CN111537632A - 一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法 - Google Patents

一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111537632A
CN111537632A CN202010325793.XA CN202010325793A CN111537632A CN 111537632 A CN111537632 A CN 111537632A CN 202010325793 A CN202010325793 A CN 202010325793A CN 111537632 A CN111537632 A CN 111537632A
Authority
CN
China
Prior art keywords
carbamazepine
liquid chromatography
serum
solution
quality control
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010325793.XA
Other languages
English (en)
Inventor
盛蔚
丁沛瑜
王金玉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Suzhou Yaoming Zekang Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Suzhou Yaoming Zekang Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Suzhou Yaoming Zekang Biotechnology Co ltd filed Critical Suzhou Yaoming Zekang Biotechnology Co ltd
Priority to CN202010325793.XA priority Critical patent/CN111537632A/zh
Publication of CN111537632A publication Critical patent/CN111537632A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
    • G01N2030/324—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed speed, flow rate

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明涉及一种采用液相色谱‑质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，具体步骤包括卡马西平储备液的配制、校准品溶液的制备、质控品溶液的制备、待测样品的前处理、液相色谱‑质谱实验参数的设置后将处理后的待测血清样本按进样2μL进行液相色谱串联质谱分析，最后计算血清样本中卡马西平浓度。本发明中的标准品溶液和质控品溶液的基质使用动物血清代替人血清，降低了检测成本，且本发明中检测血清中卡马西平浓度的方法，准确、快速、特异性强。

Description

一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的 方法
技术领域
本发明涉及一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，属于分析化学技术领域。
背景技术
卡马西平(Carbamazepine)是一种高效的广谱抗癫痫药物，能够对多种癫痫如部分性发作、复杂部分性发作、简单部分性发作、继发性全身发作、全身性发作和强直-阵挛发作等症状具有疗效，同时对神经性疼痛、心律失常、预防及治疗躁狂抑郁症都有一定治疗作用。
卡马西平的血药浓度与用药剂量、临床疗效和副作用有直接的关系。卡马西平推荐的血浆浓度5到10微克/毫升。过量服用可能造成剧烈眩晕、嗜睡、呼吸不规则、颤抖，心跳异常、昏迷，严重时有致命的皮肤反应，包括中毒性表皮坏死松解症和史蒂文斯-约翰逊综合征等都在卡马西平治疗中有所报告。所以临床用药时需要对个体随时进行监测给药。
另外，卡马西平的代谢效率随个体的生理情况不同而不同。卡马西平血药浓度的检测结果可以作为个性化治疗方案的制定依据。
治疗药物监测(therapeutic drug monitoring,简称TDM)是指在临床进行药物治疗过程中，观察药物疗效的同时，定时采集患者的血液(有时采集尿液、唾液等液体)，测定其中的药物浓度，探讨药物的体内过程，以便根据患者的具体情况，以药动学和药效学基础理论为指导，借助先进的分析技术手段，并利用药代动力学原理和公式，使给药方案个体化，从而达到满意的疗效及避免发生毒副反应，同时也可以为药物过量中毒的诊断和处理提供有价值的实验室依据，将临床用药从传统的经验模式提高到比较科学的水平。
现有的血药浓度监测试剂盒中的校准品和质控品基质都为同源基质(即人血来源的全血、血清或血浆样本)。但人血的采集在世界范围内都是严格受控的，要经过严格的前期志愿者的招募、体检筛选；要符合伦理要求；要进行血液传染性病毒安全性检测。而且，《中华人民共和国献血法》第十一条规定，“无偿献血的血液必须用于临床，不得买卖。”以上原因造成无论TDM试剂盒生产或实验室自建方法TDM检测，获得国内人源基质都比较困难。而若从国外进口校准品、质控品成品，成本高、周期长，限制了TDM在国内的开展。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有马西平血液药物浓度检测过程中校准品和质控品的基质需要采用人源基质造成的检测受限的问题，提出了一种LC-MS法进行卡马西平TDM检测时使用动物血清替代人血清作为基质的检测方法。
本发明采用如下的技术方案：一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，具体步骤包括如下：
(1)卡马西平储备液的制备：取一定量的卡马西平，加甲醇溶解，制备得到卡马西平储备液；
(2)内标工作液：取一定量的D10-卡马西平，加80％甲醇溶解，制备得到内标工作液；
(3)取一定量的动物血清低温解冻，再平衡至室温备用；
(4)校准品溶液的制备：
取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平校准品溶液；
(5)质控品溶液的制备：
取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平质控品溶液；
(6)待测样品的前处理：
在室温条件下，分别准确吸取校准品溶液、质控品溶液、待测血清样本加入内标工作液，设置空白质控，经振荡混合后，离心取上清液，加入超纯水复溶，震荡混合后离心，封膜后为待测样品；
(7)设置液相色谱-质谱条件：
按照液相色谱条件和质谱条件进行液相色谱串联质谱参数的设置和优化；
(8)待测样品的检测：
经处理后的校准品溶液按照浓度由低到高顺序进行液相色谱串联质谱分析，将处理后的待测血清样本按进样量2μL进行液相色谱串联质谱分析；
(9)质量控制：对处理后的质控品溶液进行测定，若质控品溶液测定结果在理论值±15％范围内，则测定结果有效；质控品测定结果不在范围内，则测定结果无效，需重新定标再进行测定；
(10)根据校准品溶液浓度值、质控品溶液浓度值对其卡马西平峰面积与内标峰面积的比例，建立线性方程，最终计算得到血清样本中卡马西平的浓度。
进一步的，所述动物血清为小牛血清、新生牛血清、马血清、山羊血清、猪血清、狗血清或兔血清中的一种。
进一步的，所述校准品溶液的梯度浓度为每毫升分别含卡马西平0.5μg、1.0μg、3.0μg、10μg、15μg和20μg。
进一步的，所述质控品溶液的梯度浓度为1.2μg、8.0μg和18μg。
进一步的，所述空白质控包含2个复孔，在空白质控孔1内加入250μL80％的甲醇溶液；在空白质控孔2内加入250μL内标工作液。
进一步的，所述步骤(6)中离心条件为：温度为4℃，离心速度为4000rpm，离心时间为5min。
进一步的，所述步骤(7)中液相色谱条件为：色谱柱采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18，柱温为40℃。
进一步的，所述步骤(7)中液相色谱的流动相A为0.5％乙酸水溶液，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱的方式，流速为0.4mL/min。
进一步的，所述步骤(7)中质谱条件为：采用喷雾离子源(ESI)，正离子模式，毛细管电压为2.5kV，雾化压力为7.0Bar。
进一步的，所述步骤(7)中质谱条件为：去溶剂化温度为600℃，去溶剂化流速为1000L/Hr，锥孔流速为150L/Hr。
我国法律规定严格禁止人血液买卖，进口人血清须在政府部门进行申购人备案、风险评估、特殊物品进口审批、情况说明等一系列流程。不易获得、成本高、周期长等问题限制了人血清作为基质的方法应用。动物血清不存在以上问题，经过分析性能评估证明以动物血清作为校准品和质控品的基质，方法的灵敏度、线性、准确度、精密度和抗干扰能力良好，解决了现有马西平血液药物浓度检测过程中校准品和质控品的基质需要采用人源基质造成的检测受限的问题。
本发明的有益效果：本发明中的标准品溶液和质控品溶液的基质中使用动物血清代替人血清，极大的简化了实验用物料采购的法规程序复杂度，降低了检测成本，且本发明中检测血清中卡马西平浓度的方法，准确、快速、特异性强，具有较高的分离度和灵敏度，为临床上卡马西平的血药浓度监测提供了可靠的实验数据，更便于医生为患者及时提供准确的卡马西平给药方案。
附图说明
图1为小牛血清标曲检测结果-人血清标曲检测结果对比图。
图2为新生牛血清标曲检测结果-人血清标曲检测结果对比图。
图3为马血清标曲检测结果-人血清标曲检测结果对比图。
图4为山羊血清标曲检测结果-人血清标曲检测结果对比图。
图5为猪血清标曲检测结果-人血清标曲检测结果对比图。
图6为狗血清标曲检测结果-人血清标曲检测结果对比图。
图7为兔血清标曲检测结果-人血清标曲检测结果对比图。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明做进一步的说明。
本发明实施例中所用的马血清、狗血清、山羊血清、猪血清、兔血清外购于广州蕊特生物科技有限公司，新生牛血清外购于浙江天杭生物科技股份有限公司，小牛血清外购于上海源叶生物科技有限公司。
实施例：血清中卡马西平血药浓度的测定方法：
一、校准品溶液、质控品溶液的制备方法：
1.卡马西平储备液：取卡马西平10mg，精密称定，置10mL容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，混匀，制备成每毫升含卡马西平1.0mg的卡马西平储备液；
2.内标工作液：取D10-卡马西平甲醇溶液(100μg/mL)(Sigma)0.2mL，加甲醇-水(80：20，v:v)500mL，混匀，即得。
3.校准品溶液：
3.1.在动物血清中加入一定量的卡马西平储备液，制备成每毫升含卡马西平20μg的SC-H溶液和每毫升含卡马西平0.5μg的SC-L溶液。
3.2.将SC-H和SC-L溶液按不同比例混合，制备得到每毫升分别含卡马西平0.5μg、1.0μg、3.0μg、10μg、15μg和20μg的卡马西平校准品溶液(C1至C6)如表2所示。
4.质控品溶液：
4.1.在动物血清中加入一定量的卡马西平储备液，制备成每毫升含卡马西平20μg的CC-H溶液和每毫升含卡马西平0.5μg的CC-L溶液。
4.2.将CC-H和CC-L溶液按不同比例混合，制备得到每毫升分别含卡马西平1.2μg、8.0μg和18μg的卡马西平质控品溶液(LQC、MQC和HQC)如表2所示。
表1
Figure BDA0002463159880000041
表2
样本号 C1 C2 C3 C4 C5 C6 LQC MQC HQC
Cal-L(mL) 65 64.6 57.8 34 17 0 65.8 40.8 6.8
Cal-H(mL) 0 1.7 8.5 32.3 49.3 65 2.45 25.5 59.5
总体积 65 66.3 66.3 66.3 66.3 65 68.25 66.3 66.3
浓度(ug/mL) 0.5 1.0 3.0 10 15 20 1.2 8.0 18
二、检测方法包括如下步骤：
1.待测样品的前处理:在室温条件下，分别准确吸取5μL校准品溶液、质控品溶液、空白质控、待测血清样本于96孔板内，空白质控做2个复孔，在空白质控孔1内加入250μL甲醇:去离子水(v:v＝80:20)溶液；在空白质控孔2和其余各孔内加入250μL内标工作液(D10-卡马西平的80％甲醇溶液)，振荡混合10min，在4℃条件下离心(4000rpm)10min，取上清液20μL置于新的96孔板中，加入780μL超纯水复溶，振荡混合2min，在4℃条件下离心4000rpm，5min，封膜后为待分析样本。
2.液相色谱条件：
2.1色谱柱：WatersACQUITY UPLC BEH C18，2.1mm×50mm，1.7μm
2.2流动相：A：0.5％乙酸水溶液B：乙腈
2.3流速：0.4mL/min
2.4柱温：40℃
2.5液相色谱洗脱条件
Figure BDA0002463159880000051
3.质谱条件：
3.1源参数
电喷雾离子源(ESI)，正离子模式，毛细管电压：2.5kV，去溶剂化温度：600℃，去溶剂化流速：1000L/Hr，锥孔流速：150L/Hr，雾化压力：7.0Bar
3.2离子信息
化合物名称 母离子(m/z) 子离子(m/z) 驻留时间(s) 锥孔电压(v) 碰撞能量(v)
CMZ 237.1 179.0 0.04 6 34
CMZ 237.1 194.1 0.04 6 18
CMZ-d10 247.2 204.2 0.04 18 20
4.液相色谱串联质谱检测
4.1按照样本前处理的方法对校准品溶液、质控品溶液、空白对照和待测血清样本进行前处理，按照液相色谱条件和质谱条件进行液相色谱串联质谱参数设置和优化；
4.2校准品溶液经前处理后，按照浓度由低到高顺序进行液相色谱串联质谱分析；
4.3待测血清样本进行前处理后，进样2μL进行液相色谱串联质谱分析。
5.质量控制
质控品赋值
用校准品溶液(C1～C6)作标准曲线，质控品溶液(LQC,MQC,HQC)分别作为分析物检测其各自的浓度，以此为一个批次内，分多日进行多个批次的检测，所得结果的均值即为质控品工作液的赋值浓度，并以此计算相应的不确定度。
质控品测定结果在理论值±15％范围内，则测定结果有效；质控品测定结果不在范围内，则测定结果无效，需重新定标再进行测定。
6.结果计算
6.1保留时间
样品、校准品溶液和质控品溶液中，化合物和内标保留时间差值应小于2s，如果保留时间差值超过2s，需要进行系统适用性测试；
6.2工作曲线的建立
根据赋值表，以校准品C1～C6浓度值和质控品LQC、MQC、HQC浓度对其卡马西平峰面积与相应的内标峰面积的比例，建立线性方程。
6.3血清样本中卡马西平浓度的计算
将待测样本的卡马西平峰面积与相应的内标峰面积的比例代入6.2中建立的线性方程，计算出样本中卡马西平的浓度。
对比例：建立人血清基质的模拟样本与动物血清基质的基质效应对比
按照动物血清基质的制备方法，配制每毫升含卡马西平20μg的H人血清溶液和每毫升含卡马西平0.5μg的L人血清溶液。按照下表互相稀释，制备成20个不同浓度的人血清基质模拟样本。具体如下表3所示：
表3
Figure BDA0002463159880000061
分别以人血清、小牛血清、新生牛血清、马血清、山羊血清、猪血清、狗血清，兔血清配制的标准曲线检测以上20个模拟样本，将人血清标准曲线测试结果对各动物血清标准曲线测试结果做线性回归分析，结果如附图1-7所示。
由附图1-7可知，人血标曲检测结果和各动物血标曲检测结果的线性关系极好，R2均为1.000。由此可知各个模拟样本人血标曲检测结果和各动物血标曲检测结果具有固定的比例，即为线性方程斜率。此比例即为人血清和动物血清基质效应的比值。汇总如下表4：
表4
Figure BDA0002463159880000062
由表4可知，各种动物血清和人血清基质效应的比值均在90％～110％范围内，说明基质效应相近，可以在血清样本检测中使用动物血清替代人血清作为标准品和质控品的基质。
分析性能评估：对按本方法制备的三批校准品和质控品进行了分析性能评估。
1.灵敏度、线性、准确度、精密度
空白限LOB：检测5份空白血清各4次，重复3天，每批次共60个数据。
检测限LOD：配制含卡马西平0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL人血清低值样品，检测5份低值样品各4次，重复3天，每批次共60个数据。
线性：检测线性参考品(11个)范围为0.3μg/mL～24μg/mL，使用线性参考品的测得浓度均值(y)对理论浓度(x)进行回归计算，得到线性回归方程。
准确度：对自制的准确度参考品(R-AL＝1.16μg/mL，R-AH＝17.09μg/mL)进行测定，每个参考品重复测定3次。计算检测结果与理论值的偏倚。
精密度：对自制的精密度参考品(R-AL＝1.16μg/mL，R-AM＝，R-AH＝17.09μg/mL)进行测定，重复10次。
结果如下表5所示：
表5
Figure BDA0002463159880000071
由表5结果可知：采用本方法的检测方法灵敏度小于0.1μg/mL，在线性范围0.5～20μg/mL线性良好，准确度平均偏倚小于15％，精密度CV小于10％。
2.抗干扰能力：
使用三个生产批的试剂盒检测无干扰物的对照样本(Control)和加入了干扰物的样本(Test)，每个样本重复测定5次。样本中卡马西平的基础浓度为3.8μg/mL，近似卡马西平质量窗口最低点。计算测试样本与对照样本均值之间的差值Dobs＝|Ctest-Ccontrol|/Ccontrol。结果如表6所示。
表6
Figure BDA0002463159880000072
Figure BDA0002463159880000081
由表6结果可知：采用本发明中的本方法对卡马西平检测中的常见的11种干扰物质的Dobs均小于15％，这表明本发明的检测方法抗干扰能力良好。

Claims (10)

1.一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：具体步骤包括如下：
(1)卡马西平储备液的制备：取一定量的卡马西平，加甲醇溶解，制备得到卡马西平储备液；
(2)内标工作液：取一定量的D10-卡马西平，加80％甲醇溶解，制备得到内标工作液；
(3)取一定量的动物血清低温解冻，再平衡至室温备用；
(4)校准品溶液的制备：
取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平校准品溶液；
(5)质控品溶液的制备：
取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平质控品溶液；
(6)待测样品的前处理：
在室温条件下，分别准确吸取校准品溶液、质控品溶液、待测血清样本加入内标工作液，设置空白质控，经振荡混合后，离心取上清液，加入超纯水复溶，震荡混合后离心，封膜后为待测样品；
(7)设置液相色谱-质谱条件：
按照液相色谱条件和质谱条件进行液相色谱串联质谱参数的设置和优化；
(8)待测样品的检测：
经处理后的校准品溶液按照浓度由低到高顺序进行液相色谱串联质谱分析，将处理后的待测血清样本按进样量2μL进行液相色谱串联质谱分析；
(9)质量控制：对处理后的质控品溶液进行测定，若质控品溶液测定结果在理论值±15％范围内，则测定结果有效；质控品测定结果不在范围内，则测定结果无效，需重新定标再进行测定；
(10)根据校准品溶液浓度值、质控品溶液浓度值对卡马西平峰面积与内标峰面积的比例，建立线性方程，最终计算得到血清样本中卡马西平的浓度。
2.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述动物血清为小牛血清、新生牛血清、马血清、山羊血清、猪血清、狗血清或兔血清中的一种。
3.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述校准品溶液的梯度浓度为每毫升分别含卡马西平0.5μg、1.0μg、3.0μg、10μg、15μg和20μg。
4.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述质控品溶液的梯度浓度为1.2μg、8.0μg和18μg。
5.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述空白质控包含2个复孔，在空白质控孔1内加入250μL80％的甲醇溶液；在空白质控孔2内加入250μL内标工作液。
6.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(6)中离心条件为：温度为4℃，离心速度为4000rpm，离心时间为5min。
7.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中液相色谱条件为：色谱柱采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18，柱温为40℃。
8.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中液相色谱的流动相A为0.5％乙酸水溶液，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱的方式，流速为0.4mL/min。
9.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中质谱条件为：采用喷雾离子源(ESI)，正离子模式，毛细管电压为2.5kV，雾化压力为7.0Bar。
10.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中质谱条件为：去溶剂化温度为600℃，去溶剂化流速为1000L/Hr，锥孔流速为150L/Hr。
CN202010325793.XA 2020-04-23 2020-04-23 一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法 Pending CN111537632A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010325793.XA CN111537632A (zh) 2020-04-23 2020-04-23 一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010325793.XA CN111537632A (zh) 2020-04-23 2020-04-23 一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111537632A true CN111537632A (zh) 2020-08-14

Family

ID=71977164

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010325793.XA Pending CN111537632A (zh) 2020-04-23 2020-04-23 一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111537632A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114487212A (zh) * 2022-03-31 2022-05-13 深圳荻硕贝肯精准医学有限公司 一种采用液相色谱-质谱检测血液中泊沙康唑药物浓度的检测方法
CN114527230A (zh) * 2022-02-28 2022-05-24 上海药明奥测医疗科技有限公司 一种人干血斑中维生素a和维生素e浓度的检测方法
CN115774067A (zh) * 2022-11-22 2023-03-10 浙江迪赛思诊断技术有限公司 一种高效液相色谱串联质谱检测血清中抗癫痫药物的检测试剂盒及其检测方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109541107A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中卡马西平浓度的方法
CN110208393A (zh) * 2019-04-25 2019-09-06 中南民族大学 一种检测血清中5种雄激素的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109541107A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中卡马西平浓度的方法
CN110208393A (zh) * 2019-04-25 2019-09-06 中南民族大学 一种检测血清中5种雄激素的方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TIAN LIU ET AL.: "Fast liquid chromatography-tandem mass spectrometry method for simultaneous determination of eight antiepileptic drugs and an active metabolite in human plasma using polarity switching and timed selected reaction monitoring", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 *
储小曼 等: "牛血清代替人血清测定茶碱血药浓度", 《中国医院药学杂志》 *
国家药典委员会 编: "《中华人民共和国药典 2010年版 第1增补本》", 31 August 2012, 中国医药科技出版社 *
孙晓清 等: "UPLC-MS/MS法同时检测人血浆中卡马西平和苯巴比妥浓度", 《中国药师》 *
张海彬 等: "《小动物临床诊断学》", 31 July 2016, 中国农业大学出版社 *
王新红 等: "《海洋环境中的POPs污染及其分析监测技术》", 31 December 2011 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114527230A (zh) * 2022-02-28 2022-05-24 上海药明奥测医疗科技有限公司 一种人干血斑中维生素a和维生素e浓度的检测方法
CN114487212A (zh) * 2022-03-31 2022-05-13 深圳荻硕贝肯精准医学有限公司 一种采用液相色谱-质谱检测血液中泊沙康唑药物浓度的检测方法
CN115774067A (zh) * 2022-11-22 2023-03-10 浙江迪赛思诊断技术有限公司 一种高效液相色谱串联质谱检测血清中抗癫痫药物的检测试剂盒及其检测方法
CN115774067B (zh) * 2022-11-22 2023-08-22 浙江迪赛思诊断技术有限公司 一种高效液相色谱串联质谱检测血清中抗癫痫药物的检测试剂盒及其检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111537632A (zh) 一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法
US11162958B2 (en) Method for the direct detection and/or quantification of at least one compound with a molecular weight of at least 200
CN102428367A (zh) 测定肌醇六磷酸（ihp）的方法
CN107202839A (zh) 一种兽药制剂中122种非处方药物的筛查方法
CN109060972B (zh) 兔血在制备人疾病体外诊断试剂盒中的应用
CN112946107B (zh) 一种阿加曲班原料药或制剂中n-亚硝基二甲胺、n-亚硝基二乙胺的分析方法
CN112505179B (zh) 一种测定同位素稀释超高效液相色谱质谱联用方法
CN111537648A (zh) 一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗结核病药物的试剂盒
CN114002344A (zh) 奥氮平、阿立哌唑及脱氢阿立哌唑的检测方法及试剂盒
CN114994198A (zh) 一种液相色谱质谱联用法同时定量检测78种神经精神类药物的方法
CN113176351B (zh) 一种复方葡萄糖酸钙口服溶液的检测方法
CN112697935B (zh) 同时测定人血浆中培哚普利和培哚普利拉浓度的方法
CN113820424A (zh) 一种同时测定人血浆中14种抗抑郁药浓度的hplc-ms/ms方法
CN101592637A (zh) 一种新的复方头孢噻肟钠他唑巴坦钠的检测方法
CN111812219A (zh) 一种检测血浆中抗凝血药物浓度的方法
CN114544796B (zh) 一种液相质谱联用测定血浆中司替戊醇的方法
CN113933418A (zh) 一种同时检测人血清中7种抗生素类药物浓度的方法
CN114397379A (zh) 一种液质联用测定血浆中奥硝唑浓度的方法
CN114689737A (zh) 一种s-邻氯苯甘氨酸甲酯酒石酸盐有关物质的分析方法
CN113533561A (zh) 一种注射用核糖核酸ⅱ重均分子量的检测方法
CN111103381A (zh) 一种液质联用测定人血浆中尼美舒利浓度的方法
CN111812226A (zh) 一种检测血清中抗病毒药物浓度的方法
CN117030905B (zh) 一种快速定量血浆中丁二酮浓度的lc-ms/ms分析方法
CN112710773B (zh) 一种采用离子色谱法同时检测磷霉素及其二醇物的方法
CN113406254A (zh) 一种同时检测多种外源性和内源性甾体激素的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information

Address after: 215127 building 30, biomedical industrial park, No. 218, Sangtian street, Suzhou Industrial Park, Suzhou City, Jiangsu Province

Applicant after: SUZHOU YAOMING ZEKANG BIOTECHNOLOGY CO.,LTD.

Address before: 215104 floor 1, building 7, No. 1336, Wuzhong Avenue, Wuzhong Economic Development Zone, Suzhou, Jiangsu

Applicant before: SUZHOU YAOMING ZEKANG BIOTECHNOLOGY CO.,LTD.

CB02 Change of applicant information
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200814

RJ01 Rejection of invention patent application after publication