质量
Figure BDA0002548318410000094
表7不同施用方式基质养分含量
Figure BDA0002548318410000095
表8不同施用方式基质酶活性
Figure BDA0002548318410000101
由上述各表数据可知，溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2对杉木有较好的促生效果，并具有较强的改善土壤性质，提高土壤质量的作用。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
序列表
<110> 中国林业科学研究院林业研究所
<120> 一种溶磷菌RP2及其发酵产物、菌剂与应用
<130> KHP191116819.7
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1299
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gtgtgacggg cggtgtgtac aaggcccggg aacgtattca ccgcgacatt ctgattcgcg 60
attactagcg attccgactt cacgcagtcg agttgcagac tgcgatccgg actacgatcg 120
gttttatggg attagctcca cctcgcggct tggcaaccct ctgtaccgac cattgtagca 180
cgtgtgtagc ccaggccgta agggccatga tgacttgacg tcatccccac cttcctccgg 240
tttgtcaccg gcagtctcct tagagtgccc accattacgt gctggtaact aaggacaagg 300
gttgcgctcg ttacgggact taacccaaca tctcacgaca cgagctgacg acagccatgc 360
agcacctgtc tcaatgttcc cgaaggcacc aatccatctc tggaaagttc attggatgtc 420
aaggcctggt aaggttcttc gcgttgcttc gaattaaacc acatgctcca ccgcttgtgc 480
gggcccccgt caattcattt gagttttaac cttgcggccg tactccccag gcggtcaact 540
taatgcgtta gctgcgccac taagagctca aggctcccaa cggctagttg acatcgttta 600
cggcgtggac taccagggta tctaatcctg tttgctcccc acgctttcgc acctcagtgt 660
cagtatcagt ccaggtggtc gccttcgcca ctggtgttcc ttcctatatc tacgcatttc 720
accgctacac aggaaattcc accaccctct accatactct agctcgacag ttttgaatgc 780
agttcccagg ttgagcccgg ggatttcaca tccaacttaa cgaaccacct acgcgcgctt 840
tacgcccagt aattccgatt aacgcttgca ccctctgtat taccgcggct gctggcacag 900
agttagccgg tgcttattct gtcggtaacg tcaaaacaat tacgtattag gtaactgccc 960
ttcctcccaa cttaaagtgc tttacaatcc gaagaccttc ttcacacacg cggcatggct 1020
ggatcaggct ttcgcccatt gtccaatatt ccccactgct gcctcccgta ggagtctgga 1080
ccgtgtctca gttccagtgt gactgatcat cctctcagac cagttacgga tcgtcgcctt 1140
ggtgagccat tacctcacca actagctaat ccgacctagg ctcatctgat agcgcaaggc 1200
ccgaaggtcc cctgctttct cccgtaggac gtatgcggta ttagcgttcg tttccgaacg 1260
ttatccccca ctaccaggca gattcctagg cattactca 1299
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
agagtttgat cctggctcag 20
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
ggttaccttg ttacgactt 19

Claims (10)

1.溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2，其特征在于，所述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2，其特征在于，所述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2的保藏编号为CGMCC No.19865。
3.权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2的发酵产物。
4.一种菌剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonasfrederiksbergensis)RP2或权利要求3所述的发酵产物。
5.一种植物肥料，其特征在于，含有权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonasfrederiksbergensis)RP2或权利要求3所述的发酵产物。
6.一种土壤生态环境调节剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2或权利要求3所述的发酵产物。
7.权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2或权利要求3所述的发酵产物或权利要求4所述的菌剂在溶磷和/或产铁载体中的应用。
8.权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2或权利要求3所述的发酵产物或权利要求4所述的菌剂在促进植物生长中的应用；
优选地，所述应用的具体方式为：将所述溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2、所述发酵产物或所述菌剂添加至所述植物的根系土壤中和/或喷施于所述植物的叶面。
9.权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2或权利要求3所述的发酵产物或权利要求4所述的菌剂在提升磷肥利用率中的应用；
和/或，在防止由施用所述磷肥引起的土壤板结、酸化、有害物质积累中的应用。
10.权利要求1或2所述的溶磷菌(Pseudomonas frederiksbergensis)RP2或权利要求3所述的发酵产物或权利要求4所述的菌剂在制备植物肥料和/或土壤生态环境调节剂中的应用。
CN202010568288.8A 2020-06-19 2020-06-19 一种溶磷菌rp2及其发酵产物、菌剂与应用 Active CN111676164B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010568288.8A CN111676164B (zh) 2020-06-19 2020-06-19 一种溶磷菌rp2及其发酵产物、菌剂与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010568288.8A CN111676164B (zh) 2020-06-19 2020-06-19 一种溶磷菌rp2及其发酵产物、菌剂与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111676164A true CN111676164A (zh) 2020-09-18
CN111676164B CN111676164B (zh) 2022-05-20

Family

ID=72436778

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010568288.8A Active CN111676164B (zh) 2020-06-19 2020-06-19 一种溶磷菌rp2及其发酵产物、菌剂与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111676164B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114164140A (zh) * 2021-10-28 2022-03-11 中国林业科学研究院华北林业实验中心 一株高效溶磷菌mqr6及其发酵产物与应用
CN115058365A (zh) * 2022-06-30 2022-09-16 南京林业大学 一株从薄壳山核桃人工林根际土中分离的假单胞菌及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105062910A (zh) * 2015-07-16 2015-11-18 南京林业大学 一株杨树根际解磷细菌Pseudomonas frederiksbergensis JW-SD2及其应用
CN106119148A (zh) * 2016-06-07 2016-11-16 江苏联海生物科技有限公司 一株假单胞菌及其应用
CN107586743A (zh) * 2017-10-20 2018-01-16 广西壮族自治区林业科学研究院 一株林木根际高效溶磷巨大芽胞杆菌及应用
CN108841751A (zh) * 2018-07-05 2018-11-20 滨州学院 一种耐盐碱溶磷细菌菌株及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105062910A (zh) * 2015-07-16 2015-11-18 南京林业大学 一株杨树根际解磷细菌Pseudomonas frederiksbergensis JW-SD2及其应用
CN106119148A (zh) * 2016-06-07 2016-11-16 江苏联海生物科技有限公司 一株假单胞菌及其应用
CN107586743A (zh) * 2017-10-20 2018-01-16 广西壮族自治区林业科学研究院 一株林木根际高效溶磷巨大芽胞杆菌及应用
CN108841751A (zh) * 2018-07-05 2018-11-20 滨州学院 一种耐盐碱溶磷细菌菌株及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
QINGWEI ZENG ET AL: "Identification and characterization of the rhizosphere phosphate-solubilizing bacterium Pseudomonas frederiksbergensis JW-SD2 and its plant growth-promoting effects on poplar seedlings", 《ANNALS OF MICROBIOLOGY》 *
无: "Pseudomonas sp. strain GGS10 16S ribosomal RNA gene, partial sequence", 《NCBI》 *
曾庆伟等: "1株Pseudomonas frederiksbergensis JW-SD2的解磷特性及解磷条件研究", 《微生物学杂志》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114164140A (zh) * 2021-10-28 2022-03-11 中国林业科学研究院华北林业实验中心 一株高效溶磷菌mqr6及其发酵产物与应用
CN114164140B (zh) * 2021-10-28 2023-12-12 中国林业科学研究院华北林业实验中心 一株高效溶磷菌mqr6及其发酵产物与应用
CN115058365A (zh) * 2022-06-30 2022-09-16 南京林业大学 一株从薄壳山核桃人工林根际土中分离的假单胞菌及其应用
CN115058365B (zh) * 2022-06-30 2023-05-05 南京林业大学 一株从薄壳山核桃人工林根际土中分离的假单胞菌及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN111676164B (zh) 2022-05-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107099467B (zh) 一株铜绿假单胞菌xcs007及其在防治烟草黑胫病中的应用
CN112980728B (zh) 一株耐盐碱解硅磷钾的内生弯曲芽孢杆菌及其应用
CN110669696A (zh) 一种解磷菌及其提取方法
CN111676164B (zh) 一种溶磷菌rp2及其发酵产物、菌剂与应用
CN115011510A (zh) 一株耐盐促生的嗜麦芽寡养单胞菌、其微生物菌剂及其应用
CN107557313B (zh) 一种钝化农田镉污染及促水稻增产的复合调理剂
CN116515716B (zh) 屎鞘氨醇杆菌及其应用
CN117106614B (zh) 一株根际细菌青岛假单胞菌yim b08402和其微生物菌剂及应用
CN111662846B (zh) 一种溶磷菌p5及其发酵产物、菌剂与应用
CN114752538B (zh) 具有土壤改良功能的油茶内生放线菌及其应用
CN108130303B (zh) 一株沃氏食酸菌tcp2011036及其应用
CN114806931B (zh) 贝莱斯芽孢杆菌yq-1-8及其应用
CN111718874B (zh) 一种溶磷菌rp22及其发酵产物、菌剂与应用
CN110699279A (zh) 一种无色杆菌及其在改善花生铁营养中的应用
CN114164140B (zh) 一株高效溶磷菌mqr6及其发酵产物与应用
CN113652382B (zh) 一种用于防治花生白绢病的贝莱斯芽孢杆菌、微生物菌剂、微生物肥料及其应用
CN115960766A (zh) 一种防治青枯病的微生物及其应用
CN112280714B (zh) 一株铜绿假单胞菌8-7及其应用
CN114921362A (zh) 具有溶解难溶性磷和促生长功能的油茶内生放线菌及其应用
CN111004727B (zh) 一株在高盐环境下增加木麻黄生物量的内生真菌z1
CN114231425A (zh) 一株溶磷解钾菌黑曲霉z8及应用
CN116590195B (zh) 假黄单胞菌、微生物制剂以及它们的应用
CN114317371B (zh) 一株稻瘟病生防促生菌及其应用
CN117535171B (zh) 盐胁迫诱导大豆招募的剑菌Ensifer sp.GMS14及其应用
CN116676227B (zh) 白色伯克霍尔德氏菌、菌剂及其应用以及促进植物生长的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant