CN111544443A - 一种预防或治疗心肌病的药物组合 - Google Patents

一种预防或治疗心肌病的药物组合 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种预防或治疗心肌病的药物组合，其中，菝葜皂苷在预防或治疗心肌病中的应用，所述菝葜皂苷在制备抗心肌纤维化增效剂中的应用，所述菝葜皂苷与抗心肌纤维化活性的化合物的联合应用，所述抗心肌纤维化活性的化合物为虎杖苷；一种预防或治疗心肌病的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐，其包括，虎杖苷和菝葜皂苷，所述虎杖苷和菝葜皂苷的重量比为1:(0.5‑2)。本发明研究表明菝葜皂苷与虎杖苷联合使用处理TGF‑β1诱导的乳大鼠心肌成纤维细胞(CFB)增殖和胶原合成的影响，在较低作用浓度，菝葜皂苷对虎杖苷的保护CFB细胞损伤呈现明显的增效作用。

Description

一种预防或治疗心肌病的药物组合
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种预防或治疗心肌病的药物组合，具体涉及菝葜皂苷在制备抗心肌纤维化增效剂中的应用，菝葜皂苷作为抗心肌纤维化增效剂与抗心肌纤维化药物联合使用，形成协同抗心肌纤维化的药效，可用于制备预防或治疗心肌病的药物。
背景技术
心肌纤维化是指心肌正常组织结构中出现的以细胞增殖、细胞外基质过度沉积为主要表现的疾病。近年来大量研究表明，心肌纤维化与许多心脏疾病有密切关系，如心房纤颤、心肌梗死、慢性心力衰竭、风湿性心瓣膜病等。心肌纤维化是多种心脏疾病发展至一定阶段具有的共同病理改变，也是引起心室重塑的关键原因，其主要病理表现有心肌僵硬度增加，心肌收缩力下降，冠脉血流储备降低，甚至引起恶性心律失常和猝死。目前临床尚缺乏疗效确切、可靠、特异性的抗心肌纤维化药物。
我国学者对中药抗纤维化作用已进行了大量研究，证明多种中药在体外及动物实验中均有明显的抗心肌纤维化作用。临床观察亦取得可喜的苗头，展示了天然药物用于心肌纤维化治疗的巨大潜力。
虎杖苷(3,4’,5-trihydroxystibene-3-β-mono-D-glucoside)，是一种单晶化合物，主要活性成分来自蓼科植物虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc)的根茎和根，具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用，可有效地用于治疗心脏病，糖尿病，脑缺血，脂肪性肝炎，肾损伤和各种癌症。现代药理研究表明虎杖苷也具有强烈的心肌损伤保护和抗心肌纤维化活性。
其结构式如下：
Figure BDA0002540782620000021
文献Steroidal saponins from the roots of Smilax sp.：Structure andbioactivity.(Victoria L.Challinor et al.Steroids.77(2012)504-511)报道了从菝葜属植物中提取纯化得到菝葜皂苷，并对其抗肿瘤细胞活性进行了研究。目前尚无菝葜皂苷预防或治疗心肌疾病的报道，也没有菝葜皂苷与其它活性成分联用预防或治疗心脏疾病的报道。其结构式如下：
Figure BDA0002540782620000022
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述的技术缺陷，提出了本发明。本发明的目的是提供菝葜皂苷在制备抗心肌纤维化增效剂中的应用以及一种预防或治疗心脏疾病药物组合物，更进一步的是将虎杖苷和菝葜皂苷形成药物组合物，用于制备高效的预防或治疗心肌病药物。
因此，作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种预防或治疗心肌病的药物组合。
为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：菝葜皂苷在预防或治疗心肌病中的应用。
作为本发明所述的应用的优选方案，其中：所述菝葜皂苷在制备抗心肌纤维化增效剂中的应用。
作为本发明所述的应用的优选方案，其中：所述菝葜皂苷与抗心肌纤维化活性的化合物的联合应用。
作为本发明所述的应用的优选方案，其中：所述抗心肌纤维化活性的化合物为虎杖苷。
作为本发明的另一方面，本发明提供一种预防或治疗心肌病的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐，其包括，虎杖苷和菝葜皂苷。
作为本发明所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐的优选方案，其中：其特征在于：所述虎杖苷和菝葜皂苷的重量比为1:(0.5-2)。
作为本发明所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐的优选方案，其中：所述虎杖苷和菝葜皂苷的重量比为1:1。
作为本发明所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐的优选方案，其中：所述心肌病为与心肌纤维化有关的疾病。
作为本发明所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐的优选方案，其中：所述心肌病包括心房纤颤、心肌梗死、慢性心力衰竭、风湿性心瓣膜病用的一种或几种。
本发明的有益效果：
本发明研究表明菝葜皂苷与虎杖苷联合使用处理TGF-β1诱导的乳大鼠心肌成纤维细胞(CFB)增殖和胶原合成的影响，在较低作用浓度，菝葜皂苷对虎杖苷的保护CFB细胞损伤呈现明显的增效作用。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
本发明提供了菝葜皂苷在制备抗心肌纤维化增效剂中的应用，本发明所述的应用，菝葜皂苷可作为抗心肌纤维化增效剂与抗心肌纤维化活性的化合物联合使用，形成协同抗心肌纤维化的药效。所述抗心肌纤维化药物为虎杖苷。
本发明的另一目的在于提供一种预防或治疗心肌病的药物组合物，包括虎杖苷和菝葜皂苷。
优选的，所述二虎杖苷和菝葜皂苷的重量比为1:0.5-2，更优选1：1。
优选的，所述心肌病为与心肌纤维化有关的疾病。进一步的，所述与心肌纤维化有关的疾病为心房纤颤、心肌梗死、慢性心力衰竭、风湿性心瓣膜病等。
本发明所述的药物组合物适用于心房纤颤、心肌梗死、慢性心力衰竭、风湿性心瓣膜病和心肌纤维化，特别适用于心肌纤维化的预防和治疗。
本发明所述的药物组合物还含有药学上可接受的辅料。所述药物组合物通过口服或非口服途径给药。如通过皮下注射，肌肉注射，静脉注射，口服，直肠给药，阴道给药，鼻腔给药，透皮给药等。
本发明研究表明菝葜皂苷与虎杖苷联合使用处理TGF-β1诱导的乳大鼠心肌成纤维细胞(CFB)增殖和胶原合成的影响，在较低作用浓度，菝葜皂苷对虎杖苷的保护CFB细胞损伤呈现明显的增效作用。
在本实施例中，菝葜皂苷参照文献Steroidal saponins from the roots ofSmilax sp.:Structure and bioactivity.(Victoria L.Challinor et al.Steroids.77(2012)504-511)公开的方法提取、纯化制备得到，虎杖苷购于南京狄尔格医药科技有限公司。
实施例1
本发明分别考察了虎杖苷与菝葜皂苷对TGF-β1诱导乳大鼠心肌成纤维细胞(CFB)的单一的保护作用。分为空白对照组，TGF-β1组(5μg/L)，虎杖苷低剂量组(10mg/L PD)、中剂量组(20mg/L PD)和高剂量组(40mg/L PD)，菝葜皂苷低剂量组(10mg/L Par)、中剂量组(20mg/L Par)和高剂量组(40mg/L Par)。单药处理24h后采用BrdU ELISA法检测细胞增殖活性和羟脯氨酸法检测心肌胶原含量(六次独立实验，mean±SD)
表1虎杖苷和菝葜皂苷对TGF-β1诱导CFB细胞增殖的影响
分组 吸收度(A)
对照组 0.256±0.0423
TGF-β1组 0.617±0.0535**
TGF-β1+10mg/L PD组 0.596±0.0586
TGF-β1+20mg/L PD组 0.534±0.0563<sup>#</sup>
TGF-β1+40mg/L PD组 0.405±0.0461<sup>##</sup>
TGF-β1+10mg/L Par组 0.621±0.0725
TGF-β1+20mg/L Par组 0.613±0.0518
TGF-β1+40mg/L Par组 0.610±0.0539
**与对照组组比P<0.01；#与TGF-β1模型组比P<0.05；##与TGF-β1模型组比P<0.01。P<0.05即有显著差异、P<0.01即有非常显著差异。
结果如表1所示。虎杖苷单一用药对TGF-β1诱导CFB细胞具有明显的抑制细胞增殖的作用，随虎杖苷剂量的增加保护作用增强。菝葜皂苷单一用药对TGF-β1诱导CFB细胞增殖作用不明显，与模型组比较没有显著差异。
表2虎杖苷和菝葜皂苷对TGF-β1诱导CFB细胞胶原含量的影响
分组 胶原含量(mg/g)
对照组 0.531±0.0828
TGF-β1组 0.936±0.0961**
TGF-β1+10mg/L PD组 0.888±0.0742
TGF-β1+20mg/L PD组 0.819±0.0718<sup>#</sup>
TGF-β1+40mg/L PD组 0.697±0.0889<sup>##</sup>
TGF-β1+10mg/L Par组 0.945±0.0864
TGF-β1+20mg/L Par组 0.937±0.0958
TGF-β1+40mg/L Par组 0.926±0.0981
**与对照组组比P<0.01；#与TGF-β1模型组比P<0.05；##与TGF-β1模型组比P<0.01。P<0.05即有显著差异、P<0.01即有非常显著差异。
结果如表2所示。虎杖苷单一用药对TGF-β1诱导CFB细胞具有明显的抑制细胞胶原生成的作用，随虎杖苷剂量的增加此作用增强。菝葜皂苷单一用药对TGF-β1诱导CFB细胞胶原生成不明显，与模型组比较没有显著差异。
实施例2
本发明考察了虎杖苷与菝葜皂苷的组合物对TGF-β1诱导乳大鼠心肌成纤维细胞(CFB)的保护作用。分为空白对照组，TGF-β1组(5μg/L)，虎杖苷与菝葜皂苷组合物的低剂量组(20mg/L PD+10mg/L Par)、中剂量组(20mg/L PD+20mg/L Par)和高剂量组(20mg/L PD+40mg/L Par)。药物干预24h后采用BrdU ELISA法检测细胞增殖活性和羟脯氨酸法检测心肌胶原含量(六次独立实验，mean±SD)。
表3虎杖苷联合菝葜皂苷对TGF-β1诱导CFB细胞增殖的影响
分组 吸收度(A)
对照组 0.249±0.0468
TGF-β1组 0.621±0.0624**
TGF-β1+20mg/L PD+10mg/L Par组 0.489±0.0465<sup>#</sup>
TGF-β1+20mg/L PD+20mg/L Par组 0.385±0.0487<sup>##</sup>
TGF-β1+20mg/L PD+40mg/L Par组 0.359±0.0461<sup>##</sup>
**与对照组组比P<0.01；#与TGF-β1模型组比P<0.05；##与TGF-β1模型组比P<0.01。P<0.05即有显著差异、P<0.01即有非常显著差异。
结果如表3所示。虎杖苷与菝葜皂苷组合物对TGF-β1诱导CFB细胞增殖具有显著的抑制作用，增殖指标吸收度(A)显低于同等剂量下(20mg/L PD)单一的虎杖苷药物组。表明菝葜皂苷对虎杖苷的抑制CFB细胞增殖作用呈现明显的增效作用，且随着菝葜皂苷使用浓度的增加增效作用逐渐增强。
表4虎杖苷联合菝葜皂苷对TGF-β1诱导CFB细胞胶原含量的影响
分组 胶原含量(mg/g)
对照组 0.523±0.0526
TGF-β1组 0.942±0.0745**
TGF-β1+20mg/L PD+10mg/L Par组 0.751±0.0615<sup>#</sup>
TGF-β1+20mg/L PD+20mg/L Par组 0.665±0.0689<sup>##</sup>
TGF-β1+20mg/L PD+40mg/L Par组 0.619±0.0568<sup>##</sup>
**与对照组组比P<0.01；#与TGF-β1模型组比P<0.05；##与TGF-β1模型组比P<0.01。P<0.05即有显著差异、P<0.01即有非常显著差异。
结果如表4所示。虎杖苷与菝葜皂苷组合物对TGF-β1诱导CFB细胞具有明显的抑制细胞胶原生成的作用，胶原含量显低于同等剂量下(20mg/L PD)单一的虎杖苷药物组。表明菝葜皂苷对虎杖苷的抑制CFB细胞胶原生成呈现明显的增效作用，且随着菝葜皂苷使用浓度的增加增效作用逐渐增强。
实施例3
本发明考察了虎杖苷与菝葜皂苷的组合物对TGF-β1诱导乳大鼠心肌成纤维细胞(CFB)的毒性作用。分为空白对照组，TGF-β1组(5μg/L)，虎杖苷与菝葜皂苷组合物的低剂量组(20mg/L PD+10mg/L Par)、中剂量组(20mg/L PD+20mg/L Par)和高剂量组(20mg/L PD+40mg/L Par)。药物干预24h后用培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率为指标，判断CFB损伤程度，即可反映药物对CFB的细胞毒性作用(六次独立实验，mean±SD)。
表5虎杖苷联合菝葜皂苷对TGF-β1诱导CFB细胞毒性作用
分组 LDH释放率(％)
对照组 8.125±1.987
TGF-β1组 10.528±2.021
TGF-β1+20mg/L PD+10mg/L Par组 9.715±1.562
TGF-β1+20mg/L PD+20mg/L Par组 9.568±1.778
TGF-β1+20mg/L PD+40mg/L Par组 9.928±1.842
结果如表5所示。各组上清液中LDH释放率无显著性差异，提示该浓度范围内虎杖苷与菝葜皂苷组合物对CFB无毒性作用。这些现象说明菝葜皂苷对虎杖苷抑制细胞增殖和胶原生成的增效作用与细胞毒性或损伤无关。
本发明公开了菝葜皂苷在制备抗心肌纤维化增效剂中的应用。菝葜皂苷可以与虎杖苷化合物形成协同抗心肌纤维化的效果，对虎杖苷的抗心肌纤维化作用起到增效的效果。本发明还公开了一种预防或治疗心肌病的药物组合物，包括虎杖苷和菝葜皂苷，可以作为预防或治疗心肌病药物的活性成分，具有广泛的用途。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (9)

1.菝葜皂苷在预防或治疗心肌病中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述菝葜皂苷在制备抗心肌纤维化增效剂中的应用。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述菝葜皂苷与抗心肌纤维化活性的化合物的联合应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述抗心肌纤维化活性的化合物为虎杖苷。
5.一种预防或治疗心肌病的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐，其特征在于：包括，虎杖苷和菝葜皂苷。
6.如权利要求5所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐，其特征在于：所述虎杖苷和菝葜皂苷的重量比为1:(0.5-2)。
7.如权利要求6所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐，其特征在于：所述虎杖苷和菝葜皂苷的重量比为1:1。
8.如权利要求5～7任一所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐，其特征在于：所述心肌病为与心肌纤维化有关的疾病。
9.如权利要求8所述的药物组合物、异构体或其医学上可接受的盐，其特征在于：所述心肌病包括心房纤颤、心肌梗死、慢性心力衰竭、风湿性心瓣膜病用的一种或几种。
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